CN107245462B - 一种耐高温除臭保氮发酵有机肥菌剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种耐高温除臭保氮发酵有机肥菌剂及其制备方法。在对生物转化有机废弃物后的代谢生物质进行二次高温发酵堆肥化过程中，该菌剂具有耐高温除臭保氮作用，由枯草芽孢杆菌、雅致放射毛霉、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、乳酸乳球菌、酿酒酵母菌混合组成。本发明提供的耐高温除臭保氮活性菌剂利用有机物降解微生物菌、抑制致病菌、除臭菌及耐高温产酸菌之间的协同作用，具有菌株组合新、结构稳、活性强、菌数高等特点，同时解决了包括传统有机肥堆肥和生物转化有机废弃物的代谢物堆肥在内的有机物降解慢，除臭效果不明显，堆肥成品含氮量低等问题，提高了有机肥的处理效率和养分利用率。

Description

一种耐高温除臭保氮发酵有机肥菌剂及其制备方法
技术领域
本发明属于生态养殖领域，涉及一种生物转化厨余垃圾后的代谢生物质的二次堆肥处理技术，具体涉及一种耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂的制备方法。
背景技术
随我国社会经济的高度发展及现代化农业的快速推进，城镇居民厨余垃圾不仅数量日益剧增，而且其中含大量水分、油脂、盐分及各种营养元素，很难经传统垃圾处理方式进行处置。在经过各种分解处理的研发过程中，生物转化处理方式逐渐展现其优势所在，如申请号CN201510380599.0的发明公开了一种利用家蝇蝇蛆高效生物转化厨余垃圾的方法，该发明可使1.0t厨余垃圾在一个蝇蛆生物转化周期内减量达70-95％。为了垃圾资源化、减量化，经生物蠕虫转化的厨余垃圾形成虫粪等代谢生物质，由于其中含大量氮素及碱性过高，在其二次堆肥中出现排放大量含氨气、硫化氢和吲哚等有害臭味气体，不仅损耗堆肥的氮素，降低堆肥成品品质，而且也会对现场及周围居民的健康产生不良影响。因此，合理有效解决包括传统有机肥在内的生物质发酵过程中产生大量氨气和损耗氮素的问题，是目前我国发展现代化和生态化农业亟需解决的重要问题之一。
当前，我国已研发出一些有机肥发酵菌剂配方，如申请号201610156566.2的发明公开了一种禽畜粪便除臭活性菌剂，该菌剂由枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、节杆菌、链霉菌、酵母菌、乳酸链球菌组成。该菌剂可有效减少禽畜粪便垃圾发酵堆肥过程中的恶臭气体，但对于在有机肥发酵过程中提高温度和保持氮素等方面还没有有效解决。也有发明专利(申请号：201010272801.5)公开了一种食物垃圾降解消除型微生物菌剂III，该微生物菌剂III是由蜡状芽孢杆菌和雅致放射毛霉组成。该专利对于厨余垃圾的降解消除效果非常好，但仍在快速除臭及保氮方面存在诸多欠缺。因此，研发一种既能保持高温快速发酵，同时又适用于高碱性生物质除臭保氮的多功能有机肥发酵菌剂，对于完善整个生物转化厨余垃圾产业链具有重要意义。
发明内容
本发明弥补现有技术的不足，提供一种耐高温除臭保氮发酵有机肥菌剂及其制备方法。
本发明采用以下技术手段解决上述技术问题：
在代谢生物质及传统有机肥堆肥发酵过程中，利用枯草芽孢杆菌CGMCC1.775(Bacillus subtilis)、雅致放射毛霉CGMCC3.4389(Actinomucor elegans)、蜡状芽孢杆菌CGMCC1.230(Bacilus cereus)、地衣芽孢杆菌CGMCC1.7461(Bacillus licheniformis)、沼泽红假单胞菌CGMCC1.5007(Rhodopseudomonas)、乳酸乳球菌CGMCC1.2281(Lactococcuslactis)、酿酒酵母菌CGMCC2.1643(Saccharomyces cerevisiae)具有较强适应性和一定耐高温特性，进入堆肥物料后可快速形成优势菌群，大量生长繁殖，释放出脂肪酶、淀粉酶、脱氢酶、蛋白酶等生物活性物质，将堆肥物料中的脂肪、淀粉、蛋白质等分解为短链低分子有机物。同时，利用雅致放射毛霉CGMCC3.4389和乳酸乳球菌CGMCC1.2281的产酸功能，蜡状芽孢杆菌CGMCC1.230还原硝酸盐的功能，以及沼泽红假单胞菌CGMCC1.5007分解有毒有害物质的功能，可有效调节堆肥物料的pH值，降低碱性，降解物料中的含氨(胺)组分，控制氨气等臭味气体的排放，从而达到除臭保氮、提高堆肥成品品质、促进堆肥效率的目的。所选用的这七种菌均为农业部允许使用的无害安全菌，全部购自于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)。
该耐高温除臭保氮发酵有机肥菌剂的制备方法包括以下步骤：
1)将保存在0～4℃环境中的各斜面菌种进行活化处理，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CGMCC1.775、雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereus CGMCC1.230、地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461、沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007、乳酸乳球菌Lactococcus lactisCGMCC1.2281、酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.1643七株菌分别进行试管-摇床培养，获得各菌种一级种子液；
2)将培养发酵好的枯草芽孢杆菌、雅致放射毛霉、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、乳酸乳球菌、酿酒酵母菌种子液按体积比3-5.5:0.5-1.5:1-3:1-4:1-3:4-8:1-3.5进行混合；
3)对步骤2)获得的混合菌液进行扩大培养，按质量浓度5％～7％向大容量发酵罐中加入新鲜培养基质—玉米面-蝇蛆虫渣提取物培养基；用显微直接计数法和紫外分光光度法检测发酵液体的吸光值和菌群数，判断菌群的生长状况，检测到有效活菌数为8.5×108～2.4×1010cfu/ml时停止培养；
4)按照质量浓度1～2‰的比例向步骤3)中得到的复合菌剂液体中加入保护剂—山梨酸钾，搅拌均匀，搅拌参数为150～200rpm，45～60min；
5)以硅藻土为载体，向步骤4)中得到的复合菌剂液体中按照3～6g/L的比例进行添加搅拌，搅拌参数为50～120rpm，5～15min；制得耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂。
优选地，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC1.775、蜡状芽孢杆菌Baciluscereus CGMCC1.230和沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007采用牛肉膏蛋白胨培养基进行培养；所述牛肉膏蛋白胨培养基的配方为：0.3％牛肉膏，1.0％蛋白胨，0.5％氯化钠，调节pH值至7.0～7.4；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
优选地，雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389和酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.1643采用马铃薯-蔗糖培养基培养；所述马铃薯-蔗糖培养基的配方为：去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000mL煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加入2％蔗糖；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
优选地，地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461采用ZC液体培养基培养；所述ZC液体培养基的配方为：0.2％酪蛋白胨，0.5％酵母膏，0.2％六水合氯化镁，4.0％氯化钠，0.1％氯化钾，调节pH值至7.0～7.2；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
优选地，乳酸乳球菌Lactococcus lactis CGMCC1.2281采用MRS液体培养基培养；所述MRS液体培养基的配方为：1.0％酪蛋白胨，1.0％牛肉膏，0.5％酵母膏，0.5％葡萄糖，0.5％乙酸钠，0.2％柠檬酸二胺，0.1％Tween-80，0.2％磷酸氢二钾，0.02％七水合硫酸镁，0.005％一水合硫酸锰，2.0％碳酸钙，调节pH值至6.8～7.0；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
优选地，玉米面-蝇蛆虫渣提取物培养基的配方为：2.5％～3.0％玉米面，1.5％～2.0％蝇蛆虫渣提取物，0.8％硝酸钾，0.05％硫酸镁，0.05％磷酸氢二钾，0.05％氯化钠，0.0001％硫酸亚铁，pH值7.2～7.4；所述蝇蛆虫渣提取物蛋白含量60％以上；接种量为7％～12％，280-350rpm，培养24～30h。
上述所有配方中，百分比例未经特殊说明均指质量浓度。
本发明优势在于：本发明提供的耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂利用有机物降解菌、除臭菌及产酸菌之间在高温好氧环境中的协同作用，产生多种生物活性酶参与堆肥过程，具有菌株组合新、结构稳、酶活性强、菌数高等特点，同时解决了包括厨余垃圾生物转化代谢生物质堆肥在内的有机质堆肥效率慢，除臭效果不明显，堆肥成品含氮量低等问题，提高了有机肥的处理效率和养分利用率。硅藻土的疏松空间网状结构大大提高了微生物吸附率，增加了在堆肥过程中与底料的结合度，使菌剂均匀混合在堆肥物料中，快速形成优势菌群，充分发挥除臭保氮，促进堆肥过程的作用。经高温除臭保氮处理的肥料可做农用有机肥，提高农田土壤肥力，具有良好的生态效益和经济效益。本发明提供的复合菌剂制备简单，在配置过程中采用的为无毒保护剂，即保证了菌剂安全，又能提高制备效率。
具体实施方式
以下列举的若干实施例仅为本发明的补充说明，本发明不局限于以下实施例。在不背离本发明实质框架的情况下，由本发明直接推导和联想到的变形方案，均属于本发明保护范畴。
实施例1
按以下步骤进行发酵菌剂的制备：
1.将保存在4℃冰箱中的各斜面菌种进行活化处理，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CGMCC1.775、雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereus CGMCC1.230、地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461、沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007、乳酸乳球菌Lactococcus lactisCGMCC1.2281、酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.1643七株菌分别进行试管-摇床培养，获得各菌种一级种子液。
枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC1.775、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereusCGMCC1.230和沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007采用牛肉膏蛋白胨培养基进行培养：3g牛肉膏，10g蛋白胨，5g氯化钠，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.0；接种量为1％，200rpm，培养24h。
雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389和酿酒酵母菌Saccharomycescerevisiae CGMCC2.1643采用马铃薯-蔗糖培养基培养：取去皮马铃薯200克，擦成丝，加水1000mL煮沸30分钟，滤去马铃薯残渣，将滤液用蒸馏水补足至1000mL，加入20g蔗糖；接种量为1％，200rpm，培养24h。
地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461采用ZC液体培养基培养：2g酪蛋白胨，5g酵母膏，2g六水合氯化镁，40g氯化钠，1g氯化钾，充分溶于1000mL蒸馏水中，调节pH值至7.0；接种量为1％，200rpm，培养24h。
乳酸乳球菌Lactococcus lactis CGMCC1.2281采用MRS液体培养基培养：10g酪蛋白胨，10g牛肉膏，5g酵母膏，5g葡萄糖，5g乙酸钠，2g柠檬酸二胺，1gTween-80，2g磷酸氢二钾，0.2g七水合硫酸镁，0.05g一水合硫酸锰，20g碳酸钙，蒸馏水1000mL，调节pH值至6.8；接种量为1％，200rpm，培养24h。
2.将上述培养发酵好的枯草芽孢杆菌、雅致放射毛霉、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、乳酸乳球菌、酿酒酵母菌种子液按体积比3:0.5:1:1:1:4:1进行混合。
3.将混合好的菌液进行扩大培养，按质量浓度5％向30L发酵罐中加入新鲜培养基质—玉米面-蝇蛆虫渣提取物培养基：25g玉米面，15g蝇蛆虫渣提取物，8g硝酸钾，0.5g硫酸镁，0.5g磷酸氢二钾，0.5g氯化钠，0.001g硫酸亚铁，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.2；所述蝇蛆虫渣提取物蛋白含量60％以上；接种量为7％，280rpm，培养24h；所制得的复合菌剂有效活菌数为8.5×108cfu/ml。
4.按质量浓度1‰向扩大培养好的复合菌剂液体中加入山梨酸钾作为保护剂，搅拌均匀，150rpm，60min。
5.向已添加完保护剂的复合菌液中加入3g/L硅藻土，充分搅拌均匀，50rpm，15min；即制得耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂。
实施例2
1.将保存在4℃冰箱中的七剂斜面菌种进行活化处理，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CGMCC1.775、雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereus CGMCC1.230、地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461、沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007、乳酸乳球菌Lactococcus lactisCGMCC1.2281、酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.1643分别进行试管-摇床培养，获得各菌种一级种子液。
枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC1.775、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereusCGMCC1.230和沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007采用牛肉膏蛋白胨培养基进行培养：3g牛肉膏，10g蛋白胨，5g氯化钠，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.2；接种量为1.5％，220rpm，培养27h。
雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389和酿酒酵母菌Saccharomycescerevisiae CGMCC2.1643采用马铃薯-蔗糖培养基培养：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000mL煮沸30分钟，滤去马铃薯残渣，将滤液用蒸馏水补足至1000mL，加入20g蔗糖；接种量为1.5％，220rpm，培养27h。
地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461采用ZC液体培养基培养：2g酪蛋白胨，5g酵母膏，2g六水合氯化镁，40g氯化钠，1g氯化钾，充分溶于1000mL蒸馏水中，调节pH值至7.0；接种量为1.5％，220rpm，培养27h。
乳酸乳球菌Lactococcus lactis CGMCC1.2281采用MRS液体培养基培养：10g酪蛋白胨，10g牛肉膏，5g酵母膏，5g葡萄糖，5g乙酸钠，2g柠檬酸二胺，1gTween-80，2g磷酸氢二钾，0.2g七水合硫酸镁，0.05g一水合硫酸锰，20g碳酸钙，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.0；接种量为1.5％，220rpm，培养27h。
2.将上述培养发酵好的枯草芽孢杆菌、雅致放射毛霉、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、乳酸乳球菌、酿酒酵母菌种子液按体积比4:1:2:2.5:2:6:2进行混合。
3.将混合好的菌液进行扩大培养，按质量浓度6％向30L发酵罐中加入新鲜培养基质—玉米面-蝇蛆虫渣提取物培养基：28g玉米面，18g蝇蛆虫渣提取物，8g硝酸钾，0.5g硫酸镁，0.5g磷酸氢二钾，0.5g氯化钠，0.001g硫酸亚铁，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.2；所述蝇蛆虫渣提取物蛋白含量60％以上；接种量为10％，300rpm，培养27h；所制得的复合菌剂有效活菌数为3.7×109cfu/ml。
4.按质量浓度1.5‰向扩大培养好的复合菌剂液体中加入山梨酸钾作为保护剂，搅拌均匀，180rpm，50min。
5.向已添加完保护剂的复合菌液中加入4.5g/L硅藻土，充分搅拌均匀，80rpm，10min；即制得耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂。
实施例3
1.将保存在4℃冰箱中的七剂斜面菌种进行活化处理，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CGMCC1.775、雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereus CGMCC1.230、地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461、沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007、乳酸乳球菌Lactococcus lactisCGMCC1.2281、酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.1643分别进行试管-摇床培养，获得各菌种一级种子液。
枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC1.775、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereusCGMCC1.230和沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007采用牛肉膏蛋白胨培养基进行培养：3g牛肉膏，10g蛋白胨，5g氯化钠，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.4；接种量为2％，250rpm，培养30h。
雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389和酿酒酵母菌Saccharomycescerevisiae CGMCC2.1643采用马铃薯-蔗糖培养基培养：取去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000mL煮沸30分钟，滤去马铃薯残渣，将滤液用蒸馏水补足至1000mL，加入20g蔗糖；接种量为2％，250rpm，培养30h。
地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461采用ZC液体培养基培养：2g酪蛋白胨，5g酵母膏，2g六水合氯化镁，40g氯化钠，1g氯化钾，充分溶于1000mL蒸馏水中，调节pH值至7.2；接种量为2％，250rpm，培养30h。
乳酸乳球菌Lactococcus lactis CGMCC1.2281采用MRS液体培养基培养：10g酪蛋白胨，10g牛肉膏，5g酵母膏，5g葡萄糖，5g乙酸钠，2g柠檬酸二胺，1gTween-80，2g磷酸氢二钾，0.2g七水合硫酸镁，0.05g一水合硫酸锰，20g碳酸钙，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.0；接种量为2％，250rpm，培养30h。
2.将上述培养发酵好的枯草芽孢杆菌、雅致放射毛霉、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、乳酸乳球菌、酿酒酵母菌种子液按体积比5:1.5:3:4:3:6:3进行混合。
3.将混合好的菌液进行扩大培养，按质量浓度7％向30L发酵罐中加入新鲜培养基质—玉米面-蝇蛆虫渣提取物培养基：30g玉米面，20g蝇蛆虫渣提取物，8g硝酸钾，0.5g硫酸镁，0.5g磷酸氢二钾，0.5g氯化钠，0.001g硫酸亚铁，蒸馏水1000mL，调节pH值至7.2；所述蝇蛆虫渣提取物蛋白含量60％以上；接种量为12％，350rpm，培养30h；所制得的复合菌剂有效活菌数为1.0×1010cfu/ml。
4.按质量浓度2‰向扩大培养好的复合菌剂液体中加入山梨酸钾作为保护剂，搅拌均匀，200rpm，45min。
5.向已添加完保护剂的复合菌液中加入6g/L硅藻土，充分搅拌均匀，100rpm，8min；即制得耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂。
试验效果
以厨余垃圾生物转化厂开展黑水虻虫粪二次堆肥试验为例，应用实施例2中制备的耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂。
试验地点：浙江省杭州市余杭区杭州谷胜农业科技有限公司
试验材料：黑水虻转化厨余垃圾后的代谢生物质(虫粪)；实施例2中制备的有机肥耐高温除臭保氮活性菌剂；某公司生产的普通有机肥发酵菌剂。
试验设计：设置两个处理，每个堆肥垛场处理量为10吨。
处理1：用铲车将虫粪堆积成条垛状，按虫粪体积的1‰加入实施例2中制备的本发明耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂，再用翻抛机对垛体进行翻动、搅拌和充氧，使菌剂与虫粪混合均匀，当堆体温度达到60℃以上，且稳定2天左右后，每3天翻抛一次，并且在整个发酵过程中分不同时间段测定堆体温度、pH、TN、NH4 +-N、恶臭指数等指标。
处理2：另向10吨虫粪中添加占虫粪体积的1‰的某农业科技公司生产的普通有机肥发酵菌剂，同样用翻抛机进行翻抛，其余处理条件与处理1相同，作为对照组。
试验结果：
两个堆肥处理在不同时间段的温度、pH、TN、NH4 +-N、恶臭指数的测定方法与标准参考中华人民共和国农业行业标准-有机肥料(NY525-2012)和恶臭污染物排放标准(GB14554-93)。其中恶臭指数采用臭气强度数值化表示：0-无臭；1-稍稍能够感知到的气味(检测临界值)；2-能够知道是何气味的微弱气体(认知临界值)；3-能够轻松感知的气味；4-较强的气味；5-强烈的气味。TN、NH4 +-N采用与虫粪初始TN、NH4 +-N值相比损耗程度(％)来表示。
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施用实施例2制备的耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂处理的虫粪(生物转化厨余垃圾的代谢生物质)堆肥效果好于普通发酵菌剂处理。施用本发明菌剂的堆肥温度上升快，在第三天升到最高温(＞70℃)，而对照组升温慢，且最高温度低于70℃，之后便快速下降；由于虫粪是生物转化处理厨余垃圾后的代谢生物质，因而碱性大，难处理，施用本发明菌剂的堆肥腐熟后pH值在6.0～6.8之间，符合NY525-2012标准，而对照组普通发酵剂的最终pH值达不到标准，碱性仍较高；NH4 +-N指标不但与堆肥成品品质相关，而且与堆肥过程中氨气等臭气的释放有关，由TN和NH4 +-N可以看出本发明菌剂较普通菌剂有更好的保氮效果；施用本发明菌剂的虫粪在堆肥24h后臭味明显下降，3天后臭味全无，而普通菌剂处理的堆肥在3天后仍能闻到明显臭味，仅在堆肥中后期臭味才开始下降。
通过试验证实了本发明耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂确实在除臭、保氮和促进堆肥发酵过程方面的作用。

Claims (5)

1.一种耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂在黑水牤虫粪二次堆肥中的应用，其特征在于：所述黑水牤虫粪为黑水牤转化厨余垃圾后的代谢生物质；所述的有机肥发酵菌剂为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CGMCC1.775、雅致放射毛霉Actinomucor elegansCGMCC3.4389、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereus CGMCC1.230、地衣芽孢杆菌Bacilluslicheniformis CGMCC1.7461、沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007、乳酸乳球菌Lactococcus lactis CGMCC1.2281、及酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiaeCGMCC2.1643七株菌组合而成的复合活性菌剂；
所述的耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂的制备方法包括如下步骤：
1)将保存在0～4℃环境中的各斜面菌种进行活化处理，枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis CGMCC1.775、雅致放射毛霉Actinomucor elegans CGMCC3.4389、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereus CGMCC1.230、地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformis CGMCC1.7461、沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007、乳酸乳球菌Lactococcus lactisCGMCC1.2281、酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.1643七株菌分别进行试管-摇床培养，获得各菌种一级种子液；
2)将上述培养发酵好的枯草芽孢杆菌、雅致放射毛霉、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、乳酸乳球菌、酿酒酵母菌种子液按体积比3-5.5:0.5-1.5:1-3:1-4:1-3:4-8:1-3.5进行混合；
3)对步骤2)获得的混合菌液进行扩大培养，按质量浓度5％～7％向大容量发酵罐中加入新鲜培养基质—玉米面-蝇蛆虫渣提取物培养基；接种量为7％～12％，280-350rpm，培养24～30h；所制得的复合菌剂有效活菌数为8.5×108～2.4×1010cfu/ml；所述的玉米面-蝇蛆虫渣提取物培养基配方为：2.5％～3.0％玉米面，1.5％～2.0％蝇蛆虫渣提取物，0.8％硝酸钾，0.05％硫酸镁，0.05％磷酸氢二钾，0.05％氯化钠，0.0001％硫酸亚铁，pH值7.2～7.4；所述蝇蛆虫渣提取物蛋白含量60％以上；
4)按照质量浓度1～2‰的比例向步骤3)中得到的复合菌剂液体中加入保护剂—山梨酸钾，搅拌均匀，搅拌参数为150～200rpm，45～60min；
5)向步骤4)中得到的复合菌剂液体中按照3～6g/L的比例添加载体硅藻土并搅拌，搅拌参数为50～120rpm，5～15min；即制得耐高温除臭保氮有机肥发酵菌剂。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisCGMCC1.775、蜡状芽孢杆菌Bacilus cereus CGMCC1.230和沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas CGMCC1.5007采用牛肉膏蛋白胨培养基进行培养；所述牛肉膏蛋白胨培养基的配方为：0.3％牛肉膏，1.0％蛋白胨，0.5％氯化钠，调节pH值至7.0～7.4；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，雅致放射毛霉Actinomucor elegansCGMCC3.4389和酿酒酵母菌Saccharomyces cerevisiae CGMCC2.1643采用马铃薯-蔗糖培养基培养；所述马铃薯-蔗糖培养基的配方为：去皮马铃薯200克，切成小块，加水1000mL煮沸30分钟，滤去马铃薯块，将滤液补足至1000毫升，加入2％蔗糖；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，地衣芽孢杆菌Bacillus licheniformisCGMCC1.7461采用ZC液体培养基培养；所述ZC液体培养基的配方为：0.2％酪蛋白胨，0.5％酵母膏，0.2％六水合氯化镁，4.0％氯化钠，0.1％氯化钾，调节pH值至7.0～7.2；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，乳酸乳球菌Lactococcus lactisCGMCC1.2281采用MRS液体培养基培养；所述MRS液体培养基的配方为：1.0％酪蛋白胨，1.0％牛肉膏，0.5％酵母膏，0.5％葡萄糖，0.5％乙酸钠，0.2％柠檬酸二胺，0.1％Tween-80，0.2％磷酸氢二钾，0.02％七水合硫酸镁，0.005％一水合硫酸锰，2.0％碳酸钙，调节pH值至6.8～7.0；接种量为1％～2.5％，180～250rpm，培养24～30h。
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