CN107232103A - 一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法 - Google Patents

一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107232103A
CN107232103A CN201710545398.0A CN201710545398A CN107232103A CN 107232103 A CN107232103 A CN 107232103A CN 201710545398 A CN201710545398 A CN 201710545398A CN 107232103 A CN107232103 A CN 107232103A
Authority
CN
China
Prior art keywords
temperature
bivalve shellfish
shellfish
accelerating
bivalve
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710545398.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107232103B (zh
Inventor
邢强
朱星海
李仰平
李若佼
廖欢
张美微
张玲玲
黄晓婷
包振民
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Ocean University of China
Original Assignee
Ocean University of China
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ocean University of China filed Critical Ocean University of China
Priority to CN201710545398.0A priority Critical patent/CN107232103B/zh
Publication of CN107232103A publication Critical patent/CN107232103A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107232103B publication Critical patent/CN107232103B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01KANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K61/00Culture of aquatic animals
    • A01K61/50Culture of aquatic animals of shellfish
    • A01K61/54Culture of aquatic animals of shellfish of bivalves, e.g. oysters or mussels
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/80Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in fisheries management
    • Y02A40/81Aquaculture, e.g. of fish

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)

Abstract

本发明的目的是建立一种基于心电参数确定双壳贝类积温促熟最佳温度的方法,利用双壳贝类心电波幅作为指标对其进行快速准确的积温促熟最佳温度的确定。在不伤害育种参考个体/群体生物活性的基础上,实现心电参数指标的快速无损伤检测,解决现阶段海产经济双壳贝类人工育苗生产过程中缺少快速、准确、高效、活体测定性腺积温促熟最佳温度的问题。本发明将心电波幅指标作为一个新兴数量指标,应用于双壳贝类的苗种生产中,为亲贝数量较少的种群或者濒危双壳贝类的无损伤繁育提供理论参考和方法指导。

Description

一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法
技术领域
本发明属于海洋贝类养殖评价技术领域,具体涉及一种基于心电参数确定双壳贝类积温促熟最佳温度的方法。
背景技术
贝类产业是我国海水养殖产业的重要组成部分,养殖产量超过海水养殖总产量的72%(中国渔业统计年鉴,2016)。以扇贝为代表的贝类养殖曾引领我国海水养殖的第三次浪潮,推动了养殖产业的快速发展。标准化的人工育苗是双壳贝类大规模商业化养殖的前提条件,而亲贝培育又是人工育苗的重要技术环节,直接影响着配子的质量、卵子的受精率、受精卵的孵化率以及幼虫的变态率等。因此,经济贝类培育过程中性腺发育的好坏,直接影响着苗种生产、生长与养殖。
影响贝类性腺发育的因素除了自身以外,还包括温度、盐度、饵料供应、种贝密度以及水环境等多种综合因素。许多学者都认为,影响海洋无脊椎动物生殖和发育的最重要因子是温度。双壳贝类栖息环境的水温波动与其性腺发育有密切关系,如水温对其呼吸、摄食、消化、排泄、运动、生长、性腺发育与繁殖均产生重要作用。目前,人工控温条件下的性腺发育和繁殖规律已经在栉孔扇贝(Chlamys farreri)、虾夷扇贝(Patinopectenyessoensis)、海湾扇贝(Argopecten irradias)、华贵栉孔扇贝(Chlamys nobilis)、太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)、菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)、紫贻贝(Mytilusedulis)等双壳贝类物种中得到开展。
现阶段,双壳贝类性腺发育的研究主要通过肉眼解剖观察,石蜡切片光镜观察等方法。上述方法虽然能够从个体、组织和细胞水平等不同角度在不同程度上指示双壳贝类的选种指标,但是实验通量低、周期长,较难实现实时实地快速检测。而且,个体、组织和细胞水平的检测往往需要活体采样,某种程度上会导致育种候选个体/群体损伤甚至死亡,无法很好的保证其活性作为后续育种和传代的亲本,尤其是对于亲贝数量较少的种群或者濒危双壳贝类。因此,提供一种具有操作简便、测定迅速、活体无损伤检测、实时实地监测双壳贝类积温促熟最佳温度的方法就成为双壳贝类育种的研究热点之一。
发明内容
本发明的目的是建立一种基于心电参数确定双壳贝类积温促熟最佳温 度的方法,利用双壳贝类心电波幅作为指标对其进行快速准确的积温促熟最佳温度的确定。
本发明在不伤害育种参考个体/群体生物活性的基础上,实现心电参数指标的快速无损伤检测,解决现阶段海产经济双壳贝类人工育苗生产过程中缺少快速、准确、高效、活体测定性腺积温促熟最佳温度的问题。
本发明首先提供双壳贝类心电波幅强度Heart Amplitude(HA)作为检测双壳贝类积温促熟最佳温度的指标的应用;
本发明再一个方面提供一种确定双壳贝类积温促熟最佳温度的方法,是通过心电波幅强度来确定的;
所述的方法,包括如下的步骤:
1)将Infrared sensors(CNY-70)的红外感端粘到待检测的双壳贝类实验个体的壳外靠近心脏的位置;
所述的双壳贝类壳外靠近心脏的位置,为双壳贝类壳外背部围心腔;
作为优选,所述的双壳贝类实验个体的数目不少于20个;
2)将待测双壳贝类个体放到水体中,待外套膜触须伸展之后,仪器连通进行检测;选择实验双壳贝类的适温范围,从低温到高温逐渐升温,进行不同温度下的心电参数的测定;
作为优选,升温速度设定为0.2℃/min,每个整数温度点稳定维持10分钟;
3)计算每个实验个体整数温度下的心电波幅强度,运用回归分析待测个体在适温范围温度变化过程中的最大心电波幅强度(Maximum Heart Amplitude-MHA)及其对应的温度(TMHA);对测定的实验个体的TMHA进行统计,TMHA平均值(M)±标准误(SEM)即为该双壳贝类物种的积温促熟最佳温度。
所述的双壳贝类,包含但不限于虾夷扇贝、栉孔扇贝和海湾扇贝;
本发明还提供一种基于扇贝心跳指标的快速选种的标准,所述的标准如下:虾夷扇贝(Patinopecten yessoensis)积温促熟最佳温度为8.55±0.14℃;栉孔扇贝(Chlamysfarreri)积温促熟最佳温度为15.08±0.02℃;海湾扇贝(Argopecten irradians)积温促熟最佳温度为18.78±0.12℃。
本发明对双壳贝类进行体外非侵入性无损伤的心电参数检测,将获得的心电波幅强度作为确定其积温促熟最佳温度的依据。本发明方法结合了红外感应技术、滤波技术、波形放大技术,能够快速灵敏地检测双壳贝类的心电波形。与传统方法相比,本方法具有非侵入性、无损伤性、可长期跟踪等特点,首 次将TMHA作为双壳贝类积温促熟最佳温度的指标。采用本种方法能够究为双壳贝类人工育苗工作中的亲贝积温促熟及濒危双壳贝类的人工繁育提供研究基础。
附图说明
图1、虾夷扇贝心电波幅强度随温度变化曲线图;
图2、栉孔扇贝心电波幅强度随温度变化曲线图;
图3、海湾扇贝心电波幅强度随温度变化曲线图。
具体实施方式
本发明将心电波幅指标作为一个新兴数量指标,应用于双壳贝类的苗种生产中,为亲贝数量较少的种群或者濒危双壳贝类的无损伤繁育提供理论参考和方法指导。
本发明通过对温度胁迫条件下双壳贝类的心电参数进行检测,同时分析心电波幅随温度的变化趋势,采用回归分析确定相应个体/群体的最大心电波幅及其对应的温度,建立一种基于心电参数确定双壳贝类积温促熟最佳温度的方法,为养殖双壳贝类积温促熟温度的确定提供可靠的技术手段。
本发明方法的总体步骤如下:
1、双壳贝类心电波形检测仪器的连接
(1)Infrared sensors(CNY-70)的接口端以RJ11连接方式接入Heartbeatmonitor amplifier(AMP-03);
(2)Heartbeat monitor amplifier(AMP-03)和PowerLab 8/35八通道研究型高速记录主机(含LabChart Pro专业版)两端均以BNC连接方式相互连接;
(3)PowerLab 8/35八通道研究型高速记录主机(含LabChart Pro专业版)以USB连接方式接入电脑(安装LabCharb v7for Windows)。
2、双壳贝类心电波形检测方法的标准化
(1)将实验双壳贝类外壳的附着生物清除干净,放在实验条件下5-7天使其适应实验环境;
(2)将Infrared Sensors(CNY-70)的红外感端用Blu-Tag型胶(蓝丁胶)粘到实验双壳贝类壳外靠近心脏的位置(背部围心腔中);
(3)根据实验条件,检测之前10分钟,将待测双壳贝类个体放到充气的5L的实验水体环境中,待外套膜触须充分伸展之后,仪器连通进行检测。选择实验双壳贝类适温范围,从低温到高温逐渐升温,升温速度设定为0.2℃/min,每个整数温度点稳定维持10分钟进行该温度下心电参数的测定。在实验结束后, 实验个体仍然放回实验前的水体环境中。
3、数据分析
(1)计算每只实验个体每个整数温度下的心电波幅强度-HA,运用回归分析待测个体在室温范围温度变化过程中的最大心电波幅强度MHA及其对应的温度TMHA;将每个个体按上述步骤重复三次或以上,作为此条件下该个体的积温促熟最佳温度TMSIi
(2)对测定物种N个个体的TMHA进行统计,TMHA平均值(M)±标准误(SEM)即为该双壳贝类物种的积温促熟最佳温度。
下面以心电波幅强度为指标评价,对适温范围内的虾夷扇贝、栉孔扇贝和海湾扇贝进行积温促熟最佳温度确定的方法为例详细叙述本发明的方法。
实施例1
1、扇贝心电波形检测仪器的连接:
(1)Infrared sensors(CNY-70)的接口端以RJ11连接方式接入Heartbeatmonitor amplifer(AMP-03);
(2)Heartbeat monitor amplifer(AMP-03)和PowerLab 8/35八通道研究型高速记录主机(含LabChart Pro专业版)两端均以BNC接口相互连接;
(3)PowerLab 8/35八通道研究型高速记录主机(含LabChart Pro专业版)以以USB连接方式接入电脑(安装LabCharb v7for Windows)。
2、扇贝心电波形检测方法的标准化:
(1)将实验扇贝外壳的附着生物清除干净,放在实验条件下暂养5-7天,使其适应实验环境;
(2)将Infrared sensors(CNY-70)的红外感端用Blu-Tag型胶(蓝丁胶)粘到扇贝壳外靠近心脏的位置(背部围心腔中);
(3)根据实验条件,检测之前10分钟,将待测双壳贝类个体放到充气的5L的实验水体环境中,待外套膜触须充分伸展之后,仪器连通进行检测。选择所选实验双壳贝类适温范围(虾夷扇贝1-31℃;栉孔扇贝1-37℃;海湾扇贝10-37℃),从低温到高温逐渐升温,升温速度设定为0.2℃/min,整数温度点稳定维持10分钟进行该温度下的心电参数的测定,实验扇贝保证不少于6个个体的重复样。在实验结束后,实验个体仍然放回实验前的水体环境中。
3、数据分析
(1)计算每个实验扇贝个体整数温度下的心电波幅强度-HA,运用回归分析待测个体在室温范围温度变化过程中的最大心电波形强度MHA及其对应的温 度TMHA;将每个个体按上述步骤重复三次或以上,作为此条件下此个体的积温促熟最佳温度TMHAi
(2)对测定物种N个个体的TMHA进行统计,TMHA平均值(M)±标准误(SEM)即为该双壳贝类物种的积温促熟最佳温度。
虾夷扇贝为冷水贝,1-31℃温度变化过程中,其MHA为1.654±0.027V,对应的温度TMHA-虾夷为8.55±0.14℃(图1);栉孔扇贝为温水贝,1-37℃温度变化过程中,其MHA为1.903±0.014V,对应的温度TMHA-栉孔为15.08±0.02℃(图2);海湾扇贝为温水贝,10-37℃温度变化过程中,其MHA为1.622±0.026V,对应的温度TMHA-海湾为18.78±0.12℃(图3);不同生活习性的三种扇贝的TMHA-虾夷<TMHA-栉孔<TMHA-海湾,而且与对应物种实际生产过程中经验值较为吻合,验证了TMHA作为指示双壳贝类物种的积温促熟最佳温度的准确性(表1)。
表1依据心电波幅测定不同扇贝物种的积温促熟最佳温度TMSI和实际生产过程中经验值T(表1)
扇贝物种 TMSI T
虾夷扇贝 8.55±0.14℃ 8-9℃
栉孔扇贝 15.08±0.02℃ 15-16℃
海湾扇贝 18.78±0.12℃ 18-20℃
应用本发明方法,选取二龄虾夷扇贝个体(n=180,取自大连市长海县獐子岛海区)、二龄栉孔扇贝个体(n=180,取自青岛市崂山区沙子口海区)和一龄虾夷海湾个体(n=180,取自青岛市黄岛开发区胶南海区)随机分为两组(n=90),每组分为三个平行样(n=30)。分别按照本发明测定的TMHA温度(实验组)和经验值(对照组)的温度进行亲贝的积温促熟。实验过程中除了水温差异外,其他积温促熟条件(饵料、换水、充气等)保持一致。做好标记后车间暂养,跟踪统计性腺指数、产卵量、受精率、孵化率和变态率(表2),验证本发明方法在育种工作中的应用。
结果显示,每种扇贝实验组和对照组各45个个体,实验组(TMHA)的性腺指数和产卵量均显著高于对照组(经验值)(one-way ANOVA,P<0.05);受精率和孵化率,实验组(TMHA)的略微高于对照组(经验值),但无显著性差异(one-way ANOVA,P>0.05);育苗过程中最重要指标之一的变态率,实验组(TMHA)极显著高于对照组(经验值)(one-way ANOVA,P<0.01)。通过整个苗期生产的对比,实验组(TSIM)的虾夷扇贝、栉孔扇贝和海湾扇贝的苗种数量的增产率对照组(经验值)分别提高48.97%,45.03%和61.51%。
结果表明本发明的检测标准可以有效的确定扇贝积温促熟最佳温度,从而为扇贝的人工育苗和科研提供翔实和有效的实验方法,为我国双壳贝类的高质健康养殖提供技术支撑。

Claims (10)

1.双壳贝类的心电波幅强度作为检测双壳贝类积温促熟最佳温度的指标的应用。
2.一种确定双壳贝类积温促熟最佳温度的方法,其特征在于,所述的方法是通过检测心电波幅强度来确定的。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的方法包括如下的步骤:
1)将Infrared sensors CNY-70的红外感端粘到待检测的双壳贝类实验个体的壳外靠近心脏的位置;
2)将待测双壳贝类个体放到水体中,待外套膜触须伸展之后,仪器连通进行检测;选择实验双壳贝类的适温范围,从低温到高温逐渐升温,进行不同温度下的心电参数的测定;
3)计算每个实验个体整数温度下的心电波幅强度,运用回归分析待测个体在适温范围温度变化过程中的最大心电波幅强度及其对应的温度TMHA;对测定的实验个体的TMHA进行统计,TMHA平均值(M)±标准误(SEM)即为该双壳贝类物种的积温促熟最佳温度。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的双壳贝类壳外靠近心脏的位置,为双壳贝类壳外背部围心腔。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的双壳贝类实验个体的数目不少于20个。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的升温速度设定为0.2℃/min,每个整数温度点稳定维持10分钟。
7.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的双壳贝类,包含但不限于虾夷扇贝、栉孔扇贝和海湾扇贝。
8.如权利要求2-6任一项所述的方法,其特征在于,所述的双壳贝类,包含但不限于虾夷扇贝、栉孔扇贝和海湾扇贝。
9.一种基于扇贝心跳指标的快速选种的标准,其特征在于,所述的标准如下:虾夷扇贝积温促熟最佳温度为8.55±0.14℃;栉孔扇贝积温促熟最佳温度为15.08±0.02℃;海湾扇贝积温促熟最佳温度为18.78±0.12℃。
10.权利要求9所述的标准在虾夷扇贝、栉孔扇贝、海湾扇贝遗传育种中的应用。
CN201710545398.0A 2017-07-06 2017-07-06 一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法 Expired - Fee Related CN107232103B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710545398.0A CN107232103B (zh) 2017-07-06 2017-07-06 一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710545398.0A CN107232103B (zh) 2017-07-06 2017-07-06 一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107232103A true CN107232103A (zh) 2017-10-10
CN107232103B CN107232103B (zh) 2020-03-20

Family

ID=59991311

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710545398.0A Expired - Fee Related CN107232103B (zh) 2017-07-06 2017-07-06 一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107232103B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111280098A (zh) * 2020-03-17 2020-06-16 中国海洋大学 一种栉孔扇贝耐温性状指标abt的快速测定方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1463595A (zh) * 2002-06-20 2003-12-31 朱纯清 一种扇贝杂交品种培育方法
CN103120140A (zh) * 2013-03-08 2013-05-29 大连海洋岛水产集团股份有限公司 一种扇贝的养殖方法
CN103371118A (zh) * 2013-08-01 2013-10-30 辽宁省海洋水产科学研究院 一种提高海湾扇贝孵化率的方法
CN105165675A (zh) * 2015-08-21 2015-12-23 中国海洋大学 一种利用心跳作为海湾扇贝亲贝选育指标的方法
CN105191837A (zh) * 2015-08-21 2015-12-30 中国海洋大学 一种基于心跳指标的快速评估扇贝抗性的方法
CN105191836A (zh) * 2015-08-21 2015-12-30 中国海洋大学 一种基于扇贝心跳指标的快速选种方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1463595A (zh) * 2002-06-20 2003-12-31 朱纯清 一种扇贝杂交品种培育方法
CN103120140A (zh) * 2013-03-08 2013-05-29 大连海洋岛水产集团股份有限公司 一种扇贝的养殖方法
CN103371118A (zh) * 2013-08-01 2013-10-30 辽宁省海洋水产科学研究院 一种提高海湾扇贝孵化率的方法
CN105165675A (zh) * 2015-08-21 2015-12-23 中国海洋大学 一种利用心跳作为海湾扇贝亲贝选育指标的方法
CN105191837A (zh) * 2015-08-21 2015-12-30 中国海洋大学 一种基于心跳指标的快速评估扇贝抗性的方法
CN105191836A (zh) * 2015-08-21 2015-12-30 中国海洋大学 一种基于扇贝心跳指标的快速选种方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111280098A (zh) * 2020-03-17 2020-06-16 中国海洋大学 一种栉孔扇贝耐温性状指标abt的快速测定方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN107232103B (zh) 2020-03-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105191837B (zh) 一种基于心跳指标的快速评估扇贝抗性的方法
CN105191836B (zh) 一种基于扇贝心跳指标的快速选种方法
CN111280098B (zh) 一种栉孔扇贝耐温性状指标abt的快速测定方法
CN105165675B (zh) 一种利用心跳作为海湾扇贝亲贝选育指标的方法
CN105594666A (zh) 一种快速增加水蛭抗凝血酶活性的养殖方法
CN107232103A (zh) 一种确定双壳贝类积温促熟温度的方法
CN107372273A (zh) 一种快速区分鲍耐温性能的测定方法
Grover et al. Length-weight relationship of pond-raised milkfish in the Philippines
CN112837267A (zh) 一种预测转基因玉米抗药性的数字检测方法及系统
Chelyadina et al. Сomparative characteristics of indices to assess the quality of mussel production by an example of cultivated Mytilus galloprovincialis (Сrimea, the Вlack Sea)
CN102090360B (zh) 四倍体半滑舌鳎鱼苗高效诱导方法
CN115669584B (zh) 一种基于攻击性性状对三疣梭子蟹进行亲本选育的方法
CN105420223B (zh) 一种乌鳢育种方法
CN101861839B (zh) 一种紫色珍珠质品系三角帆蚌的人工选育方法
CN109100336A (zh) 一种鉴定和评价小麦赤霉病籽粒抗性的方法
CN112753650B (zh) 一种鸭皮脂性状活体预测方法及其应用
Denekamp The choice of experimental models in cancer research: the key to ultimate success or failure?
Gupta et al. Intrinsic rate of natural increase of Brueelia amandavae (Ischnocera, Phthiraptera) populations infesting Indian red avadavat
CN114982681B (zh) 一种蛏类硬壳新品种选育方法
CN106719130B (zh) 一种构建温度和光照强度对于乌苏里拟鲿仔鱼生活力影响模型的方法
CN114814099B (zh) 一种基于葡萄叶片形状的光合作用预测方法
NL2035574B1 (en) Method for constructing slow-feathering pure lines of high-quality qingjiao mayu broiler chickens
RU2764307C1 (ru) Способ определения комплексного индекса телосложения и экстерьерно-конституционального типа животных
CN111149747B (zh) 一种三疣梭子蟹分级越冬培育方法
US11672237B2 (en) Method for measuring productivity of angora rabbit and its application

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
CB03 Change of inventor or designer information

Inventor after: Xing Qiang

Inventor after: Bao Zhenmin

Inventor after: Zhu Xinghai

Inventor after: Li Yangping

Inventor after: Li Ruojiao

Inventor after: Liao Huan

Inventor after: Zhang Meiwei

Inventor after: Lu Wei

Inventor after: Zhang Lingling

Inventor after: Huang Xiaoting

Inventor before: Xing Qiang

Inventor before: Zhu Xinghai

Inventor before: Li Yangping

Inventor before: Li Ruojiao

Inventor before: Liao Huan

Inventor before: Zhang Meiwei

Inventor before: Zhang Lingling

Inventor before: Huang Xiaoting

Inventor before: Bao Zhenmin

CB03 Change of inventor or designer information
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20200320

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee