CN107217005A - 一种金藻培养液配方及其快速培养方法 - Google Patents

一种金藻培养液配方及其快速培养方法 Download PDF

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侯仕营
栾会妮
李兆河
刘晓燕
王玲玲
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
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Abstract

一种金藻培养液配方及其快速培养方法，一级、二级和三级的配方是由NaNO3；柠檬酸铁：KH2PO4；EDTA‑2Na；Na2SiO3；VB1；VB12；NaHCO3；KH2PO4和海水所组成的，培养方法为，一级培养用1000mL灭菌锥形瓶，二级培养用2‑3立方水体的水泥池，三级培养用6‑20立方水体的水泥池，用三基色灯光光照，充气动力循环培养，培养3‑4d后采收，发明培养液配方营养均衡、充气动力循环培养、不用人工搅池，培养方法能够使金藻快速生长，过程操作简单，成本低，产量高，可大规模推广应用。

Description

一种金藻培养液配方及其快速培养方法
技术领域
本发明涉及水产养殖饵料培养领域，特别是将氮、磷、铁、硅的比例做了调整，添加了藻类生长所需的碳源，并对培养液总浓度进行了改进，增加金藻产量，效缩短培养时间的一种金藻培养液配方及其快速培养方法。
背景技术
金藻是一种单胞藻,其细胞微小、细胞壁薄、营养丰富,适于幼体摄食和消化,且该藻适应性较强,一次培养延长时间长,藻体不易老化沉淀,易于培养。金藻不仅含有白糖素、类胡萝卜素、抗氧化剂和长链多不饱和脂肪酸等多种高价值产物，其总油脂含量高，而且细胞壁中不含纤维素。因此，金藻不仅是海产经济动物一种良好的饵料生物,在双壳类育苗生产中,作为幼体的优质饵料被应用，而且在医疗保健和能源方面有广阔的应用前景。
在水产养殖育苗生产中，一方面是海胆、对虾、牡蛎、魁蚶、鲍鱼、海参等海珍品的优质育苗饵料；另一方面它也是培养轮虫、丰年虫卵、桡足类和枝角类等的优良生物饵料。合理利用饵料金藻不仅具有提高育苗存活率、保证幼苗正常变态和发育、提高生长速度及体长和体重等各项性状指标、提高免疫力等综合作用，而且是生物增氧和净化养殖水体的重要组分，可实现生态健康养殖，具有良好的经济和社会效益。
目前应用的培养液中氮、磷、铁、硅的比例不合理，培养液浓度偏低，光照强度、温度、水体pH值及通气量等条件控制不合理，导致金藻培养时间过长，且藻的营养成分难以得到保障。
发明内容
本实发明所要解决的技术问题是，克服上述现有技术的不足，提供了一种金藻营养液配方，并优化出与之配套的金藻培养流程，快速高效的为水产养殖生物提供营养物质丰富、适口性好的一种金藻培养液配方及其快速培养方法。
本发明解决上述技术问题所采取的技术方案是：一种金藻培养液配方及其快速培养方法，其特征是：一级培养液配方包括NaNO3：40~100mg/L；柠檬酸铁：0.4~1mg/L；KH2PO4：4~10mg/L；EDTA-2Na：5~6mg/L；Na2SiO3：6~10mg/L；VB1 ：200ug/L；VB12 ：200mug/L；消毒海水1000mL；pH为8.2；高压灭菌锅中121℃灭菌15min。
本发明二、三级培养液配方包括NaNO3：40~100mg/L； NaHCO3 ：1.0g/L；柠檬酸铁：0.4~1mg/L；KH2PO4：4~10mg/L；EDTA-2Na：5~6mg/L；Na2SiO3 ：5~10mg/L；VB1 ：200ug/L；VB12 ：200mug/L；消毒海水1000mL，pH=8.2。
本发明一级培养工艺流程如下：
a投放培养液约600mL于1000mL灭菌锥形瓶中；
b按照1:3-1:5接入藻种；
c控制光照强度，1000-3600lx 光暗周期比为：12L:12D；
d温度控制在22-26℃；
e第一天每小时摇瓶1次；
f一天后每天摇瓶3次。
本发明二、三级培养工艺流程如下：
a投放培养液2/3于培养池内；
b二级培养按照1:5-1:10，三级培养按照1:10-1:15接入藻种；
c控制光照强度，1000-3600lx 光暗周期比为：12L:12D；
d温度控制在22-26℃；
e期间用充气动力循环；
f5~6天即可达450×104个/mL。
实施例
实验证明：在海珍品育苗场进行实验结果如下：
一级培养的步骤：
1.投放培养液约600mL于1000mL灭菌锥形瓶中；
2.按照1:4接入藻种；
3.控制光照强度，1000-3600lx光暗周期比为：12L:12D；
4. 温度控制在22-26℃；
5.第一天每小时摇瓶1次；
6.一天后每天摇瓶3次。
达到300×104个/mL所需时间
二级培养的步骤：
1.投放培养液1立方水（培养池总容积3立方）于培养池内；
2.二级培养按照1:6接入藻种；
3.控制光照强度，1000-3600lx 光暗周期比为：12L:12D；
4.温度控制在22-26℃；
5.期间用充气动力循环；
达到300×104个/mL所需时间计
三级培养的步骤：
1.投放培养液6立方水（培养池总容积10立方）于培养池内；
2.三级培养按照1:12接入藻种；
3.控制光照强度，1000-3600lx 光暗周期比为：12L:12D；
4.温度控制在22-26℃；
5.期间用充气动力循环；
达到300×104个/mL所需时间计
通过优化金藻的培养基配方，调整合适的氮、磷、铁、硅比例，经过饵料培养实验，结果显示较普通培养液一级培养时间缩短约41%，二级培养缩短时间约38%，三级培养缩短培养时间约44%。
综上所述，本发明所用培养液配方营养更加全面；本发明培养液浓度较高能够快速有效实现金藻的扩增，较普通配方培养密度提高20%以上；用本发明所用培养方法稳定；通过充气动力循环，无需人工搅池。

Claims (4)

1.一种金藻培养液配方及其快速培养方法，其特征是：一级培养液配方包括NaNO3：40~100mg/L；柠檬酸铁：0.4~1mg/L；KH2PO4：4~10mg/L；EDTA-2Na：5~6mg/L；Na2SiO3：6~10mg/L；VB1 ：200ug/L；VB12 ：200mug/L；消毒海水1000mL；pH为8.2；高压灭菌锅中121℃灭菌15min；二级和三级培养液配方包括NaNO3：40~100mg/L； NaHCO3 ：1.0g/L；柠檬酸铁：0.4~1mg/L；KH2PO4：4~10mg/L；EDTA-2Na：5~6mg/L；Na2SiO3 ：5~10mg/L；VB1 ：200ug/L；VB12 ：200mug/L；消毒海水1000mL；pH=8.2。
2.根据权利要求1所述的一种金藻培养液配方及其快速培养方法，其特征是：包括以下制作步骤：步骤1、按重量配比取得各组成成分，并按顺序依次加入；步骤2、为防止维生素受热分解，需在灭菌后添加；步骤3、用次氯酸钠消毒海水的方法消毒，消毒方法为每立方米海水中加入300ml 10%的次氯酸钠溶液，有效消毒浓度为30ppm，加入次氯酸钠后，过夜8h后，在每立方米海水中加入20g无水硫代硫酸钠，充气5h左右，测定无残氯即可使用；步骤4、对于一级培养液需调节pH后高温灭菌使用；对于二级和三级培养液直接用消毒海水溶解后喷洒全池即可。
3.根据权利要求1所述的一种金藻培养液配方及其快速培养方法，其特征是，一级培养工艺流程如下：a投放培养液约600mL于1000mL灭菌锥形瓶中；b按照1:3~1:5接入藻种；c控制光照强度，1000~3600lx 光暗周期比为：12L:12D；d温度控制在22~26℃；e第一天每小时摇瓶1次；f一天后每天摇瓶3次。
4.根据权利要求1所述的一种金藻培养液配方及其快速培养方法，其特征是，二级和三级培养工艺流程如下：a投放培养液2/3于培养池内；b二级培养按照1:5~1:10，三级培养按照1:10~1:15接入藻种；c控制光照强度，1000~3600lx 光暗周期比为：12L:12D；d温度控制在22~26℃； e期间用充气动力循环；f 6~7天即可达450×104个/mL。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113186103A (zh) * 2021-05-27 2021-07-30 山西大学 一种适合黄群藻生长的dy-iv培养基和制备方法及其应用

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN113186103A (zh) * 2021-05-27 2021-07-30 山西大学 一种适合黄群藻生长的dy-iv培养基和制备方法及其应用

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