CN107043411A - 具有潜在镇痛性的多肽及其合成方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有潜在镇痛性的多肽及其合成方法，属于生物医药技术领域，具有潜在镇痛性多肽的氨基酸序列是GHCSDPRFNYDHPEICGGAAGG。本发明具有潜在镇痛性的多肽，通过改造α芋螺毒素Vc1.1得到，合成过程简单，解决了现有技术中α芋螺毒素Vc1.1的合成实验步骤繁琐，终产率低的问题。

Description

具有潜在镇痛性的多肽及其合成方法
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，涉及一种具有潜在镇痛性的多肽及其合成方法，尤其涉及一种具有新骨架的结构稳定的海洋多肽α芋螺毒素类似物及其合成方法。
背景技术
芋螺毒素(conotoxin或conopeptide,或CTX)，由海洋腹足纲软体动物芋螺(Conus)的毒液管和毒囊内壁的毒腺所分泌，由许多单一毒肽组成的鸡尾酒样的混合毒素，主要成分是一些对不同离子通道及神经受体高专一性的活性多肽化合物。每种芋螺的毒液中可能含50～200个活性多肽。不同种芋螺所含活性肽各不相同，即使同种芋螺因海域不同，其毒素成分也可存在差别，理论上估计有5万多种不同活性肽存在于芋螺毒液中。芋螺毒素多数由10～40个氨基酸残基组成，富含两对或三对二硫键，是发现的最小核酸编码的动物神经毒素肽，也是二硫键密度最高的小肽，可作用于各种离子通道和受体的类型及亚型。
α-芋螺毒素是A-超家族芋螺毒素中分布最广、丰度最高的家族，它们是一些12～30AA的小肽，通常含两个二硫键，有20种α-芋螺毒素的一级结构得到了确证，分别来自不同的芋螺种。α-芋螺毒素是神经或肌肉乙酰胆碱受体的抑制剂。而一种芋螺中同时可能含有6种以上的α-芋螺毒素，其靶位分子均为nAChR受体。已知不同生物物种或同一种物种体内均存在多种nAChR受体亚型，某些生物体内nAChR受体亚型可达16种之多。为了适应此种生态环境，α-芋螺毒素的分子结构不断进化，其二硫键间的loop环框架与氨基酸组成发生变异。
α芋螺毒素Vc1.1是一种作用于乙酰胆碱受体的具有潜在镇痛活性的多肽，含有四个半胱氨酸形成两对二硫键来维持结构的稳定。目前主要的合成方法是固相合成法，但由于两对二硫键的形成需要进行两步氧化，实验过程较为繁琐且降低了最终产率。而且二硫键在体内容易被谷胱甘肽酶和氧化还原酶还原而使生物活性降低。
发明内容
为实现上述目的，本发明提供一种具有潜在镇痛性的多肽，通过改造α芋螺毒素Vc1.1得到，合成过程简单，解决了现有技术中α芋螺毒素Vc1.1的合成实验步骤繁琐，终产率低的问题。
本发明的另一目的是提供一种具有潜在镇痛性的多肽的合成方法。
本发明所采用的技术方案是，一种具有潜在镇痛性的多肽，具有潜在镇痛性多肽的氨基酸序列是GHCSDPRFNYDHPEICGGAAGG。
本发明所采用的技术方案是，一种具有潜在镇痛性的多肽的合成方法，具体按照以下步骤进行：
步骤1，将野生型α芋螺毒素Vc1.1肽链2、8位上的一对二硫键删除，并在肽链2、8位分别引入组氨酸与苯丙氨酸，得到具有潜在镇痛性多肽的氨基酸序列，选择野生型α芋螺毒素Vc1.1作为模板，采用Modeller软件，在LINUX系统环境下，利用同源建模方法生成目标蛋白的三维结构模型，采用Dope打分对所获得的三维结构模型进行打分排序，选取最优目标蛋白的三维结构模型；
步骤2，采用Fmoc固相合成法对最优目标蛋白的多肽序列进行化学全合成，采用2-CTC树脂，树脂活化后，在树脂上对多肽链进行合成，利用质量浓度15％-25％的哌啶/DMF溶液进行氨基酸氮端Fmoc的脱保护，利用HCTU、DIPEA进行各氨基酸之间的偶联反应；偶联完成后采用TFA的稀溶液作为切割剂，将多肽链从树脂上切割下来，即得。
本发明的特征还在于，所述具有潜在镇痛性的多肽的合成方法还包括以下步骤：将步骤2中所得多肽产物溶解于1ml-5ml的DMF溶液，使多肽浓度达2mM-5mM，根据已加入的DMF的体积，加入5mM-25mM的HATU和10mM-50mM的DIPEA，室温搅拌3h-4h，反应完成后，加入质量浓度20％-60％的乙腈水溶液冻干，得到环化多肽，将环化多肽的保护基进行切割，采用TFA：TIPS：H2O＝96：2：2的溶液作为切割剂；室温搅拌2h-3h，反应完成，旋蒸除去大量TFA后，加入冰乙醚，环多肽析出；随后采用HPLC进行纯化，得到具有镇痛活性的环多肽。
本发明的有益效果是，本发明删除α芋螺毒素Vc1.1序列中的一对二硫键，简化了化学全合成中的实验步骤，容易得到最终产物，终产率提高，因为本发明具有潜在镇痛性多肽仅含有一对二硫键，所以合成过程中不会形成二硫键异构体，氧化过程只需在弱碱环境(0.1M NH4HCO3，pH＝8～8.5)中氧化，这大大减小了后续分离纯化的负担。相反，野生型α芋螺毒素Vc1.1含有两对二硫键，合成过程中需要选择性保护，氧化过程也需要两步，不仅要在空气中氧化，还需要碘氧化法。因此，本发明的多肽具有合成容易，纯化简便，避免了异构体形成的优点。
此外，经分子动力学模拟与核磁共振技术测定，本发明具有潜在镇痛性多肽保留了野生型多肽的结构与稳定性；经过环化获得具有镇痛活性的环多肽类似物，能够用于海洋多肽镇痛药物的开发，且该结构序列短结构稳定，能够用来修饰提高活性并设计其它多肽药物。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明删除α芋螺毒素Vc1.1序列中的一对二硫键的结构示意图。
图2是本发明多肽骨架分子内氢键的稳定性曲线。
图3a是多肽抑制α9α10nAChR的电流强度曲线图。
图3b是多肽浓度抑制曲线。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明具有潜在镇痛性多肽的氨基酸序列是GHCSDPRFNYDHPEICGGAAGG；α芋螺毒素Vc1.1的氨基酸序列是GCCDPRCNYDHPEIC#，#代表氨基化；如图1所示，α芋螺毒素Vc1.1肽链2、8位上的二硫键被删除，并在肽链2、8位分别引入组氨酸与苯丙氨酸。
实施例1，
具有潜在镇痛性的多肽的合成方法，具体按照以下步骤进行：
步骤1，在同源模建过程中，需要提供目标蛋白与模板蛋白的序列比对及模板蛋白的三维结构，然后使用Modeller软件直接生成目标蛋白的三维结构；将野生型α芋螺毒素Vc1.1肽链2、8位上的一对二硫键删除，并在肽链2、8位分别引入组氨酸与苯丙氨酸，选择野生型α芋螺毒素Vc1.1作为模板，采用Modeller软件，在LINUX系统环境下，利用同源建模方法采用Modeller9.14生成100个目标蛋白的三维结构模型，采用Dope打分对所获得的三维结构模型进行打分排序，选取最优目标蛋白的三维结构模型；
步骤2，采用Fmoc固相合成法对最优目标蛋白的多肽序列进行化学全合成，采用2-CTC树脂，树脂活化后，在树脂上对多肽链进行合成，利用质量浓度20％的哌啶/DMF溶液进行氨基酸氮端Fmoc的脱保护，利用HCTU、DIPEA进行各氨基酸之间的偶联反应；偶联完成后采用TFA的稀溶液作为切割剂，将多肽链从树脂上切割下来，得到具有潜在镇痛性的多肽。本发明采用Fmoc固相合成法，因其反应条件温和，副产物少，同时避开使用HF作为多肽从树脂上的切割剂。
步骤3，环化获得具有镇痛活性的环多肽：对步骤2中所得多肽粗产物进行首尾环化，将其溶解于2ml的DMF溶液，使多肽浓度达3mM，根据已加入的DMF的体积，加入10mM的HATU和20mM的DIPEA，室温搅拌3h，反应完成后，加入50％的乙腈/水溶液冻干，得到已经环化的多肽；为提高环化产率，多肽链上的侧链保护基被保留，因此环化结束后，将各保护基进行切割，采用TFA：TIPS：H2O＝96：2：2的溶液作为切割剂；室温搅拌2h，反应完成，旋蒸除去大量TFA后，加入冰乙醚，环肽析出。随后采用HPLC进行纯化，得到的产物对其进行表征。常用的表征手段有分析高效液相色谱(Analytical HPLC)、质谱(MS)、以及核磁共振(NMR)等。其中Analytical HPLC用来表征获得样品的纯度；MS表征样品的分子量；NMR用来表征样品的结构。
实施例2，
具有潜在镇痛性的多肽的合成方法，具体按照以下步骤进行：
步骤1与实施例1相同；
步骤2，采用Fmoc固相合成法对最优目标蛋白的多肽序列进行化学全合成，采用2-CTC树脂，树脂活化后，在树脂上对多肽链进行合成，利用质量浓度15％的哌啶/DMF溶液进行氨基酸氮端Fmoc的脱保护，利用HCTU、DIPEA进行各氨基酸之间的偶联反应；偶联完成后采用TFA的稀溶液作为切割剂，将多肽链从树脂上切割下来，得到具有潜在镇痛性的多肽。本发明采用Fmoc固相合成法，因其反应条件温和，副产物少，同时避开使用HF作为多肽从树脂上的切割剂。
步骤3，环化获得具有镇痛活性的环多肽：对步骤2中所得多肽粗产物进行首尾环化，将其溶解于1ml的DMF溶液，使多肽浓度达2mM，根据已加入的DMF的体积，加入25mM的HATU和10mM的DIPEA，室温搅拌3h，反应完成后，加入20％的乙腈/水溶液冻干，得到已经环化的多肽；为提高环化产率，多肽链上的侧链保护基被保留，因此环化结束后，将各保护基进行切割，采用TFA：TIPS：H2O＝96：2：2的溶液作为切割剂；室温搅拌3h，反应完成，旋蒸除去大量TFA后，加入冰乙醚，环肽析出。随后采用HPLC进行纯化，得到的产物对其进行表征。常用的表征手段有分析高效液相色谱(Analytical HPLC)、质谱(MS)、以及核磁共振(NMR)等。其中Analytical HPLC用来表征获得样品的纯度；MS表征样品的分子量；NMR用来表征样品的结构。
实施例3，
具有潜在镇痛性的多肽的合成方法，具体按照以下步骤进行：
步骤1与实施例1相同；
步骤2，采用Fmoc固相合成法对最优目标蛋白的多肽序列进行化学全合成，采用2-CTC树脂，树脂活化后，在树脂上对多肽链进行合成，利用质量浓度25％的哌啶/DMF溶液进行氨基酸氮端Fmoc的脱保护，利用HCTU、DIPEA进行各氨基酸之间的偶联反应；偶联完成后采用TFA的稀溶液作为切割剂，将多肽链从树脂上切割下来，得到具有潜在镇痛性的多肽。本发明采用Fmoc固相合成法，因其反应条件温和，副产物少，同时避开使用HF作为多肽从树脂上的切割剂。
步骤3，环化获得具有镇痛活性的环多肽：对步骤2中所得多肽粗产物进行首尾环化，将其溶解于5ml的DMF溶液，使多肽浓度达5mM，根据已加入的DMF的体积，加入5mM的HATU和50mM的DIPEA，室温搅拌4h，反应完成后，加入60％的乙腈/水溶液冻干，得到已经环化的多肽；为提高环化产率，多肽链上的侧链保护基被保留，因此环化结束后，将各保护基进行切割，采用TFA：TIPS：H2O＝96：2：2的溶液作为切割剂；室温搅拌2h，反应完成，旋蒸除去大量TFA后，加入冰乙醚，环肽析出。随后采用HPLC进行纯化，得到的产物对其进行表征。常用的表征手段有分析高效液相色谱(Analytical HPLC)、质谱(MS)、以及核磁共振(NMR)等。其中Analytical HPLC用来表征获得样品的纯度；MS表征样品的分子量；NMR用来表征样品的结构。
本发明多肽的生物活性：
本发明多肽的生物活性测试是在非洲爪蟾卵母细胞(Xenopus oocytes)上采用双电极电压钳(Molecular Devices Corp.,Sunnyvale,CA))进行。测试之前，经过乙醚麻醉青蛙、解剖取卵、缝合、离子通道RNA转录、蛋白表达等过程(大约需要1周时间)。非均质α9α10nAChR表达是通过控制注射不同亚单位mRNA的浓度比来实现的。离子通道受体表达后采用双膜片钳来测试毒素的抑制活性。在测试过程中，α芋螺毒素及类似物持续灌流300s，流速为2mL/min，再加入乙酰胆碱(ACh，50μM)持续灌流120s，流速为5mL/min。然后再施加乙酰胆碱(ACh，50μM)流速改为5mL/min，持续120s。施加激动剂的过程中记录电流强度。如图3a所示hcVc1.1与cVc1.1对乙酰胆碱受体激动电流具有显著的抑制，hcVc1.1的活性与Vc1.1相比有所降低，但是跟cVc1.1的抑制活性相当。另外，如图3b所示的多肽浓度抑制曲线进一步证实，hcVc1.1的活性虽然低于Vc1.1的但是跟cVc1.1的活性相当，前者的浓度抑制曲线与后者相比仅略向右平移。通过分析电流强度衰退的强弱推导α芋螺毒素及类似物的半抑制浓度IC50。活性数据表明，新设计的多肽具有明显的α9α10nAChR抑制活性，其活性与改造前相比仅仅降低了3倍，见图3a。
本发明多肽的稳定性：对其进行30ns的分子动力学模拟，观察结构的稳定性的变化，采用二维核磁共振技术将本发明多肽的结构与野生型结构作比较，验证结构的稳定性。
分子动力学模拟：单位温度变化引起的HN化学位移变化可以反映多肽骨架分子内氢键的稳定性。当化学位移随温度变化越慢，说明对温度的变化越不敏感，对应的多肽结构也越稳定。如图2所示，2号位X代表组氨酸(H)或半胱氨酸(C)，其中野生型α芋螺毒素Vc1.1、经过环化的野生型芋螺毒素cVc1.1的2、8号位均对应于半胱氨酸，而本发明多肽hcVc1.12号位对应组氨酸(H)，8号位X代表苯丙氨酸(F)。分子动力学模拟结果显示，本发明多肽主链的RMSD平均值在左右，和改造前多肽主链的RMSD值相当，因此分子动力学模拟结果显示删除多肽一对二硫键其主链区的二级结构不会发生大的变化，多肽的稳定性良好。
二维核磁共振研究：通过开展D2O交换实验考察新设计多肽骨架分子内氢键的稳定性。一般来讲，分子内氢键越稳定，重水交换的速率就会越慢，化学位移在单位时间内的变化就会越小。同上操作，α芋螺毒素或类似物被溶解在90％H2O/10％D2O，配制成pH为4.5、浓度2mg/mL的溶液。记录温度在274K到316K变化所对应的TOCSY数值。然后，再向样品中加入氘代乙腈，重复上面操作，记录在温度变化区间内对应的TOCSY值。
研究结果显示，见图2，本发明多肽的化学位移变化值与改造前相当，甚至主链核心区的变化值还略高于改造前的多肽，因此本发明多肽虽然删除一对二硫键，其结构稳定性与改造前相当。
终产率提高：本发明多肽合成的产率与改造前相比，提高了36％，并且纯化过程更加简便，节约了纯化的溶剂，降低了能耗。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围内。

Claims (3)

1.一种具有潜在镇痛性的多肽，其特征在于，具有潜在镇痛性多肽的氨基酸序列是GHCSDPRFNYDHPEICGGAAGG。
2.如权利要求1所述一种具有潜在镇痛性的多肽的合成方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：
步骤1，将野生型α芋螺毒素Vc1.1肽链2、8位上的一对二硫键删除，并在肽链2、8位分别引入组氨酸与苯丙氨酸，得到具有潜在镇痛性多肽的氨基酸序列，选择野生型α芋螺毒素Vc1.1作为模板，采用Modeller软件，在LINUX系统环境下，利用同源建模方法生成目标蛋白的三维结构模型，采用Dope打分对所获得的三维结构模型进行打分排序，选取最优目标蛋白的三维结构模型；
步骤2，采用Fmoc固相合成法对最优目标蛋白的多肽序列进行化学全合成，采用2-CTC树脂，树脂活化后，在树脂上对多肽链进行合成，利用质量浓度15％-25％的哌啶/DMF溶液进行氨基酸氮端Fmoc的脱保护，利用HCTU、DIPEA进行各氨基酸之间的偶联反应；偶联完成后采用TFA的稀溶液作为切割剂，将多肽链从树脂上切割下来，即得。
3.根据权利要求2所述的一种具有潜在镇痛性的多肽的合成方法，其特征在于，所述具有潜在镇痛性的多肽的合成方法还包括以下步骤：将步骤2中所得多肽产物溶解于1ml-5ml的DMF溶液，使多肽浓度达2mM-5mM，根据已加入的DMF的体积，加入5mM-25mM的HATU和10mM-50mM的DIPEA，室温搅拌3h-4h，反应完成后，加入质量浓度20％-60％的乙腈水溶液冻干，得到环化多肽，将环化多肽的保护基进行切割，采用TFA：TIPS：H2O＝96：2：2的溶液作为切割剂；室温搅拌2h-3h，反应完成，旋蒸除去大量TFA后，加入冰乙醚，环多肽析出；随后采用HPLC进行纯化，得到具有镇痛活性的环多肽。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117347415A (zh) * 2023-09-22 2024-01-05 江苏国源先进仪器技术研究院有限公司 一种基于高场核磁共振技术鉴定多肽药物二硫键的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6008058A (en) * 1993-06-18 1999-12-28 University Of Louisville Cyclic peptide mixtures via side chain or backbone attachment and solid phase synthesis
CN101448516A (zh) * 2006-04-13 2009-06-03 昆士兰大学 环化α-芋螺毒素肽
CN101602796A (zh) * 2008-06-13 2009-12-16 深圳海王药业有限公司 一种含硒活性多肽及其制备方法与应用
CN105440126A (zh) * 2015-12-31 2016-03-30 南京工业大学 治疗骨质疏松的α-螺旋多肽及其制备方法与应用
CN105601718A (zh) * 2016-01-30 2016-05-25 济南康和医药科技有限公司 一种布美诺肽的固相合成方法
CN105777871A (zh) * 2016-04-15 2016-07-20 暨南大学 一种环五肽的合成方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6008058A (en) * 1993-06-18 1999-12-28 University Of Louisville Cyclic peptide mixtures via side chain or backbone attachment and solid phase synthesis
CN101448516A (zh) * 2006-04-13 2009-06-03 昆士兰大学 环化α-芋螺毒素肽
CN101602796A (zh) * 2008-06-13 2009-12-16 深圳海王药业有限公司 一种含硒活性多肽及其制备方法与应用
CN105440126A (zh) * 2015-12-31 2016-03-30 南京工业大学 治疗骨质疏松的α-螺旋多肽及其制备方法与应用
CN105601718A (zh) * 2016-01-30 2016-05-25 济南康和医药科技有限公司 一种布美诺肽的固相合成方法
CN105777871A (zh) * 2016-04-15 2016-07-20 暨南大学 一种环五肽的合成方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
RILEI YU等: "Less is More: Design of a Highly Stable Disulfide-Deleted Mutant of Analgesic Cyclic α-Conotoxin Vc1.1", 《SCIENTIFIC REPORTS》 *
司岩岩等: "骨架环肽的化学合成研究进展", 《有机化学》 *
梁宋平主编: "《生物化学与分子生物学实验教程》", 31 March 2003, 北京：高等教育出版社 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117347415A (zh) * 2023-09-22 2024-01-05 江苏国源先进仪器技术研究院有限公司 一种基于高场核磁共振技术鉴定多肽药物二硫键的方法

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