CN107027815A - 一种发酵商陆制备杀虫剂的方法 - Google Patents

一种发酵商陆制备杀虫剂的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107027815A
CN107027815A CN201710243505.4A CN201710243505A CN107027815A CN 107027815 A CN107027815 A CN 107027815A CN 201710243505 A CN201710243505 A CN 201710243505A CN 107027815 A CN107027815 A CN 107027815A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fermentation
phytolacca acinosa
insecticide
seed
water
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710243505.4A
Other languages
English (en)
Inventor
廖祥儒
窦欣
田乔鹏
蔡宇杰
管政兵
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangnan University
Original Assignee
Jiangnan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University filed Critical Jiangnan University
Priority to CN201710243505.4A priority Critical patent/CN107027815A/zh
Publication of CN107027815A publication Critical patent/CN107027815A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A01N65/08—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/07—Bacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明提供了一种制备生物源杀虫剂的技术。其工艺特点是以商陆为原料，利用保存于中国典型培养物保藏中心的，保藏编号为：CCTCCNO：M2013283的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)H47和市售短小芽孢杆菌及市售苏云金杆菌混合发酵。原料适当打碎后加菌种100mL，加水10L，25℃—30℃发酵3‑12d，过滤后获得成品。本发明制备方法及过程中无污染安全可靠，发酵时间周期短，工艺环节少，简单易操作，可节省投资和运行费用。与传统化学药剂相比，其具绿色安全，环境友好等优势，且促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用，拥有广阔的应用前景。

Description

一种发酵商陆制备杀虫剂的方法
技术领域
本发明涉及到解一株淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)H47和短小芽孢杆菌及苏云金杆菌微生物发酵商陆制备植物源杀虫剂的生产方法，属于微生物和发酵技术领域。
背景技术
商陆(Phytolacca acinosa)系为商陆科多年生宿根草本植物，其干燥块根是一种应用历史悠久的传统中药，始载于《神农本草经》。商陆一般株高70-100cm，全株无毛，根粗壮、肉质、圆锥形，外皮淡黄色；茎直立、多分枝、绿色或紫红色、具纵沟；叶互生、椭圆形或卵状椭圆形，长12-25cm，宽5-10cm，先端急尖、基部楔形而下延，全缘，侧脉羽状，主脉粗壮；叶柄长1.5-3cm，上面具槽，下面半圆形。总状花序顶生或侧生，长10-15cm；花两性，径约8mm，具小梗，小梗基部有苞片1及小苞片2；萼通常5片、偶为4片，卵形或长方状椭圆形，初白色，后变淡红色；无花瓣、雄蕊8，花药淡粉红色(少数成淡紫色)；心皮8-10，离生。浆果扁球形，径约7mm，通常由8个分果组成，熟时紫黑色。种子肾圆形，扁平，黑色。花期6-8月。果期8-10月。广布于长江以南红壤低丘陵地区，在中国现有分布的品种中主要有商陆(野萝卜)和垂序商陆。主产河南，湖北，山东，浙江，江西等。商陆根入药，以白色肥大者为佳，红根有剧毒，仅供外用；具有通二便，逐水、散结，治水肿、胀满、脚气、喉痹，外敷治痈肿疮毒；也可作兽药及农药。果实含鞣质，可提制栲胶。嫩茎叶可供蔬食。
商陆含有多种次生代谢产物，包括美商陆皂苷A、B、D、E、G、F、D2等，美商陆皂苷元，2-羟基商陆酸、商陆酸、美商陆酸、3-氧代-30-甲氧基羰基-23-去甲齐墩果烷-12-烯-28-酸等。另外，有菠菜甾醇、△1-豆甾烯醇等甾醇类成分，以及天冬氨酸、谷氨酸等氨基酸类成分，并含有多糖，尚有美商陆根抗病毒蛋白和美商陆根抗真菌蛋白R1、R2，美商陆毒素，有丝分裂原，组胺等。因而具有灭螺、杀螨、杀虫作用。
目前，植物性杀虫剂多用有机溶剂或煎煮提取，不利于节能且有较大的环境风险；也会影响活性物质的稳定性和遗失活性物质；同时增加成本使得开发应用困难较大，作用效果缓慢，因此给植物源杀虫剂的研发和生产带来了巨大的经济困难。利用合适的植物促生菌发酵商陆，不仅有利于生理活性物质的提取，还不易造成活性物质的失活，促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用。有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护和商陆植物本身的有效利用。
发明内容
针对现有技术存在的上述缺陷，本发明利用商陆植物为原料，用2013年6月24日保存于中国典型培养物保藏中心的，保藏编号为：CCTCCNO：M2013283的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)H47(该菌株以下简称：解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283)和市售短小芽孢杆菌及市售苏云金杆菌发酵制备植物源杀虫剂，有利于改善植物生长和增强杀虫效果，有利于环境保护。
本发明的发酵技术方案：
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl 10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按一定比例混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
本发明的有益效果：
本发明提供了发酵商陆制得一种生物源杀虫剂的方法。本发明制备方法及过程中无污染安全可靠，发酵时间周期短，工艺环节少，简单易操作，可节省投资和运行费用。与传统化学药剂相比，其具绿色安全，环境友好等优势，且促生菌本身还有较好的杀虫防病和促生作用，拥有广阔的应用前景。
具体实施方法：
下面结合实施例对本发明进行进一步描述。以下实施例仅为本发明的几个具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。
实施例1
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl 10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按1:1:1混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
实施例2
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl 10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按1:2:1混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
实施例3
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl 10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按1:1:2混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。

Claims (7)

1.一种发酵商陆制备生物源杀虫剂的方法。其特征是以商陆为原料，添加菌种发酵制备杀虫剂，该方法包括以下步骤：
1)菌种准备：将解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌分别接种于种子培养基，于30℃，250r/min震荡培养12h；所述种子培养基成分按g/L计为：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl 10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。按一定比例混合做种子。
2)发酵液准备：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
3)发酵罐空消及空气管道消毒：按相关说明书进行发酵罐空消。
4)发酵液实消：将步骤2所得商陆放入发酵罐中，补充自来水至终体积为10L，按相关说明书进行实消灭菌。
5)接种培养：当发酵罐温度降至37℃时，将步骤1所得种子按体积比1％的接种量，接种至装有商陆的发酵罐中，25—30℃条件下培养3—12天，设置工艺要求的通气量并保持罐压，设置各其他培养参数培养。
6)出料：培养完毕，放出发酵液，过滤，过滤后所得发酵液即为杀虫剂成品。
2.根据权利要求1所述的发酵商陆制备生物源杀虫剂的方法，其特征是：所述菌种单独种子培养基培养12h按一定比例混合后做为发酵用种子。
3.根据权利要求1所述的发酵商陆制备生物源杀虫剂的方法，其特征是：菌种(解淀粉芽孢杆菌H47CCTCCM2013283和市售短小芽孢杆菌、市售苏云金杆菌)用种子培养基配方为(g/L)：蛋白胨10，酵母膏5，NaCl 10，其余成分为水，121℃高压灭菌15min，调整pH至7.0。
4.根据权利要求1所述的发酵商陆制备生物源杀虫剂的方法，其特征是：选用质量优良的商陆，用水冲洗，70％—75％酒精浸泡3min，用水洗净，经搅碎机搅碎后待用。
5.根据权利要求1所述的发酵商陆制备生物源杀虫剂的方法，其特征是：菌种的加入量为发酵体系的1％。
6.根据权利要求1所述的发酵商陆制备生物源杀虫剂的方法，其特征是：原料及菌种混合均匀，发酵温度25—30℃，发酵时间3-12d。
7.根据权利要求1所述的发酵商陆制备生物源杀虫剂的方法，其特征是：发酵时间周期短，工艺环节少，发酵后可获得较好的杀虫防病和促生作用的杀虫剂。
CN201710243505.4A 2017-04-14 2017-04-14 一种发酵商陆制备杀虫剂的方法 Pending CN107027815A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710243505.4A CN107027815A (zh) 2017-04-14 2017-04-14 一种发酵商陆制备杀虫剂的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710243505.4A CN107027815A (zh) 2017-04-14 2017-04-14 一种发酵商陆制备杀虫剂的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN107027815A true CN107027815A (zh) 2017-08-11

Family

ID=59534982

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710243505.4A Pending CN107027815A (zh) 2017-04-14 2017-04-14 一种发酵商陆制备杀虫剂的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107027815A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110623000A (zh) * 2019-09-09 2019-12-31 湖北工程学院 一种白花菜提取物及其制备方法和用途
CN111742903A (zh) * 2020-06-22 2020-10-09 黄丽 一种控制新疆牲畜养殖场所卫生害虫数量的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1265834A (zh) * 1999-03-07 2000-09-13 宛吉斌 天然植物生物杀虫剂及生物肥料的制备方法
CN101697740A (zh) * 2009-04-04 2010-04-28 冯子龙 新型中药农药及其生产工艺
CN103451128A (zh) * 2013-07-12 2013-12-18 江南大学 一株解淀粉芽孢杆菌及其在防治桃流胶病中的应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1265834A (zh) * 1999-03-07 2000-09-13 宛吉斌 天然植物生物杀虫剂及生物肥料的制备方法
CN101697740A (zh) * 2009-04-04 2010-04-28 冯子龙 新型中药农药及其生产工艺
CN103451128A (zh) * 2013-07-12 2013-12-18 江南大学 一株解淀粉芽孢杆菌及其在防治桃流胶病中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王国夫等: "商陆等3种植物提取物对菜粉蝶的拒食作用", 《安徽农业科学》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110623000A (zh) * 2019-09-09 2019-12-31 湖北工程学院 一种白花菜提取物及其制备方法和用途
CN111742903A (zh) * 2020-06-22 2020-10-09 黄丽 一种控制新疆牲畜养殖场所卫生害虫数量的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107723258B (zh) 防治烟草青枯病的复合菌剂及其制备方法
CN106282067B (zh) 多功能农用复合微生物菌剂及微生态制剂与应用
CN110218685B (zh) 生防放线菌及应用
CN106867946A (zh) 一种以苦皮藤为原料经微生物发酵制备杀虫剂的方法
CN107432135A (zh) 利用真菌促进锁阳种子萌发的方法
CN104718983A (zh) 一种人工栽培猪苓的菌种驯化方法
CN107027815A (zh) 一种发酵商陆制备杀虫剂的方法
CN101288359B (zh) 一种打破苜蓿种子硬实休眠的方法
CN107382511A (zh) 一种防治黄瓜枯萎病的中草药发酵肥料及其制备方法
CN110235698A (zh) 一种牛樟芝的培养方法
CN106867947A (zh) 一种以苦楝为原料经微生物发酵制备杀虫剂的方法
CN103819230A (zh) 一种食用菌新型栽培基质及其生产方法
CN108821858A (zh) 火龙果抗病专用菌肥、制备方法及其应用
CN106967752A (zh) 一种以苍耳为原料经微生物发酵制备杀虫剂的方法
CN101914457B (zh) 促进白芨种子萌发的一株真菌
CN106316624A (zh) 一种防治苹果树腐烂病的管理方法
CN110583704A (zh) 一种防治红心蜜柚黄龙病的生物制剂
CN109136122A (zh) 一种降解皂素和单宁的复合微生物菌剂
CN105175126A (zh) 一种活性酵素液体肥的制备方法
CN104177168A (zh) 一种利用抗病毒颗粒药渣制备的有机肥及其制备方法
CN109526974B (zh) 一种高效防治水稻稻瘟病的组合物及应用方法
CN107690999A (zh) 一种桃树育苗方法
CN106967754A (zh) 一种以苦参为原料发酵制备杀虫剂的技术
CN105969828A (zh) 一种哈茨木霉菌菌株抗菌肽的制备方法及在防治月季黑斑病中的应用
CN106867949A (zh) 一种以曼陀罗为原料经微生物发酵制备杀虫剂的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20170811

WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication