CN106924760B - 一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物及其制备方法，由以下成分组成：体温液化组合基质、促皮吸收剂、缓冲液、电解质维持剂等。本发明将过敏原检测抗原与上述组合物混合并包被于斑贴检测点上，通过贴敷于体表皮肤对接触性过敏进行病因检测与诊断。与现有技术相比，本发明改变传统斑贴试验采用凡士林为单一基质的不足：应用体温液化组合基质技术使过敏原检测抗原处于液态，更易被皮肤吸收；结合促皮吸收剂改变皮肤屏障层结构，使过敏原抗原成分更好地渗透；同时，采用缓冲液与电解质维持剂保护受检皮肤组织细胞的正常生理功能，使检测结果得以真实表现。上述成分相辅相成，相互促进，大幅提高过敏原检测速度及检测敏感性。

Description

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种斑贴试验基质组合物及其制备方法，尤其是指一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物及其制备方法。

背景技术

斑贴试验（Patch Test）发展到现在已有一百多年的历史，是确定接触性过敏患者的致敏原一个简单而可靠的方法。当患者因皮肤或粘膜接触致敏原产生过敏后，在同一致敏原或化学结构类似、具有相同抗原性物质在接触到体表的任何部位，就将在接触部位出现皮肤炎症改变，此即变态反应性接触性皮炎。斑贴试验就是利用这一原理，人为地将可疑的致敏原配置成一定浓度，放置在一特制的检测点并敷贴于人体体表，经过一定时间，根据有否阳性反应来确定受试物是否系致敏原。

斑贴试验避免了病人针刺、抽血等创伤性操作，患者无痛苦，并且不需要昂贵的检测设备，不仅有助于确定皮炎湿疹患者的致敏原还有助于指导患者的预防及治疗。另外，还有助于确定职业性皮炎的致病原因，在临床上具有非常重要的意义和实用价值。但是，现有的皮肤斑贴诊断技术还存在以下缺陷或不足，具有产生影响结果准确性的风险：

1、检测基质单一：一直以来都是以凡士林作为过敏原检测基质。凡士林是一种极具化学惰性的碳氢化合物，几乎不与其他化学物质相溶，通常需要把固体类型的过敏原抗原研磨成粉沫状再与凡士林混合，若与水溶液类型的抗原相混合则更不容易混匀，容易出现抗原分布不均的情况，影响检测结果的准确性。此外，凡士林在50℃以下时呈膏状，被其包裹的过敏原抗原经皮肤吸收缓慢，使皮肤变态反应的应答时间延长，通常需要48—72小时才可观察结果，因此给患者的诊断及治疗时机造成一定程度上的延误。

2、检测基质没有缓冲体系：人体的正常pH值为7.35-7.45，呈弱碱性，人体正常的细胞需要这样的环境中，才能进行正常的新陈代谢，维持其正常的生能机能。事实上很多过敏原抗原物质的PH值偏酸性或偏碱性，若其直接与皮肤上皮细胞接触，可引起局部组织细胞产生代谢性酸中毒或代谢性碱中毒，使细胞机能退化，免疫应答反应迟钝等，在一定程度上会影响斑贴试验的准确性。

3、检测基质无电解质平衡体系：钠和钾是人体体液中的重要电解质。在人体细胞内的钾离子与细胞外的钠离子互相协调，维持体液及组织细胞的生理机能。在皮肤斑贴试验中，当细胞接触到大量外源性物质时，其生理平衡关系将受到影响和改变，进而使其代谢失常、渗透压改变（使细胞肿胀或收缩），产生一系列的应激性反应，导致诊断干扰。

发明内容

本发明提供一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物及其制备方法，其主要目的在于克服现有皮肤过敏原斑贴试验检测产品存在的检测时间长、灵敏度较低、操作麻烦的缺陷。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，按组合物质量百分比含量包括如下组分：

体温液化组合基质 80～90%；

促皮吸收剂 1～10%；

缓冲液 10～11%；

电解质维持剂 0.3～0.9%。

进一步的，所述体温液化组合基质由聚乙二醇（PEG）和/或丙二醇组成。

进一步的，所述聚乙二醇（PEG）包括聚乙二醇300（PEG300）、聚乙二醇400（PEG400）、聚乙二醇600（PEG600）、聚乙二醇1000（PEG1000）、聚乙二醇1450（PEG1450）、聚乙二醇1500（PEG1500）、聚乙二醇2000（PEG2000）、聚乙二醇3305（PEG3305）、聚乙二醇4000（PEG4000）、聚乙二醇6000（PEG6000）中的至少一种，并且其按组合物质量百分比配比的含量分别为：

聚乙二醇300（PEG300） 60～85%；

聚乙二醇400（PEG400） 50～80%；

聚乙二醇600（PEG600） 45～70%；

聚乙二醇1000（PEG1000） 40～60%；

聚乙二醇1450（PEG1450） 35～55%；

聚乙二醇1500（PEG1500） 30～50%；

聚乙二醇2000（PEG2000） 25～40%；

聚乙二醇3305（PEG3305） 15～35%；

聚乙二醇4000（PEG4000） 10～30%；

聚乙二醇6000（PEG6000） 5～20%。

进一步的，所述促皮吸收剂包括月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮）、丙二醇、薄荷醇、冰片中的至少一种，并且其按组合物质量百分比配比的含量分别为：

月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮） 2～6%；

丙二醇 1～5%；

薄荷醇 1～5%；

冰片 1～5%。

进一步的，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液。

进一步的，所述缓冲液的PH值为7.4。

进一步的，所述缓冲液的摩尔浓度为0.01～0.02M/L。

进一步的，所述电解质维持剂按组合物质量百分比含量包括如下组分：

氯化钠 0.4～0.9%；

氯化钾 0.05～0.1%。

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将占组合物质量百分比为80～90%的体温液化组合基质放在60～80℃恒温水浴锅中溶化，充分混匀后，随即将恒温水浴锅的温度设置为45℃；所述体温液化组合基质由聚乙二醇（PEG）和/或丙二醇组成；

2)加入促皮吸收剂：将占组合物质量百分比为1～10%的促皮吸收剂加入到步骤1制得的体温液化组合基质中充分混匀备用；所述促皮吸收剂包括月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮）、丙二醇、薄荷醇、冰片中的至少一种；

3)制备缓冲液：调制一份占组合物质量百分比为10～11%的缓冲液，并使其PH值为7.4；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液；

4)加入电解质维持剂：将占组合物质量百分比为0.3～0.9%的电解质维持剂加入到步骤3制得的缓冲液中充分溶解备用；所述电解质维持剂由氯化钠和氯化钾组成；

5)将步骤2与步骤4分别制得的混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

一种利用一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解；

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；

所述过敏原抗原可以为重铬酸钾、硫酸镍、硫柳汞、甲醛、环氧树脂中的一种，并且其按诊断试剂质量百分比配比的含量分别为：

重铬酸钾 0.5%；

硫酸镍 5%；

硫柳汞 0.1%；

甲醛 2%；

环氧树脂 1%；

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。

和现有技术相比，本发明产生的有益效果在于:

1、本发明中的体温液化组合基质，可完美替代凡士林。首先，该基质无刺激性，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份具有良好的相溶性，因此固体过敏原抗原可在溶解后与其均匀混合，液体型过敏原抗原则更易与其均匀混溶；其次，当其在＜35℃时，呈半固体状，使抗原在常温下得到更好的保护与储存；而遇35～37℃左右温度时，该基质由半固体缓慢的转化为液状，液状抗原经皮吸收速率明显优于半固体或固体基质。

2、本发明中的促皮吸收剂，其促进抗原透皮吸收的机理为：作用于表皮角质层细胞间脂质，使角质层细胞疏松，细胞间距增大，从而引起角质层外层细胞易于脱落，皮肤角质层变薄，大大降低了皮肤对药物的屏障作用，从而促进抗原的经皮渗透。在本发明中其与体温液化组合基质共同使用，达到相互促进的效果，在大幅缩短检测时间的同时，有效增强检测的敏感性。

3、本发明中增加了细胞离子维持剂组合物，达到维持斑贴试验时受检处细胞内外渗透压平衡及其正常的生理功能和代谢功能的目的，可有效克服皮肤应激性反应导致的诊断干扰因素，同时还有助于过敏原抗原物质的输送，对检测物质的吸收产生进一步的促进作用。

4、本发明中的缓冲液则将各种过敏原抗原及基质维持在PH值7.4，使其与人体PH值相近，可有效避免受检组织细胞受到外源性酸碱平衡干扰而产生的检测结果影响。

5、与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明改变传统斑贴试验采用凡士林为单一基质的不足，应用体温液化组合基质、促皮吸收剂、缓冲液、电解质维持剂等相结合的过敏原斑贴试验基质组合物配方及制备方法，该技术使得过敏原斑贴试验基质组合物在常温（＜35℃）存储状态下（未使用时）过敏原抗原被基质组合物以半固体形式包裹和保护；在临床应用时，将斑贴贴覆于人体体表，受人体体温（35～37℃）影响，基质组合物转变为液态，过敏原抗原在液态下更易被皮肤吸收。同时促皮吸收剂的应用，可改变皮肤屏障层结构，使过敏原抗原成分更好地渗透，两种组分相辅相成，大幅提高过敏原检测速度及检测敏感性。另外缓冲液、电解质维持剂组分可维持和保护受检部位的组织细胞的生理功能及正常的新陈代谢，避免应激性反应的发生，减少外源性诊断干扰，保证了皮肤过敏原斑贴试验的准确性。

6、本发明操作简便、检测时间短、敏感性及准确性更高，更适合在皮肤科等临床过敏原诊断中推广和应用。

具体实施方式

下面说明本发明的具体实施方式。

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，按组合物质量百分比含量包括如下组分：体温液化组合基质80～90%、促皮吸收剂1～10%、缓冲液10～11%、电解质维持剂0.3～0.9%。

具体的：

体温液化组合基质由聚乙二醇（PEG）和/或丙二醇组成。

其中，所述聚乙二醇（PEG）包括聚乙二醇300（PEG300）、聚乙二醇400（PEG400）、聚乙二醇600（PEG600）、聚乙二醇1000（PEG1000）、聚乙二醇1450（PEG1450）、聚乙二醇1500（PEG1500）、聚乙二醇2000（PEG2000）、聚乙二醇3305（PEG3305）、聚乙二醇4000（PEG4000）、聚乙二醇6000（PEG6000）中的至少一种，并且其按组合物质量百分比配比的含量分别为：聚乙二醇300（PEG300）60～85%、聚乙二醇400（PEG400）50～80%、聚乙二醇600（PEG600）45～70%、聚乙二醇1000（PEG1000）40～60%、聚乙二醇1450（PEG1450）35～55%、聚乙二醇1500（PEG1500）30～50%、聚乙二醇2000（PEG2000）25～40%、聚乙二醇3305（PEG3305）15～35%、聚乙二醇4000（PEG4000）10～30%、聚乙二醇6000（PEG6000）5～20%。

上述聚乙二醇（PEG）实际使用剂量跟与其配伍的液化组合物相关（与其配伍的液化组合物分子量不同，则其使用剂量随之改变）。

本发明中的体温液化组合基质，可完美替代凡士林。首先，该基质无刺激性，具有良好的水溶性，并与许多有机物组份具有良好的相溶性，因此固体过敏原抗原可在溶解后与其均匀混合，液体型过敏原抗原则更易与其均匀混溶；其次，当其在＜35℃时，呈半固体状，使抗原在常温下得到更好的保护与储存；而遇35～37℃左右温度时，该基质由半固体缓慢的转化为液状，液状抗原经皮吸收速率明显优于半固体或固体基质。

促皮吸收剂包括月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮）、丙二醇、薄荷醇、冰片中的至少一种，并且其按组合物质量百分比配比的含量分别为：月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮）2～6%（优选为4%）、丙二醇1～5%（优选为3%）、薄荷醇1～5%（优选为3%）、冰片1～5%（优选为3%）。

本发明中的促皮吸收剂，其促进抗原透皮吸收的机理为：作用于表皮角质层细胞间脂质，使角质层细胞疏松，细胞间距增大，从而引起角质层外层细胞易于脱落，皮肤角质层变薄，大大降低了皮肤对药物的屏障作用，从而促进抗原的经皮渗透。在本发明中其与体温液化组合基质共同使用，达到相互促进的效果，在大幅缩短检测时间的同时，有效增强检测的敏感性。

缓冲液为磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液，并且该缓冲液的PH值为7.4，摩尔浓度为0.01～0.02M/L。

其中，磷酸盐缓冲液由磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、双蒸水组成；柠檬酸盐缓冲液由柠檬酸钠、0.5%柠檬酸、双蒸水组成。

本发明中的缓冲液则将各种过敏原抗原及基质维持在PH值7.4，使其与人体PH值相近，可有效避免受检组织细胞受到外源性酸碱平衡干扰而产生的检测结果影响。

电解质维持剂按组合物质量百分比含量包括如下组分：氯化钠0.4～0.9%、氯化钾0.05～0.1%。

本发明中增加了细胞离子维持剂组合物，达到维持斑贴试验时受检处细胞内外渗透压平衡及其正常的生理功能和代谢功能的目的，可有效克服皮肤应激性反应导致的诊断干扰因素，同时还有助于过敏原抗原物质的输送，对检测物质的吸收产生进一步的促进作用。

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将占组合物质量百分比为80～90%的体温液化组合基质放在60～80℃恒温水浴锅中溶化，充分混匀后，随即将恒温水浴锅的温度设置为45℃。所述体温液化组合基质由聚乙二醇（PEG）和/或丙二醇组成，其中，聚乙二醇（PEG）包括聚乙二醇300（PEG300）、聚乙二醇400（PEG400）、聚乙二醇600（PEG600）、聚乙二醇1000（PEG1000）、聚乙二醇1450（PEG1450）、聚乙二醇1500（PEG1500）、聚乙二醇2000（PEG2000）、聚乙二醇3305（PEG3305）、聚乙二醇4000（PEG4000）、聚乙二醇6000（PEG6000）中的至少一种。

2)加入促皮吸收剂：将占组合物质量百分比为1～10%的促皮吸收剂加入到步骤1制得的体温液化组合基质中充分混匀备用；所述促皮吸收剂包括月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮）、丙二醇、薄荷醇、冰片中的至少一种。

3)制备缓冲液：调制一份占组合物质量百分比为10～11%的缓冲液，并使其PH值为7.4；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液；其中，磷酸盐缓冲液按组合物质量百分比含量包括如下组分：磷酸氢二钠0.58%、磷酸二氢钾0.07%、双蒸水10%；柠檬酸盐缓冲液按组合物质量百分比含量包括如下组分：柠檬酸钠0.62%、0.5%柠檬酸（滴定）、双蒸水10%。

4)加入电解质维持剂：将占组合物质量百分比为0.3～0.9%的电解质维持剂加入到步骤3制得的缓冲液中充分溶解备用；所述电解质维持剂由氯化钠和氯化钾组成。

5)将步骤2与步骤4分别制得的混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明改变传统斑贴试验采用凡士林为单一基质的不足，应用体温液化组合基质、促皮吸收剂、缓冲液、电解质维持剂等相结合的过敏原斑贴试验基质组合物配方及制备方法，该技术使得过敏原斑贴试验基质组合物在常温（＜35℃）存储状态下（未使用时）过敏原抗原被基质组合物以半固体形式包裹和保护；在临床应用时，将斑贴贴覆于人体体表，受人体体温（35～37℃）影响，基质组合物转变为液态，过敏原抗原在液态下更易被皮肤吸收。同时促皮吸收剂的应用，可改变皮肤屏障层结构，使过敏原抗原成分更好地渗透，两种组分相辅相成，大幅提高过敏原检测速度及检测敏感性。另外缓冲液、电解质维持剂组分可维持和保护受检部位的组织细胞的生理功能及正常的新陈代谢，避免应激性反应的发生，减少外源性诊断干扰，保证了皮肤过敏原斑贴试验的准确性。

一种利用一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解。

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；所述过敏原抗原可以为重铬酸钾、硫酸镍、硫柳汞、甲醛、环氧树脂中的一种，并且其按诊断试剂质量百分比配比的含量分别为：重铬酸钾 0.5%、硫酸镍 5%、硫柳汞0.1%、甲醛 2%、环氧树脂 1%。

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。

实施例一

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，按组合物质量百分比含量包括如下组分：

与该组分相对应的一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将聚乙二醇1500（PEG1500）在60℃恒温水浴锅中溶化，再加入聚乙二醇600（PEG600）充分混匀，随即将恒温水浴锅温度设置为45℃；

2)加入促皮吸收剂：将月桂氮卓酮、丙二醇加入步骤1的体温液化组合基质中充分混匀备用；

3)制备缓冲液：将磷酸氢二钠、磷酸二氢钾加入双蒸水中溶解，测其PH值为7.4；

4)加入电解质维持剂：将氯化钠、氯化钾加入缓冲液中充分溶解备用；

5)将步骤2与步骤4所得混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

采用该制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解；

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原（可以为重铬酸钾 0.5%、硫酸镍5%、硫柳汞 0.1%、甲醛 2%、环氧树脂 1%中的一种）加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。

实施例二

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，按组合物质量百分比含量包括如下组分：

与该组分相对应的一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将聚乙二醇2000（PEG2000）在60～70℃恒温水浴锅中溶化，再加入聚乙二醇400（PEG400）充分混匀，随即将恒温水浴锅温度设置为45℃；

2)加入促皮吸收剂：将丙二醇、薄荷醇加入步骤1的体温液化组合基质中充分混匀备用；

3)制备缓冲液：将磷酸氢二钠、磷酸二氢钾加入双蒸水中溶解，测其PH值为7.4；

4)加入电解质维持剂：将氯化钠、氯化钾加入缓冲液中充分溶解备用；

5)将步骤2与步骤4所得混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

采用该制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解；

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原（可以为重铬酸钾 0.5%、硫酸镍5%、硫柳汞 0.1%、甲醛 2%、环氧树脂 1%中的一种）加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。

实施例三

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，按组合物质量百分比含量包括如下组分：

与该组分相对应的一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将聚乙二醇3305（PEG3305）在70～80℃恒温水浴锅中溶化，再加入聚乙二醇300（PEG300）充分混匀，随即将恒温水浴锅温度设置为45℃；

2)加入促皮吸收剂：将月桂氮卓酮、冰片加入步骤1的体温液化组合基质中充分混匀备用；

3)制备缓冲液：先将柠檬酸钠加入双蒸水中溶解备用；配制0.5%柠檬酸溶液备用；在柠檬酸钠溶液中缓慢滴入0.5%柠檬酸溶液，边滴边测其PH值，直到PH为7.4为止；

4)加入电解质维持剂：将氯化钠、氯化钾加入缓冲液中充分溶解备用；

5)将步骤2与步骤4所得混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

采用该制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解；

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原（可以为重铬酸钾 0.5%、硫酸镍5%、硫柳汞 0.1%、甲醛 2%、环氧树脂 1%中的一种）加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。

实施例四

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，按组合物质量百分比含量包括如下组分：

与该组分相对应的一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将聚乙二醇4000（PEG4000）在80℃恒温水浴锅中溶化，再加入聚乙二醇300（PEG300）充分混匀，随即将恒温水浴锅温度设置为45℃；

2)加入促皮吸收剂：将月桂氮卓酮、薄荷醇加入步骤1的体温液化组合基质中充分混匀备用；

3)制备缓冲液：先将柠檬酸钠加入双蒸水中溶解备用；配制0.5%柠檬酸溶液备用；在柠檬酸钠溶液中缓慢滴入0.5%柠檬酸溶液，边滴边测其PH值，直到PH为7.4为止；

4)加入电解质维持剂：将氯化钠、氯化钾加入缓冲液中充分溶解备用；

5)将步骤2与步骤4所得混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

采用该制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解；

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原（可以为重铬酸钾 0.5%、硫酸镍5%、硫柳汞 0.1%、甲醛 2%、环氧树脂 1%中的一种）加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。

实施例五

一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，按组合物质量百分比含量包括如下组分：

与该组分相对应的一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将聚乙二醇6000（PEG6000）在80℃恒温水浴锅中溶化，再加入聚乙二醇300（PEG300）充分混匀，随即将恒温水浴锅温度设置为45℃；

2)加入促皮吸收剂：将丙二醇、冰片加入步骤1的体温液化组合基质中充分混匀备用；

3)制备缓冲液：将磷酸氢二钠、磷酸二氢钾加入双蒸水中溶解，测其PH值为7.4；

4)加入电解质维持剂：将氯化钠、氯化钾加入缓冲液中充分溶解备用；

5)将步骤2与步骤4所得混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

采用该制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解；

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原（可以为重铬酸钾 0.5%、硫酸镍5%、硫柳汞 0.1%、甲醛 2%、环氧树脂 1%中的一种）加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。

上述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。

Claims (7)

1.一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，其特征在于，按组合物质量百分比含量包括如下组分：

体温液化组合基质 80～90%；

促皮吸收剂 1～10%；

缓冲液 10～11%；

电解质维持剂 0.3～0.9%；

所述体温液化组合基质为聚乙二醇（PEG）；

所述促皮吸收剂包括月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮）、丙二醇、薄荷醇中的至少一种，并且其按组合物质量百分比配比的含量分别为：

月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮） 2～6%；

丙二醇 1～5%；

薄荷醇 1～5%；

所述电解质维持剂按组合物质量百分比含量包括如下组分：

氯化钠 0.4～0.9%；

氯化钾 0.05～0.1%。

2.如权利要求1所述一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，其特征在于：所述聚乙二醇（PEG）包括聚乙二醇1000（PEG1000）、聚乙二醇1450（PEG1450）、聚乙二醇1500（PEG1500）、聚乙二醇2000（PEG2000）、聚乙二醇3305（PEG3305）、聚乙二醇4000（PEG4000）、聚乙二醇6000（PEG6000）中的至少一种，并且其按组合物质量百分比配比的含量分别为：

聚乙二醇1000（PEG1000） 40～60%；

聚乙二醇1450（PEG1450） 35～55%；

聚乙二醇1500（PEG1500） 30～50%；

聚乙二醇2000（PEG2000） 25～40%；

聚乙二醇3305（PEG3305） 15～35%；

聚乙二醇4000（PEG4000） 10～30%；

聚乙二醇6000（PEG6000） 5～20%。

3.如权利要求1所述一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，其特征在于：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液。

4.如权利要求3所述一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，其特征在于：所述缓冲液的pH值为7.4。

5.如权利要求3所述一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物，其特征在于：所述缓冲液的摩尔浓度为0.01～0.02mol/L。

6.一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)制备体温液化组合基质：先将占组合物质量百分比为80～90%的体温液化组合基质放在60～80℃恒温水浴锅中溶化，充分混匀后，随即将恒温水浴锅的温度设置为45℃；所述体温液化组合基质由聚乙二醇（PEG）组成；

2)加入促皮吸收剂：将占组合物质量百分比为1～10%的促皮吸收剂加入到步骤1制得的体温液化组合基质中充分混匀备用；所述促皮吸收剂包括月桂氮卓酮（1-正十二烷氮杂环庚-2-酮）、丙二醇、薄荷醇中的至少一种；

3)制备缓冲液：调制一份占组合物质量百分比为10～11%的缓冲液，并使其pH值为7.4；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液或柠檬酸盐缓冲液；

4)加入电解质维持剂：将占组合物质量百分比为0.3～0.9%的电解质维持剂加入到步骤3制得的缓冲液中充分溶解备用；所述电解质维持剂由氯化钠和氯化钾组成；

5)将步骤2与步骤4分别制得的混合物在45℃恒温水浴锅中充分混匀制得基质组合物。

7.一种利用如权利要求6所述一种皮肤过敏原斑贴试验诊断基质组合物的制备方法制得的基质组合物制备皮肤斑贴试验诊断试剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)溶解基质组合物：将步骤5制得的基质组合物置于45℃恒温水浴锅中充分溶解；

b)加入过敏原抗原：将要用于制备的过敏原抗原加入步骤a所制得的组合物中，充分溶解、混匀；所述过敏原抗原可以为重铬酸钾、硫酸镍、硫柳汞、甲醛、环氧树脂中的一种，并且其按诊断试剂质量百分比配比的含量分别为：重铬酸钾0.5%；硫酸镍5%；硫柳汞0.1%；甲醛2%；环氧树脂1%；

c)包被检测点：先将空白检测点贴于医用脱敏胶布上，再将步骤b所制得的检测过敏原混合物用定量加样器加载包被到不同检测点上，冷却、封装。