CN106822095B - 一种防治脂肪肝和肥胖的药物及其在制药中的应用 - Google Patents
一种防治脂肪肝和肥胖的药物及其在制药中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106822095B CN106822095B CN201710059233.2A CN201710059233A CN106822095B CN 106822095 B CN106822095 B CN 106822095B CN 201710059233 A CN201710059233 A CN 201710059233A CN 106822095 B CN106822095 B CN 106822095B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- obesity
- borapetoside
- compound
- fatty liver
- srebp
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 208000004930 Fatty Liver Diseases 0.000 title claims abstract description 18
- 206010019708 Hepatic steatosis Diseases 0.000 title claims abstract description 18
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 title claims abstract description 18
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 title claims abstract description 18
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 title claims abstract description 17
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 title claims abstract description 17
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 26
- ZXGKLWUOGQDOTD-IYIXDXQLSA-N methyl (1S,2R,7S,8S,9R)-8-[(2R)-2-(furan-3-yl)-2-[(2R,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyethyl]-2,8-dimethyl-10-oxo-11-oxatricyclo[7.2.1.02,7]dodec-3-ene-3-carboxylate Chemical compound COC(=O)C1=CCC[C@H]2[C@](C)(C[C@@H](O[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3O)c3ccoc3)[C@H]3C[C@H](OC3=O)[C@@]12C ZXGKLWUOGQDOTD-IYIXDXQLSA-N 0.000 claims abstract description 24
- XMDFFEJAGQDGJG-UHFFFAOYSA-N Borapetoside E Natural products COC(=O)C1CC(C23C)OC(=O)C3=CCCC2C1(C)CC(C1=COC=C1)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O XMDFFEJAGQDGJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 108010020396 Sterol Regulatory Element Binding Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 102000009822 Sterol Regulatory Element Binding Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 14
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 3
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 abstract description 20
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 11
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 abstract description 10
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 abstract description 10
- 230000037213 diet Effects 0.000 abstract description 10
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 abstract description 10
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 abstract description 9
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 abstract description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 abstract description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 2
- XUOAZZCHOKUHCF-AWGNRERRSA-N Borapetoside B Natural products COC(=O)C1=C[C@@H](O)C[C@H]2[C@@]3(C)C[C@H](OC(=O)[C@H]3C[C@H](O[C@H]4O[C@@H](CO)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]4O)[C@@]12C)c5cocc5 XUOAZZCHOKUHCF-AWGNRERRSA-N 0.000 abstract 1
- 229930192114 borapetoside Natural products 0.000 abstract 1
- GCXIISSOWSXMCD-MZYRCUENSA-N borapetoside a Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@]3(C)C[C@H](OC(=O)[C@@H]3C[C@H]3[C@]2([C@@]1(O)C(=O)O3)C)C1=COC=C1)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GCXIISSOWSXMCD-MZYRCUENSA-N 0.000 abstract 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 25
- 235000021069 high fat-high sugar diet Nutrition 0.000 description 19
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 9
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 9
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010074438 Sterol Regulatory Element Binding Protein 2 Proteins 0.000 description 6
- 102100026841 Sterol regulatory element-binding protein 2 Human genes 0.000 description 6
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 108010074436 Sterol Regulatory Element Binding Protein 1 Proteins 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 5
- 102100026839 Sterol regulatory element-binding protein 1 Human genes 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960003105 metformin Drugs 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 238000010832 independent-sample T-test Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 3
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 3
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NPGIHFRTRXVWOY-UHFFFAOYSA-N Oil red O Chemical compound Cc1ccc(C)c(c1)N=Nc1cc(C)c(cc1C)N=Nc1c(O)ccc2ccccc12 NPGIHFRTRXVWOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 2
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000013227 male C57BL/6J mice Methods 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000012046 mixed solvent Substances 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FXLJDRXREUZRIC-BAOOBMCLSA-N (3s,4r,5r)-1,3,4,5,6-pentahydroxyhexan-2-one;hydrate Chemical compound O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO FXLJDRXREUZRIC-BAOOBMCLSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 206010063409 Acarodermatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000881711 Acipenser sturio Species 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- YMTCQCWFYXOJRY-UHFFFAOYSA-N Bedfordiaditerpenalcohol Natural products OCC=C(C)CCC1(C)C(C)CCC2(C)C1CCCC2=C YMTCQCWFYXOJRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010392 Bone Fractures Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010017076 Fracture Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 241000218164 Menispermaceae Species 0.000 description 1
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000447727 Scabies Species 0.000 description 1
- 102000008078 Sterol Regulatory Element Binding Protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000096270 Swertia leducii Species 0.000 description 1
- 241000133430 Tinospora Species 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- -1 clerodane diterpenoid glycoside compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 230000000678 effect on lipid Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000003209 gene knockout Methods 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 208000005687 scabies Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/365—Lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明涉及borapetoside E以及以Borapetoside E为活性成分的药物组合在用于制备治疗和预防脂肪肝和肥胖的药物中的用途。通过研究发现：化合物borapetoside E 40mg/kg剂量即可明显降低高脂高糖(HFGD，High fat and glucose diet)饮食诱导的小鼠肝脏中的甘油三酯、胆固醇及游离脂肪酸水平；显著缓解HFGD小鼠肥胖症状并促进其能量代谢；其作用机制可能与抑制固醇调节元件结合蛋白(SREBP，Sterol regulatory element binding proteins)有关，可以用于制备治疗和预防脂肪肝和肥胖的药物。
Description
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及化合物borapetoside E及以该化合物作为活性成分的药物组合物在制备防治脂肪肝和肥胖方面的药物中的新用途。
技术背景：
2008年，世界卫生组织估计，成人中超重人数已经有14亿，其中有5亿为肥胖患者，2030年，肥胖患者人数将达到10亿。肥胖是导致脂肪肝、2型糖尿病、心血管疾病及高血压等代谢性疾病的主要原因，这些疾病严重影响了人们的生活质量并造成了大量的医疗花费。近年来的研究发现，固醇调节元件结合蛋白(SREBPs，Sterol regulatory elementbinding proteins transcription factors)对维持机体能量代谢平衡具有重要影响。SREBP主要包括SREPB-1和SREBP-2两个家族，其中SREBP-1主要与甘油三酯和脂肪酸的合成有关，而SREBP-2主要与胆固醇合成有关。近年来，大量研究证实，通过基因敲出或小分子化合物的手段抑制SREBP的表达或激活都能够起到防治代谢性疾病的作用，如糖尿病、肥胖、脂肪肝及动脉粥样硬化等。因此，SREBP已经成为治疗该类代谢性疾病的潜在靶点。
防己科植物波叶青牛胆是一种传统的药用植物，在古代就被广泛运用于治疗发热、骨折及疥疮等多种疾病。波叶青牛胆主要分布于中国南方以及柬埔寨、印度、印度尼西亚、老挝、马来西亚、缅甸、菲律宾以及泰国等东南亚地区。20世纪80年代，人们首次从该植物的茎中提取到了一类克罗烷二萜糖苷类化合物，其为该植物茎的主要成分，包括borapetoside A-H 8个单体化合物。关于borapetoside E治疗脂肪肝以及肥胖的药理作用未见报道。本发明发现borapetoside E具有显著改善脂肪肝和肥胖的作用，其作用机制是与抑制肝脏SREBP蛋白的表达有关。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种化合物borapetoside E或含有该化合物为主要活性成分的药物组合物在制备防治脂肪肝和肥胖的药物中的新用途，以及该化合物作为SREBP抑制剂的工具药物的新用途。
为了实现本发明的上述目的，本发明提供了如下的技术方案：
如下结构式所示的化合物borapetoside E在制备治疗和预防脂肪肝和肥胖的药物中的应用，
本发明还提供了化合物borapetoside E在制备SREBP抑制剂的工具药物中的应用。
本发明另外提供了以Borapetoside E为活性成分，用于制备治疗和预防脂肪肝和肥胖的药物组合。
本发明发现borapetoside E能够显著改善HFGD小鼠的的脂肪肝、肥胖症状及能量代谢。其作用机制可能与下调固醇调节元件结合蛋白(SREBP)有关。
本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。也可以与其他药物组成复方的形式使用，该药物组合物含有0.1～99％，优选为0.5～90％的本发明化合物，其余为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的药物制剂常用的药用载体和/或赋形剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。可以使用不同的药用辅料，制成固体制剂(片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂等)或液体制剂(注射剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、糖浆剂等)。本发明的药物可经口服和注射(静脉注射、静脉滴注、肌肉注射、皮下注射、腹腔注射等)形式给药。
附图说明
图1为Borapetoside E对高脂高糖饮食(HFGD)诱导小鼠脂肪肝的影响；
图1中，(A和B)肝脏冰冻切片油红O染色，标尺长度分别为0.5cm(A)和100μm(B)，n＝6。(C-E)分别为肝脏TG，CHO和FFA的含量n＝9-10。Normal，正常饮食对照组；HFGD，高脂高糖饮食组；B，40mg/kg borapetoside E；M，200mg/kg二甲双胍。组间比较使用独立样本T检验，*P<0.05，**P<0.01，误差线为标准误。
图2为Borapetoside E对小鼠体重和饮食的影响；
图2中A平均每只小鼠饮食量，n＝6。(B)小鼠体重变化，n＝6。Normal，正常饮食对照组；HFGD，高脂高糖饮食组；B，40mg/kg borapetoside E。组间比较使用独立样本本T检验，*P<0.05，**P<0.01，误差线为标准误。
图3为Borapetoside E对小鼠脂肪组织中脂肪细胞大小及脂含量影响；
图3.(A)脂肪组织HE染色，标尺为100μm，n＝6。(B-D)分别为脂肪组织中TG，CHO和FFA的含量，n＝9-10。Normal，正常饮食对照组；HFGD，高脂高糖饮食组；B，40mg/kgborapetoside E；M，200mg/kg二甲双胍。组间比较使用独立样本T检验，*P<0.05，**P<0.01，误差线为标准误。
图4为Borapetoside E对小鼠能量消耗的影响；
图4中.(A和B)分别为小鼠夜晚和白天的氧气消耗量，n＝6。(C和D)分别为小鼠夜晚和白天的能量消耗量，n＝6。HFGD，高脂高糖饮食组；B，40mg/kg borapetoside E；Dark，夜间；Light，白天；EE，能量消耗。组间比较使用独立样本T检验，**P<0.01，误差线为标准误。
图5为Borapetoside E抑制高脂饮食(HFD)诱导小鼠SREBP的表达；
图5.(A)SREBP-1及其下游靶基因mRNA表达量。(B)SREBP-2及其下游靶基因mRNA表达量。(C)肝脏SREBP蛋白表达量；下左：前体SREBP的表达量；下右：剪切后的SREBP表达量。Normal，正常饮食对照组；HFD，高脂饮食组；B，40mg/kg borapetoside E；M，200mg/kg二甲双胍；组间比较使用独立样本T检验，n＝6-7，*P<0.05，**P<0.01，误差线为标准误，各组均与HFD组比较。
具体实施方式：
下面结合附图，用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。
实施例1：
波叶青牛胆藤采集于2012年采于云南思茅，干重15千克，粉碎，用95％乙醇室温下冷浸提取三次(每次25升)，每次5天。减压回收浓缩得到提取物1100克，进行硅胶柱层析，用石油醚/丙酮混合溶剂梯度洗脱(99：1至0：100)，得到A-G 7个组分。组分E(180克)再进行硅胶柱层析，用氯仿/甲醇混合溶剂梯度洗脱(40：1至5：1)得到三个组分E1-E3。组分E1通过Sephadex LH-20柱反复层析，甲醇洗脱，得到5.3克纯化合物borapetoside E。化合物结构的鉴定通过波谱数据的比较和解析确定。
1、Borapetoside E对高脂高糖饮食(HFGD)诱导小鼠脂肪肝的影响：
3-4周健康雄性C57BL/6J小鼠，购于中国医学科学院医学实验动物研究所，实验动物生产许可证号：SCXK 2014-0004。动物饲养于无菌条件：室温为22-25℃，相对湿度60～70％，动物自由饮水摄食。其中模型组动物给予45％高脂饲料喂养20周，并于第13周至20周给予10％果糖水，正常组给予普通饲料和正常饮用水。20周后动物按照血糖均匀分为正常组，模型组，40mg/kg borapetoside E组。动物前2.5天每天给药2次，后面每天1次，持续至第16天。第16天给药两小时后，处死动物，取部分肝脏保存于4％多聚甲醛，用蔗糖梯度脱水后，使用冰冻切片机切10μm厚片，使用0.3％油红O进行染色观察。
另取部分肝脏，按照1：9加入相应体积的无水乙醇(100mg：0.9ml)，匀浆后于4℃离心6000转/分，10min后取上清，使用试剂盒(南京建成)检测甘油三酯(TG)，总胆固醇(CHO)以及游离脂肪酸(FFA)的含量。
结果显示borapetoside E处理后HFGD小鼠的脂肪肝得到显著缓解(图1.A和B)；同时borapetoside E显著降低了小鼠肝脏中TG、CHO以及FFA的含量(图1.C-D)，而二甲双胍对肝脏组织中的脂含量无显著影响。
2、Borapetoside E对高脂高糖(HFGD)饮食诱导小鼠肥胖的影响
(1)Borapetoside E对小鼠体重饮食的影响
HFGD小鼠给药处理方式同前所述，小鼠按体重均等分组。给药期间检测小鼠饮食量和体重变化，持续至第16天，平均饮食摄入量＝整笼动物总饮食量/小鼠只数。结果显示，虽然小鼠饮食不受影响，但borapetoside E显著降低了肥胖动物的体重(图2A和B)，其可能与增加小鼠的能量消耗有关(图4.A-D)。
(2)Borapetoside E对小鼠脂肪组织中脂含量影响
动物为(1)中的同批小鼠，于第16天给药后取脂肪组织保存于4％多聚甲醛，脱水后进行石蜡切片，切片厚度为5μm，脱蜡后使用苏木素-伊红(HE)对切片进行染色，显微镜下观察拍照。另取部分脂肪组织，按检测肝脏脂含量的方法检测组织内甘油三酯(TG)，总胆固醇(CHO)以及游离脂肪酸(FFA)的含量。结果如图3所示，borapetoside E处理后，HFGD小鼠腹部的脂肪细胞显著缩小至正常对照组水平，脂肪组织中TG和FFA水平也显著降低。
(3)Borapetoside E对小鼠能量消耗的影响
另取一批HFGD小鼠，按相同给药方式和剂量给药5次后使用TSE PhenoMaster/LabMaster系统(购于德国TSE公司)检测小鼠夜间氧气消耗量VO2及能量消耗(EE，Energyexpenditure)，检测时间为29个循环(每个循环检测时间为27分钟)，取第2至第29个循环进行统计分析。结束后动物取出饲养休息一天，并在该天继续给药两次，末次给药(第7次)后检测小鼠白天氧气消耗量VO2及能量代谢，检测方法与之相同。为减少饮食对小鼠代谢影响，检测期间对小鼠进行禁食不禁水。结果显示，borapetoside E显著增加HFGD小鼠氧气和能量的消耗(图4.A-D)。
3、Borapetoside E抑制高脂饮食(HFD)诱导小鼠SREBP的表达
3-4周健康雄性C57BL/6J小鼠，来源及饲养与实施方式1相同，其中模型组动物给予45％高脂饲料喂养20周，正常组给予普通饲料和正常饮用水。小鼠按相同方式给药5次，末次给药2h后处死小鼠，取肝脏组织，按照试剂盒(天根生物科技有限公司)要求提取总RNA，并进行荧光定量PCR实验，检测SREBP及其下游靶基因的表达量。
另取一部分肝脏组织，使用9倍体积的蛋白裂解液(碧云天生物科技有限公司)充分匀浆后于4℃12000转/分离心15分钟，取上清裂解液进行蛋白免疫印记(western blot)实验，检测SREBP-1蛋白表达量。
结果显示borapetoside E显著抑制了SREBP-1及其下游有关脂肪酸和甘油三酯合成的靶基因(图5.A)；同时显著抑制了SREBP-2及其下游有关胆固醇合成的靶基因(图5.B)。与此结果一致，肝脏中SREBP蛋白的前体形式(pre-SREBP-1)及激活形式(n-SREBP-1)都受到了borapetoside E的显著抑制(图5.C)。
实施例2：
注射液制剂的制备：
按实施例1的方法先得到本发明的化合物borapetoside E 50mg，将其溶解于2毫升丙二醇中，过滤所得溶液在无菌条件下装入安瓿瓶中。
实施例3：
粉剂的制备：
按实施例1的方法先得到本发明的化合物borapetoside E，与赋形剂重量比为9:1的比例加入赋形剂，制成粉剂。
实施例4：
片剂的制备：
按实施例1的方法先得到本发明的化合物borapetoside E，按其与赋形剂重量比为1:5-1:10的比例加入赋形剂，制粒压片。
实施例5：
口服液制剂的制备：
按实施例1的方法先得到本发明的化合物borapetoside E，按常规口服液制法制成口服液。
实施例6：
胶囊剂、颗粒剂、或冲剂的制备：
按实施例1的方法先得到本发明的化合物borapetoside E，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成胶囊或颗粒剂或冲剂。
Claims (3)
1.如下结构式所示的化合物borapetoside E在制备治疗和预防脂肪肝和肥胖的药物中的应用，
2.化合物borapetoside E在制备SREBP抑制剂的工具药物中的应用。
3.以Borapetoside E为活性成分的药物组合物在用于制备治疗和预防脂肪肝和肥胖的药物中的用途。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710059233.2A CN106822095B (zh) | 2017-01-24 | 2017-01-24 | 一种防治脂肪肝和肥胖的药物及其在制药中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201710059233.2A CN106822095B (zh) | 2017-01-24 | 2017-01-24 | 一种防治脂肪肝和肥胖的药物及其在制药中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106822095A CN106822095A (zh) | 2017-06-13 |
| CN106822095B true CN106822095B (zh) | 2020-08-18 |
Family
ID=59121815
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201710059233.2A Active CN106822095B (zh) | 2017-01-24 | 2017-01-24 | 一种防治脂肪肝和肥胖的药物及其在制药中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106822095B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN117717549A (zh) * | 2021-07-12 | 2024-03-19 | 兰州大学 | 喹吖因或其药学上可接受的盐在制备治疗高脂血症药物中的应用 |
| CN115671116A (zh) * | 2021-07-30 | 2023-02-03 | 武汉大学 | 25-羟羊毛甾醇的用途 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100016213A1 (en) * | 2008-07-16 | 2010-01-21 | National Taiwan University | Use of a diterpenoid compound for treating diabetes |
-
2017
- 2017-01-24 CN CN201710059233.2A patent/CN106822095B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20100016213A1 (en) * | 2008-07-16 | 2010-01-21 | National Taiwan University | Use of a diterpenoid compound for treating diabetes |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Clerodane Diterpenoids with Anti-hyperglycemic Activity from Tinospora crispa;Yuan Gao等;《Natural Products and Bioprospecting》;20161017;247-255 * |
| Hypoglycemic Diterpenoids from Tinospora crispa;Sio-Hong Lam等;《Journal of Natural Products》;20120127;153-159 * |
| Hypotensive and cardio-chronotropic constituents of Tinospora crispa and mechanisms of action on the cardiovascular system in anesthetized rats;Siwaporn Pramana等;《Journal of Ethnopharmacology》;20120114;166-178 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106822095A (zh) | 2017-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ma et al. | Effects of a rhizome aqueous extract of Dioscorea batatas and its bioactive compound, allantoin in high fat diet and streptozotocin-induced diabetic mice and the regulation of liver, pancreas and skeletal muscle dysfunction | |
| AU2003260985B2 (en) | Extraction and purification method of active constituents from stem of Lonicera japonica Thunb., its usage for anti-inflammatory and analgesic drug | |
| Bailly | The traditional and modern uses of Selaginella tamariscina (P. Beauv.) Spring, in medicine and cosmetic: Applications and bioactive ingredients | |
| KR100825041B1 (ko) | 염증성 질환 치료 및 예방용 조성물 | |
| CN113150048B (zh) | 青钱柳的提取物及其抗类风湿性关节炎应用 | |
| Cai et al. | Radix Glycyrrhizae extract and licochalcone a exert an anti-inflammatory action by direct suppression of toll like receptor 4 | |
| US20150105458A1 (en) | Line leaf inula flower lactone a and methods for preparing and using the same for treating multiple sclerosis | |
| CN110772547B (zh) | 文王一支笔提取物在制备治疗肝炎药物中的应用 | |
| CN106822095B (zh) | 一种防治脂肪肝和肥胖的药物及其在制药中的应用 | |
| Zhang et al. | A comprehensive review on distribution, pharmacological properties, and mechanisms of action of sesamin | |
| Li et al. | Exploring the active compounds and potential mechanism of the anti-nonalcoholic fatty liver disease activity of the fraction from Schisandra chinensis fruit extract based on multi-technology integrated network pharmacology | |
| KR101034624B1 (ko) | 디디에이에이치를 활성화시키는 감초 유래의 칼콘 화합물 및 이를 유효성분으로 하는 췌장 베타세포 사멸 및 당뇨병성 신증의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| KR100979459B1 (ko) | 근육세포에서 포도당 흡수를 증가시키는 데이츄 추출물과이로부터 분리한 4ｈ-크로멘-4-온 유도체 | |
| Guo et al. | The pericarp of Zanthoxylum bungeanum Maxim.: An excellent source for the development of alternative drugs for improving glucose and lipid metabolism disorder related diseases | |
| CN109806287B (zh) | 一种布渣叶黄酮总苷及其制备方法和应用 | |
| CN103110680A (zh) | 一种短葶飞蓬总酚酸的制备方法 | |
| JP6982192B2 (ja) | 鎮痛に有効な山椒葉抽出物の分画物 | |
| CN106913619B (zh) | 一种促进胆固醇逆转运的提取物及其制备方法与应用 | |
| CN105566344B (zh) | 一种螺环色原酮及其制备与应用 | |
| CN116019854B (zh) | 桑提取物在制备预防和/或治疗肝胆疾病药物中的应用 | |
| KR20150067937A (ko) | 사이코사포닌 에이를 유효성분으로 함유하는 비만증 치료 및 예방용 조성물 | |
| CN115806490B (zh) | 具有激活ampk磷酸化的酚性杂萜化合物、药物组合物、制备方法以及应用 | |
| KR20110098994A (ko) | 리퀴리티게닌 또는 이소리퀴리티게닌을 유효성분으로 포함하는 엘엑스알-알파 과다 발현으로 인한 질병의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| CN112830947B (zh) | 拉萨大黄中分离的二苯乙烯类化合物及其在治疗神经系统疾病中的用途 | |
| KR102623896B1 (ko) | 네오헤스페리딘 디하이드로칼콘 당전이체를 포함하는 비만 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |