CN106795152B - 蛋白激酶抑制剂 - Google Patents

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Abstract

具有绝对构型R或S的式(VIII)的化合物，及其药学可接受的盐、水合物或溶剂合物，其中所述变量如说明书中所述。提供了包含式(VIII)化合物的药物组合物，及抑制蛋白激酶的方法，和治疗疾病(例如癌症、炎症)的方法。

Description

蛋白激酶抑制剂
技术领域
本发明描述了对蛋白激酶具有抑制活性的新型炔类衍生物及其药物组合物，其用于预防或治疗与异常细胞生长相关的疾病。
背景技术
蛋白激酶是催化蛋白质的丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸部分中用于羟基磷酸化的一组酶。它们在诱导细胞生长、分化和增殖的生长因子信号传导中起着非常重要的作用。人类蛋白激酶可以分为酪氨酸蛋白激酶和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。酪氨酸蛋白激酶可以进一步分为受体激酶和细胞质/非受体激酶(Manning等人,Science,2002,298,1912)。受体酪氨酸激酶具有与生长因子相互作用的细胞表面区域，以及使酪氨酸部分进行里磷酸化的细胞质区域。这样，生长因子可以与生长因子受体位点结合，从而引发受体酪氨酸激酶的聚合和细胞质内酪氨酸部分的自磷酸化。随后，蛋白质亚家族的相继磷酸化作为信号传导过程继续进行，导致转录因子过表达并最终成为癌症。特定蛋白激酶的突变或过表达可能会影响正常细胞的信号传导，从而导致身体的稳态失衡。例如，连续信号传导可导致癌症、炎症、代谢综合征和中枢神经系统(CNS)疾病。
慢性粒细胞性白血病(CML)患者中存在bcr/abl融合基因，其由染色体22上的断裂点簇集群区(breakpoint cluster region，bcr)与染色体9上的c-abl原癌基因重构而成。所述含有bcr/abl基因的染色体被称为费城染色体(Nowell,J.Natl.Cancer Inst.,1960；25:85)。在bcr/abl融合基因中，bcr基因部分含有低聚区域，abl基因部分包含酪氨酸区域。有报道，bcr/abl基因的三个主要部分(p190、p210和p230kDa)由bcr基因的断裂点决定。格列卫(甲磺酸伊马替尼，STI-571)是由诺瓦提斯公司开发并于2002年公布的第一个靶向抗癌试剂。格列卫通过抑制abl酪氨酸激酶能够选择性地抑制bcr/abl。格列卫通常作为CML的标准治疗药物，但是对格列卫的获得性耐药性逐渐成为严重的问题。导致获得性耐药的机制有多种，包括bcr/abl基因扩增、bcr/abl基因减少，以及bcr/abl基因点突变。其中诱发获得性格列卫-耐药性的最重要的因素是abl激酶区域内的T315I-bcr/abl靶基因点突变。人们正在努力进行多种克服格列卫耐药性的工作。近期发布的药物例如尼罗替尼和达沙替尼有效地抑制由格列卫耐药引起的abl激酶区域的许多点突变。然而，尼罗替尼和达沙替尼无法抑制T315I-bcr/abl突变种。因此，人们在大量尝试开发一种抑制T315I-bcr/abl突变的药物。血管内皮生长因子(VEGF)调节内皮细胞的大量生物过程，如细胞存活、增殖、分化、血管生成和迁移。VEGF主要由血管内皮的、造血的基质细胞在对低氧响应时或受到生长因子(如TGF、PDGF或白介素)刺激时产的。VEGF结合至它们的高亲和性特异性受体VEGFR上(VEGFR-1、-2和-3)。每种VEGF亚型结合于这些受体的特定亚单位上，致使形成受体同质二聚体和异质二聚体，其激活分散的信号通路并执行其生物功能，如血管生成[Cébe-Suarez S,
Figure BDA0001232664340000022
A,Ballmer-Hofer K.Cell Mol Life Sci.2006Mar；63(5):601-15]。血管生成为肿瘤提供营养、氧以及癌细胞扩散的通道。因此，血管生成对于癌细胞的增殖和扩散非常重要。血管生成在正常人体内通过血管生成刺激与抑制共同调节来平衡。然而，在失衡的癌细胞内，VEGFR被对血管内皮细胞具有巨大影响的生长因子(例如VEGF)激活[Ann Hoeben,Bart Landuyt,Martin S.Highley,Hans Wildiers,Allan T.Van Oosterom和Ernst A.De Bruijn.Pharmacological Reviews.2004卷56(4):549-580]。各种VEGF受体酪氨酸激酶抑制剂(合成的小分子)正在被开发，这些小分子抑制剂的大部分能被用于实体肿瘤，抑制仅在癌细胞中激活的血管生成，并且具有巨大的药物作用和相当低的副作用。
发明概述
本发明涉及具有蛋白激酶抑制活性的化合物，其对于治疗异常细胞生长疾病(例如癌症患者中的肿瘤)是有价值的药物活性化合物。
一方面，本发明涉及式I的化合物或其药学可接受的盐、异构体、水合物和溶剂合物。
Figure BDA0001232664340000021
其中，
环A是含有1-2个选自O、N和S的杂原子的4至8元的杂环，含有1-3个选自O、N和S的杂原子的5至10元的杂芳环，或6至12元的芳环，其中所述杂环、杂芳环及芳环任选和独立地被(R2)m取代；
R2独立地是氢、卤素、CN、CH2CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OR、SR、NRaS(O)2Rb、(CR2)v-S(O)pRc、C(O)ORc、NRaC(O)Rd、NRaC(O)ORd、NReRf或(CRg 2)t-S(O)2Rc；
R1是芳基、杂芳基、杂环、烷基或环烷基，其中芳基、芳杂基、杂环、烷基和环烷基任选及独立地被以下基团取代：卤素、CN、CH2CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OR、SR、NRaS(O)2Rb、(CR2)v-S(O)pRc、C(O)ORc、NRaC(O)Rd、NRaC(O)ORd、NReRf、(CRg 2)t-S(O)2Rc、芳基、杂环基或杂芳基；
每个Ra独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C10环烷基、杂芳基或芳基，其中所述烷基、环烷基、杂芳基和芳基任选及独立地被芳基、杂芳基或杂环基取代；
每个Rb独立地是C1-C6烷基、C3-C10环烷基或芳基，其中所述烷基、环烷基和芳基任选及独立地被1-3个选自C3-C10环烷基和卤素取代基的基团取代；
每个Rc独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C10环烷基、杂芳基或芳基，其中所述烷基、环烷基、杂芳基和芳基任选及独立地被芳基、杂芳基或杂环基取代；
每个Rd独立地是氢、C1-C6烷基或芳基，其中所述烷基和芳基任选及独立地被1-3个卤素取代基取代；
每个Re和Rf独立地是C1-C6烷基或含有1-2个独立地选自O、S或N的杂原子的4至8元的杂环，其中所述杂环和烷基任选及独立地被1-4个选自卤素和烷基的基团取代；
每个Rg独立地是氢、F、C1-C6烷基、芳基或CF3，其中所述烷基和芳基任选及独立地被1-3个选自芳基、CF3及卤素取代基的基团取代；
每个R独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C10环烷基，其中所述烷基和环烷基任选及独立地被1-4个卤素取代基取代；
m是0、1、2或3；
v是0、1、2或3；
p是0、1或2；
t是0、1、2或3；并且
G选自：
Figure BDA0001232664340000031
Figure BDA0001232664340000041
其中，
R3独立地是氢、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、(CH2)k-(5或6元)芳杂基或(CH2)k-(5或6元)杂环，其中，所述杂芳基、杂环基、烷基和环烷基独立和任选地被卤素、CN、CH2CN、CF3、OCF3、NH2、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OR、SR、NRaS(O)2Rb、(CR2)v-S(O)pRc、C(O)ORc、NReRf、(CRg 2)t-S(O)2Rc、NRaC(O)Rd、NRaC(O)ORd、芳基、杂环基或芳杂基取代；
R6独立地是卤素、CN、CH2CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OR、SR、NRaS(O)2Rb、(CR2)v-S(O)pRc、C(O)ORc、NRaC(O)Rd、NRaC(O)ORd、NReRf或(CRg 2)t-S(O)2Rc；
X是NH或O；
Y是CH或N；
Z、D、E和Q独立地是CH或N；
k是0、1、2或3；
n是0、1、2或3；
q是1或2；并且
u是0、1、2或3。
在进一方面，本发明提供了包含至少一种式I所示的化合物或其盐、水合物、异构体或溶剂合物及一种或多种药学可接受的载体和/或添加剂的药物组合物。
在进一方面，本发明提供一种用于抑制蛋白激酶的方法，包括向有需要的患者施用治疗有效量的式I的化合物或其盐、水合物、异构体或溶剂合物。
在更进一方面，本发明提供了一种对于有需要的人类患者的癌症治疗方法，包括施用治疗有效量的式I所示的化合物或其盐、水合物、异构体或溶剂合物。
在更进一方面，本发明提供了一种对于有需要的人类患者的炎症治疗方法，包括施用治疗有效量的式I所示的化合物或其盐、水合物、异构体或溶剂合物。
在更进一方面，本发明提供一种式I的化合物或其盐、水合物、异构体或溶剂合物在制备治疗癌症或炎症的药物中的用途。
在又一方面，本发明提供具有绝对构型R或S的式VIII的化合物或其药学可接受的盐、水合物和溶剂合物：
Figure BDA0001232664340000051
其中，
R1选自：
Figure BDA0001232664340000052
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
Figure BDA0001232664340000053
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯基或苄基；
R6独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；n是0、1或2；w是0、1或2；s是0、1或2；u是0、1或2；且q是1或2。
在进一方面，具有绝对构型R或者S的化合物由式VIIIa、VIIIb或VIIIc所示：
Figure BDA0001232664340000061
Figure BDA0001232664340000071
在更进一方面，根据式VIIIa、式VIIIb或者VIIIc，其中R2是氢、CH3、F或Cl；R3是
Figure BDA0001232664340000072
R5是环丙基、环丁基或异丙基；R6是氢或CF3；且s是0，u是0，m是0或1，n是1，q是1。
特别地，具有绝对构型R或者S的式VIII的化合物为：
(R)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺；
(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺；
(R)-3-(2-(2-(环丙胺基)嘧啶-5-基)乙炔基)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-4-甲基苯甲酰胺；
(S)-3-(2-(2-(环丙胺基)嘧啶-5-基)乙炔基)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-4-甲基苯甲酰胺；
(R)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氯苯甲酰胺；或者
(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氯苯甲酰胺；
(R)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氟苯甲酰胺；
(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氟苯甲酰胺。
在进一方面，本发明提供了包含至少一种具有绝对构型R或者S的式VIII化合物，或其盐、水合物或溶剂合物，及一种或多种药学可接受的载体和/或添加剂的药物组合物。
在进一方面，本发明提供一种用于抑制蛋白激酶的方法，包括向有需要的患者施用治疗有效量的具有绝对构型R或者S的式VIII的化合物或其盐、水合物或溶剂合物。
所述蛋白激酶可选自由Bcr-Abl、c-Kit、c-Src、FGFR1、FLT3、LYN和PDGFR组成的组；尤其是Bcr-Able(T315I)。
在更进一方面，本发明提供了一种对有需要的人类患者的癌症的治疗方法，包括施用治疗有效量的具有绝对构型R或者S的式VIII的化合物，或其盐、水合物或溶剂合物。
所述癌症可选自由慢性粒细胞白血病(CML)、急性淋巴性白血病(ALL)、非小细胞肺癌(NSCLC)、胃肠基质肿瘤(GIST)和急性粒细胞白血病(AML)组成的组；尤其是CML。
在更进一方面，本发明提供了一种对有需要的人类患者的炎症的治疗方法，包括施用治疗有效量的具有绝对构型R或者S的式VIII的化合物或其盐、水合物、异构体或溶剂合物。
所述炎症可选自由哮喘和类风湿性关节炎所组成的组。
在更进一方面，本发明提供一种具有绝对构型R或者S的式VIII的化合物或其盐、水合物或溶剂合物在制备治疗癌症或炎症的药物中的用途。
所述癌症可选自由慢性粒细胞白血病(CML)、急性淋巴性白血病(ALL)、非小细胞肺癌(NSCLC)、胃肠基质肿瘤(GIST)和急性粒细胞白血病(AML)组成的组。所述炎症可选自由哮喘和类风湿性关节炎所组成的组。
附图说明
图1：示出了通过使用手性柱的SFC方法分离化合物36的光学异构体的图谱。
图2：示出了化合物HA-6-13-1的实验ECD谱，及光学异构体ZDF2a和ZDF2b的计算ECD谱。
图3：示出了制备的(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺(即化合物36-(S))、HAP-71-p1和HAP-71-p2的ECD谱。
图4：示出了制备的(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺(即化合物36-(S))的手性柱结果。
图5：示出了通过使用手性柱的SFC方法分离化合物37的光学异构体的图谱。
图6：示出了通过使用手性柱的SFC方法分离化合物38的光学异构体的图谱。
图7：示出了通过使用手性柱的SFC方法分离化合物39的光学异构体的图谱。
图8：示出了以BCR-ABL抑制剂处理时的肿瘤体积(A)和体重(B)。
发明详述
本发明的一方面在于提供上文示出和表述的根据式I的新化合物。特别地，本发明的化合物是蛋白激酶抑制剂。因此，本发明提供根据式I的化合物及其药学可接受的盐、水合物、异构体或溶剂合物。以下段落将提供式I中的变量的值和特定值。
在一个实施方案中，R1独立地是芳基或杂芳环，选自：
Figure BDA0001232664340000091
其中，
R4独立地是氢、卤素、CN、CH2CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OR、SR、NRaS(O)2Rb、(CR2)v-S(O)pRc、C(O)ORc、NRaC(O)Rd、NRaC(O)ORd、NReRf、或(CRg 2)t-S(O)2Rc；
R5是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯基或苄基；并且
s是0、1或2。
在式I化合物的实施方案中，G是
Figure BDA0001232664340000101
具有下述式II结构，且所有其它变量如前述式I中所定义。
在另一个式II化合物的实施方案中，环A是苯环，具有下述式III的结构：
Figure BDA0001232664340000103
其中，
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基，C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
Figure BDA0001232664340000104
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基,苯基或苄基；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
n是0、1或2；
w是0、1或2；并且
s是0、1或2，
并且所有其它变量如前述式II中所定义。
在另一个式III化合物的实施方案中，化合物由式IIIa、式IIIb或式IIIc所示：
Figure BDA0001232664340000111
其中，
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
Figure BDA0001232664340000122
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基，C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯基或苄基；
R6独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
w是0、1或2；
s是0、1或2；并且
u是0、1或2，
并且所有其它变量如前述式I中所定义。
在另一个式IIIa-IIIc化合物的实施方案中，R2是氢、CH3或Cl；R3是
Figure BDA0001232664340000131
R5是环丙基、环丁基或异丙基；并且R6是氢或CF3；并且u是0、s是0，而且m是0或1。
在另一个式I化合物的实施方案中，G是
Figure BDA0001232664340000132
具有如下式IV结构，并且所有其它变量如前述式I中所定义。
Figure BDA0001232664340000133
在另一个式IV化合物的实施方案中，环A是苯环，具有下述式V的结构：
其中，
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
Figure BDA0001232664340000135
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯基或苄基；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
n是0、1或2；
w是0、1或2；并且
s是0、1或2,
并且所有其它变量如前述式IV中所定义。
在另一个式V化合物的实施方案中，化合物由式Va或式Vb所示：
Figure BDA0001232664340000141
其中，
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
Figure BDA0001232664340000151
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢，C1-C6烷基、C3-C6环烷基,苯基或苄基；
R6独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3,或NHCOCH2CH3；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
w是0、1或2；
s是0、1或2；
并且所有其它变量如前述式I中所定义。
在另一个式Va-Vb化合物的实施方案中，R2是氢、CH3或氯；R3是
Figure BDA0001232664340000152
R5是环丙基、环丁基或异丙基；R6是氢或CF3；并且s是0、w是1，并且m是0或1。
在另一个式IV化合物的实施方案中，环A是杂环基，具有下述式VI的结构：
Figure BDA0001232664340000154
其中，
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
Figure BDA0001232664340000161
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基，苯基或苄基；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
n是0、1或2；
w是0、1或2；
s是0、1或2；并且
q是1或2；
并且所有其它变量如前述式IV中所定义。
在另一个式VI化合物的实施方案中，化合物由式VIa所示：
Figure BDA0001232664340000162
其中，
q是1或2；n是0、1或2；并且所有其它变量如前述式IIIa-IIIc中所定义。
在另一个式VIa化合物的实施方案中，R2是氢；R3是
Figure BDA0001232664340000172
R6是氢或CF3；并且s是0、w是1、m是0，并且n是1。
在另一个式I化合物的实施方案中，G是具有下述式VII的结构：
其中，
R6独立地是卤素、CN、CH2CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OR、SR、NRaS(O)2Rb、(CR2)v-S(O)pRc、C(O)ORc、NRaC(O)Rd、NRaC(O)ORd、NReRf或(CRg 2)t-S(O)2Rc；
u是0、1、2或3；
q是1或2；
并且所有其它变量如前述式I中所定义。
在另一个式VII化合物的实施方案中，环A是苯基，具有下述式VIII的结构：
Figure BDA0001232664340000175
其中，
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯基或苄基；
R6独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
n是0、1或2；
w是0、1或2；
s是0、1或2；
u是0、1或2；并且
q是1或2，
并且所有其它变量如前述式VII中所定义。
优选地，所述式VIII的化合物具有绝对构型R或S，其中手性碳位于连接R3的茚满基上。更优选地，式VIII化合物具有绝对构型S。
在另一个式VIII化合物的实施方案中，化合物由式VIIIa、式VIIIb或式VIIIc所示：
Figure BDA0001232664340000182
Figure BDA0001232664340000191
其中，
所有其它变量如前述式VIII中所定义。
在另一个式VIIIa-VIIIc化合物的实施方案中，R2是氢、CH3或氯；R3是
Figure BDA0001232664340000192
Figure BDA0001232664340000193
R5是环丙基、环丁基或异丙基；R6是氢或CF3；并且s是0、q是1、u是0、m是0或1，并且n是1。
在另一个式I化合物的实施方案中，G是
Figure BDA0001232664340000201
具有下述式IX的结构，其中u＝0、1或2；并且所有其它变量如前述式VII中所定义。
式VIIIa、VIIIb或者VIIIc的化合物优选具有绝对构型R或S，其中手性碳位于连接R3的茚满基上；更优选地，式VIII化合物具有绝对构型S。
根据优选的实施方案，具有绝对构型R或S的式VIIIa、VIIIb或者VIIIc中，R2是氢、CH3、F或Cl；R3是
Figure BDA0001232664340000202
R5是环丙基、环丁基或异丙基；R6是H或CF3，并且s是0、u是0，m是0或1，n是1，并且q是1。
Figure BDA0001232664340000203
在另一个式IX化合物的实施方案中，环A是苯基，具有下述式X的结构：
Figure BDA0001232664340000204
其中，
R2独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
Figure BDA0001232664340000211
R4独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、苯基或苄基；
R6独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3、COOCH3或NHCOCH2CH3；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R8独立地是氢、卤素、CN、NO2、CF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
n是0、1或2；
w是0、1或2；
s是0、1或2；
u是0、1或2；并且
q是1或2；
并且所有其它变量如前述式VII中的定义。
在另一个式X化合物的实施方案中，化合物由式Xa、式Xb或式Xc所示：
Figure BDA0001232664340000212
Figure BDA0001232664340000221
其中，
u是0、1或2；
q是1或2；
n是0、1或2；
并且所有其它变量如前述式IIIa-IIIc中所定义。
本发明化合物的一些具体实例包括：
Figure BDA0001232664340000222
Figure BDA0001232664340000231
Figure BDA0001232664340000241
Figure BDA0001232664340000251
Figure BDA0001232664340000271
Figure BDA0001232664340000281
Figure BDA0001232664340000291
Figure BDA0001232664340000301
除非另有定义，本发明中所述的“烷基”包括具有特定碳原子数目的支链的和直链的饱和脂肪烃基。贯穿本申请烷基基团使用常用缩略语，例如，甲基可用惯用缩写表示，包括“Me”或CH3或是符号(未限定端基的延长键)(例如
Figure BDA0001232664340000311
)表示，乙基用“Et”或CH2CH3表示，丙基用“Pr”或CH2CH2CH3表示，丁基用“Bu”或CH2CH2CH2CH3表示等等。“C1-6烷基”(或“C1-C6烷基”)指具有特定碳原子数目的支链或直链烷基，包括所有的异构体。C1-6烷基包括所有的己基烷基和戊基烷基异构体，还包括正丁基、异丁基和叔丁基、正丙基和异丙基、乙基、甲基。如果没有给出支链和直链烷基的碳原子数目，其可以是1-10个碳原子。C1-6烷基可以无取代基或被1-3个氟或1-3个氯原子取代。
“环烷基”指不包含杂原子的C3-10碳环。例如，环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、十氢萘基等。
“芳基”是指包含6-12个碳原子的单环或双环芳香环。芳基的实例包括但不限于苯基、萘基、茚基等等。芳基还包括稠合至芳基的单环。实例包括四氢萘基和茚满基等。
除非另有说明，“杂环基”指含有1-2个选自N、O和S的杂原子的四元、五元、六元、七元或八元饱和单环，其连接位点可以是碳或氮。“杂环基”的实例包括但不限于哌啶基、哌嗪基、吗啉基、氮杂啶基(azetidinyl)、吡咯烷基、噁唑烷基、咪唑烷基、2,3-二氢呋喃并(2,3-b)吡啶基、苯并噁嗪基等。术语杂环基还包括非芳香的部分不饱和单环，例如，通过氮连接的2-或4-吡啶酮或N取代的(1H,3H)-嘧啶-2,4-二酮基(N-取代的尿嘧啶)。杂环基还可包括带有电荷形式的部分，如哌啶鎓盐(piperidnium)等。
“杂芳基”指含有5-10个原子和含有1-3个选自N、O、和S的杂原子的单环或双环芳香环或环系统。实例包括但不限于噁二唑基、噻二唑基、吡咯基、呋喃基、三嗪基、噻吩基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、异噁唑基、三唑基、异噻唑基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、噁唑基、噻唑基、四唑基等等。杂芳基还可包括稠合至非芳香或部分芳香的杂环的芳香杂环基团，和稠合至环烷基环的芳香杂环基团。杂芳基其它实例包括但不限于咪唑并吡啶基、咪唑并哒嗪基、吡唑并吡唑基、吲唑基、噻吩并吡唑基、吡唑并吡啶基和咪唑并噻唑基。杂芳基还包括带电荷形式的基团，如吡啶鎓盐。在一个实施方案中，杂芳基是咪唑基、噁二唑基、吡唑基、噁唑基和吡啶基。
除非另有说明，“杂环烷基”包括连接至如上所述的杂环基的碳原子或氮原子上的支链或直链饱和脂肪烃基。
“卤素(或卤)”包括氟、氯、溴和碘。在一个实施方案中，卤素是氯或氟。
由指定取代基的取代可位于环(如芳环、杂芳环或饱和杂环)的任意原子上，只要这种环取代是化学允许的并产生稳定的化合物。“稳定”化合物可以被制备和分离，而保持其结构和性能或者其结构和性能在一段时间里保持基本不变，使得能将所述化合物用于上述目的。
本发明使用标准命名法，首先命名指定的侧链的端基部分，然后是与连接点相邻的官能团。例如，C1-5烷基COOR等同于C1-5烷基
Figure BDA0001232664340000321
当任何变量(例如R、Rx等)在任何组分或式中出现超过一次，则其每次出现的定义独立于它其它每次出现时的定义。此外，允许取代基和/或变量的组合，只要这种组合产生稳定的化合物。
本领域普通技术人员在选择本发明化合物时，将认识到各种取代基(即，R1、R2、R等)的选择符合化合物结构的连接和稳定性的一般规则。
使用术语“取代的”以包括指定取代基的多取代度。当要求保护多个取代基时，被取代的化合物可以独立地被一个或多个公开的取代基取代。独立地取代是指(两个或更多个)取代基可以相同或不同。
当取代基或变量具有多重限定时，取代基或变量被定义为选自由指定的限定组成的组。
异构体：(光学异构体、非对映异构体、互变异构体、阻转异构体、几何异构体)：
结构为式(I)的化合物可以包括一个或多个手性中心，并可以产生外消旋混合物、单一对映异构体、非对映异构体混合物和单一非对映异构体。本发明包含了所有可用的由式(I)所涵盖化合物的这样的异构形式。
结构为式(I)的化合物可以通过在合适的溶剂中分步结晶或用光学活性固定相进行手性色谱分离为它们各自的对映异构体或非对映异构体。绝对构型可以通过结晶产品或中间体的X-射线晶体衍射确定，或从销售商提供的手性原料的手性确定。
式(I)化合物的立体异构体可以通过使用光学纯的原料或已知绝对构型的试剂进行立体选择性合成来获得。
化合物的外消旋混合物可以通过本领域公知的方法分离，例如，手性色谱、分步结晶、将化合物的外消旋混合物与纯光学异构化合物进行偶联构成非对映异构体混合物，再通过色谱分离各自的非对映异构体。偶联反应可以是使用纯光学异构的酸或碱生成盐。然后可以通过去除手性添加剂将非对映异构体衍生物转变成其纯的光学异构体。
本发明中的一些化合物可以作为互变异构体存在，它们具有不同的氢连接点和与之伴随的一个或多个双键转移。例如，酮和它的烯醇形式是酮-烯醇互变异构体。本发明的化合物包括各个互变异构体及其混合物。
除非另有说明，就含有烯烃双键的本文所述的化合物而言，它们包括E和Z烯烃异构型。
式I涵盖化合物的所有阻转异构体，若可适用，则均包含于本发明中。阻转异构体是由单键的受阻旋转产生的立体异构体，其中空间应力壁垒足够大，使得能够分离出稳定的构象异构体。阻转异构体可以通过手性分离方法如手性色谱或选择性结晶进行分离。
在式I化合物中，原子可以存在其天然同位素。可替代选择地，可人工富集一个或多个原子的特定同位素，这样的同位素具有相同的原子数，但原子质量不同于其天然中占优势的原子质量。本发明包含了所有式I所示化合物的适合的同位素异构体。例如，氢(H)的不同同位素形式包括氕(1H)和氘(2H，也表示为D)。富集氘可取得一定的治疗优势，例如，增加代谢稳定性和体内半衰期或降低所需剂量，或者可提供用作生物样品表征的标准物。具有式(I)结构的同位素富集的化合物可以由常规技术制备。
本发明包含式I化合物的所有比例的所有立体异构形式(如上文所述)。
盐：
结构为式I的化合物还涵盖了其药学可接受的盐，以及作为游离化合物的前体时药学不可接受的盐或它们的药学可接受的盐或盐的转化形式。
本发明中的化合物可以药学可接受的盐的形式给药。术语“药学可接受的盐”指从药学可接受的包括有机或无机酸或碱的酸或碱制备的盐。碱性化合物的药学可接受的盐指通常由游离碱和合适的有机或无机酸混合制备的本发明化合物的无毒盐。本发明的碱性化合物的代表性的盐包括但不限于以下化合物：醋酸盐、抗坏血酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、右旋樟脑磺酸盐、碳酸盐、盐酸盐、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二烷基硫酸盐(estolate)、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、对羟乙酰胺基苯胂酸、己基间苯二酚盐、海巴明(hydrabamine)盐、氢溴酸盐、盐酸盐、碘酸盐、羟萘甲酸盐、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月硅酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴酸盐、甲基硝酸盐、甲基硫酸盐、甲磺酸盐、半乳糖二酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、N-甲基葡糖胺铵盐、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、硫酸盐、次醋酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐、三乙基碘、戊酸盐等等。由本发明中式I涵盖的酸形成的合适的药学可接受的盐包括但不限于由无机碱形成的盐，所述无机碱包括铝、铵、钙、铜、铁、亚铁、锂、镁、锰、钾、钠、锌等。用于形成盐的药学可接受的有机无毒碱包括：伯胺、仲胺、叔胺、环状胺、二环己基胺、碱性离子交换树脂，如精氨酸、内铵盐、咖啡因、胆碱、N,N-二苄基乙二胺、二乙基胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、海巴明、异丙胺、赖氨酸、葡甲胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚氨酯、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。
本发明化合物如果有羧基(-COOH)或羟基，可使用其药学可接受的羧酸酯衍生物例如甲酯、乙酯、新戊酰甲酯或醇的酰基衍生物例如O-乙酰基、O-新戊酰基、O-苯甲酰基、O-氨酰基。包括用于修饰缓释或前药剂型的溶解性或水解特性的本领域公知的酯和酰基基团。
如果式I化合物同时具有本发明的酸性和碱性基团，则可以由本领域技术人员所知的常规方法得到内盐或内铵盐(两性离子)。例如，一个化合物可以和一种有机或无机酸或碱在溶剂或分散剂中结合，或通过阴离子或阳离子与其他盐交换得到。本发明还涵盖如式I化合物的所有形式的盐，这些盐可能是药学上不可接受的但可以用来制备生理学上可接受的盐。
本发明还包括式I化合物的溶剂合物和水合物。
本发明中还公开了合成式I化合物的方法，其如下文所述。
本发明令人感兴趣的一方面涉及用于人类治疗方法中的式I所示的化合物或其药学可接受的盐、水合物、异构体或溶剂合物。
本发明的另一方面涉及作为人类抗癌药物的式I所示的化合物或其药学可接受的盐、水合物、异构体或溶剂合物，其中所述癌症包含但不限于慢性粒细胞白血病(CML)和急性淋巴性白血病(ALL)。
本发明令人感兴趣的另一方面涉及一种在有需要的人类患者上治疗炎症的方法，这样的治疗包括施用治疗有效量的式I的化合物或其药学可接受的盐、水合物、异构体或溶剂合物。
本发明还涉及药物制剂或药物组合物，其包括至少一种有效治疗剂量的式I的化合物和/或其生理上可接受的盐、水合物、异构体或溶剂合物作为活性成分，以及一种或多种药学可接受的载体物质和/或添加剂。
基于本发明的药物组合物可以口服给药(例如，以丸剂、片剂、颗粒剂、硬和软明胶胶囊、包衣剂、糖衣片、水剂、糖浆剂、酒精或油溶液、乳剂、混悬剂等的形式)；直肠给药(如栓剂)；肠胃外给药；皮下给药；肌内注射或静脉注射(注射剂或输液)；经皮给药或局部给药(如软膏剂、酊剂、喷雾剂或透皮给药体系)；或者吸入给药(如鼻用喷雾或气雾剂、微胶囊、植入剂或埋棒)。优选给药形式取决于待治疗疾病的进展和严重程度。
式I化合物及其生理上可接受的盐、水合物、异构体或溶剂合物可以药物本身、在混合物中和其他形式一起，或与其他药物制剂混合施用于动物，尤其是人。治疗有效的量是指能够引起组织、系统、动物或人的生物学或医学反应的药物或药物制剂的量。
本发明中式I的活性化合物和/或其生理上可接受的盐、水合物、异构体或溶剂合物在药物制剂中的量通常为为单剂量1-2000毫克，优选1-500毫克，但可以根据药物制剂的类型适当增加。在药物制剂中通常含按重量计0.5％-90％的式I的化合物或其生理上可接受的盐。式I的化合物或其生理上可接受的盐中的一种或多种化合物与一种或多种固体或液体载体和/或添加剂(或辅料)，如果需要还与其他具有治疗作用的药物活性物质，配置于合适的制剂中，而后可被用于人或动物健康的药物。。
为了制作丸剂、片剂、糖衣片剂和硬质明胶胶囊，可使用乳糖和淀粉，例如，玉米淀粉、淀粉衍生物、滑石粉、硬脂酸或硬脂酸盐等等。用于制造软质明胶胶囊和栓剂的载体包括脂肪、石蜡、半固态物质、液体多元醇、天然或凝固油类等。用于制备如注射剂、乳剂或糖浆剂等液体制剂的合适载体，包括例如水、生理盐水、醇类如乙醇、甘油、多元醇、蔗糖、甘露醇、植物油、转化糖、葡萄糖等。式I化合物或其生理上可接受的盐可以制成冻干粉，其可用于制备注射剂或输液。用于制备微胶囊、植入剂或埋棒的合适载体例如有乳酸和羟基乙酸的共聚物。
除了活性化合物和载体，药物制剂还可以含有常规添加剂，例如，香料、缓冲物质、填料、稀释剂、崩解剂、分散剂、粘合剂、着色剂、调味剂、乳化剂、润滑剂、防腐剂、稳定剂、增稠剂、甜味剂、湿润剂、溶剂、增溶剂、用于长效制剂的物质、用于转变渗透压的盐、包衣剂或抗氧化剂。
待施用的式I活性化合物和/或其生理上可接受的盐的剂量取决于不同的个体，例如，待治疗疾病的性质和严重程度、性别、年龄、体重、待治疗人或动物的个体响应能力、所用化合物的药效和作用时间，治疗是急性、慢性或预防性的，或者是否施用了式I化合物以外的其他化合物。通常，对于成人要获得理想治疗效果一日剂量约为0.01-100毫克/公斤，优选0.3-10毫克/公斤(每例中毫克/公斤体重)。每日剂量可以是单剂量或多剂量。
上述化合物还与其他药学活性化合物联合使用。其他活性化合物可以与本发明中的化合物联合使用，可以是联合用药或组成复方制剂，其他活性化合物包括但不限于抗癌烷化剂或嵌合剂、抗代谢物、嘌呤或嘧啶拮抗剂、纺锤体抑制剂、鬼臼毒素、抗生素、亚硝基脲、无机离子、酶、激素、mTOR抑制剂、蛋白酶抑制剂、NF-kB抑制剂、其他激酶抑制剂(例如，Src、Brc/Abl、kdr、Flt3、Aurora、GSK-3、EGFR、VEGFR、FGFR、JNK、PKC、CDKs、Syk、JAK、PDGFR、cMET、MEK、AKT、PI3K、c-kit、fit-3、IGFR、ErbB2等等)、抗体、可溶受体或其他抗癌症中涉及的受体或激素的受体拮抗剂等。
可与式I化合物联合使用，以及分别给药或在在相同药物组合物中给药的的其他活性成分的实例包括但不限于：
氮芥、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、美法仑、异环磷酰胺、甲氨蝶呤、6-巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶、阿糖孢苷、吉西他滨、长春花碱、长春新碱、长春瑞滨、紫杉醇、依托泊苷、伊立替康、拓扑替康、阿霉素、博来霉素、丝裂霉素、卡莫司汀、洛莫司汀、顺铂、卡铂、奥沙利铂、天冬酰胺酶、他莫昔芬、亮丙瑞林、氟他胺、甲地孕酮、西罗莫司、特癌适、依维莫司、AP23573、万珂、易瑞沙、特罗凯、赫塞汀、阿瓦斯丁、爱必妥、别嘌呤醇、阿仑单抗、六甲蜜胺、阿米福汀、阿纳托唑、MLN-591、MLN591RL、MLN2704、三氧化二砷、蓓萨罗丁、白消安、卡培他滨、卡莫司汀植入膜剂、塞来昔布、苯丁酸氮芥、顺铂-肾上腺素凝胶、克拉屈滨、阿糖胞苷脂质体、柔红霉素脂质体、柔红霉素、右雷佐生、多西他赛、阿霉素、Elliott氏B溶液、表柔比星、雌莫司汀、依托泊苷磷酸盐、依托泊苷、依西美坦、氟达拉滨、氟维司群、吉妥单抗、戈舍瑞林醋酸盐、羟基脲、伊达比星、甲磺酸伊马替尼、伊立替康、MLN576、来曲唑、亚叶酸、左旋咪唑、美法仑、左旋苯丙氨酸氮芥、美司钠、丝裂霉素C、米托蒽醌、甲氧沙林、MLN518、MLN608、米托蒽醌、美罗华、滑石粉、替莫唑胺、替尼泊苷、VM-26、培加酶、喷司他丁、卟吩姆钠、2C4、维甲酸、反式维甲酸、戊柔比星、帕米膦酸钠、唑来磷酸。
此外，令人感兴趣的本发明为用于抑制蛋白激酶的方法，包含施用上述治疗有效量的式I的化合物或其盐、水合物、异构体或溶剂合物，或者药物组合物。上述蛋白激酶包括但不限于Bcr-Abl。
根据下文提供的一般方案，并考虑提供的具体实施例合成式I的化合物。优选的方法包含但不限于以下描述。除非另有提及，方案和实施例中所使用的缩略语以下述含义使用：
Ac是醋酸盐，或乙酰基；
aq是水溶液；
AIBN：2,2'-偶氮双(2-甲丙腈)；
Ar是芳基；
Bn是苄基；
Boc是叔丁氧羰基；
Br是宽的；
Bu是丁基；
tBu是叔丁基；
celite是
Figure BDA0001232664340000371
硅藻土；
cPr是环丙基；
DCM是二氯甲烷；
DIPEA是N,N-二异丙基乙胺；
DMAP是4-二甲氨基吡啶；
DMF是N,N-二甲基甲酰胺；
DMSO是二甲基亚砜；
EDCI是N-(3-二甲氨基丙基)-N’-乙基碳化二亚胺盐酸盐；
EDTA是乙二胺四乙酸；
ES-MS是电喷射离子质谱；
Et是乙基；
Et3N是三乙胺
Et2O是二乙醚；
EtOH是乙醇；
EtOAc是乙酸乙酯；
Halo是卤素(优选氟和氯)；
HetAr或HAR是杂芳基；
1HNMR是核磁共振H谱；
HOBt是1-羟基苯并三氮唑；
HPLC是高效液相色谱；
Hz是赫兹；
i是异；
kg是公斤；
LC/MS是液相色谱/质谱；
M是摩尔；
Me是甲基；
μg是微克；
MeCN是乙腈；
MeOH是甲醇；
MHz是兆赫；
mm是毫米；
μL是微升；
mM是毫摩尔每升μM是微摩尔每升；MS是质谱，通过ES-MS所得质谱可以用“ES”表示；
mw是微波；
m/z是质核比；
n是正常的；
NBS是N-溴代丁二酰亚胺；
nm是纳米；
nPr是正丙基；
p是对位；
PE是石油醚；
Ph是苯基；
Pr是丙基；
rt是室温；
sec是仲；
tBu是叔丁基；
tBuOH是叔丁醇；
tert是叔；
TBAF是四丁基氟化铵；
TFA是三氟乙酸；
THF是四氢呋喃；
TLC是薄层色谱；
TMSA是三甲基硅基乙炔；
U是单位；
UV是紫外；
方案
反应方案1-12描述了合成式I化合物中所采用的方法。除非另有说明，所有的缩略语都如上文所定义。在所述方案中，除非另有说明，所有的取代基都如式I中所定义的。
在以下方案和实施例中说明了用于制备本发明化合物的合成方法。起始原料是可商购的或可以依据本领域已知的或按本发明所述的方法制备。
方案1 苯并咪唑产物(1c)的制备
Figure BDA0001232664340000391
如方案1所示，使用钯催化的Sonogashira偶联反应得到终产物1c。在方案1中，Sonogashira偶联反应在炔基部分1a和已由存在的活性基团(W)活化的苯并咪唑部分1b进行，其中所述活性基团W是I、Br或另一种可以发生预期的偶联反应的活性基团。
下述方案2-4描述了几种基于已知转化方法的炔基部分的整体制备方法：
方案2 3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪(1a-1)的制备
Figure BDA0001232664340000392
方案3 5-乙炔基-N-环丙基嘧啶-2-胺(1a-2)的制备
Figure BDA0001232664340000401
方案4 6-乙炔基-N-取代哒嗪-2-胺(1a-3～1a-5)的制备
Figure BDA0001232664340000402
下面的方案5-6描述了式1b所示的一些代表性的苯并咪唑化合物的合成，其用作方案I所述的偶联反应的关键中间体。
方案5描述了式1b-1和1b-2的示例性合成，其中R3是(4-甲基哌嗪-1-基)甲基，R2分别是甲基和氯。
方案5
Figure BDA0001232664340000411
方案6描述了式1b-3的例证性合成，其中R3是4-甲基-1H-咪唑-1-基，R2是甲基。
方案6
Figure BDA0001232664340000421
方案7 苯甲酰胺产物(2c)的制备
Figure BDA0001232664340000422
如方案1，在方案7中，炔基部分1a与苯甲酰胺部分2b通过Sonogashira偶联反应缩合得到苯甲酰胺类似物2c。
以下方案8-10描述了式2b所示的一些代表性的苯甲酰胺类化合物的合成，其用作方案I所述的偶联反应的关键中间体的。
方案8和9描述了2b的合成，其中R3是4-甲基-1H-咪唑-1-基，R2分别是甲基和氯。一些代表性的中间体包括以下结构：
方案8
Figure BDA0001232664340000432
方案9
Figure BDA0001232664340000441
方案10描述了2b的合成，其中R3是(4-甲基哌嗪-1-基)甲基，R2分别是甲基或氯基团。
方案10
Figure BDA0001232664340000451
方案11 脲产物(3c)的制备
Figure BDA0001232664340000452
如方案11所示，含有乙酰部分的胺3a与取代的芳香胺部分3b缩合得到脲类似物3c。
方案12描述了一些代表性的式3a化合物的合成，其用作方案11所述缩合反应的中间体。方案8-10中描述2b-1～2b-6的合成时已描述了式3b芳香胺化合物的合成。
方案12
Figure BDA0001232664340000461
方案13 双环苯甲酰胺产物(4C)的制备
Figure BDA0001232664340000462
如方案1，在方案13中，炔基部分1a与苯甲酰胺部分4b通过Sonogashira偶联反应缩合得到苯甲酰胺类似物4c。
方案14描述了4b的合成，其中R3是(4-甲基哌嗪-1-基)甲基，R2是甲基。
方案14
Figure BDA0001232664340000471
实施例
以下代表性的实施例意在帮助说明本发明，而非意在也不应解释为限制本发明的范围。
实施例1
N-环丁基-6-(2-(2-甲基-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000472
步骤1. 6-溴-N-环丁基哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000481
向3,6-二溴哒嗪(1.19g，5mmol)于1,4-二氧六环(5mL)的溶液中，加入环丁胺(0.39g，5.5mmol)和三乙胺(0.60g，6mmol)。在90℃下采用150W微波反应0.45小时。用TLC监测反应，粗产物经硅胶色谱(流动相：含30％乙酸乙酯的正己烷)纯化以得到目标产物(0.63g，55.3％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.25-7.28(1H,d,J＝9.0Hz),6.49-6.52(1H,d,J＝9.0Hz),5.27(1H,s),4.16-4.24(1H,m),2.40-4.49(2H,m),1.87-1.95(2H,m),1.75-1.84(2H,m)。
步骤2.N-环丁基-6-(2-(三甲基硅基)乙炔基)哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000482
将6-溴-N-环丁基哒嗪-3-胺(0.60g，2.63mmol)、三甲基硅基乙炔(TMSA)(1.29g，13.1mmol)、Pd(PPh3)4(0.15g)和CuI(0.04mg)置于具橡胶塞的瓶中。将混合物用氩气进行3次真空/充气循环后，加入DMF(3.0mL)和N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)(0.41g，3.2mmol)。然后将混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，所得残余物经硅胶色谱(流动相：含30％乙酸乙酯的正己烷，乙酸乙酯中加入0.5％的三乙胺)纯化，以得到类白色固体(0.48g，74.5％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.26-7.29(1H,d,J＝9.0Hz),6.50-6.53(1H,d,J＝9.0Hz),5.55(1H,s),4.17-4.24(1H,m),2.40-2.46(2H,m),1.89-1.98(2H,m),1.77-1.85(2H,m),0.28(9H,s).
步骤3.N-环丁基-6-乙炔基哒嗪-3胺
Figure BDA0001232664340000483
向N-环丁基-6-(2-(三甲基硅基)乙炔基)哒嗪-3-胺(0.49g，2mmol)于二氯甲烷的溶液中，加入TBAF。用TLC监测反应。将反应混合物浓缩，所得残余物经硅胶色谱(流动相：含30％乙酸乙酯的正己烷，乙酸乙酯中加入0.5％的三乙胺)纯化，以得到类白色固体(0.26g，75.1％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.26-7.29(1H,d,J＝9.0Hz),6.51-6.54(1H,d,J＝9.0Hz),5.57(1H,s),4.17-4.24(1H,m),3.21(1H,s),2.40-2.46(2H,m),1.89-1.98(2H,m),1.77-1.85(2H,m).
步骤4.(3,4-二硝基苯基)-(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮
Figure BDA0001232664340000491
将3,4-二硝基苯甲酸(10.6g，50mmol)与SOCl2(50mL)的混合物加热回流6小时。然后将混合物真空蒸发至干。将残余物溶于CH2Cl2(50mL)，冷却至5℃。向该溶液中逐滴加入N-甲基哌嗪(5.5g，55mmol)和三乙胺(5.5g，55mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液。室温下搅拌过夜，用水(100mL)洗涤合并的有机相，于Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，所得残余物经硅胶色谱(流动相：含5％甲醇的二氯甲烷)纯化，以得到黄色固体(14.0g，95.2％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.29(1H,s),8.25-8.27(1H,d,J＝9.0Hz),7.95-7.98(1H,d,J＝9.0Hz),3.62(2H,m),3.28(2H,m),2.38(2H,m),2.26(2H,m),2.19(3H,s).
步骤5. 1-(3,4-二硝基苯基)-4-甲基哌嗪
Figure BDA0001232664340000492
向(3,4-二硝基苯基)-(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(5.88g，20mmol)于四氢呋喃的冷却溶液(-5℃)中，加入粉末NaBH4(1.89g，50mmol)，接着逐滴加入BF3·OEt2(6.4mL，50mmol)，同时保持温度低于5℃。使混合物在2小时内回至室温，然后于室温下额外搅拌3小时。然后向混合物中小心加入MeOH，继续搅拌10分钟，然后将混合物浓缩。将残余物分配于EtOAc(150mL)和饱和NaHCO3水溶液(150mL)。用水(100mL)和卤水(100mL)洗涤有机层，然后用Na2SO4干燥，过滤浓缩。残余物经硅胶色谱(流动相：含2％MeOH的CH2Cl2)纯化，得到黄色固体(4.5g，80.3％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.90-7.92(1H,d,J＝6.0Hz),7.90(1H,s),7.69-7.71(1H,d,J＝6.0Hz),3.73(2H,s),3.07-3.10(2H,m),2.94-2.99(2H,m),2.76-2.81(2H,m),2.67(3H,s),2.53-2.56(2H,m).
步骤6. 1-(3,4-二胺基苄基)-4-甲基哌嗪
将1-(3,4-二硝基苄基)-4-甲基哌嗪(2.8g，10mmol)溶于DMF:MeOH(1:1，20mL)中，在H2氛围中与10％Pd/C(280mg)搅拌12小时。通过TLC监测反应。然后将混合物过滤、蒸发得到黑色固体，其不经进一步纯化立即使用。
步骤7. 2-(3-碘-4-甲基苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑
Figure BDA0001232664340000502
将1-(3,4-二胺基苯基)-4-甲基哌嗪(10mmol)、3-碘-4-甲基苯甲酸(2.6g，10mmol)、EDCI(11mmol)和HOBt(11mmol)于干燥DMF(25mL)的混合物在室温下搅拌24小时。然后将混合物在真空下蒸发，将残余物溶于CH2Cl2(100mL)，用水(100mL)和卤水(100mL)洗涤，然后通过Na2SO4干燥，过滤浓缩。将所得残余物溶解于AcOH(30mL)，加热回流3小时。将反应混合物在真空下蒸发，残余物经硅胶色谱(流动相：含10％MeOH的CH2Cl2，MeOH中加入0.5％三乙胺)纯化得到黄色固体(1.35g，30.3％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.50(1H,s),7.94-7.97(1H,d,J＝9.0Hz),7.53-7.56(1H,d,J＝9.0Hz),7.52-7.55(1H,d,J＝9.0Hz),7.30(1H,s),7.20-7.23(1H,d,J＝9.0Hz),3.60(2H,s),2.54(8H,brs),2.45(3H,s),2.32(3H,s).
步骤8.N-环丁基-6-(2-(2-甲基-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)哒嗪-3-胺
将N-环丁基-6-乙炔基哒嗪-3-胺(62mg，0.36mmol)、2-(3-碘-4-甲基苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(134mg，0.3mmol)、Pd(PPh3)4(18mg，0.015mmol)、CuI(4.3mg，0.023mmol)置于具橡胶塞的双口瓶中。将混合物用氩气进行3次真空/充气循环后，将DIPEA(58mg，0.45mmol)和DMF(2.0mL)的溶液注入其瓶中。将混合物在室温下搅拌20小时，然后倾倒入25mL水中，用CH2Cl2萃取(20mL×3)，用卤水洗涤有机层，以Na2SO4干燥，过滤，真空蒸发滤液。残余物在硅胶上经色谱(CH2Cl2/CH3OH 97:3至97:6)纯化，得到0.12g粗产物，再经制备TLC(CH2Cl2/CH3OH 120:8)纯化得到87mg为浅黄色固体的产物。Mp:148-150℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.07-8.10(1H,d,J＝9.0Hz),7.90(1H,s),7.63-7.66(1H,d,J＝9.0Hz),7.63(1H,s),7.26-7.24(1H,d,J＝6.0Hz),7.20(1H,m),7.15(1H,m),6.60-6.63(1H,d,J＝9.0Hz),5.63(1H,s),4.26-4.33(1H,m),3.62(2H,s),2.58(8H,brs),2.35(3H,s),2.31(3H,s),1.94-2.03(2H,m),1.82-1.85(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C30H34N7的计算值:492.2870；测试值:492.2856。
实施例2
N-环丙基-6-(2-(2-甲基-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000511
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和2-(3-碘-4-甲基苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(按实施例1制备)合成标题化合物。按实施例1(步骤1至3)制备中间体化合物N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺，其光谱数据如下：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.38-7.41(1H,d,J＝9.0Hz),6.96-6.99(1H,d,J＝9.0Hz),5.99(1H,s),3.25-3.27(1H,m),2.57(1H,s),0.87-0.89(2H,s),0.61-0.63(2H,s).
得到为卡其色固体的标题化合物。Mp:145-146℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.14(1H,s),8.11-8.13(1H,d,J＝6.0Hz),7.64(2H,m),7.37-7.40(1H,d,J＝9.0Hz),7.21-7.24(1H,d,J＝9.0Hz),7.14-7.17(1H,d,J＝7.0Hz),7.01-7.04(1H,d,J＝9.0Hz),6.19(1H,s),3.67(2H,s),2.74(8H,brs),2.58(1H,m),2.50(3H,s),2.34(3H,s),0.84-0.87(2H,m),0.64(2H,m)；HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C29H32N7的计算值:478.2714；测试值:478.2708.
实施例3
3-(2-(2-甲基-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)咪唑并[1,2-b]哒嗪
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和2-(3-碘-4甲基苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(按实施例1制备)合成标题化合物。按实施例1(步骤1至3)制备中间体化合物3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪，其光谱数据如下：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.63-8.64(1H,m),8.18-8.21(1H,m),8.10(1H,s),7.32-7.35(1H,m),4.94(1H,s).
得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:114-115℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.46-8.48(1H,d,J＝6.0Hz),8.25(1H,s),8.15(1H,s),8.09-8.12(1H,d,J＝9.0Hz),7.96-7.99(1H,d,J＝9.0Hz),7.59(1H,s),7.35-7.37(1H,d,J＝9.0Hz),7.26(1H,s),7.22(1H,s),7.10-7.15(1H,m),3.64(2H,s),2.60(8H,brs),2.58(3H,s),2.34(3H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H28N7的计算值:462.2401；测试值:462.2413.
实施例4
N-异丙基-6-(2-(2-甲基-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000522
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和2-(3-碘-4甲基苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(按实施例1制备)合成标题化合物。按实施例1(步骤1至3)制备中间体化合物N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺，其光谱数据如下：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.26-7.29(1H,d,J＝9.0Hz),6.54-6.57(1H,d,J＝9.0Hz),5.00(1H,s),3.97-4.04(1H,m),3.25(1H,s),1.29(3H,s),1.27(3H,s).
得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:129-130℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.06-8.08(1H,d,J＝6.0Hz),7.87(1H,s),7.65(2H,m),7.27(1H,s),7.25(1H,s),7.19-7.21(1H,d,J＝9.0Hz),6.61-6.64(1H,d,J＝9.0Hz),5.01-5.04(1H,d,J＝9.0Hz),4.11-4.15(1H,m),3.61(2H,s),2.43(8H,brs),2.32(3H,s),2.27(3H,s),1.25-1.32(6H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C29H34N7的计算值:480.2870；测试值:480.2847.
实施例5
N-环丙基-5-(2-(2-甲基-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)嘧啶-2-胺
Figure BDA0001232664340000531
步骤1. 5-溴-N-环丙基嘧啶-2-胺
Figure BDA0001232664340000532
将5-溴-2氯嘧啶(3.87g，20mmol)和环丙胺(5.7g，0.1mol)的20mL THF溶液在密封管中于65℃加热5小时。将混合物在真空下蒸发，向残余物中加入乙醇，过滤后滤饼用乙醇洗涤得到4.07g为无色固体的产物(95.5％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.32(2H,s),5.58(1H,brs),2.72(1H,brs),0.82-0.84(2H,m),0.54(2H,brs).LCMS:m/z[M+H]+214.0011.
步骤2.N-环丙基-5-乙炔基嘧啶-2-胺
Figure BDA0001232664340000533
将5-溴-N-环丙基嘧啶-2-胺(1.06g，5mmol)、三甲基硅基乙炔(2.5g，25mmol)、Pd(PPh3)4(289mg，0.25mmol)和CuI(71mg，0.375mmol)置于具橡胶塞的双口瓶中。将混合物用氩气进行3次真空/充气循环后，向瓶内注入DIPEA(968mg，0.45mmol)和DMF(10mL)的溶液。将混合物在80℃下搅拌15小时，然后倾倒入50mL水中，用EtOAc萃取(30mL×3)，用卤水洗涤有机层，以Na2SO4干燥，过滤，真空蒸发滤液，残余物于硅胶上通过色谱(PE/EtOAc 82:18～64:36)纯化得到1.1g N-环丙基-5-(2-(三甲基硅基)乙炔基)嘧啶-2-胺。将该化合物溶解于20mL CH2Cl2中，将TBAF(1.3g，5mmol)的10mL CH2Cl2溶液加入上述溶液中。将混合物在室温下搅拌1小时，真空下蒸发。残余物于硅胶上通过色谱(PE/EtOAc 82:18～64:36)纯化得到0.55g为浅黄色固体的产物(72.8％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.43(2H,s),5.77(1H,brs),3.18(1H,s),2.76-2.81(1H,m),0.82-0.87(2H,m),0.54-0.59(2H,m).LCMS:m/z[M+H]+160.0863.
步骤3.N-环丙基-5-(2-(2-甲基-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)嘧啶-2-胺
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-5-乙炔基嘧啶-2-胺(如上制备)和2-(3-碘-4甲基苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑(按实施例1制备)合成标题化合物。得到为棕色固体的标题化合物。Mp:136-137℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.40(2H,s),8.21(1H,s),7.96-7.99(1H,d,J＝9.0Hz),7.52-7.55(1H,d,J＝9.0Hz),7.49-7.52(1H,d,J＝9.0Hz),7.23-7.26(1H,d,J＝9.0Hz),7.15-7.18(1H,d,J＝9.0Hz),5.81(1H,s),5.28(1H,s),3.57(2H,s),2.78(1H,s),2.55(8H,brs),2.46(3H,s),2.32(3H,s),0.83-0.87(2H,m),0.56(2H,brs).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C29H32N7的计算值:478.2714；测试值:478.2718.
实施例6
3-(2-(2-氯-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)咪唑并[1,2-b]哒嗪
Figure BDA0001232664340000541
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪(按实施例3制备)和2-(4-氯-3-碘代苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑合成标题化合物。按实施例1(步骤4至7)制备中间体化合物2-(4-氯-3-碘代苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑，其光谱数据如下：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.52(1H,s),7.95-7.98(1H,d,J＝9.0Hz),7.45-7.48(1H,d,J＝9.0Hz),7.43-7.46(1H,d,J＝9.0Hz),7.23(1H,s),7.21-7.24(1H,d,J＝9.0Hz),3.59(2H,s),2.51(8H,brs),2.29(3H,s).
得到为卡其色固体的标题化合物。Mp:156-157℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.43(1H,s),8.36(1H,s),8.11-8.14(1H,d,J＝9.0Hz),8.11(1H,s),7.92-7.95(1H,d,J＝9.0Hz),7.54-7.57(2H,m),7.45-7.45(1H,d,J＝9.0Hz),7.18-7.21(1H,d,J＝9.0Hz),7.10-7.11(1H,m),3.60(2H,s),2.61(8H,brs),2.31(3H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C27H25ClN7的计算值:482.1854；测试值:482.1841.
实施例7
6-(2-(2-氯-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)-N-环丙基哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000551
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和2-(4-氯-3-碘代苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑为原料合成目标化合物。目标化合物为卡其色固体，Mp:130-131℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.11-8.13(1H,d,J＝6.0Hz),7.86(1H,s),7.64(2H,m),7.42-7.45(1H,d,J＝9.0Hz),7.39-7.42(1H,d,J＝9.0Hz),7.22(1H,s),7.01-7.04(1H,d,J＝9.0Hz),6.00(1H,s),3.61(2H,s),2.60(1H,m),2.44(8H,brs),2.27(3H,s),0.87-0.89(2H,m),0.65(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H29ClN7的计算值:498.2167；测试值:498.2150.
实施例8
6-(2-(2-氯-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)-N-环丁基哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000552
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丁基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和2-(4-氯-3-碘代苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑合成标题化合物。得到为为浅黄色固体的标题化合物。Mp:161-163℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.13-8.15(1H,d,J＝6.0Hz),7.95(1H,s),7.62-7.65(1H,d,J＝9.0Hz),7.65(1H,s),7.36-7.39(1H,d,J＝9.0Hz),7.29-7.32(1H,d,J＝9.0Hz),7.18-7.21(1H,d,J＝9.0Hz),6.63-6.66(1H,d,J＝9.0Hz),5.80(1H,s),4.28-4.30(1H,m),3.63(2H,s),2.63(8H,brs),2.40-2.44(2H,m)2.40(3H,s),1.96-2.02(2H,m),1.79-1.81(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C29H31ClN7的计算值:512.2324；测试值:512.2303.
实施例9
6-(2-(2-氯-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)-N-异丙基哒嗪-3-胺
Figure BDA0001232664340000561
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和2-(4-氯-3-碘代苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑合成标题化合物。得到为为卡其色固体的标题化合物。Mp:127-128℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.11-8.13(1H,d,J＝6.0Hz),7.82(1H,s),7.64(2H,m),7.53(1H,s),7.35-7.38(1H,d,J＝9.0Hz),7.29-7.32(1H,d,J＝9.0Hz),6.66-6.69(1H,d,J＝9.0Hz),5.22(1H,s),4.12-4.14(1H,m),3.62(2H,s),2.51(8H,brs),2.31(3H,s),1.25-1.31(6H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H31ClN7的计算值:500.2324；测试值:500.2313.
实施例10
5-(2-(2-氯-5-(6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)-N-环丙基嘧啶-2-胺
Figure BDA0001232664340000562
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-5-乙炔基嘧啶-2-胺和2-(4-氯-3-碘代苯基)-6-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑合成标题化合物。得到为为棕色固体的标题化合物。Mp:160-162℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.43-8.45(2H,d,J＝6.0Hz),8.12-8.15(1H,d,J＝6.0Hz),7.58-7.60(1H,d,J＝6.0Hz),7.52(1H,s),7.45-7.47(1H,d,J＝6.0Hz),7.38-7.40(1H,d,J＝6.0Hz),7.15-7.17(1H,d,J＝6.0Hz),5.80(1H,s),3.60(2H,s),2.80(8H,brs),2.59(3H,s),1.35-1.39(1H,m),0.82-0.88(2H,m),0.58-0.60(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H29ClN7的计算值:498.2167；测试值:498.2163.
实施例11
3-(2-(2-甲基-5-(6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)咪唑并[1,2-b]哒嗪
Figure BDA0001232664340000571
步骤1. 4-(4-甲基-1H-咪唑-1基)-2-硝基苯胺
Figure BDA0001232664340000572
在密封管中于Ar2下，将4-溴-2-硝基苯胺(4.34g，20mmol)、4-甲基咪唑(1.97g，24mmol)、K2CO3(3.04g，22mmol)、CuI(0.57g，3mmol)和8-羟基喹啉(0.44g，3mmol)于20mLDMSO的悬浮液在120℃搅拌29小时。将混合物冷却至室温，加入28％的氨水(10mL)，然后加入H2O和EtOAc。用EtOAc(80mL×3)萃取水相，用卤水洗涤有机层，以Na2SO4干燥，过滤后真空蒸发滤液，用PE/EtOAc洗涤残余物得到2.47g为红色固体的产物(56.6％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.03(1H,d,J＝2.1Hz),7.64-7.68(1H,dd,J＝2.1和9.0Hz),7.53(2H,brs),7.10-7.13(1H,d,J＝9.0Hz),2.12(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+219.0895.
步骤2. 2-氨基-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯胺
将4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-2-硝基苯胺(0.22g,1mmol)悬浮于20mL无水甲醇中。在40psi下，将混合物以0.11g雷尼镍还原7小时。而后过滤去除雷尼镍。蒸发滤液得到0.18g为黄色固体的目标化合物(95.7％)。
步骤3.N-(2-氨基-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)-3-碘-4-甲基苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000581
将3-碘-4-甲基苯甲酸(0.26g，1mmol)的SOCl2(5mL)溶液加热回流2小时，而后真空下蒸发以移除过量的SOCl2。将残余物溶于5mL无水THF中，逐滴加入三乙胺(0.12g，1.2mmol)、2-胺基-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯胺(0.18g，1mmol)和DMAP(24mg)的5mL无水THF溶液。将所得混合物在室温下搅拌20小时，真空下蒸发。将残余物于硅胶上通过色谱(CH2Cl2/CH3OH 97:3)纯化得到0.16g为浅黄色固体的产物(37.0％)。LC/MS:m/z[M+H]+433.0520.
步骤4. 2-(3-碘-4-甲基苯基)-6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-1H-苯并[d]咪唑
Figure BDA0001232664340000582
将N-(2-氨基-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯基)-3-碘-4-甲基苯甲酰胺(0.16g，0.37mmol)的5mL冰乙酸溶液回流8小时，然后将混合物在真空下蒸发，残余物于硅胶上通过色谱(CH2Cl2/CH3OH 97:3～94:6)纯化得到0.1g为浅黄色固体的产物(65.3％)。LC/MS:m/z[M+H]+415.0415.
步骤5. 3-(2-(2-甲基-5-(5-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)苯基)乙炔基)咪唑并[1,2-b]哒嗪
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和2-(3-碘-4-甲基苯基)-6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-1H-苯并[d]咪唑(如上所制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:182-184℃；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ:8.57(2H,brs),8.26(1H,s),7.98-8.05(3H,m),7.74(1H,s),7.68-7.70(1H,d,J＝8.4Hz),7.46-7.48(2H,m),7.42-7.44(1H,d,J＝8.4Hz),7.29-7.33(1H,dd,J＝4.4和9.2Hz),2.61(3H,s),2.31(3H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C26H20N7的计算值:430.1775；测试值:430.1778.
实施例12
3-(2-(6-环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000591
步骤1. 1-(溴甲基)-2-(三氟甲基)-4-硝基苯
Figure BDA0001232664340000592
向1-甲基-4-硝基-2-三氟甲苯(4.1g，20mmol)的四氯化碳(30mL)溶液中加入NBS(5.4g，30mmol)和AIBN(493mg，3mmol)。将反应回流过夜，然后分配于水中。分离有机相后，用CH2Cl2萃取水层。用水洗涤合并的有机提取物，于Na2SO4上干燥，过滤浓缩以得到不经纯化直接用于下一步的产物。
步骤2. 4-甲基-1-(4-硝基-2-(三氟甲基)苄基)哌嗪
Figure BDA0001232664340000593
向粗品1-(溴甲基)-2-(三氟甲基)-4-硝基苯(13.7mmol，60％纯度)的CH2Cl2(20mL)溶液中加入三乙胺(1.5g，15mmol)和4-甲基哌嗪(1.5g，15mmol)。室温下搅拌5小时后，加入50mL H2O，将混合物用50mL CH2Cl2萃取。于Na2SO4上干燥合并的有机层，过滤、浓缩，所得残余物通过硅胶色谱(流动相：含10％MeOH的CH2Cl2)纯化得到产物(67.4％，2.8g)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:8.52(1H,s),8.37-8.40(1H,d,J＝9.0Hz),8.00-8.03(1H,d,J＝9.0Hz),3.85(2H,s),3.09-3.15(2H,m),2.90-2.93(2H,m),2.80-2.83(2H,m),2.67(3H,s),2.53-2.59(2H,m).
步骤3. 4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯胺
Figure BDA0001232664340000601
向4-甲基-1-(4-硝基-2-(三氟甲基)苄基)哌嗪(1.5g,5mmol)的甲醇(250mL)溶液中加入雷尼镍(0.15g，10wt％)。将悬浮液在氢气氛围(50psi)下搅拌24小时，并以TLC监测。反应混合物经硅藻土过滤，减压浓缩滤液得到目标产物(100％，1.36g)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:7.43-7.46(1H,d,J＝9.0Hz),6.91(1H,s),6.77-6.80(1H,d J＝9.0Hz),3.77(2H,s),3.54(2H,s),2.53(8H,brs),2.34(3H,s)。
步骤4. 3-碘-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000602
向4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯胺(1.00g，3.6mmol)、三乙胺(0.36g3.6mmol)及催化量的DMAP的THF(20mL)溶液中加入通过3-碘-4-甲基苯甲酸和二氯亚砜反应制备的3-碘-4-甲基苯甲酰氯(1.06g，3.8mmol)中。室温下搅拌2小时后，以水淬灭反应。加入乙酸乙酯分层。将合并的有机层浓缩至干，并通过硅胶色谱(流动相：含5％MeOH的CH2Cl2，MeOH中加入0.5％三乙胺)纯化得到为类白色固体目标产物(67.2％，1.25g)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:8.29(1H,s),8.00(1H,s),7.85((1H,m),7.73-7.76((2H,m),7.31-7.34((1H,d,J＝9.0Hz),3.64(2H,s),2.53(8H,brs),2.49(3H,s),2.33(3H,s)。
步骤5. 3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和3-碘-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺(如上所制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:68-69℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.84(1H,s),7.99-8.01(2H,d,J＝6.0Hz),7.95-7.98(1H,d,J＝9.0Hz),7.82-7.85(1H,d,J＝9.0Hz),7.71-7.73(1H,d,J＝6.0Hz),7.40-7.43(1H,d,J＝9.0Hz),7.29-7.32(1H,d,J＝9.0Hz),6.99-7.02(1H,d,J＝9.0Hz),5.85(1H,s),3.63(2H,s),2.53(8H,brs),2.34(3H,s),2.03(3H,s),1.43(1H,m),0.86-0.88(2H,m),0.61-0.63(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C30H32F3N6O的计算值:549.2584；测试值:549.2568.
实施例13
3-(2-(6-(环丁基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丁基-6乙炔基哒嗪-3胺和3-碘-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:120-121℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.10(1H,s),8.05(1H,s),7.97-7.80(1H,d,J＝9.0Hz),7.94(1H,s),7.81-7.83(1H,d,J＝6.0Hz),7.64-7.66(1H,d,J＝6.0Hz),7.28-7.31(1H,d,J＝9.0Hz),7.26-7.28(1H,d,J＝6.0Hz),6.57-5.59(1H,d,J＝2.0Hz),5.53(1H,s),4.22-4.27(1H,m),3.64(2H,s),2.65(8H,brs),2.49(3H,s),2.45(3H,s),2.44(2H,m),1.93-1.99(2H,m),1.83-1.89(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C31H34F3N6O的计算值:563.2741；测试值:563.2768.
实施例14
3-(2-(6-异丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000621
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和3-碘-4-甲基-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:67-68℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.97(1H,s),8.06(1H,s),7.98-8.01(1H,d,J＝9.0Hz),7.97(1H,s),7.83-7.85(1H,d,J＝6.0Hz),7.58-7.60(1H,d,J＝6.0Hz),7.30-7.32(2H,m),6.61-6.64(1H,d,J＝9.0Hz),5.05(1H,s),4.02-4.05(1H,m),3.70(2H,s),2.79-2.99(8H,brs),2.66(3H,s),2.52(3H,s),1.29(6H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C30H34F3N6O的计算值:551.2741；测试值:551.2734.
实施例15
4-氯-3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000622
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。按实施例12(步骤1～4)制备中间体化合物4-氯-3-碘-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺，其光谱数据如下：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.66(1H,s),8.53(1H,s),8.19(1H,s),8.02-8.05(1H,d,J＝6.0Hz),7.98-8.01(1H,d,J＝6.0Hz),7.77(1H,s),7.70-7.73(1H,d,J＝6.0Hz),3.62(2H,s),3.33(2H,m),2.82(2H,m),2.54(4H,m),2.50(3H,s).
得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:133-134℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.57(1H,s),8.05-8.08(1H,d,J＝9.0Hz),7.85-7.88(1H,J＝9.0Hz),7.67-7.70(1H,d,J＝9.0Hz),7.42-7.45(2H,m),7.00-70.3(1H,d,J＝9.0Hz),6.00(1H,s),3.61(2H,s),2.53(8H,brs),2.35(3H,s),1.25(1H,s),0.87(2H,m),0.63(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C29H29ClF3N6O的计算值:569.2038；测试值:569.2000.
实施例16
4-氯-3-(2-(6-(环丁基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000631
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丁基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:132-133℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.53(1H,s),8.10(1H,s),8.00(2H,m),7.85-7.87(1H,d,J＝6.0Hz),7.66-7.69(1H,d,J＝9.0Hz),7.43-7.45(1H,d,J＝6.0Hz),7.33-7.36(1H,d,J＝9.0Hz),6.58-6.61(1H,d,J＝9.0Hz),5.56(1H,s),4.23-4.25(1H,m),3.64(2H,s),2.61(8H,brs),2.44(3H,s),2.43(2H,m),1.91-1.97(2H,m),1.81-1.86(1H,brs).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C30H31ClF3N6O的计算值:583.2194；测试值:583.2174.
实施例17
4-氯-3-(2-(6-(异丙基氨基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000641
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:133-134℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.62(1H,s),8.11(1H,s),8.05(1H,s),8.01-8.03(1H,d,J＝9.0Hz),7.86-7.88(1H,d,J＝6.0Hz),7.60-7.63(1H,d,J＝6.0Hz),7.44-7.47(1H,d,J＝9.0Hz),7.33-7.36(1H,d,J＝9.0Hz),6.63-6.66(1H,d,J＝9.0Hz),3.99-4.07(1H,m),3.67(2H,s),2.84(8H,brs),2.56(3H,s),1.25-1.30(6H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C29H30ClF3N6O的计算值:571.2194；测试值:571.2209.
实施例18
3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000642
步骤1. 4-甲基-1-(2-(三氟甲基)-4-硝基苯基)-1H-咪唑
Figure BDA0001232664340000643
将4-甲基咪唑(0.63g，7.67mmol)、1-氟-2-(三氟甲基)-4-硝基苯(1.06g，5.1mmol)和K2CO3(1.06g，7.67mmol)的混合物在乙腈(20mL)中回流6小时。反应混合物经硅藻土过滤，真空蒸发滤液，残余物于硅胶上经色谱(PE/EtOAc 1:1)纯化得到1.13g为浅绿色油的产物(81.8％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.71(1H,s),8.52-8.55(1H,d,J＝8.4Hz),7.59-7.62(2H,m),6.90(1H,s),2.32(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+272.0660.
步骤2. 4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯胺
Figure BDA0001232664340000651
将4-甲基-1-(2-(三氟甲基)-4-硝基苯基)-1H-咪唑(1.1g,4.1mmol)悬浮于50mL无水乙醇中。将混合物用0.11g 10％Pd/C在40psi下氢化3小时。而后过滤除去Pd/C。蒸发滤液得到1.0g为黄色固体的标题化合物(102.0％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.42(1H,s),7.08-7.11(1H,d,J＝8.4Hz),6.99(1H,d,J＝2.4Hz),6.80-6.84(1H,dd,J＝2.1和8.4Hz),6.74(1H,s),4.14(2H,brs),2.27(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+242.0957.
步骤3. 3-碘-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000652
将3-碘-4-甲基苯甲酸(0.26g，1mmol)的SOCl2(5mL)溶液回流3小时，然后真空蒸发除去残余的SOCl2。将残余物溶于5mL无水THF，逐滴加入三乙胺(0.12g，1mmol)、4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯胺(0.24g，1mmol)和DMAP(12mg)的5mL无水THF溶液。将反应混合物在室温下搅拌40小时，于真空下蒸发。向残余物中加入水，用EtOAc(20mL×3)萃取，用卤水洗涤有机层，以Na2SO4干燥，过滤后，滤液于硅胶上经色谱(CH2Cl2/CH3OH 97:3)纯化得到0.4g粗产物。用PE/EtOAc研磨粗产物得到0.35g为浅黄色固体的标题化合物(72.2％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.91(1H,s),8.37(1H,s),8.08-8.12(2H,m),7.86-7.83(1H,d,J＝8.4Hz),7.54(1H,s),7.34-7.36(2H,m),6.84(1H,s),2.50(3H,s),2.29(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+486.0493.
步骤4. 3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和3-碘-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺(如上制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:125-126℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.94(1H,s),8.34(1H,s),8.20-8.23(1H,d,J＝8.7Hz),8.02(1H,s),7.86-7.89(1H,d,J＝8.1Hz),7.53(1H,s),7.39-7.42(1H,d,J＝9.0Hz),7.30-7.32(2H,m),7.02-7.05(1H,d,J＝9.2Hz),6.80(1H,s),6.02(1H,s),2.58(1H,m),2.48(3H,s),2.29(3H,s),0.87(2H,m),0.64(2H,brs).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C28H25F3N6O的计算值:259.1015；测试值:259.1023.
实施例19
3-(2-(6-(异丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和3-碘-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:141-143℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.82(1H,s),8.34(1H,s),8.20-8.23(1H,d,J＝7.8Hz),7.96(1H,s),7.84-7.86(1H,d,J＝8.1Hz),7.54(1H,s),7.29-7.31(3H,m),6.81(1H,s),6.63-6.66(1H,d,J＝8.4Hz),5.11(1H,brs),4.08(1H,m),2.46(3H,s),2.29(3H,s),1.28-1.31(6H,d,J＝6.3Hz).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H26F3N6O的计算值:519.2115；测试值:519.2116.
实施例20
4-氯-3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000671
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。按实施例18(步骤1至3)制备中间体化合物4-氯-3-碘-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺，其光谱数据如下：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.78(1H,s),8.55(1H,d,J＝2.1Hz),8.26(1H,s),8.22(1H,s),8.11(1H,s),7.99-8.03(1H,dd,J＝2.1和8.1Hz),7.76-7.80(2H,m),7.49(1H,s),2.19(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+505.9663.
得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:150-152℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:10.45(1H,s),8.38(1H,s),8.24-8.27(1H,d,J＝8.1Hz),8.10(1H,s),7.85-7.87(1H,d,J＝6.9Hz),7.42-7.52(3H,m),7.29-7.32(1H,d,J＝9.0Hz),7.07(1H,s),6.80(1H,s),6.09(1H,s),2.59(1H,brs),2.28(3H,s),0.88-0.89(2H,m),0.65(2H,brs).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C27H22ClF3N6O的计算值:269.0742；测试值:269.0735.
实施例21
4-氯-3-(2-(6-环丁基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000672
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丁基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:153-155℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:10.34(1H,s),8.36(1H,s),8.24-8.27(1H,d,J＝8.1Hz),8.03(1H,s),7.82-7.85(1H,d,J＝8.1Hz),7.48(1H,s),7.41-7.44(1H,d,J＝8.7Hz),7.34-7.37(2H,t,J＝9.3和8.7Hz),6.80(1H,s),6.61-6.64(1H,d,J＝9.6Hz),5.57-5.59(1H,d,J＝6.0Hz),4.22-4.29(1H,m),2.45-2.48(2H,m),2.28(3H,s),1.76-2.01(4H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C28H24ClF3N6O的计算值:276.0821；测试值:276.0817.
实施例22
4-氯-3-(2-(6-(异丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000681
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:133-135℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:10.46(1H,s),8.40(1H,s),8.28-8.31(1H,d,J＝8.1Hz),8.04(1H,s),7.82-7.84(1H,d,J＝8.1Hz),7.53(1H,s),7.41-7.43(1H,d,J＝8.4Hz),7.34-7.36(2H,m),6.81(1H,s),6.66-6.69(1H,d,J＝9.3Hz),5.13-5.15(1H,d,J＝6.3Hz),4.08(1H,m),2.29(3H,s),1.30-1.32(6H,d,J＝6.0Hz).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C27H23ClF3N6O的计算值:539.1568；测试值:539.1592.
实施例23
3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000691
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-甲基-3-碘-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为无色固体的产物。Mp:226-228℃；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.72(1H,s),8.30(1H,s),8.18-8.24(2H,m),7.94-7.98(1H,dd,J＝1.5和8.1Hz),7.72-7.74(2H,m),7.55-7.59(2H,m),7.50(1H,s),6.93-6.96(1H,d,J＝9.6Hz),2.66(1H,m),2.57(3H,s),2.23(3H,s),0.75-0.81(2H,m),0.47-0.52(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H24F3N6O的计算值:517.1958；测试值:517.1950.
实施例24
3-(2-(6-(环丁基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000692
步骤1. 3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺
Figure BDA0001232664340000693
在密封管中于氩气下将3-溴-5-(三氟甲基)苯胺(4.8g，20mmol)、4-甲基咪唑(1.97g，24mmol)、K2CO3(3.04g，22mmol)、CuI(0.57g，3mmol)和8-羟基喹啉(0.44g，3mmol)的20mL DMSO悬浮液在120℃搅拌16小时。将混合物冷却至50℃，加入28％的氨水(10mL)。将混合物在该温度保持1小时。冷却至室温后，加入H2O和EtOAc。用EtOAc萃取(60mL×3)水层，以卤水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤后，将滤液在减压下浓缩，并于硅胶上经色谱(CH2Cl2/CH3OH 97:3)纯化，得到2.85g为浅黄色固体的产物(59.1％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.76(1H,s),7.01(1H,s),6.94(1H,s),6.84(1H,s),6.78(1H,s),4.11(2H,brs),2.29(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+242.0966.
步骤2. 3-碘-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000701
将3-碘-4-甲基苯甲酸(1.31g，5mmol)的SOCl2(10mL)溶液回流2小时，然后在真空下蒸发以除去残余的SOCl2。将残余物溶于5mL无水THF，并逐滴加入至DIPEA(0.77g，6mmol)、3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯胺(1.21g，5mmol)和DMAP(24mg)的10mL无水THF溶液中。将所得混合物在室温下搅拌20小时，并于真空下蒸发。向残余物中加入水，用EtOAc(50mL×3)然后用CH2Cl2萃取。真空下蒸发合并的有机层以得到粗产物。用CH2Cl2/EtOAc研磨粗产物得到2.04g为无色固体的标题化合物(84.3％)。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.67(1H,s),8.46(1H,d,J＝1.5Hz),8.27(1H,s),8.21(1H,s),8.14(1H,s),7.93-7.96(1H,dd,J＝1.5和7.5Hz),7.74(1H,s),7.50-7.55(2H,m),2.46(3H,s),2.19(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+486.0211.
步骤3. 3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丁基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和3-碘-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺(如上所制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:223-225℃；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.72(1H,s),8.31(1H,s),8.17-8.22(2H,m),7.94-7.96(1H,dd,J＝1.5和8.1Hz),7.75(1H,s),7.47-7.61(4H,m),6.77-6.80(1H,d,J＝9.0Hz),4.42(1H,m),2.56(3H,s),2.33-2.35(2H,m),2.19(3H,brs),1.88-1.99(2H,m),1.72-1.78(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C29H26F3N6O的计算值:531.2115；测试值:531.2113.
实施例25
3-(2-(6-(异丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000711
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-异丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和3-碘-4-甲基-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:192-194℃；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.73(1H,s),8.33(1H,s),8.17-8.22(2H,m),7.94-7.96(1H,d,J＝7.2Hz),7.76(1H,s),7.54-7.57(1H,d,J＝7.8Hz),7.45-7.48(1H,d,J＝8.4Hz),7.15-7.18(1H,d,J＝7.5Hz),6.79-6.82(1H,d,J＝9.0Hz),4.14-4.20(1H,m),2.56(3H,s),2.19(3H,brs),1.20-1.22(6H,d,J＝6.3Hz).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H26F3N6O的计算值:519.2115；测试值:519.2121.
实施例26
4-氯-3-(2-(6-(环丙基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。按实施例24(步骤1至2)制备中间体化合物4-氯-3-碘-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺，其光谱数据如下：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.78(1H,s),8.55(1H,d,J＝2.1Hz),8.26(1H,s),8.22(1H,s),8.11(1H,s),7.99-8.03(1H,dd,J＝2.1和8.1Hz),7.76-7.80(2H,m),7.49(1H,s),2.19(3H,s).LCMS:m/z[M+H]+505.9663.
得到为无色固体的标题化合物。Mp:213-215℃；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.83(1H,s),8.37(1H,d,J＝2.1Hz),8.28(1H,s),8.15(1H,s),8.01-8.05(1H,dd,J＝2.1和8.4Hz),7.76-7.86(3H,m),7.52-7.63(2H,m),6.94-6.97(1H,d,J＝9.3Hz),2.67(1H,m),2.19(3H,s),0.75-0.81(2H,m),0.48-0.53(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C27H21ClF3N6O的计算值:537.1412；测试值:537.1413.
实施例27
4-氯-3-(2-(6-(环丁基胺基)哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000721
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丁基-6-乙炔基哒嗪-3-胺和4-氯-3-碘-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:225-227℃；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.82(1H,s),8.35(1H,d,J＝2.1Hz),8.27(1H,s),8.13(1H,s),7.99-8.03(1H,dd,J＝2.1和8.1Hz),7.81-7.84(1H,d,J＝8.7Hz),7.76(1H,s),7.66-7.68(2H,m),7.46-7.49(1H,d,J＝9.0Hz),6.76-6.80(1H,d,J＝9.3Hz),4.40(1H,m),2.32-2.34(2H,m),2.17(3H,brs),1.87-1.97(2H,m),1.71-1.76(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C28H24ClF3N6O的计算值:276.0821；测试值:276.0819.
实施例28
3-(2-(2-(环丙基胺基)嘧啶-5-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000731
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-5-乙炔基嘧啶-3-胺和3-碘-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:131-133℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.49(2H,brs),8.34(1H,s),8.10(2H,m),7.99(1H,s),7.78-7.81(1H,d,J＝8.4Hz),7.61(1H,brs),7.37-7.40(2H,m),6.83(1H,brs),5.58(1H,s),2.82(1H,m),2.57(3H,s),2.31(3H,s),0.87-0.89(2H,m),0.60(2H,brs).
HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C28H24F3N6O的计算值:517.1958；测试值:517.1960.
实施例29
4-氯-3-(2-(2-(环丙基胺基)嘧啶-5-基)乙炔基)-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000732
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-5-乙炔基嘧啶-3-胺和4-氯-3-碘-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为无色固体的产物。Mp:141-143℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.72(1H,s),8.50(1H,s),8.06-8.09(3H,m),7.82-7.85(1H,d,J＝8.4Hz),7.55-7.58(2H,m),7.35-7.38(1H,d,J＝8.1Hz),6.83(1H,s),5.64(1H,s),2.82(1H,brs),2.29(3H,s),0.88-0.89(2H,m),0.59(2H,brs).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C27H21ClF3N6O的计算值:537.1412；测试值:537.1417.
实施例30
3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000741
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和3-碘-4-甲基-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:124-126℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.00(1H,s),8.48(1H,d,J＝4.8Hz),8.17(1H,s),8.09(3H,m),7.93-7.95(1H,d,J＝8.7Hz),7.86-7.89(1H,d,J＝8.1Hz),7.55(1H,s),7.39-7.42(1H,d,J＝8.1Hz),7.34-7.36(1H,d,J＝8.4Hz),7.11-7.16(1H,dd,J＝4.2和8.4Hz),6.82(1H,s),2.64(3H,s),2.29(3H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C27H20F3N6O的计算值:501.1645；测试值:501.1626.
实施例31
4-氯-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000742
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和4-氯-3-碘-N-(4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:153-155℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.39(1H,s),8.49(1H,d,J＝3.3Hz),8.08-8.18(4H,m),7.91-7.94(2H,m),7.57-7.60(2H,m),7.34(1H,brs),7.14-7.16(1H,m),6.85(1H,brs),2.28(3H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C26H17ClF3N6O的计算值:521.1099；测试值:521.1092.
实施例32
4-氯-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000751
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和4-氯-3-碘-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的标题化合物。Mp:153-154℃；1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.35(1H,s),8.48-8.49(1H,d,J＝3.6Hz),8.25(1H,s),8.15(2H,brs),7.89-7.92(4H,m),7.57-7.60(1H,d,J＝8.4Hz),7.37(1H,s),7.12-7.16(1H,dd,J＝4.2和9.3Hz),2.27(3H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+ 2C26H18ClF3N6O的计算值:261.0586；测试值:261.0584.
实施例33
4-氯-3-(2-(2-(环丙基胺基)嘧啶-5-基)乙炔基)-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000752
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-5-乙炔基嘧啶-3-胺和4-氯-3-碘-N-(3-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)-5-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺合成标题化合物。得到为无色固体的产物。Mp:163-165℃；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.79(1H,s),8.53(3H,brs),8.19-8.25(2H,m),8.12(1H,s),7.95-8.00(2H,m),7.75-7.79(2H,m),2.75(1H,brs),2.16(3H,s),0.68-0.79(2H,m),0.51(2H,brs).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C27H21ClF3N6O的计算值:537.1412；测试值:537.1399.
实施例34
3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)哌啶-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲酰胺
Figure BDA0001232664340000761
步骤1. 1-BOC-3-甲酰基哌啶
Figure BDA0001232664340000762
将1-BOC-3-羟甲基哌啶(2.15g，10mmol)和三乙胺(3.03g，30mmol)溶于10mLDMSO，再将15mL SO3Py(4.77g，30mmol)的DMSO溶液逐滴加入至上述混合物中，将所得混合物在室温下搅拌2小时。将混合物倾倒入100mL冰水中，用EtOAc(100mL×3)萃取，以卤水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤，将滤液在真空下蒸发。粗产品于硅胶上经色谱(PE/EtOAc 5:1)纯化得到1.46g为无色油的产物(68.5％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.70(1H,s),3.91-3.93(1H,m),3.62-3.67(1H,m),3.29-3.36(1H,m),3.05-3.13(1H,m),2.40-2.45(1H,m),1.95-1.97(1H,m),1.63-1.72(1H,m),1.49-1.59(1H,m),1.46(9H,s).
步骤2. 1-BOC-3-乙炔基哌啶
Figure BDA0001232664340000763
将1-BOC-3-甲酰基哌啶(1.46g，6.85mmol)和(重氮甲基)膦酸二甲酯(1.79g，11.94mmol)于50mL甲醇的溶液在冰浴下搅拌10分钟，将K2CO3(1.96g,14.2mmol)加入到上述混合物中，并在冰浴下搅拌2小时，然后于室温下搅拌过夜。将混合物在减压下蒸发，向残余物中加入EtOAc和水，分离有机层，用EtOAc(100mL×3)萃取水层。相继用水和卤水洗涤合并的有机层，以Na2SO4干燥，过滤，将滤液在真空下蒸发，得到1.44g为无色油的产物(100.0％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.90(1H,brs),3.70-3.75(1H,m),2.95-3.02(2H,m),2.40-2.47(1H,m),2.05(1H,d,J＝2.1Hz),1.94-1.99(1H,m),1.69-1.73(1H,m),1.50-1.63(2H,m),1.46(9H,s).
步骤3. 1-BOC-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)哌啶
Figure BDA0001232664340000771
在氩气下，将3-溴咪唑并[1.2-b]哒嗪(0.40g，2mmol)、1-BOC-3-乙炔基哌啶(0.55g，2.6mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(70mg，0.1mmol)、CuI(29mg，0.15mmol)和DIPEA(0.39g，3mmol)的DMF(20mL)溶液于80℃搅拌6小时。将混合物倾倒入100mL水中，用EtOAc(60mL×3)萃取，以卤水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤，将滤液在真空下蒸发。粗产物于硅胶上经色谱(PE/EtOAc 7:3～3:2)纯化得到0.39g为黄色油的产物(60.0％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.50(1H,d,J＝4.2Hz),7.98-8.08(2H,m),7.13-7.17(1H,dd,J＝4.5和8.7Hz),4.09(1H,brs),3.76-3.82(1H,m),3.19(1H,brs),3.02-3.09(1H,m),2.81-2.88(1H,m),2.32(1H,brs),2.11-2.15(1H,m),1.67-1.81(2H,m),1.46(9H,s).LCMS:m/z[M+H]+327.2112.
步骤4. 3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)哌啶
Figure BDA0001232664340000772
向1-BOC-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)哌啶(0.39g，1.2mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液中加入TFA(1.23g,10.8mmol)，将混合物于室温下搅拌过夜并且在真空下蒸发。向残余物中加入10mL 10％的K2CO3水溶液，用EtOAc(20mL×3)萃取，以Na2SO4干燥，过滤后将滤液在减压下蒸发得到0.33g为黄色油的产物(107.0％)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:8.43(1H,d,J＝4.5Hz),7.93-7.97(1H,dd,J＝1.8和9.0Hz),7.91(1H,s),7.05-7.09(1H,dd,J＝4.5和9.0Hz),2.82-2.98(4H,m),2.08-2.11(1H,m),1.75-1.84(2H,m),1.53-1.58(2H,m).
步骤5. 3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)哌啶-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲酰胺
将吡啶(0.036mL，0.45mmol)和4-硝基苯基氯甲酸酯(90mg，0.45mmol)加入4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯胺(如实施例12步骤1至3制备)(0.1g，0.37mmol)的15mL无水二氧六环溶液中，将混合物在60℃下搅拌2小时，然后冷却至室温，将3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)哌啶(0.1g，0.44mmol)加入至上述混合物中。然后，将混合物在60℃搅拌9小时并在真空下蒸发。将残余物于硅胶上经色谱(CH2Cl2/CH3OH 25:1)纯化得到140mg粗产物，再经制备TLC(CH2Cl2/CH3OH 120:15)纯化得到60mg为浅黄色固体的产物。Mp:65-70℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.38(1H,s),7.97(1H,d,J＝9.0Hz),7.88(1H,s),7.58-7.61(2H,m),7.42-7.44(1H,d,J＝7.8Hz),7.06-7.10(1H,m),7.03(1H,s),3.95(1H,m),3.65(4H,m),3.49-3.53(2H,m),3.02(4H,m),2.79(4H,brs),2.69(3H,s),2.13(1H,brs),1.93(2H,m),1.63(1H,brs).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C27H31F3N7O的计算值:526.2537；测试值:526.2536.
实施例35
3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)吡咯烷-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲酰胺
Figure BDA0001232664340000781
步骤1. 1-BOC-3-甲酰基吡咯烷
采用类似于实施例30步骤1中描述的方法，使用1-BOC-3-羟甲基吡咯烷为原料合成标题化合物。得到为无色油的产物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:9.68(1H,s),3.70(1H,m),3.48-3.51(1H,m),3.37(2H,brs),2.99-3.03(1H,m),2.05-2.24(2H,m),1.45(9H,s).
步骤2. 1-BOC-3-乙炔基吡咯烷
采用类似于实施例30步骤2中描述的方法，使用1-BOC-3-甲酰基吡咯烷(如上所制备)为原料合成标题化合物。得到为无色油的产物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:3.47-3.60(2H,m),3.30(2H,brs),2.90-2.95(1H,m),2.12-2.18(1H,m),2.10(1H,d,J＝1.8Hz),1.90-1.96(1H,m),1.45(9H,s).
步骤3. 1-BOC-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)吡咯烷
采用类似于实施例30步骤3中描述的方法，使用1-BOC-3-乙炔基吡咯烷(如上所制备)为原料合成标题化合物。得到为黄色油的产物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.43(1H,d,J＝3.6Hz),7.92-7.99(2H,m),7.07-7.11(1H,dd,J＝4.2和9.0Hz),3.76(1H,m),3.60(1H,m),3.32-3.45(2H,m),2.25-2.32(1H,m),2.12(1H,m),1.71(1H,m),1.47(9H,s).
步骤4. 3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)吡咯烷
Figure BDA0001232664340000801
采用类似于实施例30步骤4中描述的方法，使用1-BOC-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)吡咯烷(如上所制备)为原料合成标题化合物。得到为黄色油的产物。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ:8.43(1H,d,J＝4.2Hz),7.94-7.97(1H,d,J＝9.0Hz),7.91(1H,s),7.06-7.10(1H,dd,J＝4.2和9.0Hz),3.10-3.35(5H,m),2.24-2.31(1H,m),2.05-2.09(1H,m).
步骤5. 3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)吡咯烷-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲酰胺
采用类似于实施例30中描述的方法，以3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)吡咯(如上所制备)和4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯胺(按实施例12步骤1至3制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产物。Mp:83-85℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:8.44(1H,s),7.92-7.98(2H,m),7.58-7.64(3H,m),7.07-7.12(1H,dd,J＝4.5和9.0Hz),6.37(1H,s),3.88-3.93(1H,m),3.76(1H,m),3.49-3.70(4H,m),2.62(8H,brs),2.44(4H,brs),2.29-2.31(2H,m).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+C26H29F3N7O的计算值:512.2380；测试值:512.2375.
实施例36
N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000802
步骤1. 6-硝基-1-茚满酮
Figure BDA0001232664340000811
在0℃时将1-茚满酮(13.2g，0.1mol)一次性加入到浓硫酸(80mL)中。于40分钟内分小批加入硝酸钾(10.1g，0.1mol)的浓硫酸(30mL)溶液。将混合物在0℃搅拌1h，然后倒入500g冰中。将混合物过滤，以水洗涤，并空气干燥。粗产品于硅胶上经色谱(PE/EtOAc 2:1)纯化得到11.58g为无色固体的产物(65.4％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:2.81-2.85(2H,t,J＝6.3Hz),3.26-3.29(2H,t,J＝6.3Hz),7.65-7.68(1H,d,J＝8.4Hz),8.43-8.47(1H,dd,J＝8.4和2.1Hz),8.57(1H,s).
步骤2. 6-硝基-1H-茚-1-酮
Figure BDA0001232664340000812
在0℃于Ar下向6-硝基-1-茚满酮(2.66g，15mmol)的干燥甲苯(100mL)溶液中依次加入Et3N(2.55mL，18mmol)和TMSOTf(2.85mL，15mmol)。将混合物暖至室温，并搅拌1小时。再次将反应混合物降温至0℃，并用乙醚(100mL)和NaHCO3溶液(150mL)稀释。分层，水层用乙醚(3×50mL)萃取。合并的有机层用卤水洗涤然后干燥(Na2SO4)、过滤，减压下蒸发，得到为淡黄色油的烯醇硅醚。
将烯醇硅醚溶于二氯甲烷(30mL)，氩气保护下滴入装有醋酸钯(3.3g,15mmol)的干燥乙腈(80mL)的铝箔包裹的反应瓶中。混合物室温搅拌2小时后，将反应液通过短的硅胶柱过滤。滤液减压蒸干，残余物硅胶柱层析(9％-21％EtOAc/PE)得0.69g产物为黄色固体(26.3％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:6.23-6.25(1H,d,J＝6.3Hz),7.27-7.30(1H,d,J＝8.1Hz),7.71-7.73(1H,d,J＝6.0Hz),8.26(1H,s),8.32-8.35(1H,dd,J＝7.8和2.4Hz).
步骤3. 2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-硝基茚满-1-酮
将N-甲基哌嗪(0.87mL，7.8mmol)加入至6-硝基-1H-茚-1-酮(690mg，3.9mmol)的THF(10mL)溶液中。将所得反应混合物在室温搅拌12小时。真空下移除THF，残余物于硅胶上经色谱(DCM/甲醇＝10:1)纯化，得0.86g为黑色油的产物(80.3％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:2.31(3H,s),2.43-2.48(6H,m),2.61(2H,brs),2.71-2.80(1H,dd,J＝7.2和12.3Hz),2.88-2.94(1H,m),4.66(1H,brs),7.89-7.92(1H,d,J＝8.1Hz),8.48-8.50(1H,d,J＝8.1Hz),8.56(1H,s).
步骤4. 1,1-二硫乙缩醛-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-硝基茚满
Figure BDA0001232664340000821
在Ar下，将2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-硝基茚满-1-酮(0.86g，3.1mmol)和1,2-乙二硫醇(0.62mL，7.4mmol)溶于25mL二氯甲烷中并冷却至-15℃。在该温度下，加入三氟化硼-二乙醚复合物(2.2mL，8.4mmol)。将混合物在-15℃搅拌3h，并于室温过夜。将溶液小心地倒入饱和NaHCO3溶液中。将水层用二氯甲烷萃取三次。有机层用卤水洗涤、干燥(Na2SO4)、蒸发。残余物于硅胶上经色谱(CH2Cl2/甲醇＝20:1to 15:1)纯化得0.6g为黑色固体的产物(55.6％)。LCMS:m/z[M+H]+352.1149.
步骤5. 1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-硝基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪
Ar下，将2.03mL 70％HF的吡啶溶液加入到1,3-二溴-5,5-二甲基乙内酰脲(2g,7mmol)和15mL二氯甲烷的悬浮液中。将混合物冷却至-74℃，并在-65℃以下的温度加入5mL1,1-二硫乙缩醛-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-6-硝基茚满(0.6g，1.7mmol)的CH2Cl2溶液。5小时后撤除冷浴。将反应混合物在室温搅拌过夜，并倒入50mL含有3mL 39％NaHSO3溶液的2N NaOH中。水层用二氯甲烷萃取三次。合并的有机层用卤水洗涤，干燥(Na2SO4)、蒸发。残余物于硅胶上经色谱(DCM/甲醇＝30:1)纯化得90mg为黑色固体的产物(18.0％)。LCMS:m/z[M+H]+298.1333.
步骤6. 1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-胺基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪
Figure BDA0001232664340000831
将1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-硝基-1H-茚-3-基)-4-甲基哌嗪(90mg,0.3mmol)悬浮于10mL无水乙醇中。将混合物用50mg 10％的Pd-C常压氢化5小时。然后过滤除去Pd-C。蒸发滤液得78mg为黄色油的标题化合物(97.5％)。
步骤7.N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘-4-甲基苯甲酰胺
将3-碘-4-甲基苯甲酸(79mg，0.3mmol)的SOCl2(5mL)溶液回流3小时，然后在真空下蒸发以除去残余的SOCl2。将残余物溶于5mL无水THF中，并逐滴加入至三乙胺(37mg，0.36mmol)、1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-胺基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪(78mg，0.3mmol)和DMAP(2mg)的5mL无水THF溶液中。将所得混合物在室温搅拌26小时，真空下蒸发。残余物于硅胶上经色谱(CH2Cl2/CH3OH 97:3)纯化得到140mg为淡黄色固体的产物(91.5％)。LCMS:m/z[M+H]+512.1049.
步骤8.N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑[1,2-b]并哒嗪)-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000841
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘-4-甲基苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。Mp:111-113℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:0.83-0.87(2H,m),2.31(3H,s),2.49(6H,brs),2.58-2.67(5H,m),4.50-4.52(1H,m),7.11-7.16(1H,dd,J＝9.0和4.5Hz),7.38-7.41(1H,d,J＝8.1Hz),7.46-7.49(1H,d,J＝8.1Hz),7.80-7.89(3H,m),7.96-8.00(1H,dd,J＝9.6和1.5Hz),8.05(1H,d,J＝1.8Hz),8.09(1H,s),8.18(1H,s),8.48-8.49(1H,d,J＝4.2Hz).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C30H30F2N6O的计算值:264.1219；测试值:264.1212.
实施例37
3-(2-(2-(环丙胺基)嘧啶-5-基)乙炔基)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-4-甲基苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000842
采用类似于实施例1中描述的方法，以N-环丙基-5-乙炔基嘧啶-3-胺和N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘-4-甲基苯甲酰胺(按实施例36步骤1至7制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。Mp:95-97℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:0.60-0.62(2H,m),0.85-0.94(4H,m),2.30(3H,s),2.47(5H,brs),2.56-2.67(6H,m),2.82(1H,m),4.49-4.51(1H,m),7.35-7.38(1H,d,J＝8.1Hz),7.46-7.49(1H,d,J＝7.8Hz),7.74-7.79(2H,m),7.83-7.86(1H,d,J＝8.1Hz),7.91(1H,s),7.95(1H,s),8.50(2H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C31H34F2N6O的计算值:272.1376；测试值:272.1370.
实施例38
N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氯苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000851
步骤1.N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘-4-氯苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000852
采用类似于实施例36步骤7中描述的方法，以4-氯-3-碘苯甲酸和1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-氨基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪(按实施例36步骤6制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。LCMS:m/z[M+H]+532.0435.
步骤2.N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氯苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000853
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和4-氯-N-(3,3-二氟-1-(4-甲基哌嗪-1-基)-2,3-二氢-1H-茚满-5-基)-3-碘苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。Mp:140-142℃.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:2.33(3H,s),2.50-2.64(10H,m),4.50(1H,m),7.11-7.16(1H,dd,J＝9.0and 4.5Hz),7.46-7.48(1H,d,J＝7.8Hz),7.55-7.58(1H,d,J＝8.4Hz),7.84-7.94(4H,m),8.11(1H,s),8.15(1H,s),8.49-8.50(1H,d,J＝3.6Hz),8.57(1H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C29H27ClF2N6O的计算值:274.0951；测试值:274.0962.
实施例39
N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氟苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000861
步骤1.N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘-4-氟苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000862
采用类似于实施例36步骤7中描述的方法，以4-氟-3-碘苯甲酸和1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-氨基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪(按实施例36步骤6制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。LCMS:m/z[M+H]+516.1312.
步骤2.N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氟苯甲酰胺
Figure BDA0001232664340000863
采用类似于实施例1中描述的方法，以3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和4-氟-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。Mp:118-121℃.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:2.38(3H,s),2.53-2.57(2H,m),2.59-2.66(8H,m),4.49-4.51(1H,d,J＝6.4Hz),7.12-7.16(1H,m),7.22-7.24(1H,d,J＝8.8Hz),7.86-7.89(2H,m),7.94-7.96(2H,m),8.11-8.12(1H,d,J＝4Hz),8.13(1H,s),8.48-8.50(1H,dd,J＝4.4and 1.6Hz),8.56(1H,s).HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+H]+ 1C29H26F3N6O的计算值:531.2115；测试值:531.2120.
实施例40
实施例36中所得化合物36的光学异构体的分离，及其绝对构型的确定
将实施例36中所得外消旋产物(5.0g)经手性柱(CHIRALCEL AS-H，0.46cm I.D.×25cm L)以SFC(超临界流体色谱)法分离(见图1)。分别在保留时间为16.817min的峰1(以下也称为HAP-71-P1，2.8257g，
Figure BDA0001232664340000872
)和保留时间为21.378min的峰2(以下也称为HAP-71-P2，2.5913g，
Figure BDA0001232664340000873
Figure BDA0001232664340000874
)收集产物。
根据下文描述的方法进行以上分离的产物的绝对构型确认。
步骤1.(S)-1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-硝基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪的制备(以下称为HA-6-13-1)
Figure BDA0001232664340000871
在室温下，向10mL甲醇中的1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-硝基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪(1g，4mmol)外消旋混合物中加入D-樟脑-10-磺酸(1.84g，8mmol)，然后加入5mL异丙醇。将混合物回流并冷却至室温。将溶液在-20℃放置5天，过滤收集所得固体。将固体在甲醇:异丙醇＝1:2的溶液中重结晶四次，得到220mg无色固体。将所述固体溶解于10mLCH2Cl2，并向其中加入5mL 1M的NaOH溶液，将混合物搅拌0.5h。分离出水层，并进一步用CH2Cl2(2×10mL)萃取。合并有机层，用卤水洗涤，以Na2SO4干燥，蒸发得到产物55mg(以下称为HA-6-13-1)。
Figure BDA0001232664340000875
如下表所示，化合物1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-硝基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪理论上具有两种光学异构体，以下分别称为ZDF2a和ZDF2b。
Figure BDA0001232664340000881
通过对比化合物HA-6-13-1的实验ECD谱和光学异构体ZDF2a及ZDF2b相应的计算ECD谱，确定以上制备的化合物HA-6-13-1的绝对构型。进行MMFF94(默克分子力场94)构象检索，随后使用密度泛函理论以B3LYP/6-31G(d)(Becke 3-Lee-Yang-Parr交换-关联泛函)法再优化，得到11个最低能量的构象异构体。然后通过11个构象异构体ECD谱的玻尔兹曼权重生成对映异构体ZDF2a和ZDF2b的整体ECD谱。HA-6-13-1记录的ECD谱与ZDF2b的计算ECD曲线吻合，但与ZDF2a的相反(见图2)。因此，推断化合物HA-6-13-1具有S绝对构型。
步骤2.(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘-4-甲基苯甲酰胺的制备
Figure BDA0001232664340000882
采用类似于实施例36步骤7中描述的方法，由3-碘-4-甲基苯甲酸和(S)-1-(1,1-二氟-2,3-二氢-6-氨基-1H-茚满-3-基)-4-甲基哌嗪(由HA-6-13-1制备)合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。LCMS:m/z[M+H]+512.1088.
步骤3.(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺(对应于化合物36-(S))的制备
Figure BDA0001232664340000891
采用类似于实施例1中描述的方法，由3-乙炔基咪唑并[1,2-b]哒嗪和(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-碘-4-甲基-苯甲酰胺合成标题化合物。得到为浅黄色固体的产品。HRMS(ESI-TOF+):m/z[M+2H]+2C30H30F2N6O的计算值:264.1219；测定值:264.1216.
以上制备的化合物记录的ECD与以上分离的产物HAP-71-p1(峰1收集的)的曲线吻合，但与产物HAP-71-p2(峰2收集的)的相反(见图3)。因此，推断HAP-71-p1具有S绝对构型。
为了进一步确认产物HAP-71-p1(峰1收集的)与以上制备的(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺(化合物36-(S))具有相同的绝对构型，使制备的化合物36-(S)通过手性柱(CHIRALCELAS-H，0.46cm I.D.×25cm L)，手性柱分析结果与ECD谱一致(请见图4)。
因此，HAP-71-P2的绝对构型是R，如下式所示。
Figure BDA0001232664340000892
实施例41
实施例37中所得化合物37光学异构体的分离
将实施例37中所得外消旋产物(0.1631g)经手性柱(CHIRALCEL AS-H，0.46cmI.D.×25cm L)以SFC(超临界流体色谱)法分离。峰1(0.0566g，
Figure BDA0001232664340000893
Figure BDA0001232664340000894
)和峰2(0.0694g，
Figure BDA0001232664340000895
)处收集的产物(见图5)被证明是分别具有S和R绝对构型的异构体(基于类似于实施例40中所描述的ECD研究进行确定)。
实施例42
实施例38中所得化合物38光学异构体的分离
将实施例36中所得外消旋产物(0.2882g)经手性柱(CHIRALCEL AS-H，0.46cmI.D.×25cm L)以SFC(超临界流体色谱)法分离。峰1(0.1228g，
Figure BDA0001232664340000902
Figure BDA0001232664340000903
)和峰2(0.1472g，
Figure BDA0001232664340000904
)处收集的产物(见图6)被证明是分别具有S和R绝对构型的异构体(基于类似于实施例40中所描述的ECD研究进行确定)。
实施例43
实施例39中所得化合物39光学异构体的分离
将实施例40中所得外消旋产物(100mg)经手性柱(CHIRALCEL AS-H，0.46cmI.D.×25cm L)以SFC(超临界流体色谱)法分离。峰1(40mg，
Figure BDA0001232664340000905
Figure BDA0001232664340000906
)和峰2(43mg，
Figure BDA0001232664340000907
)处收集的产物(见图7)被证明是分别具有S和R绝对构型的异构体(基于类似于实施例40中所描述的ECD研究进行确定)。
生物学试验
本发明化合物的活性可以使用以下试验评估。
细胞死亡试验评估
细胞死亡试验方法：
实验1：
以1.5×105个细胞/ml/孔的量将K562细胞接种在24孔板上，后用100nM剂量的AP-24534和测试化合物将细胞处理48小时。通过在4000rpm离心4min收集细胞，然后用150ulPBS重新悬浮细胞。活细胞通过台盼蓝方法用TC10计数。
结果：
表1 在100nM下杀灭K562细胞的化合物活性(％活细胞相对于对照)
Figure BDA0001232664340000901
Figure BDA0001232664340000911
*AP-24534的结构如下(J.Med.Chem.,2010,53,4701-4719)，
Figure BDA0001232664340000912
实验2：
将K562细胞(2×105个细胞/ml)接种在24孔细胞培养板上并用DMSO或试剂处理。在DMSO或试剂存在下处理48h后，通过在500g离心5分钟收集细胞，然后将细胞重新悬浮在合适体积的PBS中。将10uL细胞悬浮液与10uL台盼蓝溶液混合，活细胞通过TC10(Bio-Rad，Richmond，CA)计数。
结果：
表2 一些代表性化合物IC50值
化合物 IC<sub>50</sub>(nM)
3 3
12 4
13 11
23 16
30 3.6
36 0.87
37 3.4
如上述实验2所示，将IC50值大于0nM而小于20nM的本发明化合物定为“A”级。将IC50值大于等于20nM而小于1000nM的本发明化合物定为“B”级。
实验3：
方法：
本研究评估纯光学异构体体外对人白血病细胞活性的影响。使用帕纳替尼作为阳性对照。本研究中使用两种BCR-ABL-阳性人白血病细胞系K562和KU812。此外，本研究还使用了表达天然的BCR-ABL或T315I-BCR-ABL的Ba/F3细胞转染子，其活性取决于异位表达BCR-ABL。使用表达BCR-ABLT315I的Ba/F3细胞测试待测试化合物对导致伊马替尼(格列卫)抗药性的点突变BCR-ABLT315I的有效性。采用U937和JURKAT(两种BCR-ABL-阴性人白血病细胞系)测试待测试化合物的选择性。
将细胞接种于24孔板，在相应浓度下用药物处理。用96-孔板酶标仪使用基于MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基溴化四唑)的比色检测测量细胞活性。使用两组独立实验的平均值计算IC50值。
结论：BCR-ABL抑制剂对BCR-ABL-阳性和-阴性人白血病细胞系和一组Ba/F3细胞转染子细胞活性的影响(IC50为平均值±S.E.M，nM)。
结果显示，无论是外消旋化合物还是具有绝对构型R或者S的纯异构体，均对白血病细胞或者表达天然BCR-ABL的BaF3细胞显示活性。特别是，化合物36-(S)和38-(S)与参比化合物帕纳替尼相比，对白血病细胞或者表达天然BCR-ABL的BaF3细胞的活性相似。而对于表达BCR-ABLT315I的BaF3细胞，化合物36-(S)和38-(S)比参比化合物帕纳替尼表现更好，意味着这两种化合物在治疗对伊马替尼(第一代酪氨酸激酶抑制剂)抗药的患者时可能更有效。此外，化合物36-(S)和38-(S)在BCR-ABL-阴性人白血病细胞系U937和JURKAT上功效要差。这意味着，化合物36-(S)和38-(S)在临床使用时可能对BCR-ABL具有更好的选择性和更小的副作用。
表3 BCR-ABL抑制剂对BCR-ABL-阳性和-阴性人白血病细胞系和Ba/F3细胞转染子细胞活性的影响(IC50为平均值±S.E.M，nM)
Figure BDA0001232664340000921
实验4：
方法
将含有BCR-ABL的T315I突变异构体的鼠科祖B细胞系Ba/F3皮下注射至NODSCID小鼠(NOD.CB17-Prkdcscid/J)。给小鼠口服测试化合物14天。使用帕纳替尼作为阳性药物，剂量为10或20mg/kg/天；化合物36-(S)剂量为10或20mg/kg/天；化合物38-(S)剂量为5mg/kg/天。每周测量三次小鼠两个维度的肿瘤体积和体重(体积＝L×W2×0.5)。
结果：
药物的TGI(肿瘤生长抑制)为：帕纳替尼20mg/kg/天，94％；帕纳替尼10mg/kg/天，75％；化合物36-(S)20mg/kg/天，108％；化合物36-(S)10mg/kg/天，105％；化合物38-(S)5mg/kg/天，81％。TGI大于100％表示用药物治疗14天后的肿瘤小于它们的原始尺寸。小鼠重量在以上述剂量治疗期间未明显改变。结果也示出于图8的A和B中。
从动物实验的结果，我们可以得出：剂量为10mg/kg/天的化合物36-(S)比剂量为20mg/kg/天的帕纳替尼活性更佳。剂量为5mg/kg/天的化合物38-(S)比剂量为10mg/kg/天的帕纳替尼活性更佳。总的来说，在BaF3/BCR-ABLT315I小鼠异种移植模型中，化合物36-(S)和38-(S)比帕纳替尼的活性更好。
以上的结果表明，本发明的化合物，优选由式VIII表示的外消旋化合物或者光学异构体，及更优选由式VIII表示的具有S绝对构型的化合物，对抑制蛋白激酶(例如Bcr-Abl、c-Kit、c-Src、FGFR1、FLT3、LYN、PDGFR，特别是Bcr-Able(T315I))、抑制或治疗癌症(例如慢性粒细胞白血病(CML)、急性淋巴性白血病(ALL)、非小细胞肺癌(NSCLC)、胃肠基质肿瘤(GIST)、急性髓性白血病(AML)，特别是慢性髓性白血病(CML))和抑制和/或治疗炎症(例如哮喘、类风湿关节炎)具有良好的功效。

Claims (8)

1.一种具有绝对构型S的式(VIII)的化合物，或其药学可接受的盐：
其中，
R1选自：
Figure FDA0002089584370000012
R2独立地是H、卤素、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3或NHCOCH2CH3；
R3是
R4独立地是氢、卤素、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3或NHCOCH2CH3；
R5独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
R6独立地是氢、卤素、CF3、OCF3、NH2、NReRf、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、OCH3或NHCOCH2CH3；
R7独立地是氢、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
Re和Rf独立地是C1-C6烷基；
m是0、1或2；
n是0、1或2；
s是0、1或2；
u是0、1或2；且
q是1。
2.如权利要求1所述的化合物，所述化合物由式(VIIIa)或(VIIIb)所示：
Figure FDA0002089584370000021
3.根据权利要求2所述的化合物，其中R2是氢、CH3、F或Cl；R3是
Figure FDA0002089584370000022
R5是环丙基、环丁基或异丙基；R6是氢或CF3；且s是0，u是0，m是0或1，n是1，q是1。
4.化合物，其中所述化合物是：
(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-甲基苯甲酰胺；
(S)-3-(2-(2-(环丙胺基)嘧啶-5-基)乙炔基)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-4-甲基苯甲酰胺；
(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氯苯甲酰胺；
(S)-N-(1,1-二氟-2,3-二氢-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-1H-茚满-6-基)-3-(2-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)乙炔基)-4-氟苯甲酰胺。
5.一种药物组合物，包含至少一种权利要求1-4任一项所述的化合物或其药学可接受的盐，以及一种或多种药学可接受的载体和/或添加剂。
6.权利要求1-4任一项所述的化合物或其药学可接受的盐在制备用于抑制蛋白激酶的药物中的用途，其中所述蛋白激酶为Bcr-Abl。
7.权利要求1-4任一项所述的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗癌症的药物中的用途，其中所述癌症选自慢性粒细胞白血病(CML)、急性淋巴性白血病(ALL)和急性粒细胞白血病(AML)。
8.权利要求1-4任一项所述的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗炎症的药物中的用途，其中所述炎症选自哮喘和类风湿性关节炎。
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