CN106596425A - 一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法 - Google Patents

一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法 Download PDF

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Abstract

一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法，包括以下步骤：(1)选择油菜绿色角果，准确测量角果皮表面积和称量角果皮重量；(2)用Yaxin‑1241叶面积仪扫描角果皮表面积，并换算为I值和F值；然后按照分光光度法测定角果皮光合色素总量Cabx、叶绿素总量Cab及叶绿素a、b含量Ca、Cb；接着设C＝Ki·I或C＝Qi·F，C为色素含量，则Ki＝C/I，Qi＝C/F；根据以上测定的C值和I、F值，确定系数Ki、Qi；(3)用叶面积仪扫描待测油菜角果皮表面积，换算为I、F值；然后根据I、F值及系数Ki、Qi，计算待测角果皮的光合色素含量Cabx、Cab、Ca及Cb。本发明结果准确、可靠；且增加了样品量，减少了取样误差，便于操作，环境安全，并节省检测成本。

Description

一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法
技术领域
本发明涉及一种检测光合色素含量的方法，具体涉及一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法。
背景技术
光合色素在植物光合作用中参与光能的吸收、传递并引起原初光化学反应。高等植物光合色素主要有三大类：叶绿素a，b和类胡萝卜素。叶绿素在红光区和蓝光区、类胡萝素在蓝光区有最大吸收。叶绿素a、b在红光区最大吸收峰分别在663nm、645nm附近，在蓝紫光区分别在429nm、453nm附近。
根据光合色素对光的吸收，植物光合色素含量的测定方法主要有紫外-可见分光光度法(分光光度法)、高效液相色谱法、近红外法、叶绿素测定仪法(SPAD法)等。其中分光光度法最常用；并且分光光度法、高效液相色谱法必须对样品进行研磨和有机溶剂浸提等前处理；高效液相色谱法、近红外仪测定法对仪器要求较高，这些仪器价格昂贵。SPAD法所用仪器简单、便宜，但缺点是每次测量的面积很小，结果受植物光合器官被测部位及测量点组织厚度影响很大，代表性较差。例如：SPAD502叶绿素仪的测量面积只有2mm×3mm(厚度不超过1.2mm)。
油菜终花后，大部分叶片脱落，叶片光合作用衰退，此时油菜光合主要依靠角果。角果皮光合色素含量高低与其光合效率显著正相关，直接影响籽粒产量及籽粒含油量等。目前用传统的分光光度法测定油菜角果皮光合色素含量时，由于角果皮纤维素含量较高，增加了样品研磨难度，费时费力；并采用乙醇或丙酮提取色素，由于乙醇、丙酮容易挥发且对人体有害，测定过程造成环境污染。另外，油菜角果皮表面不平整、厚度不均匀，因而采取SPAD法测定油菜角果皮色素含量时，误差较大，代表性差。
综上，研究一种设备简单、操作简便快捷，结果准确的油菜角果皮光合色素含量的测定方法，对研究油菜角果光合特性及提高油菜籽粒产量，都具有重要意义。
本发明所涉及的Yaxin-1241叶面积仪由北京雅欣理仪科技有限公司生产，是一种用于快速测量植物叶片的面积、周长、长度等数据的仪器，仪器设计原理简单，无复杂机械部件，便于携带，易于维护。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，提供一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法。
本发明解决其技术问题采用的技术方案是，一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法，包括以下步骤：
(1)选择油菜绿色角果，去掉籽粒及隔膜，展平，裁成长方形样品块，准确测量该角果皮样品外表面的面积和称量重量；
(2)用Yaxin-1241叶面积仪扫描(1)中角果皮样品表面积，得到扫描值，根据步骤(1)中测定的角果皮表面积和称量的角果皮重量，换算为I值，单位为“扫描值/cm2”，和F值，单位为“扫描值/g”；然后按照分光光度法测定该角果皮光合色素总量Cabx、叶绿素总量Cab及叶绿素a、b含量Ca、Cb，单位为mg/m2或mg/g FW；接着设C＝Ki·I或C＝Qi·F，其中，C为色素含量，代表Cabx、Cab及Ca、Cb，Ki、Qi为系数，则Ki＝C/I，Qi＝C/F；根据分光光度法测定的色素含量C和扫描测得的I、F值，确定系数Ki、Qi；
(3)用Yaxin-1241叶面积仪扫描待测的油菜角果皮表面积，得到扫描值，换算为I、F值(I、F值定义同上)；然后根据I、F值及步骤(2)得到的系数Ki、Qi，依据C＝Ki·I或C＝Qi·F，计算待测角果皮光合色素总量Cabx、叶绿素总量Cab及叶绿素a、b含量Ca、Cb，单位：mg/m2或mg/g FW。
进一步，步骤(1)中，将油菜绿色角果，从果柄处摘下，沿开裂线剥开，去掉籽粒及隔膜，展平，裁成2.50×0.50cm2长方形方块，用精密刻度尺准确测量待测角果皮外表面的面积，并用千分之一精度的天平称量角果皮重量。
本发明采用叶面积仪扫描角果皮表面积并换算成角果皮色素含量，结果准确、可靠；且增加了样品量，减少了取样误差，便于操作，环境安全，并节省检测成本。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
(1)选择油菜绿色角果，从果柄处摘下，沿开裂线剥开，去掉籽粒及隔膜，展平，裁成2.50×0.50cm2长方形样品块，用精密刻度尺准确测量该角果皮样品外表面的面积，并用千分之一天平称量该角果皮样品块的重量；
(2)用Yaxin-1241叶面积仪扫描(1)中角果皮表面积，得到扫描值，并换算为I值(单位：扫描值/cm2)和F值(单位：扫描值/g)；然后按照分光光度法测定该角果皮样品光合色素含量C(代表Cabx、Cab及Ca、Cb)，单位为mg/m2或mg/g FW；接着设C＝Ki·I或C＝Qi·F，则Ki＝C/I，Qi＝C/F；最后根据以上分光光度法测定的色素含量C和扫描测得的I、F值，确定系数Ki、Qi；
(3)用Yaxin-1241叶面积仪扫描待测的油菜角果皮表面积，得到扫描值，换算为I、F值(I、F值定义同上)，然后根据I、F值及步骤(2)中得到的系数Ki、Qi，按照C＝Ki·I或C＝Qi·F，计算待测角果皮光合色素总量Cabx、叶绿素总量Cab及叶绿素a、b含量Ca、Cb，单位：mg/m2或mg/g FW。
统计分析结果显示，扫描值I、F与分光光度法测定的角果皮色素总量Cabx、叶绿素总量Cab及叶绿素a、b含量Ca、Cb含量间相关系数均大于0.01水平临界值，极显著正相关。根据I、F值及系数Ki、Qi计算的油菜角果皮光合色素总量、叶绿素总量及叶绿素a、b含量，与分光光度法测定的含量间无显著差异(个别结果除外)；按照角果皮色素含量大小排列待测油菜品种，则以上两种不同方法测定的色素含量的品种排列顺序一致，且品种间色素含量差异显著性一致。

Claims (2)

1.一种检测油菜角果皮光合色素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选择油菜绿色角果，去掉籽粒及隔膜，展平，裁成长方形样品块，准确测量该角果皮样品外表面的面积和称量重量；
(2)用Yaxin-1241叶面积仪扫描(1)中角果皮样品表面积，得到扫描值，根据步骤(1)中测定的角果皮表面积和重量，换算为I值，单位为“扫描值/cm2”，和F值，单位为“扫描值/g”；然后按照分光光度法测定该角果皮光合色素总量Cabx、叶绿素总量Cab及叶绿素a、b含量Ca、Cb，单位为mg/m2或mg/g FW；接着设C＝Ki·I或C＝Qi·F，其中，C为色素含量，代表Cabx、Cab及Ca、Cb，Ki、Qi为系数，则Ki＝C/I，Qi＝C/F；根据分光光度法测定的色素含量C和扫描测得的I、F值，可确定系数Ki、Qi；
(3)用Yaxin-1241叶面积仪扫描待测的油菜角果皮表面积，得到扫描值，换算为I、F值，I、F值定义同上；然后根据I、F值及步骤(2)得到的系数Ki、Qi，依据C＝Ki·I或C＝Qi·F，计算待测角果皮光合色素总量Cabx、叶绿素总量Cab及叶绿素a、b含量Ca、Cb，单位：mg/m2或mg/gFW。
2.根据权利要求1所述的检测油菜角果皮光合色素含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，将油菜绿色角果，从果柄处摘下，沿开裂线剥开，去掉籽粒及隔膜，展平，裁成2.50×0.50cm2长方形方块，用精密刻度尺准确测量待测角果皮外表面的面积，并用千分之一精度的天平称量角果皮重量。
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