CN106591260B - 一种新型定向制备内切菊粉酶的方法 - Google Patents

一种新型定向制备内切菊粉酶的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106591260B
CN106591260B CN201710136233.8A CN201710136233A CN106591260B CN 106591260 B CN106591260 B CN 106591260B CN 201710136233 A CN201710136233 A CN 201710136233A CN 106591260 B CN106591260 B CN 106591260B
Authority
CN
China
Prior art keywords
endoinulase
inulin
ethyl alcohol
solution
enzyme
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710136233.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106591260A (zh
Inventor
李鑫
王伟
勇强
赖晨欢
周瑾
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Forestry University
Original Assignee
Nanjing Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Forestry University filed Critical Nanjing Forestry University
Priority to CN201710136233.8A priority Critical patent/CN106591260B/zh
Publication of CN106591260A publication Critical patent/CN106591260A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106591260B publication Critical patent/CN106591260B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
    • C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01007—Inulinase (3.2.1.7)

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

一种新型定向制备内切菊粉酶的方法，其特征在于，将菊粉溶于乙醇的水溶液中，充分混匀后，调节溶液pH值至4.0‑5.0，加入微生物产天然菊粉酶，经静置后，离心得固形物，加入蒸馏水复溶固形物，即得仅含内切菊粉酶活力的酶液。本发明方法可以高效拆分天然菊粉酶系中的内切菊粉酶与外切菊粉酶，定向制备仅含内切菊粉酶活力的酶液，用于水解菊粉制备低聚果糖。本发明大幅度提高酶解制备低聚果糖的得率，降低产品中对人体无特异性生理活性的单糖含量，为微生物产天然菊粉酶制备低聚果糖提供了高效、低成本的生产方法。

Description

一种新型定向制备内切菊粉酶的方法
技术领域
本发明涉及生物工程中微生物产酶制备低聚糖领域，特别涉及一种新型定向制备内切菊粉酶的方法。
背景技术
菊粉，又称菊糖，广泛分布于自然界中，作为糖类储存物大都存在植物当中，例如菊芋、菊苣、大蒜、洋葱等，它是一种植物多糖，是D-果糖的聚合物，是D-果糖以β(2-1)糖苷键连接而成的链状多糖，在分子末端以β(1-2)键连接D-葡萄糖。菊粉的分子式具有GFn结构(G：葡萄糖基，F：果基，n：果糖基的单位数目)。菊粉的聚合度范围是2-60，平均分子量在5500左右。菊粉微溶于冷水，在热水中能很快溶解，与碘不呈颜色反应，无还原性，有旋光性，在水中为左旋。菊粉为白色或乳白色无定形粉末，是水溶性很好的膳食纤维。工业上一般是从菊芋中提取低聚果糖。
低聚果糖广泛存在于各种植物中，在人们日常食用的食物中，如菊芋、香蕉、大蒜、蜂蜜、洋葱、小麦等中都有低聚果糖的存在，是优良的水溶性膳食纤维，也是完全符合益生元标准的典型双歧因子，同样也是人体保健功能研究试验最为深入详尽的寡糖之一，以其优越的生理功能成为近十年来国际食品市场上广泛流行的功能性食品配料。工业上生产低聚果糖一般是以下两种方法：一是以蔗糖为底物在果糖转移酶作用下获得低聚果糖，产物为GFn型；二是以菊粉为底物在菊粉酶作用下获得低聚果糖，产物为GFn和Fn型。在果糖转移酶作用下，蔗糖会转化成葡萄糖和低聚果糖，但是葡萄糖是果糖转移酶的抑制剂，所用以蔗糖为底物在果糖转移酶作用下来获得果糖的方法成本高，效率低。大部分工业上直接采用以菊粉为底物在菊粉酶作用下来制备低聚果糖。
菊粉酶是一类催化菊粉水解的复合酶类，它按其水解果糖苷键的方式不同，分为内切菊粉酶和外切菊粉酶两类。外切菊粉酶作用于菊粉链果糖末端的糖苷键逐一水解释放出果糖，直至最后的葡萄糖，主要产物为果糖；内切菊粉酶仅作用于菊粉，随机断开菊粉链内部的糖苷键，水解产物主要是菊粉型的低聚三糖、低聚四糖和低聚五糖。菊粉酶水解菊粉的机理是菊粉多糖首先在内切菊粉酶从菊粉分子内部随机切断β-2，1-呋喃果糖苷键，得到低聚果糖，接着外切菊粉酶从低聚果糖分子的非还原末端依次水解β-D果糖苷键，生成一分子果糖和少一个果糖分子的果聚糖，最终产物为果糖和葡萄糖。由菊粉酶酶解机理可以看出，如果菊粉酶系中外切菊粉酶的含量越低，则在水解过程中，由内切菊粉酶作用得到的低聚果糖向葡萄糖、果糖方向转化就越少，而低聚果糖最终的得率就会相应的提高。而一般而言，在微生物分泌的菊粉酶酶系结构中，外切菊粉酶比例高于内切菊粉酶。
为了解决上述问题，获得低外切菊粉酶活力的高内切菊粉酶活力成为近年该领域的研究热点之一。目前多数具有工业化潜力的微生物分泌的菊粉酶，均含有较多的外切菊粉酶。低外切菊粉酶活力有利于制备低聚果糖，产生极少的果糖和葡萄糖。为了获得低外切菊粉酶活力的内切菊粉酶，国内外研究中，较多采用色谱法制备内切菊粉酶，但此类技术成本高，难于用于工业化生产。Nakamura等人(USP 4990451)报道利用两步水溶性有机溶剂沉淀法从天然菊粉酶中制备内切菊粉酶。该方法的机理是通过水溶性有机溶剂沉淀蛋白的方式，获得含有内切菊粉酶活力的沉淀蛋白，首先经低浓度有机溶剂沉淀去除含有外切菊粉酶活力的蛋白，再调高有机溶剂浓度沉淀回收含有内切菊粉酶活力的蛋白，内切菊粉酶活力/外切菊粉酶活力的比值(I/S比)显著提高。此方法是通过两步过程，获得含有内切菊粉酶活力的沉淀蛋白，虽然I/S比较高，但沉淀蛋白中仍然含有外切菊粉酶活力。此外，还有报道采用物理、化学诱变或者基因工程方式改造微生物，得到突变菌株或者基因工程菌，达到只分泌内切菊粉酶或者减少微生物分泌外切菊粉酶。
发明内容
发明目的：针对微生物分泌的菊粉酶酶系结构中同时含有内切菊粉酶和外切菊粉酶，菊粉酶水解菊粉的机理是菊粉多糖首先由内切菊粉酶从菊粉多糖分子内部随机切断β-2，1-呋喃果糖苷键，得到低聚果糖，再由外切菊粉酶从低聚果糖分子的非还原末端依次水解β-D果糖苷键，生成一分子果糖和少一个果糖分子的果聚糖，最终产物为果糖和葡萄糖。若要获得更高得率的低聚果糖，则必须降低外切菊粉酶的酶活力。这项发明主要针对于用于天然菊粉酶酶解菊粉制备低聚果糖的不足，寻找一种由微生物产天然菊粉酶系降低外切菊粉酶酶活的方法。
技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种新型定向制备内切菊粉酶的方法，将菊粉溶于乙醇的水溶液中，充分混匀后，调节溶液pH值至4.0-5.0，加入微生物产天然菊粉酶，在0-5℃条件下静置后，离心得固形物，加入蒸馏水复溶固形物，即得仅含内切菊粉酶活力的酶液。
其中，所述乙醇的水溶液，乙醇的质量百分比浓度为50％-70％，优选55％-65％，最优选60％。
其中，菊粉在乙醇的水溶液中的浓度为20-80g/L，优选为30-60g/L，最优选50g/L。
其中，用盐酸调节溶液pH值至4.0-5.0。
其中，天然菊粉酶的加入量以内切菊粉酶为基准，内切菊粉酶的加入量为15U每克菊粉。
其中，微生物产天然菊粉酶中包含内切菊粉酶与外切菊粉酶。所述的微生物包括但不限于黑曲霉，可以按照现有技术自行制备也可直接从市场上购买。
本发明的机理是根据菊粉酶水解菊粉的催化作用机制，当内切菊粉酶与长链菊粉相结合，形成内切菊粉酶与长链菊粉复合物。同时，由于水溶性有机溶剂的存在，降低长链菊粉在溶液中的溶解度，内切菊粉酶与长链菊粉复合物随即从溶液中沉淀出来，而外切菊粉酶仍然停留在溶液中，以此拆分天然菊粉酶系中的内切菊粉酶与外切菊粉酶。
一种制备低聚果糖的方法，包括如下步骤：
(1)将菊粉溶于乙醇的水溶液中，充分混匀后，调节溶液pH值至4.0-5.0，加入微生物产天然菊粉酶，在0-5℃条件下静置后，离心得固形物，加入蒸馏水复溶固形物，即得仅含内切菊粉酶活力的酶液；
(2)将步骤(1)得到的含内切菊粉酶活力的酶液与菊粉水溶液进行酶解反应得到低聚果糖。
菊粉酶降解菊粉的过程，先由内切菊粉酶与长链菊粉相结合，随机切断长链菊粉，生成短链菊粉；再由外切菊粉酶作用于短链菊粉的果糖末端，释放果糖和葡萄糖。本发明采用一定浓度的乙醇/水溶液溶解菊粉，拆分天然菊粉酶系中的内切菊粉酶与外切菊粉酶，从而提高酶法制备低聚果糖得率，显著减少副产物葡萄糖与果糖的生成。
有益效果：本发明方法可以高效拆分天然菊粉酶系中的内切菊粉酶与外切菊粉酶，定向制备仅含内切菊粉酶活力的酶液，用于水解菊粉制备低聚果糖。本发明大幅度提高酶解制备低聚果糖的得率，降低产品中对人体无特异性生理活性的单糖含量，为微生物产天然菊粉酶制备低聚果糖提供了高效、低成本的生产方法。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。
以下实施例中：
天然菊粉酶来源：黑曲霉产天然菊粉酶，购自Sigma-Aldrich公司。
内切菊粉酶的酶活定义为：以菊粉为底物，每分钟产生1μmol还原糖所需要的酶量，即为1个内切菊粉酶活力单位。
外切菊粉酶的酶活定义为：以蔗糖为底物，每分钟产生1μmol还原糖所需要的酶量，即为1个外切菊粉酶活力单位。
内切菊粉酶和外切菊粉酶的检测方法为：
(1)内切菊粉酶的检测方法：在25ml刻度试管中加入0.1ml适当稀释的酶液0.9ml和5％(w/v)菊粉悬浮液(用0.1mol/L、pH 4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液配制)，盖上塑料布，用橡皮筋扎紧后置于恒温水浴器中，于60℃下保温10min，取出，加入1.5ml DNS试剂和1ml蒸馏水，在100℃沸水中煮沸5min，冷却至室温后，加水定容至25ml，充分摇匀后于520nm波长下测定吸光度A值。反应生成的果糖量根据果糖标准曲线求得。
(2)外切菊粉酶的检测方法：在25ml刻度试管中加入0.1ml适当稀释的酶液0.9ml和5％(w/v)蔗糖液(用0.1mol/L、pH4.6的醋酸-醋酸钠缓冲液配制)，盖上塑料布，用橡皮筋扎紧后置于恒温水浴器中，于60℃下保温30min，取出，加入1.5ml DNS试剂1ml蒸馏水，在100℃沸水中煮沸5min，冷却至室温后，加水定容至25ml，充分摇匀后于520nm波长下测定吸光度A值。反应生成的果糖量根据果糖标准曲线求得。
实施例1
在三角瓶中加入50wt％乙醇的水溶液，加入菊粉，使菊粉浓度达到80g/L；0.1mol/L盐酸调节pH值为5.0；再加入天然菊粉酶酶液6.5mL(包含9.34U/mL内切菊粉酶活与10.63U/mL外切菊粉酶活)，在0-5℃条件下静置后，离心，去除上清液，得乳白色固形物，用蒸馏水复溶乳白色固形物至6.5mL，采用DNS法测定复溶溶液中的酶活。经测定，内切菊粉酶的酶活为8.22U/mL，外切菊粉酶的酶活为0U/mL，菊粉酶酶系中仅剩内切菊粉酶，内切菊粉酶回收率达到88％。
实施例2
在三角瓶中加入70wt％乙醇的水溶液，加入菊粉，使菊粉浓度达到20g/L；0.1mol/L盐酸调节pH值为4.0；再加入天然菊粉酶酶液1.6mL(包含9.34U/mL内切菊粉酶活与10.63U/mL外切菊粉酶活)，在0-5℃条件下静置后，离心，去除上清液，得乳白色固形物，用蒸馏水复溶乳白色固形物至1.6mL，采用DNS法测定复溶溶液中的酶活。经测定，内切菊粉酶的酶活为8.04U/mL，外切菊粉酶的酶活为0U/mL，菊粉酶酶系中仅剩内切菊粉酶，内切菊粉酶回收率达到86％。
实施例3
在三角瓶中加入60wt％乙醇的水溶液，加入菊粉，使菊粉浓度达到50g/L；0.1mol/L盐酸调节pH值为4.6；再加入天然菊粉酶酶液4mL(包含9.34U/mL内切菊粉酶活与10.63U/mL外切菊粉酶活)，在0-5℃条件下静置后，离心，去除上清液，得乳白色固形物，用蒸馏水复溶乳白色固形物至4mL，采用DNS法测定复溶溶液中的酶活。经测定，内切菊粉酶的酶活为8.51U/mL，外切菊粉酶的酶活为0U/mL，菊粉酶酶系中仅剩内切菊粉酶，内切菊粉酶回收率达到91％。
实施例4
20g/L菊粉溶液，调节pH值为4.6，加入实施例3得到的内切菊粉酶酶液1mL，充分混合。在50℃、170rpm的条件下水解，水解结束后水解物离心得到清液，即为低聚果糖水解糖液。经分析检测，低聚果糖水解得率为95.81％。
低聚果糖水解得率计算方法为：
低聚果糖水解得率(％)＝(C1/C)×100
其中：C--初始菊粉含量，g/L
C1--酶解后酶解液中低聚果糖含量，g/L。
对照例
20g/L菊粉溶液，调节pH值为4.6，加入黑曲霉分泌的天然菊粉酶1mL(包含9.34U/mL内切菊粉酶活与10.63U/mL外切菊粉酶活)，充分混合。在50℃、170rpm的条件下水解，水解结束后水解物离心得到清液，即为低聚果糖水解糖液。经分析检测，低聚果糖水解得率为29.33％。
低聚果糖水解得率计算方法为：
低聚果糖水解得率(％)＝(C1/C)×100
其中：C--初始菊粉含量，g/L
C1--酶解后酶解液中低聚果糖含量，g/L。

Claims (5)

1.一种定向制备内切菊粉酶的方法，其特征在于，将菊粉溶于乙醇的水溶液中，充分混匀后，调节溶液pH值至4.0-5.0，加入微生物产天然菊粉酶，在0-5℃条件下静置后，离心得固形物，加入蒸馏水复溶固形物，即得仅含内切菊粉酶活力的酶液；
其中，所述乙醇的水溶液，乙醇的质量百分比浓度为50%-70%；
菊粉在乙醇的水溶液中的浓度为20-80g/L；
用盐酸调节溶液pH值至4.0-5.0；
天然菊粉酶的加入量以内切菊粉酶为基准，内切菊粉酶的加入量为15 U每克菊粉。
2.根据权利要求1所述的定向制备内切菊粉酶的方法，其特征在于，所述乙醇的水溶液，乙醇的质量百分比浓度为55%-65%。
3.根据权利要求1所述的定向制备内切菊粉酶的方法，其特征在于，菊粉在乙醇的水溶液中的浓度为30-60g/L。
4.根据权利要求1所述的定向制备内切菊粉酶的方法，其特征在于，微生物产天然菊粉酶中包含内切菊粉酶与外切菊粉酶。
5.一种制备低聚果糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将菊粉溶于乙醇的水溶液中，充分混匀后，调节溶液pH值至4.0-5.0，加入微生物产天然菊粉酶，在0-5℃条件下静置后，离心得固形物，加入蒸馏水复溶固形物，即得仅含内切菊粉酶活力的酶液；
（2）将步骤（1）得到的含内切菊粉酶活力的酶液与菊粉水溶液进行酶解反应得到低聚果糖；
其中，所述乙醇的水溶液，乙醇的质量百分比浓度为50%-70%；
菊粉在乙醇的水溶液中的浓度为20-80g/L；
用盐酸调节溶液pH值至4.0-5.0；
天然菊粉酶的加入量以内切菊粉酶为基准，内切菊粉酶的加入量为15 U每克菊粉。
CN201710136233.8A 2017-03-09 2017-03-09 一种新型定向制备内切菊粉酶的方法 Active CN106591260B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710136233.8A CN106591260B (zh) 2017-03-09 2017-03-09 一种新型定向制备内切菊粉酶的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710136233.8A CN106591260B (zh) 2017-03-09 2017-03-09 一种新型定向制备内切菊粉酶的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106591260A CN106591260A (zh) 2017-04-26
CN106591260B true CN106591260B (zh) 2019-08-06

Family

ID=58587395

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710136233.8A Active CN106591260B (zh) 2017-03-09 2017-03-09 一种新型定向制备内切菊粉酶的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106591260B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114350724A (zh) * 2022-01-28 2022-04-15 山东农业大学 一种酶解制备大蒜低聚糖的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105238770A (zh) * 2015-11-13 2016-01-13 南京林业大学 一种原位定向拆分制备内切菊粉酶的方法及其制备低聚果糖的工艺

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105238770A (zh) * 2015-11-13 2016-01-13 南京林业大学 一种原位定向拆分制备内切菊粉酶的方法及其制备低聚果糖的工艺

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Continuous production of fructose syrups from inulin by immobilized inulinase from Aspergillus niger mutant 817;ToyohikoNakamura等;《Journal of Fermentation and Bioengineering》;19950519;第80卷(第2期);164-169
黑曲霉Uγ-2菊粉酶酶制剂的生产工艺;祝彦忠等;《中国食品学报》;20111130;第11卷(第8期);113-117

Also Published As

Publication number Publication date
CN106591260A (zh) 2017-04-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9422372B2 (en) Production of resistant dextrins
US7923437B2 (en) Water soluble β-glucan, glucosamine, and N-acetylglucosamine compositions and methods for making the same
Alonso-Sande et al. Glucomannan, a promising polysaccharide for biopharmaceutical purposes
CN1283668C (zh) 水溶性壳寡糖的制备方法
US8222232B2 (en) Glucosamine and N-acetylglucosamine compositions and methods of making the same fungal biomass
US9938550B1 (en) Aureobasidium pullulans, culturing medium and method for producing β-glucan, a culture of Aureobasidium pullulans and a composition comprising the same
CN106387923B (zh) 一种富含半乳甘露聚糖的可溶性膳食纤维及其制备方法
US20100273735A1 (en) Soluble, highly branched glucose polymers for enteral and parenteral nutrition and for peritoneal dialysis
JP2018507856A (ja) グルコースの生体利用効率が低い繊維を多く含むマルトオリゴ糖、その製造方法、食品および動物飼料におけるその使用
Nwe et al. Characterization of chitosan and chitosan–glucan complex extracted from the cell wall of fungus Gongronella butleri USDB 0201 by enzymatic method
WO2022160495A1 (zh) 一种水解半乳甘露聚糖制备小分子半乳甘露聚糖和半乳甘露低聚糖的方法及其专用复合酶
Cho et al. Production of inulooligosaccharides from chicory extract by endoinulinase from Xanthomonas oryzae No. 5
CN112806574B (zh) 一种高络合指数豌豆淀粉-乳化剂复合物的制备方法
CN112877385A (zh) 一种酶法改性淀粉-甘油酯复合物及其制备方法
CN107312807A (zh) 一种海带来源的褐藻功能寡糖的酶解制备方法
WO2013053071A1 (zh) 酶解半纤维素制备高纯度甘露低聚糖的生产方法
US20180187226A1 (en) Aureobasidium pullulans, culturing medium and method for producing b-glucan, a culture of aureobasidium pullulans and a composition comprising the same
CN111978421A (zh) 一种桑树桑黄多糖及其制备和用途
Zhengyu et al. Production of inulooligosaccharides by endoinulinases from Aspergillus ficuum
CN110862461B (zh) 一种抗性糊精制备方法
CN106591260B (zh) 一种新型定向制备内切菊粉酶的方法
US11549133B2 (en) Preparation method of amylodextrin
KR101926180B1 (ko) 지소화성 고분지 알파 리밋 덱스트린 및 그 제조방법
CN110747245B (zh) 一种利用复合酶制备麦芽低聚糖浆的方法
EP4368697A1 (en) High immune yeast cell wall, and preparation method therefor and use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant