CN106540314A - 一种类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶。本发明的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶包括类人胶原蛋白0.1～1重量％，卡波姆0.5～1重量％，甘油20～30重量％，尿囊素0.1～0.5重量％，透明质酸钠0.005～0.02重量％，氢氧化钠0.09～0.1重量％，羟苯乙酯0.1～0.5重量％，薄荷脑0.01～0.05重量％，聚山梨醇酯80 0.4～0.6重量％，以及余量的水。在将本发明的类人胶原蛋白凝胶施用于粘膜破损的鼻腔表皮时，能更显著地加快类人胶原蛋白的透皮吸收速度。从而，本发明的类人胶原蛋白凝胶能够提供更好的滋养、刺激粘膜细胞再生，促进受损鼻腔粘膜的修复。

Description

一种类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶

技术领域

本发明涉及类人胶原蛋白敷料，具体涉及特别适用于鼻腔粘膜修复的包含类人胶原蛋白的凝胶，属于保健/医疗器械领域。

背景技术

类人胶原蛋白是由中国西北大学的范代娣教授发明的(参见中国专利申请公开说明书CN1371919A)，因此又称作范氏重组胶原蛋白或范氏类人胶原蛋白(Fan’s Human-likeCollagen，FHLC)。类人胶原蛋白是一种高生物相容性的重组胶原蛋白，目前广泛应用于医疗或美容领域。

另一方面，胶原蛋白敷料产品用于例如鼻腔、肛肠、妇科部位粘膜的滋润及保护的情况下，胶原蛋白敷料产品的使用往往需要在室内进行(例如医院的耳鼻科、肛肠科及妇科等)，作为产品使用者希望能够在短时间内即完成使用(使用者可以接受的医疗的时间通常为30分钟左右)，而作用时间的延长使得医疗占用了产品使用者的大量时间，这减小了胶原蛋白敷料产品的适用范围及市场竞争力。从这个角度来讲，亟需透皮吸收速度快的胶原蛋白敷料产品。但遗憾的是，相关研究更关注胶原蛋白的透皮吸收率，而未关注胶原蛋白的透皮吸收速度。

对此，本发明人发明了一种类人胶原蛋白粘膜修复凝胶，其可能通过构成适宜的微环境，使得类人胶原蛋白的透皮吸收速度加快，详见中国专利申请公开号CN105709267A。该专利文献中还公开了所述类人胶原蛋白粘膜修复凝胶可用于例如鼻粘膜、肛肠粘膜或妇科部位粘膜的修复。

发明内容

然而，本发明人经过更为深入的研究发现，在上述类人胶原蛋白粘膜修复凝胶的研制过程中，仅是以体肤作为类人胶原蛋白透皮吸收速度的考察场所，并未重点考虑该类人胶原蛋白粘膜修复凝胶的实际应用部位的局部微环境，造成了类人胶原蛋白透皮吸收速度虽有所提高，但尚未尽善尽美。

鉴于现有技术中存在的上述问题，本发明的目的是提供一种特别适用于鼻腔粘膜修复的、能够促进类人胶原蛋白快速透皮吸收的凝胶。

即，本发明如下。

1.一种类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶，其包括:

2.项1所述的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶在制备用于鼻腔粘膜修复的医疗用敷料中的用途。

3.一种制备项1所述的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的方法，该方法包括：

步骤A：准备A相，所述A相由0.5～1重量％的卡波姆、5～15重量％的甘油、0.005～0.02重量％的透明质酸钠、0.1～0.5重量％的尿囊素以及余量的水组成；

步骤B：准备B相，所述B相是由0.09～0.1重量％的氢氧化钠和1～3重量％的水组成的氢氧化钠水溶液；

步骤C：准备C相，所述C相是0.1～0.5重量％的羟苯乙酯与5～25重量％的甘油的混合物；

步骤D：准备D相，所述D相由0.01～0.05重量％的薄荷脑以及0.4～0.6重量％的聚山梨醇酯80组成；

步骤E：准备E相，所述E相是类人胶原蛋白液，其包含使得所述的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶中类人胶原蛋白的含量为0.1～1重量％的类人胶原蛋白，介质为水，且所述类人胶原蛋白与所述水的重量比为1:1～20；以及

步骤F：将所述B相加入所述A相中并搅拌均匀，然后加入所述C相和所述E相并搅拌均匀，于80～85℃保温60～120分钟，保温结束后冷却至30～35℃，再加入分散好的D相，搅拌均匀后冷却至室温；

以所述类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的总重量作为100重量％。

本发明取得了以下技术效果：在将本发明的类人胶原蛋白凝胶施用于粘膜破损的鼻腔表皮时，能更显著地加快类人胶原蛋白的透皮吸收速度。从而，本发明的类人胶原蛋白凝胶能够提供更好的滋养、刺激粘膜细胞再生，促进受损鼻腔粘膜的修复。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行详细的说明。

本发明提供一种类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶(本发明的类人胶原蛋白凝胶)，其包括:

在本说明书中，类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶是指包含类人胶原蛋白作为有效成分的、适用于鼻腔粘膜修复的凝胶。

在本说明书中，类人胶原蛋白是指中国专利申请公开CN1371919A的权利要求1所述的重组胶原蛋白，可以采用例如该中国专利申请公开CN1371919A中公开的基因工程表达方法来制备。类人胶原蛋白是由中国西北大学的范代娣教授发明的，因此又称作范氏重组胶原蛋白或范氏类人胶原蛋白(Fan’s Human-like Collagen，FHLC)。

卡波姆是合成的丙烯酸与烯丙基蔗糖或烯丙基季戊四醇醚的高分子聚合物。对于所述卡波姆没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些卡波姆，例如可以使用广州康乔汉普药业有限公司生产的卡波姆，CAS No：9003-01-4。

对于所述甘油没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些甘油，例如可以使用湖南尔康制药股份有限公司生产的甘油，CAS No：56-81-5。

对于所述尿囊素没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些尿囊素，例如可以使用湖南九典制药股份有限公司生产的尿囊素，CAS No：97-59-6。

对于所述透明质酸钠没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些透明质酸钠，例如可以使用华熙福瑞达生物医药有限公司生产的透明质酸钠，产品代码：HA-T。

对于所述壳聚糖没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些壳聚糖，例如可以使用浙江金壳药业有限公司生产的壳聚糖,CAS No：9012-76-4。

对于所述羟苯乙酯没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些羟苯乙酯，例如可以使用湖南尔康制药股份有限公司生产的羟苯乙酯,CAS No：120-47-8。

对于所述薄荷脑没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些薄荷脑，例如可以使用安徽丰乐香料有限责任公司生产的薄荷脑，CAS No：89-78-1。

对于所述聚山梨醇酯80没有特殊限制，可以使用本领域技术人员通常在化妆品或医用敷料中使用的那些聚山梨醇酯80，例如可以使用湖南尔康制药股份有限公司生产的聚山梨醇酯80，EC编号：500-019-9。

在将本发明的类人胶原蛋白凝胶施用于鼻腔受损部位时，使得类人胶原蛋白的透皮吸收速度加快，类人胶原蛋白30分钟透皮吸收率在现有产品的基础上进一步显著提高(甚至超过50％)，其原因可能是由于构成了更为适宜的微环境。

本发明的类人胶原蛋白凝胶特别适合在医疗/保健领域用于鼻腔粘膜修复。在用于医疗/保健领域的鼻腔粘膜修复用途时，本发明的类人胶原蛋白凝胶本身可以作为敷料使用，也可以再与其他载体或辅料组合制成其他类型的敷料或者其他剂型(例如栓剂等)。

对于本发明的类人胶原蛋白凝胶的制备方法没有特殊限制，其制备方法可以包括：

步骤A：准备A相，所述A相由0.5～1重量％的卡波姆、5～15重量％的甘油、0.005～0.02重量％的透明质酸钠、0.1～0.5重量％的尿囊素以及余量的水组成；

步骤B：准备B相，所述B相是由0.09～0.1重量％的氢氧化钠和1～3重量％的水组成的氢氧化钠水溶液；

步骤C：准备C相，所述C相是0.1～0.5重量％的羟苯乙酯与25～5重量％的甘油的混合物；

步骤D：准备D相，所述D相由0.01～0.05重量％的薄荷脑以及0.4～0.6重量％的聚山梨醇酯80组成；

步骤E：准备E相，所述E相是类人胶原蛋白液，其包含使得所述的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶中类人胶原蛋白的含量为0.1～1重量％的类人胶原蛋白，介质为水，且所述类人胶原蛋白与所述水的重量比为1:1～20；以及

步骤F：将所述B相加入所述A相中并搅拌均匀，然后加入所述C相和所述E相并搅拌均匀，于80～85℃保温60～120分钟，保温结束后冷却至30～35℃，再加入分散好的D相，搅拌均匀后冷却至室温；

以所述类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的总重量作为100重量％。

这里，类人胶原蛋白液包括类人胶原蛋白的水溶液和类人胶原蛋白的水分散液。

这里，对所述步骤A、B、C、D、E、F的顺序没有特殊限制，可以以任意顺序先后进行或同时进行。

这里，对于搅拌的方式没有特殊限制，只要能够搅拌均匀即可。

本发明的类人胶原蛋白凝胶可以置于包装容器中。对构成包装容器的材料没有特殊限制，其包括但不限于陶瓷、玻璃、金属、塑料等。包装容器可以密闭也可以不密闭，但优选密闭。

实施例

以下，通过实施例对本发明进行更具体的说明，但本发明不受这些实施例的限制。

下述实施例和对比例中使用的类人胶原蛋白是按中国专利申请公开CN1371919A所述方法制备的范氏类人胶原蛋白(由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成)，确认其分子量为90kDa。

为了能够观察类人胶原蛋白的透皮吸收行为，采用常规方法用FITC(fluoresceinisothiocyanate，异硫氰酸荧光素)对其进行了荧光标记。

如无特别说明，下述内容中的“％”是指“重量％”。

实施例1.本发明的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的制备

成分：卡波姆0.6％，甘油25％，尿囊素0.2％，透明质酸钠0.01％，氢氧化钠0.096％，羟苯乙酯0.2％，聚山梨醇酯80 0.5％，薄荷脑0.02％，类人胶原蛋白0.5％，水余量。

工艺操作：

①将卡波姆、透明质酸钠、甘油(10重量％)、尿囊素加入水中并搅拌分散均匀，作为A相；将氢氧化钠溶于水中制成氢氧化钠水溶液，作为B相；将羟苯乙酯与甘油混合并加热搅拌至完全溶解，作为C相；将薄荷脑与聚山梨醇酯80混合并加热至完全溶解，作为D相；准备类人胶原蛋白液作为E相。

②在A相中加入B相，搅拌均匀后加入C相和E相，搅拌均匀后，于82℃保温90分钟，保温结束后冷却至30℃，加入D相，搅拌均匀后冷却至室温。

对比例1.其他类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的制备

成分：卡波姆1.2％，甘油30％，尿囊素0.2％，透明质酸钠0.01％，氢氧化钠0.12％，羟苯乙酯0.2％，聚山梨醇酯80 0.8％，薄荷脑0.02％，类人胶原蛋白0.5％，水余量。

工艺操作：

①将卡波姆、透明质酸钠、甘油(10重量％)、尿囊素加入水中并搅拌分散均匀，作为A相；将氢氧化钠溶于水中制成氢氧化钠水溶液，作为B相；将羟苯乙酯与甘油混合并加热搅拌至完全溶解，作为C相；将薄荷脑与聚山梨醇酯80混合并加热至完全溶解，作为D相；准备类人胶原蛋白液作为E相。

②在A相中加入B相，搅拌均匀后加入C相和E相，搅拌均匀后，于82℃保温90分钟，保温结束后冷却至30℃，加入D相，搅拌均匀后冷却至室温。

对比例2.其他类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的制备

成分：卡波姆0.3％，甘油10％，透明质酸钠0.01％，类人胶原蛋白0.5％，聚山梨醇酯80 0.1％，水89.09％。

工艺操作：

①先将卡波姆和透明质酸钠加入水中，然后缓慢加入甘油后不断搅拌至完全分散开。随后加入类人胶原蛋白水溶液(10重量％)，边加边搅拌至完全溶解，加热至80-85℃，保温30min；

②将上述混合液降温至50-60℃，加入聚山梨醇酯80，搅拌均匀后，冷却至室温。

胶原蛋白30分钟透皮吸收率的测定

将已经在实验室适应饲养环境的豚鼠用橄榄油将甲苯-2，4-二异氰酸酯配成浓度为10％溶液作为致敏剂，滴鼻，每侧5μL，每日1次，连续7天，然后每2日1次，共4次，致敏时间共15天，建立豚鼠变应性鼻炎模型(参考吉晓滨等，豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜超微结构的改变，(参考吉晓滨等，豚鼠变应性鼻炎模型鼻黏膜超微结构的改变，2008年8月第15卷第4期)。

15天后可确认鼻粘膜明显破损，将上述实施例和对比例的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶以相同量推注入豚鼠鼻腔，置入完成后正常饲养，于0.5h时将各组豚鼠5只处死，切除试验组织部位并清洗干净，采用荧光酶标仪对清洗液中的胶原蛋白进行定量分析，其就是未能透皮的胶原蛋白。

其中，透皮率这样计算：透皮率＝(注入的胶原蛋白总量－未能透皮的胶原蛋白量)/注入的胶原蛋白总量。

对于各实施例和对比例的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶，将上述透皮率测试结果的平均值示于下述表1中。

表1各胶原蛋白凝胶的透皮吸收率

No	胶原蛋白30分钟透皮吸收率
		实施例1	63％
对比例1	49％
		对比例2	38％

工业实用性

根据本发明，能够提供一种特别适用于鼻腔粘膜修复的类人胶原蛋白凝胶。

Claims (3)

1.一种类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶，其包括:

2.权利要求1所述的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶在制备用于鼻腔粘膜修复的医疗用敷料中的用途。

3.一种制备权利要求1所述的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的方法，该方法包括：

步骤A：准备A相，所述A相由0.5～1重量％的卡波姆、5～15重量％的甘油、0.005～0.02重量％的透明质酸钠、0.1～0.5重量％的尿囊素以及余量的水组成；

步骤B：准备B相，所述B相是由0.09～0.1重量％的氢氧化钠和1～3重量％的水组成的氢氧化钠水溶液；

步骤C：准备C相，所述C相是0.1～0.5重量％的羟苯乙酯与5～25重量％的甘油的混合物；

步骤D：准备D相，所述D相由0.01～0.05重量％的薄荷脑以及0.4～0.6重量％的聚山梨醇酯80组成；

步骤E：准备E相，所述E相是类人胶原蛋白液，其包含使得所述的类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶中类人胶原蛋白的含量为0.1～1重量％的类人胶原蛋白，介质为水，且所述类人胶原蛋白与所述水的重量比为1:1～20；以及

步骤F：将所述B相加入所述A相中并搅拌均匀，然后加入所述C相和所述E相并搅拌均匀，于80～85℃保温60～120分钟，保温结束后冷却至30～35℃，再加入分散好的D相，搅拌均匀后冷却至室温；

以所述类人胶原蛋白鼻腔粘膜修复凝胶的总重量作为100重量％。