CN106432239A - 嘌呤类化合物、组合物及用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属医药技术领域，涉及嘌呤类化合物、组合物及其用途，通式(Ⅰ)所示的化合物及其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物，或其组合物，治疗BTK酪氨酸激酶引起的疾病，特别是用于治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或慢性淋巴细胞白血病。
Description
技术领域
本发明属医药技术领域，涉及通式(Ⅰ)所示嘌呤类化合物及其组合物，其中通式(Ⅰ)的各取代基如说明书中的定义。本发明还涉及所述嘌呤类化合物、组合物通过抑制蛋白酪氨酸激酶治疗肿瘤的用途。
背景技术
蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTKs)通过控制细胞信号传导通路调节着细胞的生长、分化、凋亡等一系列生理生化过程。蛋白酪氨酸激酶功能的失调，特别是它们的异常表达不但导致细胞增殖调节发生紊乱，进而导致肿瘤发生，而且还与肿瘤的侵袭和转移，肿瘤新生血管的生成，肿瘤的放化疗抗性密切相关。受体型酪氨酸激酶是一类横跨细胞膜相对较大的激酶，其具有配体结合的胞外结构域、跨膜结构域和起激酶作用—在磷酸化特定酪氨酸残基并且由此影响细胞增殖的胞内结构域。在一般人类癌症中(如乳腺癌、胃肠道癌症、血癌、卵巢癌、支气管癌症或者肺癌)蛋白酪氨酸激酶均异常表达，其已成为抗肿瘤药物研发的重要靶点之一。
表皮生长因子受体酪氨酸激酶(epidermal growth factor receptor tyrosinekinase，EGFR)是最早发现的蛋白酪氨酸激酶之一，EGFR的胞内区有ATP结合位点，EGFR抑制剂可以竞争性与ATP结合位点相结合，从而抑制EGFR的磷酸化过程，阻断下游信号的传导，进而抑制肿瘤细胞的生长、分化和转移。EGFR作为抗肿瘤靶点的生化过程已被阐明，其晶体结构和活性部位也已比较清楚，以此为靶点的药物吉非替尼(gefitinib)、埃罗替尼(erlotinib)、阿法替尼(afatinib)等已经应用于临床，且随着EGFR结构和活性关系的深入研究，许多效果更佳优秀的EGFR抑制剂(EP0566226、WO9961428、WO0051587、WO0375947、WO0132651、WO9633980、WO9630347、US7709479、US6716847、US6593333、US6251912、CN201080060451.4、CN201110191525.4等)已被发现。然而这些药物不可避免地存在着抗耐药性差的问题。研究表明：氨基酸The790到Met790的突变是此类药物产生耐药性的主要诱因。有临床案例数据显示，大约有50％的患者获得性耐药都源于T790M位点的突变所致。因此开发抗耐药性更强、毒性更小、活性更强的新型EGFR抑制剂具有非常重要现实价值。本发明以喹唑啉类EGFR抑制剂为基本骨架，通过计算机模拟技术发现，在喹唑啉母核的4-苯胺基部分引入疏水性金刚烷基，显著增强了与EGFR靶酶Met790位点的相互作用，因此设计合成了通式(Ⅰ)所示金刚烷基化合物。抗肿瘤活性筛选显示，大部分此类化合物具有较强的抑制非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖能力，部分化合物显示出比吉非替尼更加优良的抗EGFR活性，且部分化合物对EGFR产生的耐药性(T790M突变)也表现出了一定的效果。作为一类结构新颖的分子，本发明中的化合物具有开发成新型高效EGFR抑制剂的潜力，对治疗相关的肿瘤疾病有较大的应用价值。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供嘌呤类化合物、组合物，提供疗效更好的治疗肿瘤、癌症的药物和治疗方法。
10.本发明的目的是提供通式(Ⅰ)所示的化合物及其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物：
其中：
R1选自氢、甲氧基、甲基、氯、氟、氰基；
R2选自吗啡啉、1-甲基哌嗪、1-乙基哌嗪、1-乙酰基哌嗪、1-甲磺酰基哌嗪或者下述的A、B、C三种基团；
其中，上述A、B、C结构中R3选自吗啡啉、1-甲基哌嗪、1-乙基哌嗪、1-乙酰基哌嗪、1-甲磺酰基哌嗪。
进一步的，本发明公开了优选的通式(Ⅰ)化合物：
(1)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-吗啡啉苯基氨基)]丙烯酰胺；
(2)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-吗啡啉苯基氨基)]丙烯酰胺；
(3)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(4)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(5)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-乙基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(6)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-乙基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(7)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[4-(1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基]]丙烯酰胺；
(8)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[2-甲氧基-4-(1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基]]丙烯酰胺；
(9)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[4-(2-甲基-1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基]]丙烯酰胺；
(10)N-[9-(2-苯基氨基-8-苯胺基)嘌呤-2-(4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(11)N-[9-(2-苯基氨基-8-苯胺基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(12)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-吗啡啉)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(13)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲氧基-4-(1-吗啡啉)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(14)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-氯-4-(1-吗啡啉)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(15)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-甲基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(16)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲氧基-4-(1-甲基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(17)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-氯-4-(1-甲基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(18)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-乙基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(19)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲氧基-4-(1-乙基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(20)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-氯-4-(1-乙基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(21)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-吗啡啉)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(22)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-甲氧基-4-(1-吗啡啉)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(23)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲基-4-(1-吗啡啉)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(24)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-甲基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(25)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-甲氧基-4-(1-甲基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(26)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲基-4-(1-甲基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(27)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-乙基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(28)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-甲氧基-4-(1-乙基哌嗪)丙氧基] 苯基氨基]]丙烯酰胺；
及其上述化合物所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物。
进一步的，本发明的还公开了一种由通式(Ⅰ)所述化合物或其药学上可接受的盐或药学上可接受的载体组成的组合物；
本发明公开的通式(Ⅰ)的所述化合物为碱，其中所需盐形式通过本领域已知的合适方法制备，包括用无机酸处理游离碱、有机酸处理游离碱。
进一步的，所述无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸；所述有机酸包括乙酸、三氟乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羟基乙酸、水杨酸，例如天冬氨酸或谷氨酸，芳香酸，例如苯甲酸或肉桂酸，磺酸，例如p-甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸等。药学上可接受的盐的实施例包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、丙酸盐、癸酸盐、辛酸盐、丙烯酸盐、甲酸盐、异丁酸盐、己酸盐、庚酸盐、丙酸盐(propiolates)、草酸盐、丙二酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐。
进一步的，本发明公开的药物组合物含有至少一种前述公开的通式(Ⅰ)所示的化合物及其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物。
本文所用的“可药用赋形剂”是指包含在所给定形式中的或与所述组合物相容的原料、组合物或载体。当混合时，各种赋形剂必须与药物组合物的其它成分相容，使得给予患者时可能基本降低本发明的化合物的有效性的相互作用以及可能导致药物组合物不可药用的相互作用得以避免。另外，各种赋形剂必须当然具有足够高的纯度，以使之可药用。
进一步的，所述的药物组合物还包括赋形剂，所述赋形剂包括稀释剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、悬浮剂、乳化剂、甜味剂、调味剂、味道掩蔽剂、着色剂、抗结块剂、湿润剂、螯合剂、増塑剂、粘度増加剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂中至少一种。
本领域技术人员将理解一些可药用赋形剂可适用于多于一种功能，并且可取决于所述赋形剂在所述制剂中的存在量以及其它成分存在于所述制剂中而适用于其它功能。
进一步的，本发明提供一种所述的药用组合物的用途：用于治疗BTK酪氨酸激酶引起的疾病。
优选的，所述的药用组合物用于治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或慢性淋巴细胞白血病。
本发明的有益效果在于提供一种新的嘌呤类化合物、组合物，提供疗效更好的治疗肿瘤的药物和治疗方法。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的具体实施方式作进一步描述，以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术实施例，而不能以此来限制本发明的保护范围。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或/和质谱(MS)来确定的。NMR位移以δ(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用液相色谱质谱联用仪(生产商：AB SCIEX，型号：API3200)。
HPLC的测定使用安捷伦12OODAD高压液相色谱仪(SunfireC1815O×4.6mm色谱柱)和Waters 2695-2996高压液相色谱仪(GiminiC1815O×4.6mm色谱柱)。
激酶平均抑制率及IC50值的测定用多功能酶标仪(生产商：Perkin Elmer，型号：Enspire2300)。
薄层层析硅胶板使用烟台黄海HSGF254或青岛GF254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胺板采用的规格是0.15mm-0.2mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm-0.5mm。
柱层析一般使用烟台黄海硅胶200-300目硅胶为载体。
本发明使用的原料主要购自可购买自国药集团化学试剂有限公司，北京偶合科技有限公司、阿拉丁化学试剂有限公司、达瑞化学品等公司。
实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。
实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为20℃-30℃。
本发明采用的技术实施例如下：
实施例1
以N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-吗啡啉苯基氨基))丙烯酰胺来阐明此类2-苯基氨基嘌呤类化合物的合成方法。
反应路径如下：
步骤A:
取1(13.81g,0.1mol)和碳酸氢钠(12.6g,0.15mol)于30ml乙腈中，搅拌下缓慢滴加丙烯酰氯(9.5g,0.105mol)，滴加完毕后室温反应5分钟，待反应结束后加入400ml水，析出白色固体，抽滤，得产物18g。(产率:93.8％)
步骤B:
取3(6g,31.23mmol)和氯化铵(3.3g,62.46mmol)于反应瓶，加入MeOH20ml和水20ml，搅拌下加入铁粉(7g,125mmol)，升温60℃反应2小时，趁热抽滤，滤渣用乙酸乙酯洗涤，滤液乙酸乙酯萃取(150ml x3)，有机层饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压蒸干，得黄色固体4.5g。(产率:88％)
步骤C:
将5-硝基尿嘧啶(6.28g,0.040mol)与三氯氧磷(26ml)混合，搅拌下慢慢加入N,N-二甲基苯胺(8ml)，然后升温至110℃反应8h，反应结束后，蒸除多余的三氯氧磷，加入硅胶，拌样至呈膨松状，硅胶柱层析，浓缩，得黄色油状液体6.2g。(产率:94％)
步骤D:
取6(10.96g,59.75mmol)溶于10ml的二氧六环中，加入DIPEA(11.58g,89.63mmol)，于冰浴下搅拌，取4(9.19g,59.75mmol)溶于20ml的二氧六环中，缓慢滴加到反应体系，室温搅拌30分钟。反应结束加入400ml水，析出红色固体，抽滤，烘干，得产物17.5g。(产率:94.8％)
步骤E:
取8(7g,49.65mmol)和9(8.65g,99.29mmol)溶于20ml的二氧六环中，升温100℃反应10小时，反应结束冷却室温，加入300ml水，析出黄色固体，抽滤，得产物7.13g。(产率:69％)
步骤F:
取10(7.13g,34.26mmol)和氯化铵(3.66g,68.52mmol)于反应瓶，加入MeOH 30ml和水30ml，搅拌下加入铁粉(7.67g,137.04mmol)，升温60℃反应2小时，趁热抽滤，滤渣用正丁醇洗涤，滤液正丁醇萃取(150mlx3)，有机层饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压蒸干，得黑褐色固体4.15g。(产率:68％)
步骤G:
取7(4.15g,23.30mmol)和DIPEA(4.52g,34.95mmol)溶于20ml二氧六环中，慢慢加入11(7.45g,23.3mmol)，室温下搅拌5小时，反应完毕加水200ml，析出红褐色固体，抽滤，烘干，得固体10g。(产率:93％)
步骤H:
取12(5.0g,10.83mmol)和氯化铵(1.16g,21.67mmol)于反应瓶，加入MeOH 20ml和水20ml，搅拌下加入锌粉(2.83g,43.32mmol)，升温60℃反应1小时，趁热抽滤，水相析出白色固体，用碳酸氢钠调节至碱性，抽滤，烘干，得固体3.08g。(产率:66％)
步骤I:
取13(450.00mg,1.04mmol)和无水硫酸钠(296.60mg,2.08mmol)于1.5ml原甲酸三乙酯中，升温130℃反应4小时，80℃过夜反应，反应结束，硅胶拌样，柱层析(DCM:MeOH＝25:1)，得白色固体121mg。(产率:26.8％)
实施例2
以N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-吗啡啉)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺来阐明此类化合物的合成方法。
反应路径如下：
根据下文所述方案，步骤和中间物制备标题化合物。
步骤A-D与实例1方案中的中间物制备步骤相同。
步骤E:
取8(10g,72mmol)溶于30ml乙腈中，加入碳酸钾(14.9g,108mmol)和碘化钾(1.2g,7.2mmol)，缓慢滴加1-溴-3-氯丙烷(13.6g,86mmol)，升温70℃反应2小时，反应完毕后抽干溶剂，加入水400ml，析出黄白色固体，抽滤，得固体14g。(产率:90％)
步骤F:
取10(4g,18.56mmol)溶于20mlDMF中，加入碳酸钾(3.8g,27.84mmol)和碘化钾(309mg,1.9mmol)，慢慢加入吗啡啉(1.9g,22.27mmol)，升温100℃反应5小时，反应结束后冷却至室温，加入水200ml，加入少许食盐，析出白色絮状固体，抽滤，得固体3.7g。(产率:75％)
步骤G、H、I、J与实例1方案中的步骤F、G、H、I的中间物制备步骤相同，
实施例3
以N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-[(1-吗啡啉)乙酰基]苯氧基]氨基]]丙烯酰胺来阐明此类的合成方法。
反应路径如下：
根据下文所述方案，步骤和中间物制备标题化合物。
步骤A-D与实例1方案中的中间物制备步骤相同。
步骤E:
取8(20g,143.88mmol)溶于150ml乙腈中，加入碳酸钾(29g,215.83mmol),碘化钾(2.4g,14.39mmol)，缓慢滴加溴乙酸乙酯(24g,143.88 mmol)，升温70℃反应2小时，反应完毕后抽干溶剂，水洗抽滤得黄白色固体27g。(产率:85％)
步骤F:
取10(6g,26.67mmol)于50ml水中，慢慢加入氢氧化钾(3g,53.3mmol)，升温50℃反应1小时，反应结束后冷却至室温，用5mmol/l的稀盐酸调节pH至弱酸性，析出白色固体，抽滤，80℃烘干2小时，得固体3.3g。(产率:63％)。
步骤G:
取11(3.3g,16.75mmol)于15ml氯化亚砜中，升温80℃回流2小时，反应完毕抽干氯化亚砜，得白色固体2.1g。(产率:58％)
步骤H:
取12(2.1g,9.7mmol)溶于20ml乙腈中，加入碳酸氢钠(1.6g,19.4mmol)，慢慢加入吗啡啉(1.01g,11.64mmol)，升温60℃反应5小时，反应完毕后抽干溶剂，加水200ml，未析出固体，水相用乙酸乙酯萃取(100mlx3)，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸干得黄白色半固体1.81g。(产率:70％)
步骤I与实例1方案中的步骤F的中间物制备步骤相同。
步骤J与实例1方案中的步骤G的中间物制备步骤相同。
步骤K与实例1方案中的步骤H的中间物制备步骤相同。
步骤L与实例1方案中的步骤I的中间物制备步骤相同。
根据以上方法制备(1)-(28)化合物，所制备化合物的理化数据如下：
(1)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-吗啡啉苯基氨基))丙烯酰胺(I-1)
产量：121mg；白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.85(br,4H)，3.68(br,4H)，5.65(d,J＝10.0Hz,1H)，6.14(d,J＝16.8Hz,1H)，6.27(m,2H)，6.37(m,2H)，6.45(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.91(m,1H)，7.18(m,1H)，7.57(m,1H)，7.59(m,1H)，8.65(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C24H23N7O2，[M+H]+计量值：442.49，测量值：442.32。
(2)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-吗啡啉苯基氨基))丙烯酰胺(I-2)
产量：70mg；白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.87(br,4H)，3.69(br,4H)，3.72(s,3H)，5.70(d,J＝10.0Hz,1H)，5.83(m,1H)，5.91(m,1H)，6.15(d,J＝16.8Hz,1H)，6.18(m,1H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.96(m,1H)，7.19(m,1H)，7.59(m,1H)，7.61(m,1H)，8.00(s,1H)，8.67(s,1H)，8.73(s,1H)；HRMS(ESI)for C25H25N7O3，[M+H]+计量值：472.51，测量值：472.40。
(3)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-甲基哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-3)
产量：30mg；黄白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.25(s,3H)，2.57(br,4H)，3.42(br,4H)，5.70(d,J＝10.0Hz,1H)，6.15(d,J＝16.8Hz,1H)，6.26(m,2H)，6.31(m,2H)，6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.97(m,1H)，7.21(m,1H)，7.59(m,1H)，7.61(m,1H)，8.00(s,1H)，8.67(s,1H)，8.70(s,1H)；HRMS(ESI)for C25H26N8O，[M+H]+计量值：455.53，测量值：455.38。
(4)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-甲基哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-4)
产量：37mg；黄白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.26(s,3H)，2.60(br,4H)，3.44(br,4H)，3.71(s,3H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，5.84(m,1H)，5.92(m,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.18(m,1H)，6.47(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.20(m,1H)，7.57(m,1H)，7.60(m,1H)，8.07(s,1H)，8.66(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C26H28N8O2，[M+H]+计量值：485.55，测量值：485.39。
(5)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-乙基哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-5)
产量：20mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.0(t,J＝6.8Hz,3H)，2.39(q,2H)，2.57(br,4H)，3.42(br,4H)，5.73(d,J＝10.0Hz,1H)，6.18(d,J＝16.8Hz,1H)，6.26(m,2H)，6.31(m,2H)，6.50(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.97(m,1H)，7.23(m,1H)，7.61(m,1H)，7.62(m,1H)，8.00(s,1H)，8.66(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C26H28N8O，[M+H]+计量值：469.55，测量值：469.41。
(6)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-乙基哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-6)
产量：20mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.0(t,J＝6.8Hz,3H)，2.41(q,2H)，2.58(br,4H)，3.42(br,4H)，3.72(s,3H)，5.73(d,J＝10.0Hz,1H)，5.84(m,1H)，5.91(m,1H)，6.16(m,1H)，6.18(d,J＝16.8Hz,1H)，6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.21(m,1H)，7.60(m,1H)，7.61(m,1H)，8.00(s,1H)，8.67(s,1H)，8.71(s,1H)；HRMS(ESI)for C27H30N8O2，[M+H]+计量值：499.58，测量值：499.42。(7)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-7)
产量：50mg；灰色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.82(s,3H)，2.77(br,4H)，3.45(br,4H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.26(m,2H)，6.32(m,2H)，6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.97(m,1H)，7.21(m,1H)，7.59(m,1H)，7.60(m,1H)，8.00(s,1H)，8.68(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C25H26N8O3S，[M+H]+计量值：519.59，测量值：519.40。
(8)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-(1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-8)
产量：53mg；灰色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.82(s,3H)，2.77(br,4H)，3.45(br,4H)，3.72(s,3H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，5.83(m,1H)，5.92(m,1H)，6.16(m,2H)，6.17(d,J＝16.8Hz,1H)，6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.21(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.00(s,1H)，8.69(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C26H28N8O4S，[M+H]+计量值：549.62，测量值：549.43。
(9)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(2-甲基-1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-9)
产量：72mg；灰色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.18(s,3H)，2.83(s,3H)，2.77(m,2H)，3.02(m,1H)，3.45(m,2H)，3.51(m,2H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.17(d,J＝16.8Hz,1H)，6.27(m,2H)，6.32(m,1H)，6.48(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.99(m,1H)，7.19(m,1H)，7.59(m,1H)，7.61(m,1H)，8.00(s,1H)，8.67(s,1H)，8.70(s,1H)；HRMS(ESI) for C26H28N8O3S，[M+H]+计量值：533.62，测量值：533.38。
(10)N-(9-(2-苯基氨基-8-苯胺基)嘌呤-2-(4-甲基哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-10)
产量：30mg；灰色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.26(s,3H)，2.56(br,4H)，3.46(br,4H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.17(d,J＝16.8Hz,1H)，6.28(m,2H)，6.33(m,2H)，6.45(m,2H)，6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.62(m,1H)，6.99(m,2H)，7.02(m,1H)，7.21(m,1H)，7.61(m,1H)，7.62(m,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C31H31N9O，[M+H]+计量值：546.64，测量值：546.45。
(11)N-(9-(2-苯基氨基-8-苯胺基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-甲基哌嗪苯基氨基))丙烯酰胺(I-11)
产量：32mg；灰色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.25(s,3H)，2.58(br,4H)，3.47(br,4H)，3.72(s,3H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，5.86(m,1H)，5.91(m,1H)，6.16(m,1H)，6.17(d,J＝16.8Hz,1H)，6.45(m,2H)，6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.62(m,1H)，7.00(m,2H)，7.02(m,1H)，7.22(m,1H)，7.61(m,1H)，7.62(m,1H)，8.70(s,1H)；HRMS(ESI)for C32H33N9O2，[M+H]+计量值：576.66，测量值：576.50。
(12)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(1-吗啡啉)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-12)
产量：51mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.36(br,4H)，3.63(s,2H)，3.68(br,4H)，5.69(d,J＝10.0Hz,1H)，6.14(d,J＝16.8Hz,1H)，6.32(m,2H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.80(m,2H)，6.99(m,1H)，7.18(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.65(s,1H)，8.70(s,1H)；HRMS(ESI)for C25H25N7O2，[M+H]+计量值：456.51，测量值：456.32。
(13)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-(1-吗啡啉)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-13)
产量：55mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.35(br,4H)，3.61(s,2H)，3.66(br,4H)，3.72(s,3H)，5.70(d,J＝10.0Hz,1H)，6.15(d,J＝16.8Hz,1H)，6.22(m,1H)，6.32(m,1H)，6.38(m,1H)，6.46(dd,J＝10.0, 16.8Hz,1H)，6.95(m,1H)，7.19(m,1H)，7.59(m,1H)，7.61(m,1H)，8.00(s,1H)，8.66(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C26H27N7O3，[M+H]+计量值：486.54，测量值：486.35。
(14)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(3-氯-4-(1-吗啡啉)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-14)
产量：53mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.35(br,4H)，3.61(s,2H)，3.67(br,4H)，5.70(d,J＝10.0Hz,1H)，6.15(d,J＝16.8Hz,1H)，6.21(m,1H)，6.34(m,1H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.76(m,1H)，6.97(m,1H)，7.20(m,1H)，7.59(m,1H)，7.60(m,1H)，8.00(s,1H)，8.67(s,1H)，8.70(s,1H)；HRMS(ESI)for C25H24ClN7O2，[M+H]+计量值：490.96，测量值：490.62。
(15)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(1-甲基哌嗪)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-15)
产量：31mg；黄白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.26(s,3H)，2.45(br,4H)，2.47(br,4H)，3.62(s,2H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.33(m,2H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.80(m,2H)，6.97(m,1H)，7.21(m,1H)，7.60(m,1H)，7.62(m,1H)，8.00(s,1H)，8.68(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C26H28N8O，[M+H]+计量值：469.55，测量值：469.35。
(16)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-(1-甲基哌嗪)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-16)
产量：31mg；黄白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.26(s,3H)，2.45(br,4H)，2.47(br,4H)，3.62(s,2H)，3.74(s,3H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.22(m,1H)，6.31(m,1H)，6.36(m,1H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.97(m,1H)，7.21(m,1H)，7.60(m,1H)，7.62(m,1H)，8.00(s,1H)，8.68(s,1H)，8.71(s,1H)；HRMS(ESI)for C27H30N8O2，[M+H]+计量值：499.58，测量值：499.41。
(17)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(3-氯-4-(1-甲基哌嗪)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-17)
产量：28mg；黄白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ2.26(s,3H)，2.46(br,4H)，2.47(br,4H)，3.63(s,2H)，5.70(d,J＝10.0Hz,1H)，6.15(d,J＝16.8Hz,1H)，6.22(m,1H)，6.34(m,1H)，6.47(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.76(m,1H)，6.98(m,1H)，7.19(m,1H)，7.60(m,1H)，7.62(m,1H)，8.00(s,1H)，8.66(s,1H)，8.70(s,1H)；HRMS(ESI)for C26H27ClN8O，[M+H]+计量值：504.00，测量值：504.07。
(18)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(1-乙基哌嗪)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-18)
产量：41mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.0(t,J＝6.8Hz,3H)，2.39(q,2H)，2.45(br,4H)，2.47(br,4H)，3.62(s,2H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.33(m,2H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.79(m,2H)，6.99(m,1H)，7.22(m,1H)，7.59(m,1H)，7.61(m,1H)，8.00(s,1H)，8.67(s,1H)，8.70(s,1H)；HRMS(ESI)for C27H30N8O，[M+H]+计量值：483.58，测量值：483.35。
(19)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-(1-乙基哌嗪)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-19)
产量：45mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.0(t,J＝6.8Hz,3H)，2.40(q,2H)，2.45(br,4H)，2.46(br,4H)，3.62(s,2H)，3.72(s,3H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.18(d,J＝16.8Hz,1H)，6.23(m,1H)，6.33(m,1H)，6.38(m,1H)，6.47(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.99(m,1H)，7.20(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.00(s,1H)，8.69(s,1H)，8.71(s,1H)；HRMS(ESI)for C28H32N8O2，[M+H]+计量值：513.61，测量值：513.50。
(20)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(3-氯-4-(1-乙基哌嗪)甲基苯基氨基))丙烯酰胺(I-20)
产量：40mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.0(t,J＝6.8Hz,3H)，2.40(q,2H)，2.45(br,4H)，2.46(br,4H)，3.62(s,2H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.18(d,J＝16.8Hz,1H)，6.23(m,1H)，6.35(m,1H)，6.47(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.76(m,1H)，7.01(m,1H)，7.17(m, 1H)，7.60(m,1H)，7.62(m,1H)，8.00(s,1H)，8.69(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)forC27H29ClN8O，[M+H]+计量值：518.03，测量值：518.10。
(21)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(1-吗啡啉)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-21)
产量：20mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.80(q,2H)，2.35(t,J＝6.8Hz,2H)，2.37(br,4H)，3.68(br,4H)，3.93(t,J＝6.8Hz,2H)，5.69(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.34(m,2H)，6.47(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.51(m,2H)，6.98(m,1H)，7.19(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.66(s,1H)，8.71(s,1H)；HRMS(ESI)for C27H29N7O3，[M+H]+计量值：500.56，测量值：500.32。
(22)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(3-甲氧基-4-(1-吗啡啉)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-22)
产量：26mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.80(q,2H)，2.33(s,3H)，2.35(t,J＝6.8Hz,2H)，2.37(br,4H)，3.68(br,4H)，3.94(t,J＝6.8Hz,2H)，5.69(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.22(m,1H)，6.31(m,1H)，6.34(m,1H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.18(m,1H)，7.59(m,1H)，7.60(m,1H)，8.68(s,1H)，8.71(s,1H)；HRMS(ESI)for C28H31N7O4，[M+H]+计量值：530.59，测量值：530.39。
(23)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲基-4-(1-吗啡啉)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-23)
产量：17mg；类白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.81(q,2H)，2.35(t,J＝6.8Hz,2H)，2.37(br,4H)，3.67(br,4H)，3.73(s,3H)，3.93(t,J＝6.8Hz,2H)，5.69(d,J＝10.0Hz,1H)，5.84(m,1H)，5.90(m,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.40(m,1H)，6.47(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.19(m,1H)，7.58(m,1H)，7.59(m,1H)，8.69(s,1H)，8.71(s,1H)；HRMS(ESI)for C28H31N7O3，[M+H]+计量值：514.59，测量值：514.39。
(24)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(1-甲基哌嗪)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-24)
产量：20mg；灰白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.80(q,2H)，2.26(s,3H)，2.35(t,J＝6.8Hz,2H)，2.47(br,4H)，2.48(br,4H)，3.92(t,J＝6.8Hz,2H)，5.70(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.34(m,2H)，6.48(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.51(m,2H)，6.99(m,1H)，7.19(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.66(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)forC28H32N8O2，[M+H]+计量值：513.61，测量值：513.42。
(25)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(3-甲氧基-4-(1-甲基哌嗪)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-25)
产量：23mg；灰白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.80(q,2H)，2.28(s,3H)，2.35(t,J＝6.8Hz,2H)，2.43(br,4H)，2.45(br,4H)，3.74(s,3H)，3.95(t,J＝6.8Hz,2H)，5.69(d,J＝10.0Hz,1H)，5.87(m,1H)，5.93(m,1H)，6.18(d,J＝16.8Hz,1H)，6.40(m,1H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.20(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.69(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C29H34N8O3，[M+H]+计量值：543.63，测量值：543.51。
(26)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲基-4-(1-甲基哌嗪)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-26)
产量：18mg；灰白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.80(q,2H)，2.28(s,3H)，2.34(s,3H)，2.36(t,J＝6.8Hz,2H)，2.44(br,4H)，2.45(br,4H)，3.94(t,J＝6.8Hz,2H)，5.69(d,J＝10.0Hz,1H)，6.18(d,J＝16.8Hz,1H)，6.22(m,1H)，6.33(m,1H)，6.34(m,1H)，6.45(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.21(m,1H)，7.59(m,1H)，7.61(m,1H)，8.69(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C29H34N8O2，[M+H]+计量值：527.63，测量值：527.51。
(27)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-(1-乙基哌嗪)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-27)
产量：30mg；灰白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.0(t,J＝6.8Hz,3H)，1.80(q,2H)，2.35(t,J＝7.5Hz,2H)，2.41(q,2H)，2.47(br,4H)，2.48(br,4H)，3.93(t,J＝6.8Hz,2H)，5.71(d,J＝10.0Hz,1H)，6.16(d,J＝16.8Hz,1H)，6.34(m,2H)，6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.53(m,2H)，6.99(m,1H)，7.19(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.67(s,1H)，8.72(s,1H)；HRMS(ESI)for C29H34N8O2，[M+H]+计量值：527.63，测量值：527.47。
(28)N-(9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(3-甲氧基-4-(1-吗啡啉)丙氧基苯基氨基))丙烯酰胺(I-28)
产量：23mg；灰白色固体；1H NMR(DMSO-d6)：δ1.0(t,J＝6.8Hz,3H)，1.80(q,2H)，2.35(t,J＝7.5Hz,2H)，2.41(q,2H)，2.43(br,4H)，2.45(br,4H)，3.72(s,3H)，3.95(t,J＝6.8Hz,2H)，5.69(d,J＝10.0Hz,1H)，5.87(m,1H)，5.91(m,1H)，6.18(d,J＝16.8Hz,1H)，6.40(m,1H)，6.46(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H)，6.98(m,1H)，7.21(m,1H)，7.58(m,1H)，7.60(m,1H)，8.69(s,1H)，8.73(s,1H)；HRMS(ESI)for C30H36N8O3，[M+H]+计量值：557.66，测量值：557.41。
活性测试
1.体外对受体酪氨酸激酶抑制活性测试方法
(1)制备激酶检测缓冲液
①在室温融解Kinase Detection Buffer，观察是否有沉淀。
②如果出现沉淀，就在37℃孵育Kinase Detection Buffer 15分钟并经常摇动，溶解沉淀。或者，小心吸走上清，去除沉淀。
(2)制备激酶检测试剂
①使用前在室温平衡Kinase Detection Buffer和Kinase DetectionSubstrate。
②将Kinase Detection Buffer全部倒进装有Kinase Detection Substrate的棕色瓶中，使冻干粉底物溶解。这样就制成了激酶检测试剂。
③轻轻震荡、涡旋或颠倒混匀，成为均质溶液。底物应在1分钟内溶解。
④激酶检测试剂配好后应立即使用，或分装存于-20℃。我们认为配好的试剂经过几次冻融后循环信号活性都没有损失。
(3)制作ATP转化成ADP的标准曲线
①用1x kinase reaction buffer稀释试剂盒提供的Ultra Pure ATP和ADP，制成90 0μL 50μM ATP和500μL 50μM ADP。
②将上一步配好的50μM ATP和50μM ADP溶液按表1所示在384孔板K1-12中混合，模拟每个转化百分比的ATP和ADP的浓度。混合好。
表1.制备50μM系列ATP+ADP标准品
③每孔加入5μL的ADP-GloTM试剂来终止激酶反应。在室温孵育40分钟。
④每孔加入10μL Kinase Detection Reagent将ADP转化成ATP，并引进萤光素酶和萤光素来检测ATP。
⑤在室温孵育30-60分钟，用多功能酶标仪测量萤光并记录萤光值。
⑥绘制ATP转化成ADP的标准曲线。
(4)确定激酶抑制物的IC50值
①按照promega试剂盒说明书配制1x kinase reaction buffer，2.5x50ng/μL激酶和2.5x0.5μg/μL底物和125μM ATP。
②在无酶对照孔中加入3μL 1x kinase reaction buffer，2μL 2.5x0.5μg/μL底物和125μM ATP。在阴性对照孔中加入1μL 1x kinase reaction buffer，2μL 2.5x 50ng/μL激酶，2μL 2.5x0.5μg/μL底物和125μM ATP。在测试孔中加入1μL 5x待测药物，2μL2.5x50ng/μL激酶，2μL 2.5x0.5μg/μL底物和125μM ATP。
③混合好平板，孵育60分钟。
④每孔加入5μL的ADP-GloTM试剂来终止激酶反应。在室温孵育40分钟。
⑤每孔加入10μL Kinase Detection Reagent将ADP转化成ATP，并引进萤光素酶和萤光素来检测ATP。在室温孵育30-60分钟，用多功能酶标仪测量萤光并记录萤光值。
⑥结果分析
2.抑制BTK高表达细胞生长实验(CCK-8检测法)
(1)细胞类型及选择：Ramos细胞(人Burkitt's淋巴瘤细胞)、Raji细胞(人Burkitt's淋巴瘤细胞)。
(2)细胞接种：收集对数生长期细胞，调整细胞悬液浓度，以每孔4x103个细胞，每孔体积90μL接种到96孔板，每组设2个复孔(边缘孔用无菌PBS填充)；
(3)细胞培养：细胞接种后，对照组用10％FBS RPMI-1640培养，实验组分别用10μL不同浓度梯度的AVL-292(1.25-40μmol/L)、各不同药物(1.25-40μmol/L)干预，37℃，5％CO2培养箱中继续培养(按实验要求分别培养不同时间)；
(4)呈色：两组细胞分别于培养48h后加入10μL CCK-8溶液(5mg/ml)，2h后终止培养，于摇床上低速振荡10min，使结晶充分溶解；
(5)比色：在酶联免疫检测仪上测定各孔光度值(OD值)，选择450nm波长，以无细胞的即RPMl-1640培养液空白孔调零，测各孔的吸光度值。实验重复三次；
(6)记录结果：细胞生长抑制率＝(对照组吸光度值一实验组吸光度值)/对照组吸光度值x 100％，细胞增殖率＝(实验组吸光度值/对照组吸光度值)x 100；
(7)绘制细胞生长曲线：以时间为横坐标，抑制率/增殖率为纵坐标绘制细胞生长曲线。
结果与讨论
表1嘌呤类化合物抑制BTK激酶活性和抗淋巴细胞增殖活性a
a数据代表至少三个独立的实验的平均值。b根据5个浓度绘制的量效曲线，IC50值在纳摩尔或微摩尔级达到至少抑制50％的细胞生长。
以上活性结果表明，本发明中的化合物对BTK激酶具有强的抑制效果，大多数化合物的有效抑制浓度IC50值在100nmol以下，化合物I-4，9，10,18,19，21，22,23,27,28，30对BTK激酶的活性均低于10nmol，且化合物I-28的IC50值达到0.4nmol,优于上市药物依鲁替尼。对JAK3激酶的抑制效果显示：此类化合物能够在100nmol/L浓度抑制JAK3激酶，化合物I-28对JAK3的IC50值最小，达到72.6nmol，揭示此分子通过双靶点途径达到治疗相关疾病的效果。抑制淋巴瘤白血病细胞的活性也表明：此类能够抑制多个淋巴瘤白血病细胞，IC50值在5-20微摩尔之间，大部分化合物达到了临床Ⅲ期分子AVL292的效果水平，且部分化合物如：I-21和I-28明显优于上市药物依鲁替尼，具有进一步开发成临床使用治疗淋巴细胞白血病的用途。
以上所述仅是本发明的优先实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种嘌呤类化合物，其特征在于，通式(Ⅰ)所示的化合物及其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物：
其中：
R1选自氢、甲氧基、甲基、氯、氟；
R2选自吗啡啉、1-甲基哌嗪、1-乙基哌嗪、1-乙酰基哌嗪、1-甲磺酰基哌嗪或者下述的A、B、C三种基团；
其中，上述A、B、C结构中R3选自吗啡啉、1-甲基哌嗪、1-乙基哌嗪、1-乙酰基哌嗪、1-甲磺酰基哌嗪。
2.如权利要求1所述的嘌呤类化合物，其特征在于，其选自
(1)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-吗啡啉苯基氨基)]丙烯酰胺；
(2)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-吗啡啉苯基氨基)]丙烯酰胺；
(3)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(4)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(5)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(4-乙基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(6)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-乙基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(7)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[4-(1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基]]丙烯酰胺；
(8)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[2-甲氧基-4-(1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基]]丙烯酰胺；
(9)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[4-(2-甲基-1-甲磺酰基)哌嗪苯基氨基]]丙烯酰胺；
(10)N-[9-(2-苯基氨基-8-苯胺基)嘌呤-2-(4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(11)N-[9-(2-苯基氨基-8-苯胺基)嘌呤-2-(2-甲氧基-4-甲基哌嗪苯基氨基)]丙烯酰胺；
(12)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-吗啡啉)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(13)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲氧基-4-(1-吗啡啉)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(14)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-氯-4-(1-吗啡啉)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(15)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-甲基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(16)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲氧基-4-(1-甲基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(17)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-氯-4-(1-甲基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(18)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-乙基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(19)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲氧基-4-(1-乙基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(20)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-氯-4-(1-乙基哌嗪)甲基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(21)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-吗啡啉)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(22)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-甲氧基-4-(1-吗啡啉)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(23)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲基-4-(1-吗啡啉)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(24)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-甲基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(25)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-甲氧基-4-(1-甲基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(26)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[2-甲基-4-(1-甲基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(27)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[4-(1-乙基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
(28)N-[9-(2-苯基氨基)嘌呤-2-[[3-甲氧基-4-(1-乙基哌嗪)丙氧基]苯基氨基]]丙烯酰胺；
及其上述化合物所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物。
3.如权利要求1所述的嘌呤类化合物，其特征在于，由通式(Ⅰ)所述化合物的盐，包括无机酸与通式(Ⅰ)所述化合物形成的盐以及有机酸与通式(Ⅰ)所述化合物形成的盐。
4.如权利要求3所述的嘌呤类化合物，其特征在于，无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸；所述有机酸包括乙酸、三氟乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、羟基乙酸、水杨酸、吡喃糖苷酸。
5.一种嘌呤类组合物，其特征在于，如权利要求1所述的由通式(Ⅰ)所述化合物或其药学上可接受的盐或药学上可接受的载体组成。
6.如权利要求5所述的嘌呤类组合物，其特征在于，含有至少一种前述公开的通式(Ⅰ)所示的化合物及其所有可能的异构体或其可药用的盐或水合物。
7.如权利要求5-6任意一项所述的嘌呤类组合物，其特征在于，所述的药物组合物还包括赋形剂，所述赋形剂包括稀释剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、粒化剂、包衣剂、润湿剂、溶剂、共溶剂、悬浮剂、乳化剂、甜味剂、调味剂、味道掩蔽剂、着色剂、抗结块剂、湿润剂、螯合剂、増塑剂、粘度増加剂、抗氧化剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂中至少一种。
8.如权利要求7所述的嘌呤类组合物，其特征在于，用于治疗BTK酪氨酸激酶引起的疾病。
9.如权利要求8所述的嘌呤类组合物，其特征在于，治疗弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤或慢性淋巴细胞白血病。
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