CN106383231A - 一种诊断肝癌的标记物组合及其应用 - Google Patents
一种诊断肝癌的标记物组合及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106383231A CN106383231A CN201610800660.7A CN201610800660A CN106383231A CN 106383231 A CN106383231 A CN 106383231A CN 201610800660 A CN201610800660 A CN 201610800660A CN 106383231 A CN106383231 A CN 106383231A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liver cancer
- syndecan
- hepatocarcinoma
- label
- application
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57438—Specifically defined cancers of liver, pancreas or kidney
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/70—Mechanisms involved in disease identification
- G01N2800/7023—(Hyper)proliferation
- G01N2800/7028—Cancer
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明涉及一种检测肝癌分期的标志物组合及其应用。具体地,本发明提供了syndecan‑1和1‑磷酸鞘氨醇在制备检测肝癌分期的诊断试剂盒中的用途。研究表明,syndecan‑1和1‑磷酸鞘氨醇在肝癌患者血清中的表达量显著高于正常健康人群,肝癌患者的血清syndecan‑1和1‑磷酸鞘氨醇表达水平正相关,不同分期患者的表达水平存在明显区别。因此,syndecan‑1和1‑磷酸鞘氨醇组合可作为肝癌分期诊断(尤其是血清学诊断)的标志物,利用它们可以提供相应的检测方法和试剂盒,实现肝癌的分期检测。
Description
【技术领域】
本发明涉及肿瘤学和诊断技术领域,具体涉及一种诊断肝癌的标记物组合及其用途。
【背景技术】
细胞外被(glycocalyx)的主要成分硫酸乙酰肝素(heparan sulfate)蛋白聚糖(proteoglycan)syndecan-1是一种跨膜蛋白,它的胞外区(ectodomain)上结合有硫酸乙酰肝素和硫酸软骨素(chondroitin sulfate)侧链。
1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)又称为1-磷酸神经鞘氨醇,由血清蛋白蛋白或高密度脂蛋白携带。正常情况下,血中浓度为0.3-0.5 µM,可作为第二信使或与细胞表面受体1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)结合发挥生物学功能。
目前,syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇之间的协同关系的研究主要集中在血管内皮细胞上,特别是内皮的选择性通透屏障功能。syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇组合在肝癌分期诊断中的重要用途未见相关报道。
肝癌是我国常见的一种恶性肿瘤,位居肿瘤发生率的第三位,死亡率的第二位。原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是最常见肝癌类型。
肝癌的分期很关键,直接影响着癌症的治疗和预后。原发性肝癌TNM分期(UICC /AJCC,2010年)标准介绍如下:
(1)T-原发病灶:
Tx:原发肿瘤不能测定;
T0:无原发肿瘤的证据;
T1:孤立肿瘤没有血管受侵;
T2:孤立肿瘤,有血管受侵或多发肿瘤直径≤5cm;
T3a:多发肿瘤直径>5cm;
T3b:孤立肿瘤或多发肿瘤侵及门静脉或肝静脉主要分支;
T4:肿瘤直接侵及周围组织,或致胆囊或脏器穿孔;
(2)N-区域淋巴腺:
Nx:区域内淋巴腺不能测定;
N0:无淋巴腺转移;
N1:区域淋巴腺转移;
(3)M-远处转移:
Mx:远处转移不能测定;
M0:无远处转移;
M1:有远处转移;
(4)肝癌分期:
I期:T1N0M0;
II期:T2N0M0;
IIIA期:T3aN0M0;
IIIB期:T3bN0M0;
IIIC期:T4,N0M0;
IVA期:任何T,N1M0;
IVB期:任何T,任何N,M1。
中国的肝癌患者数目庞大,其发病率有逐年上升的趋势。目前中国肝癌患者占全世界该病发病率的54%,而肝癌患者的5年生存率不到5%。对肝癌进行早期诊断,可以有效的降低肝癌的发病率和病死率,对肝癌患者进行准确分期,可以指导肝癌患者具体治疗方案的选择和实施。但是,当前缺少合适的方法。而发展高敏感的血清特异标志物可有效鉴别肝脏恶性病变,对肝癌进行准确地诊断和分期。本领域迫切需要开发可用于检测和判断肝癌分期的血清特异标志物。
【发明内容】
本发明的目的在于针对技术方法的缺陷和不足,提供一种可用于检测或判断肝癌分期的血清特异标志物及其用途。
在本发明中,提供了一种syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇的基因、mRNA、cDNA、或蛋白的组合用途,它被用作检测肝癌分期诊断的标志物;或用于制备检测肝癌分期的试剂或试剂盒。更佳地,所述的检测是血清检测。
作为本发明的一种优选,所述的试剂包括抗体、引物、探针、核酸芯片(如DNA芯片)或蛋白质芯片。
在本发明中,提供了syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇特异性抗体的组合用途,用于制备检测肝癌分期的诊断试剂或试剂盒。更佳地,所述的检测是血清检测。
在本发明中,提供了一种用于检测肝癌分期的诊断试剂盒,所述的试剂盒包含:
(a)syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇特异性抗体;和/或
(b)特异性扩增syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇的mRNAs或cDNAs的引物或引物对。
在本发明中,提供了一种检测肝癌分期的方法,该方法包括:
(a)准备受试者测试样品;
(b)检测测试样品中syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇的表达量,并将表达量检测结果与参比值进行比较,可准确判断受试者肝癌分期情况。
作为本发明的一种优选,所述测试样品为组织样品、血液样品、血清样品或体液样品。
作为本发明的一种优选,所述检测步骤b包括检测测试样品中syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇的mRNA、cDNA和/或蛋白的量。
作为本发明的一种优选,其特征在于,所述的试剂盒还用于联合检测其他标记物的表达;其中,所述的其他标记物包括:甲胎蛋白(AFP)、硫酸乙酰肝素和硫酸软骨素的表达。
在本发明中,提供了一种syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇特异性抗体的组合用途,用于制备血清检测肿瘤分期的诊断试剂或试剂盒。
作为本发明的一种优选,所述的试剂包括抗体、核酸芯片(如DNA芯片)或蛋白质芯片。
作为本发明的一种优选,所述的特异性抗体是单克隆抗体或多克隆抗体。
作为本发明的一种优选,所述的血清检测是ELISA法、或双抗夹心时间分辨免疫荧光法(TRFIA法)。
在本发明中,提供了一种 syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇的组合用途,它被用作血清检测肝癌分期的标志物。
作为本发明的一种优选,所述肝癌包括肝细胞肝癌,尤其是原发性肝细胞肝癌。
在本发明中,所述1-磷酸鞘氨醇可通过结合1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)发挥作用;作为本发明的一种优选,提供了一种syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)的组合用途,它被用作检测受试者组织样品、血液样品、血清样品或体液样品中的syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇I型受体的mRNA、cDNA和/或蛋白的表达量,检测判断受试者肝癌分期情况。
在本发明中,单独使用syndecan-1、1-磷酸鞘氨醇、或1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)无法判断受试者肝癌分期情况,联合syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇,或联合syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)可以准确判断肝癌的分期,指导肝癌患者具体治疗方案的选择和实施。
应理解,在本发明范围内,本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合,从而构成新的或优选的技术方案。
【附图说明】
图1 是1-磷酸鞘氨醇(S1P)在40对肝癌及健康人血清中的差异表达结果,图中controlsubjects代表健康人,HCC代表肝癌患者。
图2是syndecan-1在40对肝癌及健康人血清中的差异表达结果,图中controlsubjects代表健康人,HCC代表肝癌患者。
图3是正常人中,血清1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1无明显相关性。control代表健康人。
图4是肝癌患者中,血清1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1有明显相关性(P<0.0001)。control代表健康人。而且,不同分期患者的1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1组合表达界限明显。
图5是1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)在 40对肝癌及癌旁组织样本中的差异表达结果。图中NT是癌旁组织,T是癌组织。
图6是syndecan-1在 40对肝癌及癌旁组织样本中的差异表达结果。图中NT是癌旁组织,T是癌组织。
图7是1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)与syndecan-1在 肝癌及癌旁组织样本中的相对表达值呈负相关,而且,不同分期患者的1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1组合表达界限较明显。
【具体实施方式】
本发明人经过深入研究,发现1-磷酸鞘氨醇和syndecan-1在肝癌患者的血清中表达异常,且有明显相关性,可以作为肝癌分期检测的标志物。
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下面实施例中未注明的具体实验方法,按照Zeng Ye 等发表在《Oncotarget》杂志上的论文Sphingosine-1-phosphate induced epithelial-mesenchymal transition of hepatocellular carcinoma via an MMP-7/ syndecan-1/TGF-β autocrine loop. 2016. doi: 10.18632/oncotarget.11450. 中所述方法进行。下面详述该篇论文中,没有具体涉及的肝癌分期诊断情况。
具体地,本发明人通过使用酶联免疫技术(ELISA)检测了40对肝癌及健康人血清,结果表明,1-磷酸鞘氨醇(S1P)在肝癌患者血清显著高表达(图1);syndecan-1在肝癌患者血清显著高表达(图2);正常人中,血清1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1无明显相关性(图3);肝癌患者中,血清1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1有明显相关性(P<0.0001),不同分期患者的1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1组合表达有明显界限(图4)。
本发明人又采用了免疫印迹实验(Western blotting)检测了40对肝癌及癌旁组织样本,结果表明1-磷酸鞘氨醇(S1P1)在肝癌组织中显著高表达(图5),而syndecan-1在肝癌组织中显著低表达(图6),1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)与syndecan-1在 肝癌及癌旁组织样本中的相对表达值呈负相关,不同分期患者的1-磷酸鞘氨醇与syndecan-1组合表达有较明显界限(图7)。
本发明的主要优点包括:肝癌作为病死率最高的恶性肿瘤之一,准确判断肝癌的分期,可以指导肝癌患者具体治疗方案的选择和实施。
以上所述仅是本发明的较佳实施方式,故凡依本发明专利申请范围所述的内容,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等效变化或修饰,均包括于本发明所附权利要求书所限定的专利申请范围内。
Claims (6)
1.一种诊断肝癌的标记物组合及其应用,其特征在于,提供了一种syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇组合标记物,用于制备血清检测肝癌分期的诊断试剂或试剂盒。
2.如权利要求1所述的一种诊断肝癌的标记物组合及其应用,其特征在于, 所述的诊断试剂包括抗体、引物、探针、核酸芯片(如DNA芯片)或蛋白质芯片。
3.如权利要求1所述的一种诊断肝癌的标记物组合及其应用,其特征在于,所述的试剂盒包含:syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇特异性抗体;和/或特异性扩增syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇的mRNAs或cDNAs的引物或引物对。
4.如权利要求1所述的一种诊断肝癌的标记物组合及其应用,其特征在于,所述肝癌是原发性肝细胞肝癌。
5.如权利要求1所述的一种诊断肝癌的标记物组合及其应用,其特征在于,所述的试剂盒还用于联合检测其他标记物的表达;其中,所述的其他标记物包括:甲胎蛋白(AFP)、硫酸乙酰肝素和硫酸软骨素的表达。
6.如权利要求1所述的一种诊断肝癌的标记物组合及其应用,其特征在于,所述1-磷酸鞘氨醇可通过结合1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)发挥作用,作为优选,提供了一种syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇I型受体(S1P1)的组合用途,它被用作检测受试者组织样品、血液样品、血清样品或体液样品中的syndecan-1和1-磷酸鞘氨醇I型受体的mRNA、cDNA和/或蛋白的表达量,检测判断受试者肝癌分期情况。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610800660.7A CN106383231B (zh) | 2016-09-02 | 2016-09-02 | 一种诊断肝癌的标记物组合及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610800660.7A CN106383231B (zh) | 2016-09-02 | 2016-09-02 | 一种诊断肝癌的标记物组合及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106383231A true CN106383231A (zh) | 2017-02-08 |
CN106383231B CN106383231B (zh) | 2020-03-17 |
Family
ID=57937949
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610800660.7A Active CN106383231B (zh) | 2016-09-02 | 2016-09-02 | 一种诊断肝癌的标记物组合及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106383231B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111349704A (zh) * | 2020-03-17 | 2020-06-30 | 河北医科大学第三医院 | 肝癌的诊断产品和治疗组合物 |
CN112034171A (zh) * | 2020-08-25 | 2020-12-04 | 首都医科大学附属北京佑安医院 | 检测血清鞘氨醇-1-磷酸的试剂在制备用于区分肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102576025A (zh) * | 2009-09-18 | 2012-07-11 | 三菱化学株式会社 | 肝细胞癌标记物 |
CN104673894A (zh) * | 2015-01-16 | 2015-06-03 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种分子标记检测物在制备检测肝癌的试剂盒中的用途 |
CN105319362A (zh) * | 2014-07-02 | 2016-02-10 | 龙胜发展有限公司 | 用于肝癌的无创诊断的特异性生物标志物组 |
-
2016
- 2016-09-02 CN CN201610800660.7A patent/CN106383231B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102576025A (zh) * | 2009-09-18 | 2012-07-11 | 三菱化学株式会社 | 肝细胞癌标记物 |
CN105319362A (zh) * | 2014-07-02 | 2016-02-10 | 龙胜发展有限公司 | 用于肝癌的无创诊断的特异性生物标志物组 |
CN104673894A (zh) * | 2015-01-16 | 2015-06-03 | 中国中医科学院中药研究所 | 一种分子标记检测物在制备检测肝癌的试剂盒中的用途 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
YE ZENG ET AL: "Sphingosine-1-phosphate induced epithelial-mesenchymal transition of hepatocellular carcinoma via an MMP-7/syndecan-1/TGF-β autocrine loop", 《ONCOTARGET》 * |
康从利等: "血清肿瘤标志物的联合动态检测在原发性肝癌诊断中的价值", 《肿瘤研究与临床》 * |
曹风华等: "血清中磷酯酰肌醇蛋白聚糖-3及高尔基体蛋白-73异常表达对肝癌的", 《南京医科大学学报》 * |
陈晓香等: "鳞状细胞癌抗原检测在原发性肝癌诊断中的意义", 《中国实践医刊》 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111349704A (zh) * | 2020-03-17 | 2020-06-30 | 河北医科大学第三医院 | 肝癌的诊断产品和治疗组合物 |
CN112034171A (zh) * | 2020-08-25 | 2020-12-04 | 首都医科大学附属北京佑安医院 | 检测血清鞘氨醇-1-磷酸的试剂在制备用于区分肝硬化或肝细胞癌的试剂盒中的应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106383231B (zh) | 2020-03-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Sun et al. | Significance of glypican-3 (GPC3) expression in hepatocellular cancer diagnosis | |
Zhang et al. | Evaluation of the diagnostic value of alpha-l-fucosidase, alpha-fetoprotein and thymidine kinase 1 with ROC and logistic regression for hepatocellular carcinoma | |
Lee et al. | Clinical utility of plasma glypican-3 and osteopontin as biomarkers of hepatocellular carcinoma | |
Xu et al. | Model based on γ-glutamyltransferase and alkaline phosphatase for hepatocellular carcinoma prognosis | |
Wong et al. | Detection of circulating tumour cells and nodal metastasis by reverse transcriptase-polymerase chain reaction technique | |
Youns et al. | Serum talin-1 is a potential novel biomarker for diagnosis of hepatocellular carcinoma in Egyptian patients | |
Shan et al. | Gradually increased G olgi protein 73 expression in the progression of benign liver diseases to precancerous lesions and hepatocellular carcinoma correlates with prognosis of patients | |
Jing et al. | The Value of GPC3 and GP73 in Clinical Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma. | |
Shen et al. | ADC at 3.0 T as a noninvasive biomarker for preoperative prediction of Ki67 expression in invasive ductal carcinoma of breast | |
Chen et al. | A combination of circulating tumor cells and CA199 improves the diagnosis of pancreatic cancer | |
CN109777877A (zh) | 基于ptbp1甲基化辅助诊断脑动脉瘤的检测试剂盒及其应用 | |
Badr et al. | Role of serum glypican-3 in the diagnosis and differentiation of small hepatocellular carcinoma from hepatitis-C virus cirrhosis | |
Omachi et al. | Immunohistochemical demonstration of proliferating lymphatic vessels in colorectal carcinoma and its clinicopathological significance | |
Abdel-Hafiz et al. | Evaluation of osteopontin as a biomarker in hepatocellular carcinomas in Egyptian patients with chronic HCV cirrhosis | |
CN106383231A (zh) | 一种诊断肝癌的标记物组合及其应用 | |
CN107345969A (zh) | 包含afp、gp73和ceacam1的血清标记物在诊断肝脏疾病中的用途 | |
Yu et al. | Clinical value of tumour specific growth factor (TSGF) and carbohydrate antigen-125 (CA-125) in carcinoma of the endometrium | |
Zhang et al. | Phenotypic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma plasma-derived small extracellular vesicles for cancer diagnosis and cancer stage prediction: a proof-of-concept study | |
CN103487580A (zh) | Dkk1作为诊断标志物的用途 | |
Chen et al. | Tumor abnormal protein in the diagnosis of breast cancer in patients with a palpable mass | |
CN109085359A (zh) | 血清蛋白标志物组合在结直肠癌筛查和诊治中的应用 | |
CN107144688B (zh) | Cd19阳性外泌体作为分子标记在制备肿瘤诊断试剂盒中的应用及试剂盒 | |
CN109085355A (zh) | 血清蛋白标志物组合在肺癌筛查和诊治中的应用 | |
Cujic et al. | Differential diagnosis of liver diseases using serum biomarkers | |
Mohammed et al. | Clinical utility of biomarkers of hepatocellular carcinoma. |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |