CN106188316A - 一种键合性多糖类手性固定相及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种键合型多糖类固定相，其包含如下的结构通式：其中，Q代表固定相基质；L为-R₂SCH₂CH₂R₃-或-R₃CH₂CH₂SR₂-，其中R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的亚烷基和亚芳基；m和n各自独立地选自0和1；p为0-8之间的整数；R¹-R⁵各自独立地选自卤素、烷基和烷氧基；W代表多糖。根据本发明的所述键合型多糖类固定相，其为化学键连接，避免了多糖分子之间的交联反应，最大限度的保留多糖分子的螺旋结构，有利于发挥其优良的手性拆分能力，同时提高了其耐溶剂性能。

Description

一种键合性多糖类手性固定相及其制备方法

技术领域

本发明属于液相色谱手性分离领域，具体涉及一种通过可控、高效的方法制备的键合型多糖类手性固定相。

背景技术

不同旋光活性的对映异构体分子往往表现出不同甚至相反的生物活性，因此获得光学纯单一对映体在医药、生物、材料等领域具有极其重要的意义。手性色谱拆分法是近年来发展起来的最有效的手性拆分方法，其关键和核心是具有手性拆分功能的色谱固定相。多糖衍生物具有很好的手性识别能力，是目前应用最广、最有效、最可靠的手性拆分材料。将其通过涂覆方式负载在色谱固定相基质表面即得到目前最常用的涂覆型手性色谱固定相。但是，由于多糖衍生物与色谱固定相基质相互作用力较弱，所以所得涂覆型手性色谱固定相存在耐溶剂性能差、流动相选择范围窄等缺点，应用受到限制。为了克服这些缺点，近年来，人们大力开发键合型多糖类手性固定相。目前已报道了多种键合方式，然而现有技术中所报道的键合方式在使用过程中，由于多糖衍生物与功能化色谱固定相基质需要存在相似的键合官能团，因此不可避免地存在自交联、调控困难等问题，且目前所报道的键合方式对实验操作要求较高。

发明内容

本发明的目的在于利用在于克服现有技术中的缺陷，提供一种键合型多糖类固定相，其通过巯基-烯click反应键合而成，将此键合型手性固定相应用于液相色谱手性分离时，提高手性拆分性能，具有有更广泛的流动相选择范围，如可使用常用的正己烷/异丙醇流动相，还可以使用四氢呋喃，氯仿、二氯甲烷、丙酮等作为流动相添加剂。本发明还提供了所述固定相的制备方法，其制备方法简便、可控，反应高效，避免了多糖分子之间的交联反应，最大限度的保留多糖分子的螺旋结构，提供了固定相手性拆分能力。

根据本发明的一个方面，提供了一种键合型多糖类手性固定相，其包含如下的结构通式：

其中，Q代表固定相基质；L为-R²SCH²CH²R³-或-R³CH²CH²SR²-，其中R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的亚烷基和亚芳基；m和n各自独立地选自0和1；p为0-8之间的整数；R¹-R⁵各自独立地选自卤素、烷基和烷氧基；W代表多糖。

本发明中，所述取代或为取代的亚烷基和亚芳基，是指亚烷基和亚芳基上的原子可被卤素、烷基或烷氧基所取代。

根据本发明，所述多糖衍生物通过其包含的巯基或双键的反应形成碳-硫键连接于所述固定相中。Q代表固定相基质，其通过其表面的羟基的反应形成的硅氧键连接于所述固定相中。

根据本发明，本领域技术人员可以理解，由于固定相基质表面通常具有很多的羟基，且多糖的结构中也含有多个羟基，所述通式I所示的结构示例性地表明了所述键合型多糖类手性固定相中固定相基质以及多糖等的连接次序和连接方式，并不意味着如通式I中W所代表的多糖左右两侧的结构单元为等比例的。

根据本发明所述固定相的一个具体实施例，所述通式I中，所述R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的C₁-C₅的亚烷基和C₆-C₁₅的亚芳基，优选选自亚甲基、亚乙基、亚丙基和亚苯基。

根据本发明所述固定相的另一个具体实施例，所述通式I中，p选自0-5之间的整数，如0、1、2、3、4或5。R¹-R⁵各自独立地选自卤素、C₁-C₅烷基和C₁-C₅烷氧基，优选各自独立地选自氯、溴、碘、氟、甲基、乙基、异丙基、正丙基、甲氧基和乙氧基。

根据本发明所述的固定相，所述多糖包含但不仅限于纤维素、淀粉、葡聚糖、壳聚糖、甲基纤维素和甲壳素中的至少一种。优选所述的固定相基质选自二氧化硅、二氧化钛和二氧化锆中的至少一种。

根据本发明提供的固定相，其通过碳-硫键将含多糖的结构与含固定相基质的结构相连接，结构稳定，耐溶剂性能强，使用寿命长。

根据本发明的另外一个方面，提供一种制备上述固定相的方法，包括以下步骤：

1)将多糖溶解在离子液体中，得到多糖/离子液体溶液，然后加入衍生化试剂A和B进行反应，然后进行沉淀、分离，制得含芳香基以及巯基或双键的功能化的多糖衍生物；其中，衍生化试剂B为B1或B2，

其中，R₆选自酰氯基、异氰酸酯基和羧酸基；p为0-8之间的整数；R¹-R⁵各自独立地选自卤素、烷基和烷氧基；R₅选自酰氯基、异氰酸酯基和羧酸基；

2)将固定相基质分散于有机溶剂中，加入衍生化试剂C，在碱性条件下反应，得到含巯基或含双键的功能化的固定相基质；其中，所述衍生化试剂C为C1或C2；且当衍生化试剂B为B1时，衍生化试剂C为C2，当衍生化试剂B为B2时，衍生化试剂C为C1；

3)在碱性条件与引发剂的作用下，将所述多糖衍生物与所述功能化的固定相基质于有机溶剂中进行反应，通过双键与巯基的反应，得到键合型多糖类手性固定相；

其中，R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的亚烷基和亚芳基；R₄选自取代或未取代的烷基和芳基。

根据本发明所述的方法的一个优选实施例，p为0-5之间的整数；R¹-R⁵各自独立地选自卤素、C₁-C₅烷基和C₁-C₅烷氧基，优选各自独立地选自氯、溴、碘、氟、甲基、乙基、异丙基、正丙基、甲氧基和乙氧基；R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的C₁-C₅的亚烷基和C₆-C₁₅的亚芳基，优选各自独立地选自亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚苯基；R₄地选自取代或未取代的C₁-C₅的烷基和C₆-C₁₅的芳基，优选选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、苯基。

根据本发明所述的方法的一个具体实施例中，在步骤1)中，所述衍生化试剂A与B摩尔比为1:1-500:1，优选10:1-30:1；和/或所述衍生化试剂A与多糖羟基的摩尔比1:1-20:1，优选2:1-10:1。所述步骤1)中，所述反应的温度为0-150℃，优选60-100℃，所述反应的时间为0.1-72小时，优选5-12小时。所述多糖/离子液体溶液的浓度为1-30wt％，优选6-16wt％。具体地，例如，在步骤1)将多糖溶解在离子液体中，制备得到浓度为1-30wt％的多糖/离子液体溶液；0-150℃下，向多糖/离子液体溶液中先后加入或同时加入两种衍生化试剂A和B，反应0.1-72小时，加入沉淀剂使产物沉淀，过滤、洗涤、干燥，得到含有双功能性基团的多糖衍生物。根据本发明，在所述步骤1)中，所述衍生化试剂A使得所述多糖衍生物的结构中含芳香基。根据所使用的衍生化试剂B为B1或B2，所得到的多糖衍生物上可含巯基或双键。最后所得到的多糖衍生物的羟基取代程度为5-100％。

根据本发明，在所述步骤1)中，优选所述多糖包括但不仅限于纤维素、淀粉、葡聚糖、壳聚糖、甲基纤维素和甲壳素中的至少一种。所述离子液体为能够溶解多糖的任何一种离子液体。在一个优选的实施例中，所述离子液体包括但不仅限于1-烯丙基-3-甲基咪唑氯(AmimCl)、1-丁基-3-甲基咪唑氯(BmimCl)和1-乙基-3-甲基醋酸(EmimAc)等中的至少一种。

根据本发明所述的方法的一个具体实施例中，在步骤2)中，所述固定相基质一般为球形，优选选自二氧化硅、二氧化钛和二氧化锆中的至少一种，其表面具有羟基，通过固定相基质表面的羟基与衍生化试剂的反应，得到功能化的固定相基质。优选所述固定相基质的粒径为1.7-50μm，孔径为所述反应的温度为0-110℃，优选70-110℃。所述反应的时间为0.5-40小时，优选10-24小时。所述衍生化试剂C与所述固定相基质的重量比为1:1-10:1，优选3:1-5:1。

根据本发明，所述有机溶剂选自本领域内常用的有机溶剂，例如可选用甲苯等。在所述步骤2)中，具体的步骤可以如下：将固定相基质分散在甲苯中，加入衍生化试剂C，0-110℃下反应0.5-40小时，反应结束后冷却至室温，过滤、洗涤、干燥，得到功能化的色谱固定相基质。所述固定相基质为根据衍生化试剂C为C1或C2，使制得的功能化的固定相基质上含巯基或双键。当衍生化试剂B为B1时，衍生化试剂C为C2，当衍生化试剂B为B2时，衍生化试剂C为C1，这就意味着，当使用衍生化试剂B1使所述多糖衍生物上含双键时，衍生化试剂C为C2，使得到的所述功能化的固定相基质上含巯基；反之，当所述多糖衍生物上含巯基时，所述功能化的固定相基质上含双键。根据本发明的一个具体实施例，所述固定相基质为色谱固定相基质。

根据本发明的另一具体实施例中，在所述步骤3)中，所述反应温度为40-110℃，优选60-90℃；所述反应的时间为0.1-5，优选3-5小时。优选所述多糖衍生物与所述功能化的固定相基质的质量比为1:10-1:1，优选为1:5-1:2。所用的引发剂优选选自过氧化环己酮、过氧化二苯甲酰、叔丁基过氧化氢、偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈、1-羟基环己基苯基甲酮和2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮中的至少一种。优选所述引发剂的用量为多糖衍生物的0.01-5wt％，优选0.5-2wt％。本发明中的所述碱性条件如可通过加入吡啶等碱性试剂来实现。

根据本发明，在步骤3)中，将所述多糖衍生物与所述功能化的固定相基质于有机溶剂中进行反应，具体可以通过：将含有双功能性基团的多糖衍生物涂布在功能化的色谱固定相基质表面，然后置于甲苯中进行反应，或将含有双功能性基团的多糖衍生物与功能化的色谱固定相基质直接在甲苯中混合，然后进行反应。所述步骤3)的具体操作步骤可以如下：将含有双功能性基团的多糖衍生物涂布在功能化的色谱固定相基质表面，置于甲苯中，或将含有双功能性基团的多糖衍生物与功能化的色谱固定相基质直接在甲苯中混合；然后加入一定量的吡啶和引发剂，在40-110℃条件下，反应0.1-5小时，反应结束后冷却至室温，过滤、洗涤固体、干燥，得到键合型多糖类手性固定相。

根据本发明，在步骤3)中，通过所述多糖衍生物和所述功能化的固定相基质的反应，也即通过巯基与双键的click反应，形成本发明中所述的固定相。所述多糖衍生物与所述功能化的固定相基质之间的键合官能团是相配对的，所述键合官能团的反应只发生在所述多糖衍生物与所述功能化的固定相基质之间，而不会在所述多糖衍生物之间或所述功能化的固定相基质之间发生。

根据本发明制得的键合型多糖类手性固定相，在步骤3)中，洗涤、干燥后的所述功能化的固定相基质的重量增加，可以得知，所述多糖衍生物已经键合在所述功能化的固定相基质上。

根据本发明提供的方法，其制备方法简便，通过双键与巯基发生高效的巯基-烯click反应，将多糖衍生物与色谱固定相基质通过化学键连接起来。根据本发明提供的方法避免了多糖分子之间的交联反应，最大限度的保留多糖分子的螺旋结构，有利于发挥其优良的手性拆分能力。

根据本发明的另外一个方面，还提供了上述固定相或上述方法制备的固定相作为色谱固定相在手性分子分离中的应用。

本发明中的方法利用巯基-烯click反应，提供一种新型、简便、高效、可控的键合型多糖类手性固定相。将此键合型手性固定相应用于液相色谱手性分离时，具有更广泛的流动相选择范围，比如：可使用常用的正己烷/异丙醇流动相，还可以使用四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷、丙酮等作为流动相添加剂。

根据本发明的所述键合型多糖类固定相，其为化学键连接，避免了多糖分子之间的交联反应，最大限度的保留多糖分子的螺旋结构，有利于发挥其优良的手性拆分能力，同时提高了其耐溶剂性能，提高了结构稳定性。根据本发明的所述键合型多糖类固定相能够作为色谱固定相用于手性分子的分离，如在液相色谱手性分离中，能够有效地分离手性分子。同时，当其应用于色谱手性分离、如液相色谱手性分离时，由于其耐溶剂性能得到提高，从而具有较广的流动相选择范围，比如可使用常用的正己烷/异丙醇流动相，还可以使用四氢呋喃，氯仿、二氯甲烷、丙酮等作为流动相添加剂，提高手性拆分性能，提高了使用寿命，具有宽广的应用前景。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明的方法进行进行说明，但本发明并不局限于此。

实施例1：键合型淀粉苯甲酸酯手性固定相的制备

取1g淀粉(玉米中提取的支链淀粉)，加入盛有10g 1-丁基-3-甲基咪唑氯(BmimCl)离子液体的三口瓶中，60℃机械搅拌2h，得到淀粉/离子液体溶液。加入5mL苯甲酰氯，同时加入0.1mL丙烯酰氯，反应8小时，待反应体系冷却至室温，将反应液倒入大量异丙醇中，析出沉淀，过滤分离，收集固体，干燥，即得含双键的淀粉苯甲酸酯衍生物。

将5g纯二氧化硅(5μm，)，分散在50mL甲苯中，加入1mL吡啶，同时加入3mLγ-巯丙基三乙氧基硅烷，在80℃条件下反应12小时，待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，干燥，即得含巯基的二氧化硅基质。

将制备的淀粉衍生物按40％(w/w)涂覆在含巯基的二氧化硅基质上，将其置于50mL圆底烧瓶中，加入30mL吡啶，80mg叔丁基过氧化氢，60℃反应8小时。待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，再分别用四氢呋喃、甲醇彻底洗涤固体，真空干燥，所得到的产品的重量增加，这就证明所述淀粉衍生物已经键合在所述二氧化硅基质上了，也即制得键合型淀粉苯甲酸酯手性固定相。实施例2：键合型纤维素苯基氨基甲酸酯手性固定相的制备

取1g纤维素(聚合度650)，加入盛有20g 1-烯丙基-3-甲基咪唑氯(AmimCl)离子液体的三口瓶中，80℃机械搅拌2h，得到纤维素/离子液体溶液，加入5mL苯基异氰酸酯反应2h，然后加入0.2mL甲基丙烯酰氯，继续反应3小时，待反应体系冷却至室温，将反应液倒入大量甲醇中，析出沉淀，过滤分离，收集固体，干燥，即得含双键的纤维素苯基氨基甲酸酯衍生物。

将5g二氧化锆(5μm，)，分散在50mL甲苯中，加入1mL吡啶，同时加入3mLγ-巯丙基三甲氧基硅烷，在110℃条件下反应8小时，待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，干燥，即得含巯基的二氧化锆基质。

将制备的纤维素衍生物按30％(w/w)涂覆在二氧化锆基质上，将其置于50mL圆底烧瓶中，加入20mL吡啶，20mg偶氮二异丁腈，80℃反应5小时。待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，再分别用四氢呋喃、甲醇彻底洗涤固体，真空干燥，所得到的固体的重量比所述基质增加，这就证明所述纤维素衍生物已经键合在所述二氧化硅基质上了，也即制得键合型纤维素苯基氨基甲酸酯手性固定相。

实例3：键合型壳聚糖苯基氨基甲酸酯手性固定相的制备

取1g壳聚糖(聚合度600-1700)，加入盛有20g 1-乙基-3-甲基咪唑醋酸(EmimAc)离子液体的三口瓶中，40℃机械搅拌2h，得到壳聚糖/离子液体溶液，加入0.5mL丁基丙烯酰氯，反应1h，然后加入10mL苯基异氰酸酯，继续反应12小时，待反应体系冷却至室温，将反应液倒入大量乙醇中，析出沉淀，过滤分离，收集固体，干燥，即得含双键的壳聚糖苯基氨基甲酸酯衍生物。

将5g纯二氧化硅(5μm，)，分散在50mL甲苯中，加入2mL吡啶，同时加入5mLγ-巯丙基三甲氧基硅烷，在90℃条件下反应12小时，待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，干燥，即得含巯基的二氧化硅基质。

将制备的壳聚糖衍生物按50％(w/w)涂覆在二氧化硅基质上，将其置于50mL圆底烧瓶中，加入20mL吡啶，40mg过氧化二苯甲酰，80℃反应8小时。待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，再分别用四氢呋喃、甲醇彻底洗涤固体，真空干燥，所得到的固体的重量比所述基质增加，这就证明所述壳聚糖衍生物已经键合在所述二氧化硅基质上了，也即制得键合型壳聚糖苯基氨基甲酸酯手性固定相。

实施例4：键合型甲基纤维素苯甲酸酯手性固定相的制备

取1g甲基纤维素(1000-1800mPa·s,20℃时2％的水溶液)，加入盛有10g1-丁基-3-甲基咪唑氯(BmimCl)离子液体的三口瓶中，40℃机械搅拌2h，得到甲基纤维素/离子液体溶液。加入5mL苯甲酰氯，同时加入0.2mL丙烯酰氯，反应8小时，待反应体系冷却至室温，将反应液倒入大量甲醇中，析出沉淀，过滤分离，收集固体，干燥，即得含双键的甲基纤维素苯甲酸酯衍生物。

将5g二氧化钛(3μm，)，分散在50mL甲苯中，加入1mL吡啶，同时加入1mLγ-巯丙基三乙氧基硅烷，在80℃条件下反应12小时，待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，干燥，即得含巯基的二氧化钛基质。

将制备的甲基纤维素衍生物按40％(w/w)涂覆在含巯基的二氧化钛基质上，将其置于50mL圆底烧瓶中，加入30mL吡啶，80mg叔丁基过氧化氢，60℃反应8小时。待反应体系冷却至室温，过滤分离，收集固体，再分别用四氢呋喃、甲醇彻底洗涤固体，真空干燥，所得到的固体的重量比所述基质增加，这就证明所述甲基纤维素衍生物已经键合在所述二氧化硅基质上了，也即制得键合型甲基纤维素苯甲酸酯手性固定相。

应当注意的是，以上所述的实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明的任何限制。通过参照典型实施例对本发明进行了描述，但应当理解为其中所用的词语为描述性和解释性词汇，而不是限定性词汇。可以按规定在本发明权利要求的范围内对本发明作出修改，以及在不背离本发明的范围和精神内对本发明进行修订。尽管其中描述的本发明涉及特定的方法、材料和实施例，但是并不意味着本发明限于其中公开的特定例，相反，本发明可扩展至其他所有具有相同功能的方法和应用。

Claims (11)

1.一种键合型多糖类手性固定相，其包含如下的结构通式：

其中，Q代表固定相基质；L为-R₂SCH₂CH₂R₃-或-R₃CH₂CH₂SR₂-，其中R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的亚烷基和亚芳基；m和n各自独立地选自0和1；p为0-8之间的整数；R¹-R⁵各自独立地选自卤素、烷基和烷氧基；W代表多糖。

2.根据权利要求1所述的固定相，其特征在于，所述通式I中，所述R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的C₁-C₅的亚烷基和C₆-C₁₅的亚芳基，优选选自亚甲基、亚乙基、亚丙基和亚苯基。

3.根据权利要求1或2所述的固定相，其特征在于，所述通式I中，p选自0-5之间的整数；和/或R¹-R⁵各自独立地选自卤素、C₁-C₅烷基和C₁-C₅烷氧基，优选各自独立地选自氯、溴、碘、氟、甲基、乙基、异丙基、正丙基、甲氧基和乙氧基。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的固定相，其特征在于，所述多糖选自纤维素、淀粉、葡聚糖、壳聚糖、甲基纤维素和甲壳素中的至少一种；和/或所述固定相基质选自二氧化硅、二氧化钛和二氧化锆中的至少一种。

5.一种制备权利要求1-4中任意一项所述固定相的方法，包括以下步骤：

1)将多糖溶解在离子液体中，得到多糖/离子液体溶液，然后加入衍生化试剂A和B进行反应，然后进行沉淀、分离，制得含芳香基以及巯基或双键的功能化的多糖衍生物；其中，衍生化试剂B为B1或B2，

其中，R₆选自酰氯基、异氰酸酯基和羧酸基；p为0-8之间的整数，优选0-5之间的整数；R¹-R⁵各自独立地选自卤素、烷基和烷氧基，优选各自独立地选自卤素、C₁-C₅烷基和C₁-C₅烷氧基，更优选各自独立地选自氯、溴、碘、氟、甲基、乙基、异丙基、正丙基、甲氧基和乙氧基；R₅选自酰氯基、异氰酸酯基和羧酸基；

2)将固定相基质分散于有机溶剂中，加入衍生化试剂C，在碱性条件下反应，得到含巯基或含双键的功能化的固定相基质；其中，所述衍生化试剂C为C1或C2；且当衍生化试剂B为B1时，衍生化试剂C为C2，当衍生化试剂B为B2时，衍生化试剂C为C1；

3)在碱性条件、于引发剂的作用下，将所述多糖衍生物与所述功能化的固定相基质于有机溶剂中进行反应，通过双键与巯基的反应，得到键合型多糖类手性固定相；

其中，R₂和R₃各自独立地选自取代或未取代的亚烷基和亚芳基，优选各自独立地选自取代或未取代的C₁-C₅的亚烷基和C₆-C₁₅的亚芳基，更优选各自独立地选自亚甲基、亚乙基、亚丙基和亚苯基；R₄选自取代或未取代的烷基和芳基，优选选自取代或未取代的C₁-C₅的烷基和C₆-C₁₅的芳基，更优选选自甲基、乙基、正丙基、异丙基和苯基。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述衍生化试剂A与B摩尔比为1:1-500:1，更优选10:1-30:1；和/或所述衍生化试剂A与多糖中的羟基的摩尔比1:1-20:1，优选2:1-10:1。

7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，所述多糖衍生物的羟基取代程度为5-100％；和/或所述固定相基质的粒径为1.7-50μm，孔径为

8.根据权利要求5-7中任意一项所述的方法，其特征在于，所述衍生化试剂C与所述固定相基质的质量比为1:1-10:1，优选3:1-5:1；和/或所述多糖衍生物与所述功能化的固定相基质的质量比为1:10-1:1，优选1:5-1:2。

9.根据权利要求5-8中任意一项所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述反应的温度为0-150℃，优选60-100℃，所述反应的时间为0.1-72小时，优选5-12小时；和/或所述步骤2)中，所述反应的温度为0-140℃，优选70-110℃，所述反应的时间为0.5-40小时，优选10-24小时；和/或所述步骤3)中，所述反应温度为40-110℃，优选60-90℃，所述反应的时间为0.1-5小时，优选3-5小时。

10.根据权利要求5-9中任意一项所述的方法，其特征在于，所述多糖/离子液体溶液的浓度为1-30wt％，优选6-16wt％；和/或所述引发剂选自过氧化环己酮、过氧化二苯甲酰、叔丁基过氧化氢、偶氮二异丁腈、偶氮二异庚腈、1-羟基环己基苯基甲酮和2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮中的至少一种；和/或所述引发剂的用量为多糖衍生物的0.01-5wt％，优选0.5-2wt％。

11.根据权利要求1-4中任意一项所述的键合型多糖类手性固定相或根据权利要求5-10中任意一项所述方法制备得到的键合型多糖类手性固定相作为色谱固定相在手性分子分离中的应用。