CN105961242A - 一种人工诱导砗磲排放配子的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种人工诱导砗磲配子排放的方法。它包括以下步骤:a、选取成熟亲贝:在砗磲繁殖期内,筛选个头大、健康无损个体作为亲贝;b、配制催产试剂:将5‑羟色胺按照0.6‑0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂;c、注射亲本催产:根据砗磲重量,按照0.6‑1.25ml/kg亲本将催产剂注射到砗磲体内,砗磲排精排卵,得到配子。利用本发明方法可以高效率获得砗磲精卵,配子排放率近乎100%,这为砗磲人工繁育、遗传育种、增殖放流等奠定了坚实基础。
Description
技术领域:
本发明属于海洋农业中贝类繁育技术领域,具体涉及一种人工诱导砗磲排放配子的方法。
背景技术:
砗磲从西太平洋到印度洋非洲东海岸均有分布,栖息于低潮区附近的珊瑚礁间。它们是珊瑚礁生态系统中造礁主要生物物种,对珊瑚骨架具有支撑作用。它们不但具有美丽的外套膜,具有较高的观赏价值;而且肉可食用,具有很好的滋阴壮阳功效,深受国际市场青睐。
在我国的台湾、海南、西沙群岛及其它南海岛屿也有分布,分别为库氏砗磲、无鳞砗磲、鳞砗磲、长砗磲、番红砗磲、砗蠔等。长期以来,由于渔民过渡采捕,导致砗磲资源锐减。为此,如何快速恢复我国南海砗磲资源,维护珊瑚礁生态系统高多态性,成为关系到国计民生的焦点问题。其中,采用人工繁育增加砗磲数量是最有效的解决办法之一。那么,采用何种催产方式,如何获得砗磲配子成为本发明的主要创新点。
发明内容:
本发明的目的是提供一种人工诱导砗磲排放配子的方法。本发明可以高效获得成熟的砗磲精卵,为砗磲人工繁育、遗传育种、增殖放流奠定了坚实的基础。
本发明的人工诱导砗磲排放配子的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、选取成熟亲贝:根据砗磲繁育规律,在砗磲繁殖期内,筛选个头大、健康无损个体作为亲贝;
b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.6-0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂;
c、注射亲本催产:根据砗磲重量,按照0.6-1.25ml/kg砗磲将催产剂注射到砗磲体内,大约10分钟之内开始排精,之后排卵,催产效率100%。
优选,所述的选取成熟亲贝中的砗磲繁殖期,由于不同砗磲物种繁殖期存在差异,通常是通过注射器抽取性腺中少量精卵显微镜检查作为标准,成熟的精子在显微镜下不停跳到,成熟的卵子直径在100μm左右,卵黄积累颜色为深黄色或者黑色。
优选,所述的配制催产试剂中的催产剂,配制出来为无色透明液体,一般有效试用期在2个月以内,如果发现液体颜色变黄,说明已经变质,不能使用。
优选,所述的注射亲本催产中,注射部位可以是砗磲足基部、外套膜内层肌肉或性腺。
利用本发明方法可以100%获得砗磲精卵,配子排放率近乎100%,这为砗磲人工繁育、遗传育种、增殖放流方奠定了坚实基础。
李育培、卢传安公开了对比文件,一种砗磲贝的人工诱导产卵方法,专利号为ZL201310184339.7。本发明与对比文件相比,具有以下主要不同点:①方法不同:对比文件是物理诱导方法,而本发明是一种化学诱导方法;②繁琐程度不同:对比文件相对比较麻烦,需要暴晒、性产物诱导等技术手段,反复蒸腾砗磲亲贝,而本发明步骤极其简单,仅需要打入催产剂即可;③效率不同:对比文件诱导催产比率仅为80%相对较低,而本发明产卵排精比率可以达到100%;④排放率不同:对比文件排放配子不完全,而本发明配子排放率近乎100%;⑤时间间隔不同:对比文件诱导时间较长,累计诱导时间4.5-5.0小时,才可以排放配子,而本发明从催产到排放配子时间非常短,在10分钟之内;⑥时效性不同:对比文件时效性较差,仅在大潮期间诱导,亲本产卵排精时间受到严重限制,而本发明全天候可催产亲贝,不受日月大潮限制。由此可见,本发明是一种简单、快速获取砗磲配子的有效方法,为砗磲苗种产业化生产提供了良好的基础,具有很好的应用推广前景。
具体实施方式:
以下实施例是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
实施例1:
a、选取成熟亲贝:2016年4月初,从海南岛琼海购买鳞砗磲25只,平均体重每个个体5kg,利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站,将其放置于水池中,流水暂养3d。在此期间,发现砗磲对光线反应灵敏,非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺,在显微镜下观察,发现精子跳动频繁,卵子直径在100μm,卵黄深黄色,说明性腺已经成熟,处于繁殖期内;
b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂,该试剂无色透明;
c、注射亲本催产:随机抽取6只砗磲,每只注射3ml催产剂,注射部位为足基部,之后单独放置于盛满30L新鲜海水的红桶中,大约经过5-6分钟,砗磲开始排放精子,排放精子持续了10分钟左右,之后我们将其放置另外盛满50L新鲜海水的白桶中,大约经过10-12分钟之后开始排放卵子,卵子排放时间大约持续了1.0-1.5小时。这样,我们成功的获得了砗磲成熟配子。经过检测,6只砗磲全部排放配子,其中4只雌雄同体,排放了精卵,2只均为雌性,仅仅排放了卵子。对其排放后砗磲性腺进行了检测,显微镜下已经没有任何配子,说明排放率接近100%。
由此可见,通过本发明,可以100%成功催产砗磲,配子排放率近乎100%。
实施例2:
a、选取成熟亲贝:2016年3月末,从海南岛琼海购买长砗磲12只,平均体重每个个体3kg,利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站,将其放置于水池中,流水暂养5d。在此期间,发现砗磲对光线反应灵敏,非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺,在显微镜下观察,发现精子跳动频繁,卵子直径在100μm,卵黄深黄色,说明性腺已经成熟,处于繁殖期内;
b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.6mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂,该试剂无色透明;
c、注射亲本催产:随机抽取7只砗磲,每只注射2ml催产剂,注射部位为外套膜内层肌肉,之后单独放置于盛满30L新鲜海水的红桶中,大约经过7-8分钟,长砗磲开始排放精子,排放精子持续了10分钟左右,之后我们将其放置另外盛满50L新鲜海水的白桶中,大约经过8-10分钟之后开始排放卵子,卵子排放时间大约持续了45-60分钟。这样,我们成功的获得了砗磲成熟配子。经过检测,7只砗磲全部排放配子,其中6只雌雄同体,排放了精卵,1只均为雌性,仅仅排放了卵子。对其排放后砗磲性腺进行了检测,显微镜下已经没有任何配子,说明排放率接近100%。
由此可见,通过本发明,可以100%成功催产砗磲,配子排放率近乎100%。
实施例3:
a、选取成熟亲贝:2016年4月初,从海南岛琼海购买番红砗磲109只,平均体重每个个体0.4kg,利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站,将其放置于水池中,流水暂养3d。在此期间,发现砗磲对光线反应灵敏,非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺,在显微镜下观察,发现精子跳动频繁,卵子直径在100μm,卵黄深黄色,说明性腺已经成熟,处于繁殖期内;
b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.6mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂,该试剂无色透明;
c、注射亲本催产:随机抽取15只番红砗磲,每只注射0.5ml催产剂,注射部位为性腺部位,之后单独放置于盛满2L新鲜海水的红桶中,大约经过2-3分钟,番红砗磲开始排放精子,排放精子持续了3分钟左右,之后我们将其放置另外盛满5L新鲜海水的蓝桶中,大约经过3-4分钟之后开始排放卵子,卵子排放时间大约持续了5-6分钟。这样,我们成功的获得了番红砗磲成熟配子。经过检测,15只砗磲全部排放配子,其中9只雌雄同体,排放了精卵,6只均为雄性,仅仅排放了精子。对其排放后砗磲性腺进行了检测,显微镜下已经没有任何配子,说明排放率接近100%。
由此可见,通过本发明,可以100%成功催产砗磲,配子排放率近乎100%。
实施例4:
a、选取成熟亲贝:2016年4月初,从海南岛琼海购买砗蠔25只,平均体重每个个体5kg,利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站,将其放置于水池中,流水暂养3d。在此期间,发现砗蠔对光线反应灵敏,非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺,在显微镜下观察,发现精子跳动频繁,卵子直径在120μm,卵黄深黄色,说明性腺已经成熟,处于繁殖期内;
b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.6mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂,该试剂无色透明;
c、注射亲本催产:随机抽取9只砗蠔,每只注射3ml催产剂,注射部位为外套膜内层肌肉,之后单独放置于盛满20L新鲜海水的红桶中,大约经过5-6分钟,砗蠔开始排放精子,排放精子持续了6-7分钟左右,之后我们将其放置另外盛满30L新鲜海水的白桶中,大约经过7-8分钟之后开始排放卵子,卵子排放时间大约持续了30-40分钟。这样,我们成功的获得了砗蠔配子。经过检测,9只砗磲全部排放配子,其中7只雌雄同体,排放了精卵,2只均为雄性,仅仅排放了精子。对其排放后砗蠔性腺进行了检测,显微镜下已经没有任何配子,说明排放率接近100%。
由此可见,通过本发明,可以100%成功催产砗蠔,配子排放率近乎100%。
实施例5:
a、选取成熟亲贝:2016年4月初,从海南岛琼海购买瓷口砗蠔17只,平均体重每个个体4kg,利用水车运送至中科院南海海洋研究所海南热带海洋生物实验站,将其放置于水池中,流水暂养3d。在此期间,发现砗蠔对光线反应灵敏,非常健康。经注射器经出水孔从性腺中取出少许性腺,在显微镜下观察,发现精子跳动频繁,卵子直径在120μm,卵黄深黄色,说明性腺已经成熟,处于繁殖期内;
b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂,该试剂无色透明;
c、注射亲本催产:随机抽取12只瓷口砗蠔,每只注射3ml催产剂,注射部位为外套膜内层肌肉,之后单独放置于盛满20L新鲜海水的红桶中,大约经过4-6分钟,砗蠔开始排放精子,排放精子持续了5-8分钟左右,之后我们将其放置另外盛满30L新鲜海水的白桶中,大约经过6-8分钟之后开始排放卵子,卵子排放时间大约持续了30-40分钟。这样,我们成功的获得了瓷口砗蠔配子。经过检测,12只砗磲全部排放配子,其中10只雌雄同体,排放了精卵,2只均为雄性,仅仅排放了精子。对其排放后砗蠔性腺进行了检测,显微镜下已经没有任何配子,说明排放率接近100%。
由此可见,通过本发明,可以100%成功催产瓷口砗蠔,配子排放率近乎100%。
Claims (2)
1.一种人工诱导砗磲排放配子的方法,其特征在于,包括以下步骤:
a、选取成熟亲贝:在砗磲繁殖期内,筛选个头大、健康无损个体作为亲贝;
b、配制催产试剂:将5-羟色胺按照0.6-0.8mg/ml浓度溶于生理盐水中,作为催产剂;
c、注射亲本催产:根据砗磲重量,按照0.6-1.25ml/kg亲本将催产剂注射到砗磲体内,砗磲排精排卵,得到配子。
2.根据权利要求1所述的人工诱导砗磲排放配子的方法,其特征在于,所述的将催产剂注射到砗磲体内,其注射部位是砗磲足基部、外套膜内层肌肉或性腺。
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