CN105950507A - 枯草芽孢杆菌和菌剂及其在禽畜养殖废水处理方面的应用和处理方法 - Google Patents

枯草芽孢杆菌和菌剂及其在禽畜养殖废水处理方面的应用和处理方法 Download PDF

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CN105950507A CN201610348479.7A CN201610348479A CN105950507A CN 105950507 A CN105950507 A CN 105950507A CN 201610348479 A CN201610348479 A CN 201610348479A CN 105950507 A CN105950507 A CN 105950507A
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Abstract

本发明公开了一种枯草芽孢杆菌和菌剂及其在禽畜养殖废水处理方面的应用和处理方法，该枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.12317。本发明还提供了一种微生物菌剂，将该微生物菌剂和禽畜养殖废水与秸秆及禽畜粪便混合制成蚯蚓养殖基质，同时在养殖过程中继续添加禽畜养殖废水可以促进蚯蚓增重产茧。本发明的养殖废水处理方法可以在养殖蚯蚓的过程中消耗大量禽畜养殖废水，并且整个过程中禽畜养殖废水完全被蚯蚓养殖过程消化，无废水外排；得到的蚯蚓和蚯蚓粪可以用作禽畜养殖的饲料和种植业的肥料，具有可观的经济效益；处理禽畜养殖废水过程同时还消耗了大量秸秆。本发明的禽畜养殖废水处理方法具有处理效率高、无污染、占地少、能耗低且经济效益高的优点。

Description

枯草芽孢杆菌和菌剂及其在禽畜养殖废水处理方面的应用和处理方法
技术领域
本发明涉及禽畜养殖领域，具体地，涉及一株枯草芽孢杆菌和菌剂及其在禽畜养殖废水处理方面的应用和处理方法。
背景技术
随着我国禽畜养殖业的规模不断扩大，禽畜养殖污染暴露出来的环境问题也日益增多，大量的禽畜排泄物、各种养殖废弃物的排放，不仅影响了禽畜养殖的整体效益，而且污染水源，造成水体富营养化，对自然环境和人体健康都存在极大的危害。畜禽养殖废水主要包括尿、部分粪和养殖舍冲洗水，该类废水有机物浓度高、悬浮物多、氨氮含量高、臭味大。这些废水中的有机物、氨氮等物质不经过处理，直接排入水体，将对其周围水体造成严重富营养化，严重破坏水体的自洁能力，造成水体发黑变臭，影响环境和农业灌溉。
现有技术中，养殖废水的处理方法主要包括物理处理法、化学处理法和生物处理法三类。目前广泛应用的生物化学处理法是利用微生物代谢作用，使污废水中呈溶解、胶体状态的有机污染物转化为稳定的无害物质的一种处理方法。主要可分为两大类，即利用好氧微生物作用的好氧法(好氧氧化法)和利用厌氧微生物作用的厌氧法(厌氧还原法)。前者广泛用于处理城市污水及有机性生产污水，其中有活性污泥法和生物膜法两种；后者多用于处理高浓度有机污水与污水处理过程中产生的污泥，现在也开始用于处理城市污水与低浓度有机污水。目前这些方法都存在能耗大、占地广、投资和运行费用高等缺陷，并且处理过程中产生的污泥及废水仍需向系统外排放，造成较大的环境压力。
发明内容
本发明的目的是提供一株枯草芽孢杆菌和菌剂及其在禽畜养殖废水处理方面的应用和处理方法，该处理方法可以解决现有的处理方法产生污泥及废水需向处理系统外排放的技术问题，同时该处理方法可以解决现有技术中禽畜养殖废水处理的能耗大、占地广、投资和运行费用高的问题。
本发明的发明人分离了一株枯草芽孢杆菌，发现其可以高效地将氮素转化为蚯蚓生长需要的氮源，将铵态氮转化为亚硝态氮从而减少氨氮的产生，同时还具有将纤维素降解成腐殖酸类物质，由此得到了本发明。
为了实现上述目的，本发明提供一株枯草芽孢杆菌，该枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.12317。
本发明还提供一种微生物菌剂，该微生物菌剂含有菌体和培养基，菌体含有保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌。
本发明还提供上述微生物菌剂在处理禽畜养殖废水方面的应用。
本发明还提供上述微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法，该方法包括以下步骤：
(1)使所述微生物菌剂与秸秆、禽畜粪便和禽畜养殖废水混合均匀得到蚯蚓养殖基质，其中，相对于100重量份秸秆，所述微生物菌剂的用量为3-10重量份，禽畜粪便的用量为20-40重量份，禽畜养殖废水的用量为800-1000重量份；
(2)在所述蚯蚓养殖基质上接种蚯蚓，其中，相对于100重量份秸秆，所述蚯蚓的接种密度为20-40条；
(3)使所述蚯蚓在蚯蚓养殖基质上养殖50-90天，养殖过程中，在蚯蚓养殖基质中加入禽畜养殖废水，加入量为10-30重量份/天；
(4)养殖过程结束后，将蚯蚓和蚯蚓粪分离，蚯蚓用于禽畜养殖饲料及制药业原料，蚯蚓粪用于果蔬种植肥料。
通过上述技术方案，本发明的枯草芽孢杆菌和微生物菌剂可以分解纤维素、产生腐殖酸、降解氨氮，将该微生物菌剂和禽畜养殖废水与秸秆及禽畜粪便混合制成蚯蚓养殖基质并采用该养殖基质饲养蚯蚓，同时在养殖过程中继续添加禽畜养殖废水可以促进蚯蚓增重产茧。本发明的养殖废水处理方法可以在养殖蚯蚓的过程中消耗大量禽畜养殖废水，并且整个过程中禽畜养殖废水完全被蚯蚓养殖过程消化，无废水外排；养殖得到的蚯蚓和蚯蚓粪可以分别用作禽畜养殖的饲料和种植业的肥料，具有可观的经济效益；处理禽畜养殖废水过程同时还消耗了大量的农作物秸秆，也为秸秆处理找到新的出口。本发明的禽畜养殖废水处理方法具有处理效率高、无污染、占地少、能耗低且经济效益高的优点。
本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
生物材料保藏
本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是本发明的发明人从位于北京的牛粪及堆腐秸秆中分离的纯培养物，其保藏编号为CGMCC No.12317，保藏日期为2016年3月29日，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为枯草芽孢杆菌。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
本发明提供一株枯草芽孢杆菌，该枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.12317。
本发明还提供一种微生物菌剂，该微生物菌剂含有菌体和培养基，菌体 含有保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌。
根据本发明，微生物菌剂中含有的菌体的量可以在很大范围内改变，例如每克微生物菌剂中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌的活菌数可以为107-1011cfu，优选情况下，每克微生物菌剂中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌的活菌数可以为108-109cfu。
根据本发明，微生物菌剂的菌体中还可以含有商品号为ACCC01955的蜡状芽孢杆菌和商品号为ACCC30166的绿色木霉菌。其中，蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量可以在很大范围内变化，优选情况下，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量比可以为1：(0.2-0.8)：(0.5-1.2)。保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166在上述含量范围内时，微生物菌剂降解氨氮的效率高，产生的腐殖酸较多，有利于改善蚯蚓养殖基质的养分结构，有利于蚯蚓的增重和产茧。
根据本发明，培养基的种类可以在很大范围内改变，可以为各种能够用于培养枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌和绿色木霉菌的培养基，例如，可以为牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、LB培养基等常用培养基作上述培养基能够商购得到或者根据“微生物培养基手册”(Microbiology Culture Media Manual)的记载制备得到。例如，培养基可以为牛肉膏蛋白胨培养基，其含有1-5g/L的牛肉膏、5-20g/L的蛋白胨和3-8g/L的氯化钠。
其中，上述各种培养基可以按照常规的灭菌方法进行灭菌后备用，例如在115-125℃和1.5-2个标准大气压的条件下灭菌10-30分钟。
其中，所述微生物菌剂的制备方法可以包括：将保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166分别接种于培养基中进行培养。优选情况下，通过培养可以使 得到的每克所述微生物菌剂中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的活菌数分别为107-1011cfu，更优选为108-109cfu。在培养的过程中，可以通过常规的方法，例如血球板计数法或OD值观察法得到活菌的浓度。
培养后的菌液可以直接作为微生物菌剂使用，优选情况下，菌液通过包括无菌过滤、冷冻干燥等步骤进一步加工为更方便贮藏的剂型的微生物菌剂使用。其中，菌种的培养条件没有特别的限制，可以为菌种培养过程中常用条件，例如采用摇床震荡培养，培养温度可以为28-37℃，培养时间可以为1-3天。
本发明还提供了如上所述的枯草芽孢杆菌和如上所述的微生物菌剂在处理禽畜养殖废水中的应用。
本发明还提供了如上所述的枯草芽孢杆菌和如上所述的微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法，该方法包括以下步骤：
(1)使微生物菌剂与秸秆、禽畜粪便和禽畜养殖废水混合均匀得到蚯蚓养殖基质，其中，相对于100重量份秸秆，所述微生物菌剂的用量为3-10重量份，禽畜粪便的用量为20-40重量份，禽畜养殖废水的用量为800-1000重量份；
(2)在蚯蚓养殖基质上接种蚯蚓，其中，相对于100重量份秸秆，蚯蚓的接种密度为20-40条；
(3)使蚯蚓在蚯蚓养殖基质上养殖50-90天，养殖过程中，在蚯蚓养殖基质中加入禽畜养殖废水，加入量为10-30重量份/条·天；
(4)养殖过程结束后，将蚯蚓和蚯蚓粪分离，蚯蚓用于禽畜养殖饲料，蚯蚓粪用于果蔬种植肥料。
在根据本发明的处理方法中，禽畜粪便的含水率可以在很大范围内变化，优选情况下，禽畜粪便的含水率可以为6-20％。含水率在上述范围内的 禽畜粪便有利于与秸秆、微生物菌剂及禽畜养殖废水混合均匀，并使蚯蚓养殖基质保持适宜的含水率以提高蚯蚓的增重率和产茧率。
在根据本发明的处理方法中，秸秆的种类没有特别的要求，可以为本领域技术人员所熟知的秸秆种类，例如可以为水稻、玉米、小麦等农作物秸秆。秸秆和禽畜粪便的粒径可以在很大范围内变化，优选情况下，秸秆和禽畜粪便的粒径可以为5-10mm。上述粒径范围内的秸秆和禽畜粪便有利于与微生物菌剂及禽畜养殖废水混合均匀。
在根据本发明的处理方法中，禽畜养殖废水可以为来自猪、牛、羊、鸭、鸡和鹅等养殖场的废水，其C/N比和总氮浓度可以在很大范围内变化，禽畜养殖废水的总氮浓度优选为100-200mg/L。
在根据本发明的处理方法中，蚯蚓养殖基质的pH没有特别的要求，可以为本领域技术人员所熟知的，例如蚯蚓养殖基质的pH可以为7-9。符合上述要求的蚯蚓养殖基质有利于蚯蚓增重和产茧，并且可以消耗较多量的禽畜养殖废水。
在根据本发明的处理方法中，养殖的蚯蚓种类没有特别的要求，可以为本领域技术人员所熟知的种类，例如蚯蚓可以优选为赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)、环毛蚓(Pheretima tschiliensis)、异唇蚓(Allolobophora)和双胸蚓(Bimastus)中的一种或几种，更优选地可以为赤子爱胜蚓。上述种类的蚯蚓在生长过程中可以消耗更多禽畜养殖废水，在本发明的蚯蚓养殖基质生长时具备较高的增重率和产茧率。
下面通过实施例进一步说明本发明，但是本发明并不因此而受到任何限制。
实施例1
本实施例用于说明本发明的枯草芽孢杆菌的培养及微生物菌剂的制备。
将保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌接种到LB培养基(含10g/L的胰蛋白胨、5g/L的酵母提取物和10g/L的NaCl)中，在30℃和200转/分振荡下培养。所得的菌液即为本实施例的微生物菌剂V1，每克该微生物菌剂中，活菌数为109cfu。
实施例2
本实施例用于说明本发明的枯草芽孢杆菌的培养及微生物菌剂的制备。
(1)将保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、商品号为ACCC01955的蜡状芽孢杆菌和商品号为ACCC30166的绿色木霉菌分别接种到牛肉膏蛋白胨培养基(含20g/L的蛋白胨、5g/L的牛肉膏和5g/L的NaCl)中，在37℃和180转/分振荡下进行培养，在培养过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的活菌数分别达到108cfu/克。
(2)将(1)中得到的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166按比例进行混合，使得到的微生物菌剂V2中，枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量比为1：0.2：0.5。
实施例3
本实施例用于说明本发明的枯草芽孢杆菌的培养及微生物菌剂的制备。
(1)将保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、商品号为ACCC01955的蜡状芽孢杆菌和商品号为ACCC30166的绿色木霉菌分别接种到营养肉汤培养基(含10g/L的蛋白胨、3g/L的牛肉膏粉和5g/L的NaCl)中，在35℃和160转/分振荡下进行培养，在培养过程中进行取样并通过显 微镜直接计数法进行观察，直至保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的活菌数分别达到2×108cfu/克。
(2)将(1)中得到的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166按比例进行混合，使得到的微生物菌剂V3中，枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量比为1：0.8：1.2。
实施例4
本实施例用于说明本发明的枯草芽孢杆菌的培养及微生物菌剂的制备。
(1)将保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、商品号为ACCC01955的蜡状芽孢杆菌和商品号为ACCC30166的绿色木霉菌分别接种到营养肉汤培养基(含10g/L的蛋白胨、3g/L的牛肉膏粉和5g/L的NaCl)中，在35℃和160转/分振荡下进行培养，在培养过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的活菌数分别达到8×108cfu/克。
(2)将(1)中得到的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166按比例进行混合，使得到的微生物菌剂V4中，枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量比为1：0.5：1。
实施例5
本实施例用于说明本发明的枯草芽孢杆菌的培养及微生物菌剂的制备。
采用与实施例4相同的培养方法，所不同的是，得到的微生物菌剂V5 中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌的cfu含量为107cfu/克。
实施例6
本实施例用于说明本发明的枯草芽孢杆菌的培养及微生物菌剂的制备。
采用与实施例4相同的培养方法得到微生物菌剂V6，所不同的是，将蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166分别替换为等cfu含量的保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌。
实施例7
采用与实施例4相同的培养方法，所不同的是，得到的微生物菌剂V7中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量比为1：2：2。
对比例1
本对比例用于说明与本发明不同的微生物菌剂。
采用与实施例4相同的培养方法得到微生物菌剂V8，所不同的是，将保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌替换为等cfu含量的蜡状芽孢杆菌ACCC01955。
对比例2
本对比例用于说明与本发明不同的微生物菌剂。
采用与实施例4相同的培养方法，所不同的是，将微生物菌剂中的保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌替换为等cfu含量的商品号为 14580TM的地衣芽孢杆菌得到本对比例的微生物菌剂V9。
对比例3
本对比例用于说明与本发明不同的微生物菌剂。
采用与实施例4相同的培养方法，所不同的是，微生物菌剂中采用如下方法制备：(1)在100重量份的营养肉汁培养基(蛋白胨的含量为0.8重量％、NaCl的含量为0.4重量％、牛肉膏的含量为0.45重量％、余量为无菌水，pH为7.0)中接种4重量份的地衣芽孢杆菌的菌株(ACCC 10146，购自中国农业微生物菌种保藏中心)，37℃发酵培养，在发酵过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至地衣芽孢杆菌的活菌数为0.8×1010个/克；(2)在100重量份的营养肉汁培养基中接种2重量份的枯草芽孢杆菌的菌株(ACCC 10629，购自中国农业微生物菌种保藏中心)，37℃发酵培养，在发酵过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至枯草芽孢杆菌ACCC 10629的活菌数为0.8×1010个/克的培养基，其中，所述肉汁培养基中，蛋白胨的含量为1重量％、NaCl的含量为0.25重量％、牛肉膏的含量为0.45重量％、余量为无菌水，pH为7.0。(3)在100重量份的营养肉汁培养基中接种3重量份的短小芽孢杆菌的菌株(ACCC 10113，购自中国农业微生物菌种保藏中心)，37℃发酵培养，在发酵过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至短小芽孢杆菌的活菌数为0.8×1010个/克，其中，所述肉汁培养基中，蛋白胨的含量为0.5重量％、NaCl的含量为0.5重量％、牛肉膏的含量为0.3重量％、余量为无菌水，pH为7.0。(4)在100重量份的YPG培养基中接种4重量份的凝结芽孢杆菌的菌株(ACCC 10229，购自中国农业微生物菌种保藏中心)，37℃发酵培养，在发酵过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至凝结芽孢杆菌的活菌数为0.8×1010个/克，其中，所述YPG培养基中，蛋白胨的含量为0.8重量％、葡萄糖的含量为0.3重量％、酵母膏的含量为0.8重量％、余量为无菌水，该培养基的pH为7.2。(5)在100重量份的麦芽汁培养基(上海晶纯试剂有限公司)中接种3重量份的酿酒酵母菌株(ACCC 20237，购自中国农业微生物菌种保藏中心)， 30℃发酵培养，在发酵过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至酿酒酵母的活菌数为0.8×1010个/克的培养基。(6)在100重量份的高氏合成一号培养基中接种4重量份的泾阳链霉菌的菌株(ACCC 40126，购自中国农业微生物菌种保藏中心)，30℃发酵，在发酵过程中进行取样并通过显微镜直接计数法进行观察，直至泾阳链霉菌的活菌数为0.8×1010个/克，其中，所述高氏一号培养基中，以该培养基的总重量为基准，可溶性淀粉的含量为2重量％、KNO3的含量为0.2重量％、K2HPO4的含量为0.7重量％、NaCl的含量为0.03重量％、余量为无菌水，该培养基的pH为7.2。(7)将步骤(1)至(6)中得到的地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、酿酒酵母和泾阳链霉菌按照比例进行混合，使得到的微生物菌剂V10中，以得到的微生物菌剂的总活菌数为基准，地衣芽孢杆菌的活菌数为总活菌数的15重量％、枯草芽孢杆菌的活菌数为总活菌数的15％、短小芽孢杆菌的活菌数为总活菌数的20％、凝结芽孢杆菌的活菌数为总活菌数的20％、酿酒酵母的活菌数为总活菌数的15％、泾阳链霉菌的活菌数为总活菌数的15％。
测试实施例1
本实施例用于说明本发明的微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法。
选取赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)的亚种大平二号，用新鲜的水稻秸秆饲养大平二号蚯蚓作驯化，在驯化一周后挑选有活力的蚯蚓加入到处理系统中。秸秆选用水稻秸秆，用高速粉碎机粉碎至粒径为10mm。
取100重量份水稻秸秆(粒径为10mm)，3重量份微生物菌剂V1，20重量份禽畜粪便和1000重量份奶牛场养殖废水(总氮浓度为100mg/L)混合均匀得到蚯蚓养殖基质(pH为7)；在蚯蚓养殖基质上接种20条蚯蚓；蚯蚓养殖过程中，每天向蚯蚓养殖基质中加入10重量份禽畜养殖废水；养殖 50天后测量蚯蚓的增重和产茧率，以及蚯蚓养殖基质中的氮磷钾提高率、有机质降低率和C/N降低率，测试结果列于表1中。
测试实施例2
本实施例用于说明本发明的微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法。
选取赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)的亚种大平二号，用新鲜的小麦秸秆饲养大平二号作驯化，在驯化一周后挑选有活力的蚯蚓加入到处理系统中。秸秆选用小麦秸秆，用高速粉碎机粉碎至粒径为5mm。
取100重量份小麦秸秆(粒径为5mm)，10重量份微生物菌剂V2，40重量份禽畜粪便和800重量份猪场养殖废水(总氮浓度为200mg/L)混合均匀得到蚯蚓养殖基质(pH为7.2)；在蚯蚓养殖基质上接种40条蚯蚓；蚯蚓养殖过程中，每天向蚯蚓养殖基质中加入30重量份禽畜养殖废水；养殖90天后测量增重和产茧率，以及蚯蚓养殖基质中的氮磷钾提高率、有机质降低率和C/N降低率，测试结果列于表1中。
测试实施例3
本实施例用于说明本发明的微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法。
选取赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)的亚种大平二号，用新鲜的玉米秸秆饲养大平二号作驯化，在驯化一周后挑选有活力的蚯蚓加入到处理系统中。秸秆选用玉米秸秆，用高速粉碎机粉碎至粒径为10mm。
取100重量份玉米秸秆(粒径为10mm)，8重量份微生物菌剂V3，30重量份禽畜粪便和900重量份猪场养殖废水(总氮浓度为200mg/L)混合均匀得到蚯蚓养殖基质(pH为7.3)；在蚯蚓养殖基质上接种25条蚯蚓；蚯蚓养殖过程中，每天向蚯蚓养殖基质中加入20重量份禽畜养殖废水；养殖80天后测量增重和产茧率，以及蚯蚓养殖基质中的氮磷钾提高率、有机质降低 率和C/N降低率，测试结果列于表1中。
测试实施例4
本实施例用于说明本发明的微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法。
选取赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)的亚种大平二号，用新鲜的水稻秸秆饲养大平二号蚯蚓作驯化，在驯化一周后挑选有活力的蚯蚓加入到处理系统中。秸秆选用水稻秸秆，用高速粉碎机粉碎至粒径为10mm。
取100重量份水稻秸秆(粒径为10mm)，5重量份微生物菌剂V4，35重量份禽畜粪便和850重量份猪场养殖废水(总氮浓度为200mg/L)混合均匀得到蚯蚓养殖基质(pH为7.3)；在蚯蚓养殖基质上接种20条蚯蚓；蚯蚓养殖过程中，每天向蚯蚓养殖基质中加入25重量份禽畜养殖废水；养殖75天后测量增重和产茧率，以及蚯蚓养殖基质中的氮磷钾提高率、有机质降低率和C/N降低率，测试结果列于表1中。
测试实施例5-7
采用与测试实施例4相同的处理方法，所不同的是，将微生物菌剂V4分别替换成等重量的微生物菌剂V5-V7。
测试实施例8
采用与测试实施例4相同的处理方法，所不同的是，将赤子爱胜蚓(Eisenia fetida)的亚种大平二号替换为相同数量的异唇蚓(Allolobophora)。
测试对比例1-3
采用与测试实施例4相同的处理方法，所不同的是，将微生物菌剂V4分别替换成等重量的微生物菌剂V8-V10。
测试对比例4
采用与测试实施例4相同的处理方法，所不同的是，蚯蚓养殖基质中不加入微生物菌剂。
测试对比例5
采用与测试实施例4相同的处理方法，所不同的是，将蚯蚓养殖基质中的禽畜养殖废水替换为等重量的纯水。
表1
根据表1数据，测试实施例4与测试对比例4-5相比可以看出，相对于采用秸秆和禽畜粪便作为蚯蚓养殖基质(测试对比例5)或养殖基质中不加入本发明的微生物菌剂(测试对比例4)，本发明的微生物菌剂和禽畜养殖废水与秸秆及禽畜粪便混合制成蚯蚓养殖基质可以促进蚯蚓增重产茧，并降低养殖废液中的总氮、氨氮和COD等污染负荷。测试实施例4与测试对比例1-3相比可以看出，相对于微生物菌剂中不加入枯草芽孢杆菌或将其替换为 其他菌或加入其它微生物菌剂，本发明的蚯蚓养殖基质的微生物菌剂可以促进蚯蚓增重和产茧，并消耗禽畜养殖废水，降低污染负荷。
从测试实施例4与测试实施例5的数据对比可以看出，在本发明优选的每克微生物菌剂中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌的活菌数为108-109cfu的情况下，蚯蚓养殖基质的微生物菌剂可以更有效地促进蚯蚓增重和产茧，并消耗禽畜养殖废水，降低污染负荷。
从测试实施例4和测试实施例6-7的数据对比可以看出，在本发明优选的微生物菌剂的菌体中还含有商品号为ACCC01955的蜡状芽孢杆菌和商品号为ACCC30166的绿色木霉菌，其中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量比为1：(0.2-0.8)：(0.5-1.2)的情况下，微生物菌剂的降解氨氮和分解纤维素的效果好，蚯蚓增重快产茧多。
从测试实施例4和测试实施例8的数据对比可以看出，在本发明优选的蚯蚓为赤子爱胜蚓的情况下，本发明的微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法具有更有效分解养殖废水中的有机物以及促进蚯蚓增重产茧的效果。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (10)

1.一种枯草芽孢杆菌，其特征在于：该枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的保藏编号为CGMCC No.12317。
2.一种微生物菌剂，该微生物菌剂含有菌体和培养基，其特征在于：所述菌体含有保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌。
3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于：每克所述微生物菌剂中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌的活菌数为108-109cfu。
4.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于：所述菌体中还含有商品号为ACCC01955的蜡状芽孢杆菌和商品号为ACCC30166的绿色木霉菌，其中，保藏编号为CGMCC No.12317的枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌ACCC01955和绿色木霉菌ACCC30166的cfu含量比为1：(0.2-0.8)：(0.5-1.2)。
5.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于：所述培养基为牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基和LB培养基中的至少一种。
6.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌或权利要求2-5中任意一项所述的微生物菌剂在处理禽畜养殖废水中的应用。
7.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌或权利要求2-5中任意一项所述的微生物菌剂处理禽畜养殖废水的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)使所述微生物菌剂与秸秆、禽畜粪便和禽畜养殖废水混合均匀得到蚯蚓养殖基质，其中，相对于100重量份秸秆，所述微生物菌剂的用量为3-10重量份，禽畜粪便的用量为20-40重量份，禽畜养殖废水的用量为800-1000重量份；
(2)在所述蚯蚓养殖基质上接种蚯蚓，其中，相对于100重量份秸秆，所述蚯蚓的接种密度为20-40条；
(3)使所述蚯蚓在蚯蚓养殖基质上养殖50-90天，养殖过程中，在蚯蚓养殖基质中加入禽畜养殖废水，加入量为10-30重量份/天；
(4)养殖过程结束后，将蚯蚓和蚯蚓粪分离，蚯蚓用于禽畜养殖饲料及制药业原料，蚯蚓粪用于果蔬种植肥料。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述禽畜粪便的含水率为6-20％，所述秸秆和禽畜粪便的粒径为5-10mm。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述禽畜养殖废水的总氮浓度为100-200mg/L。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述蚯蚓为赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)。
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