CN105948888A - 一种多功能高效生态有机生物液肥 - Google Patents

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Abstract

一种多功能高效生态有机生物液肥，将水稻秸秆发酵熬煮浓缩液、蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液、水稻秸秆固氮菌液、水稻秸秆解磷解钾菌液、水稻秸秆抗虫菌液、中药抗病防虫液等量或不等量混匀,即为本多功能高效生态有机生物液肥。优点：变废为宝，促进作物代谢和抗病虫害能力，促进作物生长和壮苗，具有良好的促生长发育和抗病防虫作用，作物吸收好、吸收迅速，增强了施用作物的保健功能。

Description

一种多功能高效生态有机生物液肥
技术领域
本发明涉及农业肥料领域。
技术背景
近年来，随着农田大量施用化肥、农药，造成了土壤板结、作物吸收养分困难、有机质严重缺乏、养分失调、有害物质积累以及土壤有益微生物数量稀少，土壤生态系统已遭到破坏。长期使用化肥农药，病害虫害易发多发、抗药性增强，不得不更大量施用农药化肥，形成恶性循环，农产品品质下降。近年来研究证实，充分补充作物有机养分，修复土壤生态系统，对促进作物生长、防治病虫害、提高和改善作物品质有重要作用。以现代生物技术及我国传统中药资源，迅速以有机养分、功能微生物等供给作物各种营养，防治病害虫害，促进长期高产稳产，有重要意义。
发明内容
本发明的目的就是针对现有技术之上述不足，而提供一种多功能高效生态有机生物液肥，制备方法为：
1）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液
（1）制备水稻秸秆发酵菌种液
A）制备菌种培养基
a、制备A液体培养基：将土豆80-120g、水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入红糖4-6g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得A液体培养基；
b、制备B液体培养基：将水稻秸秆粉80-120g加水900-1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入(NH4)2SO4 2-3g、(NH4)3PO4 2-3g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得B液体培养基；
c、制备C液体培养基：将红糖38-42g、(NH4)2SO4 18-22g和水900-110ml混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5-7.5, 100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得C液体培养基；
d、制备D液体培养基：将水稻秸秆粉8-12g加水900-110ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入红糖38-42g、(NH4)2SO4 18-22g、补足水量，混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5-7.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得D液体培养基；
B）制备各菌种菌株的菌种液
a、将绿色木霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
b、将米曲霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
c、将草酸青霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
d、将美味丝葚霉菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入D液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长并菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
e、将黄色短杆菌菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊、颜色改变；继续无菌接入D液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至发酵液浑浊、颜色改变，并经细胞平板涂抹计数达5×108/ml以上；
C）制备水稻秸秆发酵菌种液
将上述培养的绿色木霉、米曲霉、草酸青霉、美味丝葚霉和黄色短杆菌的菌种液等量混合，即为水稻秸秆发酵菌种液；
（2）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液
A）原料重量份配比
水稻秸秆发酵菌种液15-20 水稻秸秆100 红糖3-5公斤 水200-250(NH4)2SO4 10-15(NH4)3PO4 10-15 KH2PO4 5-10 MgCl2 5-10 FeSO43-5
MnCl2 3-5 ZnSO43-5 NaSeO3 0.5-1；
B）制备方法
a、水稻秸秆发酵
将水稻秸秆粉粹为1-2cm小段，以2.8-3.2%石灰水浸泡12-24小时后捞出，放入发酵罐中，同时按原料配比加入水、红糖、水稻秸秆发酵菌种液，及1/2配方用量的(NH4)2SO4 、KH2PO4、MgCl2 、FeSO4、MnCl2、ZnSO4、NaSeO3，25-40℃、气驱搅拌发酵7-8日，至可见发酵罐内菌丝大量生长；继续加入另1/2的用量(NH4)2SO4 、KH2PO4、MgCl2 、FeSO4、MnCl2、ZnSO4、NaSeO3，25-40℃、气驱搅拌发酵5-6日，至发酵液中可见大量菌丝、秸秆明显减少且腐软、检测有机氮含量≥2.0g/100ml时，即完成水稻秸秆发酵；
b、熬煮
发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器，加热排除冷空气后继续加热至110-130℃、搅拌、熬煮20-24小时，至秸秆及菌丝完全溶解，即为水稻秸秆发酵熬煮液；
c、浓缩
将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤转移至敞开加热容器内，继续文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮2-4小时，使液体浓缩至30-35公斤，即为水稻秸秆发酵熬煮浓缩液；
2）制备水稻秸秆蛹虫草菌丝熬煮浓缩液
A)制备蛹虫草菌种液
a、制备E液体培养基:将去皮土豆80-120 g、蚕蛹粉8-12g加水900-1100ml煮至沸腾继续文火维持沸腾0.5-1小时，冷却后再加入红糖14-16g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、补足水量1000ml，混匀，以1mol/L盐酸调节pH值为6.0-6.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得E液体培养基；
b、制备F液体培养基: 将水稻秸秆发酵熬煮液180-220g和水900-1100ml混匀，并通过加入1mol/L盐酸调节pH值为6.0-6.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得F液体培养基；
c、将蛹虫草菌种活化，无菌接入到E液体培养基，转速160-200r/min、20-25℃摇床培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；
d、菌丝大量生长后，继续无菌接入F液体培养基，转速160-200r/min、20-25℃培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长，菌丝生物量达500mg/100ml以上，即为蛹虫草菌种液；
B)制备水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液
将100公斤水稻秸秆发酵熬煮液加入到专用发酵罐中，加入蛹虫草菌种液4-6公斤，20-25℃气驱搅拌培养5-7日，至发酵液粘稠、出现大量菌丝且菌丝生物量达750-850mg/100ml以上，结束发酵；发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器内，加热排除冷空气后继续加热至100-120℃，搅拌、熬煮3-4小时，至菌丝完全溶解；菌丝完全溶解后，继续转移至敞开加热容器内，文火加热并维持微沸腾2-4小时，使液体浓缩至30-35公斤，即为水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液；
3）制备水稻秸秆固氮菌液
A) 制备G液体培养基
将蛋白胨4-6g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、水900-1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得G液体培养基；
B) 制备H液体培养基
将水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、水900-1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得H液体培养基；
C) 制备水稻秸秆固氮菌种液
将蜡样芽胞杆菌、阿氏芽孢杆菌、嗜糖假单胞杆菌、固氮菌菌种进行活化，分别无菌接入G液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊，继续无菌接入H液体培养基, 160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至各菌种菌株菌液浑浊，且经细胞平板计数达5×108/ml以上，即为各菌株菌种液；再将各菌株菌种液等量混合, 即为水稻秸秆固氮菌种液；
D) 制备水稻秸秆固氮菌液
将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤加入到专用发酵罐中，并加入水稻秸秆固氮菌种液4-6公斤,气驱搅拌发酵,25-40℃培养1-2日，至细胞计数达5×108/ml以上，即为水稻秸秆固氮菌液；
4)制备水稻秸秆解磷解钾菌液
A) 制备I液体培养基
将蛋白胨4-6g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、磷矿粉8-12g、钾长石粉4-6g、水900-1100ml混匀, 100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得I液体培养基；
B) 制备J液体培养基
将水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、磷矿粉8-12g、钾长石粉4-6g、水900-1100ml混匀,100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得J液体培养基；
C) 制备解磷解钾菌株菌种液
将枯草芽胞杆菌、芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌进行活化，分别无菌接入I液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，当各菌株大量生长、菌液浑浊，进一步分别无菌接入J液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至各菌株菌液浑浊、细胞计数达5×108/ml以上，即为各解磷解钾菌株菌种液；
D) 制备水稻秸秆解磷解钾菌液
a、原料配比
水稻秸秆发酵熬煮液80-120公斤、磷矿粉1-3公斤、钾长石粉0.5-2公斤；
b）制备方法
在各专用发酵罐中，按照配方加入水稻秸秆发酵熬煮液、磷矿粉、钾长石粉，再分别加入各解磷解钾菌株菌种液4-6公斤，并气驱搅拌、25-40℃发酵8-10日，至各菌株细胞计数达5×108/ml以上，即为各相应菌株水稻秸秆解磷解钾菌液；将各菌株菌液等量混合，即为水稻秸秆解磷解钾菌液；
5）制备水稻秸秆抗虫菌液
A）制备抗虫菌种液
a、制备K液体培养基
将蛋白胨4-6 g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、水900-1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得K液体培养基；
b、制备L液体培养基
水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、水900-1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得L液体培养基；
c、将苏云金芽孢杆菌进行活化，无菌接入K液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊；继续无菌接入L液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊且细胞计数达5×108/ml以上，即为抗虫菌菌种液；
B）制备水稻秸秆抗虫菌液
在专用发酵罐中，加入水稻秸秆发酵熬煮液100公斤及抗虫菌种液4-6公斤，25-40℃气驱搅拌发酵1-2日，至菌株大量生长、平板计数达5×108/ml以上，即为水稻秸秆抗虫菌液；
6）制备中药抗病抗虫液
称取苦参、地榆、贯众、射干、牛蒡子、吴茱萸、艾叶、薄荷、马齿苋、败酱草、蒲公英的茎叶及根系，枇杷叶、连翘果实及茎叶，花椒果实及叶片各4-6公斤，加2-3倍水，一同加入到密闭加热容器内，加热排除冷空气后继续加热至100-120℃，搅拌、熬煮12-24小时，过滤，将滤液转移至敞开加热容器内，文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮3-4小时，浓缩至40-50公斤，即为中药抗病抗虫液；
7）制备多功能高效生态有机生物液肥
将水稻秸秆发酵熬煮浓缩液、蛹虫草菌丝熬煮浓缩液、水稻秸秆固氮菌液、水稻秸秆解磷解钾菌液、水稻秸秆抗虫菌液、中药抗病抗虫液等量或不等量混匀,即为多功能高效生态有机生物液肥。
本发明优点
1、变废为宝。本发明遵循生态环保规律，以水稻秸秆为主要原料，通过系列微生物的作用，在充分释放水稻秸秆养分的同时，进一步合成充足的蛋白质、氨基酸等易于被作物吸收的多种有机养分及有机态的各种元素营养，可保证作物对各种营养的需求，且大中微量元素比例恰当；
2、充分利用水稻秸秆的有机养分，发酵生产蛹虫草菌丝并释放其中活性成分，促进作物代谢和抗病害能力，促进作物壮苗和发育；
3、根据配方中菌株之间的协同关系，本产品配伍组成了固氮解磷解钾、杀虫等功能菌，在完全满足作物对各种养分需求的同时，也保证了施用土壤不断修复土壤性能，增强土壤自我养分积累和防虫防病能力；
4、本产品配伍了多种本地防病抗虫、促进作物代谢的中草药，经多年配伍试验，与上述功能菌株配合，具有良好的防病抗虫及促生长作用，可防治鳞翅目、直翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目等多种虫害及细菌、真菌、病毒等多种病害；
5、本产品通过微生物作用而富含有机硒元素，可供作物迅速吸收，增强了施用作物的保健功能；
6、将有机速效养分与功能微生物、生物农药进行了深度结合，健康环保，填补有机及生物肥空白；
7、经本地土肥等部门田间试验，施用本产品一般可增产5-10%并明显提高农产品品质，病虫害明显减轻，尤其适合有机绿色农业领域广泛推广和使用。
具体实施方式
本产品最佳制备方法为：
1）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液
（1）制备水稻秸秆发酵菌种液
A）制备菌种培养基
a、制备A液体培养基：将土豆80-120g、水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入红糖4-6g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得A液体培养基；
b、制备B液体培养基：将水稻秸秆粉80-120g加水900-1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入(NH4)2SO4 2-3g、(NH4)3PO4 2-3g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得B液体培养基；
c、制备C液体培养基：将红糖38-42g、(NH4)2SO4 18-22g和水900-110ml混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5-7.5, 100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得C液体培养基；
d、制备D液体培养基：将水稻秸秆粉8-12g加水900-110ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入红糖38-42g、(NH4)2SO4 18-22g、补足水量，混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5-7.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得D液体培养基；
B）制备各菌种菌株的菌种液
a、将绿色木霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
b、将米曲霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
c、将草酸青霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
d、将美味丝葚霉菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入D液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长并菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
e、将黄色短杆菌菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊、颜色改变；继续无菌接入D液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至发酵液浑浊、颜色改变，并经细胞平板涂抹计数达5×108/ml以上；
C）制备水稻秸秆发酵菌种液
将上述培养的绿色木霉、米曲霉、草酸青霉、美味丝葚霉和黄色短杆菌的菌种液等量混合，即为水稻秸秆发酵菌种液；
（2）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液
A）原料重量份配比
水稻秸秆发酵菌种液15-20 水稻秸秆100 红糖3-5公斤 水200-250(NH4)2SO4 10-15(NH4)3PO4 10-15 KH2PO4 5-10 MgCl2 5-10 FeSO43-5
MnCl23-5 ZnSO43-5 NaSeO30.5-1；
B）制备方法
a、水稻秸秆发酵
将水稻秸秆粉粹为1-2cm小段，以2.8-3.2%石灰水浸泡12-24小时后捞出，放入发酵罐中，同时按原料配比加入水、红糖、水稻秸秆发酵菌种液，及1/2配方用量的(NH4)2SO4 、KH2PO4、MgCl2 、FeSO4、MnCl2、ZnSO4、NaSeO3，25-40℃、气驱搅拌发酵7-8日，至可见发酵罐内菌丝大量生长；继续加入另1/2的用量(NH4)2SO4 、KH2PO4、MgCl2 、FeSO4、MnCl2、ZnSO4、NaSeO3，25-40℃、气驱搅拌发酵5-6日，至发酵液中可见大量菌丝、秸秆明显减少且腐软、检测有机氮含量≥2.0g/100ml时，即完成水稻秸秆发酵；
b、熬煮
发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器，加热排除冷空气后继续加热至110-130℃、搅拌、熬煮20-24小时，至秸秆及菌丝完全溶解，即为水稻秸秆发酵熬煮液；
c、浓缩
将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤转移至敞开加热容器内，继续文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮2-4小时，使液体浓缩至30-35公斤，即为水稻秸秆发酵熬煮浓缩液；
2）制备水稻秸秆蛹虫草菌丝熬煮浓缩液
A)制备蛹虫草菌种液
a、制备E液体培养基:将去皮土豆80-120 g、蚕蛹粉8-12g加水900-1100ml煮至沸腾继续文火维持沸腾0.5-1小时，冷却后再加入红糖14-16g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、补足水量1000ml，混匀，以1mol/L盐酸调节pH值为6.0-6.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得E液体培养基；
b、制备F液体培养基: 将水稻秸秆发酵熬煮液180-220g和水900-1100ml混匀，并通过加入1mol/L盐酸调节pH值为6.0-6.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得F液体培养基；
c、将蛹虫草菌种活化，无菌接入到E液体培养基，转速160-200r/min、20-25℃摇床培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；
d、菌丝大量生长后，继续无菌接入F液体培养基，转速160-200r/min、20-25℃培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长，菌丝生物量达500mg/100ml以上，即为蛹虫草菌种液；
B)制备水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液
将100公斤水稻秸秆发酵熬煮液加入到专用发酵罐中，加入蛹虫草菌种液4-6公斤，20-25℃气驱搅拌培养5-7日，至发酵液粘稠、出现大量菌丝且菌丝生物量达750-850mg/100ml以上，结束发酵；发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器内，加热排除冷空气后继续加热至100-120℃，搅拌、熬煮3-4小时，至菌丝完全溶解；菌丝完全溶解后，继续转移至敞开加热容器内，文火加热并维持微沸腾2-4小时，使液体浓缩至30-35公斤，即为水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液；
3）制备水稻秸秆固氮菌液
A) 制备G液体培养基
将蛋白胨4-6g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、水900-1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得G液体培养基；
B) 制备H液体培养基
将水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、水900-1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得H液体培养基；
C) 制备水稻秸秆固氮菌种液
将蜡样芽胞杆菌、阿氏芽孢杆菌、嗜糖假单胞杆菌、固氮菌菌种进行活化，分别无菌接入G液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊，继续无菌接入H液体培养基, 160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至各菌种菌株菌液浑浊，且经细胞平板计数达5×108/ml以上，即为各菌株菌种液；再将各菌株菌种液等量混合, 即为水稻秸秆固氮菌种液；
D) 制备水稻秸秆固氮菌液
将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤加入到专用发酵罐中，并加入水稻秸秆固氮菌种液4-6公斤,气驱搅拌发酵,25-40℃培养1-2日，至细胞计数达5×108/ml以上，即为水稻秸秆固氮菌液；
4)制备水稻秸秆解磷解钾菌液
A) 制备I液体培养基
将蛋白胨4-6g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、磷矿粉8-12g、钾长石粉4-6g、水900-1100ml混匀, 100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得I液体培养基；
B) 制备J液体培养基
将水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、磷矿粉8-12g、钾长石粉4-6g、水900-1100ml混匀,100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得J液体培养基；
C) 制备解磷解钾菌株菌种液
将枯草芽胞杆菌、芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌进行活化，分别无菌接入I液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，当各菌株大量生长、菌液浑浊，进一步分别无菌接入J液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至各菌株菌液浑浊、细胞计数达5×108/ml以上，即为各解磷解钾菌株菌种液；
D) 制备水稻秸秆解磷解钾菌液
a、原料配比
水稻秸秆发酵熬煮液80-120公斤、磷矿粉1-3公斤、钾长石粉0.5-2公斤；
b）制备方法
在各专用发酵罐中，按照配方加入水稻秸秆发酵熬煮液、磷矿粉、钾长石粉，再分别加入各解磷解钾菌株菌种液4-6公斤，并气驱搅拌、25-40℃发酵8-10日，至各菌株细胞计数达5×108/ml以上，即为各相应菌株水稻秸秆解磷解钾菌液；将各菌株菌液等量混合，即为水稻秸秆解磷解钾菌液；
5）制备水稻秸秆抗虫菌液
A）制备抗虫菌种液
a、制备K液体培养基
将蛋白胨4-6 g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、水900-1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得K液体培养基；
b、制备L液体培养基
水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、水900-1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得L液体培养基；
c、将苏云金芽孢杆菌进行活化，无菌接入K液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊；继续无菌接入L液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊且细胞计数达5×108/ml以上，即为抗虫菌菌种液；
B）制备水稻秸秆抗虫菌液
在专用发酵罐中，加入水稻秸秆发酵熬煮液100公斤及抗虫菌种液4-6公斤，25-40℃气驱搅拌发酵1-2日，至菌株大量生长、平板计数达5×108/ml以上，即为水稻秸秆抗虫菌液；
6）制备中药抗病抗虫液
称取苦参、地榆、贯众、射干、牛蒡子、吴茱萸、艾叶、薄荷、马齿苋、败酱草、蒲公英的茎叶及根系，枇杷叶、连翘果实及茎叶，花椒果实及叶片各4-6公斤，加2-3倍水，一同加入到密闭加热容器内，加热排除冷空气后继续加热至100-120℃，搅拌、熬煮12-24小时，过滤，将滤液转移至敞开加热容器内，文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮3-4小时，浓缩至40-50公斤，即为中药抗病抗虫液；
7）制备多功能高效生态有机生物液肥
将水稻秸秆发酵熬煮浓缩液、蛹虫草菌丝熬煮浓缩液、水稻秸秆固氮菌液、水稻秸秆解磷解钾菌液、水稻秸秆抗虫菌液、中药抗病抗虫液等量或不等量混匀,即为多功能高效生态有机生物液肥。
菌种来源:中国农业微生物菌种保藏管理中心
绿色木霉（菌株保藏号30206）、米曲霉（菌株保藏号31493）（菌株保藏号31493）、草酸青霉（菌株保藏号32576）（菌株保藏号32576）、美味丝葚霉（菌株保藏号30315）、黄色短杆菌（菌株保藏号11052）、蛹虫草（菌株保藏号50632）、蜡样芽胞杆菌（菌株保藏号19428）、阿氏芽孢杆菌（菌株保藏号06384）、嗜糖假单胞杆菌（菌株保藏号01133）、固氮菌（菌株保藏号01437）、枯草芽胞杆菌（菌株保藏号19743）、芽孢杆菌（菌株保藏号01467）、胶质芽孢杆菌（菌株保藏号19749）。
使用方法
本产品主要用于作物追肥及病虫害防治。可于作物主要生长阶段及病虫害发生初期进行追肥及病虫害防治，施用量按每亩1000-2000ml，兑水稀释20倍进行叶面喷施。也可在作物病虫害未发生之前结合追肥进行预防性施用。本产品施用时不可同时喷施农药，避免强阳光直射、降雨、高温等极端气候条件施用，以及施用本产品前后约一周以不施用农药为宜。病虫害严重时，可在常规农药防治基础上，于喷施农药5-7天后，使用本产品巩固病虫害防治效果，并可适当减小稀释倍数。本产品含有充足的有机态养分物质及有机态各种大中微量元素，以及硒、硅等有益和健康元素，富含固氮解磷解钾抗虫防病功能菌株及中药活性成份等，长期施用本产品，可显著改善土壤结构和性能，修复土壤生态系统，提高保水保肥抗旱及抗虫防病能力，提高作物品质和产量，尤其适合水稻等各种作物的有机及绿色种植。经本地有关部门田间试验，可增产5-10%，明显改善农产品品质。

Claims (1)

1. 一种多功能高效生态有机生物液肥，其特征在于制备方法为：
1）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液
（1）制备水稻秸秆发酵菌种液
A）制备菌种培养基
a、制备A液体培养基：将土豆80-120g、水稻秸秆粉18-22g加水900-1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入红糖4-6g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得A液体培养基；
b、制备B液体培养基：将水稻秸秆粉80-120g加水900-1100ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入(NH4)2SO4 2-3g、(NH4)3PO4 2-3g、补足水量，混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得B液体培养基；
c、制备C液体培养基：将红糖38-42g、(NH4)2SO4 18-22g和水900-110ml混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5-7.5, 100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得C液体培养基；
d、制备D液体培养基：将水稻秸秆粉8-12g加水900-110ml置于密闭容器内，加热排除冷空气后维持110-130℃、0.5-1小时，冷却后再加入红糖38-42g、(NH4)2SO4 18-22g、补足水量，混匀，并以石灰水调节pH值，pH值为6.5-7.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得D液体培养基；
B）制备各菌种菌株的菌种液
a、将绿色木霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
b、将米曲霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
c、将草酸青霉菌种活化，无菌接入A液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养5-7日，至菌液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入B液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养7-8日，至发酵菌液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长且菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
d、将美味丝葚霉菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；继续无菌接入D液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长并菌丝生物量达500 mg/100ml以上；
e、将黄色短杆菌菌种活化，活化后无菌接入C液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊、颜色改变；继续无菌接入D液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至发酵液浑浊、颜色改变，并经细胞平板涂抹计数达5×108/ml以上；
C）制备水稻秸秆发酵菌种液
将上述培养的绿色木霉、米曲霉、草酸青霉、美味丝葚霉和黄色短杆菌的菌种液等量混合，即为水稻秸秆发酵菌种液；
（2）制备水稻秸秆发酵熬煮浓缩液
A）原料重量份配比
水稻秸秆发酵菌种液15-20 水稻秸秆100 红糖3-5公斤 水200-250(NH4)2SO4 10-15(NH4)3PO4 10-15 KH2PO4 5-10 MgCl2 5-10 FeSO43-5
MnCl2 3-5 ZnSO43-5 NaSeO30.5-1；
B）制备方法
a、水稻秸秆发酵
将水稻秸秆粉粹为1-2cm小段，以2.8-3.2%石灰水浸泡12-24小时后捞出，放入发酵罐中，同时按原料配比加入水、红糖、水稻秸秆发酵菌种液，及1/2配方用量的(NH4)2SO4 、KH2PO4、MgCl2 、FeSO4、MnCl2、ZnSO4、NaSeO3，25-40℃、气驱搅拌发酵7-8日，至可见发酵罐内菌丝大量生长；继续加入另1/2的用量(NH4)2SO4 、KH2PO4、MgCl2 、FeSO4、MnCl2、ZnSO4、NaSeO3，25-40℃、气驱搅拌发酵5-6日，至发酵液中可见大量菌丝、秸秆明显减少且腐软、检测有机氮含量≥2.0g/100ml时，即完成水稻秸秆发酵；
b、熬煮
发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器，加热排除冷空气后继续加热至110-130℃、搅拌、熬煮20-24小时，至秸秆及菌丝完全溶解，即为水稻秸秆发酵熬煮液；
c、浓缩
将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤转移至敞开加热容器内，继续文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮2-4小时，使液体浓缩至30-35公斤，即为水稻秸秆发酵熬煮浓缩液；
2）制备水稻秸秆蛹虫草菌丝熬煮浓缩液
A)制备蛹虫草菌种液
a、制备E液体培养基:将去皮土豆80-120 g、蚕蛹粉8-12g加水900-1100ml煮至沸腾继续文火维持沸腾0.5-1小时，冷却后再加入红糖14-16g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、补足水量1000ml，混匀，以1mol/L盐酸调节pH值为6.0-6.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得E液体培养基；
b、制备F液体培养基: 将水稻秸秆发酵熬煮液180-220g和水900-1100ml混匀，并通过加入1mol/L盐酸调节pH值为6.0-6.5，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得F液体培养基；
c、将蛹虫草菌种活化，无菌接入到E液体培养基，转速160-200r/min、20-25℃摇床培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变并可见菌丝大量生长；
d、菌丝大量生长后，继续无菌接入F液体培养基，转速160-200r/min、20-25℃培养4-5日，至发酵液粘稠、颜色改变、可见菌丝大量生长，菌丝生物量达500mg/100ml以上，即为蛹虫草菌种液；
B)制备水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液
将100公斤水稻秸秆发酵熬煮液加入到专用发酵罐中，加入蛹虫草菌种液4-6公斤，20-25℃气驱搅拌培养5-7日，至发酵液粘稠、出现大量菌丝且菌丝生物量达750-850mg/100ml以上，结束发酵；发酵完成后，将发酵液转移至密闭加热容器内，加热排除冷空气后继续加热至100-120℃，搅拌、熬煮3-4小时，至菌丝完全溶解；菌丝完全溶解后，继续转移至敞开加热容器内，文火加热并维持微沸腾2-4小时，使液体浓缩至30-35公斤，即为水稻秸秆蛹虫草菌丝发酵熬煮浓缩液；
3）制备水稻秸秆固氮菌液
A) 制备G液体培养基
将蛋白胨4-6g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、水900-1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得G液体培养基；
B) 制备H液体培养基
将水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、水900-1100ml混合，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得H液体培养基；
C) 制备水稻秸秆固氮菌种液
将蜡样芽胞杆菌、阿氏芽孢杆菌、嗜糖假单胞杆菌、固氮菌菌种进行活化，分别无菌接入G液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊，继续无菌接入H液体培养基, 160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至各菌种菌株菌液浑浊，且经细胞平板计数达5×108/ml以上，即为各菌株菌种液；再将各菌株菌种液等量混合, 即为水稻秸秆固氮菌种液；
D) 制备水稻秸秆固氮菌液
将水稻秸秆发酵熬煮液100公斤加入到专用发酵罐中，并加入水稻秸秆固氮菌种液4-6公斤,气驱搅拌发酵,25-40℃培养1-2日，至细胞计数达5×108/ml以上，即为水稻秸秆固氮菌液；
4)制备水稻秸秆解磷解钾菌液
A) 制备I液体培养基
将蛋白胨4-6g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、磷矿粉8-12g、钾长石粉4-6g、水900-1100ml混匀, 100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得I液体培养基；
B) 制备J液体培养基
将水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、磷矿粉8-12g、钾长石粉4-6g、水900-1100ml混匀,100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得J液体培养基；
C) 制备解磷解钾菌株菌种液
将枯草芽胞杆菌、芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌进行活化，分别无菌接入I液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，当各菌株大量生长、菌液浑浊，进一步分别无菌接入J液体培养基, 转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至各菌株菌液浑浊、细胞计数达5×108/ml以上，即为各解磷解钾菌株菌种液；
D) 制备水稻秸秆解磷解钾菌液
a、原料配比
水稻秸秆发酵熬煮液80-120公斤、磷矿粉1-3公斤、钾长石粉0.5-2公斤；
b）制备方法
在各专用发酵罐中，按照配方加入水稻秸秆发酵熬煮液、磷矿粉、钾长石粉，再分别加入各解磷解钾菌株菌种液4-6公斤，并气驱搅拌、25-40℃发酵8-10日，至各菌株细胞计数达5×108/ml以上，即为各相应菌株水稻秸秆解磷解钾菌液；将各菌株菌液等量混合，即为水稻秸秆解磷解钾菌液；
5）制备水稻秸秆抗虫菌液
A）制备抗虫菌种液
a、制备K液体培养基
将蛋白胨4-6 g、水稻秸秆发酵熬煮液80-120g、水900-1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得K液体培养基；
b、制备L液体培养基
水稻秸秆发酵熬煮液480-520g、水900-1100ml混匀，100℃蒸汽灭菌0.5-1小时，制得L液体培养基；
c、将苏云金芽孢杆菌进行活化，无菌接入K液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊；继续无菌接入L液体培养基，转速160-200r/min、25-40℃摇床培养1-2日，至菌液浑浊且细胞计数达5×108/ml以上，即为抗虫菌菌种液；
B）制备水稻秸秆抗虫菌液
在专用发酵罐中，加入水稻秸秆发酵熬煮液100公斤及抗虫菌种液4-6公斤，25-40℃气驱搅拌发酵1-2日，至菌株大量生长、平板计数达5×108/ml以上，即为水稻秸秆抗虫菌液；
6）制备中药抗病抗虫液
称取苦参、地榆、贯众、射干、牛蒡子、吴茱萸、艾叶、薄荷、马齿苋、败酱草、蒲公英的茎叶及根系，枇杷叶、连翘果实及茎叶，花椒果实及叶片各4-6公斤，加2-3倍水，一同加入到密闭加热容器内，加热排除冷空气后继续加热至100-120℃，搅拌、熬煮12-24小时，过滤，将滤液转移至敞开加热容器内，文火加热并维持微沸腾、搅拌、熬煮3-4小时，浓缩至40-50公斤，即为中药抗病抗虫液；
7）制备多功能高效生态有机生物液肥
将水稻秸秆发酵熬煮浓缩液、蛹虫草菌丝熬煮浓缩液、水稻秸秆固氮菌液、水稻秸秆解磷解钾菌液、水稻秸秆抗虫菌液、中药抗病抗虫液等量或不等量混匀,即为多功能高效生态有机生物液肥。
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