CN105944147A - 一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法 - Google Patents

一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105944147A
CN105944147A CN201610260534.7A CN201610260534A CN105944147A CN 105944147 A CN105944147 A CN 105944147A CN 201610260534 A CN201610260534 A CN 201610260534A CN 105944147 A CN105944147 A CN 105944147A
Authority
CN
China
Prior art keywords
bone tissue
tissue engineering
dimensional
engineering scaffold
multiple dimensioned
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610260534.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105944147B (zh
Inventor
周长春
樊渝江
王科锋
朱向东
裴玄
殷国富
张兴栋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chengdu Bainian Beiya Medical Technology Co., Ltd
Original Assignee
Sichuan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sichuan University filed Critical Sichuan University
Priority to CN201610260534.7A priority Critical patent/CN105944147B/zh
Publication of CN105944147A publication Critical patent/CN105944147A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105944147B publication Critical patent/CN105944147B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/56—Porous materials, e.g. foams or sponges
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/18—Macromolecular materials obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
    • C08J9/04—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof using blowing gases generated by a previously added blowing agent
    • C08J9/12—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof using blowing gases generated by a previously added blowing agent by a physical blowing agent
    • C08J9/122—Hydrogen, oxygen, CO2, nitrogen or noble gases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/412—Tissue-regenerating or healing or proliferative agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/02—Materials or treatment for tissue regeneration for reconstruction of bones; weight-bearing implants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2203/00—Foams characterized by the expanding agent
    • C08J2203/06—CO2, N2 or noble gases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2203/00—Foams characterized by the expanding agent
    • C08J2203/08—Supercritical fluid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2367/00—Characterised by the use of polyesters obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain; Derivatives of such polymers
    • C08J2367/04—Polyesters derived from hydroxy carboxylic acids, e.g. lactones

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Manufacture Of Porous Articles, And Recovery And Treatment Of Waste Products (AREA)

Abstract

本发明提供了一种仿生骨组织工程支架材料及其制备方法，该支架材料具有与天然骨组织相似的多层级微孔结构，支架具有从500纳米至1000微米范围内可调的多层级仿生类骨三维孔结构。该多尺度孔结构可控的骨组织工程支架，首先通过快速成型技术对医用高分子材料进行三维打印，定制一级微米尺度三维孔结构及支架外形，然后再通过超临界气体发泡对支架内部进行二级微、纳米尺度微孔制备。最终制备的多尺度微孔骨组织工程支架不但可以提供骨组织再生所需的三维支撑，而且可以从不同尺度层面上满足蛋白吸附、营养物质/代谢产物输送、细胞迁移、组织长入的需要，在骨科临床上具有广阔的应用前景。

Description

一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种结合三维打印快速成型以及超临界流体发泡技术制备具有多尺度可控微孔结构的骨组织工程支架材料及其制备方法，属于生物医学材料领域。
技术背景
天然骨组织是一种具有复杂分级孔隙结构的组织。理想的骨组织工程支架需尽量设计与天然骨组织解剖相似的微孔结构，同时具有良好的生物相容性，容易键合周围骨组织。为了满足新生骨组织长入的需求，骨组织工程支架必须设计具有相互贯通的三维多孔结构。三维孔隙结构可以为骨细胞的黏附、迁移和增殖提供必要的生存空间，同时为细胞的繁殖、代谢提供营养与代谢产物的传输通道。大量研究表明，理想骨组织工程支架既需具有宏观大孔结构(孔径为200～1000μm)，支持血管生长和组织向内长入，同时也需兼具几百纳米至10μm的微小孔隙，以提供与细胞相互作用的活性位点，及利于营养物质的扩散与输送。多孔组织工程支架在组织再生中具有重要地位。其常规制备技术主要包括物理发泡、化学发泡、纤维粘结、相分离、微粒占位法、三维打印、静电纺丝等。然而，这些传统的多孔材料制备方法大多无法精确定制支架结构的微孔尺寸，无法实现多孔结构的连通形式控制，更无法针对天然骨组织的解剖结构，仿生制备具有复杂分级孔结构的骨组织支架。
超临界流体作为一种物理发泡工艺，其在针对高分子材料的发泡方面具有一定优势，例如(Supercritical carbon dioxide，ScCO2)制备微孔可降解高分子支架工艺过程简单，CO2无毒、价廉，无有机溶剂残留，不会引起机体产生炎症问题等。采用超临界流体制备微孔聚合物的基本原理是，在高温高压条件下，通过吸附二氧化碳超临界流体进入聚合物基体，再通过控制混合体系的压力和温度，急剧减压或升温以产生热力学不稳定，在聚合物中形成大量的超临界介质泡核，进而通过温度诱导和压力诱导发泡以成型微孔结构。这种方法得到的多孔结构其孔密度大、孔尺寸小且分布均匀，但其显著缺陷在于不便于成型宏观大孔结构(>100μm)，不利于保障多孔结构的连通性、贯通性。
近年来，三维打印(3D Printing，简称3DP)，也称快速成型(RapidPrototyping，RP)作为一种先进制造成型技术在制备多孔支架方面具有无可比拟的优势，其打印系统通过读取文件中的横截面信息，用液体状、粉状或片状的材料将这些截面逐层打印、粘合起来从而制造出三维实体。针对于高分子材料，熔融沉积成型(Fused Deposition Modeling，FDM)作为一种典型3D打印技术，它通过把高分子材料用高温熔化成液态，然后通过喷嘴挤压出一个很小的熔料条，在熔料条挤出后立即固化，并通过喷嘴运动轨迹在立体空间的排列组合形成实物结构。FDM可以准确、快速地将设计产品转化为具有一定结构和功能的部件。三维打印技术尽管理论上可以实现任何孔形及结构的制备，但事实上由于受打印精度制约，如打印喷头直径，打印材料丝线、粒度等影响，其往往无法实现纳米尺度，以及小于10μm的微孔成型。
因此，本发明针对常规微孔成型工艺技术的不足，提出一种新型的可实现多尺度孔结构可控的骨组织工程支架的及其制备工艺。
发明内容
本发明提供一种多尺度孔结构可控的骨组织工程支架及其制备工艺，多尺度孔结构骨组织工程支架不但可以提供组织再生所需的三维支撑，而且可以从多尺度层面上满足蛋白吸附、营养物质/代谢产物输送、细胞迁移、组织长入的需要。
本发明通过以下技术方案来实现：
一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其包含多尺度微观结构，三维宏观大孔尺度为：10-1000μm，大孔孔壁材料均匀分布三维微观小孔，小孔尺度为500nm-10μm，支架的孔隙率：30％～95％。所述多尺度微孔骨组织工程支架结构高度模仿天然骨组织解剖结构。
作为优选方式，所述多尺度可控微孔结构骨组织工程支架材料成分可为：热塑性医用高分子材料为PLA、PLLA、PLGA、PEG或它们经过任意比例共混得到的复合材料中的一种。热塑性医用高分子材料可以通过超临界气体发泡制备微孔结构。
作为优选方式，所述多尺度可控微孔结构骨组织工程支架总体孔隙率为30％～95％，宏观大孔尺度为：10-1000μm，大孔由快速成型技术制备，孔与孔之间可以通过任意形式互穿贯通，大孔孔壁均匀分布微观小孔，小孔尺度为500nm-10μm，小孔由超临界气体发泡制备。
作为优选方式，所述多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于：所述支架的三维宏观大孔由快速成型技术制备，快速成型技术为熔融沉积成型(Fused Deposition Modeling，FDM)、选择性激光烧结(Selective LaserSintering，SLS)、熔丝制造(Fused Filament Fabrication，FFF)、选择性热烧结(Selective Heat Sintering，SHS)等快速成型技术中的一种。快速成型技术通过支架孔结构预设计建模可以有效定制支架孔结构特征参数。
作为优选方式，所述多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于：所述支架的三维微观小孔由超临界气体发泡制备，超临界气体发泡所用气体为二氧化碳或氮气中的一种。二氧化碳及氮气无毒性，价格低廉，超临界气体发泡工艺不引入其他化学试剂、溶剂，避免了有毒、有害物质对支架材料的污染，确保产品的生物相容性和安全性。
本发明的另一目的在于提供一种上述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架的制备方法，其操作步骤包括：
(a)医用高分子材料骨组织工程支架宏观孔结构预设计及建模；
(b)医用高分子材料骨组织工程支架一级宏观孔结构经快速成型技术打印制备；
(c)将上述(b)步骤中打印成型的支架置于超临界气体反应斧中进行气体吸附，并达到支架基体材料气体饱和吸附状态；
(d)控制(c)步骤中的反应釜压力及温度，通过减压或加温的途径进行支架气体发泡制备三维微观小孔结构；
(e)灭菌封装：将步骤(d)所得多尺度可控微孔结构骨组织工程支架进行灭菌封装。
作为优选，所述步骤(a)中，医用高分子材料骨组织工程支架宏观孔结构模型设计的孔隙率为60％～90％，三维宏观大孔尺度为：200-800μm，大孔之间为三维互穿连接，各向同性。
作为优选，所述步骤(b)中，医用高分子材料骨组织工程支架宏观孔结构由FDM快速成型技术打印制备，打印喷头直径为0.2-0.8mm，打印速度为50-200mm/s。
作为优选，所述步骤(c)中，所述超临界气体吸附为超临界二氧化碳气体吸附，超临界点为：Tc＝31.3℃，Pc＝7.3MPa，超临界气体吸附过程吸附温度及压力高于超临界点，吸附过程持续1～10小时。
作为优选，所述步骤(d)中，所述通过减压或加温的途径进行支架气体发泡制备三维微观小孔结构，减压速率＞0.5MPa/sec至标准大气压，加温途径中的发泡温度为对应热塑性高分子材料玻璃态转变温度以上10-50℃；
本发明还提供了一种所述多尺度可控微孔结构骨组织工程支架的用途：将其用作人体硬组织缺损的修复或骨组织工程用支架材料。
作为优选，本发明所述三级仿生的骨组织工程支架材料还可与药物、基因、细胞等复合制备具有特殊药物、生物学功能的骨组织工程支架。
本发明的有益效果：
1、本发明所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架以可生物降解医用高分子材料为原料，从材料成分上保证了支架的生物安全性和生物相容性，促进了其骨组织修复功能。
2、本发明所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架具有多层级的微纳米孔结构，高度仿生天然骨组织解剖结构，这种结构一方面可以通过建模预定制支架的力学性能以匹配骨组织的生物力学特性，另一方面可以从多尺度范围内模拟天然骨相类似的多孔微环境，有助于促进骨组织整合与修复。
3、本发明所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，不但可以提供骨组织再生所需的三维支撑，同时其宏观大孔有利于宿主骨组织及血管的长入，其微孔小孔结构可以满足蛋白吸附、营养物质/代谢产物输送以及细胞迁移等，可以从多尺度层面上满足支架的生物学功能实现。
4、本发明所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架的整个制备工艺中，无化学反应及有机溶剂参与，避免了有毒、有害物质对支架的污染。产品具有良好的外形结构可设计性和多尺度微孔结构可设计性能，同时支架具有可调控的力学特性，可有效满足匹配天然骨组织的生物力学要求。
附图说明
图1为本发明的制备工艺流程图；
图2为通过FDM打印定制微米尺度三维多孔支架；
图3为通过超临界气体发泡成型支架内部纳米尺度微孔；
图4为经FDM打印成型的微米尺度三维多孔组织工程支架的SEM图，其支架宏观孔结构中，经喷头挤出丝线直径约为400μm，三维宏观大孔尺度约为：200×200μm，孔隙率约为60％，大孔之间三维互穿连接，各向同性，无纳米尺度微孔。
图5为经超临界气体发泡后支架内部纳米尺度微孔的SEM图，其支架保留了原有的宏观孔结构，同时打印丝线中经超临界气体发泡成型了部分微纳米尺度微孔，微孔分布均匀，大小不一，其微孔尺度约为1-5μm，经超临界气体发泡成型的微纳米尺度微孔经一步提高了支架的整体孔隙率，其支架整体孔隙率约为65％。微、纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通连接，无严格的取向性。
具体实施方法：
为达上述目的，本发明按照下述方法制备这种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，下面结合附图对本发明工艺作进一步详述。
本发明的制备工艺流程如图1所示。仿生多尺度可控微孔结构骨组织工程支架的制备分为两个步骤，其一是通过快速成型技术三维打印对医用高分子材料定制微米尺度内的三维孔结构及外形；其二是将由快速成型技术三维打印制备的微米尺度支架进行超临界气体发泡，由此在支架结构内部形成微纳米尺度的二级微孔。经本发明制备工艺成型的仿生多尺度可控微孔结构骨组织工程支架具有从500纳米至1000微米范围内可调的多层级仿生类骨三维孔结构。该骨组织工程支架不但可以提供骨组织再生所需的三维支撑，而且可以从多尺度层面上满足蛋白吸附、营养物质/代谢产物输送、细胞迁移、组织长入的需要。
本发明所适用的支架三维宏观大孔可由包括以下快速成型技术制备：如熔融沉积成型(Fused Deposition Modeling，FDM)、选择性激光烧结(SelectiveLaser Sintering，SLS)、熔丝制造(Fused Filament Fabrication，FFF)、选择性热烧结(Selective Heat Sintering，SHS)等快速成型技术。
本发明所适用的医用高分子材料为热塑性高分子材料，如临床常用的PLA、PLLA、PLGA、PEG或它们经过任意比例共混得到的复合材料中的一种。热塑性医用高分子材料可以通过超临界气体发泡制备微孔结构。
本发明中所适用的超临界气体发泡所用气体为：CO2或N2中的一种。
以下所列为本发明的几个最佳实施例，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本发明的保护范围。
实施例1
以热塑性医用高分子材料PLA为原材料制备仿生多尺度可控微孔结构骨组织工程支架。其制作具体步骤如下：
1)选择Φ1.75mm的医用级PLA材料线材，经由FDM三维打印成型微米尺度三维多孔组织工程支架，其具体打印工艺中，选择直径为Φ0.2mm的单喷头打印，喷头温度为200℃，打印速度为150mm/s，截面内的宏观孔设计尺寸为200×200μm的正交大孔，垂直方向分层厚度为200μm。其最终成型的支架外形尺寸为Φ8×6mm，支架维宏观大孔尺度约为：200×200×200μm，孔隙率约为50％，大孔之间三维互穿连接，各向同性。
2)将步骤一得到的三维大孔组织工程支架经超临界二氧化碳气体发泡制备二级微纳米尺寸微孔。其气体发泡工艺中，设置的吸附气体环境为T＝35℃，P＝7.5MPa，吸附时间为5小时，发泡温度为T＝100℃，发泡时间为5秒。其最终获得的支架保留了原有的宏观孔结构，支架维宏观大孔尺度约为：215×215×215μm，同时打印丝线中经超临界气体发泡成型了部分微纳米尺度微孔，微孔尺度约为2μm，微孔分布均匀，无严格的取向性。经超临界气体发泡成型进一步提高了支架的整体孔隙率，其支架整体孔隙率约为55％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。
实施例2
其它条件及工艺同实施例1，不同之处在于步骤一中采用不同的三维打印工艺。其具体打印工艺中，选择直径为Φ0.4mm的单喷头打印，喷头温度为200℃，打印速度为150mm/s，截面内的宏观孔设计尺寸为400×400μm的正交大孔，垂直方向分层厚度为400μm。其最终成型的支架外形尺寸为Φ8×6mm，支架维宏观大孔尺度约为：400×400×400μm，孔隙率约为52％，大孔之间三维互穿连接，各向同性。经由实施例1中步骤二的超临界气体发泡工艺，最终成型的仿生多尺度微孔结构支架的宏观大孔尺度约为：420×420×420μm，打印丝线中成型的二级微纳米尺度微孔约为2μm，其支架整体孔隙率约为57％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。此实施例在步骤一中通过三维打印工艺，调控了支架的一级宏观大孔结构。
实施例3
其它条件及工艺同实施例1，不同之处在于步骤一中采用不同的三维打印工艺。其具体打印工艺中，选择直径为Φ0.4mm的单喷头打印，喷头温度为200℃，打印速度为150mm/s，截面内的宏观孔设计尺寸为600×600μm的正交大孔，垂直方向分层厚度为400μm。其最终成型的支架外形尺寸为Φ8×6mm，支架维宏观大孔尺度约为：600×600×400μm，孔隙率约为66％，大孔之间三维互穿连接，各向同性。经由实施例1中步骤二的超临界气体发泡工艺，最终成型的仿生多尺度微孔结构支架的宏观大孔尺度约为：620×620×420μm，打印丝线中成型的二级微纳米尺度微孔约为2μm，其支架整体孔隙率约为70％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。此实施例在步骤一中通过三维打印工艺，调控了支架的一级宏观大孔结构。
实施例4
其它条件及工艺同实施例1，不同之处在于步骤二中采用不同的超临界气体发泡工艺。其步骤二气体发泡工艺中，设置的吸附气体环境为T＝35℃，P＝8.0MPa，吸附时间为5小时，发泡温度为T＝100℃，发泡时间为5秒。通过超临界气体发泡，打印丝线中成型了部分微纳米尺度微孔，微孔尺度约为1μm，其最终获得的支架具有一级宏观大孔尺度为：212×212×212μm，二级微纳米孔约Φ1μm，支架整体孔隙率约为53％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。此实施例在步骤二中通过超临界气体发泡工艺，调控了支架的二级微纳米孔结构。
实施例5
其它条件及工艺同实施例4，不同之处在于步骤二中采用不同的超临界气体发泡工艺。其步骤二气体发泡工艺中，设置的吸附气体环境为T＝40℃，P＝9.0MPa，吸附时间为5小时，发泡温度为T＝100℃，发泡时间为5秒。通过超临界气体发泡，打印丝线中成型了部分微纳米尺度微孔，微孔尺度约为800nm，其最终获得的支架具有一级宏观大孔尺度为：208×208×208μm，二级微纳米孔约Φ800nm，支架整体孔隙率约为52％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。此实施例在步骤二中通过超临界气体发泡工艺，调控了支架的二级微纳米孔结构。
实施例6
其它条件及工艺同实施例3，不同之处在于步骤二中采用不同的超临界气体发泡工艺。其步骤二气体发泡工艺中，设置的吸附气体环境为T＝40℃，P＝9.0MPa，吸附时间为10小时，发泡温度为T＝110℃，发泡时间为5秒。通过超临界气体发泡，打印丝线中成型了部分微纳米尺度微孔，微孔尺度约为600nm，其最终获得的仿生多尺度微孔结构支架的宏观大孔尺度约为：612×612×412μm，打印丝线中成型的二级微纳米尺度微孔约为600nm，其支架整体孔隙率约为67％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。此实施例在步骤二中通过超临界气体发泡工艺，调控了支架的二级微纳米孔结构。
实施例7
其它条件及工艺同实施例1，不同之处在于选择不同的医用高分子PLLA作为原材料。其步骤一具体打印工艺中，选择直径为Φ0.4mm的单喷头打印，喷头温度为210℃，打印速度为120mm/s，截面内的宏观孔设计尺寸为600×600μm的正交大孔，垂直方向分层厚度为600μm。经由实施例1中步骤二的超临界气体发泡工艺，最终成型的仿生多尺度微孔结构支架中的一级宏观大孔为：620×620×420μm，二级微纳米尺度微孔约为2μm，其支架整体孔隙率约为70％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。
实施例8
其它条件及工艺同实施例1，不同之处在于步骤二中选择不同的发泡气体进行二级微纳米孔制备。其步骤二的具体工艺中，设置的吸附气体为氮气(N2)环境为T＝30℃，P＝8.0MPa，吸附时间为10小时，发泡温度为T＝100℃，发泡时间为5秒。打印丝线中经氮气发泡成型了部分微纳米尺度微孔，微孔尺度约为1.2μm。其最终成型的仿生多尺度微孔结构支架中的一级宏观大孔为：215×215×215μm，二级微纳米尺度微孔约为1.2μm，其支架整体孔隙率约为54％。一级、二级微纳米尺度微孔之间三维互穿，彼此贯通。CO2及N2均无毒性、价格低廉，经它们成型的二级微纳米孔不会存在有毒物质残留，可以确保组织工程支架的生物相容性，避免植入体在体内出现炎症反应。
实施例9细胞毒性实验
取上述各实施例中制备的支架试样作细胞毒性实验研究，实验中以1×105个/样的细胞密度进行种植，Osteoblast细胞在该试样表面进行悬浮培养，培养环境条件为5％CO2，37℃，第1、3、5天进行激光共聚焦细胞形貌观察，同时通过MTT比色法检测细胞的存活和生长状况，实验结果显示，在各实施例中制得的骨组织工程支架上细胞存活、生长、增殖状况良好，细胞整体存活率＞95％。此说明经本发明提供的支架材料不但可以提供成骨细胞生长所需的三维介质，同时可从多尺度层面上满足细胞黏附所需的材料表面理化特性，利于营养物质/代谢产物传输。同时本发明以无毒的CO2作为发泡剂，制备工艺中无任何有机溶剂参与，无任何毒副隐患，安全可靠。
以上所述仅为本发明的优选实施例，对本发明而言仅是说明性的，而非限制性的；本领域普通技术人员理解，在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效变更，但都将落入本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种仿生骨组织工程支架材料，其特征在于,所述支架为医用高分子材质,包含从微米至纳米范围内多尺度可调的三维孔结构,具体包括由医用高分子构成的一级三维宏观大孔结构以及分布于所述一级三维宏观大孔结构孔壁上的二级三维微观小孔结构。
2.根据权利要求1所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于：所述支架原材料为热塑性医用高分子材料。
3.根据权利要求2所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于，所述热塑性医用高分子材料为PLA、PLLA、PLGA、PEG或它们经过任意比例共混得到的复合材料中的一种。
4.根据权利要求1所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于：支架的孔隙率：30%～95%，三维宏观大孔尺度为：10-1000µm，大孔孔壁材料均匀分布三维球状微观小孔，小孔尺度为500nm-10µm。
5.根据权利要求1所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于：所述支架的一级三维宏观大孔由快速成型技术三维打印成型，三维打印快速成型技术为熔融沉积成型（fused deposition modeling，FDM）、选择性激光烧结（selective laser sintering，SLS）、熔丝制造（Fused Filament Fabrication，FFF）、选择性热烧结（Selective heat sintering，SHS）等快速成型技术中的一种。
6.根据权利要求1所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于：所述支架的二级三维微观小孔由超临界气体发泡制备，超临界气体发泡所用气体为二氧化碳或氮气中的一种。
7.一种如权利要求1所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架，其特征在于,其制作步骤包括：
（a）医用高分子材料骨组织工程支架宏观孔结构预设计及建模；
（b）医用高分子材料骨组织工程支架宏观孔结构经快速成型技术打印制备；
（c）将上述（b）步骤中打印成型的支架置于超临界气体反应斧中进行气体吸附，并达到支架基体材料气体饱和吸附状态；
（d）控制（c）步骤中的反应釜压力及温度，通过减压或加温的途径进行支架气体发泡制备三维微观小孔结构。
8.根据权利要求7所述制备方法，其特征在于,还包括步骤（e）灭菌封装：将步骤（d）所得多尺度可控微孔结构骨组织工程支架进行灭菌封装。
9.根据权利要求7所述制备方法，其特征在于, 所述步骤（b）中，医用高分子材料骨组织工程支架宏观孔结构由FDM快速成型技术打印制备，打印喷头直径为0.2-0.8mm，打印速度为50-200mm/s；所述步骤（d）中，所述通过减压或加温的途径进行支架气体发泡制备三维微观小孔结构，减压速率˃0.5MPa/sec至标准大气压，加温途径中的发泡温度为对应热塑性高分子材料玻璃态转变温度以上10-50℃。
10.一种如权利要求1所述的多尺度可控微孔结构骨组织工程支架的用途，其特征在于，将其用作骨组织工程支架材料。
CN201610260534.7A 2016-04-25 2016-04-25 一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法 Active CN105944147B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610260534.7A CN105944147B (zh) 2016-04-25 2016-04-25 一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610260534.7A CN105944147B (zh) 2016-04-25 2016-04-25 一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105944147A true CN105944147A (zh) 2016-09-21
CN105944147B CN105944147B (zh) 2019-01-08

Family

ID=56916787

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610260534.7A Active CN105944147B (zh) 2016-04-25 2016-04-25 一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105944147B (zh)

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106863785A (zh) * 2017-02-17 2017-06-20 陈昱霖 骨模型的制备方法及装置
CN107936459A (zh) * 2017-12-07 2018-04-20 中国科学院福建物质结构研究所 一种用于熔融沉积成型3d打印机的组合物、制备及其应用
WO2018093145A1 (ko) * 2016-11-15 2018-05-24 한국생산기술연구원 Fdm 3d 프린팅을 이용한 의료용 이중 기공 스캐폴드의 제조방법
CN109370179A (zh) * 2018-09-28 2019-02-22 中国科学院长春应用化学研究所 一种聚乳酸多级孔材料及其制备方法
CN109821073A (zh) * 2019-03-27 2019-05-31 四川大学 一种原位实时立体交联的骨组织工程支架材料及制备方法
KR20190067541A (ko) * 2017-12-07 2019-06-17 한국생산기술연구원 Fdm 3d 프린팅을 이용한 다공성 스캐폴드의 제조방법에 있어서의 기공 조절 방법
CN110538350A (zh) * 2019-09-20 2019-12-06 江西理工大学 一种plla/zif-8复合骨支架及其制备方法
CN111544644A (zh) * 2020-05-14 2020-08-18 广东省新材料研究所 一种多尺度孔隙结构磷酸钙支架、制备方法和应用
CN115337450A (zh) * 2022-06-17 2022-11-15 四川大学 具有多孔化纤维的3d打印弹性支架及其制备方法与应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003000857A2 (en) * 2001-06-22 2003-01-03 The Regents Of The University Of Michigan Design methodology for tissue engineering scaffolds and biomaterial implants
WO2008069761A1 (en) * 2006-12-05 2008-06-12 Nanyang Technological University Manufacturing three-dimensional scaffolds using cryogenic prototyping
CN102784014A (zh) * 2012-08-14 2012-11-21 中国科学院深圳先进技术研究院 多孔性骨支架及其制备方法
CN105343936A (zh) * 2015-11-05 2016-02-24 深圳市第二人民医院 一种plcl三维多孔支架、plcl-col复合支架及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003000857A2 (en) * 2001-06-22 2003-01-03 The Regents Of The University Of Michigan Design methodology for tissue engineering scaffolds and biomaterial implants
WO2008069761A1 (en) * 2006-12-05 2008-06-12 Nanyang Technological University Manufacturing three-dimensional scaffolds using cryogenic prototyping
CN102784014A (zh) * 2012-08-14 2012-11-21 中国科学院深圳先进技术研究院 多孔性骨支架及其制备方法
CN105343936A (zh) * 2015-11-05 2016-02-24 深圳市第二人民医院 一种plcl三维多孔支架、plcl-col复合支架及其制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
张润，等: "用超临界CO2法制备聚乳酸三维多孔支架材料", 《材料研究学报》 *
高长云，等: "微孔发泡过程中聚合物/超临界CO2均相体系形成的研究", 《工程塑料应用》 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018093145A1 (ko) * 2016-11-15 2018-05-24 한국생산기술연구원 Fdm 3d 프린팅을 이용한 의료용 이중 기공 스캐폴드의 제조방법
CN106863785A (zh) * 2017-02-17 2017-06-20 陈昱霖 骨模型的制备方法及装置
CN106863785B (zh) * 2017-02-17 2019-07-09 陈昱霖 骨模型的制备方法及装置
CN107936459B (zh) * 2017-12-07 2019-08-20 中国科学院福建物质结构研究所 一种用于熔融沉积成型3d打印机的组合物、制备及其应用
CN107936459A (zh) * 2017-12-07 2018-04-20 中国科学院福建物质结构研究所 一种用于熔融沉积成型3d打印机的组合物、制备及其应用
KR102166991B1 (ko) 2017-12-07 2020-10-19 한국생산기술연구원 Fdm 3d 프린팅을 이용한 다공성 스캐폴드의 제조방법에 있어서의 기공 조절 방법
KR20190067541A (ko) * 2017-12-07 2019-06-17 한국생산기술연구원 Fdm 3d 프린팅을 이용한 다공성 스캐폴드의 제조방법에 있어서의 기공 조절 방법
CN109370179A (zh) * 2018-09-28 2019-02-22 中国科学院长春应用化学研究所 一种聚乳酸多级孔材料及其制备方法
CN109821073A (zh) * 2019-03-27 2019-05-31 四川大学 一种原位实时立体交联的骨组织工程支架材料及制备方法
CN109821073B (zh) * 2019-03-27 2021-09-21 四川大学 一种原位实时立体交联的骨组织工程支架材料及制备方法
CN110538350A (zh) * 2019-09-20 2019-12-06 江西理工大学 一种plla/zif-8复合骨支架及其制备方法
CN110538350B (zh) * 2019-09-20 2021-12-28 江西理工大学 一种plla/zif-8复合骨支架及其制备方法
CN111544644A (zh) * 2020-05-14 2020-08-18 广东省新材料研究所 一种多尺度孔隙结构磷酸钙支架、制备方法和应用
CN111544644B (zh) * 2020-05-14 2022-08-26 广东省科学院新材料研究所 一种多尺度孔隙结构磷酸钙支架、制备方法和应用
CN115337450A (zh) * 2022-06-17 2022-11-15 四川大学 具有多孔化纤维的3d打印弹性支架及其制备方法与应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105944147B (zh) 2019-01-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105944147A (zh) 一种多尺度可控微孔结构骨组织工程支架及其制备方法
Babaie et al. Fabrication aspects of porous biomaterials in orthopedic applications: A review
Hutmacher Scaffold design and fabrication technologies for engineering tissues—state of the art and future perspectives
Marques et al. Review on current limits and potentialities of technologies for biomedical ceramic scaffolds production
Zhou et al. Combination of fused deposition modeling and gas foaming technique to fabricated hierarchical macro/microporous polymer scaffolds
Mohammadi et al. How does scaffold porosity conduct bone tissue regeneration?
Tarik Arafat et al. State of the art and future direction of additive manufactured scaffolds-based bone tissue engineering
Thavornyutikarn et al. Bone tissue engineering scaffolding: computer-aided scaffolding techniques
Leong et al. Solid freeform fabrication of three-dimensional scaffolds for engineering replacement tissues and organs
Hoque et al. Extrusion based rapid prototyping technique: an advanced platform for tissue engineering scaffold fabrication
Yang et al. Rapid prototyping of ceramic lattices for hard tissue scaffolds
CN106178124B (zh) 一种可降解高分子网络/磷酸钙骨水泥复合骨修复材料及其制备方法与应用
Seunarine et al. 3D polymer scaffolds for tissue engineering
Bártolo et al. Rapid prototyping and manufacturing for tissue engineering scaffolds
Li et al. Current status of additive manufacturing for tissue engineering scaffold
JP5899376B2 (ja) 生体インプラント及びその製造方法
Akbarzadeh et al. Hierarchical polymeric scaffolds support the growth of MC3T3-E1 cells
KR101003024B1 (ko) 다공성 티타늄 지지체 및 이의 제조방법
Rasouli et al. Morphological properties and mechanical performance of polylactic acid scaffolds fabricated by a novel fused filament fabrication/gas foaming coupled method
JONES Scaffolds for tissue engineering
KR20180054503A (ko) Fdm 3d 프린팅을 이용한 의료용 이중 기공 스캐폴드의 제조방법
Malyala et al. Organ printing with life cells: a review
Chanes-Cuevas et al. Macro-, micro-and mesoporous materials for tissue engineering applications.
Chen Foaming technology of tissue engineering scaffolds-a review
KR100941374B1 (ko) 생분해성 3중 기공 세라믹-고분자 지지체 및 이의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20200930

Address after: No.1, 2 / F, building 6, No.39 Renhe street, high tech Zone, Chengdu, Sichuan 610015

Patentee after: Chengdu Bainian Beiya Medical Technology Co., Ltd

Address before: Shuangliu County Sichuan Road Chengdu City, Sichuan province 610207

Patentee before: SICHUAN University