CN105766987A - 一种用于防治柑橘黄龙病的药剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于防治柑橘黄龙病的药剂及其制备方法，每100mL药剂中含有农用链霉素0.5‑2g，井冈霉素0.5‑2g，噻虫嗪1‑10mg，稳定剂0‑2mL，防冻剂0‑2 mL，助渗剂0‑2 mL，分散剂0‑2g，乳化剂0‑2g，助溶剂0‑2 mL，余量用去离子水补足。本发明是根据黄龙病防控的客观需要，通过杀菌剂和杀虫剂两种药物的合理混配，并采用树干输液的方法施药，使制剂优势互补，具备高效、低毒、安全、经济、多功能的特性，可更好的防控柑橘黄龙病。

Description

一种用于防治柑橘黄龙病的药剂及其制备方法
技术领域
本发明属于植物病害防治技术领域，具体涉及一种用于防治柑橘黄龙病的药剂及其制备方法。
背景技术
我国是世界柑橘生产第一大国，柑橘产业在促进农民增收、增加社会就业和社会主义新农村建设中发挥极其重要的作用。柑橘黄龙病是柑橘生产上危害最大的毁灭性病害。至今已经在50多个国家和地区发生和流行。我国广东、广西、福建、云南、海南等17个柑橘主产区中，有11个产区受到黄龙病的严重威胁，每年经济损失高达数十亿美元，严重制约我国至世界范围内柑橘产业的发展。
目前尚无任何可用的柑橘黄龙病抗病品种。因此，防控柑橘黄龙病主要依靠：1.加强苗木检疫，选用无病苗木和接穗；2.挖除田间病树，防止病原扩散。但是无病苗木对柑橘黄龙病并无抗性，因此一段时间后依然会受到柑橘黄龙病侵染；挖除或砍除病树虽然可限制病害传播，但直接阻碍了柑橘生产，难以被果农接受。目前研究发现，柑橘黄龙病病原为革兰氏阴性细菌Candidatus Liberibacter asiaticus，因此，积极筛选抗生素进行对症治疗是一种防控柑橘黄龙病积极可行的方法。
农用链霉素是一种氨基葡萄糖型抗生素，杀菌谱广，对多种细菌性病害效果较好；井冈霉素是一种防效高、无药害、无污染的环保型农药，具有较强的内吸性，易被菌体细胞吸收并在其内迅速传导，干扰和抑制菌体细胞生长和发育。如果施用单一种类的杀菌剂虽然可以有效降低黄龙病菌浓度，但长期使用单一药剂，黄龙病菌有可能会产生抗药性，从而大大减弱杀菌剂的药效。因此本发明选用两种不同类型的杀菌剂混配使用，可更好的防控黄龙病。
同时，黄龙病防控的独特性还在于：柑橘木虱是目前唯一已知的可在田间传播黄龙病的昆虫介体，如果只施用杀菌剂虽然可以降低黄龙病菌浓度、延长柑橘病树的商业生产年限，但病树中的黄龙病菌可借助田间大量存在的柑橘木虱快速向四周传播，威胁周边健康的柑橘树；如果只施用杀虫剂，虽然可以阻止黄龙病在田间的传播，但已受感染的柑橘病树仍会不断受到黄龙病菌的侵蚀，而快速衰退，失去商业价值。因此本发明采用杀菌剂和杀虫剂协同使用，可更好的防控柑橘黄龙病。
此外，目前采用的频繁大剂量药剂外施法，极大的破坏了生态环境，威胁人畜健康。本发明采用树干注射施用药剂技术，受到干旱和降雨等外部环境的影响较小，也不会受到树木的危害部位和高度的影响，因此药液利用效率高，施药剂量精确，对环境产生的污染或破坏很小。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于防治柑橘黄龙病的药剂及其制备方法，其通过杀菌剂和杀虫剂两类药物的合理混配，并采用树干输液的方法施药，使制剂优势互补，具备高效、低毒、安全、多功能的特性，可更好的防控柑橘黄龙病。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种用于防治柑橘黄龙病的药剂，每100mL药剂中含有农用链霉素0.5-2g，井冈霉素0.5-2g，噻虫嗪1-10mg，稳定剂0-2mL，防冻剂0-2 mL，助渗剂0-2 mL，分散剂0-2g，乳化剂0-2g，助溶剂0-2 mL，余量用去离子水补足。
其中，所述稳定剂为异丙醇、聚乙二醇中的任意一种。
所述防冻剂为乙二醇、丙二醇、丙三醇中的任意一种。
所述助渗剂为氮酮。
所述分散剂为木质素磺酸钠、丁基萘磺酸钠中的任意一种。
所述乳化剂为十二烷基苯磺酸钠、聚丙烯酸钠中的任意一种。
所述助溶剂为DMSO。
所述用于防治柑橘黄龙病的药剂的制备方法，是将农用链霉素、井冈霉素、噻虫嗪、分散剂、乳化剂一起加入到锥型混合机中混合2-6小时，将混合后的物料加入到气流粉碎机中粉碎后，再加入到锥型混合机中混合2小时，使用60目的标准筛进行筛分后，加入部分去离子水充分搅拌溶解，然后加入稳定剂、防冻剂、助渗剂、助溶剂，充分搅拌溶解，最后加入剩余去离子水调配即得。
所述用于防治柑橘黄龙病的药剂采用树干输液的方法进行施药，可同时防治柑橘黄龙病和柑橘木虱。
传统的农药外施法，简单易行，但柑橘黄龙病菌的特异性在于其在柑橘韧皮部定殖，而传统的杀菌农药外施后，较难穿透柑橘外表皮，因此对环境污染很大，药效也较差。而树干注射施药技术可通过木质部把药剂系统输送到整个树体，到达病菌寄生的部位，大大提高了药剂的有效性，并使所需的用药量更少，且药液封闭在树体内，因此洒漏在外界环境中的药量更少，减少了与人体接触的机会，具备安全、低污染的特性，可更好的防控黄龙病。
本发明是根据柑橘黄龙病防控的客观需要，通过杀菌剂和杀虫剂两种药物的合理混配，并采用树干输液的方法施药，使制剂优势互补，具备高效、低毒、安全、多功能的特性，可更好的防控黄龙病。根据检索，相关的研究及专利文献未见有采用农用链霉素、井冈霉素杀菌剂与噻虫嗪杀虫剂及佐剂等混配加工成树干注射剂的报道。
具体实施方式
为了使本发明所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本发明所述的技术方案做进一步的说明，但是本发明不仅限于此。
实施例1
2015年4月在广东省阳江市潭水镇柑橘场选取20棵患黄龙病的柑橘树，遵循随机选取原则，将其中10株作为处理组，采用树干输液法，输入药剂（农用链霉素0.5g，井冈霉素2g，噻虫嗪2mg，异丙醇1mL，乙二醇0.5 mL，氮酮0.5 mL，十二烷基苯磺酸钠0.5g，去离子水补足100mL），另外10株输入清水做对照，从4月5日开始施药，每月施药一次，每次施药300mL，共计输液4次。每次施药前分别采集两组植株不同部位的叶片样品各20片进行DNA提取，并采用实时荧光定量PCR测定植株黄龙病菌Ct值数量的变动情况，结果见表1和表2。
实时荧光定量PCR实验参照文献Wenbin Li et al., 2006。20μL的反应体系，引物终浓度250 nM，探针终浓度150 nM，缓冲液参照takara探针法实时荧光定量PCR试剂盒说明书。PCR反应程序：95℃预变性20s，然后95℃ 5 s，58℃ 40 s，40个循环。实验结束后，记录荧光定量PCR反应的Ct值。
表1 柑橘中黄龙病菌Ct值随时间的变化
表2 柑橘样品中黄龙病菌浓度（病原菌个数×105/每克柑橘病样）随时间的变化
结果发现：处理组与对照组的黄龙病菌Ct值与黄龙病菌浓度在处理前无显著差异（P>0.05）,而两组的Ct值在处理30天、60天、90天和120天后差异显著增大（P<0.05），即处理组病原浓度显著降低，处理组的黄龙病菌浓度降低到对照组的7.60%-3.31%（P<0.05），表明本发明药剂对抑制柑橘病树的黄龙病菌有较好的作用。
同时，从4月5日开始，每次施药前在每组的各棵树上随机选择5个枝条，调查柑橘木虱虫口总数量，结果见表3。
表3 柑橘上柑橘木虱头数随时间的变化
数据说明，本发明药剂可以大大降低柑橘木虱虫口基数，减少黄龙病的传播。
实施例2
2014年5月在广东省广州市白云区钟落潭柑橘场选取20棵患黄龙病的柑橘树，遵循随机选取原则，将其中10株作为处理组，采用树干输液法，输入药剂（农用链霉素1g，井冈霉素1g，噻虫嗪5mg，聚乙二醇1mL，氮酮1 mL，木质素磺酸钠0.2g，十二烷基苯磺酸钠0.2g，DMSO 0.2 mL，去离子水补足100mL），另外10株输入清水做对照，从5月10日开始施药，每月施药一次，每次施药300mL，共计输液4次。每次施药前分别采集两组植株不同部位的叶片样品各20片进行DNA提取，并采用实时荧光定量PCR测定植株黄龙病菌Ct值数量的变动情况，结果见表4和表5。
实时荧光定量PCR实验参照文献Wenbin Li et al., 2006。20μL的反应体系，引物终浓度250 nM，探针终浓度150 nM，缓冲液参照takara探针法实时荧光定量PCR试剂盒说明书。PCR反应程序：95℃预变性20s，然后95℃ 5 s，58℃ 40 s，40个循环。实验结束后，记录荧光定量PCR反应的Ct值。
表4 柑橘中黄龙病菌CT值随时间的变化
表5 柑橘样品中黄龙病菌浓度*106(病原菌个数×106/每克柑橘病样)随时间的变化
结果发现：处理组与对照组的黄龙病菌Ct值与黄龙病菌浓度在处理前无显著差异（P>0.05）,而两组的Ct值在处理30天、60天、90天和120天后差异显著增大（P<0.05），即处理组病原浓度显著降低，处理组的黄龙病菌浓度降低到对照组的22.18%-4.58%（P<0.05），表明本发明药剂对抑制柑橘病树的黄龙病菌有较好的作用。
同时，从5月10日开始，每次施药前在每组的各棵树上随机选择5个枝条，调查柑橘木虱虫口总数量，结果见表6。
表6 柑橘上柑橘木虱头数随时间的变化
数据说明，本发明药剂可以大大降低柑橘木虱虫口基数，减少黄龙病的传播。
实施例3.
2015年6月在广东省广州大丰柑橘场选取20棵患黄龙病的柑橘树，遵循随机选取原则，将其中10株作为处理组，采用树干输液法，输入药剂（农用链霉素2g，井冈霉素0.5g，噻虫嗪10mg，氮酮1 mL，丁基萘磺酸钠1g，去离子水补足100mL），另外10株输入清水做对照，从6月15日开始施药，每月施药一次，每次施药300mL，共计输液3次。每次施药前分别采集两组植株不同部位的叶片样品各20片进行DNA提取，并采用实时荧光定量PCR测定植株黄龙病菌Ct值数量的变动情况，结果见表7和表8。
实时荧光定量PCR实验参照文献Wenbin Li et al., 2006。20μL的反应体系，引物终浓度250 nM，探针终浓度150 nM，缓冲液参照takara探针法实时荧光定量PCR试剂盒说明书。PCR反应程序：95℃预变性20s，然后95℃ 5 s，58℃ 40 s，40个循环。实验结束后，记录荧光定量PCR反应的Ct值。
表7 处理柑橘盆栽苗中黄龙病菌CT值随时间的变化
表8 柑橘样品中黄龙病菌浓度*104(病原菌个数×104/每克柑橘病样)随时间的变化
结果发现：处理组与对照组的黄龙病菌Ct值与黄龙病菌浓度在处理前无显著差异（P>0.05）,而两组的Ct值在处理30天、60天、90天和120天后差异显著增大（P<0.05），即处理组病原浓度显著降低，处理组的黄龙病菌浓度降低到对照组的52.89%-12.30%（P<0.05），表明本发明药剂对抑制柑橘病树的黄龙病菌有较好的作用。
同时，从6月15日开始，每次施药前在每组的各棵树上随机选择5个枝条，调查柑橘木虱虫口总数量，结果见表9。
表9 柑橘上柑橘木虱子头数随时间的变化
数据说明，本发明药剂可以大大降低柑橘木虱虫口基数，减少黄龙病的传播。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (10)

1. 一种用于防治柑橘黄龙病的药剂，其特征在于：每100mL药剂中含有农用链霉素0.5-2g，井冈霉素0.5-2g，噻虫嗪1-10mg，稳定剂0-2mL，防冻剂0-2 mL，助渗剂0-2 mL，分散剂0-2g，乳化剂0-2g，助溶剂0-2 mL，余量用去离子水补足。
2. 根据权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂，其特征在于：所述稳定剂为异丙醇、聚乙二醇中的任意一种。
3. 根据权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂，其特征在于：所述防冻剂为乙二醇、丙二醇、丙三醇中的任意一种。
4. 根据权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂，其特征在于：所述助渗剂为氮酮。
5. 根据权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂，其特征在于：所述分散剂为木质素磺酸钠、丁基萘磺酸钠中的任意一种。
6. 根据权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂，其特征在于：所述乳化剂为十二烷基苯磺酸钠、聚丙烯酸钠中的任意一种。
7. 根据权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂，其特征在于：所述助溶剂为DMSO。
8. 一种如权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂的制备方法，其特征在于：将农用链霉素、井冈霉素、噻虫嗪、分散剂、乳化剂一起加入到锥型混合机中混合2-6小时，将混合后的物料加入到气流粉碎机中粉碎后，再加入到锥型混合机中混合2小时，使用60目的标准筛进行筛分后，加入部分去离子水充分搅拌溶解，然后加入稳定剂、防冻剂、助渗剂、助溶剂，充分搅拌溶解，最后加入剩余去离子水调配即得。
9. 一种如权利要求1所述用于防治柑橘黄龙病的药剂的应用，其特征在于：用于同时防治柑橘黄龙病和柑橘木虱。
10. 根据权利要求9所述用于防治柑橘黄龙病的药剂的应用，其特征在于：采用树干输液的方法进行施药。
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