CN105766893A - 一种桉树花粉的贮藏方法及其贮藏花粉的生活力测定方法 - Google Patents

一种桉树花粉的贮藏方法及其贮藏花粉的生活力测定方法 Download PDF

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吴世军
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    • A01N3/00—Preservation of plants or parts thereof, e.g. inhibiting evaporation, improvement of the appearance of leaves or protection against physical influences such as UV radiation using chemical compositions; Grafting wax
    • G—PHYSICS
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Abstract

本发明公开了一种桉树花粉的贮藏方法，包括以下步骤：(1)花粉的收集和干燥；(2)低温贮藏。贮藏花粉的生活力测定方法，用于检验贮藏前、后的花粉活力，包括以下步骤：(1)配制培养基：20％蔗糖+6％琼脂+100mg/L硼酸；a、硼酸母液称取0.1g硼酸，水溶解后定容至100ml；b、培养基的配制称取20g蔗糖，6克琼脂加10ml硼酸母液，再加水定容至100ml，备用；(2)贮藏花粉的预处理；(3)培养；(4)镜检观察。本发明与现有技术相比的优点是：本发明可使桉树花粉的保活期由原来的3‑5天延长至5年，还可达30％的生活力。可以在任何季节提供桉树母树授粉需要的花粉。解决桉树杂交育种中的亲本树花期不遇等关键技术问题。本发明操作方法简便，适合桉树花粉贮藏应用。

Description

一种桉树花粉的贮藏方法及其贮藏花粉的生活力测定方法
技术领域
本发明涉及一种花粉贮藏及测定方法，尤其涉及一种桉树花粉的贮藏方法及其贮藏花粉的生活力测定方法。
背景技术
桉树是桃金娘科(Myrtaceae)桉树属(Eucalyptus)植物的统称，原产澳大利亚和印度尼西亚岛，因其具有速生、丰产、抗性好、耐瘠薄、干形好且用途广泛等特点而被世界各国广泛种植。我国桉树栽培面积已达600万公顷，是南方地区的重要工业用材树种，为我国商品木材生产作出了重要贡献。本发明主要涉及以下几种在我国南方地区种植广泛的几个桉树树种：尾叶桉、巨桉、细叶桉、赤桉、邓恩桉。
桉树是雌雄同株植物，目前桉树人工林种植普遍是杂交无性系，主要是通过人工授粉后进行子代测定等一系列选育手段而来，因此，杂交育种是桉树品种选育的最重要手段。桉树花期一般为1个月左右，不同桉树树种花期多不一致，因此，在父母本花期不遇的情况下必须要先行采集父本树的花粉，进行贮藏。
桉树花粉的寿命(保存时间)在自然条件下通常只有3-5天，使用冰壶低温保鲜法贮藏运输，也只能延长至5～8天。因此，在桉树杂交育种的人工授粉过程中，父本树的花粉质量的好坏是人工授粉能否取得成功的关键因素。桉树杂交育种能否取得较好优种优势的决定因素是亲本树的遗传品质，因此对亲本树的筛选至关重要。对一些优良的父本树来说，存在着花期不遇，花粉采集困难、花粉资源少的种种问题，故改良父本树花粉采集与贮藏技术，充分利用父本树的花粉资源，是保障桉树杂交育种的成功关键。
发明内容
本发明是为了解决上述不足，提供了一种桉树花粉的贮藏方法及其贮藏花粉的生活力测定方法。
本发明的上述目的通过以下的技术方案来实现：一种桉树花粉的贮藏方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)花粉的收集和干燥：在桉树盛花期，选择淡黄色或黄白色且萼环出现裂缝时(萼盖将掉未掉时)的花蕾，摘下此类成熟的花蕾，去除萼盖，将雄蕊摘下，置于已消毒的玻璃培养皿中，放进装有干燥剂——硅胶的干燥器中，在常温中干燥24-36小时，使花粉达到恒重，含水量为4.5～6.5％；干燥的花粉快速用200目的筛筛除少量杂质，装入小瓶子中密封，抽真空；
(2)低温贮藏：将干燥花粉放入普通电冰箱的冷冻层中贮藏，冷冻温度为-18～-22℃。
一种贮藏花粉的生活力测定方法，用于检验贮藏前、后的花粉活力，其特征在于：包括以下步骤：
(1)配制培养基：20％蔗糖+6％琼脂+100mg/L硼酸；
a、硼酸母液称取0.1g硼酸，水溶解后定容至100ml；
b、培养基的配制称取20g蔗糖，6克琼脂加10ml硼酸母液，再加水定容至100ml，备用；
(2)贮藏花粉的预处理：将要测定的贮藏花粉放入有吸饱水滤纸的容器中20分钟(花粉不要直接接触水)，让花粉缓慢吸水恢复生活力；
(3)培养：在有凹孔的玻片中滴入2～3滴培养基液，用解剖针粘取少量花粉放入培养液中，轻搅拌几下，放入有保湿滤纸的培养皿中，在20～35℃下培养30～60分钟；
(4)镜检观察：用100倍的生物显微镜观察花粉培养玻片，具有生活力的花粉粒萌发出花粉管，取几个视野约100粒花粉统计萌发百分率。
本发明与现有技术相比的优点是：本发明可使桉树花粉的保活期由原来的3-5天延长至5年，还可达30％的生活力，要求的设备条件不高，总投资在一万元以下。掌握这一技术应用，可以在任何季节提供桉树母树授粉需要的花粉。解决桉树杂交育种中的亲本树花期不遇等关键技术问题。本发明操作方法简便，适合桉树花粉贮藏应用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进一步详述。
一种桉树花粉的贮藏方法，包括以下步骤：
(1)花粉的收集和干燥：在桉树盛花期，选择淡黄色或黄白色且萼环出现裂缝时(萼盖将掉未掉时)的花蕾，摘下此类成熟的花蕾，去除萼盖，将雄蕊摘下，置于已消毒的玻璃培养皿中，放进装有干燥剂——硅胶的干燥器中，在常温中干燥24-36小时，使花粉达到恒重，含水量为4.5～6.5％；干燥的花粉快速用200目的筛筛除少量杂质，装入小瓶子中密封，抽真空；
(2)低温贮藏：将干燥花粉放入普通电冰箱的冷冻层中贮藏，冷冻温度为-18～-22℃。
一种贮藏花粉的生活力测定方法，用于检验贮藏前、后的花粉活力，包括以下步骤：
(1)配制培养基：20％蔗糖+6％琼脂+100mg/L硼酸；
a、硼酸母液称取0.1g硼酸，水溶解后定容至100ml；
b、培养基的配制称取20g蔗糖，6克琼脂加10ml硼酸母液，再加水定容至100ml，备用；
(2)贮藏花粉的预处理：将要测定的贮藏花粉放入有吸饱水滤纸的容器中20分钟(花粉不要直接接触水)，让花粉缓慢吸水恢复生活力；
(3)培养：在有凹孔的玻片中滴入2～3滴培养基液，用解剖针粘取少量花粉放入培养液中，轻搅拌几下，放入有保湿滤纸的培养皿中，在20～35℃下培养30～60分钟；
(4)镜检观察：用100倍的生物显微镜观察花粉培养玻片，具有生活力的花粉粒萌发出花粉管，取几个视野约100粒花粉统计萌发百分率。
实例：采集成熟新鲜桉树优良父本树雄花一批(约几百朵)，用小剪刀或手逐朵把雄蕊摘下，平摊于一张圆滤纸上，滤纸的直径是刚好能平放入干燥器内。预先在干燥器内放入硅胶干燥剂，将花粉放入干燥器中盖上密封的盖子，放在阴凉处干燥，花粉的放入量以24-36小时能干燥至恒重为宜。已吸水的干燥剂可用120～150℃烘干再生使用。
干燥处理后的花粉快速用200目的筛子以小毛笔筛除少量杂质，装入已消毒的小瓶子中密封，用橡皮塞盖紧瓶口，然后用医用注射器抽去瓶内的空气，贴上写明花粉采集树的名称、编号和收集日期的标签。再放入普通家用电冰箱的冷冻层中贮藏。
桉树花粉贮藏时间对萌发率的影响(单位：％)
树种 1天 5天 15天 30天 100天 180天 360天 2年 5年
尾叶桉 62.7 46.6 42.3 41.3 40.6 38.5 38.2 36.5 33.2
赤桉 70.4 56.7 55.3 50.4 46.8 44.3 40.5 35.5 34.3
巨桉 58.5 48.2 46.4 41.7 41.5 36.7 34.6 28.9 20.3
邓恩桉 60.3 50.2 45.7 40.6 35.8 32.5 29.7 26.5 20.7
尾巨桉 65.4 58.7 54.3 53.2 47.9 43.6 41.6 40.3 30.2
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书及实施例内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (2)

1.一种桉树花粉的贮藏方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)花粉的收集和干燥：在桉树盛花期，选择淡黄色或黄白色且萼环出现裂缝时(萼盖将掉未掉时)的花蕾，摘下此类成熟的花蕾，去除萼盖，将雄蕊摘下，置于已消毒的玻璃培养皿中，放进装有干燥剂——硅胶的干燥器中，在常温中干燥24-36小时，使花粉达到恒重，含水量为4.5～6.5％；干燥的花粉快速用200目的筛筛除少量杂质，装入小瓶子中密封，抽真空；
(2)低温贮藏：将干燥花粉放入普通电冰箱的冷冻层中贮藏，冷冻温度为-18～-22℃。
2.一种贮藏花粉的生活力测定方法，用于检验贮藏前、后的花粉活力，其特征在于：包括以下步骤：
(1)配制培养基：20％蔗糖+6％琼脂+100mg/L硼酸。
a、硼酸母液称取0.1g硼酸，水溶解后定容至100ml；
b、培养基的配制称取20g蔗糖，6克琼脂加10ml硼酸母液，再加水定容至100ml，备用；
(2)贮藏花粉的预处理：将要测定的贮藏花粉放入有吸饱水滤纸的容器中20分钟(花粉不要直接接触水)，让花粉缓慢吸水恢复生活力；
(3)培养：在有凹孔的玻片中滴入2～3滴培养基液，用解剖针粘取少量花粉放入培养液中，轻搅拌几下，放入有保湿滤纸的培养皿中，在20～35℃下培养30～60分钟；
(4)镜检观察：用100倍的生物显微镜观察花粉培养玻片，具有生活力的花粉粒萌发出花粉管，取几个视野约100粒花粉统计萌发百分率。
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