CN105766313A - 一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法 - Google Patents
一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于植物分类鉴定技术领域,具体公开了一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法。即将艾纳香和六耳铃的健康的嫩茎进行切片,通过光学显微镜观察其表皮毛形态,并进行比较,通过表皮毛的类型、非腺毛与腺毛的长度和形态可将两种植物的幼苗完全区分开。最明显的差异在于:嫩茎表皮只具有非腺毛、1种头状腺毛的是艾纳香,不仅具有非腺毛、1种与艾纳香腺毛近似的头状腺毛,而且还具有少量长柄头状腺毛的是六耳铃。该方法解决了这两种植物生态区域接近、种子细小易混淆、苗期植株外观相似,易混种、误种,从而造成损失的问题,能够产生较好的经济效益和社会效益。
Description
技术领域
本发明涉及植物分类鉴定技术领域,具体地,涉及一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法。
背景技术
艾纳香(Blumeabalsamifera(L.)DC.)和六耳铃(Blumealanciniata(Roxb.)DC.)均为菊科艾纳香属植物,均分布且适合生长在海南、贵州等地,它们的种子细小,可随风散播。艾纳香是中药“艾片”的唯一药源植物,在海南、贵州等地均有农民和企业进行栽培,通过出售原药材、提取物及含有提取物的中成药等获得收益。而与前者不同,六耳铃无法像艾纳香一样通过加工提取获得艾片。但是,六耳铃因与艾纳香的生态适应性相似,常生长在相同生态区,时常因种子飘入而造成混种、误种的情况,并且,幼苗植株格外相似,容易混淆,从而浪费了时间、人力与土地,降低了生产效率。
根据以往的技术,要区分这两种植物,需要根据其成熟植株的形态特征,进行观察和比较,方可确定。例如:六耳铃的成熟植株基部叶片的下半部分具有明显叶裂,而艾纳香成熟植株的叶不具有明显叶裂;六耳铃的花序总苞片具有腺毛,而艾纳香花序的总苞片表皮不具有腺毛。以上区分方法往往需要等待植株长大进入成熟阶段才得以明确区分,此时植株已经种植数月,部分地区甚至已经达到可以开始采收的状态;而在苗期就尽早快速、准确地区分这两种植物方法尚未有人提出。
发明内容
本发明为了克服现有技术的上述不足,提供一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法。本发明的方法有助于显著缩短区分这几种植株所需要等待的时间,有助于显著性减小混种、误种对栽培者带来的损失。
为了实现上述目的,本发明是通过以下技术方案予以实现的:
一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法,在待测植株上选择完整、健康的嫩茎,进行切片后在光学显微镜下观察,观察过程中观察到以下5点差异中的至少1点都可以将二者进行区分:
(1)表皮毛种类数量:艾纳香表皮毛只有2种,分为非腺毛和腺毛;六耳铃表皮毛有3种,为非腺毛1种和腺毛2种,其中腺毛又有长腺毛和短腺毛各1种;
(2)非腺毛长度:艾纳香非腺毛细长,长度超过500μm;六耳铃非腺毛较短,为100~500μm;
(3)非腺毛形态:组成艾纳香非腺毛的细胞为圆柱形,轴面为长方形或梯形;组成六耳铃非腺毛的细胞在底部有钟状膨大,轴面为钟形;
(4)腺毛长度:艾纳香腺毛的长度为35~60μm;六耳铃短腺毛的长度为40~100μm,长腺毛的长度为200~300μm;
(5)腺毛的形态:艾纳香腺毛为两列2~8排细胞组成的头状腺毛,头部不明显膨大,中部略膨大;六耳铃短腺毛形态与艾纳香腺毛相似,而长腺毛为2~8个单排柄细胞连接一个由4~20个细胞组成的倒圆锥状膨大头部的头状腺毛。
优选地,以第(1)、(3)、(5)点中任意一点作为苗期区分艾纳香和六耳铃的区分点。
优选地,所述切片为冰冻切片或徒手切片。
更优选地,所述冰冻切片的具体步骤为:选择完整、健康的嫩茎,流水冲洗20min后,截取长度为4~6mm的小段,吸干水分后迅速置于冷冻切片机的样品固着器上,在材料周围滴上专用包埋剂,放进温度为-12℃~-20℃的冷冻箱,样品台温度-12℃~-20℃,5~10min后进行切片,切片厚度25~30μm。
更优选地,选则健康、完整的茎尖以下10cm范围内的嫩茎。
更优选地,对于艾纳香:冷冻箱温度为-15℃;对于六耳铃,冷冻箱温度-13℃。
更优选地,8min后切片。
更优选地,冰冻切片厚度为25μm。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明提供了一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法,该方法解决了这两种植物生态区域接近、种子细小易混淆、苗期植株外观相似,易混种、误种的问题。以往的区分方法需要等待植株发育成熟,进行观察和比较,方可确定,例如:六耳铃的成熟植株基部叶片的下半部分具有明显叶裂,而艾纳香成熟植株的叶不具有明显叶裂;六耳铃的花序总苞片具有腺毛,而艾纳香花序的总苞片表皮不具有腺毛,以上方法往往需要等待植株长大进入成熟阶段,长出其具有特殊形态的叶片或总苞片才得以明确区分,此时植株已经种植数月,部分地区甚至已经达到可以开始采收的状态,影响了生产效率和经济效益。本发明的方法有助于显著缩短区分这几种植株所需要等待的时间,有助于显著减小混种、误种对栽培者带来的时间、人力、物力和经济损失。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述,所述实施例只用于解释本发明,并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明,均为常规方法;所使用的材料、试剂等,如无特殊说明,为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1
本实施例所使用的艾纳香(Blumeabalsamifera(L.)DC.)、六耳铃(Blumealanciniata(Roxb.)DC.)均采集自海南省儋州市郊,由庞玉新研究员鉴定,保存在中国热带农业科学院药用植物资源圃中。
在艾纳香和六耳铃幼苗植株上选择完整、健康的嫩茎,进行冰冻切片后在光学显微镜下观察,基本流程为:取材→分割→包埋→切片→观察。具体为:选择健康、完整、茎尖以下10cm范围内的嫩茎,流水冲洗20min后,用锋利的刀片切取截取长度为4~6mm的小段,吸水纸吸干水分,迅速置于德国LeicaCM1900冷冻切片机的样品固着器上,在材料周围滴上专用包埋剂(JungTissueFreezingMedium,Leica)进行包埋,放进温度为-12℃~-20℃的冷冻箱,样品台温度-12℃~-20℃,5~10min后进行切片,切片厚度25~30μm,使用常温载玻片吸贴切下来的组织片,临时装片,在光学显微镜下观察,观察结果发现艾纳香和六耳铃幼苗具有以下5点区别:
1、表皮毛种类数量:艾纳香表皮毛只有2种,分为非腺毛和腺毛;六耳铃表皮毛有3种,为非腺毛1种和腺毛2种,其中腺毛又有长腺毛和短腺毛各1种。
2、非腺毛长度:艾纳香非腺毛细长,长度一般超过500μm;六耳铃非腺毛较短,一般为100~500μm。
3、非腺毛形态:组成艾纳香非腺毛的细胞一般为圆柱形,轴面常为长方形或梯形;组成六耳铃非腺毛的细胞在底部有钟状膨大,轴面常为钟形。
4、腺毛长度:艾纳香腺毛长度一般为35~60μm;六耳铃短腺毛的长度为40~100μm,长腺毛的长度为200~300μm。
5、腺毛的形态:艾纳香腺毛为两列2~8排细胞组成的头状腺毛,头部不明显膨大,中部略膨大;六耳铃短腺毛形态与艾纳香腺毛相似,而长腺毛为2~8个单排柄细胞连接一个由4~20个细胞组成的倒圆锥状膨大头部的头状腺毛。
因此,可以根据以上5个区别点中的至少一点就可以区分艾纳香和六耳铃幼苗。
实施例2
从中国热带农业科学院药用植物资源圃中分别取10株艾纳香和10株六耳铃,做好标记后,将10株艾纳香和10株六耳铃混合打乱,然后按照下列方法一一区分20株幼苗。
在待测植株上选择完整、健康的嫩茎,进行冰冻切片后在光学显微镜下观察,观察指标为表皮毛种类数量:艾纳香表皮毛只有2种,分为非腺毛和腺毛;六耳铃表皮毛有3种,为非腺毛1种和腺毛2种,其中腺毛又有长腺毛和短腺毛各1种。上述20株幼苗经过区分后,区分结果100%正确。
实施例3
从中国热带农业科学院药用植物资源圃中分别取10株艾纳香和10株六耳铃,做好标记后,将10株艾纳香和10株六耳铃混合打乱,然后按照下列方法一一区分20株幼苗。
在待测植株上选择完整、健康的嫩茎,进行冰冻切片后在光学显微镜下观察,观察指标为非腺毛形态:组成艾纳香非腺毛的细胞一般为圆柱形,轴面常为长方形或梯形;组成六耳铃非腺毛的细胞在底部有钟状膨大,轴面常为钟形。上述20株幼苗经过区分后,区分结果100%正确。
实施例4
从中国热带农业科学院药用植物资源圃中分别取10株艾纳香和10株六耳铃,做好标记后,将10株艾纳香和10株六耳铃混合打乱,然后按照下列方法一一区分20株幼苗。
在待测植株上选择完整、健康的嫩茎,进行冰冻切片后在光学显微镜下观察,观察指标为腺毛的形态:艾纳香腺毛为两列2~8排细胞组成的头状腺毛,头部不明显膨大,中部略膨大;六耳铃短腺毛形态与艾纳香腺毛相似,而长腺毛为2~8个单排柄细胞连接一个由4~20个细胞组成的倒圆锥状膨大头部的头状腺毛。上述20株幼苗经过区分后,区分结果100%正确。
Claims (7)
1.一种苗期区分艾纳香和六耳铃的方法,其特征在于,在待测植株上选择完整、健康的嫩茎,进行切片后在光学显微镜下观察,观察过程中观察到以下5点差异中的至少1点都可以将二者进行区分:
(1)表皮毛种类数量:艾纳香表皮毛只有2种,分为非腺毛和腺毛;六耳铃表皮毛有3种,为非腺毛1种和腺毛2种,其中腺毛又有长腺毛和短腺毛各1种;
(2)非腺毛长度:艾纳香非腺毛细长,长度超过500μm;六耳铃非腺毛较短,为100~500μm;
(3)非腺毛形态:组成艾纳香非腺毛的细胞为圆柱形,轴面为长方形或梯形;组成六耳铃非腺毛的细胞在底部有钟状膨大,轴面为钟形;
(4)腺毛长度:艾纳香腺毛的长度为35~60μm;六耳铃短腺毛的长度为40~100μm,长腺毛的长度为200~300μm;
(5)腺毛的形态:艾纳香腺毛为两列2~8排细胞组成的头状腺毛,头部不明显膨大,中部略膨大;六耳铃短腺毛形态与艾纳香腺毛相似,而长腺毛为2~8个单排柄细胞连接一个由4~20个细胞组成的倒圆锥状膨大头部的头状腺毛。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,以第(1)、(3)或(5)点作为苗期区分艾纳香和六耳铃的区分点。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述切片为冰冻切片,冰冻切片的具体步骤为:选择完整、健康的嫩茎,流水冲洗20min后,截取长度为4~6mm的小段,吸干水分后迅速置于冷冻切片机的样品固着器上,在材料周围滴上专用包埋剂,放进温度为-12℃~-20℃的冷冻箱,样品台温度-12℃~-20℃,5~10min后进行切片,切片厚度25~30μm。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,选择完整、健康的茎尖以下10cm范围内的嫩茎。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,对于艾纳香,冷冻箱温度为-15℃;对于六耳铃,冷冻箱温度-13℃。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,8min后切片。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,冰冻切片厚度为25μm。
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