CN105614895A - 碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法 - Google Patents

碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种双酶法制备富铬酵母自溶粉的方法,所述酵母自溶粉富含谷胱甘肽和有机铬,由提取谷胱甘肽后的母液经过预处理,然后与鲜酵母混合,经过酶解、干燥获得,具体步骤如下:(1)谷胱甘肽提取母液预处理,(2)母液沉降,(3)均质破壁,(4)一次酶解,(5)二次酶解,(6)二次酶解结束后经喷雾干燥获得富铬酵母自溶粉。本发明的有益效果是:(1)通过合理的方式回收提取谷胱甘肽后的母液,变废为宝,避免了母液中的谷胱甘肽和氨基酸多肽成分的浪费;(2)获得的自溶粉总氮、氨基酸态氮含量高,营养价值高,灰分低,产品品质好。

Description

碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法
技术领域
本发明涉及一种酵母衍生物的制备方法,具体的说涉及碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法。
背景技术
酵母广泛应用于面包发酵、啤酒发酵等领域,酵母的种类繁多,包括面包酵母、啤酒酵母、药用酵母,酵母中含有丰富的蛋白质、氨基酸等物质,通过对酵母水解,能够获得酵母的蛋白质或氨基酸等物质。
自溶酵母粉选用特异鲜酵母为原料,采用高效破壁和多联酶解等高新技术,经提纯精制而成,产品富含核苷酸,营养小肽、谷胱甘肽及酵母细胞壁多糖等多种营养成分,不含载体,耐高温、可制粒,对动物具有极佳的诱食性、免疫性和促生长性。适用于水产、畜禽及宠物饲料。
富谷胱甘肽酵母用于发酵获得谷胱甘肽,传统的成本最低的提取方法是铜盐法,含有GSH的酵母提取液与氧化亚铜反应生成沉淀GSCu,然后还原获得GSH,但去除沉淀后的母液中仍含有大量的谷胱甘肽及氨基酸、多肽,而现有技术中母液大多被排入污水处理池做废水处理,没有回收综合利用。
发明内容
本发明的目的在于解决现有的不足,提供碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法,将谷胱甘肽提取母液变废为宝,获得谷胱甘肽含量高、营养价值高的富铬酵母粉。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法,所述富铬酵母自溶粉富含有机硒和谷胱甘肽,所述富铬酵母自溶粉的制备方法按如下步骤进行:
(1)谷胱甘肽提取母液预处理:按0.5-0.8Kg/吨母液添加硫化钠,于常温搅拌反应10-15min,然后用氢氧化钡调母液pH至5.6-5.8,搅拌30-45min,保证氢氧化钡与母液充分反应,所述谷胱甘肽提取母液的pH值为1.8-2.5,谷胱甘肽含量0.5-0.6g/L,固形物质量含量为5-5.5%;
(2)母液沉降:步骤(1)反应好的母液送至沉降槽自然沉降20-24h以上,然后上清液或抽滤或板框压滤,充分去除杂质待用;
(3)收集新鲜的含湿量40-50%的富铬酵母泥,加入步骤(2)的母液,升温至55-60℃,充分搅拌均匀,然后采用高压均质机均质1-2遍;
(4)一次酶解,高压均质后的酵母液用氢氧化钠调pH至7.20-7.5,然后调整温度为50-55℃,按体积分数10-12‰添加10-20万单位的碱性蛋白酶进行一次酶解,充分搅拌均匀后开始计时酶解5-8小时,过程温度维持50-55℃,pH让其自然下降,当pH到6.0-6.1左右时一次酶解结束;
(5)二次酶解:一次酶解后,用稀硫酸调pH至5.4,温度50-55℃,然后按体积分数0.8-1‰加80-100万单位的菠萝蛋白酶,酶解0.5-1.5小时,过程pH让其自然下降;
(6)干燥:二次酶解结束后,升温至80-82℃,维持5-10min灭活酶,然后经喷雾干燥获得富谷胱甘肽核酸酵母粉。
步骤(1)中硫化钠现用水溶解,然后以流加的方式加入待预处理的母液中,边流加边搅拌。
步骤(3)中母液与酵母泥的质量比为1:1,富铬酵母的有机硒含量以干基计为0.15-0.2%。
本发明的有益效果是:(1)通过合理的方式回收提取谷胱甘肽后的母液,变废为宝,避免了母液中的谷胱甘肽和氨基酸多肽成分的浪费,降低了污水处理成本;(2)采用合理的酶解工艺,获得的富铬酵母粉总氮、氨基酸态氮含量高,营养价值高,灰分低,产品品质好。
具体实施方式
下面通过具体实施例,对本发明的技术方案作进一步的具体说明。
实施例1:
碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法,所述富铬酵母自溶粉富含有机硒和谷胱甘肽,所述富铬酵母自溶粉的制备方法按如下步骤进行:
(1)谷胱甘肽提取母液预处理:按0.5Kg/吨母液添加硫化钠,于常温搅拌反应10min,然后用氢氧化钡调母液pH至5.6,搅拌30min,保证氢氧化钡与母液充分反应,所述谷胱甘肽提取母液的pH值为1.8,谷胱甘肽含量0.5g/L,固形物质量含量为5%;
(2)母液沉降:步骤(1)反应好的母液送至沉降槽自然沉降20h以上,然后上清液或抽滤或板框压滤,充分去除杂质待用;
(3)收集新鲜的含湿量40%的富铬酵母泥,加入步骤(2)的母液,升温至55℃,充分搅拌均匀,然后采用高压均质机均质1遍;
(4)一次酶解,高压均质后的酵母液用氢氧化钠调pH至7.20,然后调整温度为50℃,按体积分数10‰添加20万单位的碱性蛋白酶进行一次酶解,充分搅拌均匀后开始计时酶解5小时,过程温度维持50℃,pH让其自然下降,当pH到6.0左右时一次酶解结束;
(5)二次酶解:一次酶解后,用稀硫酸调pH至5.4,温度50℃,然后按体积分数0.8‰加100万单位的菠萝蛋白酶,酶解0.5小时,过程pH让其自然下降;
(6)干燥:二次酶解结束后,升温至80℃,维持5min灭活酶,然后经喷雾干燥获得富谷胱甘肽核酸酵母粉。
步骤(1)中硫化钠现用水溶解,然后以流加的方式加入待预处理的母液中,边流加边搅拌。
步骤(3)中母液与酵母泥的质量比为1:1,富铬酵母的有机硒含量以干基计为0.15%。
实施例2:
碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法,所述富铬酵母自溶粉富含有机硒和谷胱甘肽,所述富铬酵母自溶粉的制备方法按如下步骤进行:
(1)谷胱甘肽提取母液预处理:按0.8Kg/吨母液添加硫化钠,于常温搅拌反应15min,然后用氢氧化钡调母液pH至5.8,搅拌45min,保证氢氧化钡与母液充分反应,所述谷胱甘肽提取母液的pH值为2.5,谷胱甘肽含量0.6g/L,固形物质量含量为5.5%;
(2)母液沉降:步骤(1)反应好的母液送至沉降槽自然沉降24h以上,然后上清液或抽滤或板框压滤,充分去除杂质待用;
(3)收集新鲜的含湿量50%的富铬酵母泥,加入步骤(2)的母液,升温至60℃,充分搅拌均匀,然后采用高压均质机均质2遍;
(4)一次酶解,高压均质后的酵母液用氢氧化钠调pH至7.5,然后调整温度为55℃,按体积分数12‰添加20万单位的碱性蛋白酶进行一次酶解,充分搅拌均匀后开始计时酶解8小时,过程温度维持55℃,pH让其自然下降,当pH到6.1左右时一次酶解结束;
(5)二次酶解:一次酶解后,用稀硫酸调pH至5.4,温度55℃,然后按体积分数1‰加80万单位的菠萝蛋白酶,酶解1.5小时,过程pH让其自然下降;
(6)干燥:二次酶解结束后,升温至82℃,维持10min灭活酶,然后经喷雾干燥获得富谷胱甘肽核酸酵母粉。
步骤(1)中硫化钠现用水溶解,然后以流加的方式加入待预处理的母液中,边流加边搅拌。
步骤(3)中母液与酵母泥的质量比为1:1,富铬酵母的有机硒含量以干基计为0.2%。
步骤(3)中母液与酵母泥的质量比为1:1。
实施例1-2制备得到的硒酵母自溶粉的质量指标如下:
实施例 谷胱甘肽含量 总氮含量 硒含量 氨基酸态氮含量 灰分
1 0.685% 12.8% 0.12% 4.2% 0.98%
2 0.82% 13.5% 0.18% 4.5% 1.0%
以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案,并非对本发明作任何形式上的限制,在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。

Claims (3)

1.碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法,其特征在于:所述富铬酵母自溶粉富含有机铬和谷胱甘肽,所述富铬酵母自溶粉的制备方法按如下步骤进行:
(1)谷胱甘肽提取母液预处理:按0.5-0.8Kg/吨母液添加硫化钠,于常温搅拌反应10-15min,然后用氢氧化钡调母液pH至5.6-5.8,搅拌30-45min,保证氢氧化钡与母液充分反应,所述谷胱甘肽提取母液的pH值为1.8-2.5,谷胱甘肽含量0.5-0.6g/L,固形物质量含量为5-5.5%;
(2)母液沉降:步骤(1)反应好的母液送至沉降槽自然沉降20-24h以上,然后上清液或抽滤或板框压滤,充分去除杂质待用;
(3)收集新鲜的含湿量40-50%的富铬酵母泥,加入步骤(2)的母液,升温至55-60℃,充分搅拌均匀,然后采用高压均质机均质1-2遍;
(4)一次酶解,高压均质后的酵母液用氢氧化钠调pH至7.20-7.5,然后调整温度为50-55℃,按体积分数10-12‰添加10-20万单位的碱性蛋白酶进行一次酶解,充分搅拌均匀后开始计时酶解5-8小时,过程温度维持50-55℃,pH让其自然下降,当pH到6.0-6.1左右时一次酶解结束;
(5)二次酶解:一次酶解后,用稀硫酸调pH至5.4,温度50-55℃,然后按体积分数0.8-1‰加80-100万单位的菠萝蛋白酶,酶解0.5-1.5小时,过程pH让其自然下降;
(6)干燥:二次酶解结束后,升温至80-82℃,维持5-10min灭活酶,然后经喷雾干燥获得富谷胱甘肽核酸酵母粉。
2.根据权利要求1所述的碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法,其特征在于:步骤(1)中硫化钠现用水溶解,然后以流加的方式加入待预处理的母液中,边流加边搅拌。
3.根据权利要求1所述的碱性-酸性蛋白酶联合酶解制备富铬酵母自溶粉的方法,其特征在于:步骤(3)中母液与酵母泥的质量比为1:1,富铬酵母的有机铬含量以干基计为0.15-0.2%。
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