CN105594758A - 一种载银蛋白缓释动物用消毒剂的制备方法 - Google Patents

一种载银蛋白缓释动物用消毒剂的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种载银蛋白缓释动物用消毒剂的制备方法，属于动物消毒剂制备领域。本发明以花椒种子为原料，将其晾干并粉碎，与石油醚混合加热回流后，抽滤得滤渣与盐酸混合离心分离收集下层沉淀干燥得花椒种子蛋白，加入去离子水溶解，与酸性蛋白酶酶解离心分离旋转蒸发得蛋白抗菌肽，与CuFe2O4、AgNO3溶液制得的载银氧化物置于无水乙醇中振荡分散，减压抽滤并收集滤饼干燥制得动物用消毒剂。本发明的有益效果是：本发明所制备的动物消毒剂稳定性好，对黏膜刺激性和动物皮肤腐蚀性小；使用后药物无残留，不受有机物影响，药效持续时间长，药物贮存时间久，绿色环保。

Description

一种载银蛋白缓释动物用消毒剂的制备方法
技术领域
本发明涉及一种载银蛋白缓释动物用消毒剂的制备方法，属于动物消毒剂制备领域。
背景技术
消毒剂是指用于杀灭传播媒介上病原微生物，使其达到无害化要求的制剂。消毒是指根据不同的生产环节、对象，用适宜的方法（包括物理、化学或生物学）清除或杀灭畜禽体表及其生存环境中的病原微生物及其他有害微生物。由于动物用药的限制及其存在的弊端，人们已充分认识到消毒在防控动物疫病时的重要作用。目前，畜禽业应用较多的是化学消毒剂，主要分为卤素类（氯制剂、碘制剂、溴制剂）、醛类、酚类、醇类、氧化剂类、表面活性剂类、酸碱类等。其作用机理就是改变微生物赖以生存的环境，致使微生物的内外结构发生改变，主要代谢机能出现障碍，生长发育受阻，从而丧失活性，失去致病力。
氯制剂主要对细菌、芽孢、病毒及真菌杀菌作用强，属高效消毒剂，但其药效持续时间较短，药物不易久存，且具有较强的刺激性和腐蚀性，长期使用会对环境造成严重的破坏；碘制剂属于中效消毒剂，其稀溶液毒性低、无腐蚀性，但不稳定，须现用现配；溴制剂杀菌效力与氯制剂差不多，除藻性能好，但价格高；醛类消毒剂抗菌谱广、杀菌作用强，具有杀灭细胞、芽孢、真菌和病毒的作用，但对人畜有较强的刺激性，性质不稳定；酚类属中效消毒剂，因其pH值低，易受碱性有机物质的影响，对环境有污染，具有刺激性气味，对人和畜禽机体的黏膜系统有刺激性，且具有气味滞留性，对人和畜禽具有很强的毒性，不宜用作养殖期间消毒，其杀菌效果也较差；醇类属中效消毒剂，易挥发，不易保存，对皮肤、黏膜刺激性小；氧化剂类消毒后在物品上不留残余毒性，但化学性质不稳定，应现配现用，因其具有强氧化性，高浓度时可刺激、损害皮肤黏膜、腐蚀物品，长期使用对人和动物眼睛、呼吸道黏膜、环境有强力的破坏。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对目前动物消毒剂易残留，稳定性差，对黏膜刺激性大，且在有机物存在时，易失效挥发的弊端，提供了一种以花椒种子为原料，将其晾干并粉碎，与石油醚混合加热回流后，抽滤得滤渣与盐酸混合离心分离收集下层沉淀干燥得花椒种子蛋白，加入去离子水溶解，与酸性蛋白酶酶解离心分离旋转蒸发得蛋白抗菌肽，与CuFe2O4、AgNO3溶液制得的载银氧化物置于无水乙醇中振荡分散，减压抽滤并收集滤饼干燥制得动物用消毒剂的方法。本发明所制备的动物消毒剂稳定性好，绿色环保，使用后药物无残留，药效持续时间长。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
（1）选取新鲜的花椒种子，对其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末将其置于50～60℃烘箱中干燥6～8h，制备得花椒种子粉末，随后按固液质量比1:25，将花椒种子粉末与石油醚搅拌混合，加热升温并使其回流4～5h，待回流完成后，对其抽滤并收集滤渣，在60～70℃烘箱中干燥3～4h，制备得脱脂花椒种子粉末；
（2）按固液质量比1:10，将脱脂花椒种子粉末与质量浓度为10%的盐酸溶液搅拌混合2～3h，随后对其离心分离并收集下层沉淀，用蒸馏水洗涤3～5次，真空干燥3～4h，制备得花椒种子蛋白；
（3）选取上述制备的10～15g的花椒种子蛋白和80～85mL的去离子水，搅拌混合使其完全溶解后，将其置于30～40℃恒温加热2～3h，用质量浓度为10%的盐酸调节pH至6.0～6.5，随后添加0.5～1.0g的酸性蛋白酶，在200～300r/min摇床振荡酶解4～6h；
（4）待酶解完成后，对其加热升温至95～100℃灭酶处理10～15min，随后静置冷却至20～30℃，在7800～8000r/min下离心分离10～15min，收集上清液并加蒸馏水稀释其pH至7.0，再在30～35℃下旋转蒸发至干，收集干燥蛋白抗菌肽备用；
（5）按Cu2+和Fe2+摩尔比1:2，将Cu（NO3）2，和Fe（NO3）2搅拌混合，制备得混合硝酸盐，按混合硝酸盐与去离子水质量比1:25搅拌混合，制备得混合硝酸盐溶液，再按质量比1:1，将上述制备的混合硝酸盐溶液与质量浓度为20%的氢氧化钠溶解搅拌混合，减压抽滤，收集滤饼并置于高压反应釜中，在300～350℃下水热合成2～3h，随后对其抽滤并收集滤饼，将其置于60～80℃烘箱中干燥6～8h，制备得CuFe2O4；
（6）按CuFe2O4和AgNO3溶液质量比1:1000，将上述制备的CuFe2O4与质量分数为10%的AgNO3溶液搅拌混合，加热升温搅拌混合10～15min后，对其抽滤并收集滤饼，将其置于200～300℃马弗炉中煅烧3～4h，制备得载银氧化物，再将步骤（4）备用的蛋白抗菌肽与载银氧化物按质量比100:1置于无水乙醇中振荡分散1～2h，随后减压抽滤并收集滤饼，将其置于60～80℃烘箱中干燥6～8h，即可制备得一种载银蛋白缓释动物用消毒剂。
本发明的应用方法：将本发明制得的载银蛋白缓释动物用消毒剂放入喷枪中，控制压力为0.5～0.8MPa，喷入量为3～5mg/m3，均匀喷洒于动物养殖场所即可。该动物用消毒剂无刺激性气味和腐蚀性，使用后药物无残留，药效持续时间长，可有效杀灭细菌、病毒、虫卵，减少动物疾病的发生。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明所制备的动物消毒剂稳定性好，对黏膜刺激性和动物皮肤腐蚀性小；
（2）使用后药物无残留，不受有机物影响，药效持续时间长，药物贮存时间久，绿色环保。
具体实施方式
首先选取新鲜的花椒种子，对其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末将其置于50～60℃烘箱中干燥6～8h，制备得花椒种子粉末，随后按固液质量比1:25，将花椒种子粉末与石油醚搅拌混合，加热升温并使其回流4～5h，待回流完成后，对其抽滤并收集滤渣，在60～70℃烘箱中干燥3～4h，制备得脱脂花椒种子粉末；然后按固液质量比1:10，将脱脂花椒种子粉末与质量浓度为10%的盐酸溶液搅拌混合2～3h，随后对其离心分离并收集下层沉淀，用蒸馏水洗涤3～5次，真空干燥3～4h，制备得花椒种子蛋白；再选取上述制备的10～15g的花椒种子蛋白和80～85mL的去离子水，搅拌混合使其完全溶解后，将其置于30～40℃恒温加热2～3h，用质量浓度为10%的盐酸调节pH至6.0～6.5，随后添加0.5～1.0g的酸性蛋白酶，在200～300r/min摇床振荡酶解4～6h；待酶解完成后，对其加热升温至95～100℃灭酶处理10～15min，随后静置冷却至20～30℃，在7800～8000r/min下离心分离10～15min，收集上清液并加蒸馏水稀释其pH至7.0，再在30～35℃下旋转蒸发至干，收集干燥蛋白抗菌肽备用；按Cu2+和Fe2+摩尔比1:2，将Cu（NO3）2，和Fe（NO3）2搅拌混合，制备得混合硝酸盐，按混合硝酸盐与去离子水质量比1:25搅拌混合，制备得混合硝酸盐溶液，再按质量比1:1，将上述制备的混合硝酸盐溶液与质量浓度为20%的氢氧化钠溶解搅拌混合，减压抽滤，收集滤饼并置于高压反应釜中，在300～350℃下水热合成2～3h，随后对其抽滤并收集滤饼，将其置于60～80℃烘箱中干燥6～8h，制备得CuFe2O4；最后按CuFe2O4和AgNO3溶液质量比1:1000，将上述制备的CuFe2O4与质量分数为10%的AgNO3溶液搅拌混合，加热升温搅拌混合10～15min后，对其抽滤并收集滤饼，将其置于200～300℃马弗炉中煅烧3～4h，制备得载银氧化物，再将备用的蛋白抗菌肽与载银氧化物按质量比100:1置于无水乙醇中振荡分散1～2h，随后减压抽滤并收集滤饼，将其置于60～80℃烘箱中干燥6～8h，即可制备得一种载银蛋白缓释动物用消毒剂。
实例1
首先选取新鲜的花椒种子，对其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末将其置于50℃烘箱中干燥6h，制备得花椒种子粉末，随后按固液质量比1:25，将花椒种子粉末与石油醚搅拌混合，加热升温并使其回流4h，待回流完成后，对其抽滤并收集滤渣，在60℃烘箱中干燥3h，制备得脱脂花椒种子粉末；然后按固液质量比1:10，将脱脂花椒种子粉末与质量浓度为10%的盐酸溶液搅拌混合2h，随后对其离心分离并收集下层沉淀，用蒸馏水洗涤3次，真空干燥3h，制备得花椒种子蛋白；再选取上述制备的10g的花椒种子蛋白和80mL的去离子水，搅拌混合使其完全溶解后，将其置于30℃恒温加热2h，用质量浓度为10%的盐酸调节pH至6.0，随后添加0.5g的酸性蛋白酶，在200r/min摇床振荡酶解4h；待酶解完成后，对其加热升温至95℃灭酶处理10min，随后静置冷却至20℃，在7800r/min下离心分离10min，收集上清液并加蒸馏水稀释其pH至7.0，在30℃下旋转蒸发至干，收集干燥蛋白抗菌肽备用；按Cu2+和Fe2+摩尔比1:2，将Cu（NO3）2，和Fe（NO3）2搅拌混合，制备得混合硝酸盐，按混合硝酸盐与去离子水质量比1:25搅拌混合，制备得混合硝酸盐溶液，再按质量比1:1，将上述制备的混合硝酸盐溶液与质量浓度为20%的氢氧化钠溶解搅拌混合，减压抽滤，收集滤饼并置于高压反应釜中，在300℃下水热合成2h，随后对其抽滤并收集滤饼，将其置于60℃烘箱中干燥6h，制备得CuFe2O4；最后按CuFe2O4和AgNO3溶液质量比1:1000，将上述制备的CuFe2O4与质量分数为10%的AgNO3溶液搅拌混合，加热升温搅拌混合10min后，对其抽滤并收集滤饼，将其置于200℃马弗炉中煅烧3h，制备得载银氧化物，再将备用的蛋白抗菌肽与载银氧化物按质量比100:1置于无水乙醇中振荡分散1h，随后减压抽滤并收集滤饼，将其置于60℃烘箱中干燥6h，即可制备得一种载银蛋白缓释动物用消毒剂。
将本发明制得的载银蛋白缓释动物用消毒剂放入喷枪中，控制压力为0.5MPa，喷入量为3mg/m3，均匀喷洒于动物养殖场所即可。该动物用消毒剂无刺激性气味和腐蚀性，使用后药物无残留，药效持续时间长，可有效杀灭细菌、病毒、虫卵，减少动物疾病的发生。
实例2
首先选取新鲜的花椒种子，对其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末将其置于55℃烘箱中干燥7h，制备得花椒种子粉末，随后按固液质量比1:25，将花椒种子粉末与石油醚搅拌混合，加热升温并使其回流4.5h，待回流完成后，对其抽滤并收集滤渣，在65℃烘箱中干燥3.5h，制备得脱脂花椒种子粉末；然后按固液质量比1:10，将脱脂花椒种子粉末与质量浓度为10%的盐酸溶液搅拌混合2.5h，随后对其离心分离并收集下层沉淀，用蒸馏水洗涤4次，真空干燥3.5h，制备得花椒种子蛋白；再选取上述制备的13g的花椒种子蛋白和83mL的去离子水，搅拌混合使其完全溶解后，将其置于35℃恒温加热2.5h，用质量浓度为10%的盐酸调节pH至6.3，随后添加0.8g的酸性蛋白酶，在250r/min摇床振荡酶解5h；待酶解完成后，对其加热升温至98℃灭酶处理13min，随后静置冷却至25℃，在7900r/min下离心分离13min，收集上清液并加蒸馏水稀释其pH至7.0，再在33℃下旋转蒸发至干，收集干燥蛋白抗菌肽备用；随后按Cu2+和Fe2+摩尔比1:2，将Cu（NO3）2，和Fe（NO3）2搅拌混合，制备得混合硝酸盐，按混合硝酸盐与去离子水质量比1:25搅拌混合，制备得混合硝酸盐溶液，再按质量比1:1，将上述制备的混合硝酸盐溶液与质量浓度为20%的氢氧化钠溶解搅拌混合，减压抽滤，收集滤饼并置于高压反应釜中，在325℃下水热合成2.5h，随后对其抽滤并收集滤饼，将其置于70℃烘箱中干燥7h，制备得CuFe2O4；最后按CuFe2O4和AgNO3溶液质量比1:1000，将上述制备的CuFe2O4与质量分数为10%的AgNO3溶液搅拌混合，加热升温搅拌混合13min后，对其抽滤并收集滤饼，将其置于250℃马弗炉中煅烧3.5h，制备得载银氧化物，再将备用的蛋白抗菌肽与载银氧化物按质量比100:1置于无水乙醇中振荡分散1.5h，随后减压抽滤并收集滤饼，将其置于70℃烘箱中干燥7h，即可制备得一种载银蛋白缓释动物用消毒剂。
将本发明制得的载银蛋白缓释动物用消毒剂放入喷枪中，控制压力为0.65MPa，喷入量为4mg/m3，均匀喷洒于动物养殖场所即可。该动物用消毒剂无刺激性气味和腐蚀性，使用后药物无残留，药效持续时间长，可有效杀灭细菌、病毒、虫卵，减少动物疾病的发生。
实例3
首先选取新鲜的花椒种子，对其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末将其置于60℃烘箱中干燥8h，制备得花椒种子粉末，随后按固液质量比1:25，将花椒种子粉末与石油醚搅拌混合，加热升温并使其回流5h，待回流完成后，对其抽滤并收集滤渣，在70℃烘箱中干燥4h，制备得脱脂花椒种子粉末；然后按固液质量比1:10，将脱脂花椒种子粉末与质量浓度为10%的盐酸溶液搅拌混合3h，随后对其离心分离并收集下层沉淀，用蒸馏水洗涤5次，真空干燥4h，制备得花椒种子蛋白；再选取上述制备的15g的花椒种子蛋白和85mL的去离子水，搅拌混合使其完全溶解后，将其置于40℃恒温加热3h，用质量浓度为10%的盐酸调节pH至6.5，随后添加1.0g的酸性蛋白酶，在300r/min摇床振荡酶解6h；待酶解完成后，对其加热升温至100℃灭酶处理15min，随后静置冷却至30℃，在8000r/min下离心分离15min，收集上清液并加蒸馏水稀释其pH至7.0，在35℃下旋转蒸发至干，收集干燥蛋白抗菌肽备用；按Cu2+和Fe2+摩尔比1:2，将Cu（NO3）2，和Fe（NO3）2搅拌混合，制备得混合硝酸盐，按混合硝酸盐与去离子水质量比1:25搅拌混合，制备得混合硝酸盐溶液，再按质量比1:1，将上述制备的混合硝酸盐溶液与质量浓度为20%的氢氧化钠溶解搅拌混合，减压抽滤，收集滤饼并置于高压反应釜中，在350℃下水热合成3h，随后对其抽滤并收集滤饼，将其置于80℃烘箱中干燥8h，制备得CuFe2O4；最后按CuFe2O4和AgNO3溶液质量比1:1000，将上述制备的CuFe2O4与质量分数为10%的AgNO3溶液搅拌混合，加热升温搅拌混合15min后，对其抽滤并收集滤饼，将其置于300℃马弗炉中煅烧4h，制备得载银氧化物，再将备用的蛋白抗菌肽与载银氧化物按质量比100:1置于无水乙醇中振荡分散2h，随后减压抽滤并收集滤饼，将其置于80℃烘箱中干燥8h，即可制备得一种载银蛋白缓释动物用消毒剂。
将本发明制得的载银蛋白缓释动物用消毒剂放入喷枪中，控制压力为0.8MPa，喷入量为5mg/m3，均匀喷洒于动物养殖场所即可。该动物用消毒剂无刺激性气味和腐蚀性，使用后药物无残留，药效持续时间长，可有效杀灭细菌、病毒、虫卵，减少动物疾病的发生。

Claims (1)

1.一种载银蛋白缓释动物用消毒剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：
（1）选取新鲜的花椒种子，对其晾干并粉碎，收集粉碎的花椒粉末将其置于50～60℃烘箱中干燥6～8h，制备得花椒种子粉末，随后按固液质量比1:25，将花椒种子粉末与石油醚搅拌混合，加热升温并使其回流4～5h，待回流完成后，对其抽滤并收集滤渣，在60～70℃烘箱中干燥3～4h，制备得脱脂花椒种子粉末；
（2）按固液质量比1:10，将脱脂花椒种子粉末与质量浓度为10%的盐酸溶液搅拌混合2～3h，随后对其离心分离并收集下层沉淀，用蒸馏水洗涤3～5次，真空干燥3～4h，制备得花椒种子蛋白；
（3）选取上述制备的10～15g的花椒种子蛋白和80～85mL的去离子水，搅拌混合使其完全溶解后，将其置于30～40℃恒温加热2～3h，用质量浓度为10%的盐酸调节pH至6.0～6.5，随后添加0.5～1.0g的酸性蛋白酶，在200～300r/min摇床振荡酶解4～6h；
（4）待酶解完成后，对其加热升温至95～100℃灭酶处理10～15min，随后静置冷却至20～30℃，在7800～8000r/min下离心分离10～15min，收集上清液并加蒸馏水稀释其pH至7.0，再在30～35℃下旋转蒸发至干，收集干燥蛋白抗菌肽备用；
（5）按Cu2+和Fe2+摩尔比1:2，将Cu（NO3）2，和Fe（NO3）2搅拌混合，制备得混合硝酸盐，按混合硝酸盐与去离子水质量比1:25搅拌混合，制备得混合硝酸盐溶液，再按质量比1:1，将上述制备的混合硝酸盐溶液与质量浓度为20%的氢氧化钠溶解搅拌混合，减压抽滤，收集滤饼并置于高压反应釜中，在300～350℃下水热合成2～3h，随后对其抽滤并收集滤饼，将其置于60～80℃烘箱中干燥6～8h，制备得CuFe2O4；
（6）按CuFe2O4和AgNO3溶液质量比1:1000，将上述制备的CuFe2O4与质量分数为10%的AgNO3溶液搅拌混合，加热升温搅拌混合10～15min后，对其抽滤并收集滤饼，将其置于200～300℃马弗炉中煅烧3～4h，制备得载银氧化物，再将步骤（4）备用的蛋白抗菌肽与载银氧化物按质量比100:1置于无水乙醇中振荡分散1～2h，随后减压抽滤并收集滤饼，将其置于60～80℃烘箱中干燥6～8h，即可制备得一种载银蛋白缓释动物用消毒剂。
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