CN105548317A - 一种电化学葡萄糖生物传感器的制备方法及其用于葡萄糖测试的检测方法 - Google Patents
一种电化学葡萄糖生物传感器的制备方法及其用于葡萄糖测试的检测方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种电化学葡萄糖生物传感器的制备及其检测方法。一种电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,首先将钛酸钙纳米粒子分散在壳聚糖溶液中,配制GOD/CaTiO3/CS混合溶液;然后将制得的GOD/CaTiO3/CS混合溶液修饰到经过预处理的玻碳电极表面,即得到所述电化学葡萄糖生物传感器。利用该制备方法得到的电化学葡萄糖生物传感器对葡萄糖样本进行检测的方法,包括以下步骤:(1)在测试液中,以制得的修饰电极为工作电极,饱和甘汞电极作为参比电极,铂片电极作为对电极,加入葡萄糖样本;(2)然后用电化学工作站检测工作电极的电化学信号。采用钛酸钙纳米粒子固定葡萄糖氧化酶,可以很好地保持生物大分子的生物催化活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种电化学生物传感器的制备方法,尤其涉及一种钛酸钙纳米粒子修饰的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,以及利用所述电化学葡萄糖生物传感器进行检测的方法。
背景技术
糖尿病严重危害着人类的健康,因此对于糖尿病的诊断显得尤为重要。通过检测人体血液中葡萄糖的浓度可以间接得知人们的身体健康状况,为糖尿病的诊断提供一个平台。
目前,检测葡萄糖浓度的方法有色谱法、分光光度法、旋光度法、比色法等,这些分析方法灵敏度低、费力、耗时,而使用电化学生物传感器法具有更高的灵敏度,以及分析速度快、选择性高、仪器操作简单、价格低廉等特点。
近年来,电化学分析法由于其灵敏度高,特异性好,样品消耗量小、简单快速等特点,成为一种极有竞争力的现场检测方法。
钛酸钙有很多有趣的性质,应用范围很广,可以作为催化剂、半导体、电介质材料,还可以作为中间体来粘附基体等等;而纳米材料是具有表面效应、体积效应和介电限域效应等不同于块体材料和原子或分子的介观效应,很多纳米材料具有导电性和完整的表面结构,可作为电极材料,为电化学分析研究提供了新的研究途径。
目前,缺乏新的灵敏度高、稳定性好的纳米材料电化学葡萄糖传感器的制备方法,而钛酸钙纳米粒子作为一种新的纳米材料,为传感器的制备提供了新的可能性。
发明内容
本发明提出一种电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,将钛酸钙纳米粒子与葡萄糖氧化酶修饰玻碳电极上,制得电化学生物传感器;
本发明同时公开了利用前述方法制得的钛酸钙纳米粒子的电化学葡萄糖生物传感器进行葡萄糖检测的方法;
本发明利用钛酸钙纳米粒子固定葡萄糖氧化酶,构建一个电化学生物传感器实现对葡萄糖的定量检测,对人体血糖的检测、糖尿病的早期诊断具有重要意义。
本发明所采用的技术方案:
一种电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,包括步骤如下:
1)将钛酸钙纳米粒子分散在壳聚糖溶液中,配制葡萄糖氧化酶/钛酸钙纳米粒子/壳聚糖混合溶液;
2)将步骤1)中制得的葡萄糖氧化酶/钛酸钙纳米粒子/壳聚糖混合溶液修饰到经过预处理的玻碳电极表面,即得到所述电化学葡萄糖生物传感器。
所述步骤1)中,钛酸钙纳米粒子的制备过程如下:
a)称取 一定物质的量的四水合硝酸钙和等物质的量的P25二氧化钛放置于坩埚中;b)在马弗炉中把坩埚加热到550-650°C,保持该温度9-11 h , 然后冷却至室温,收集钛酸钙纳米粒子待用。
所述步骤2)中,对玻碳电极的预处理方法如下:将玻碳电极依次用粒径0.3µm和0.5µm的氧化铝粉抛光,再以去离子水冲洗掉残留的氧化铝粉后,放入稀硝酸水溶液中超声清洗,最后依次用乙醇和二次蒸馏水清洗玻碳电极,修饰前用氮气快速吹干。
一种利用前述制备方法得到的电化学葡萄糖生物传感器对葡萄糖样本进行检测的方法,包括以下步骤:
(1)在测试液中,以制得的修饰电极为工作电极,饱和甘汞电极作为参比电极,铂片电极作为对电极,加入葡萄糖样本;
(2)然后用电化学工作站检测工作电极的电化学信号。
在步骤(1)中,检测条件是:所述测试液为磷酸缓冲盐0.02-0.1mol L-1的溶液;所述磷酸缓冲盐PBS溶液,其pH值为6.5-7.5。
本发明的有益效果:
1、本发明电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,采用钛酸钙纳米粒子具有比表面积大、生物相容性好、导电性好等优点,利用其固定葡萄糖氧化酶,保持生物大分子的生物催化活性,提高检测时的电子传递速率,拓宽检测的线性范围。制备的纳米材料电化学葡萄糖传感器可实现对葡萄糖的定量检测,灵敏度高、稳定性好。
2、本发明电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,制备简单、快速、成本低、灵敏度高,可以用于实际样品中葡萄糖浓度的检测。该传感器通过安培检测得到的i–t曲线来检测葡萄糖浓度,可将其应用于葡萄糖电化学分析。
3、利用本发明的传感器置于检测体系中,加入葡萄糖,检测其电化学信号。测试方法无需标记、简单、快速、成本低、灵敏度高、重现性和稳定性好,可以用于人体血糖葡萄糖浓度的检测。为了提高检测的准确性,本发明还在涂覆钛酸钙纳米材料的混合溶液前,将玻碳电极依次用粒径0.3µm和0.5µm的氧化铝粉抛光,再以去离子水冲洗掉残留的氧化铝粉后,放入稀硝酸水溶液中超声清洗,最后依次用乙醇和二次蒸馏水清洗玻碳电极,修饰前用氮气快速吹干,以此制得预处理的玻碳电极。
4、本发明检测方法,对缓冲溶液的pH、安培检测中的电位进行了优化,并获得了最佳的葡萄糖检测条件,提高了分析效果。用于检测人体血糖浓度,有助于糖尿病的检测,方法简单、快速、成本低、灵敏度高、重现性和稳定性好。
附图说明
图1是钛酸钙纳米粒子(A)、钛酸钙纳米粒子和壳聚糖的溶液(B)、葡萄糖氧化酶溶解于钛酸钙纳米粒子和壳聚糖的溶液(C)修饰到玻碳电极上干燥后的扫描电镜图( SEM );
图2是CS(曲线a),CaTiO3(曲线b)和CaTiO3/CS(曲线c),GOD(曲线d),GOD/CS(曲线e),GOD/CaTiO3/CS(曲线f)的紫外吸收图谱;
图3是裸玻碳电极和不同修饰材料的交流阻抗图;
图4是不同的修饰电极在0.1 M pH 7.0的N2饱和的PBS中的循环伏安图;
图5是GOD/CaTiO3/CS/GCE修饰电极在0.1 M pH 7.0 PBS中,连续加入葡萄糖不同浓度的得到的i–t安培响应曲线。
具体实施方式
下面通过具体实施方式,对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
实施例1
本发明电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,通过如下步骤:
1)将钛酸钙纳米粒子(CaTiO3)分散在壳聚糖(CS)溶液中,配制葡萄糖氧化酶(GOD)/钛酸钙纳米粒子/壳聚糖混合溶液(即:GOD/CaTiO3/CS混合溶液);
2)将步骤1)中制得的GOD/CaTiO3 /CS混合溶液修饰到经过预处理的玻碳电极表面,最终制得所述电化学葡萄糖生物传感器。
实施例2
本实施例所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其与实施例1的不同之处在于:进一步公开了步骤1)中,钛酸钙纳米粒子的制备过程:
a)称取 一定物质的量的四水合硝酸钙( Ca(NO3)2 ·4H2O )和等物质的量的P25二氧化钛(P25 TiO2 )放置于坩埚中;
b)在马弗炉中把坩埚加热到550-650°C,保持该温度9-11 h , 然后冷却至室温,收集钛酸钙纳米粒子待用。
实施例3
本实施例所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其与实施例1或实施例2的不同之处在于:步骤2)中,对玻碳电极的预处理方法如下:将玻碳电极依次用粒径0.3µm和0.5µm的氧化铝粉抛光,再以去离子水冲洗掉残留的氧化铝粉后,放入稀硝酸水溶液中超声清洗,最后依次用乙醇和二次蒸馏水清洗玻碳电极,修饰前用氮气快速吹干。
实施例4
本实施例所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其与前述各实施例的不同之处在于:所述步骤1):在超声条件下,将1.0-3.0 mg 钛酸钙纳米粒子(CaTiO3)分散在1.0 mL0.5% 的壳聚糖(CS)溶液中,取配好的CaTiO3/CS溶液用于配制10-20 mg mL-1的GOD/CaTiO3/CS混合溶液,搅拌15分钟 (溶解时转速快易导致葡萄糖氧化酶失活,因此需要以1-2 r/s的速度缓慢搅拌)。
实施例5
本实施例所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其与实施例4的不同之处在于:所述步骤2)中:将步骤1)中制得的含有钛酸钙纳米粒子/葡萄糖氧化酶/壳聚糖(GOD/CaTiO3/CS)的混合溶液3.0-7.0 µL均匀地涂覆于预处理的玻碳电极(d=2-4mm)表面,置于4℃的温度环境下,干燥后制得GOD/CaTiO3/CS修饰电极。
实施例6
本实施例为利用前述制备方法得到的电化学葡萄糖生物传感器对葡萄糖样本进行检测的方法,包括以下步骤:
(1)在测试液中,以制得的修饰电极为工作电极,饱和甘汞电极作为参比电极,铂片电极作为对电极,加入葡萄糖样本;
(2)然后用电化学工作站检测工作电极的电化学信号。
所述的检测方法,在步骤(1)中,检测条件是:所述测试液为磷酸缓冲盐0.02-0.1mol L-1的溶液(即PBS溶液);所述磷酸缓冲盐PBS溶液,其pH值为6.5-7.5。
本发明利用纳米材料的特殊性能来控制酶的活性,采用CaTiO3纳米粒子以及壳聚糖的生物兼容性构建了一种生物传感器。下述通过实验说明,本发明基于GOD/CaTiO3/CS修饰GCE的生物传感器不但对葡萄糖有良好的催化活性,而且重复性及稳定性很好。
1.实验部分
1.1 试剂
葡萄糖氧化酶(GOD,EC 1.1.3.4,108 U mg–1,Aspergillus niger)购买自Amresco ,D–(+)–葡萄糖和nafion 购自Sigma-Aldrich公司,四水合硝酸钙(Ca(NO3)2 · 4H2O,A.R.,金山化工厂),二氧化钛(P25 TiO2,A. R.,上海苏懿化学试剂有限公司)。磷酸缓冲液(PBS)是用0.1 M Na2HPO4和 NaH2PO4溶液由pH计调节到所需值。其它试剂均为分析纯并用去离子水配制。
1.2 仪器
电化学测量是在CHI 852C(USA)电化学工作站上完成。实验采用三电极体系,玻碳电极GCE(Φ=3 mm)为工作电极,铂电极作对电极,饱和甘汞电极作参比电极(SCE)。循环伏安实验都是在100 mV s–1的扫速下进行的(除非有特殊说明),pH值的测量是在S–25测量仪上完成的。
电化学交流阻抗实验是在含有5.0 mM Fe(CN)6 3-/Fe(CN)6 4-(1:1)混合物的0.1 MKNO3溶液中进行,频率范围为10-2–105 Hz,交流电位的幅度为0.18 V。
扫描电镜(SEM)S–4800,日本,电压15 kV;傅里叶红外(FT–IR)光谱 Tensor 27Bruker公司,德国;紫外光谱(UV–vis)UV–2500,Shimadzu公司,日本。
1.3 CaTiO3的合成及酶传感器的制备
称取 5 mmol Ca(NO3)2 ·4H2O 和等摩尔的P25 TiO2 放置于坩埚中。用马弗炉对坩埚加热到600°C ,保持600°C 10 h , 然后冷却至室温,收集起来用来做分析鉴定。
GCE首先依次用0.3和0.5 µm的Al2O3处理,然后用二次水冲洗,再用1:1的HNO3、丙酮和二次水超声处理,在室温干燥。3.0 mg CaTiO3分散在1.0 mL 0.5% CS溶液中,取配好的CaTiO3/CS溶液配10 mg mL-1的GOD/CaTiO3/CS溶液在缓慢搅速下搅拌15分钟后,取混合溶液5.0 µL分散液滴在处理好的GCE上,置于4 oC的冰箱中保存,干燥后制得GOD/CaTiO3/CS修饰电极,然后用去离子水冲洗去除没有固定的酶分子。当不用的时候,制备好的电极应该放在0.1 M pH 7.0 PBS溶液中在4 oC的冰箱中保存。
1.4电化学检测过程
循环伏安和安培检测在室温下电解池中进行。安培检测在搅拌的体系中完成,施加电位为–0.45 V。电流稳定后,每间隔30 s,加入待测物。对葡萄糖的检测是通过加不同体积的葡萄糖储备液到空气饱和的缓冲溶液中进行的。
2.结果与讨论
2.1材料的表征
参见图1扫描电镜图,SEM图表征了CaTiO3(A)、CaTiO3/CS(B)和GOD/CaTiO3/CS(C),从图上可以看出,CaTiO3呈现规则的结构(A),CaTiO3被CS的薄层所包裹(B),CaTiO3表面呈现出糊状的结构,说明GOD已经均匀的填充到CaTiO3空隙当中。
图2是CS(曲线a),CaTiO3(曲线b)和CaTiO3/CS(曲线c),GOD(曲线d),GOD/CS(曲线e),GOD/CaTiO3/CS(曲线f)的紫外吸收图谱。GOD在273 nm和380、454nm弱的吸收归咎于蛋白质结构中的多肽链和羰基的吸收峰。而酶包裹的复合物即GOD/CaTiO3/CS(曲线f)的吸收峰的位置和形状和纯的GOD的吸收峰位置和形状基本一致,这表明固定在CaTiO3/CS材料中的GOD保持良好的活性。
图3是裸玻碳电极和不同修饰材料的交流阻抗图,其中a:GCE;b:CS/GCE;c:CaTiO3/CS/GCE;d: GOD/CaTiO3/CS /GCE。电化学阻抗图谱是表征电极表面性质和电子传递过程的有力工具。高频处的半圆对应着限制过程中的电子转移,低频处的直线对应着分散过程。半圆的半径等同于电子转移阻抗(Ret),控制着电极表面氧化还原探针的电子转移动力学。由图3看出,CaTiO3有助于电子传递,能够提供一个类似电子传导隧道的微环境,当CaTiO3/CS的复合材料负载酶时,半圆半径变大,即阻抗增大,说明GOD已经成功地固定在电极表面。
2.2 GOD/CaTiO3/CS/GCE的直接电化学
参见图4,给出了不同修饰电极的循环伏安图。在N2饱和的0.1 M pH 7.0 PBS中的CS/GCE(a);CaTiO3/CS/GCE(b);GOD/Cs/GCE(c);GOD/CaTiO3/CS/GCE(d)的循环伏安图。扫速为:100 mV s–1。从图4看出,CaTiO3/CS/GCE(b)没有氧化还原峰出现,负载酶之后出现了一对GOD的典型的Fe(III)/Fe(II)的可逆氧化还原峰(d),而且在由材料负载酶之后的循环伏安图峰电流明显大于单独的活性酶的峰电流,峰电流是活性酶的3.53倍。由此说明该材料有助于负载酶,加大了酶和电极之间的电子传递。Epa=–0.412 V,Epc=–0.459 V,△Ep= 47 mV,ipa/ipc≈1,根据59/n= 47 mV,可计算得知,GOD在该复合材料修饰的电极上是两个电子的传递过程。
2.3 GOD/CaTiO3/CS/GCE对葡萄糖的电催化行为
固定在CaTiO3/CS修饰电极上的GOD保持了其原有的生物活性,对葡萄糖有良好的催化性能。修饰电极对葡萄糖的响应机理为:
GOD (FAD) + 2e– + 2H+ ↔ GOD (FADH2) (1)
GOD (FAD) + Glucose ↔ GOD (FADH2)+Gluconolactone (2)
上述两反应竞争FAD,当溶液中有氧气存在,就会发生下面的反应
GOD (FADH2) + O2 → GOD (FAD) + H2O2 (3)
(上述式子中:FAD 黄素腺嘌呤二核苷酸,FADH2 还原型黄素腺嘌呤二核苷酸)
随着葡萄糖浓度的增加,还原峰电流减小,由此提出了葡萄糖传感器。在一定的范围内,葡萄糖的量与还原峰电流的减小值成正比。
图5是GOD/CaTiO3/CS/GCE在连续搅拌、空气饱和的0.1 M pH 7.0的PBS缓冲液中连续滴加不同浓度的葡萄糖溶液得到的i–t安培响应曲线。电压为–0.45 V,内插图揭示了响应信号与葡萄糖浓度的关系。线性响应范围7.0×10−6 M–1.49×10−3 M,线性方程为:I(μA)=0.0744+0.995C(mM)R=0.9995,灵敏度:14.10±0.5 mA M−1 cm−2,检出限:2.3 ×10−6 M(S/N=3)。
干扰试验是在搅拌的情况下,在0.1 M pH 7.0 PBS中加入0.2 mM葡萄糖,尿酸和抗坏血酸来进行的。实验结果表明,尿酸或抗坏血酸存在时几乎不会引起还原电流明显的改变,这些物质不会干扰传感器的电流响应。通过修饰电极对0.1 mM葡萄糖的电流响应可考察传感器测定的精密度。在最优化条件下重复制作5个葡萄糖传感器,平行进行10次测定,相对标准偏差为2.1 %,分别加入0.05 mM葡萄糖测定20次,相对标准偏差为0.75 %,表明该传感器有较好的重现性。
GOD/CaTiO3/CS/GCE不用时可在0.1 M pH 7.0 PBS 中在4 oC的冰箱中保存,三个星期以内没有观察到酶电极对葡萄糖的安培响应降低,酶电极保存25天后仍能保持初始电流响应的93%,说明GOD/CaTiO3/CS/GCE能够有效地保持葡萄糖氧化酶的活性,并能防止酶泄漏,这是因为壳聚糖的包裹性能。
2.4 实际样品的检测
为了证明该葡萄糖传感器的实际使用性,对未经处理的实际血清样品进行了检测。实际样品的检测是在连续搅拌、空气饱和的pH 7.0的PBS缓冲溶液中连续滴加不同浓度的血清得到的。计算得血清中葡萄糖浓度为4.3 mM,跟用分光光度法测得的4.12 mM接近。然后在血清样品中分别加入0.1 mM 、0.2 mM 葡萄糖,回收率分别为104.8 %、103.8 %,检测结果如下表1所示,结果表明,该修饰电极在实际血清样品检测中具有很好的准确性。
表1 血清中葡萄糖的测定值
3.结论
本研究制备了CaTiO3纳米粒子,利用CaTiO3纳米粒子大的比表面积,壳聚糖的优良性能为一体修饰电极固定GOD,实现了酶与电极表面之间的快速直接电子传递。实验结果表明,利用该纳米材料来固载葡萄糖氧化酶,能保持其良好的生物活性。所固定的酶分子表现出表面控制、可逆的两电子两质子的转移过程,电子转移速率常数ks为3.35 s-1。该酶电极对葡萄糖响应的浓度范围为7.0×10−6 M–1.49×10−3 M,检测限为2.3×10−6 M(S/N=3),灵敏度为14.10 ±0.5 mAM−1cm−2。利用该方法制备的葡萄糖电化学生物传感器具有良好的重复性、优良的选择性和可接受的寿命,能够成功应用于血清中葡萄糖的选择性测定。
Claims (8)
1.一种电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其特征在于,包括步骤如下:
1)将钛酸钙纳米粒子分散在壳聚糖溶液中,配制葡萄糖氧化酶/钛酸钙纳米粒子/壳聚糖混合溶液;
2)将步骤1)中制得的葡萄糖氧化酶/钛酸钙纳米粒子/壳聚糖混合溶液修饰到经过预处理的玻碳电极表面,即得到所述电化学葡萄糖生物传感器。
2.根据权利要求1所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其特征在于:步骤1)中,钛酸钙纳米粒子的制备过程如下:
a)称取一定物质的量的四水合硝酸钙和等物质的量的P25二氧化钛放置于坩埚中;
b)在马弗炉中把坩埚加热到550-650°C,保持该温度9-11 h , 然后冷却至室温,收集钛酸钙纳米粒子待用。
3.根据权利要求1或2所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其特征在于:步骤2)中,对玻碳电极的预处理方法如下:将玻碳电极依次用粒径0.3µm和0.5µm的氧化铝粉抛光,再以去离子水冲洗掉残留的氧化铝粉后,放入稀硝酸水溶液中超声清洗,最后依次用乙醇和二次蒸馏水清洗玻碳电极,修饰前用氮气快速吹干。
4.根据权利要求1或2所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤1):在超声条件下,将1.0-3.0 mg 钛酸钙纳米粒子分散在1.0 mL 0.5% 的壳聚糖溶液中,取配好的CaTiO3 /CS溶液用于配制10-20 mg mL-1的GOD/CaTiO3 /CS混合溶液,缓慢搅拌15分钟。
5.根据权利要求4所述的电化学葡萄糖生物传感器的制备方法,其特征在于:所述步骤2)中:将步骤1)中制得的含有钛酸钙纳米粒子/葡萄糖氧化酶/壳聚糖的混合溶液3.0-7.0µL均匀地涂覆于预处理的玻碳电极表面,置于4 ℃的温度环境下,干燥后制得GOD/CaTiO3/CS修饰电极。
6.一种利用权利要求1制备方法得到的电化学葡萄糖生物传感器对葡萄糖样本进行检测的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)在测试液中,以制得的修饰电极为工作电极,饱和甘汞电极作为参比电极,铂片电极作为对电极,加入葡萄糖样本;
(2)然后用电化学工作站检测工作电极的电化学信号。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于:在步骤(1)中,检测条件是:所述测试液为磷酸缓冲盐0.02-0.1mol L-1的溶液。
8.根据权利要求6或7所述的检测方法,其特征在于:所述磷酸缓冲盐PBS溶液,其pH值为6.5-7.5。
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---|---|
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106442674A (zh) * | 2016-09-29 | 2017-02-22 | 扬州大学 | 一种基于钛酸锶纳米粒子的电化学葡萄糖生物传感器及其制备方法 |
CN108918448A (zh) * | 2018-06-28 | 2018-11-30 | 河南省肿瘤医院 | 一种基于纳米金增强型酶生物传感材料的制备方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101581691A (zh) * | 2009-06-26 | 2009-11-18 | 上海大学 | 作为葡萄糖传感器的修饰玻碳电极的制备方法及其应用 |
CN102636540A (zh) * | 2012-04-19 | 2012-08-15 | 湖南大学 | 一种葡萄糖检测传感器及其制备和使用方法 |
CN102847529A (zh) * | 2012-02-09 | 2013-01-02 | 江苏大学 | 一种石墨烯/钛酸盐纳米复合可见光催化剂及其制备方法 |
-
2016
- 2016-01-07 CN CN201610007745.XA patent/CN105548317B/zh active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101581691A (zh) * | 2009-06-26 | 2009-11-18 | 上海大学 | 作为葡萄糖传感器的修饰玻碳电极的制备方法及其应用 |
CN102847529A (zh) * | 2012-02-09 | 2013-01-02 | 江苏大学 | 一种石墨烯/钛酸盐纳米复合可见光催化剂及其制备方法 |
CN102636540A (zh) * | 2012-04-19 | 2012-08-15 | 湖南大学 | 一种葡萄糖检测传感器及其制备和使用方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
TING-QIAN LIN ET AL.: "Fabrication of glucose fiber sensor based on immobilized GOD technique for rapid measurement", 《OPTICS EXPRESS》 * |
刘州洲等: "葡萄糖氧化酶一Nation一钛酸盐纳米带修饰电极的电化学性能研究", 《福州大学学报(自然科学版)》 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106442674A (zh) * | 2016-09-29 | 2017-02-22 | 扬州大学 | 一种基于钛酸锶纳米粒子的电化学葡萄糖生物传感器及其制备方法 |
CN108918448A (zh) * | 2018-06-28 | 2018-11-30 | 河南省肿瘤医院 | 一种基于纳米金增强型酶生物传感材料的制备方法 |
CN108918448B (zh) * | 2018-06-28 | 2020-10-02 | 河南省肿瘤医院 | 一种基于纳米金增强型酶生物传感材料的制备方法 |
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