CN105493863A

CN105493863A - 藏茵陈种植方法

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Publication number: CN105493863A
Application number: CN201510995469.8A
Authority: CN
Inventors: 祝清灿; 周宁; 杨相波; 陈钟; 刘凯; 白志文
Original assignee: Sinopharm Tongjitang Guizhou Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Sinopharm Tongjitang Guizhou Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-12-28
Filing date: 2015-12-28
Publication date: 2016-04-20
Anticipated expiration: 2035-12-28
Also published as: CN105493863B

Abstract

本发明提供了藏茵陈的种植方法。本发明在深入研究藏茵陈生长发育特性与适宜生长条件的前提下，在进行系统的繁育和种植实验研究的基础上，所制定的藏茵陈种植方法科学合理，通过对藏茵陈野生资源的保护抚育实现了藏茵陈质量的稳定可控，以及资源的充分、合理、可持续利用，采用本发明所提供的藏茵陈规范化种植方法，幼苗发育整齐，育苗效率高，使得植株生长茂盛，产量高；其主要成分含量与野生药材相同，但单位面积苗产量却远远高于野生药材，经济价值成倍提高。

Description

藏茵陈种植方法

技术领域

本发明涉及药材种植领域，具体涉及藏茵陈的种植方法。

背景技术

藏茵陈药材来源于龙胆科獐牙菜属植物川西獐牙菜(SwertiamussottiiFranch.)、印度獐牙菜(S.chirata)、尼泊尔獐牙菜(S.neplensis)和普兰獐牙菜(S.angustifolia)等10多种，而常用的主要有川西獐牙菜、抱茎獐牙菜和印度獐芽菜三种。本发明仅指川西獐牙菜，为藏药标准收载的品种(即法定品种)，藏语称“贾斗、桑帝和蒂达”。藏茵陈药材属于名贵藏药植物，不是一般意义上的藏药材，是藏药材资源中的宝中宝。

川西獐牙菜一年生草本，从基部起呈塔形或帚状分枝。主根淡黄色。茎四棱形，棱上有窄翅。基生叶不发达，茎生叶卵状披针形，中脉于背面明显突起，无叶柄。聚伞花序，花1-3朵，腋生和顶生；花4数；花萼裂片线状披针形或披针形；花冠暗紫红色，裂片披针形，先端渐尖，具尖头，基部有2个腺窝，边缘具柔毛状流苏；子房柱头头状，2裂。蒴果矩圆状披针形；种子深褐色，椭圆形，表面具细网状突起。花期7-8月，果期9-10月。生于海拔2000-5000m的山坡、河谷、水边、林下及灌丛中。产青海西南部、西藏、云南(德钦)和四川西北部。，而是指本来就存在于青藏高原特有种

川西獐牙菜气味略带清香，味极苦，主要含有口山酮类、环烯醚萜类和三萜类等，主要功能为清热消炎、利胆退黄，是治疗肝胆疾病的首选药物，特别对肝胆实热性疾病有较好疗效，也用于治疗胆囊炎、各型肝炎、急性黄疸性肝炎、肾盂肾炎、流行性感冒、发烧、急性咽喉炎及烫伤，也用于风火牙痛。《百科全书·藏医分卷》汇集历代经典著作中以藏茵陈为主药命名的著名方剂共十余方，例如三味藏茵陈汤、四味藏茵陈汤、六味藏茵陈膏、八味藏茵陈散、藏茵陈片、金黄利胆胶囊、十五味藏茵陈酥油丸等。这些方剂治疗肝胆疾病各有所长。传统的八味藏茵陈散，经青海省藏药制药厂用现代工艺加工成丸剂、胶囊推向全国医药市场。

藏茵陈是一种名贵藏药植物，其为青藏高原特有种，但因该植物种分布的“生态位”极为狭窄，自然资源量十分有限，难以达到“收支平衡”，日益增大的药用需求，不仅导致了藏茵陈药源锐减，甚至该种已陷入了频危以至灭绝的境地。为了挽救藏茵陈的生存，我们开展了引种栽培的研究，并获得了成功，在此，本发明公开了一种藏茵陈的人工种植方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种藏茵陈的种植方法。

采用本发明中的育苗方法和种植方法，能使藏茵陈种子发芽率高，幼苗发育整齐，存活率高，生长条件优越，长势好；本发明的种植技术符合GAP要求，无农药，无重金属残留物，保证藏茵陈的无公害种植。

经过大量的考察，发现藏茵陈的自然分布地带比较狭窄，一般在海拔2300m～4600m，年平均气温12℃以上，1月平均温度在2.9℃以上，年平均日照1200～1500小时，年平均年总积温高于3000℃，无霜期在210天以上，年平均降水量达1000mm，生长期相对湿度在70～90％之间，年均日照时数1100～1500小时，中亚热带湿润气候，雨热同期的地区。

种质资源圃内藏茵陈的生物学特性观察研究发现，藏茵陈的一个生长发育期须经历6个时期：第一期为芽苞形成期，该期通常为当年的3月～8月中旬，该生育期在地下完成；第二期为萌芽期，当年8月～10月，当气温稳定达8～10℃时，地下芽苞膨大而出土萌芽；第三期为花芽、腋芽抽生期，3～4月为花芽、腋芽抽生期，当气温稳定通过10～15℃时，花芽和腋芽抽生到植株成株高度；第四期为花果期，7月至9月，藏茵陈边开花边结果；第五期为展叶期及主杆生长期，5月～7月，藏茵陈枝干变粗，色变深；第六期为停止生长期，为10月至翌年2月。

本发明深入研究了藏茵陈的生长发育特性与适宜生长条件，进行系统的繁育和种植实验研究，提出本发明的藏茵陈的种植方法。

本发明所述藏茵陈的种植方法包括以下步骤：

1)育苗：沙土与种子混拌育苗；

2)选地，整地，按每株地下根茎的发育状况进行分株，按每株带2～3苗或带1～2芽，分株，株间距15cm～30cm；

3)田间管理：分为间苗、搭棚遮荫、中耕除草、灌溉以及合理施肥；

4)采收及加工：种植的第二年夏、秋季花期及花后期均可采割，晒干或阴干。

另外，所述的种植方法还包括步骤5)采收成熟种子，然后消毒并保存种子。

其中，步骤1)中，所述的育苗可采用以下方式进行：在拌种前30-40天，用种子体积8-10倍的细沙与种子混拌均匀，湿度以于握成团松开后即散为宜；然后把拌好的种子装在木箱内，埋在室外地势较高和较干燥的阴凉处，深度为35-45厘米为宜。坑周围挖好排水沟，以防雨水渗入；

步骤1)中，所述的育苗也可采用以下方式进行：在种植前3天，用浓度为100mg/kg的赤霉素水溶液浸种2小时，捞出装入布袋中用清水冲洗到无黄色为止，然后把种子袋浮水控净；再用3％硝酸钾液于室温条件下浸种3小时后用清水洗净，达到水无色为止，把种子袋的水控净后，按细沙或细土与种子20:1的体积比搅拌均匀后立刻拌种到大田；

步骤2)中，所述的选地是依据藏茵陈的野生条件进行选择。一般可选择山坡、河滩地、阳坡等灌丛较为密集，遮阳条件较好的土地；土壤以肥沃、疏松、保水保肥、耕作层厚30㎝左右(25-40㎝)的壤土或砂质壤土，pH值为5～7、有机质2.5％以上为佳。遮阳条件较好，或用搭棚遮荫，使照度不超过2000lux。

步骤2)中，所述整地可采用本领域常用的方法进行，但需要注意保护原有的这样条件。一般来说，所述整地可分为2次进行。第一次于育苗期间，割去地面杂草及株高低于藏茵陈成株的小灌木，保留乔木和其他灌木，在整地时，翻耕20～30cm，除去留于地中的杂草根及小灌木树根；第二次于种植前，再次将杂草割除，翻耕20～30cm，整细土壤，将腐殖质土施于地表，每亩撒施1000-2000㎏腐熟的农家肥或有机肥作底肥。

步骤3)中，所述间苗可采用本领域常用的方法进行，保证株间距即可；一般来说藏茵陈的间苗是在菜植株萌芽期内进行，需要经常查看植株萌芽情况，发现有密度较大地方，进行间苗，保持株间距在15cm～30cm(每株带2～3苗)。

步骤3)中，搭棚遮荫是指光照大于2000lux后，搭棚遮荫，荫棚高1.8～2m，材料因地制宜选用，可选择木桩加铁丝或水泥桩加铁丝或其它绳索、木条等搭建，也可搭竹棚，遮荫材料选用市售90％的遮荫网。

步骤3)中，中耕除草是指除草结合中耕进行，除去田间杂草。在秋冬季杂草生长缓慢，视草情决定除草次数。

步骤3)中，所述灌溉应适时进行，以保持土壤湿润为准；如出苗后的1个月后，应适时灌溉；在夏季一般连续晴5～6天时，就必须进行人工浇水，浇水宜在早晚进行。

步骤3)中，所述施肥一般分为提芽肥、促芽肥和补充施肥：

提芽肥于萌芽期前期和萌芽期追一次或两次；幼苗出土后的一个月是川西獐牙菜生长的关键时期，应结合灌溉、松土，及时追施提苗肥：

促芽肥于花芽、腋芽抽生期施一次；

采收后的补施，然后在每次采收(一般为夏采和秋采)后，及时补充肥料。

步骤3)中，采收后施肥：每亩农家肥1000～2000kg或每亩有机复合肥20～30kg/亩；提芽肥或促芽肥：每亩农家肥1000kg/亩，或有机复合肥10～20kg/亩。

步骤5)中，成熟种子的采收依据为朔果黄色，顶端开裂的为直接成熟；果核为开裂，但颜色黄色或蜡黄色的也是成熟特征；如果下霜后大部分果核仍比较硬，呈绿色，这时判断成熟的方法是扒开几个果核，取出绿色种子，用手捻开，如果种仁呈白色即可判定为后熟的种子；

步骤5)中，还包括采用40目和60目的分样筛进行筛分，收集40～60目的种子；

在所述步骤5)中，种子消毒用50％多菌灵可湿性粉剂或70％代森锰锌可湿性粉剂按种子重量的0.2-0.3％的比例进行拌种，还可以采用50％多菌灵可湿性粉剂600-800倍数液或70％代森锰锌可湿性粉剂500-800倍液，或75％百菌清可湿性粉剂800-1000倍液，在温度17-25℃下浸种消毒2-3小时，捞出后用清水冲洗药液，晾至种皮无水。

在所述步骤5)中，保存种子的贮藏条件为0-5℃下低温处保存。

实验观察发现，在上述种植条件下，藏茵陈在种植过程中很少遭受病虫害。

本发明在深入研究藏茵陈生长发育特性与适宜生长条件的前提下，在进行系统的繁育和种植实验研究的基础上，提出了藏茵陈的种植方法，采收并消毒种子，并提出了沙土育苗方法，使种子发芽率大于40％；集成研究了引种、驯化、繁育技术(包括：引种、驯化、套种、催芽、育苗、病虫害防治)等关键技术，幼苗发育整齐，育苗效率高，使得植株生长茂盛，产量高。通过对藏茵陈野生资源的保护抚育实现了藏茵陈质量的稳定可控，以及资源的充分、合理、可持续利用，得到的人工培育品与野生药材比较，其主要成分含量与野生药材相同，但单位面积苗产量却远远高于野生药材，经济价值成倍提高。

具体实施方式

下面对本发明所述的藏茵陈种植方法进行说明。

实施例1藏茵陈种子室内与室外萌发试验

室内培养皿萌发试验：在培养皿(直径90㎜)内置经沸水消毒的吸水纸，将种子放置于吸水纸上。分别采用用黑色塑料薄膜遮光和不遮光2种处理，比较光对种子萌芽的影响。

室内花盆内萌发试验：取直径25cm的花盆，装满经沸水消毒处理的腐殖质土，覆平，将种子均匀撒播于盆内。分别设置复土2cm与不复土直接播于土壤表面2种处理，对比种子萌芽情况。

室外小拱棚苗床播种育苗试验：将当年采收的川西獐牙菜种子直接撒播于腐殖土做成的苗床上，覆土厚1cm左右，再搭上小拱棚，经常浇水保湿，观察种子发芽和幼苗生长情况。

表1川西獐牙菜种子室内萌发试验结果

注：上表系川西獐牙菜种子室内播种出苗情况观察的结果。

表2川西獐牙菜种子室外小拱棚播种育苗试验结果

注：(1)播种量:10g；(2)播种种子粒数系用种子千粒重换算而得。

试验结果：试验结果表明，川西獐牙菜种子需要后熟，种子播种后需经175天～190天后才开始出苗；育苗基质对川西獐牙菜种子萌发有一定的影响,在腐质土内的出苗率比无土的培养皿内的出苗率高；光照对川西獐牙菜种子的萌发有一定的促进作用，在培养皿内遮光条件下的萌发率(23.6％)比不遮光的萌发率(31.3％)低；覆土对川西獐牙菜种子的萌发有一定的抑制作用，在花盆内不覆土的出苗率(62.3％)比花盆内覆土(47.3％)及室外苗床覆土(45.0％)均高。因此，在实际生产中，川西獐牙菜种子育苗的基质应选择腐质土，播种后不用覆土或浅覆土，加强浇水保湿、除草等管理。

实施例2选地对家种藏茵陈影响

在都兰试验示范地对比了大棚、苹果树林、山坡等林下及乔木林下种植的川西獐牙菜的萌发及长势情况，分别在不同环境的栽培样地内，随机选择10株，观测统计植株的生长情况，记录植株单株分枝数、单株年增加分枝数、枝高、单株地上部分干重量，并选择邻近栽培地的野生川西獐牙菜设点作对照。

表3都兰基地不同环境下家种及野生川西獐牙菜生长情况

注：(1)单株重量为单株植株地上部分枝叶的干重。(2)种植时间为2009年3月，观察时间为2010年。

从上表得知：家种川西獐牙菜的单株年新增分枝数比野生多，表明家种可以促进川西獐牙菜植株枝叶的萌发，提高产量；斜坡地种植川西獐牙菜的单株年新增分枝数(10.5枝)比平地麦地种植川西獐牙菜(6.5)多，斜坡地种植川西獐牙菜的分枝高度及单株干重也较高，说明斜坡地种植川西獐牙菜比平地要好；平地小麦地种植的川西獐牙菜的单株年新增分枝数(12.24枝)比苹果树下种植川西獐牙菜(6.5)多，苹果树下种植川西獐牙菜的分枝高度及单株干重也较高，表明遮阴较好的苹果树下种植川西獐牙菜比小麦地里要好。家种川西獐牙菜的分枝均为翌年新萌芽，而野生川西獐牙菜植株往年萌发的分枝，所以野生川西獐牙菜植株的株高及单株干重均比家种高。

实施例3种植藏茵陈与野生藏茵陈中抗肝炎有效成分含量在全草及不同部位的差异性比较分析

本实验以川西獐牙菜中6种主要成分—獐牙菜苦苷(swertiamarin,代号S₁)、龙胆苦苷(gentiopicroside,代号S₂)、芒果苷(mangiferin,代号S₃)、苦龙苷(amarogentin,代号S₄)、7-O-[α-L-吡喃鼠李糖-(12)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-[α-L-rhamnopyranosyl-(12)-β-D—xylopyranosyl]-1，8-dihydroxy-3-methoxyxanthoneXD-3,代号S₅)、7-O-β-D-吡喃木糖-1，8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-β-D-xylopyranosyl-l,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone代号S₆)为指标，采用反相高效液相色谱梯度洗脱方法对青海玉树及四川地区野生的川西獐牙菜和都兰县香日德地区种植的川西獐牙菜全草、根、茎、叶、花各部位进行了进行了3种药效成分的含量测定。同时对不同生长期的栽培川西獐牙菜进行了6种药效成分的含量测定。

1.实验部分

1.1.仪器与试药

LC—10AT_VP二元泵(岛津公司)；Rheodyne7725进样器(美国)；SPD—M10AVP二极管阵列检测器(岛津公司)；Class—VP液相色谱工作站(岛津公司)；Milli-Q超纯水装置。

甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯。水为重蒸水并经0.45μm滤膜过滤。对照品S₁购自中国药品生物制品检定所，批号110770－200907；对照品S₂及S₆为植化室孙洪发教授所赠，纯度均在96％以上。

1.2.标准品和样品的配制

标准品配制：精确称取S1、S2、S3、S4、S5各对照品约2mg，芒果苷对照品约1mg分别置于10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得浓度约为0.2mg/mL，0.1mg/ml的对照品溶液。

样品配制：分别取待测样品，置超微粉碎机中粉碎20min，精密称取0.5g，置100ml锥形瓶中，加甲醇20ml，置80℃水浴锅上回流2h，放冷至室温，过滤，滤液于25ml容量瓶中，用甲醇定容；摇匀后经C₁₈硅胶小柱做脱脂处理，即先用5ml蒸馏水活化小柱，即用5ml甲醇预先淋洗，再用10ml蒸馏水洗脱后，将样品提取液直接上柱，弃取初滤液，收集续滤液为供试品溶液。

1.3.色谱条件

色谱柱为KromasilC₁₈(250mm×4.60mm,5uμm)；流动相为甲醇-水-0.02％磷酸，梯度洗脱,0～50min，甲醇20％～80％；50min～55min，甲醇至100％；表4检测波长:260nm；柱温为室温。

表4梯度洗脱程序

1.4.方法学考察

精密度实验：精确吸取上述各对照品溶液，进样20μL，重复5次，根据所得峰面积值计算，测得5种药效成分峰面积的RSD见表2。

重复性实验：精密称定同一批样品，按供试品溶液制备方法分别制备5份供试品溶液，进行重复性实验,求得RSD值见表2。

稳定性实验：取上述供试品溶液，分别间隔2小时进样，每次20μl，重复5次，进行测定方法的稳定性实验,求得RSD值见表5。

表5六种药效成分的精密度、重复性、稳定性(RSD％)

标准曲线的绘制

依据待测样品含量范围，分别配制含有不同质量浓度的6种对照品溶液进行测定。以相应组分的色谱峰面积(Y)对其含量(X,μg)绘制标准曲线。并计算相关系数(见表6)。

表6六种药效成分的回归曲线、相关系数及线性范围

2.结果

2.1.以青海玉树及四川地区野生的川西獐牙菜和都兰香日德地区种植的川西獐牙菜为样品，分全草、根、茎、叶、花5个部位。样品采收期均为2010年9月中旬。实验用川西獐牙菜样品由中国科学院西北高原生物研究所鉴定。

在选定的色谱条件下测定样品，进样量为20μL，根据峰面积计算不同地区野生与栽培的川西獐牙菜全草、根、茎、叶、花各部位3种主要药效成分的含量。结果如表7所示。

表7样品测定结果(含量/％)

结果显示；不同地区的野生与栽培的川西獐牙菜中不同部位3种药效成分的含量分布基本一致。

野生种中3种药效成分均在花的部位含量最高，并且随根、茎、叶、花各部位其含量依次升高。种植种中的芒果苷的含量在茎、叶、花中均较高，其余2种成分的含量分布与野生种一致。

种植种中龙胆苦苷的含量明显高于野生种。

Claims

1.一种藏茵陈的种植方法，其特征在于，所述藏茵陈的种植方法包括以下步骤：

1)育苗：沙土与种子混拌育苗；

2.如权利要求1所述的种植方法，其特征在于，所述的种植方法还包括步骤5)采收种子，然后消毒并保存种子。

3.如权利要求1或2所述的种植方法，其特征在于，步骤1)中，步骤1)中，所述的育苗可采用以下方式进行：在拌种前30-40天，用种子体积8-10倍的细沙与种子混拌均匀，湿度以于握成团松开后即散为宜；然后把拌好的种子装在木箱内，埋在室外地势较高和较干燥的阴凉处，深度为35-45厘米。

4.如权利要求1或2所述的种植方法，其特征在于，步骤1)中，所述的育苗也可采用以下方式进行：在种植前3天，用浓度为100mg/kg的赤霉素水溶液浸种2小时，捞出装入布袋中用清水冲洗到无黄色为止，然后把种子袋浮水控净；再用3％硝酸钾液于室温条件下浸种3小时后用清水洗净，达到水无色为止，把种子袋的水控净后，按细沙或细土与种子20:1的体积比搅拌均匀后立刻拌种到大田。

5.如权利要求1或2所述的种植方法，其特征在于，步骤2)中，所述的选地是选择山坡、河滩地或阳坡地，土壤耕作层厚25-40㎝的壤土或砂质壤土，pH值为5～7、有机质2.5％以上，遮荫条件好或用搭棚遮荫，使照度不超过2000lux。

6.如权利要求1或2所述的种植方法，其特征在于，步骤2)中，整地分为2次进行；第一次于育苗期间，割去地面杂草及株高低于藏茵陈成株的小灌木，保留乔木和其他灌木，在整地时，翻耕20～30cm，除去留于地中的杂草根及小灌木树根；第二次于种植前，再次将杂草割除，翻耕20～30cm，整细土壤，将腐殖质土施于地表，每亩撒施1000-2000㎏腐熟的农家肥或有机肥作底肥。

7.如权利要求1所述的种植方法，其特征在于，步骤3)中，所述施肥分为提芽肥、促芽肥和补充施肥：

提芽肥于萌芽期前期和萌芽期追一次或两次；

促芽肥于花芽、腋芽抽生期施一次；

提芽肥或促芽肥：每亩农家肥1000kg/亩，或有机复合肥10～20kg/亩；

采收后的补施，每亩农家肥1000～2000kg或每亩有机复合肥20～30kg/亩。

8.如权利要求2所述的种植方法，其特征在于，步骤5)中，采收成熟种子后，还包括采用40目和60目的分样筛进行筛分，收集40～60目的种子。

9.如权利要求2或8所述的种植方法，其特征在于，步骤5)中，收集的种子进行消毒：用50％多菌灵可湿性粉剂或70％代森锰锌可湿性粉剂按种子重量的0.2-0.3％的比例进行拌种，还可以采用50％多菌灵可湿性粉剂600-800倍数液或70％代森锰锌可湿性粉剂500-800倍液，或75％百菌清可湿性粉剂800-1000倍液，在温度17-25℃下浸种消毒2-3小时，捞出后用清水冲洗药液，晾至种皮无水；然后在0-5℃下低温处保存种子。

10.一种藏茵陈育苗方法，其特征在于，所述的育苗可采用以下方式进行：在拌种前30-40天，用种子体积8-10倍的细沙与种子混拌均匀，湿度以于握成团松开后即散为宜；然后把拌好的种子装在木箱内，埋在室外地势较高和较干燥的阴凉处，深度为35-45厘米；

或者采用以下方式进行：在种植前3天，用浓度为100mg/kg的赤霉素水溶液浸种2小时，捞出装入布袋中用清水冲洗到无黄色为止，然后把种子袋浮水控净；再用3％硝酸钾液于室温条件下浸种3小时后用清水洗净，达到水无色为止，把种子袋的水控净后，按细沙或细土与种子20:1的体积比搅拌均匀后立刻拌种到大田。