CN105462809A - 核酸精制设备 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种核酸精制设备,即使在长期保管的情况下,也能够防止一个水系液体层被其他水系液体层的成分污染。核酸精制设备(5)的特征在于,将清洗容器(200)与溶出容器(300)接合而形成用于供核酸移动的流路(2),清洗容器具有与第一流路(2a)分离配置且收纳第一流路与第二流路(2b)的连结部(250)的外周壁(236),溶出容器具有多个凸缘(600),它们配置于第二流路的周围且与外周壁的内壁(236a)接触,多个凸缘配置于溶出容器的插入外周壁的内部的部分(310),由多个凸缘中的相邻的两个凸缘和外周壁划分出来的一个空间(700)与隔着相邻的两个凸缘的一方而跟一个空间相邻的其他空间连通。

Description

核酸精制设备
技术领域
本发明涉及核酸精制设备。
背景技术
在生物化学领域中,确立了PCR(PolymeraseChainReaction:聚合酶链式反应)技术。最近,PCR法中的扩增精度、检测灵敏度得到提高,从而能够对极微量的检体(DNA等)进行扩增来进行检测·解析。PCR是通过对含有作为扩增对象的核酸(靶核酸)和试剂的溶液(反应液)实施热循环而使靶核酸扩增的方法。作为PCR的热循环,一般是以两个梯度或三个梯度的温度来实施热循环的方法。
另一方面,对医疗领域中的流行性感冒等感染症的诊断而言,现状是使用免疫层析等的简易检查试剂盒成为主流。但是,在这样的简易检查中,存在精度不足的情况,希望将能够期待更高的检查精度的PCR应用于感染症的诊断。
近几年,作为在PCR法等中使用的设备,提出如下设备,即在毛细管中交替地层叠水系液体层与非水溶性的凝胶层,使附着有核酸的磁性体粒子通过,由此来进行核酸的精制(参照专利文献1)。但是,这样的设备在长期保管的情况下,存在水系液体层的成分通过凝胶层缓缓扩散而导致一个水系液体层被其他水系液体层的成分污染的情况。
专利文献1:国际公开第2012/086243号
发明内容
本发明的几个实施方式所涉及的目的之一在于,提供一种即使在长期保管的情况下也防止一个水系液体层被其他水系液体层的成分污染的核酸精制设备。
应用例1
本发明所涉及的核酸精制设备构成为,
将清洗容器与溶出容器接合而形成用于供核酸移动的流路,其中,清洗容器在第一流路密封收纳有清洗液和不与该清洗液混合的流体,溶出容器在第二流路密封收纳有溶出液和不与该溶出液混合的流体,
上述清洗液是对吸附有核酸的核酸结合性固相载体进行清洗的液体,
上述溶出液是使核酸从核酸结合性固相载体脱离的液体,
上述清洗容器具有外周壁,该外周壁与上述第一流路分离配置且收纳上述第一流路与上述第二流路的连结部,
上述溶出容器具有多个凸缘,上述凸缘配置于上述第二流路的周围且与上述外周壁的内壁接触,
上述多个凸缘配置于上述溶出容器的插入于上述外周壁的内部的部分,
由上述多个凸缘中的相邻的两个凸缘和上述外周壁划分出来的一个空间,与隔着上述相邻的两个凸缘的一方而跟上述一个空间相邻的其他空间连通。
根据本应用例所涉及的精制设备,在将清洗容器与溶出容器接合之前,清洗容器与溶出容器分别对内容物进行密封收纳,因此能够防止溶出液被清洗液污染。另外,根据本应用例所涉及的精制设备,即使在清洗容器与溶出容器接合之后,也能够利用不跟清洗液和溶出液混合的流体来防止清洗液与溶出液混合,因此,能够防止溶出液因组装后立即使用而被清洗液污染。而且,根据本应用例所涉及的精制设备,在将清洗容器与溶出容器接合时(将清洗容器插入溶出容器时),例如既能够使外周壁内的空气(大气)逸散至外部,又能够抑制清洗容器内的流体、溶出容器内的流体泄漏至核酸精制设备的外部。而且,根据本应用例所涉及的核酸精制设备,多个凸缘能够发挥作为用于将清洗容器插入溶出容器的引导件的作用。
应用例2
在本发明所涉及的核酸精制设备中,也可以构成为,
上述溶出容器具有密封凸缘,该密封凸缘配置于上述第二流路的周围且与上述外周壁的内壁接触,
上述多个凸缘配置为比上述密封凸缘靠上述连结部侧,
上述密封凸缘与上述外周壁的内壁密封。
根据本应用例所涉及的核酸精制设备,在将清洗容器与溶出容器接合时,能够更可靠地抑制清洗容器内的流体、溶出容器内的流体泄漏至核酸精制设备的外部。
应用例3
在本发明所涉及的核酸精制设备中,也可以构成为,
在上述多个凸缘设置有切口部,
上述一个空间通过上述切口部与上述其他空间连通。
根据本应用例所涉及的核酸精制设备,在将清洗容器与溶出容器接合时,例如能够使外周壁内的空气通过切口部逸散至核酸精制设备的外部。
应用例4
在本发明所涉及的核酸精制设备中,也可以构成为,
上述多个凸缘的外周部除了上述切口部之外与上述外周壁的内壁接触。
根据本应用例所涉及的核酸精制设备,多个凸缘能够更可靠地发挥作为用于将清洗容器插入溶出容器的引导件的作用。
应用例5
本发明所涉及的核酸精制设备构成为,
将清洗容器与溶出容器接合而形成用于供核酸移动的流路,其中,清洗容器密封收纳清洗液和不与该清洗液混合的流体,溶出容器密封收纳溶出液和不与该溶出液混合的流体,
上述清洗液是对吸附有核酸的核酸结合性固相载体进行清洗的液体,
上述溶出液是使核酸从核酸结合性固相载体脱离的液体,
在上述清洗容器与上述溶出容器的连接部设置有相互连通的多个圆环状的空间。
根据本应用例所涉及的精制设备,在将清洗容器与溶出容器接合之前,清洗容器与溶出容器分别对内容物进行密封收纳,因此能够防止溶出液被清洗液污染。另外,根据本应用例所涉及的精制设备,即使在清洗容器与溶出容器接合之后,也能够利用不跟清洗液和溶出液混合的流体来防止清洗液与溶出液混合,因此,能够防止溶出液因组装后立即使用而被清洗液污染。而且,根据本应用例所涉及的精制设备,在将清洗容器与溶出容器接合时(将清洗容器插入溶出容器时),例如既能够使外周壁内的空气(大气)逸散至外部,又能够抑制清洗容器内的流体、溶出容器内的流体泄漏至核酸精制设备的外部。
应用例6
本发明所涉及的核酸精制设备构成为,
将第一容器与第二容器接合而形成用于供核酸移动的流路,其中,第一容器在第一流路密封收纳有第一液体和不与该第一液体混合的流体,第二容器在第二流路密封收纳有第二液体和不与该第二液体混合的流体,
上述第一容器具有与上述第一流路分离配置且收纳上述第一流路与上述第二流路的连结部的外周壁,
上述第二容器具有多个凸缘,上述凸缘配置于上述第二流路的周围且与上述外周壁的内壁接触,
上述多个凸缘配置于上述溶出容器的插入于上述外周壁的内部的部分,
由上述多个凸缘中的相邻的两个凸缘和上述外周壁划分的一个空间,与隔着上述相邻的两个凸缘的一方而跟上述一个空间相邻的其他空间连通。
根据本应用例所涉及的核酸精制设备,即使在长期保管的情况下,也能够防止一个水系液体层被其他水系液体层的成分污染。
附图说明
图1是实施方式所涉及的容器组装体1的主视图。
图2是实施方式所涉及的容器组装体1的侧视图。
图3是实施方式所涉及的容器组装体1的俯视图。
图4是实施方式所涉及的容器组装体1的立体图。
图5是实施方式所涉及的容器组装体1的图3中的A-A剖视图。
图6是实施方式所涉及的容器组装体1的图3中的C-C剖视图。
图7是对实施方式所涉及的容器组装体1的操作进行说明的示意图。
图8是对实施方式所涉及的容器组装体1的操作进行说明的示意图。
图9是PCR装置50的示意结构图。
图10是PCR装置50的框图。
图11是第三清洗容器230的立体图。
图12是第三清洗容器230的纵剖视图。
图13是溶出容器300的纵剖视图。
图14是第三清洗容器230以及溶出容器300的纵剖视图。
图15是溶出容器300的立体图。
图16是溶出容器300的主视图。
图17是溶出容器300的剖视图。
图18是第三清洗容器230以及溶出容器300的纵剖视图。
图19是实施方式所涉及的容器组装体1的图3中的C-C剖视图。
具体实施方式
以下,使用附图对本发明的优选实施方式详细地进行说明。此外,以下所说明的实施方式并不是不合理地限定权利要求书中记载的本发明的内容。另外,未必下文中说明的结构全部都是本发明的必需构成要件。
本发明所涉及的核酸精制设备的特征在于,将清洗容器与溶出容器接合而形成用于供物质(核酸)移动的流路,其中,清洗容器密封收纳清洗液和不与该清洗液混合的流体,溶出容器密封收纳溶出液和不与该溶出液混合的流体,上述清洗液是对吸附有核酸的物质结合性固相载体(核酸结合性固相载体)进行清洗的液体,上述溶出液是使核酸从核酸结合性固相载体脱离的液体,上述清洗容器具有与上述清洗容器的流路分离配置且收纳上述清洗容器的流路与上述溶出容器的流路的连结部的外周壁,上述溶出容器具有多个凸缘,上述凸缘被配置为与上述外周壁的内壁接触,被上述多个凸缘中的相邻的凸缘和上述外周壁划分的一个空间与隔着上述相邻的凸缘的一方跟上述一个空间相邻的其他空间连通。
这里,作为生物体相关物质、即与生物体相关的物质,包括核酸(DNA、RNA)、多肽、蛋白质、多糖类等生物高分子、蛋白质、酶、肽、核苷酸、氨基酸、维生素等出自生物体的低分子有机化合物、以及无机化合物等。在以下实施方式中,作为生物体相关物质使用核酸进行说明。
另外,物质结合性固相载体是能够通过吸附生物体相关物质即可逆的物理结合来进行保持的物质。物质结合性固相载体的形状优选为微粒子,但并不局限于此,也可以是微小的纤维、网状体,并不特别限定。物质结合性固相载体保持吸附着生物体相关物质的状态而在组装体内向所希望的方向移动,因此优选具有磁性。在以下实施方式中,作为物质结合性固相载体使用吸附核酸的磁性粒子30(参照后述的图7、图8)进行说明。
清洗液12、14、16(参照后述的图7、图8)是用于对吸附着生物体相关物质的物质结合性固相载体进行清洗的液体。因此,通过利用清洗液对物质结合性固相载体进行清洗,既能够使物质结合性固相载体更稳定地对吸附于物质结合性固相载体的生物体相关物质进行吸附,又能够除去其他夹杂物等。
不与清洗液混合的流体是在清洗容器内不与清洗液混合的流体,能够与清洗液相分离。不与清洗液混合的流体是相对于清洗液呈现惰性的物质,也包括空气等气体。在清洗液为水系液体的情况下,不与清洗液混合的流体能够使用不与该清洗液混合的例如油、油凝胶等。油凝胶是利用凝胶化剂将液体状的油凝胶化的产物。此外,在本实施方式中,在仅称为“油”的情况下,凝胶化了的物质除外。在以下的实施方式中,作为不与清洗液混合的流体使用油20、22、24、26(参照后述的图7、图8)进行说明。
溶出液32(参照后述的图7、图8)使生物体相关物质从物质结合性固相载体脱离并溶出至溶出液。溶出液例如能够使用水、缓冲液。
不与溶出液混合的流体是在溶出容器内不与溶出液混合的流体,能够与溶出液相分离。不与溶出液混合的流体是相对于溶出液呈现惰性的物质。在以下实施方式中,作为不与清洗液混合的流体使用油26(参照后述的图7、图8)进行说明。
1.容器组装体的概要
首先,使用图1~图4对本实施方式所涉及的容器组装体1的概要进行说明。图1是实施方式所涉及的容器组装体1(以下,有时称为盒(cartridge))的主视图。图2是实施方式所涉及的容器组装体1的侧视图。图3是实施方式所涉及的容器组装体1的俯视图。图4是实施方式所涉及的容器组装体1的立体图。此外,在图1~图3中的容器组装体1的状态为正立状态下进行说明。
容器组装体1包括吸附容器100、清洗容器200、溶出容器300、以及反应容器400。容器组装体1是形成从吸附容器100连通至反应容器400的未图示的流路的容器。对容器组装体1的流路而言,一方的端部被盖110封闭,另一方的端部被底部402封闭。
容器组装体1是进行如下处理的容器:即在吸附容器100内使核酸与未图示的磁性粒子结合,并在磁性粒子在清洗容器200内移动期间对核酸进行精制,从而在溶出容器300内进行使核酸溶出至未图示的溶出液液滴中的前处理;在反应容器400内相对于含有核酸的溶出液的液滴进行聚合酶反应的热循环处理。
容器组装体1的材质并不特别限定,例如可以是玻璃、高分子、金属等。若容器组装体1的材质选择玻璃、高分子等在可见光中具有透明性的材质,则能够从容器组装体1的外部观察内部(空洞内),因此更加优选。另外,若容器组装体1的材质选择磁力可透过的物质、非磁性体,则在使未图示的磁性粒子通过容器组装体1的情况下等,因从容器组装体1的外部施加磁力而使进行上述情况变得容易,因此优选。容器组装体1的材质例如可以是聚丙烯树脂。
吸附容器100具有在内部收纳未图示的吸附液的圆筒状的注射器部120、插入注射器部120的内部的可动式的按压件亦即柱塞部130、以及固定于柱塞部130的一方的端部的盖110。吸附容器100通过使盖110相对于注射器部120移动而使柱塞部130在注射器部120的内表面滑动,从而能够将收纳于注射器部120内的未图示的吸附液向清洗容器200挤出。此外,稍后对吸附液进行叙述。
清洗容器200可以通过将第一清洗容器~第三清洗容器210、220、230接合并组装而得到。第一清洗容器~第三清洗容器210、220、230分别在内部具有被未图示的油层分隔的一个以上的清洗液层。而且,因将第一清洗容器~第三清洗容器210、220、230接合,清洗容器200在内部具有被未图示的多个油层划分的多个清洗液层。在本实施方式的清洗容器200中,对使用由第一清洗容器~第三清洗容器210、220、230构成的三个清洗容器的例子进行了说明,但并不局限于此,可以根据清洗液层的数量来适当地进行增减。此外,稍后对清洗液进行叙述。
溶出容器300接合于清洗容器200的第三清洗容器230,并能够将溶出液维持为液柱的形状地收纳在内部。这里,“液柱”是指特定的液体在流路内占据一个区域的情况下的液体。更具体而言,特定的液体的液柱是指在流路的长边方向上实质只有该特定的液体占据内部的柱状的液体,表示流路内部的一定的空间被液体的液柱划分出来的状态。这里的实质这一表达是指在液柱的周围、即流路的内壁也可以存在少量(例如薄膜状)的其他物质(液体等)。此外,稍后对溶出液进行叙述。
核酸精制设备5包括吸附容器100、清洗容器200、以及溶出容器300。
反应容器400是接合于溶出容器300且接受被从溶出容器300挤出的液体的容器,并且是热循环处理时对包含检体的溶出液的液滴进行收纳的容器。另外,反应容器400还收纳未图示的试剂。此外,稍后对试剂进行叙述。
2.容器组装体的详细构造
接下来,使用图5以及图6对容器组装体1的详细构造进行说明。图5是实施方式所涉及的容器组装体1的图3中的A-A剖视图。图6是实施方式所涉及的容器组装体1的图3中的C-C剖视图。此外,实际上,容器组装体1在填充有清洗液等内容物的状态下被组装,但在图5以及图6中,由于是对容器组装体1的构造进行说明,所以省略内容物的记载。
2-1.吸附容器
对吸附容器100而言,从注射器部120的一方的开口端部插入有柱塞部130,而在柱塞部130的开口端部插入有盖110。盖110在其中央具有通气部112,从而在对柱塞部130进行操作时能够利用通气部112抑制柱塞部130的内压的变化。
柱塞部130是在注射器部120的内周面进行滑动的近似圆筒状的按压件,具有供盖110插入的开口端部、从与该开口端部对置的底部沿注射器部120的长边方向延伸的棒状部132、以及棒状部132的前端的前端部134。棒状部132从柱塞部130的底部的中央突出,在棒状部132的周围形成有贯通孔,从而柱塞部130内与注射器部内120连通。
注射器部120构成容器组装体1的流路2的一部分,具有收纳柱塞部130的大径部、内径比该大径部小的小径部、内径从大径部向小径部缩径的缩径部、位于该小径部的前端的吸附插入部122、以及覆盖吸附插入部122的周围的圆筒状的吸附盖部126。成为容器组装体1的流路2的一部分的大径部、小径部以及吸附插入部122为大致圆筒状。
在提供给操作者时,柱塞部130的前端部134将注射器部120的小径部密封而将大径部和缩径部与小径部分隔,从而形成两个区域。
注射器部120的吸附插入部122插入清洗容器200中的第一清洗容器210的一方的开口端部亦即第一接受部214内而与之嵌合,由此将注射器部120与第一清洗容器210接合。吸附插入部122的外周面与第一接受部214的内周面紧贴,从而防止内容物亦即液体向外部泄漏。
2-2.清洗容器
清洗容器200构成容器组装体1的流路2的一部分,是由第一清洗容器~第三清洗容器210、220、230构成的组装体。第一清洗容器~第三清洗容器210、220、230的基本构造相同,因此,对第一清洗容器210的构造进行说明,而省略对第二、第三清洗容器220、230的说明。
第一清洗容器210是沿容器组装体1的长边方向延伸的近似圆筒状,具有形成于一方的开口端部的第一插入部212、形成于另一方的开口端部的第一接受部214、以及覆盖第一插入部212的周围的圆筒状的第一盖部216。
第一插入部212的外径与第二接受部224的内径大致相同。另外,第一接受部214的内径与吸附插入部122的外径也大致相同。
将第一清洗容器210的第一插入部212插入第二清洗容器220的第二接受部224而与之嵌合,由此,第一插入部212的外周与第二接受部224的内周紧贴而密封,并且将第一清洗容器210与第二清洗容器220接合。同样地,将第一清洗容器~第三清洗容器210、220、230连结而形成清洗容器200。这里“密封”是指封闭为至少使收纳于容器等的液体或气体不会泄漏至外部,也可以包括对液体或气体从外部向内部侵入进行封闭的情况。
2-3.溶出容器
溶出容器300是沿容器组装体1的长边方向延伸的近似圆筒状,其构成容器组装体1的流路2的一部分。溶出容器300具有形成于一方的开口端部的溶出插入部302、以及形成于另一方的开口端部的溶出接受部304。
溶出接受部304的内径与第三清洗容器230的第三插入部232的外径大致相同。将第三插入部232插入溶出接受部304而与之嵌合,由此第三插入部232的外周与溶出接受部304的内周紧贴而密封,并且将第三清洗容器230与溶出容器300接合。
2-4.反应容器
反应容器400是沿容器组装体1的长边方向延伸的大致圆筒状,其构成容器组装体1的流路2的一部分。反应容器400具有形成于开口端部的反应接受部404、形成于另一方的封闭的端部的底部402、以及覆盖反应接受部404的存储部406。
反应接受部404的内径与溶出容器300的溶出插入部302的外径大致相同。将溶出插入部302插入反应接受部404而与之嵌合,由此将溶出容器300与反应容器400接合。
在反应接受部404的周围设置具有规定的空间的存储部406。存储部406具有能够对因柱塞部130的移动而从反应容器400溢出的液体进行收纳的容积。
3.容器组装体的内容物以及容器组装体的操作
接下来,使用图7(a)对容器组装体1的内容物进行说明,使用图7以及图8对容器组装体1的操作进行说明。图7是对实施方式所涉及的容器组装体1的操作进行说明的示意图。图8是对实施方式所涉及的容器组装体1的操作进行说明的示意图。此外,在图7以及图8中,对内容物的状态进行说明,因此在流路2中表现出各容器而省略外形状、接合构造。
3-1.内容物
图7(a)表示图1的状态下的流路2内的内容物的状态。流路2内的内容物从盖110侧朝向反应容器400依次为吸附液10、第一油20、第一清洗液12、第二油22、第二清洗液14、第三油24、磁性粒子30、第三油24、第三清洗液16、第四油26、溶出液32、第四油26、以及试剂34。
对流路2的与容器组装体1的长边方向正交的面而言,剖面积较大的部分(流路2的较粗部分)与剖面积较小的部分(流路2的较细部分)交替配置。对第一油~第四油20、22、24、26以及溶出液32而言,该各液的一部分或全部收纳于流路2的较细部分。流路2的较细部分的剖面积具有在邻接的相互不混合的液体(也可以是流体。以下相同)的界面配置于流路2的较细部分的情况下能够稳定地维持该界面的面积。因此,能够利用配置于流路2的较细部分的液体稳定地维持该液体与配置于该液体的上下的其他液体的配置关系。另外,即使在配置于流路2的较细部分的液体与配置于流路2的较粗部分的其他液体的界面形成于流路2的较粗部分的情况下,该界面因强烈的冲击而紊乱,也可以通过放置至静止的状态而在规定的位置稳定地形成界面。
流路2的较细部分形成于吸附插入部122、第一插入部212、第二插入部222、第三插入部232、以及溶出插入部302的内侧,并在溶出容器300中超过溶出插入部302向上方延伸。此外,收纳于流路2的较细部分的液体即使在组装容器之前也被稳定地维持。
3-1-1.油
第一油~第四油20、22、24、26均由油构成,在图7的状态下,它们在各油的前后的液体之间作为液柱而存在。由于第一油~第四油20、22、24、26作为液柱而存在,所以在各油的前后邻接的液体被选择相互相分离的液体即不混合的液体。另外,构成第一油~第四油20、22、24、26的油也可以是相互不同的种类的油。作为能够在它们中使用的油,例如,可以举出从二甲基硅油等硅油系油、链烷烃系油、矿物油以及它们的混合物中选择的一种。
3-1-2.吸附液
吸附液10是指成为使核酸吸附于磁性粒子30的场所的液体,例如是包含离液物质的水溶液。作为吸附液10,例如可以使用5M胍硫氰酸盐、2%TritonX-100、50mMTris-HCl(pH=7.2)。吸附液10只要含有离液物质就不特别限定,但也可以以细胞薄膜的破坏或使细胞中所包含的蛋白质变性为目的而使吸附液10含有表面活性剂。作为该表面活性剂,只要是通常用于从细胞等提取核酸的表面活性剂就不特别限定,具体而言,能够举出Triton-X等Triton系表面活性剂、Tween20等Tween系表面活性剂之类的非离子性表面活性剂、以及N-月桂酰肌氨酸钠(SDS)等阴离子性表面活性剂,但特别优选以使非离子性表面活性剂成为0.1~2%的范围的方式进行使用。而且,优选含有2-巯基乙醇或二硫苏糖醇等还原剂。溶解液可以是缓冲液,但优选为pH=6~8的中性。考虑到这些,具体而言,优选含有3M~7M的胍盐、0%~5%的非离子性表面活性剂、0mM~0.2mM的EDTA、以及0M~0.2M的还原剂等。
这里,离液物质只要具有在水溶液中产生离液离子(离子半径大的1价的阴离子)、使疏水性分子的水溶性增加的作用,并有助于核酸的向固相载体的吸附,就不特别限定。具体而言,可举出盐酸胍盐、碘化钠、高氯酸钠等,这些物质中,优选蛋白质变质作用较强的胍硫氰酸盐或盐酸胍盐。这些离液物质的标准浓度因各物质而不同,例如在使用胍硫氰酸盐的情况下,优选在3M~5.5M的范围内使用,在使用盐酸胍盐的情况下,优选在5M以上使用。
离液物质存在于水溶液中,由此,水溶液中的核酸以吸附于固体的方式存在比以被水分子包围的方式存在,在热力学上更为有利,因而吸附于磁性粒子30的表面。
3-1-3.清洗液
第一清洗液~第三清洗液12、14、16对核酸所结合的磁性粒子30进行清洗。
第一清洗液12是与第一油20以及第二油22均相分离的液体。优选第一清洗液12为水或低盐浓度水溶液,在为低盐浓度水溶液的情况下,优选为缓冲液。低盐浓度水溶液的盐浓度优选为100mM以下,更优选为50mM以下,最优选为10mM以下。另外,第一清洗液12可以含有如上所述的表面活性剂,pH并不特别限定。用于使第一清洗液12形成为缓冲液的盐并不特别限定,但优选Tris、HEPES、PIPES、磷酸等盐。并且,优选第一清洗液12包含不阻碍核酸向载体的吸附、逆转录反应、PCR反应等的量的乙醇。在这种情况下,乙醇浓度并不特别限定。
此外,也可以使第一清洗液12含有离液物质。例如,若使第一清洗液12含有盐酸胍盐,则既能够维持或强化吸附于磁性粒子30等的核酸的吸附,又能够清洗磁性粒子30等。
第二清洗液14是与第二油22以及第三油24均相分离的液体。第二清洗液14可以是基本上与第一清洗液12相同或不同的组成,优选事实上不含有离液物质的溶液。用于不使离液物质被带入之后的溶液。作为第二清洗液14,例如可以由5mMTris盐酸缓冲液构成。如上所述,第二清洗液14优选包含醇。
第三清洗液16是与第三油24以及第四油26均相分离的液体。第三清洗液16可以是基本与第二清洗液14相同或不同的组成,但不含有醇。另外,第三清洗液16为了防止将醇带入反应容器400而可以含有柠檬酸。
3-1-4.磁性粒子
磁性粒子30是吸附核酸的粒子,为了能够利用位于容器组装体1之外的磁铁3而使之移动,优选具有较强的磁性。磁性粒子30,例如可以是硅珠或涂覆了硅涂层的粒子。磁性粒子30也可以优选涂覆了硅涂层的粒子。
3-1-5.溶出液
溶出液32是与第四油26相分离的液体,其在溶出容器300中的流路2内作为夹在第四油26、26之间的液柱而存在。溶出液32是使吸附于磁性粒子30的核酸从磁性粒子30溶出至溶出液32中的液体。另外,溶出液32通过加热而在第四油26中成为液滴。溶出液32例如能够使用纯水。这里,“液滴”是被自由表面包围的液体。
3-1-6.试剂
试剂34包含反应所需要的成分。试剂34在反应容器400中的反应为PCR的情况下,为了对溶出至溶出液的液滴36(参照图8)中的靶核酸(DNA)进行扩增,能够含有DNA聚合酶等酶和引物(核酸)、以及用于检测扩增产物的荧光探针中的至少一个,这里,引物、酶以及荧光探针全部含有。试剂34与第四油26不相溶,若与包含核酸的溶出液32的液滴36接触,则溶解而发生反应,其在反应容器400内的流路2的重力方向上的最下部的区域以固体状态存在。例如,试剂34可以使用冷冻干燥(freezedry)了的试剂。
3-2.容器组装体的操作
作为容器组装体1的操作的一个例子,使用图7以及图8进行说明。
容器组装体1的操作包括如下工序:
(A)将吸附容器100、清洗容器200、溶出容器300以及反应容器400接合来组装容器组装体1的工序;
(B)将含有核酸的检体导入收纳有吸附液10的吸附容器100的工序;
(C)从第二清洗容器220向吸附容器100移动磁性粒子30的工序;
(D)摆动吸附容器100使核酸吸附于磁性粒子30的工序;
(E)使吸附着核酸的磁性粒子30从吸附容器100依次通过第一油20、第一清洗液12、第二油22、第二清洗液14、第三油24、第三清洗液16以及第四油26向溶出容器300移动的工序;
(F)在溶出容器300内,使核酸从磁性粒子30溶出至溶出液32的工序;以及
(G)使包含核酸的液滴与反应容器400内的试剂34接触的工序。
以下,依次针对各工序进行说明。
(A)组装容器组装体1的工序
如图7(a)所示,组装的工序是以对吸附容器100至反应容器400进行接合而形成从吸附容器100连续至反应容器400的流路2的方式来组装容器组装体1。此外,在图7(a)中,吸附容器100安装有盖110,但将盖110安装于柱塞部130是在(B)工序之后进行的。
更具体而言,向反应容器400的反应接受部404插入溶出容器300的溶出插入部302,向溶出容器300的溶出接受部304插入第三清洗容器230的第三插入部232,向第三清洗容器230的第三接受部234插入第二清洗容器220的第二插入部222,向第二清洗容器220的第二接受部224插入第一清洗容器210的第一插入部212,向第一清洗容器210的第一接受部214插入吸附容器100的吸附插入部122。
(B)导入检体的工序
导入的工序以如下方式进行:例如将附着有检体的棉棒从吸附容器100的安装有盖110的开口插入吸附液10中,并将该棉棒浸渍在吸附液10中。更具体而言,将棉棒从吸附容器100的位于插入注射器部120状态下的柱塞部130的一方的端部的开口插入。接下来,将棉棒从吸附容器100取出,并安装盖110。这是图7(a)的状态。另外,检体也可以利用移液管等向吸附容器100导入。另外,若检体为糊状、固体状,则例如可以利用匙、镊子等以使其附着于柱塞部130的内壁或投入柱塞部130的内壁的方式向吸附容器100导入。如图7(a)所示,注射器部120以及柱塞部130之中填充吸附液10至中间,在供盖110安装的开口侧残留有空间。
检体中包含成为靶的核酸。以下,有时将其简称为靶核酸。靶核酸例如是DNA、RNA(DNA:DeoxyribonucleicAcid和/或RNA:RibonucleicAsid)。靶核酸被从检体提取出来并溶出至后述的溶出液32后,例如被用作PCR的模板。作为检体,可以举出血液、鼻腔粘液、口腔粘薄膜、其他各种生物体样本等。
(C)移动磁性粒子的工序
如图7(a)所示,移动磁性粒子30的工序以如下方式进行:在对夹在第二清洗容器220的第三油24、24之间且以液柱状存在的磁性粒子30施加配置于容器外部的磁铁3的磁力的状态下,使磁铁3朝向吸附容器100移动。
配合该磁性粒子30的移动或比此更早地使盖110以及柱塞部130向从注射器部120抽出的方向移动来使吸附液10内的检体从柱塞部130内向注射器部120内移动。通过该柱塞部130的移动,被前端部134堵塞的流路2与吸附液10连通。
磁性粒子30随着磁铁3的移动在流路2内上升,如图7(b)所示,到达存在检体的吸附液10内。
(D)使核酸吸附于磁性粒子的工序
使核酸吸附的工序通过使吸附容器100摆动而进行。吸附容器100的开口被盖110密封至吸附液10不会泄露,因此该工序能够高效地进行。通过该工序,靶核酸因离液剂的作用而吸附于磁性粒子30的表面。在该工序中,在磁性粒子30的表面还可以吸附靶核酸以外的核酸、蛋白质。
作为使吸附容器100摆动的方法,可以使用公知的漩涡振荡器等装置,也可以通过操作者的手振荡混合。另外,也可以利用磁性粒子30的磁性,边从外部施加磁场边摆动吸附容器100。
(E)移动吸附着核酸的磁性粒子的工序
移动吸附着核酸的磁性粒子30的工序通过边从吸附容器100、清洗容器200以及溶出容器300的外部施加磁铁3的磁力边移动磁铁3来使磁性粒子30在吸附液10、第一油~第四油20、22、24、26以及第一清洗液~第三清洗液12、14、16中移动。
磁铁3例如可以使用永磁铁、电磁铁等。另外,磁铁3可以通过操作者的手进行移动,也可以利用机械装置等进行移动。磁性粒子30具有被磁力吸引的性质,因此利用该性质来改变磁铁3相对于吸附容器100、清洗容器200以及溶出容器300的配置,使该磁铁3在流路2内移动。磁性粒子30通过各清洗液时的速度并不特别限定,可以在同一清洗液内沿着流路2的长边方向往复地移动。此外,在使磁性粒子30以外的粒子等在管内移动时,例如能够利用重力、电位差来进行移动。
(F)使核酸溶出的工序
使核酸溶出的工序在溶出容器300内,使核酸从磁性粒子30溶出至溶出液的液滴36。图7中的溶出液32在溶出容器300的流路的较细部分作为液柱而存在,在如上述那样使磁性粒子30移动期间,加热反应容器400,内容液膨胀,从而如图8所示,作为液滴36而在溶出容器300内向上方移动。而且,如图8(a)所示,若磁性粒子30到达溶出容器300的溶出液的液滴36,则吸附于磁性粒子30的靶核酸因溶出液的作用而溶出至溶出液的液滴36内。
(G)与试剂34接触的工序
与试剂34接触的工序使包含核酸的液滴36与位于反应容器400内的最下部的试剂34接触。具体而言,如图8(b)所示,推动盖110、并利用柱塞部130的前端部134来下压第一油20,从而将施加有磁铁3的磁力的磁性粒子30维持在规定位置,并在这种状态下使溶出了靶核酸的溶出液的液滴36向反应容器400移动,与位于反应容器400的最下部的试剂34接触。液滴36接触的试剂34溶解并与溶出液中的靶核酸混合,从而例如能够实施使用热循环的PCR。
4.PCR装置
使用图9和图10对使用容器组装体1进行核酸溶出处理和PCR的PCR装置50进行说明。图9是PCR装置50的示意结构图。图10是PCR装置50的框图。
PCR装置50具有旋转机构60、磁铁移动机构70、按压机构80、荧光测定器55、以及控制器90。
4-1.旋转机构
旋转机构60包括旋转用马达66和加热器65,其通过驱动旋转用马达66使容器组装体1以及加热器65旋转。旋转机构60使容器组装体1和加热器65旋转而上下反转,由此包含靶核酸的液滴在反应容器400的流路内移动,进行热循环处理。
加热器65包括未图示的多个加热器,例如可以包括溶出用、高温用以及低温用的加热器。溶出用加热器对容器组装体1的液柱状的溶出液进行加热,促进靶核酸从磁性粒子向溶出液的溶出。高温用加热器将反应容器400的流路的上游侧的液体加热至比低温用加热器更高的温度。低温用加热器对反应容器的流路的底部402进行加热。利用高温用加热器与低温用加热器,能够在反应容器400的流路内的液体形成温度梯度。在加热器65设置有温度控制装置,该温度控制装置能够根据来自控制器90的指令将容器组装体1内的液体设定为适于处理的温度。
加热器65具有将反应容器400的底部402的外壁露出的开口。荧光测定器55从该开口测定溶出液的液滴的亮度。
4-2.磁铁移动机构
磁铁移动机构70是使磁铁3移动的机构。磁铁移动机构70将容器组装体1内的磁性粒子吸引至磁铁3,并且通过使磁铁3移动来使磁性粒子在容器组装体1内移动。磁铁移动机构70具有一对磁铁3、升降机构以及摆动机构。
摆动机构是使一对磁铁3在图9的左右方向(也可以是图9的前后方向)上摆动的机构。一对磁铁3以从左右方向夹着安装于PCR装置50的容器组装体1的方式配置(参照图7、图8),能够在与容器组装体1的流路正交的方向(这里为图9的左右方向)上使磁性粒子与磁铁3的距离接近。因此,若使一对磁铁3在左右方向上如箭头那样摆动,则容器组装体1内的磁性粒子配合磁铁3的动作而在左右方向上移动。升降机构使磁铁3在上下方向上移动,从而能够配合磁铁3的移动而使磁性粒子在图9的上下方向上移动。
4-3.按压机构
按压机构80是推动容器组装体1的柱塞部的机构,柱塞部被按压机构80推动,由此溶出容器300内的液滴被挤出至反应容器400内,从而能够在反应容器400内实施PCR。
在图9中,以按压机构80配置于正立的容器组装体1的上方的方式示出按压机构80,但按压机构80按动柱塞部的方向也可以不是图9中的上下方向,而例如是相对于上下方向倾斜45度的方向。这样一来,容易将按压机构80配置在不与磁铁移动机构70干涉的位置。
4-4.荧光测定器
荧光测定器55是对反应容器400的液滴的亮度进行测定的测定器。荧光测定器55配置在与反应容器400的底部402对置的位置。此外,荧光测定器55为了能够应对多重PCR(multiplexPCR),优选能够检测多个波长域的亮度。
4-5.控制器
控制器90是对PCR装置50进行控制的控制部。控制器90例如具有CPU等处理器、以及ROM、RAM等存储装置。在存储装置存储有各种程序以及数据。另外,存储装置提供展开程序的区域。处理器通过执行存储于存储装置的程序来实现各种处理。
例如,控制器90对旋转用马达66进行控制而使容器组装体1旋转至规定的旋转位置。在旋转机构60设置有未图示的旋转位置传感器,控制器90根据旋转位置传感器的检测结果使旋转用马达66驱动/停止。
另外,控制器90对加热器65进行控制,其对加热器进行开启·关闭控制而使该加热器发热,将容器组装体1内的液体加热至规定的温度。
另外,控制器90对磁铁移动机构70进行控制,从而使磁铁3在上下方向上移动,并根据未图示的位置传感器的检测结果使磁铁3在图9的左右方向上摆动。
另外,控制器90控制荧光测定器55来对反应容器400内的液滴的亮度进行测定。该测定结果保存于控制器90的未图示的存储装置。
将容器组装体1安装于该PCR装置50,能够实施上述3-2的(C)~(G)的工序,进而能够实施PCR。
5.核酸精制设备的详细构造
使用图11~图17对本实施方式所涉及的核酸精制设备5进行说明。图11是第三清洗容器230的立体图。图12是第三清洗容器230的纵剖视图。图13是溶出容器300的纵剖视图。图14是第三清洗容器230以及溶出容器300的纵剖视图。图15是溶出容器300的立体图。图16是溶出容器300的主视图。图17是溶出容器300的剖视图。
此外,图11以及图12表示构成核酸精制设备5之前的(与第二清洗容器220以及溶出容器300接合之前的状态的)第三清洗容器230。图13表示构成核酸精制设备5之前的状态的(与第三清洗容器230以及反应容器400接合之前的状态的)溶出容器300。另外,图14表示第三清洗容器230以及溶出容器300接合的状态。另外,在图14中,省略清洗液等内容物。
另外,图17(a)是图16中的A-A剖视图,图17(b)是图16中的B-B剖视图,图17(c)是图16中的C-C剖视图,图17(d)是图16中的D-D剖视图,图17(e)是图16中的E-E剖视图,图17(f)是图16中的F-F剖视图。
如图11~图17所示,核酸精制设备5包括清洗容器200、以及溶出容器300。这里,作为清洗容器,对作为清洗容器的最小构成单位亦即一个第三清洗容器230进行说明。
5-1.清洗容器
参照图11以及图12对构成核酸精制设备5之前的清洗容器进行说明。清洗容器亦即第三清洗容器(第一容器)230在第三清洗容器230中的流路2(第一流路2a)密封收纳有清洗液亦即第三清洗液(第一液体)16、以及不与该第三清洗液16混合的流体亦即第三油24和第四油26。
第三清洗容器230在第三清洗容器230中的形成流路2(第一流路2a)的部分的一个端部具有第三插入部232,在另一端部具有第三接受部234。形成于第三清洗容器230的内侧的流路2(第一流路2a)从第三插入部232贯通至第三接受部234。流路2的外径构成为随着从第三接受部234朝向第三插入部232而逐渐变小。
第三插入部232为大致圆筒状,具有横剖面为圆形的外壁232a。
第三清洗容器230具有第三盖部(外周壁)236,该第三盖部236形成于第三插入部232的周围,并且从外壁232a的上部朝向下方开放。
第三盖部236的上端与第三插入部232的外壁232a连接,下端超过第三插入部232而延伸。第三盖部236的内壁236a朝向下方扩径并具有环状的阶部236b。阶部236b位于比第三插入部232的下端稍靠下方的位置,且在其表面粘贴有薄膜232c。
第三接受部234为大致圆筒状,具有横剖面为圆形的内壁234a。内壁234a朝向上方扩径并具有管状的阶部234b。阶部234b位于第三接受部234的上端附近,且在其表面粘贴有薄膜234c。此外,在图11中,薄膜234c被省略。
第三清洗容器230以在其流路2内从第三接受部234侧依次收纳有第三油24、第三清洗液16、以及第四油26的状态而通过薄膜232c、234c密封上下的开口。第三清洗液16与第三油24在界面16a不混合,第三清洗液16与第四油26在界面16b不混合。因此,对于密封收纳于第三清洗容器230内的第三油24、第三清洗液16、以及第四油26而言,将第三清洗液16保持为液柱状。
5-2.溶出容器
参照图13对构成核酸精制设备5之前的溶出容器进行说明。溶出容器(第二容器)300在溶出容器300中的流路2(第二流路2b)密封收纳有溶出液(第二液体)32、以及不与溶出液32混合的流体亦即第四油26。
溶出容器300的形状基本与第三清洗容器230相同。
溶出容器300在溶出容器300中的形成流路2(第二流路2b)的部分的一个端部具有溶出插入部302,在另一端部具有溶出接受部304。形成于溶出容器300的内侧的流路2从溶出插入部302贯通至溶出接受部304。流路2的外径构成为随着从溶出接受部304朝向溶出插入部302而逐渐变小。
溶出插入部302大致为圆筒状,具有横剖面为圆形的外壁302a。
溶出容器300具有溶出盖部306,该溶出盖部306形成于溶出插入部302的周围,并且从外壁302a的上部朝向下方开放。
溶出盖部306的上端与溶出插入部302的外壁302a连接,下端超过溶出插入部302而延伸。溶出盖部306的内壁306a朝向下方扩径并具有环状的阶部306b。阶部306b位于比溶出插入部302的下端稍靠下方的位置,且在其表面粘贴有薄膜302c。
溶出接受部304大致为圆筒状,具有横剖面为圆形的内壁304a。内壁304a朝向上方扩径并具有管状的阶部304b。阶部304b位于溶出接受部304的上端附近,且在其表面粘贴有薄膜304c。
溶出容器300以在其流路2内从溶出接受部304侧依次收纳有第四油26、溶出液32、以及第四油26的状态而通过薄膜302c、304c密封上下的开口。溶出液32与上侧的第四油26在界面32a不混合,溶出液32与下侧的第四油26在界面32b不混合。因此,对于密封收纳于溶出容器300内的第四油26以及溶出液32,将溶出液32保持为液柱状。
第三清洗容器230与溶出容器300的接合以如下方式进行:第三插入部232以及溶出接受部304刺破薄膜232c以及薄膜304c,从而将第三插入部232插入溶出接受部304。因此,在第三插入部232以及溶出接受部304刺破薄膜232c和薄膜304c之后,才将第三清洗容器230内的流路2与溶出容器300内的流路2连通。
此外,虽然未图示,但在第一清洗容器210以及第二清洗容器220也粘贴有薄膜,刺破该薄膜使清洗容器210、220、230接合,从而能够得到清洗容器200。另外,在吸附容器100也粘贴有薄膜,刺破该薄膜使吸附容器100、清洗容器200、以及溶出容器300接合,从而能够得到核酸精制设备5。另外,在反应容器400也粘贴有薄膜,刺破该薄膜使吸附容器100、清洗容器200、溶出容器300、以及反应容器400接合,从而能够得到容器组装体1。
上述那样的组装第三清洗容器230(清洗容器200)以及溶出容器300而得到的核酸精制设备5(例如参照图1以及图2)通过将密封收纳内容物的清洗容器200与密封收纳内容物的溶出容器300接合而形成用于供核酸移动的流路2。因此,在核酸精制设备5中,在将清洗容器200与溶出容器300接合之前能够防止溶出液32被第三清洗液16污染。另外,在核酸精制设备5中,即使在第三清洗容器230与溶出容器300接合之后,也能够利用不跟第三清洗液16和溶出液32混合的第四油26来防止第三清洗液16与溶出液32混合,因此,能够防止溶出液32因在组装后立即使用而被第三清洗液16污染。
5-3.接合构造
参照图14~图17对第三清洗容器230(清洗容器200)与溶出容器300的接合构造进行说明。
如上所述,清洗容器200的第三清洗容器230具有第三盖部(外周壁)236。如图14所示,第三盖部236配置为与清洗容器200的流路2(第一流路2a)分离。第三盖部236对清洗容器200的流路2(第一流路2a)与溶出容器300的流路2(第二流路2b)的连结部250进行收纳。更具体而言,第三盖部236对第三清洗容器230的第三插入部232与溶出容器300的溶出接受部304进行收纳。在核酸精制设备5中,向在溶出接受部304插入第三插入部232(向溶出容器300插入清洗容器200),从而将清洗容器200与溶出容器300接合。
溶出容器300具有凸缘600。凸缘600以与第三盖部236的内壁236a接触的方式配置。凸缘600配置于溶出容器300的流路2(第二流路2b)的周围。凸缘600配置于溶出容器300的筒状部310。筒状部310是溶出容器300的形成溶出容器300的流路2(第一流路2a)的部分,是插入第三盖部236的内部的部分。凸缘600从筒状部310朝向外侧突出。
如图15以及图17所示,在凸缘600设置有切口部610。切口部610在流路2的长边方向(容器组装体1的长边方向)上贯通凸缘600。除了切口部610以外,凸缘600的外周部602与第三盖部236的整个面接触。即,凸缘600的外周部602因切口部610而具有不与第三盖部236接触的部分。借助切口部610在凸缘600与第三盖部236之间设置间隙。即,凸缘600以在其与第三盖部236之间的一部分具有间隙的方式与第三盖部236的内壁236a接触。凸缘600具有在圆环状(环状)的部件设置有切口的形状。
溶出容器300具有多个凸缘600,在图示的例子中,具有五个凸缘600(第一凸缘600a、第二凸缘600b、第三凸缘600c、第四凸缘600d、第五凸缘600e)。凸缘600a、600b、600c、600d、600e依次沿着清洗容器200的插入方向(即沿着流路2的长边方向、或沿着从吸附容器100朝向反应容器400的方向)排列设置。在图示的例子中,凸缘600a、600b间的距离比其他相邻的凸缘间的距离(例如凸缘600b、600c间的距离)更长。此外,凸缘600的数量并不特别限定。
在多个凸缘600的每一个均设置有切口部610。在图17所示的例子中,虽然在各个凸缘600a、600b、600c、600d、600e设置有三个切口部610,但切口部610的数量并不特别限定。只要借助切口部610能够在凸缘600与第三盖部236之间形成间隙,切口部610的平面形状(从清洗容器200的插入方向观察的形状)就并不特别限定。
从清洗容器200的插入方向观察,设置于第一凸缘600a的切口部610与设置于第二凸缘600b的切口部610配置于不重叠的位置。即,第一凸缘600a与第三盖部236之间的间隙(因切口部610而形成的间隙)以及第二凸缘600b与第三盖部236之间的间隙配置于不重叠的位置。
设置于第一凸缘600a的切口部610例如与设置于第三凸缘600c的切口部610、以及设置于第五凸缘600d的切口部610重叠。设置于第二凸缘600b的切口部610例如与设置于第四凸缘600d的切口部610重叠。
如图17所示,从清洗容器200的插入方向观察,设置于第一凸缘600a的切口部610与设置于第二凸缘600b的切口部610隔着溶出容器300的流路2而设置于对置的位置。从清洗容器200的插入方向观察,例如,第一凸缘600a与第二凸缘600b成为180度旋转对称的关系。
如图14所示,利用多个凸缘600中的相邻的两个凸缘600与第三盖部236而划分出多个空间700。多个空间700中的一个空间700与隔着相邻的两个凸缘的一方而跟一个空间700相邻的其他空间700通过切口部610连通。具体而言,由凸缘600a、600b、第三盖部236、以及筒状部310划分出来的第一空间700通过设置于第二凸缘600b的切口部610而与由凸缘600b、600c、第三盖部236、以及筒状部310划分出来的第二空间700连通。这样一来,在清洗容器200与溶出容器300的连接部350(被第三盖部236覆盖的部分)设置有利用切口部610而相互连通的多个圆环状的空间700。
溶出容器300具有与第三盖部236的内壁236a接触的密封凸缘620。密封凸缘620配置于溶出容器300的流路2(第二流路2b)的周围。多个凸缘600配置于比密封凸缘620靠连结部250侧的位置。即,密封凸缘620配置于比第五凸缘600e靠反应容器400侧的位置。在密封凸缘620不设置切口部。密封凸缘620将第三盖部236的内壁236a密封。密封凸缘620的外周部622例如整个面与第三盖部236的内壁236a接触。如图17所示,密封凸缘620的平面形状为圆环状。此外,为了方便,在图15中省略密封凸缘620的图示。
如图14所示,密封凸缘620划分出空间710。更具体而言,空间710由第五凸缘600e、密封凸缘620、第三盖部236、以及筒状部310划分出来。空间710与由凸缘600d、600e、第三盖部236、以及筒状部310划分出来的空间700连通。
此外,在上述内容中,对相邻的空间710因在凸缘600的外周部602设置有切口部610而连通的例子进行了说明,但例如也可以不在凸缘600的外周部602设置切口部610,而利用设置于凸缘600的贯通孔(未图示)将相邻的空间710连通。另外,也可以利用设置于第三盖部236的内壁236a的槽(未图示)将相邻的空间710连通。只要能够像这样地将相邻的空间710连通,凸缘600的形状以及第三盖部236的形状就不特别限定。
根据核酸精制设备5,溶出容器300具有与第三盖部(外周壁)236的内壁236a接触的多个凸缘600,由多个凸缘600中相邻的两个凸缘600与第三盖部236划分出来的一个空间700与隔着相邻的两个凸缘的一方而跟一个空间700相邻的其他空间700连通。因此,在核酸精制设备5中,在将清洗容器200与溶出容器300接合时(将清洗容器200的第三插入部232插入溶出容器300的溶出接受部304时),例如既能够使第三盖部236内的空气(大气)逸散至外部,又能够抑制清洗容器200内的第四油26、溶出容器300内的第四油26的一部分泄漏至核酸精制设备5的外部。更具体而言,在核酸精制设备5中,相邻的空间700连通,由此例如能够使第三盖部236内的空气逸散至外部。因此,能够减少清洗容器200插入溶出容器300时的插入负荷。而且,利用多个凸缘600例如能够在溶出容器300内等的第四油26的一部分顺着溶出容器300的外壁到达核酸精制设备5的外部之前,将清洗容器200与溶出容器300接合。即,利用多个凸缘600例如能够延长溶出容器300内等的第四油26的一部分顺着溶出容器300的外壁到达密封凸缘620之前的路径。由此,能够抑制第四油26泄漏至外部。
而且,如图18所示,根据核酸精制设备5,在清洗容器200与溶出容器300接合时,边使清洗容器200与多个凸缘600接触边将清洗容器200插入溶出容器300,从而能够稳定地将清洗容器200插入溶出容器300。即,多个凸缘600能够具有作为用于将清洗容器200插入溶出容器300的引导件的功能。此外,图18是将第三清洗容器230以及溶出容器300接合时的第三清洗容器230以及溶出容器300的纵剖视图。
根据核酸精制设备5,溶出容器300具有与第三盖部236的内壁236a接触的密封凸缘620,多个凸缘600配置于比密封凸缘620靠连结部250侧的位置,从而密封凸缘620与第三盖部236的内壁236a密封。因此,在核酸精制设备5中,在将清洗容器200与溶出容器300接合时,能够利用密封凸缘620更可靠地抑制溶出容器300内等的第四油26的一部分泄漏至核酸精制设备5的外部。
根据核酸精制设备5,在多个凸缘600设置有切口部610,且一个空间700通过切口部610与其他空间700连通。因此,在核酸精制设备5中,在将清洗容器200与溶出容器300接合时,例如能够使第三盖部236内的空气通过切口部610逸散至核酸精制设备5的外部。而且,在将清洗容器200与溶出容器300接合时,例如溶出容器300内等的第四油26的一部分能够利用切口部610中的毛细现象而更可靠地从一个空间700向其他空间700(位于一个空间700的下方的空间700)移动。
根据核酸精制设备5,多个凸缘600的外周部602除了切口部610之外与第三盖部236的内壁236a接触。因此,在核酸精制设备5中,多个凸缘600能够更可靠地发挥作为用于将清洗容器200插入溶出容器300的引导件的作用。
根据核酸精制设备5,从清洗容器200的插入方向观察,设置于第一凸缘600a的切口部610与设置于第二凸缘600b的切口部610配置于不重叠的位置。更具体而言,设置于第一凸缘600a的切口部610与设置于第二凸缘600b的切口部610隔着溶出容器的流路2而设置于对置的位置。因此,在核酸精制设备5中,在将清洗容器200与溶出容器300接合时,例如能够进一步延长溶出容器300内等的第四油26的一部分顺着溶出容器300的外壁到达密封凸缘620之前的路径。
根据核酸精制设备5,设置于各个凸缘600a、600b、600c、600d、600e的切口部610设置有多个。因此,在核酸精制设备5中,在将清洗容器200与溶出容器300接合时,例如能够使第三盖部236内的空气更可靠地通过切口部610逸散至核酸精制设备5的外部。例如在设置于第一凸缘600a的切口部610为一个的情况下,在第四油26与该切口部610触碰的瞬间,该切口部610成为第四油26的流路,从而存在无法使空气通过切口部610逸散至核酸精制设备5的外部的情况。
此外,在核酸精制设备5中,如图19所示,清洗容器210、220、230也与溶出容器300相同,具有凸缘600以及密封凸缘620。清洗容器210、220、230的凸缘600以及密封凸缘620也能够具有与溶出容器300的凸缘600和密封凸缘620相同的功能。
另外,在上述内容中,对包括清洗容器的例子进行了说明,但例如在仅靠使核酸吸附于磁性粒子来除去夹杂物的情况下,本发明所涉及的核酸精制设备也可以不包括清洗容器,而将吸附容器与溶出容器连结起来。
本发明并非限定于上述实施方式,还能够进行各种变形。例如,本发明包括与实施方式中说明的结构实质相同的结构(例如,功能、方法以及结果相同的结构、或目的以及效果相同的结构)。另外,本发明包括替换了实施方式中说明的结构的非本质部分的结构。另外,本发明包括起到与实施方式中说明的结构相同的作用效果的结构或能够实现相同的目的的结构。另外,本发明包括对实施方式中说明的结构附加了公知技术的结构。
附图标记说明:
1…容器组装体;2…流路;2a…第一流路;2b…第二流路;3…磁铁;5…核酸精制设备;10…吸附液;12…第一清洗液;14…第二清洗液;16…第三清洗液;20…第一油;22…第二油;24…第三油;26…第四油;30…磁性粒子;32…溶出液;34…试剂;36…液滴;50…PCR装置;55…荧光测定器;60…旋转机构;65…加热器;66…旋转用马达;70…磁铁移动机构;80…按压机构;90…控制器;100…吸附容器;110…盖;112…通气部;120…注射器部;120b…凸缘部;120c…薄膜;122…吸附插入部;122a…外壁;122c…薄膜;126…吸附盖部;126a…内壁;126b…阶部;130…柱塞部;132…棒状部;134…前端部;200…清洗容器;210…第一清洗容器;212…第一插入部;214…第一接受部;216…第一盖部;220…第二清洗容器;222…第二插入部;224…第二接受部;226…第二盖部;230…第三清洗容器;232…第三插入部;232a…外壁;232c…薄膜;234…第三接受部;234a…内壁;234b…阶部;234c…薄膜;236…第三盖部;236a…内壁;236b…阶部;250…连结部;300…溶出容器;302…溶出插入部;302a…外壁;302c…薄膜;304…溶出接受部;304a…内壁;304b…阶部;304c…薄膜;306…溶出盖部;306a…内壁;306b…阶部;310…筒状部;350…连接部;400…反应容器;402…底部;404…反应接受部;406…存储部;600…凸缘;600a…第一凸缘;600b…第二凸缘;600c…第三凸缘;600d…第四凸缘;600e…第五凸缘;602…外周部;610…切口部;620…密封凸缘;622…外周部;700、710…空间。

Claims (6)

1.一种核酸精制设备,其特征在于,
将清洗容器与溶出容器接合而形成用于供核酸移动的流路,其中,所述清洗容器在第一流路密封收纳有清洗液和不与该清洗液混合的流体,所述溶出容器在第二流路密封收纳有溶出液和不与该溶出液混合的流体,
所述清洗液是对吸附有核酸的核酸结合性固相载体进行清洗的液体,
所述溶出液是使核酸从核酸结合性固相载体脱离的液体,
所述清洗容器具有与所述第一流路分离配置且能够收纳所述第一流路与所述第二流路的连结部的外周壁,
所述溶出容器具有多个凸缘,所述凸缘配置于所述第二流路的周围,且在所述清洗容器与所述溶出容器接合时与所述外周壁的内壁接触,
所述多个凸缘配置于所述溶出容器的插入于所述外周壁的内部的部分,
由所述多个凸缘中的相邻的两个凸缘和所述外周壁划分出来的一个空间,与隔着所述相邻的两个凸缘的一方而跟所述一个空间相邻的其他空间连通。
2.根据权利要求1所述的核酸精制设备,其特征在于,
所述溶出容器具有密封凸缘,该密封凸缘配置于所述第二流路的周围且与所述外周壁的内壁接触,
所述多个凸缘配置为比所述密封凸缘靠所述连结部侧,
所述密封凸缘与所述外周壁的内壁密封。
3.根据权利要求1或2所述的核酸精制设备,其特征在于,
在所述多个凸缘设置有切口部,
所述一个空间通过所述切口部与所述其他空间连通。
4.根据权利要求3所述的核酸精制设备,其特征在于,
所述多个凸缘的外周部除了所述切口部之外与所述外周壁的内壁接触。
5.一种核酸精制设备,其特征在于,
将清洗容器与溶出容器接合而形成用于供核酸移动的流路,其中,所述清洗容器密封收纳清洗液和不与该清洗液混合的流体,所述溶出容器密封收纳溶出液和不与该溶出液混合的流体,
所述清洗液是对吸附有核酸的核酸结合性固相载体进行清洗的液体,
所述溶出液是使核酸从核酸结合性固相载体脱离的液体,
在所述清洗容器与所述溶出容器的连接部设置有相互连通的多个圆环状的空间。
6.一种核酸精制设备,其特征在于,
将第一容器与第二容器接合而形成用于供核酸移动的流路,其中,所述第一容器在第一流路密封收纳有第一液体和不与该第一液体混合的流体,所述第二容器在第二流路密封收纳有第二液体和不与该第二液体混合的流体,
所述第一容器具有与所述第一流路分离配置且能够收纳所述第一流路与所述第二流路的连结部的外周壁,
所述第二容器具有多个凸缘,所述凸缘配置于所述第二流路的周围,且在所述第一容器与所述第二容器接合时与所述外周壁的内壁接触,
所述多个凸缘配置于所述第二容器的插入于所述外周壁的内部的部分,
由所述多个凸缘中的相邻的两个凸缘和所述外周壁划分出来的一个空间,与隔着所述相邻的两个凸缘的一方而跟所述一个空间相邻的其他空间连通。
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