CN105388056B - 一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法 - Google Patents
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Abstract
一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，它涉及一种制备巨型磷脂囊泡阵列的方法。本发明的目的是要解决现有方法制备的巨型磷脂囊泡不能进行单一尺寸的控制的问题。方法：一、清洗电极；二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗；三、制备磷脂薄膜阵列；四、制备图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；五、密闭制备装置的组装；六、巨型磷脂囊泡阵列的形成；得到巨型磷脂囊泡阵列。本发明制备的巨型磷脂囊泡阵列可广泛应用于高通量磷脂膜曲率、细胞融合、物质传输及单分子反应等方面的研究与应用。本发明可获得一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种制备巨型磷脂囊泡阵列的方法。
背景技术
制备巨型磷脂囊泡的方法主要有乙醇注入法、钙融合法、冷冻干燥法、挤压法、超声分散法、电形成法等，但这些方法制备的巨型磷脂囊泡尺寸分布范围较为广泛，单一尺寸较难控制。目前，尺寸单一可控的巨型磷脂囊泡的制备还罕见报道，关于应用点面电极制备巨型磷脂囊泡阵列也未见报道。
发明内容
本发明的目的是要解决现有方法制备的巨型磷脂囊泡不能进行单一尺寸的控制的问题，而提供一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法。
一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，是按以下步骤完成的：
一、清洗电极：首先使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗，再使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗，再使用氮气吹干，再使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗；得到清洗后的ITO电极；将钨针电极浸泡在物质的量浓度为2mol/L的盐酸中3h～6h，再用蒸馏水进行冲洗3次～6次，再使用氮气吹干，得到清洗后的钨针电极；
二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗：首先使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用氮气吹干，得到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章；
三、制备磷脂薄膜阵列：将清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的带有图案微结构的一面朝上放置，再将浓度为1mg/mL～25mg/mL的磷脂溶液滴加到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构上，再将图案微结构上滴有磷脂溶液的聚二甲基硅氧烷印章放入密闭容器中，磷脂溶液浸润10min～50min，吸去聚二甲基硅氧烷印章图案微结构上剩余的磷脂溶液，再使用氮气吹干，得到图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤三中所述的磷脂溶液为磷脂溶解到无水乙醇中得到；
四、制备图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极：将聚二甲基硅氧烷印章浸有磷脂的图案微结构压印在步骤一中得到的清洗后的ITO电极表面上5min～60min，然后揭去聚二甲基硅氧烷印章，再在室温下自然干燥，得到图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
步骤四中所述的压印时每1cm2聚二甲基硅氧烷印章上受力为0.05N～0.1N；
五、密闭制备装置的组装：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与聚四氟乙烯矩形框和PDMS盖片组成密闭制备装置，清洗后的钨针电极垂直通过PDMS盖片，且清洗后的钨针电极进入到密闭制备装置内部中；再在密闭制备装置中注入蒸馏水；
步骤五中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离为250μm～1000μm；
步骤五中所述的清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离为1200μm～1800μm；
六、巨型磷脂囊泡阵列的形成：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为2V～10V、频率为10Hz～1000Hz和时间为60min～300min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；
步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为10μm～90μm。
本发明的原理及优点：
一、本发明的目的是提供一种基于微接触印刷技术，并利用点面电极产生的电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，首先采用微接触印刷技术，在聚二甲基硅氧烷印章上浸润磷脂溶液，将作为“墨水”的磷脂转移到ITO电极表面，得到磷脂薄膜阵列，然后图案化的磷脂薄膜阵列在点面电极产生的电场的作用下实现了巨型磷脂泡囊阵列的制备；通过聚二甲基硅氧烷印章的微结构对磷脂薄膜阵列的形状和尺寸进行控制，成功实现了单一尺寸可控的巨型磷脂囊泡的制备，可获得单分散性良好的巨型磷脂囊泡阵列，且省略了普通巨型磷脂囊泡阵列制备中进行囊泡固定的繁琐过程，本发明具有低能耗、经济环保、简单高效、反应条件温和、巨型磷脂囊泡阵列尺寸单一可控、高通量的优点；
二、本发明利用点面电极和带有不同图案和尺寸的聚二甲基硅氧烷印章印章，基于微接触印刷技术和电形成方法，实现在一定交流电压范围、一定时间范围内制备巨型磷脂囊泡阵列，本发明制备的巨型磷脂囊泡具有良好的形态，尺寸单一可控，巨型磷脂囊泡阵列分布范围广，较大范围内囊泡阵列清晰可见，囊泡单分散性良好；
三、本发明制备的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为10μm～90μm；
四、本发明制备的巨型磷脂囊泡阵列可广泛应用于高通量磷脂膜曲率、细胞融合、物质传输及单分子反应等方面的研究与应用。
本发明可获得一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法。
附图说明
图1为实施例一步骤三中制备磷脂薄膜阵列过程的示意图，图1中1为清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章，2为磷脂溶液，3为图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章，4为清洗后的ITO电极，5为图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
图2为实施例一步骤五组装的密闭制备装置的结构示意图，图2中1为图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极，2为清洗后的钨针电极，3为聚四氟乙烯矩形框，4为PDMS盖片，5为信号发生器，A为清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离，B为图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离；
图3为实施例一制备的巨型磷脂囊泡阵列的荧光显微镜图片。
具体实施方式
具体实施方式一：本实施方式是一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法是按以下步骤完成的：
一、清洗电极：首先使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗，再使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗，再使用氮气吹干，再使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗；得到清洗后的ITO电极；将钨针电极浸泡在物质的量浓度为2mol/L的盐酸中3h～6h，再用蒸馏水进行冲洗3次～6次，再使用氮气吹干，得到清洗后的钨针电极；
二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗：首先使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用氮气吹干，得到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章；
三、制备磷脂薄膜阵列：将清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的带有图案微结构的一面朝上放置，再将浓度为1mg/mL～25mg/mL的磷脂溶液滴加到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构上，再将图案微结构上滴有磷脂溶液的聚二甲基硅氧烷印章放入密闭容器中，磷脂溶液浸润10min～50min，吸去聚二甲基硅氧烷印章图案微结构上剩余的磷脂溶液，再使用氮气吹干，得到图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤三中所述的磷脂溶液为磷脂溶解到无水乙醇中得到；
四、制备图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极：将聚二甲基硅氧烷印章浸有磷脂的图案微结构压印在步骤一中得到的清洗后的ITO电极表面上5min～60min，然后揭去聚二甲基硅氧烷印章，再在室温下自然干燥，得到图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
步骤四中所述的压印时每1cm2聚二甲基硅氧烷印章上受力为0.05N～0.1N；
五、密闭制备装置的组装：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与聚四氟乙烯矩形框和PDMS盖片组成密闭制备装置，清洗后的钨针电极垂直通过PDMS盖片，且清洗后的钨针电极进入到密闭制备装置内部中；再在密闭制备装置中注入蒸馏水；
步骤五中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离为250μm～1000μm；
步骤五中所述的清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离为1200μm～1800μm；
六、巨型磷脂囊泡阵列的形成：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为2V～10V、频率为10Hz～1000Hz和时间为60min～300min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；
步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为10μm～90μm。
本实施方式的原理及优点：
一、本实施方式的目的是提供一种基于微接触印刷技术，并利用点面电极产生的电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，首先采用微接触印刷技术，在聚二甲基硅氧烷印章上浸润磷脂溶液，将作为“墨水”的磷脂转移到ITO电极表面，得到磷脂薄膜阵列，然后图案化的磷脂薄膜阵列在点面电极产生的电场的作用下实现了巨型磷脂泡囊阵列的制备；通过聚二甲基硅氧烷印章的微结构对磷脂薄膜阵列的形状和尺寸进行控制，成功实现了单一尺寸可控的巨型磷脂囊泡的制备，可获得单分散性良好的巨型磷脂囊泡阵列，且省略了普通巨型磷脂囊泡阵列制备中进行囊泡固定的繁琐过程，本实施方式具有低能耗、经济环保、简单高效、反应条件温和、巨型磷脂囊泡阵列尺寸单一可控、高通量的优点；
二、本实施方式利用点面电极和带有不同图案和尺寸的聚二甲基硅氧烷印章印章，基于微接触印刷技术和电形成方法，实现在一定交流电压范围、一定时间范围内制备巨型磷脂囊泡阵列，本实施方式制备的巨型磷脂囊泡具有良好的形态，尺寸单一可控，巨型磷脂囊泡阵列分布范围广，较大范围内囊泡阵列清晰可见，囊泡单分散性良好；
三、本实施方式制备的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为10μm～90μm；
四、本实施方式制备的巨型磷脂囊泡阵列可广泛应用于高通量磷脂膜曲率、细胞融合、物质传输及单分子反应等方面的研究与应用。
本实施方式可获得一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一的不同点是：步骤一中所述的使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗的次数为2次～3次，每次超声清洗的时间为5min～20min，超声功率为40W～80W。其他与具体实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二的不同点是：步骤一中所述的使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗的次数为2次～3次，每次超声清洗的时间为5min～20min，超声功率为40W～80W。其他与具体实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一的不同点是：步骤一中所述的使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗的时间为10s～45s，功率为40W～80W；步骤二中所述的使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为5min～30min，超声清洗的功率为40W～80W。其他与具体实施方式一至三相同。
具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至四之一的不同点是：步骤三中所述的清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构为阵列的边长为50μm的正方形、阵列的直径为20μm的圆形或阵列的边长为87μm的正方形。其他与具体实施方式一至四相同。
具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至五之一的不同点是：步骤二中所述的使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为5min～30min，超声清洗的功率为40W～80W。其他与具体实施方式一至五相同。
具体实施方式七：本实施方式与具体实施方式一至六之一的不同点是：步骤五中所述的密闭制备装置的尺寸为17mm×8mm×2mm；所述的密闭制备装置中注入蒸馏水的量为290μL。其他与具体实施方式一至六相同。
具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式一至七之一的不同点是：步骤六中将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为2.5V、频率为10Hz和时间为90min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为21.21μm。其他与具体实施方式一至七相同。
具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式一至八之一的不同点是：步骤六中将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为3.5V、频率为10Hz和时间为120min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为59.94μm。其他与具体实施方式一至八相同。
具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式一至九之一的不同点是：步骤六中将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为5V、频率为10Hz和时间为265min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为79.76μm。其他与具体实施方式一至九相同。
采用以下实施例验证本发明的有益效果：
实施例一：一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法是按以下步骤完成的：
一、清洗电极：首先使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗，再使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗，再使用氮气吹干，再使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗；得到清洗后的ITO电极；将钨针电极浸泡在物质的量浓度为2mol/L的盐酸中3h，再用蒸馏水进行冲洗4次，再使用氮气吹干，得到清洗后的钨针电极；
步骤一中所述的使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗的次数为2次，每次超声清洗的时间为20min，超声功率为40W；
步骤一中所述的使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗的次数为2次，每次超声清洗的时间为20min，超声功率为40W；
步骤一中所述的使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗的时间为20s，功率为40W；
二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗：首先使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用氮气吹干，得到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤二中所述的使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为15min，超声清洗的功率为40W；
步骤二中所述的使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为15min，超声清洗的功率为40W；
三、制备磷脂薄膜阵列：将清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的带有图案微结构的一面朝上放置，再将浓度为5mg/mL的磷脂溶液滴加到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构上，再将图案微结构上滴有磷脂溶液的聚二甲基硅氧烷印章放入密闭容器中，磷脂溶液浸润20min，吸去聚二甲基硅氧烷印章图案微结构上剩余的磷脂溶液，再使用氮气吹干，得到图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤三中所述的清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构为为阵列的直径为20μm的圆形；
步骤三中所述的磷脂溶液为磷脂溶解到无水乙醇中得到；
四、制备图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极：将聚二甲基硅氧烷印章浸有磷脂的图案微结构压印在步骤一中得到的清洗后的ITO电极表面上15min，然后揭去聚二甲基硅氧烷印章，再在室温下自然干燥，得到图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
步骤四中所述的压印时每1cm2聚二甲基硅氧烷印章上受力为0.06N；
步骤四中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极为带有阵列的直径为20μm的圆形磷脂薄膜阵列；
五、密闭制备装置的组装：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与聚四氟乙烯矩形框和PDMS盖片组成密闭制备装置，清洗后的钨针电极垂直通过PDMS盖片，且清洗后的钨针电极进入到密闭制备装置内部中；再在密闭制备装置中注入蒸馏水；
步骤五中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离为340μm；
步骤五中所述的清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离为1660μm；
步骤五中所述的密闭制备装置的尺寸为17mm×8mm×2mm；所述的密闭制备装置中注入蒸馏水的量为290μL；
六、巨型磷脂囊泡阵列的形成：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为2.5V、频率为10Hz和时间为90min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；
步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为21.21μm。
实施例二：一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法是按以下步骤完成的：
一、清洗电极：首先使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗，再使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗，再使用氮气吹干，再使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗；得到清洗后的ITO电极；将钨针电极浸泡在物质的量浓度为2mol/L的盐酸中3h，再用蒸馏水进行冲洗4次，再使用氮气吹干，得到清洗后的钨针电极；
步骤一中所述的使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗的次数为2次，每次超声清洗的时间为15min，超声功率为60W；
步骤一中所述的使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗的次数为2次，每次超声清洗的时间为15min，超声功率为60W；
步骤一中所述的使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗的时间为30s，功率为60W；
二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗：首先使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用氮气吹干，得到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤二中所述的使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为20min，超声清洗的功率为60W；
步骤二中所述的使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为20min，超声清洗的功率为60W；
三、制备磷脂薄膜阵列：将清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的带有图案微结构的一面朝上放置，再将浓度为1mg/mL的磷脂溶液滴加到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构上，再将图案微结构上滴有磷脂溶液的聚二甲基硅氧烷印章放入密闭容器中，磷脂溶液浸润40min，吸去聚二甲基硅氧烷印章图案微结构上剩余的磷脂溶液，再使用氮气吹干，得到图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤三中所述的清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构为为阵列的边长为50μm的正方形；
步骤三中所述的磷脂溶液为磷脂溶解到无水乙醇中得到；
四、制备图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极：将聚二甲基硅氧烷印章浸有磷脂的图案微结构压印在步骤一中得到的清洗后的ITO电极表面上25min，然后揭去聚二甲基硅氧烷印章，再在室温下自然干燥，得到图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
步骤四中所述的压印时每1cm2聚二甲基硅氧烷印章上受力为0.06N；
步骤四中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极为带有阵列的直径为50μm的正方形磷脂薄膜阵列；
五、密闭制备装置的组装：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与聚四氟乙烯矩形框和PDMS盖片组成密闭制备装置，清洗后的钨针电极垂直通过PDMS盖片，且清洗后的钨针电极进入到密闭制备装置内部中；再在密闭制备装置中注入蒸馏水；
步骤五中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离为355μm；
步骤五中所述的清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离为1645μm；
步骤五中所述的密闭制备装置的尺寸为17mm×8mm×2mm；所述的密闭制备装置中注入蒸馏水的量为290μL；
六、巨型磷脂囊泡阵列的形成：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为3.5V、频率为10Hz和时间为120min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；
步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为59.94μm。
实施例三：一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法是按以下步骤完成的：
一、清洗电极：首先使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗，再使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗，再使用氮气吹干，再使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗；得到清洗后的ITO电极；将钨针电极浸泡在物质的量浓度为2mol/L的盐酸中3h，再用蒸馏水进行冲洗4次，再使用氮气吹干，得到清洗后的钨针电极；
步骤一中所述的使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗的次数为2次，每次超声清洗的时间为10min，超声功率为70W；
步骤一中所述的使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗的次数为2次，每次超声清洗的时间为10min，超声功率为70W；
步骤一中所述的使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗的时间为40s，功率为70W；
二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗：首先使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用氮气吹干，得到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤二中所述的使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为10min，超声清洗的功率为70W；
步骤二中所述的使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为10min，超声清洗的功率为70W；
三、制备磷脂薄膜阵列：将清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的带有图案微结构的一面朝上放置，再将浓度为15mg/mL的磷脂溶液滴加到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构上，再将图案微结构上滴有磷脂溶液的聚二甲基硅氧烷印章放入密闭容器中，磷脂溶液浸润15min，吸去聚二甲基硅氧烷印章图案微结构上剩余的磷脂溶液，再使用氮气吹干，得到图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤三中所述的清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构为为阵列的边长为87μm的正方形；
步骤三中所述的磷脂溶液为磷脂溶解到无水乙醇中得到；
四、制备图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极：将聚二甲基硅氧烷印章浸有磷脂的图案微结构压印在步骤一中得到的清洗后的ITO电极表面上40min，然后揭去聚二甲基硅氧烷印章，再在室温下自然干燥，得到图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
步骤四中所述的压印时每1cm2聚二甲基硅氧烷印章上受力为0.06N；
步骤四中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极为带有阵列的直径为50μm的正方形磷脂薄膜阵列；
五、密闭制备装置的组装：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与聚四氟乙烯矩形框和PDMS盖片组成密闭制备装置，清洗后的钨针电极垂直通过PDMS盖片，且清洗后的钨针电极进入到密闭制备装置内部中；再在密闭制备装置中注入蒸馏水；
步骤五中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离为500μm；
步骤五中所述的清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离为1500μm；
步骤五中所述的密闭制备装置的尺寸为17mm×8mm×2mm；所述的密闭制备装置中注入蒸馏水的量为290μL；
六、巨型磷脂囊泡阵列的形成：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为5V、频率为10Hz和时间为265min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；
步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为79.76μm。
图1为实施例一步骤三中制备磷脂薄膜阵列过程的示意图，图1中1为清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章，2为磷脂溶液，3为图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章，4为清洗后的ITO电极，5为图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
图2为实施例一步骤五组装的密闭制备装置的结构示意图，图2中1为图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极，2为清洗后的钨针电极，3为聚四氟乙烯矩形框，4为PDMS盖片，5为信号发生器，A为清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离，B为图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离；
图3为实施例一制备的巨型磷脂囊泡阵列的荧光显微镜图片。
从图3可知，实施例一制备的巨型磷脂囊泡具有良好的形态，尺寸单一可控，巨型磷脂囊泡阵列分布范围广，较大范围内囊泡阵列清晰可见，囊泡单分散性良好；实施例一制备的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为10μm～90μm。
Claims (9)
1.一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法是按以下步骤完成的：
一、清洗电极：首先使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗，再使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗，再使用氮气吹干，再使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗；得到清洗后的ITO电极；将钨针电极浸泡在物质的量浓度为2mol/L的盐酸中3h～6h，再用蒸馏水进行冲洗3次～6次，再使用氮气吹干，得到清洗后的钨针电极；
二、带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的清洗：首先使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗，再使用氮气吹干，得到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章；
三、制备磷脂薄膜阵列：将清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的带有图案微结构的一面朝上放置，再将浓度为1mg/mL～25mg/mL的磷脂溶液滴加到清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构上，再将图案微结构上滴有磷脂溶液的聚二甲基硅氧烷印章放入密闭容器中，磷脂溶液浸润10min～50min，吸去聚二甲基硅氧烷印章图案微结构上剩余的磷脂溶液，再使用氮气吹干，得到图案微结构上浸有磷脂的聚二甲基硅氧烷印章；
步骤三中所述的磷脂溶液为磷脂溶解到无水乙醇中得到；
步骤三中所述的清洗后的带有图案的聚二甲基硅氧烷印章的图案微结构为阵列的边长为50μm的正方形、阵列的直径为20μm的圆形或阵列的边长为87μm的正方形；
四、制备图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极：将聚二甲基硅氧烷印章浸有磷脂的图案微结构压印在步骤一中得到的清洗后的ITO电极表面上5min～60min，然后揭去聚二甲基硅氧烷印章，再在室温下自然干燥，得到图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极；
步骤四中所述的压印时每1cm2聚二甲基硅氧烷印章上受力为0.05N～0.1N；
五、密闭制备装置的组装：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与聚四氟乙烯矩形框和PDMS盖片组成密闭制备装置，清洗后的钨针电极垂直通过PDMS盖片，且清洗后的钨针电极进入到密闭制备装置内部中；再在密闭制备装置中注入蒸馏水；
步骤五中所述的图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极与清洗后的钨针电极针尖之间的距离为250μm～1000μm；
步骤五中所述的清洗后的钨针电极针尖与密闭制备装置上部PDMS盖片的距离为1200μm～1800μm；
六、巨型磷脂囊泡阵列的形成：将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为2V～10V、频率为10Hz～1000Hz和时间为60min～300min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；
步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为10μm～90μm。
2.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤一中所述的使用无水乙醇对ITO电极进行超声清洗的次数为2次～3次，每次超声清洗的时间为5min～20min，超声功率为40W～80W。
3.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤一中所述的使用蒸馏水对ITO电极进行超声清洗的次数为2次～3次，每次超声清洗的时间为5min～20min，超声功率为40W～80W。
4.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤一中所述的使用等离子体清洗机对ITO电极进行清洗的时间为10s～45s，功率为40W～80W；步骤二中所述的使用蒸馏水对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为5min～30min，超声清洗的功率为40W～80W。
5.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤二中所述的使用无水乙醇对带有图案的聚二甲基硅氧烷印章进行超声清洗的时间为5min～30min，超声清洗的功率为40W～80W。
6.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤五中所述的密闭制备装置的尺寸为17mm×8mm×2mm；所述的密闭制备装置中注入蒸馏水的量为290μL。
7.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤六中将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为2.5V、频率为10Hz和时间为90min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为21.21μm。
8.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤六中将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为3.5V、频率为10Hz和时间为120min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为59.94μm。
9.根据权利要求1所述的一种基于微接触印刷技术利用点面电极电场制备巨型磷脂囊泡阵列的方法，其特征在于步骤六中将图案化磷脂薄膜阵列的ITO电极和清洗后的钨针电极分别与信号发生器相连接，在波形为正弦波、交流电压为5V、频率为10Hz和时间为265min的条件下，得到巨型磷脂囊泡阵列；步骤六中所述的巨型磷脂囊泡阵列中磷脂囊泡的直径为79.76μm。
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Citations (5)
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|---|---|---|---|---|
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| CN104474990A (zh) * | 2014-11-07 | 2015-04-01 | 哈尔滨工业大学宜兴环保研究院 | 一种利用点面电极电场同时制备磷脂微管和囊泡的方法 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101461965A (zh) * | 2009-01-14 | 2009-06-24 | 西南交通大学 | 一种材料表面制备壳聚糖/蛋白质复合微图形的方法 |
| CN102784607A (zh) * | 2012-08-14 | 2012-11-21 | 哈尔滨工业大学 | 利用指状微电极制备巨型磷脂泡囊的方法 |
| CN102895930A (zh) * | 2012-11-15 | 2013-01-30 | 哈尔滨工业大学 | 利用指状微电极制备磷脂纳米/微米管的方法 |
| CN104058365A (zh) * | 2014-06-23 | 2014-09-24 | 哈尔滨工业大学 | 在等离子体氧化技术图案化的自组装膜表面上构建远离基底的仿生膜的方法 |
| CN104474990A (zh) * | 2014-11-07 | 2015-04-01 | 哈尔滨工业大学宜兴环保研究院 | 一种利用点面电极电场同时制备磷脂微管和囊泡的方法 |
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| A novel technique for preparation of monodisperse giant liposomes;Pietro Taylor et al;《Chem.Commun》;20030616;第1732-1733页 * |
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