CN105362231A - 制造具有不同Log P值的缓释递送载体脂质纳米粒子的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种制造缓释脂质纳米粒子的方法，所述方法包括以下步骤：测定活性成分的log？P值；混合脂肪酸、非离子型表面活性剂和活性成分以形成混合物；融化所述混合物；均质化所述混合物以形成纳米乳剂；超声处理所述均质化的纳米乳剂；以及将所述纳米乳剂注入冷水中以形成所述液体纳米粒子。具有活性成分和所选log？P值的脂质纳米粒子具有延长释放的性质。在特定实施例中，所述活性成分是具有选自0到4.0的范围的log？P值的化合物。

Description

制造具有不同Log P值的缓释递送载体脂质纳米粒子的方法

技术领域

本发明涉及用于化妆品和医药产品应用的纳米结构脂质载体。更具体地说，本发明涉及一种用于制造能够提供活性成分到靶位点的缓释的脂质纳米粒子的方法。

背景技术

由于固体脂质纳米粒子(Solidlipidnanoparticles,SLNs)的纳米级尺寸药物递送系统结合了聚合物纳米粒子、乳剂和脂质体的优点，所以SLNs已经吸引了日益增多的关注(Paliwal等人，2009年；Subedi等人，2009年)。SLNs基本上由外壳上具有表面活性剂的生物相容的脂质基质组成，SLNs在室温下为固态(Kamboj等人，2010年)。由于其独特结构和性质，诸如良好的生物适应性、保护并入的化合物不被降解，以及药物的缓释，SLNs已经被广泛用作用于医药、化妆品和皮肤病用目的的药物和活性成分递送系统的载体(Chourasia和Jain，2009年；Zhang等人，2012年)。然而，由于纳米粒子的完整结晶状态，SLN的缺陷是固有的，此完整结晶状态是由于出乎意料地经多晶型转化而成更完整的β晶型的脂质转变所导致的(Freitas和Miller，1999年)，从而造成了潜在问题，如有限的药物包封和药物外排。

已开发出了新一代的脂质纳米粒子，即纳米结构脂质载体(Nanostructuredlipidcarriers,NLC)来克服所述限制(pardeike等人，2009年)。NLC或脂质纳米粒子(在下文中统称为“脂质纳米粒子”)是亚微米尺寸的脂质粒子，所述脂质粒子包含固体脂质和液体油的共混物。由于液体油与脂质纳米粒子之间的结构差异，将液体油并入脂质纳米粒子中扰乱了固体脂质基质的完整晶体排列，从而引起了许多晶体缺陷来容纳分子形式的药物，以及由此帮助改善对活性成分的负载能力(Muller等人，2002年；Souto和Muller，2006年)。

使用不同类型的原材料来制备脂质纳米粒子，诸如甘油三酯、磷脂和蜡(Wang等人，2011年；Kheradmandnia等人，2010年；Jenning等人，2000年；Tsai等人，2012年；以及专利号CN101890170的中国专利)。这些现有技术的主要缺点是用于制备脂质纳米粒子的原材料的成本昂贵。用比较便宜的化合物作为制备脂质纳米粒子的原材料是有利的。开发一种用比较便宜的原材料制造脂质纳米粒子的简单方法同样也是有利的。除此之外，不存在能够提供活性成分到靶位点的缓释的可用脂质纳米粒子。

在药物递送系统中药物的释放如控释或者缓释是重要的，以便通过在施用单次剂量后在很长一段时间内持续释放药物来实现长效治疗效果(ChugaIsha等人，2012年)。LogP是辛醇-水分配系数，是药物或者活性成分的脂质溶解度的良好指示；其中较高的logP值表示在脂质环境中较高的溶解度(Hansch和Clayton，1973年)。

鉴于上述，本发明已经开发了一种制造用于化妆品或者医药应用的缓释的脂质纳米粒子递送载体的方法。在此方法中，使用比较便宜的化合物—脂肪酸作为脂质纳米粒子的原材料来制造脂质纳米粒子。根据本发明的脂质纳米粒子由脂肪酸、非离子型表面活性剂和活性成分组成，其中所述活性成分是具有所选logP值的化学化合物。此外，根据本发明的方法生产制造的脂质纳米粒子递送载体具有延长释放的性质，此性质适合于化妆品或者医药用途。

发明内容

本发明的目的是提供一种通过使用具有16到24个碳原子的饱和或者不饱和脂肪酸作为包封原材料来制造缓释的脂质纳米粒子递送载体的方法。根据本发明公开的制造缓释的脂质纳米粒子递送载体的方法包括以下步骤：测定活性成分的logP值；混合脂肪酸、非离子型表面活性剂和活性成分以形成混合物；在75℃到90℃的温度下融化所述混合物；等到所有成分都融化，以13,000到20,000rpm的转速均质化所述混合物达2到15分钟以形成纳米乳剂；超声处理所述均质化的纳米乳剂达1到2分钟以减小粒度和多分散性指数；以及将所述纳米乳剂注入温度等于或者低于5℃的冷水中以形成液体纳米粒子。在一优选实施例中，所述活性成分选自logP值选自0到4.0的范围的化合物。

本发明的另一目的是提供一种用于化妆品和医药应用的缓释的脂质纳米粒子递送载体，所述载体由具有16到24个碳原子的饱和或者不饱和脂肪酸作为包封原材料组成以包封活性成分并且通过非离子型表面活性剂而稳定化。根据本发明的脂质纳米粒子递送载体具有延长释放的性质。

本发明的这些和其他目的，特征和优点将从以下描述中轻易地显而易见。

附图说明

所述附图被包括以提供对本发明的进一步理解，并且被并入本说明书中以及构成本说明书的组成部分，所述附图图示本发明的实施例并且与描述一起用来解释本发明的原理。

图1是流程图，图示所公开的制造用于包封高logP值的化合物的脂质纳米粒子的方法的操作步骤；

图2示出四种不同样本在24小时时段中的氯喹啉二磷酸盐体外释放；■表示在溶液中，●表示在乳膏中，▲表示在NLC中，以及表示在NLC共混乳膏中；

图3示出四种不同样本在24小时时段中的吖啶橙体外释放；■表示在溶液中，●表示在乳膏中，▲表示在NLC中，以及表示在NLC共混乳膏中；

图4示出四种不同样本在24小时时段中的偶氮胂III体外释放；■表示在溶液中，●表示在乳膏中，▲表示在NLC中，以及表示在NLC共混乳膏中；

图5示出四种不同样本在在37℃下的氯喹啉二磷酸盐累积释放；■表示在溶液中，●表示在乳膏中，▲表示在NLC中，以及表示在NLC共混乳膏中；

图6示出四种不同样本在在37℃下的吖啶橙累积释放；表示在溶液中，表示在乳膏中，表示在NLC中，以及表示在NLC共混乳膏中；以及

图7示出四种不同样本在在37℃下的偶氮胂III累积释放；■表示在溶液中，●表示在乳膏中，▲表示在NLC中，以及表示在NLC共混乳膏中。

具体实施方式

在以下详细描述中，参考其中可实践本发明的各种具体实施例。描述了这些实施例的充分细节以使得本领域技术人员能够实践本发明，并且要理解的是在不脱离本发明的范围的情况下可采用其他实施例并且可作出结构和逻辑改变。

总的来说，本发明表示一种制造缓释的脂质纳米粒子递送载体的方法。根据本发明制造的脂质纳米粒子递送载体具有延长释放的性质并且具有在50nm到500nm的范围内的直径。

图1是本发明方法的代表性流程图的实例。此流程图仅为说明并且不应限制本文权利要求书的范围。本领域的普通技术人员将认识到可作出其他改变，修改和替换。参见图1，根据本发明的制造缓释脂质纳米粒子的方法包括以下步骤：测定活性成分的logP值，记为步骤一；混合脂肪酸、非离子型表面活性剂和所述活性成分来形成混合物，记为步骤二；在75℃到90℃的温度下融化所述混合物，记为步骤三；以13,000到20,000rpm的转速均质化所述混合物达2到15分钟以形成纳米乳剂，记为步骤四；超声处理所述均质化的纳米乳剂达1到2分钟以减小粒度和多分散性指数，记为步骤五；以及将所述纳米乳剂注入温度等于或者低于5℃的冷水中以形成液体纳米粒子，记为步骤六。

操作步骤一是起始步骤，在此步骤中测定所述活性成分的所述logP值。在一个实施例中，打算包封到脂质纳米粒子中的活性成分必须由logP值选自0到4.0的范围中的活性成分组成。

接着，在操作步骤二中，混合脂肪酸、非离子型表面活性剂和活性成分以形成混合物。在另一个实施例中，用作脂质纳米粒子原材料的脂肪酸选自由碳原子数为16到24的饱和或者不饱和脂肪酸组成的群组。在一示例性实施例中，多种材料可用作脂质纳米粒子原材料，包括但不限于硬脂酸、油酸、棕榈酸、花生酸、山嵛酸、木蜡酸、棕榈油酸、顺式-6-十六碳烯酸(sapienicacid)、反油酸、异油酸、亚油酸、花生四烯酸、芥子酸，或者任何其他碳原子数为16到24的饱和或者不饱和脂肪酸。

在又一实施例中，在操作步骤二中使用的非离子型表面活性剂选自由聚山梨醇酯类(Tween^TM)、油酸山梨坦(Span^TM)、蔗糖脂肪酸酯、鲸蜡硬脂醇聚醚、鲸蜡醇聚醚、月桂醇的聚氧醚(聚乙二醇单十二醚)、泊洛沙姆等组成的群组。表面活性剂通常是两亲的有机化合物，也就是说它们包括疏水基(它们的尾部)和亲水基(它们的头部)两者。因此，表面活性剂包括水不溶性(或者油溶性的)组分和水溶性的组分两者。最常见地，表面活性剂根据极性或者亲水性头部基团来分类。非离子型表面活性剂在其头部不含荷电基团。离子型表面活性剂的头部负载有净电荷。如果电荷是阴性的，则表面活性剂被更准确地称作阴离子；虽然电荷是阳性的，则表面活性剂被更准确地称作阳离子。如果表面活性剂包含具有两个带相反电荷的基团的头部，则所述表面活性剂被称为两性的。在本发明中，非离子型表面活性剂的功能是稳定化由脂肪酸形成的脂质纳米粒子。

仍然参看图1，在操作步骤三处，在75℃到90℃的温度下融化脂肪酸、非离子型表面活性剂和活性成分的混合物。在又一实施例中，脂肪酸、活性成分和非离子型表面活性剂的混合物包含固相和液相物质。因此，为了均质化混合物，必须融化所述混合物以使所有物质变成液相。应用于融化脂肪酸、活性成分和非离子型表面活性剂的混合物的温度优选地被设置为75℃到90℃。不同物质的熔点是不同的；然而在75℃的温度下，大部分用于制造脂质纳米粒子的物质将在此温度下开始融化。将所述混合物加热到超过90℃时不可取的，这是因为更高的温度将造成活性成分的损坏或分解。这将减小所述脂质纳米粒子的药效。

在所有成分融化之后，在操作步骤四处，以13,000到20,000rpm的转速均质化所述混合物2到15分钟，以形成纳米乳剂。然后，在操作步骤五处，超声处理所述均质化的纳米乳剂1到2分钟以减小粒度和多分散性指数。在操作步骤六处，将所述纳米乳剂注入温度等于或者低于5℃的冷水中以形成液体纳米粒子。

在另一实施例中，通过使用根据本发明的操作步骤一到六获得的脂质纳米粒子的大小在50nm-500nm的范围中。操作步骤四是任选的步骤并且此步骤更多地取决于打算使脂质纳米粒子小到何种程度。此外，可以通过控制均质化时间或者速度、应用超声处理以及改变表面活性剂浓度来获得脂质纳米粒子的所期望粒度。

为了进一步以非限制的方式更详细地说明本发明，将给出以下实例。为了提供更好的理解以及为了比较的目的，在以下实例中，除了使用纯的饱和脂肪酸(硬脂酸)来制造脂质纳米粒子之外，也已经使用饱和脂肪酸(硬脂酸)和单不饱和脂肪酸(油酸)的混合物来制造脂质纳米粒子。

实例1

脂质纳米粒子的制备

硬脂酸购自西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)(美国圣路易斯(St.Louis,USA))。油酸购自Fluka公司(瑞士布赫斯(Buchs,Switzerland))。Tween60(聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯)购自蕾升亚洲公司(LasemAsia)(马来西亚吉隆坡(KualaLumpur,Malaysia)。所使用的化合物诸如氯喹啉二磷酸盐、吖啶橙和偶氮胂III分别购自西格玛奥德里奇公司(美国圣路易斯)、东京化成工业株式会社(TokyoChemicalIndustry，TCI)(日本)和默克公司(Merck)(德国)。SalcareSC91得自巴斯夫公司(BASF)(德国路德维希港(Ludwigshafen,Germany))。使用电阻率为18.2ΩScm^-1的去离子水来制备所有的溶液和样本(BarnsteadNANODiamond^TMNanopure水系统)。

脂质纳米粒子是通过使用融化-乳化技术制备的。以30重量％的OA比率将400mg的硬脂酸与油酸混合，在80℃的温度下融化，以及随后与Tween60溶液混合。均质化所述混合物10分钟，然后进一步超声处理2分钟以形成纳米乳剂。将所述纳米乳剂注入20ml的冷水(2℃)中以形成脂质纳米粒子。

为了更透彻的理解以及为了比较的目的，已经将不同logP的化合物包封在脂质纳米粒子中。使用了三种具有不同logP的化合物，即氯喹啉二磷酸盐(logP：3.93)、吖啶橙(logP：3.72)、偶氮胂III(logP：0.49)。氯喹啉二磷酸盐已经被广泛地用作有效的抗疟药和杀阿米巴药物，以及治疗药物(Jiang等人，2010年)。吖啶橙是蒽的含氮类似物，其在分子生物学、生物化学、毒理学和超分子化学中被用作荧光染料(Shaikh等人，2008年；Agrayat等人，2008年)。偶氮胂III是水溶性化合物，其是钙、铀、镉等等的金属指示剂(Brown和Rydqvist，1981年)。

负载氯喹啉二磷酸盐、吖啶橙和偶氮胂III的硬脂酸-油酸纳米粒子(SON)分散相是完全按照如上所述的相同方式制备的，区别仅在于分别添加10mg的不同化合物到上述脂质相中以分别形成NLC-1、NLC-2和NLC-3。将负载氯喹啉二磷酸盐、吖啶橙和偶氮胂III的SON分散相进一步并入购自巴斯夫公司的SalcareSC91基础乳膏，即由通过涡流技术分散在5–8％的医学级白油中的8％的阴离子丙烯酸系共聚物组成的原料中，其中这三个样本分别被表示为NLC-C1、NLC-C2和NLC-C3。制备空白氯喹啉二磷酸盐、吖啶橙和偶氮胂III溶液以及仅溶解相应的空白化合物的基础乳膏以用于比较，以及所述溶液分别被表示为A1、A2、A3，而所述乳膏分别被表示为C1、C2、C3。在制备后，所有的样本(NLC-1、NLC-2、NLC-3；NLC-C1、NLC-C2、NLC-C3；A1、A2、A3和C1、C2、C3)被存储于5℃下。

实例2

脂质纳米粒子的表征

脂质纳米粒子的粒度和电动电势

使用ZetasizerZS(马尔文仪器有限公司(MalvinInstrucments)，英国)来测定负载化合物的脂质纳米粒子的平均粒度和电动电势。用去离子水将500μl的脂质纳米粒子稀释到25ml，以及平衡至室温下10分钟。在25℃进行粒度和电动电势的测量。

脂质纳米粒子的包封率(EncapsulationEfficiency,EE)

将负载化合物的SON分散相在具有50000Da的截留分子量的离心过滤管(Vivaspin6，赛多利斯斯泰迪生物技术公司(SartoriusStedimBiotech)，德国)的上部腔室中以8000rpm的转速离心30min。稀释在所述离心过滤管的底部处收集到的游离化合物，以及用Cary50UV-Vis分光光度计(Cary50UV-VisSpectrometer)(安捷伦科技，美国(AgilentTechnologies,USA))分光光度地测定所收集的游离化合物的数量。使用以下等式构造标准标定曲线来确定所述化合物的浓度：

$EE=\left(\frac{WT-WF}{WT}\right)\×100\%$

EE：NLC的包封率

WT：在制备期间添加的水杨酸的重量

WF：在所述过滤管底部处收集到的未负载的水杨酸的重量

实例3

体外释放研究

通过使用自动Franz扩散细胞系统(AutomatedFranzDiffusionCellSystem)(Microette自动进样系统，美国汉森公司(MicroetteAutosamplingSystem,HansonResearchCo.,USA)来评估四种不同样本的体外药物释放，这四种不同样本是仅溶解化合物的溶液(A1、A2、A3)、包封有化合物的脂质纳米粒子(NLC-1、NLC-2、NLC-3)、溶解有化合物的基础乳膏(C1、C2、C3)，以及针对每一化合物、共混包封有化合物的脂质纳米粒子的乳膏(NLC-C1、NLC-C2，以及NLC-C3)。

在整个实验中在400rpm的搅拌和37±1℃的水浴循环的条件下，使四种不同的样本在6个体积为4ml的pH7.4的10mmPBS溶液的扩散物室中跑样，所述扩散物室包含具有0.6362cm²的有效扩散面积。在滞留隔室中将大约500mg的每一样本负载到再生纤维素薄膜表面(截留5000Da的分子量)上，预浸泡过夜，然后进行24小时的评估。在预定时间间隔处，取出样本以用分光光度计测量样本中的药物含量，以及用新鲜的容置媒介替代样本。根据来自六个不同滞留隔室的六个测量值的平均完成计算。

结果和论述

脂质纳米粒子的粒度和电动电势

脂质纳米粒子的粒度和电动电势于表1中示出。相较于NLC-2和NLC-3，NLC-1的粒度表现出最大的粒度，具有最高的logP值。这可能是因为氯喹啉二磷酸盐在水中的高溶解度(100mg/ml)(Kasim等人，2004年)，此高溶解度导致药物与OA和硬脂酸的脂质基质的结晶层之间不相容的混合。相同的原因同样适用于解释NLC-3相较于NLC-2具有更大的尺寸，NLC-2因为具有溶于极性水相而非亲脂性脂质相的趋向而具有较小的亲油性。具有不同logP的所有三个NLC在多分散性指数方面没有显著的差异。

表1：新鲜制备的脂质纳米粒子在25℃下的粒度、多分散性指数、电动电势以及EE。

电动电势是围绕粒子的双电层上的电势(Elazhary和Soliman，2009年)。电动电势是用于预测胶体分散体系的稳定性的参数之一(Muller等人，2001年)。一般说来，由于粒子之间的电推斥，当电动电势的绝对值高于30mV时，粒子可稳定地分散(Muller等人，2000年)。参看表1，发现NLC-1接近于-30mV，而NLC-3表现出低于-40mV的电动电势，这指示存储具有良好的稳定性。相反地，NLC-2的电动电势高于-30mV，这是因为在生理状态(pH＝7.4)下吖啶橙以其质子化形式存在(Lagutschenkov和Dopfer，2011年)，这导致NLC界面处的负电荷被吖啶橙的正电荷中和以及因此表现出较小负值的电动电势。

参看表1，NLC的EE表现为随着logP值的增大而具有降低的趋势。这可以用药物与NLC的脂质核心之间的不相容混合来解释，因为亲油性增大而限制了脂质基质中的化合物负载。

脂质纳米粒子的体外释放研究

使用静态Franz扩散池(StaticFranzDiffusionCell)法来评估如上所述的四种不同的样本，以及绘制所有样本随时间变化的累积化合物释放曲线。参看图2、图3和图4，可以注意到化合物的logP越高，则化合物在整个膜上各处的扩散量越多，如由A1的扩散量较高，然后是A2与A3所证明的。此现象的原因是由皮肤表皮的角质层的脂质层较厚，而药物应该穿过角质层以进行渗透所造成的。亲脂性分子将轻易地分配到角质层中但是将很难离开角质层，而亲水性分子将遭受渗透不良(Pouillot等人，2008年；Desai等人，2010年)。

在图2、图3和图4中，所有的化合物在24小时内表现出逐渐的释放，然而具有NLC载体的化合物更慢地释放，而与化合物的logP无关。粒子中的包封药物扩散到内相的表面并且经历脂质相与水相之间的分配(Venkateswarlu和Manjunath，2004年)。相较于NLC-2和NLC-3，具有最高logP的NLC-1显示出较高的扩散药物量。

NLC-C1、NLC-C2和NLC-C3，而并非是NLC-1、NLC-2和NLC-3，表现出比更慢的释放趋势，这是因为化合物被保持在NLC颗粒分散系中以及在乳剂中。相较于没有SON的样本(A1、A2、A3、C1、C2、C3)，NLC-1、NLC-2、NLC-3、NLC-C1、NLC-C2和NLC-C3以较慢的速率被释放。包含SON的样本的控释行为的存在揭示化合物被成功地并入SON的固体基质中并且从粒子缓慢地释放。

将所述四种不同样本的体外释放曲线拟合于Higuchi模型，以便理解其释放动力学，这是因为此模型被用来描述药物从均匀和粒状基质体系扩散(Vivek等人，2007年)。每种化合物的所述四种样本的释放曲线表现为最佳地拟合于Higuchi模型(R²＞0.93)。所获得的所有样本的线性拟合(图5、图6和图7)表明化合物从所述样本的释放是控制扩散的过程(Vivek等人，2007年)。如表2所示，从Higuchi模型的绘制获得的斜率表示化合物的释放速率。分别地，对于氯喹啉二磷酸盐，所述四种样本的释放速率是A1＞C1＞NLC-1＞NLC-C1；对于吖啶橙，所述四种样本的释放速率是A2＞C2＞NLC-2＞NLC-C2；以及对于偶氮胂III，所述四种样本的释放速率是A3＞C3＞NLC-3＞NLC-C3。当被配制成乳膏(C1、C2、C3)时，每一种化合物(A1、A2、A3)的释放速率下降，这表明乳剂具有潴留效应。当负载相应化合物的NLC被并入乳膏中时(NLC-C1、NLC-C2、NLC-C3)，C1、C2、C3的释放速率被进一步分别降低到原来的约40分之一、12分之一、4分之一，并且这指示在本发明中制备的NLC具有缓释性质。NLC的此缓释性质可归因于化合物从NLC粒子的固体基质释放涉及两个途径。第一途径涉及化合物在滞留物室中的缓释(k₁)，而接着第二途径是穿过薄膜以更快的速率扩散(k₂＞k₁)。化合物在第一途径缓释的原因可能是由于NLC的疏水性固体基质维持化合物释放到水相，以及因此导致了延长的释放速率。

表2：根据Higuchi模型的四种不同样本的化合物释放

结论

概括地说，本发明已经展示了一种用于通过融化-乳化技术制造缓释脂质纳米粒子的方法。负载化合物的NLC的粒度将增大，但是包封率将降低，并且由于化合物与OA和硬脂酸的脂质基质的结晶层之间的不相容混合而具有增大的LogP值。较高LogP的化合物在NLC和乳剂两者中均显示出跨皮肤表皮角质层的脂质层的较高扩散。在本发明中制备的负载化合物的NLC具有延长释放的性质，这可能是由于化合物被并入NLC的固体基质中。NLC并入乳膏剂型中进一步降低了在24小时时段内的释放速率，这表明乳剂也减缓了化合物的释放。本发明建议富含载药NLC的乳膏可为用于增强化妆品和医药应用中的疗效的有前途的递送系统。

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Claims (7)

1.一种制造用于化妆品或者医药应用的缓释脂质纳米粒子递送载体的方法，所述方法包括以下步骤：

一)测定活性成分的logP值；

二)混合脂肪酸、非离子型表面活性剂和活性成分以形成混合物；

三)在75℃到90℃的温度下融化所述混合物；

四)等到所有所述成分都融化，以13,000到20,000rpm的转速均质化所述混合物2到15分钟以形成纳米乳剂；

五)超声处理所述均质化的纳米乳剂达1到2分钟以减小粒度和多分散性指数；以及

六)将所述纳米乳剂注入温度等于或者低于5℃的冷水中以形成脂质纳米粒子。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述活性成分是logP值选自0到4.0的范围的化合物。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂质纳米粒子具有延长释放的性质并且具有在50nm到500nm的范围内的直径。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述脂肪酸选自由碳原子数目为从16到24的饱和或者不饱和脂肪酸组成的群组。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述碳原子数目为从16到24的饱和或者不饱和脂肪酸选自由以下脂肪酸组成的群组：月桂酸；豆蔻酸；棕榈酸；硬脂酸；花生酸；山萮酸；木蜡酸；肉豆蔻脑酸；棕榈油酸；顺式-6-十六碳烯酸；油酸；反油酸；异油酸；亚油酸；花生四烯酸；芥子酸。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述非离子型表面活性剂选自由以下各项组成的群组：聚山梨醇酯；油酸山梨坦；蔗糖脂肪酸酯；鲸蜡硬脂醇聚醚；鲸蜡醇聚醚；月桂醇的聚氧醚，聚乙二醇单十二醚；泊洛沙姆。

7.一种缓释的脂质纳米粒子递送载体，所述载体具有用方法1到6制造的延长释放的性质。