CN105273021A - 红霉素半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和用途 - Google Patents

红霉素半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和用途 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种红霉素半抗原和人工抗原,分子结构式分别为:

Description

红霉素半抗原、人工抗原和抗体及其制备方法和用途
技术领域
本发明涉及选择一种具有—COOH的、又最大可能包含红霉素原有结构的化合物作为红霉素半抗原,以此半抗原制成的人工抗原、特异性抗体;以及此类半抗原、人工抗原、特异性抗体的用途,和半抗原、人工抗原、抗体的制备方法。
背景技术
红霉素(ErythromycinA)属大环内酯类抗生素,对葡萄球菌、各种链球菌和革兰氏阳性杆菌均具有抗菌活性,主要用于抗畜禽细菌及支原体感染,亦可用作猪的饲料添加剂以促进增重和提高饲料转换率,在畜禽、水产品养殖及其疾病治疗过程中应用广泛。但是红霉素能对机体产生一些副作用,如胃肠道反应、胆汁郁积性黄疸以及静滴时引起静脉炎,还能引起坏死性肝病、精神障碍和关节炎综合症等,因此,红霉素在生产上的大量使用会由于其在动物体内代谢时间较长而在畜禽组织、蜂蜜、牛奶、鱼虾等产品中的残留,危害公众健康。目前世界各国为保证食品安全,对红霉素的使用和红霉素在食品中的残留限量进行了规定,我国农业部235号公告中规定红霉素的最大残留限量为动物组织200μg/kg,奶40μg/kg,蛋150μg/kg。
目前对红霉素的研究主要集中在医药领域,食品中红霉素残留的相应检测方法研究报道较少,且多为仪器检测,如薄层色谱法、液相色谱法、液相色谱-质谱法、气相色谱-质谱法等。仪器检测法存在样品前处理繁琐、检测时间长、仪器贵重等缺点,所以在我国无法得到广泛应用,并且不符合现场检测“在短时间内低成本对大量样品进行准确检测和筛选”的要求。酶联免疫吸附测定技术Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay(ELISA),是将免疫技术与现代测试手段相结合而建立的一种超微量的测定方法,具有成本低、速度快、灵敏度高、仪器设备简单的特点,适合大批量样品的快速分析。而免疫学检测方法的基础是相应的高特异性、高亲和力的抗体的制备,而红霉素作为小分子化合物,本身不具备免疫原性,因此,其半抗原的结构改造和全抗原合成是建立免疫速测技术的关键和难点之一。
发明内容
针对现有技术中存在的不足之处,本发明提供一种能最大程度保留红霉素的化学结构,又具有一定长度连接臂的半抗原以及这种半抗原的制备方法;以此半抗原制备的人工抗原、检测灵敏度高和特异性强的抗体;以及此半抗原、抗体的用途。
本发明为达到以上目的,是通过这样的技术方案来实现的:提供一种红霉素半抗原,它的分子结构式为:
本发明的半抗原以红霉素为起始原料,先与溴乙酸叔丁酯反应生成中间体,再与甲酸反应生成羧甲基红霉素,即为红霉素半抗原。反应式如下:
本发明的红霉素半抗原的制备方法进一步描述如下:
1)向100mL两口烧瓶中加入0.5g溴乙酸叔丁酯、0.90g红霉素和10mL丙酮,加热至轻微回流,反应20h后,抽滤白色固体;
2)向步骤1)所得固体粉末中加入10mL四氢呋喃和10mL甲酸,室温反应20h,蒸除溶剂得到羧甲基红霉素,即为红霉素半抗原。
上述方法制得的红霉素半抗原,具有红霉素特征结构的同时又具有可以与蛋白质偶联的—COOH结构。
本发明还提供了一种依靠上述红霉素半抗原制得的红霉素人工抗原,它的分子结构式为:
本发明的红霉素人工抗原的制备方法描述如下:
1)18mg红霉素半抗原溶于1mLN,N-二甲基甲酰胺中;
2)30mg碳化二亚胺和30mgN-羟基琥珀酰亚胺用0.2mL水充分溶解后加入到步骤1)红霉素半抗原溶液中,室温搅拌24h;
3)50mg载体蛋白充分溶于3.8mLPBS(pH7.2)中,将步骤2)所得溶液逐滴缓慢加入到蛋白溶液中,室温搅拌24h;
4)待上述反应完成后,装入透析袋中,0.01mol/LPBS缓冲液中4℃透析3d,每天换透析液3次,透析完成后冻干,-20℃保存备用。
所述载体蛋白可为牛血清白蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)、血蓝蛋白(KLH)或卵清蛋白(OVA),优选牛血清白蛋白(BSA)。
本发明还提供了一种红霉素特异性抗体,是用分子结构式为的红霉素人工抗原免疫白鼠所得到的、能与红霉素发生特异性免疫反应的单克隆免疫球蛋白G。
本发明同时提供了上述红霉素半抗原的用途,是用作动物免疫的抗原体系的原料。
本发明同时提供了上述红霉素特异性抗体的用途,用于检测食品中红霉素类化合物的残留量。
所述红霉素类化合物为红霉素、硫氰酸红霉素和琥乙红霉素中的至少一种。
基于红霉素内酯环结构可能是其活性官能团,以红霉素为原料,经过两步反应,分别与溴乙酸叔丁酯、甲酸反应,引入不同的“连接臂”合成了半抗原,最大可能保留了原来红霉素的分子结构,使红霉素分子的化学结构与电子分布几乎不受影响,这为获得对红霉素有高度特异性的抗体提供了保证。
本发明中合成的红霉素半抗原化合物为国内外首创的新化合物,既最大程度地保留了红霉素的化学结构,又具有一定长度的连接臂,用这一半抗原制备的免疫抗原去免疫动物,所得的抗体的效价、特异性、亲和力都比较好,所得的抗体用于ELISA方法检测红霉素类化合物,灵敏度可达0.2μg/L,与其他大环内酯类抗生素的交叉反应率低。
附图说明
图1红霉素半抗原合成路线图
图2红霉素半抗原核磁共振氢谱图
图3红霉素ELISA竞争标准曲线图
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例进一步详细说明本发明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法;所使用的材料、试剂等,如无特殊说明,为可从商业途径得到的试剂和材料。
实施例1:半抗原合成和鉴定
一种红霉素半抗原,分子结构式为:
是用作动物免疫的抗原体系的原料。
上述红霉素半抗原的制备方法如下(合成路线见附图1):
1)向100mL两口烧瓶中加入0.5g溴乙酸叔丁酯、0.90g红霉素和10mL丙酮,加热至轻微回流,反应20h后,抽滤白色固体;
2)向步骤1)所得固体粉末中加入10mL四氢呋喃和10mL甲酸,室温反应20h,蒸除溶剂得到羧甲基红霉素,即为红霉素半抗原。
产物的鉴定:
取上述目的产物经核磁共振氢谱鉴定,见附图2所示。图谱中11.0ppm增加的羧基峰说明红霉素半抗原合成成功。
实施例2:人工抗原合成和鉴定
由实施例1所述红霉素半抗原制成的一种红霉素人工抗原,分子结构式为:
1、免疫原的合成
免疫原的合成利用碳化二亚胺法,制备方法如下:
1)18mg红霉素半抗原溶于1mLN,N-二甲基甲酰胺中(DMF);
2)30mg碳化二亚胺(EDC)和30mgN-羟基琥珀酰亚胺(NHS)用0.2mL水充分溶解后加入到步骤1)红霉素半抗原溶液中,室温搅拌24h;
3)50mg牛血清白蛋白(BSA)充分溶于3.8mLPBS(pH7.2)中,将步骤2)所得溶液逐滴缓慢加入到蛋白溶液中,室温搅拌24h;
4)待上述反应完成后,装入透析袋中,0.01mol/LPBS缓冲液中4℃透析3d,每天换透析液3次,透析完成后冻干,-20℃保存备用。
人工抗原的鉴定:
按合成红霉素免疫原反应所用半抗原、载体蛋白与偶联产物的比例,进行紫外(200nm~400nm)扫描测定,通过比较三者分别在260nm和280nm的吸光值计算其结合比。偶联物红霉素半抗原-BSA的最大吸收峰与红霉素半抗原、BSA的最大吸收峰相比发生了明显的变化,表明人工抗原红霉素半抗原-BSA的合成是成功的。经计算,半抗原与BSA的结合比为15:1。
2、包被原的合成
包被原的合成也利用碳化二亚胺法,制备方法同免疫原的合成,将50mg牛血清白蛋白替换为50mg卵清蛋白(OVA)。
人工抗原的鉴定:
按合成红霉素包被原反应所用半抗原、载体蛋白与偶联产物的比例,进行紫外(200nm~400nm)扫描测定,通过比较三者分别在260nm和280nm的吸光值计算其结合比。偶联物红霉素半抗原-OVA的最大吸收峰与红霉素半抗原、OVA的最大吸收峰相比发生了明显的变化,表明人工抗原红霉素半抗原-OVA的合成是成功的。经计算,半抗原与OVA的结合比为8:1。
实施例3:单克隆抗体制备
一种红霉素特异性抗体,是将实施例2所述红霉素免疫原免疫白鼠所得到的、能与红霉素发生特异性免疫反应的单克隆免疫球蛋白G,用于检测食品中红霉素类化合物的残留量;红霉素类化合物为红霉素、硫氰酸红霉素和琥乙红霉素中的至少一种。
上述红霉素单克隆抗体的制备方法如下:
1)动物免疫:将免疫原注入到Balb/c小鼠体内,免疫剂量为150μg/只,使其产生抗血清。
2)细胞融合和克隆化:取产生特异性抗体的Balb/c小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP20融合,采用间接竞争酶联免疫分析方法测定细胞上清液,筛选阳性孔。利用有限稀释法对阳性孔进行克隆化,得到并建立产单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
3)细胞冻存和复苏:取处于对数生长期的杂交瘤细胞用冻存液制成细胞悬液,分装于冻存管,在液氮中长期保存。复苏时取出冻存管,立即放入37℃水浴中速融,离心去除冻存液后,移入培养瓶内培养。
4)单克隆抗体的制备与纯化:采用体内诱生法,将Balb/c小鼠(8周龄)腹腔注入灭菌石蜡油,7~14天后腹腔注射杂交瘤细胞,7~10天后采集腹水。经辛酸-饱和硫酸铵法进行腹水纯化,纯度经SDS-PAGE电泳鉴定,小瓶分装,-20℃保存。
抗体的特异性测定:
用具有多种抗原决定簇的免疫原(蛋白质或多肽)制备的抗体,其中含的抗体分子往往是混合体。当有甲、乙两种抗原,其分子结构中具有相同或部分相同的抗原决定簇时,甲抗原可与乙抗原的抗体反应,而乙抗原也可与甲抗原的抗体反应,称为交叉反应。抗体的特异性就是指它同特异性抗原结合的能力与同该抗原类似物结合能力的比较。常用交叉反应活性作为评价的重要标准。交叉反应越小,抗体的特异性则越好。
将特异性抗原及其类似物做系列稀释,分别与同一种红霉素半抗原-BSA抗体,按制作标准曲线同样方法制作标准曲线,并在曲线上找出抑制率50%的剂量和类似物抑制率50%时的用量。然后计算出各类似物的交叉反应率。
抗红霉素半抗原-BSA抗体对红霉素类化合物及各类似物的交叉反应率:红霉素为100%,硫氢酸红霉素为114%,琥乙红霉素为67.4%,泰乐菌素、替米考星、螺旋霉素、北里卡星均为<0.1%。由此可见,除红霉素类化合物外,所制备的抗体的特异性均较强。
实施例4:红霉素酶联免疫吸附测定方法的建立与应用
一、红霉素ELISA测定方法的基本原理
采用间接竞争酶联免疫分析方法,即将红霉素分子与大分子载体(如蛋白质)偶联制得的复合物作为包被原吸附于固相载体(96孔酶标板)上,制备成固相抗原,然后加入待测样品和相应抗体。固相抗原、待测样品中的红霉素与抗体进行竞争结合反应,待测样品中红霉素含量多,则被结合在固相抗原上的抗体少,反之结合在固相抗原上的抗体多,然后加入酶标二抗,最后用底物进行显色加以测定。当抗体量一定时,加入的待测样本中红霉素量越多,与固相抗原结合的抗体就越少,与抗体结合的酶标二抗也越少,发色反应就减弱,反之,则发色反应增强,因而可根据已知红霉素量的标准曲线和待测样品的吸光度值,推算出待测样品中红霉素的浓度。
二、红霉素ELISA测定方法中涉及的组分
(1)包被有红霉素人工抗原(红霉素半抗原-卵清蛋白偶联物)的酶标板;
(2)红霉素系列标准品溶液:浓度分别为0μg/L、0.2μg/L、0.6μg/L、1.8μg/L、5.4μg/L、16.2μg/L;
(3)抗体工作液:实施例3中所述的红霉素单克隆抗体工作液;
(4)酶标二抗:用辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠抗抗体;
(5)底物显色液:由A液和B液组成,A液为2%过氧化脲的水溶液,B液为1%四甲基联苯胺的水溶液;
(6)终止液:2mol/L硫酸水溶液;
(7)洗涤液:含有1.0%吐温-20、0.02‰叠氮化钠防腐剂,pH值为7.4、0.05mol/L的磷酸盐缓冲液,所述百分比为质量体积百分比;
(8)复溶液:含有5%牛血清白蛋白,pH值为7.4、0.02mol/L的磷酸盐缓冲液,所述百分比为质量体积百分比。
三、红霉素ELISA测定方法中各组分的制备
1、包被有红霉素人工抗原(红霉素半抗原-卵清蛋白偶联物)的酶标板的制备
用包被缓冲液将实施例2中所述红霉素包被原稀释至0.2μg/mL,包被96孔聚苯乙烯酶标板,每孔100μL,37℃温育2h,倾去包被液,用洗涤液洗涤3次,每次30s,拍干,然后在每孔加入200μL封闭液,37℃温育2h,倾去孔内液体,干燥后用铝膜真空密封保存。
所用的包被缓冲液和封闭液如下:
包被缓冲液:pH9.6、0.05mol/L的碳酸盐缓冲液;
封闭液:含有0.5%马血清、0.1%叠氮化钠、3%酪蛋白,pH值为7.2、0.02mol/L的磷酸盐缓冲液,所述百分比为质量体积百分比。
2、红霉素系列标准品溶液的制备
用标准品稀释液将红霉素标准品稀释至浓度分别为0μg/L、0.2μg/L、0.6μg/L、1.8μg/L、5.4μg/L、16.2μg/L;标准品稀释液为含有5%牛血清白蛋白,pH值为7.4、0.02mol/L的磷酸盐缓冲液,所述百分比为质量体积百分比。
3、抗体工作液的制备
用抗体稀释液将实施例3中所述的红霉素单克隆抗体稀释1000倍,得到抗体工作液;抗体稀释液为含有2.5%酪蛋白和0.03‰叠氮化钠的磷酸盐缓冲液,所述百分比为质量体积百分比。
4、酶标二抗的制备
(1)羊抗鼠抗抗体的制备
以羊作为免疫动物,以鼠源抗体为免疫原对无病原体羊进行免疫,得到羊抗鼠抗抗体。
(2)酶标二抗的制备
将羊抗鼠抗抗体与辣根过氧化物酶采用过碘酸钠法进行偶联,然后用酶标二抗稀释液将其稀释500倍;所述酶标二抗稀释液为含0.5%牛血清白蛋白,pH值为7.4、0.02mol/L的磷酸盐缓冲液,所述百分比为质量体积百分比。
四、用上述红霉素ELISA测定方法检测样品中残留的红霉素
(一)样品前处理
1、猪肉、猪肝、鸡肉、鸡肝、鱼、虾样品
称取1.0g±0.05g均质后的样品至50mL聚苯乙烯离心管中;加入4mL0.05mol/L氢氧化钠溶液,用振荡器剧烈振荡10min;3000g,室温(20-25℃/68-77℉)离心5min;取200μL上清液至2mL聚苯乙烯离心管中,加入750μL复溶液,再加入50μL0.1mol/L盐酸溶液,混匀;取50μL用于分析(稀释倍数:25倍)。
2、牛肉样品
称取2.0g±0.05g均质后的牛肉样品至50mL聚苯乙烯离心管中;加入10mL乙腈-0.1mol/L氢氧化钠溶液,用振荡器剧烈振荡10min;3000g,室温(20-25℃/68-77℉)离心5min;取1mL上层液至10mL洁净干燥玻璃试管中,于50-60℃(122-140℉)水浴氮气流下吹干;加入1mL正已烷,用涡旋仪涡动30s;再加入1mL复溶液,用涡旋仪涡动30s,3000g以上,室温(20-25℃/68-77℉)离心5min;除去上层有机相,取下层50μL用于分析(稀释倍数:5倍)。
3、蜂蜜样品
称取1.0g±0.05g蜂蜜样品至50mL聚苯乙烯离心管中;加入2mL甲醇-2%氯化钠=2:1,用涡旋仪涡动2min至蜂蜜全部溶解,3000g,室温(20-25℃/68-77℉)离心5min;移取100μL清亮样品液至2mL聚苯乙烯离心管中,加入900μL复溶液混匀;取50μL用于分析(稀释倍数:20倍)。
4、牛奶样品
取100μL鲜牛奶样品至2mL聚苯乙烯离心管中;加入900μL复溶液,混匀;取50μL用于分析(稀释倍数:10倍)。
5、冰淇淋样品
加热使冰淇淋充分溶解混匀;称取1.0g±0.05g冰淇淋样品至50mL聚苯乙烯离心管中;加入4mL复溶液,充分振荡至样品全部溶解;取200μL样品液至2mL聚苯乙烯离心管中,加入200μL复溶液,混匀;取50μL用于分析(稀释倍数:10倍)。
6、奶油样品
称取1.0g±0.05g奶油样品至50mL聚苯乙烯离心管中;加入1mL甲醇,用涡旋仪涡动2min,使样品充分溶解,再加入3mL复溶液,充分振荡至样品全部溶解;取200μL样品液至2mL聚苯乙烯离心管中,加入200μL复溶液,混匀;取50μL用于分析(稀释倍数:10倍)。
(二)检测
向包被有红霉素半抗原-卵清蛋白偶联物的酶标板微孔中加入系列标准品溶液或样品溶液50μL,随即加入酶标二抗50μL,再加入单克隆抗体工作液50μL,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应40min;倒出孔内液体,每孔加入洗涤液250μL,10s后倒出孔内液体,如此重复操作共洗板5次,用吸水纸拍干;每孔加入底物显色液A液和B液各50μL,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应15min;每孔加入终止液50μL,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于450nm处,测定每孔的吸光度值。
(三)检测结果分析
用所获得的每个浓度的标准品溶液的吸光度平均值(B)除以第一个标准品溶液(0标准)的吸光度平均值(B0)再乘以100%,得到百分吸光度值。
百分吸光度值(%)=(B/B0)×100%
公式中B为标准品溶液或样品溶液的平均吸光度值,B0为0μg/L标准品溶液的平均吸光度值。
以红霉素标准品浓度的对数值为X轴,百分吸光度值为Y轴,绘制标准曲线图(图3)。用同样的方法计算样品溶液的百分吸光度值,相对应每一个样品的浓度,则可从标准曲线上读出样品中红霉素的残留量。本发明中检测结果的分析也可以采用回归方程法,计算出样品溶液浓度。本发明中检测结果的分析还可以利用计算机专业软件,此法更便于大量样品的快速分析,整个检测过程只需1.0h可以完成。
五、上述红霉素ELISA测定方法检测效果评价
(一)最低检测限
取不含红霉素类药物的阴性猪肉、猪肝、鸡肉、鸡肝、牛肉、鱼、虾、蜂蜜、牛奶、冰淇淋、奶油样品各20份,将样品进行前处理后用上述红霉素ELISA测定方法对其进行检测,以20份样品检测浓度的平均值加上3倍标准差表示检测限。
结果表明,该方法对猪肉、鸡肉、鱼样品的最低检测限为5μg/kg,对猪肝、鸡肝、虾样品的最低检测限为10μg/kg,对牛肉样品的最低检测限为1μg/kg,对蜂蜜样品的最低检测限为4μg/kg,对牛奶、冰淇淋、奶油样品的最低检测限为2μg/kg。
(二)准确度和精密度
以回收率作为准确度评价指标,重复测定某一浓度样品的检测结果相对标准偏差(RSD%)作为精密度评价指标。计算公式为:回收率(%)=实际测定值/理论值×100%,其中理论值为样品的添加浓度;相对标准偏差RSD%=SD/X×100%,其中SD为标准偏差,X为测定数据的平均值。
向不含红霉素的样品中分别添加红霉素,使红霉素在猪肉、鸡肉、鱼样品中的终浓度为10μg/kg、20μg/kg,在猪肝、鸡肝、虾样品中的终浓度为20μg/kg、40μg/kg,在牛肉样品中的终浓度为2μg/kg、4μg/kg,在蜂蜜样品中的终浓度为8μg/kg、16μg/kg,在牛奶、冰淇淋、奶油样品中的终浓度为4μg/kg、8μg/kg;将添加后的样品进行前处理后用上述红霉素ELISA测定方法对其进行检测,每个浓度做5个平行,分别计算回收率和相对标准偏差,结果如表1所示。结果表明,猪肉、猪肝、鸡肉、鸡肝、鱼、虾样品添加回收率在69.5%~92.7%之间,牛肉样品添加回收率在85.1%~102.8%之间,蜂蜜样品添加回收率在73.5%~98.1%之间,牛奶、冰淇淋、奶油样品添加回收率在72.8%~105.3%之间,所有样品的相对标准偏差在5.9%~14.1%之间,均低于20%,符合规定。
表1准确度和精密度实验结果
(三)保存期
上述红霉素ELISA测定方法中所涉及到的主要试剂最终以工作液的形式提供,组装成试剂盒,大大降低了移液和操作的误差,同时体积小,易于携带和运送至终端客户处,更适合应用于现场操作检测和大批量样本检测,也节约了快递运输成本费用。
试剂盒保存条件为2-8℃,经过12个月的测定,试剂盒的最大吸光度值(零标准)、50%抑制浓度、红霉素添加回收率均在正常范围内。考虑到运输和使用过程中会有非正常保存条件出现,将试剂盒在37℃下放置8天进行加速老化实验,结果该试剂盒的各项指标完全符合要求;考虑到试剂盒冷冻情况发生,将试剂盒在-20℃冰箱中放置8天,结果该试剂盒的各项指标也完全正常。从以上结果可得出试剂盒可以在2-8℃至少保存12个月以上。

Claims (9)

1.一种红霉素半抗原,其特征在于它的分子结构式为:
2.一种权利要求1所述红霉素半抗原的制备方法,其特征在于依次包括下列步骤:
1)向100mL两口烧瓶中加入0.5g溴乙酸叔丁酯、0.90g红霉素和10mL丙酮,加热至轻微回流,反应20h后,抽滤白色固体;
2)向步骤1)所得固体粉末中加入10mL四氢呋喃和10mL甲酸,室温反应20h,蒸除溶剂得到羧甲基红霉素,即为红霉素半抗原。
3.一种红霉素人工抗原,其特征在于它的分子结构式为:
4.一种权利要求3所述红霉素人工抗原的制备方法,其特征在于依次包括下列步骤:
1)18mg红霉素半抗原溶于1mLN,N-二甲基甲酰胺中;
2)30mg碳化二亚胺和30mgN-羟基琥珀酰亚胺用0.2mL水充分溶解后加入到步骤1)红霉素半抗原溶液中,室温搅拌24h;
3)50mg载体蛋白充分溶于3.8mLPBS(pH7.2)中,将步骤2)所得溶液逐滴缓慢加入到蛋白溶液中,室温搅拌24h;
4)待上述反应完成后,装入透析袋中,0.01mol/LPBS缓冲液中4℃透析3d,每天换透析液3次,透析完成后冻干,-20℃保存备用。
5.根据权利要求4所述的红霉素人工抗原的制备方法,其特征在于所述载体蛋白为牛血清白蛋白、人血清蛋白、血蓝蛋白或卵清蛋白。
6.一种红霉素特异性抗体,其特征在于是用分子结构式为的红霉素人工抗原免疫白鼠所得到的、能与红霉素发生特异性免疫反应的单克隆免疫球蛋白G。
7.一种红霉素半抗原的用途,其特征在于是用作动物免疫的抗原体系的原料。
8.一种红霉素特异性抗体的用途,其特征在于用于检测食品中红霉素类化合物的残留量。
9.根据权利要求8所述的红霉素特异性抗体的用途,其特征在于所述红霉素类化合物为红霉素、硫氰酸红霉素和琥乙红霉素中的至少一种。
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