CN105053741A - 防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料，其原料包括用于防治猪繁殖与呼吸综合征的免疫制剂、玉米、豆粕、鱼粉、磷酸氢钙、小麦、食盐、复合微量元素添加剂、复合维生素添加剂、赖氨酸和蛋氨酸。其包含的免疫制剂可以通过机体调节作用，增强机体的细胞免疫、体液免疫，激活免疫细胞，诱导干扰素的产生，促使病毒不能在猪体细胞中生存繁殖，而发挥抗猪繁殖与呼吸综合征的作用。

Description

防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料

技术领域

本发明涉及饲料技术领域，尤其涉及一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征(PorcineReproductiveandRespira-tionSyndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种急性接触性传染病，主要引起妊娠母猪的繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状，导致妊娠母猪流产、死胎、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍和仔猪的大量死亡。该病是一种急性、高致死性传染病，病毒致病力强，传播速度快，猪群发病率和死亡率高，仔猪发病率可达100％死亡率可达30％以上，母猪流产率可达30％以上。育肥猪、母猪也可发病死亡。

该病至今尚无有效的治疗方法，疫苗防治是主要的措施。疫苗的研究已取得显著进展，世界上商品化的猪繁殖与呼吸综合征疫苗有灭活疫苗和弱毒活疫苗两类。临床上猪繁殖与呼吸综合征疫苗主要存在的问题是：第一，疫苗产生免疫反应需要较长时间；其次，猪繁殖与呼吸综合征疫苗并不具备完全的保护力，尤其是灭活疫苗不能激发细胞免疫；第三，猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗可以在免疫猪体组织中存在几周时间，并且从注苗猪向易感猪传播。因此，应用灭活疫苗增强疫苗免疫效力和安全性，研制免疫增强剂来提高猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗的免疫效果具有显著优势。

近年来发现中药对病毒性疾病的防止有较好的作用，因此开发和研制出中药制剂来防治该病有广阔的前景。中兽医认为，PRRS属于温(疫)病范畴，是因猪受虚邪贼风、暑热燥寒等外邪侵袭而引起的疾病，具有传染性、流行性、高热等特点。中药防治猪繁殖与呼吸综合征的机理有直接作用和间接作用，直接作用是中药制剂阻断病毒对正常细胞的吸附、穿入、复制等环节而达到抗病毒的目的。间接作用是中药通过机体调节作用，增强机体的细胞免疫、体液免疫，激活免疫细胞，诱导干扰素的产生，促使病毒不能在猪体细胞中生存繁殖，而发挥抗猪繁殖与呼吸综合征的作用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料，其包含的免疫制剂可以通过机体调节作用，增强机体的细胞免疫、体液免疫，激活免疫细胞，诱导干扰素的产生，促使病毒不能在猪体细胞中生存繁殖，而发挥抗猪繁殖与呼吸综合征的作用。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料，其原料包括用于防治猪繁殖与呼吸综合征的免疫制剂、玉米、豆粕、鱼粉、磷酸氢钙、小麦、食盐、复合微量元素添加剂、复合维生素添加剂、赖氨酸和蛋氨酸。

其中，所述原料中各重量份分别为上述免疫制剂2重量份～4重量份，玉米50重量份～60重量份、豆粕8重量份～12重量份、鱼粉5重量份～10重量份、磷酸氢钙1重量份～2重量份、小麦10重量份～16重量份、食盐0.5重量份～1重量份、复合微量元素添加剂0.1重量份～0.3重量份、复合维生素添加剂0.3重量份～0.6重量份、赖氨酸0.05重量份～0.1重量份、蛋氨酸0.05重量份～0.1重量份。

其中，所述防治猪繁殖与呼吸综合征的免疫制剂的原料药包括淫羊藿、黄精、芡实、麻黄、鹅不食草、沙苑子、连翘、土党参、水栀、山药、牡丹皮、刺五加、白仙茅、扭肚藤、四叶草、马尾连、桑寄生、山大黄、南沙参和益智。

其中，所述免疫制剂中各原料药的重量份分别为淫羊藿20重量份～30重量份、黄精35重量份～45重量份、芡实25重量份～35重量份、麻黄10重量份～20重量份、鹅不食草15重量份～25重量份、沙苑子20重量份～30重量份、连翘30重量份～40重量份、土党参25重量份～35重量份、水栀15重量份～25重量份、山药20重量份～30重量份、牡丹皮15重量份～25重量份、刺五加30重量份～40重量份、白仙茅10重量份～20重量份、扭肚藤10重量份～20重量份、四叶草15重量份～25重量份、马尾连10重量份～20重量份、桑寄生25重量份～35重量份、山大黄15重量份～25重量份、南沙参20重量份～30重量份和益智10重量份～20重量份。

其中，所述免疫制剂中各原料药的重量份分别为淫羊藿23重量份～27重量份、黄精38重量份～42重量份、芡实28重量份～32重量份、麻黄13重量份～17重量份、鹅不食草18重量份～22重量份、沙苑子23重量份～27重量份、连翘33重量份～37重量份、土党参28重量份～32重量份、水栀18重量份～22重量份、山药23重量份～27重量份、牡丹皮18重量份～22重量份、刺五加33重量份～37重量份、白仙茅13重量份～17重量份、扭肚藤13重量份～17重量份、四叶草18重量份～22重量份、马尾连13重量份～17重量份、桑寄生28重量份～32重量份、山大黄18重量份～22重量份、南沙参23重量份～27重量份和益智13重量份～17重量份。

本发明还提供了上述饲料的制备方法，具体包括：

第一步，制备所述中药免疫制剂；

第二步，将第一步得到的免疫制剂和磷酸氢钙、食盐、复合微量元素添加剂、复合维生素添加剂、赖氨酸和蛋氨酸按上述重量份配比均匀混合，混合时间为2～3分钟，混合后通过制粒机制成直径1～3mm颗粒，制粒在45～55℃下真空干燥；

第三步，将玉米、豆粕、鱼粉、小麦按照上述重量份配比取出混合均匀后粉碎，将粉碎好的原料进行混合，混合时间为4～5分钟，通过制粒机制成直径1～3mm颗粒，然后在45～55℃下真空干燥；

第四步，将第二步制成的颗粒和第三步制成的颗粒进行混合，混合时间为4～5分钟，得到颗粒料成品。

所述第一步进一步具体为将各原料药成分分别粉碎至20～40目，按上述重量份混合在一起，然后将其放入体积为药材量的6～12倍并且体积浓度为70％～95％的乙醇溶液中，采用回流提取法，提取2～4次，每次提取时间为1.5～2.5h，提取温度为65℃～85℃，将提取溶液混合、过滤后收集滤液，置于旋转蒸发仪上浓缩，除去乙醇溶剂，干燥，粉碎，获得免疫制剂。

本发明的有益效果：

本发明提供一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料，其包含的免疫制剂可以通过机体调节作用，增强机体的细胞免疫、体液免疫，激活免疫细胞，诱导干扰素的产生，促使病毒不能在猪体细胞中生存繁殖，而发挥抗猪繁殖与呼吸综合征的作用。

具体实施方式

中医理论认为，猪繁殖与呼吸综合征的发生和变化虽错综复杂，但归于两点，即机体内在因素和外在因素相互作用的结果。中兽医学认为这是(正气)与(邪气)斗争的结果。(正气)是畜禽机体各脏腑组织器官的机能活动，以及其对外界环境的适应能力，对致病因素的抵抗能力，康复能力，是以脏腑功能和气血津液等物质为基础的识别异物，排除异物，维持自身内环境平衡和稳定的功能。(邪气)是指外界的六淫、疫病之气，又包括机体阴阳失调所产生的病理变化和病理产物等。机体的健康与否取决于(正气)和(邪气)的强弱，从中兽医学角度分析，属于中医温病，其在猪体的发病转变可用三焦，上焦、中焦、下焦，卫气营血来辨证论治。(虚邪共济)是发病诱因，也就是中医所讲的五脏处于(虚)时病毒乘虚而入，导致邪盛正衰，抗病无力，该病夏季多发。多因外感湿热化火，导致肺气不宣，升降失常，阴阳失调所致。现代医学的免疫系统有防御，自隐和监视3大功能。防御是指抵御各种病原微生物的感染，中兽医学正气防御外邪的作用与之相似；自隐就是指清除自身抗原、排除外源性因素十扰、稳定内环境、维持免疫平衡；免疫监视以防止机体细胞突变为“异己分子”，并通过免疫排斥反应，排斥这些“异己分子”，中兽医学正气协调脏腑经络气血相互依存、相互制约、清除内邪、重新建立阴阳平衡的作用也与之相似。由此可知，中兽医学所说的畜体正气，具有现代兽医学免疫系统的相似功能，免疫系统的器官、组织、细胞可能就是正气的中药物质基础，正邪相争的过程就是免疫反应的过程。因此，整个疾病的发生、发展和变化，都是“正气”和“邪气”相互斗争的反应，正邪斗争贯穿疾病发展的始终，因此，在治疗上本着扶正祛邪，标本兼顾的原则。

基于此，本发明提供一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的免疫制剂，其原料药包括淫羊藿、黄精、芡实、麻黄、鹅不食草、沙苑子、连翘、土党参、水栀、山药、牡丹皮、刺五加、白仙茅、扭肚藤、四叶草、马尾连、桑寄生、山大黄、南沙参和益智。

进一步优选，所述免疫制剂仅由上述原料药制备而成。

所述免疫制剂中各原料药的重量份分别为淫羊藿20重量份～30重量份、黄精35重量份～45重量份、芡实25重量份～35重量份、麻黄10重量份～20重量份、鹅不食草15重量份～25重量份、沙苑子20重量份～30重量份、连翘30重量份～40重量份、土党参25重量份～35重量份、水栀15重量份～25重量份、山药20重量份～30重量份、牡丹皮15重量份～25重量份、刺五加30重量份～40重量份、白仙茅10重量份～20重量份、扭肚藤10重量份～20重量份、四叶草15重量份～25重量份、马尾连10重量份～20重量份、桑寄生25重量份～35重量份、山大黄15重量份～25重量份、南沙参20重量份～30重量份和益智10重量份～20重量份。

进一步优选，所述免疫制剂中各原料药的重量份分别为淫羊藿23重量份～27重量份、黄精38重量份～42重量份、芡实28重量份～32重量份、麻黄13重量份～17重量份、鹅不食草18重量份～22重量份、沙苑子23重量份～27重量份、连翘33重量份～37重量份、土党参28重量份～32重量份、水栀18重量份～22重量份、山药23重量份～27重量份、牡丹皮18重量份～22重量份、刺五加33重量份～37重量份、白仙茅13重量份～17重量份、扭肚藤13重量份～17重量份、四叶草18重量份～22重量份、马尾连13重量份～17重量份、桑寄生28重量份～32重量份、山大黄18重量份～22重量份、南沙参23重量份～27重量份和益智13重量份～17重量份。

最优选，所述免疫制剂中各原料药的重量份分别为淫羊藿25重量份、黄精40重量份、芡实30重量份、麻黄15重量份、鹅不食草20重量份、沙苑子25重量份、连翘35重量份、土党参30重量份、水栀20重量份、山药25重量份、牡丹皮20重量份、刺五加35重量份、白仙茅15重量份、扭肚藤15重量份、四叶草20重量份、马尾连15重量份、桑寄生30重量份、山大黄20重量份、南沙参25重量份和益智15重量份。

各原料药药理如下：

淫羊藿：拉丁名EpimediiFolium，味辛、甘，性温，入肝、肾经，具有补肾阳，强筋骨，祛风湿的功效，主治肾虚阳痿、遗精早泄、腰膝痿软、肢冷畏寒；寒湿痹痛或四肢拘挛麻木等证。

黄精：拉丁名PolygonatiRhizoma，味甘，性平，入肺、脾、肾经，具有养气养阴，健脾润肺，益肾填精的功效，用于脾胃气阴亏虚，食少无力，阴虚肺燥，干咳少痰，阴虚内热之消渴，肾虚精亏、阳痿遗精、头晕耳鸣、目昏眼花等证。

芡实：味甘，涩，性平。归脾、肾经。具有益肾固精，补脾止泻，祛湿止带的功能，主治梦遗滑精，脾虚泄泻，脾虚白浊，带下等证。

麻黄：味辛、微苦，性温，入肺、膀胱经，具有发寒解表，宣肺平喘，利水消肿的作用，主要用于外感风寒之发热无汗等表实证；风湿性痹痛；寒邪犯肺或热邪壅肺至咳喘气逆，水肿，小便不利等证。

鹅不食草：味辛，性温，入肺、肝经，具有祛风寒，通鼻窍，止咳祛痰，散瘀消肿的作用，用于风寒表证，鼻塞流涕及鼻渊，咳嗽痰多，百日咳，疮痈肿痛等证。

沙苑子：性温，味甘，具有温补肝肾，固精，缩尿，明目的作用，用于肾虚阳痿，遗精早泄，尿频，或白带过多，腰膝酸软，腰痛；肝肾不足，目昏目暗，视力减退等证。

连翘：味苦，性微寒，入心、肝、胆、小肠经，有清热解毒，消肿散结的功效，用于痈疽，瘰疬，乳痈，丹毒，风热感冒，温病初起，温热入营，高热烦渴，神昏发斑，热淋尿闭等证。

土党参：拉丁名radixcampanumoeajavanicae，为桔梗科金钱豹属植物大花金钱豹与金钱豹的根，味甘，性平，归肺、脾经，具有健脾益气、补肺止咳，下乳的功效，主治劳虚内伤，气虚乏力，心悸，多汗，脾虚泄泻，白带，乳汁稀少，脾虚咳嗽等证。

水栀：为茜草科栀子属植物大花栀子的果实，味苦，性寒，具有清热解毒，消肿止痛的功效，主治热毒，黄疸，肾炎水肿，挫伤扭伤等证。

山药：拉丁名dioscoreaerhizoma，味甘、性平，入肺、脾、胃经，有补脾养胃，益肺固肾，养阴生津的作用，主治脾胃虚弱，脾失健运之食少纳差，脘闷腹泻等证。

牡丹皮：拉丁名MoutanCortex，味苦、辛，性微寒，入心、肝、肾经，有清热凉血、活血化瘀的作用，用于热毒炽盛之阴虚发热、湿热结毒之肠痈、气结血瘀、口干、舌红绛等证。

刺五加：为五加科五加属植物刺五加的根、根茎或茎叶，拉丁名AcanthopanacisSenticosiRadixetRhizomaseuCaulis，味辛、苦、微甘，性温，入脾、肾、心经，具有益气健脾，补肾安神，祛风除湿的功效，用于风寒湿痹、腰膝疼痛、筋骨痿软、行动迟缓、体虚羸弱、跌打损伤、骨折、水肿、脚气、阴下湿痒等证。

白仙茅：为川续断科刺续断属植物大花刺参的根，味甘、微苦，性温，具有益肺健脾，补肾壮阳，活血舒筋的功效，主治肺虚咳嗽，脾虚消化不良，肾虚阳痿，带下，子宫脱垂，跌打损伤，骨折等证。

扭肚藤：为木犀科茉莉属植物扭肚藤的枝叶，味微苦，性凉，具有清热，利湿，解毒的功效，主治湿热泻痢，腹痛里急后重，风湿热痹，四肢肿痛，疮疥等证。

四叶草：为茜草科拉拉藤属植物四叶葎的全草，味甘、苦，性平，具有清热解毒，利尿消肿的功效，主治热淋，痢疾，咳血，赤白带下，小儿疳积，跌打损伤，毒蛇咬伤等证。

马尾连：为毛莨科唐松草属植物金丝马尾连、昭通唐松草、高原唐松草、多叶唐松草的根及根茎，味苦，性寒，归心、肝、大肠经，具有清热燥湿，泻火解毒的功效，主治湿热泄泻，痢疾，黄疸，感冒发热，麻疹，目赤肿痛等证。

桑寄生：味苦，甘，性平，入肝、肾经，具有补肝肾、强筋骨、祛风湿、安胎元的作用，用于肝肾不足所致的腰酸疼痛，筋骨痿软，足膝无力，肝肾不足，精血虚亏，胎元不固之胎动不安，腰腹疼痛等证。

山大黄：拉丁名RadixetRhizomeRheiFranzenbachii，为蓼科植物波叶大黄的根及根茎，味苦；性寒，归胃；大肠经，具有泻热解毒；凉血行瘀的功效，主治湿热黄疸；痢疾；经闭腹痛；吐血衄血；跌打瘀痛；痈肿疔毒；口舌糜烂；烧烫伤等证。

南沙参：味甘、微苦，性微寒，入肺、胃经，有润肺止咳，养胃生津的作用，主要用于阴虚肺燥、干咳少痰、劳嗽痰血，胃阴不足、口感咽燥、大便秘结、舌红少苔等证，可提高细胞免疫和非特异性免疫力，抑制体液免疫，具有调节免疫平衡的功能。

益智：味辛，性温，归脾、肾经，具有暖肾固精缩尿，温脾止泻摄唾的功效，主治肾虚遗尿，小便频数，遗精白浊，脾寒泄泻，腹中冷痛的功效。

本发明还提供了上述中药免疫制剂的制备方法，具体为：

将各原料药成分分别粉碎至20～40目，按上述重量份混合在一起，然后将其放入体积为药材量的6～12倍并且体积浓度为70％～95％的乙醇溶液中，采用回流提取法，提取2～4次，每次提取时间为1.5～2.5h，提取温度为65℃～85℃，将提取溶液混合、过滤后收集滤液，置于旋转蒸发仪上浓缩，除去乙醇溶剂，干燥，粉碎，获得免疫制剂。

本发明还提供了一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料，其原料包括上述免疫制剂、玉米、豆粕、鱼粉、磷酸氢钙、小麦、食盐、复合微量元素添加剂、复合维生素添加剂、赖氨酸和蛋氨酸。

进一步优选，所述饲料仅由上述原料制备而成。

所述原料中各重量份分别为上述免疫制剂2重量份～4重量份，玉米50重量份～60重量份、豆粕8重量份～12重量份、鱼粉5重量份～10重量份、磷酸氢钙1重量份～2重量份、小麦10重量份～16重量份、食盐0.5重量份～1重量份、复合微量元素添加剂0.1重量份～0.3重量份、复合维生素添加剂0.3重量份～0.6重量份、赖氨酸0.05重量份～0.1重量份、蛋氨酸0.05重量份～0.1重量份。

进一步优选，所述原料中各重量份分别为上述免疫制剂3重量份，玉米55重量份、豆粕10重量份、鱼粉8重量份、磷酸氢钙2重量份、小麦13重量份、食盐1重量份、复合微量元素添加剂0.2重量份、复合维生素添加剂0.5重量份、赖氨酸0.1重量份、蛋氨酸0.1重量份。

所述复合维生素添加剂可以采用市售的任何复合维生素添加剂，优选北京优利保生物技术有限公司生产的优维素。

所述复合微量元素添加剂可以采用市售的任何复合微量元素添加剂，优选北京优利保生物技术有限公司生产的优利保。

本发明还提供了上述饲料的制备方法，具体包括：

第一步，制备所述中药免疫制剂；

第二步，将第一步得到的免疫制剂和磷酸氢钙、食盐、复合微量元素添加剂、复合维生素添加剂、赖氨酸和蛋氨酸按上述重量份配比均匀混合，混合时间为2～3分钟，混合后通过制粒机制成直径1～3mm颗粒，制粒在45～55℃下真空干燥；

第三步，将玉米、豆粕、鱼粉、小麦按照上述重量份配比取出混合均匀后粉碎，将粉碎好的原料进行混合，混合时间为4～5分钟，通过制粒机制成直径1～3mm颗粒，然后在45～55℃下真空干燥；

第四步，将第二步制成的颗粒和第三步制成的颗粒进行混合，混合时间为4～5分钟，得到颗粒料成品。

以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式，借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题，并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。

实施例1免疫制剂1

将淫羊藿25g、黄精40g、芡实30g、麻黄15g、鹅不食草20g、沙苑子25g、连翘35g、土党参30g、水栀20g、山药25g、牡丹皮20g、刺五加35g、白仙茅15g、扭肚藤15g、四叶草20g、马尾连15g、桑寄生30g、山大黄20g、南沙参25g和益智15g分别粉碎至40目，混合在一起，然后将其放入体积为药材量的10倍并且体积浓度为90％的乙醇溶液中，采用回流提取法，提取3次，每次提取时间为2h，提取温度为75℃，将提取溶液混合、过滤后收集滤液，置于旋转蒸发仪上浓缩，除去乙醇溶剂，干燥，粉碎，获得免疫制剂。

实施例2免疫制剂2

将淫羊藿23g、黄精38g、芡实28g、麻黄13g、鹅不食草18g、沙苑子23g、连翘33g、土党参28g、水栀18g、山药23g、牡丹皮18g、刺五加33g、白仙茅13g、扭肚藤13g、四叶草18g、马尾连13g、桑寄生28g、山大黄18g、南沙参23g和益智13g分别粉碎至40目，混合在一起，然后将其放入体积为药材量的10倍并且体积浓度为90％的乙醇溶液中，采用回流提取法，提取3次，每次提取时间为2h，提取温度为75℃，将提取溶液混合、过滤后收集滤液，置于旋转蒸发仪上浓缩，除去乙醇溶剂，干燥，粉碎，获得免疫制剂。

实施例3免疫制剂3

将淫羊藿27g、黄精42g、芡实32g、麻黄17g、鹅不食草22g、沙苑子27g、连翘37g、土党参32g、水栀22g、山药27g、牡丹皮22g、刺五加37g、白仙茅17g、扭肚藤17g、四叶草22g、马尾连17g、桑寄生32g、山大黄22g、南沙参27g和益智17g分别粉碎至40目，混合在一起，然后将其放入体积为药材量的10倍并且体积浓度为90％的乙醇溶液中，采用回流提取法，提取3次，每次提取时间为2h，提取温度为75℃，将提取溶液混合、过滤后收集滤液，置于旋转蒸发仪上浓缩，除去乙醇溶剂，干燥，粉碎，获得免疫制剂。

实施例4饲料

将实施例1制备的的免疫制剂30g和磷酸氢钙20g、食盐10g、复合微量元素添加剂优利保2g、复合维生素添加剂优维素5g、赖氨酸1g和蛋氨酸1g均匀混合，混合时间为3分钟，混合后通过制粒机制成直径2mm颗粒，制粒在50℃下真空干燥，将玉米550g、豆粕100g、鱼粉80g、小麦130g混合均匀后粉碎，将粉碎好的原料进行混合，混合时间为5分钟，通过制粒机制成直径2mm颗粒，然后在50℃下真空干燥，将前面制成的颗粒进行混合，混合时间为5分钟，得到颗粒料成品。

实施例5体外病毒影响

主要试剂及仪器

细胞生长液，低糖DMEM，GIBCO产品，加10％新生小牛血清(青岛四季青生物有限公司)，每100ml营养液加1ml的10000IU的青霉素和链霉素。细胞维持液，除新生小牛血清为2％外，其余同细胞生长液。MTT，3-(4，6-二甲基噻唑-2-xl)-2，5-乙苯基-四唑溴盐，Amresco公司产品；二甲基亚砜(DMSO)，分析纯，上海凌缝化学试剂有限公司产品；DG3022型酶联免疫检测仪，国营华东电子管厂产品。

药物准备：

将本发明实施例1制备的免疫制剂配置成60mg/ml，0.22μm微孔滤膜过滤除菌。经预试验测定对Marc-145细胞的最大安全浓度为6.0mg/ml，用细胞维持液稀释成3000μg/ml，4℃保存备用。

病毒准备

猪繁殖与呼吸综合征病毒，本实验室-20℃保存，临用前37℃解冻后，用细胞维持液稀释成100TCID₅₀备用。

试验方法

在96孔板上接种Marc-145细胞，培养24h形成单层后分别采用先加药后加病毒，先加病毒后加药物，药物与病毒孵育后加三种方式。即先加药物，孵育2h后加入病毒液；先加病毒，孵育2h后除去病毒液再加药物；药物和病毒孵育2h后加入到细胞。继续培养72h，按MTT吸收法用酶联免疫检测仪测定各孔OD₅₇₀值，作为药物对抗病毒感染细胞的指标。OD值越大，抗病毒效果越好。

数据处理

计量资料采用表示，组间比较采用χ²检验，所有资料均采用SPSS12.0统计软件处理。

结果

免疫制剂抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞的作用，结果见表1。

表1免疫制剂抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染细胞的作用(OD₅₇₀值)

药物浓度(μg/ml)	先药物后病毒	先病毒后药物	病毒与病毒孵育后加
				3000	0.597±0.051b	0.580±0.021b	0.591±0.035b
病毒对照	0.311±0.039a	0.299±0.040a	0.308±0.049a
				细胞对照	0.619±0.033	0.592±0.046	0.601±0.043

注：与细胞对照组比较，^aP＜0.01，与病毒对照组比较，^bP＜0.01

表1显示，三种加药方式均显示，采用本发明提供的免疫制剂有较强的抵抗病毒感染细胞的作用，对猪繁殖与呼吸综合征有较强的抑制作用，与病毒对照组相比，差异显著，P＜0.01。

实施例6疗效情况

实验组试验饲料：实施例4制备的饲料1。

对照组药物：头孢噻肟钠，1g/支，广东金地药业有限公司生产。

试验动物

病例来源与临床检查

2013年9月，青岛某地等地多个猪场的保育猪，整群发生不同程度的呼吸困难(腹式呼吸)、精神沉郁、嗜睡、食欲不振等情况，严重者咳嗽、气喘，呼吸频率高达80次/min以上，耳部、腹部和腿部发绀等症状。剖检病猪可见肺充血、出现水肿，局灶性肺炎；有的有胸腔积液！、肺门淋巴结肿大等症状。临床上曾用过多种药物治疗如磺胺嘧啶，青！链霉素等均未见效果，猪群进行过猪瘟、猪蓝耳病和链球菌病免疫。

实验室检查

随机无菌采血10份，分离血清，参考汤景元文献的方法PRRSV的RT-PCR检测(汤景元，姜平，邓雨修，等，猪繁殖与呼吸综合征病毒和致病性沙门氏菌的混合感染[J]，中国兽医学学，2005(7)：337-338)。

病毒总RNA的提取

取血清0.25ml加入1mlTrizol试剂，室温孵育5min，加入0.2ml氯仿，充分晃动离心管15s，室温孵育2-3min，4℃、12000r/min离心15min，转以上清液于另一新的1.5ml离心管，加入0.5ml异丙醇，充分晃动，放置10min，4℃、12000r/min离心10min，沉淀核酸，弃上清液，加入75％乙醇1ml，震摇，洗涤核酸，4℃、8000r/min离心5min，弃上清液，室温干燥沉淀5min，加入40μlDEPC水溶解沉淀物。

反转录

取下游引物GP5.20.5μl，10mmol/ldNTPs0.25μl，5×反转录buffer2.0μl和总RNA7.0μl，65℃水浴10min，然后加入M-MLV反转录酶0.25μl，用无菌双蒸水补至总体积10.0μl，37℃水浴1h。

PCR

反应总体积25μl。上游引物GP5.10.5μl，下游引物GP5.20.5μl，2.5mmol/ldNTPs2.0μl，10×Mg²⁺freebuffer2.5μl，2.5mmol/lMg²⁺1.5μl，rTap酶2.5U，CDNA1μl，用灭菌双蒸水补至总体积25μl。反应循环参数，94℃预变性5min；94℃变性45s，59℃退火45s，72℃延伸60s，共进行35循环；然后72℃延伸10min。取PCR产物进行2％琼脂糖凝胶电泳。

RT-PCR检测结果

10份血清样品结果全部为阳性，根据临床症状、剖检变化和血清学检测结果，诊断为主要病原为猪繁殖与呼吸综合征病毒。

分组治疗

取600头病猪分成3组，分别放入3个打扫干净并消毒的隔离猪舍内。免疫制剂饲料组200头，采用本发明实施例4提供的饲料进行喂食；抗生素对照组200头，每日每头肌肉注射头孢噻肟钠1支，同时采用常规玉米饲料喂食，连用7天，空白对照组200头不给任何药物，喂食常规玉米饲料。三组均喂食7天。

疗效判定

观察猪只的精神、采食、体温、呼吸、皮肤和耳朵颜色及死亡等情况，按如下标准判断疗效。

治愈：用药后呼吸平稳，精神、饮食、体温、皮肤和耳朵颜色恢复正常。

好转：用药后症状明显减轻，呼吸、精神、体温、饮食好转。

无效：用药后症状不减轻，甚至加重或死亡。

总有效率＝治愈率+好转率。

结果

三组疗效比较，结果见表2。

表2三组疗效比较

组别

治愈数

治愈率

好转数

好转率

无效数

总有效率

免疫制剂

178

89.0％

12

6.0％

10

95.0％

抗生素

85

42.5％

63

31.5％

52

74.0％

空白对照

0

0.0％

25

12.5％

175

12.5％

从表2可以看出，采用本发明提供的饲料，较抗生素更能很好的治疗，两组差异显著。

所有上述的首要实施这一知识产权，并没有设定限制其他形式的实施这种新产品和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息，上述内容修改，以实现类似的执行情况。但是，所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (7)

1.一种用于防治猪繁殖与呼吸综合征的饲料，其特征在于：原料包括用于防治猪繁殖与呼吸综合征的免疫制剂、玉米、豆粕、鱼粉、磷酸氢钙、小麦、食盐、复合微量元素添加剂、复合维生素添加剂、赖氨酸和蛋氨酸。

2.如权利要求1所述的饲料，其特征在于：所述原料中各重量份分别为上述免疫制剂2重量份～4重量份，玉米50重量份～60重量份、豆粕8重量份～12重量份、鱼粉5重量份～10重量份、磷酸氢钙1重量份～2重量份、小麦10重量份～16重量份、食盐0.5重量份～1重量份、复合微量元素添加剂0.1重量份～0.3重量份、复合维生素添加剂0.3重量份～0.6重量份、赖氨酸0.05重量份～0.1重量份、蛋氨酸0.05重量份～0.1重量份。

3.如权利要求1或2所述的饲料，其特征在于：所述防治猪繁殖与呼吸综合征的免疫制剂的原料药包括淫羊藿、黄精、芡实、麻黄、鹅不食草、沙苑子、连翘、土党参、水栀、山药、牡丹皮、刺五加、白仙茅、扭肚藤、四叶草、马尾连、桑寄生、山大黄、南沙参和益智。

4.如权利要求1至3所述的饲料，其特征在于：所述免疫制剂中各原料药的重量份分别为淫羊藿20重量份～30重量份、黄精35重量份～45重量份、芡实25重量份～35重量份、麻黄10重量份～20重量份、鹅不食草15重量份～25重量份、沙苑子20重量份～30重量份、连翘30重量份～40重量份、土党参25重量份～35重量份、水栀15重量份～25重量份、山药20重量份～30重量份、牡丹皮15重量份～25重量份、刺五加30重量份～40重量份、白仙茅10重量份～20重量份、扭肚藤10重量份～20重量份、四叶草15重量份～25重量份、马尾连10重量份～20重量份、桑寄生25重量份～35重量份、山大黄15重量份～25重量份、南沙参20重量份～30重量份和益智10重量份～20重量份。

5.如权利要求1至4所述的饲料，其特征在于：所述免疫制剂中各原料药的重量份分别为淫羊藿23重量份～27重量份、黄精38重量份～42重量份、芡实28重量份～32重量份、麻黄13重量份～17重量份、鹅不食草18重量份～22重量份、沙苑子23重量份～27重量份、连翘33重量份～37重量份、土党参28重量份～32重量份、水栀18重量份～22重量份、山药23重量份～27重量份、牡丹皮18重量份～22重量份、刺五加33重量份～37重量份、白仙茅13重量份～17重量份、扭肚藤13重量份～17重量份、四叶草18重量份～22重量份、马尾连13重量份～17重量份、桑寄生28重量份～32重量份、山大黄18重量份～22重量份、南沙参23重量份～27重量份和益智13重量份～17重量份。

6.权利要求1至5所述饲料的制备方法，其特征在于，包括：

第一步，制备所述中药免疫制剂；

第二步，将第一步得到的免疫制剂和磷酸氢钙、食盐、复合微量元素添加剂、复合维生素添加剂、赖氨酸和蛋氨酸按上述重量份配比均匀混合，混合时间为2～3分钟，混合后通过制粒机制成直径1～3mm颗粒，制粒在45～55℃下真空干燥；

第三步，将玉米、豆粕、鱼粉、小麦按照上述重量份配比取出混合均匀后粉碎，将粉碎好的原料进行混合，混合时间为4～5分钟，通过制粒机制成直径1～3mm颗粒，然后在45～55℃下真空干燥；

第四步，将第二步制成的颗粒和第三步制成的颗粒进行混合，混合时间为4～5分钟，得到颗粒料成品。

7.如权利要求6所述饲料的制备方法，其特征在于：所述第一步进一步具体为将各原料药成分分别粉碎至20～40目，按上述重量份混合在一起，然后将其放入体积为药材量的6～12倍并且体积浓度为70％～95％的乙醇溶液中，采用回流提取法，提取2～4次，每次提取时间为1.5～2.5h，提取温度为65℃～85℃，将提取溶液混合、过滤后收集滤液，置于旋转蒸发仪上浓缩，除去乙醇溶剂，干燥，粉碎，获得免疫制剂。