CN104955462A

CN104955462A - 用于治疗或预防龋齿的组合物、用途和方法

Info

Publication number: CN104955462A
Application number: CN201380071453.7A
Authority: CN
Inventors: 金俊; 丹尼斯·赫拉德·茨维特科维什
Original assignee: APOLLONIA HEALTH Inc
Current assignee: APOLLONIA HEALTH Inc
Priority date: 2012-11-26
Filing date: 2013-11-25
Publication date: 2015-09-30
Also published as: US20200179258A1; WO2014078942A1; US20150297490A1; CA2930455A1; HK1215682A1

Abstract

本发明提供了用于抑制促龋齿细菌生长的组合物、其用途和方法。所述组合物含有木糖醇、柠檬酸钠、碳酸氢钠、阴离子聚合物和可接受的载体材料。所述组合物可以倾向于用于治疗或预防由促龋齿细菌所致的病症。所述组合物可以进一步倾向于用于诸如儿童、青少年的患者或遭受对有毒物质高度易感性的患者。

Description

用于治疗或预防龋齿的组合物、用途和方法

相关申请

本申请要求享有2013年11月26日提交的美国临时专利申请号61/729,804的优先权，其内容结合于本文中作为参考。

技术领域

本发明涉及治疗或预防龋齿的组合物和方法。更具体而言，本发明涉及用于抑制促龋齿细菌(致龋齿细菌，caries-causing bacteria)生长的组合物和方法。

背景技术

龋齿是口腔有害的病症。龋齿能够引起广泛的牙冠残缺，根尖周组织的细菌性病症，或甚至损失患病牙齿要素。其特征在于牙釉质和牙本质在各个发展阶段脱矿质而直至其影响指髓间隙。当病灶越过釉质牙本质边界时，就会观察到牙髓组织的炎性反应，随之在某些情况下形成反应牙本质。

龋齿是由繁殖于口中并产生最终导致牙釉质溶解的酸的细菌引起的。这些产酸细菌包括变形链球菌(Streptococcus mutans)(变异链球菌(S.mutans))、远源链球菌(Streptococcus sobrinus)和乳酸杆菌等。这些细菌是附着于牙齿表面的牙菌斑、细菌基质和胞外物质的生物膜环境的物种。在适当的条件下，这些细菌种群将上升而周围的牙菌斑pH值会下降。这些细菌都是居住于牙菌斑中最耐酸的生物，在酸性环境中数量上将会增加，并最终成为牙菌斑集团中的主要成员。一旦附着后，细菌会将六碳膳食糖，如葡萄糖、蔗糖和果糖代谢成乳酸。这种情况最终会导致牙釉质溶解，导致龋齿的发展。由于牙菌斑或唾液中变形链球菌相对于其它菌种的比例和龋齿的存在或未来爆发风险之间存在强的相关性，牙菌斑或唾液中的变形链球菌可以起到龋齿活动状态和龋齿风险或易感性的标志。这些标志在龋齿的诊断和治疗中扮演了越来越重要的角色。

最近，已经很清楚的是，牙菌斑实际上由成百上千的不同的细菌类群组成。大多数这些细菌在称为牙菌斑或生物膜的混杂集团中存在于牙齿表面上。因此口腔充当了这些细菌的储库。尽管大多数这些细菌是共生的，这意味着它们不会对人类宿主产生不利影响，但是其它的却是致病的并能够导致蛀牙。此外，这些致病细菌已经发现能够导致称为心内膜炎的危及生命疾病。

据发现变形链球菌还有助于感染性心内膜炎。感染性心内膜炎对原生(正常)和人工心脏瓣膜都是潜在的致死性感染，并且如果不及时治疗可能是致命的。变形链球菌在这些瓣膜表面上形成生物膜，并通常是各种病原细菌的混合群体。由于这些细菌会找到其经由血液流到达这些瓣膜的途径并且血液流通常是无菌的，则通常对于细菌会有极少机会导致这些感染。唯一例外的是当致病细菌，如变形链球菌，在牙科手术过程期间进入血流中。因此，感染的可能性直接关系到口腔中发现的传染性细菌的储层。

先前对于龋齿的矫正工作围绕使用标准牙刷去除牙菌斑展开。在今天广泛使用还有电动刷、牙线和辅助设备如代理刷(proxy brushes)。此外，众多的牙膏和含有各种补充剂的漱口水被吹捧为预防龋齿的助手。例如，氟化物通常作为减缓牙腐过程的产品进行出售。然而，这种治疗或预防龋齿方法的有效性是有争议的。牙菌斑，即使遵照口腔卫生苛刻方案，其可以包括使用牙线、刷牙和定期看牙医，都只能部分从口腔去除。此外，许多牙膏和漱口水含有有毒的补充剂，如氟化物和三氯生，这对于非常年幼的儿童可能是有毒的。

2010年，美国卫生局(US Surgeon)局长表示，龋齿是儿童最常见的慢性疾病；它比哮喘频繁五倍和比花粉热症频繁七倍。1999-2004年进行的全国健康和营养体检调查(National Health and Nutrition ExaminationSurvey)发现，在2-11岁龄的美国儿童中将近二分之一的儿童在他或她的乳牙上具有至少一个龋洞。(参见United States,National Health andNutrition Examination Survey，1999-2004)。美国科学院儿童牙科(AAPD)降低婴幼儿和青少年牙齿患者龋齿发病率的准则建议除了定期专业牙科服务之外还要加氟。儿童加氟的建议包括2岁龄儿童加氟牙膏的“涂抹”量和2-5岁龄儿童的“豌豆粒大小”量。在掂量儿童使用氟化物的风险收益概况中，AAPD认为轻度氟中毒(牙齿上可见白色斑点标识的过量氟消耗)相比于预防牙科疾病的严重健康风险是微不足道的健康危害(参见American Academy Of Pediatric Dentistry，Guideline on Infant Oral HealthCare，2012，Reference Manual V 35/NO 613/14)。

氟化物也广泛用于口腔卫生产品。例如，许多牙膏和漱口水都含有氟化物。此外，在加拿大和美国的许多城市都实行公共水加氟超过了60年。

然而，全身使用氟化物预防龋洞因为癌症和氟化物之间的潜在相关性而是有争议的。据美国癌症协会(American Cancer Society)，骨肉瘤(骨癌)是每年在美国400个儿童和青少年患癌症的稀有形式。许多长期动物和人类的研究数据已被收集，并且在某些研究中，在饮用水较高水平的氟化物与小鼠和人类、包括儿童中骨肉瘤发生率升高之间已经找到了相关性(参见Levy M，Leclerc BS.Fluoride in drinking water and osteosarcomaincidence rates in the continental United States among children andadolescents.Cancer Epidemiol.2012；36:83-88；参见Comber H，Deady S，Montgomery E，Gavin A.Drinking water fluoridation and osteosarcomaincidence on the island of Ireland.Cancer Causes Control.2011；22:919-924)。

在其2011年题为在龋齿预防中木糖醇使用指南(Guideline on XylitolUse in Caries Prevention)的出版物中，AAPD建议使用木糖醇预防中度到高风险儿童患者的龋齿。该指南建议每天分剂量给予3-8克木糖醇剂量预防所有年龄的儿童的龋齿。然而，目前可用的口腔卫生制品和发明，即使它们确实包含木糖醇，但往往还会包括氟化物和醇等有毒物质。因此这些物质往往在摄入时是有害的，因而特别不适合儿童和其它虚弱人群的龋齿预防和治疗组合物。

尽管以前人们对配制治疗或预防龋齿的治疗付诸了大量努力，但仍然需要龋齿的有效治疗。

对于预防和治疗龋齿的不含氟口腔组合物仍需要改进。提供预防和治疗龋齿适合儿童和大众群体中其它龋齿-脆弱群体使用的口腔组合物仍存需要。此外，提供倾向于保持口腔环境高pH值的组合物仍存需要，因为引起龋齿的细菌在酸性环境中会茁壮成长。此外，提供长久持效并不含吞下有害的有毒物质的组合物仍存需要。

发明内容

在本发明的一个方面中，提供了一种用于抑制促龋齿细菌生长的组合物，包含碳酸氢钠、柠檬酸钠、至少一种阴离子聚合物和木糖醇。在某些实施方式中，碳酸氢钠浓度为0.1％-1.5％w/w，在其它实施方式中，柠檬酸钠浓度为0.1％-1％w/w，以及在还有进一步的实施方式中，碳酸氢钠和柠檬酸钠浓度任一者或两者都为0.5％w/w。在还有进一步的实施方式中，碳酸氢钠与柠檬酸钠之比为1:1-2:1。

在某些实施方式中，阴离子聚合物是海藻酸钠，而在进一步的实施方式中，海藻酸钠浓度为0.05％-0.5％w/w，或为0.1％w/w。在某些实施方式中，木糖醇浓度为15％-40％w/w，或为30％w/w。

在本发明的某些方面中，组合物进一步含有至少一种赋形剂。在某些实施方式中，赋形剂是粘合剂、润滑剂、崩解剂、悬浮剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂、悬浮剂、水、甘油、调味剂、乳化剂、或氢化葡萄糖糖浆。

在组合物含有水的某些实施方式中，水浓度可以往往为35％-85％w/w，50％-75％w/w，或为58.75％w/w。在组合物含有甘油的某些实施方式中，甘油浓度可以往往为10％-30％w/w，15％-25％w/w或为10％。在组合物含有氢化葡萄糖糖浆的某些实施方式中，氢化葡萄糖(聚葡糖醇，polyglycitol)浓度可以往往为0％-15％w/w或5％-10％w/w。

在本发明的某些方面中，组合物进一步含有至少一种天然调味剂。天然调味剂浓度可以往往小于0.1％w/w或可以为0.05％w/w。在某些实施方式中，天然调味剂是天然水果味如柠檬。

在本发明的某些方面中，组合物含有聚山梨酸酯20。在组合物含有聚山梨酸酯20的某些实施方式中，聚山梨酸酯20浓度可以往往为0.01％-0.1％w/w，或可以为0.1％。

在本发明的某些方面中，组合物含有抗微生物剂。在组合物含有对羟基苯甲酸甲酯(methylparaban)作为抗微生物剂的某些实施方式中，对羟基苯甲酸甲酯浓度可以往往小于0.1％w/w。

在本发明的某些方面中，组合物可以往往为口服制剂如液体、漱口剂、洁齿剂(dentifrice)、洞护剂(varnish)、凝胶剂、食品、糖食、冰淇淋、口香糖、糖浆、乳膏、片剂、囊片、胶囊、咀嚼片、速溶片剂、泡腾片、硬明胶胶囊、软明胶胶囊、散剂、或液体悬浮剂。

在本发明的另一方面中，提供了组合物治疗或预防患者龋齿的用途。在一些方面中，组合物可以由儿童、青少年或遭受对有毒物质高度易感性的患者使用。

在本发明进一步的实施方式中，提供了组合物用于制备治疗或预防龋齿、治疗或预防由促龋齿细菌所致的病症的制剂，制备用于治疗或预防由促龋齿细菌所致的病症的制剂，抑制促龋齿细菌生长，以及制备抑制促龋齿细菌生长的制剂的用途。在某些实施方式中，促龋齿细菌是变形链球菌、远源链球菌、或乳酸杆菌。

附图说明

为了更好地理解本文中所述的系统和方法，并更清楚地显示它们如何可以付诸实施，将通过举例的方式参照附图，其中：

图1显示了生物膜采用各种测试治疗剂温育1min之后培养基的pH。

图2显示了生物膜采用各种测试治疗剂温育1min之后6小时培养基的pH降低。

图3显示了生物膜采用各种测试治疗剂温育1min之后8小时培养基的pH降低。

图4显示了采用各种测试治疗剂温育1min之后1小时变形链球菌细胞的存活率，其中存活率采用Presto Blue^TM分析法进行测定(*p<0.05)。

图5显示了采用各种测试治疗剂温育1min之后1小时变形链球菌细胞的存活率，其中存活率采用菌落形成单位(CFU)分析法进行测定(*p<0.05)。

具体实施方式

本发明已经参照具体实施方式进行了描述。然而，本领域的技术人员显而易见的是，各种变体和修改能够作出，而不会偏离本文中所述的本发明的范围。

具体而言，大量的具体细节进行阐述是为了提供对本文中所述的实施方式的彻底理解。然而，本领域中普通技术人员应该理解的是，本文中所述的实施方式可以进行实践而无需这些具体细节。在其它情况下，公知的方法、过程步骤和组分没有进行详细描述，以使之不会混淆本文中所述的实施方式。此外，这种描述不应该以任何方式认为是限制本文中所述的实施方式的范围，而应当作为仅仅是描述本文中所述的各个实施方式的实施。

本文中所述用于治疗和预防龋齿的组合物尤其适用于向儿童和其它脆弱群体给药。目前还没有适合这些消费者专门配制用于改善口腔预防和治疗、仅包括一般认为安全(GRAS)的成分、提高pH改善矿化以及增加功效持续时间的商购可获得制剂。

由于儿童往往具有比成人较弱的免疫系统，父母一般都会避免有关其儿童健康的甚至是很小的风险。本发明倾向于通过使用提供持久效能的生物粘合剂材料和安全成分提高口腔pH而提供对于最龋齿脆弱的年龄人群、3-12岁龄儿童的龋齿防护解决方案。然而，技术人员将理解的是，本文中所述的组合物可以适用于其他人群，包括成年和老年人群。

在本发明的一个实施方式中，提供了一种用于治疗和预防龋齿的组合物，其倾向于提高牙齿环境的pH。技术人员将理解的是，龋齿是由于繁殖于口腔中的细菌产生酸，导致牙釉质溶解而发生的。口内部pH平衡确定了去矿质(从牙釉质中失去矿物质，主要是钙的过程)和再矿化(牙釉质重新获得矿质的过程)多快发生而决定人的口中龋齿发生速率。当pH范围下降低于5.5时，主要发生去矿质，而如果低pH保持较长一段时间，则龋齿的发生急剧增加。然而，目前可用的口腔卫生产品往往都有低pH。

本发明提供了提高口腔pH促进再矿化和防止牙釉质脱矿的卫生用品。在某些实施方式中，组合物含有碳酸氢钠。在还有进一步的实施方式中，组合物含有柠檬酸钠。这些成分倾向于保持口腔环境的高pH。当这两种盐组合于水性溶液中时，阴离子柠檬酸根和碳酸氢根充当碱化剂作用而使溶液pH升高，从而提供当存在于口的口腔中时倾向于提高牙齿环境pH的组合物。

在某些实施方式中，碳酸氢钠含量范围可以为0.1％-1.5％w/w。在还有进一步的实施方式中，柠檬酸钠的范围可以为0.1％-1％w/w。在替代实施方式中，碳酸氢钠与柠檬酸钠的比率倾向于为1:1至2:1。

无论漱口水或是牙膏中的活性成分是否都是抗细菌或类氟釉质保护剂，技术人员将认识到，牙齿保健从业者和厂商的一般建议在采用标准口腔防护剂洗漱或刷牙之后要克制吃或喝30分钟。对于大众人群，包括活跃的成年人、繁忙的父母和非患病儿童，消除30分钟的等待时间将是有利的。

本发明的实施方式提供了用于控释龋齿预防和治疗成分的组合物。在某些实施方式中，组合物包含阴离子聚合物吸收活性成分并随后由于发生水合而释放活性成分。在进一步的实施方式中，组合物包含海藻酸钠，这是在褐藻的细胞壁中天然发现的，用于控制组合物中其它化学物质的释放。这种控释物质可以倾向于降低施加本文中组合物之后的等待时间。

在某些实施方式中，天然生物粘合剂和控释物质海藻酸钠可以倾向于用于延长组合物成分，如木糖醇、碳酸氢钠和柠檬酸钠在口腔中的有益效果。海藻酸钠的含量可以倾向于为0.05％-0.5％w/w。

本发明要求保护的组合物的实施方式由源自天然源的成分或是公认安全(GRAS)材料的成分组成。这些安全成分可以倾向于用于预期消费者，特别是儿童的误食。

尽管缺乏对于氟化物是无害的明确实证，但是因为其在龋齿预防中已知的健康益处，氟化物广泛用于口腔卫生产品中。其它已知的制剂包括水可溶性钙盐，用于防止或治疗龋洞，但是技术人员将会理解的是，使用钙盐可以倾向于引起不良反应。这些不良反应包括钙过量，特别是如果预想的使用者群是喝均质牛奶或消费含钙丰富的食物的儿童时(更会产生钙过量)。其它公知用于预防和治疗龋齿的组合物倾向于包含醇，这是在消费时充当公知的抑制剂的物质。

本发明的实施方式倾向于不含醇、氟化物或其他认为在吞下时有风险的化学物质。本申请要求保护的本发明提供了有效的龋齿预防而未使用如果误食能够对使用者引起健康风险的有害化学试剂。

本发明的实施方式包括木糖醇，这是在许多食物如浆果、燕麦和蘑菇中天然发现的糖醇。木糖醇可以倾向于降低促龋齿细菌粘附于细胞表面的能力并倾向于抑制细菌将六碳膳食糖代谢成乳酸。

在一个优选的实施方式中，组合物可以倾向于包含在分开的剂量中提供的3-8克木糖醇。本文中所述的组合物可以倾向于包含15％-40％w/w的木糖醇，其对于预防龋洞往往是所需要的和重要的。

本文所述的组合物可以制成各种形式，如以下的组合物：漱口剂、洁齿粉、洞护剂、凝胶剂、糖果、冰淇淋、口香糖、糖浆、乳膏等。在其它实施方式中，组合物可以制成其它形式如片剂、囊片、胶囊、咀嚼片、快速溶解片剂、泡腾片、硬明胶胶囊、软明胶胶囊、粉末剂、液体悬浮液、以及其他类型的食品。本领域技术人员将认识到还有其他可行的方式用于向使用者递送组合物。在一个实施方式中，组合物是液体剂型；而在进一步的实施方式中，组合物是漱口剂形式。

此外，这些组合物可以使用本领域中已知的常规设备和技术进行制备。当制备引入本发明的组合物的剂型时，各种成分通常与常规赋形剂如粘合剂、润滑剂、崩解剂、悬浮剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂和悬浮剂一起共混。

其它载体材料可以倾向于包括，例如水、甘油、调味剂和乳化剂。本领域技术人员将认识到，其它成分都能包括在内。

在本发明的实施方式中，水可以倾向于以35％-85％w/w的范围存在。在进一步的实施方式中，水可以倾向于为50％-75％w/w。在组合物是漱口水形式的本发明实施方式中，水可以倾向于是主要溶剂。

甘油，有或无氢化葡萄糖糖浆时，可以用于增加本发明实施方式的甜味、味道、粘度、质地。甘油含量范围可以倾向于为10％-30％w/w。在进一步的实施方式中，甘油含量可以倾向于为15％-25％w/w。在某些实施方式中，氢化葡萄糖糖浆的范围可以往往为0％-15％w/w，而在进一步的实施方式中为5％-10％w/w。

天然水果味，而非人工香料，可以用于某些实施方式中以改善组合物的气味和味道。天然调味剂可以倾向于以小于0.1％w/w的浓度存在，可能与不同味道进行组合。

乳化剂，聚山梨酸酯20，可以倾向于包含于某些实施方式中而分散调味剂。例如，组合物可以包含0.01％-0.1％w/w的聚山梨酸酯20。

在某些实施方式中，本发明通过调节水活性(aw)而配制用于预防微生物污染，由此降低对防腐剂的依赖。天然产生的抗微生物剂，对羟基苯甲酸甲酯，可以用于本发明的某些实施方式中作为防腐剂而预防有害微生物生长。在替代实施方式中，组合物可以包含用量小于0.1％w/w的对羟基苯甲酸甲酯。

木糖醇与柠檬酸钠、碳酸氢钠和海藻酸钠组合使用倾向于提供协同效应。正如以下实施例中的讨论，已经观察到在使用变形链球菌培养物的测试中，包含木糖醇、柠檬酸钠、碳酸氢钠和海藻酸钠的组合物，相比于木糖醇或任何单独的其它活性组分，致使培养基的pH升高而变形链球菌生存力(活力，viability)下降。

实施例

实施例1-抑制龋齿的组合物(Xyncal 8.3)

抑制龋齿组合物实施方式的实施例在整个申请书中是指：

成分	％w/w	克/5g剂量
			水	58.75	2.938
甘油	10.00	0.500
			木糖醇	30.00	1.500
碳酸氢钠	0.50	0.025
			柠檬酸钠	0.50	0.025
海藻酸钠	0.10	0.005
			调味剂	0.05	0.003
聚山梨酸酯20	0.10	0.005

实施例1的组合物本文中称之为Xyncal 8.3。

实施例2-潜在的产品规格

本发明实施方式的样品产品规格如下列出：

测试	规格
		固体，通过手动折射计(°brix)的％w/w	25.0+/-2.0
pH，原样	08.3+/-0.3
		色泽	无色
外观	澄清液体
		香味	柠檬味
味道	甜味，柠檬味

口感和质地	微稠
		APC(有氧平板计数)。Y&M(酵母和霉菌)	<20

实施例3-制备变形链球菌生物膜

所用的细菌菌株

在产酸细菌中，变形链球菌是人体龋齿的主要病原体。由于牙斑或唾液中变形链球菌相对于其它细菌物种的比例和龋齿未来爆发的存在或风险之间存在强相关性，因而牙菌斑或唾液中的变形链球菌可以起到龋齿活性状态和龋齿风险或易感性的指示作用。变形链球菌UA159菌株用于本实施例中。

生物膜的制备

在第一天，生物膜生长通过用UA59接种含有0.3％酵母提取物的100％Todd-Hewitt肉汤(THYE)在pH 7.0制备过夜培养物而开始。样品在37℃在厌氧室(5％CO₂)内无需搅拌接种于封闭的螺旋帽管内。

在第二天，将1:100稀释液通过将20μl过夜UA159培养物与含有0.075％酵母提取物的1/4THYE混合并用0.1％蔗糖补充直至达到最终体积2mL而制备。稀释液随后置于12孔板的孔中。培养物在厌氧室(5％CO₂)中无搅拌37℃温育18-24小时。

用测试治疗物温育

在第三天，2mL培养基从各孔中移出。将1.0mL测试治疗溶液，如下所述，加入到各孔中，之后将孔在实验台上室温下温育1分钟。接着，移出测试治疗溶液，并将含有0.3％酵母提取物而无蔗糖的3.0mL未稀释THYE加入到每个孔中。如果需要内部pH对照，则还要向两个未接种的孔中加入新制THYE。在这些步骤期间，要很小心以避免破坏生物膜。

使用了以下的测试治疗物：

水
	Xyncal 8.3
在水中的木糖醇[1.5g/5ml]
	在水中的碳酸氢钠[0.5g/100ml]
在水中的柠檬酸钠二水合物[0.5g/100ml]
	在水中的海藻酸钠[0.1 g/100ml]
Listerine^TMSmart Rinse^TM
	Listerine^TM Agent Cool Blue^TM

实施例4-实施例1的组合物(Xyncal 8.3)在含变形链球菌的培养基中对pH的影响

进行体外分析测定，确定本发明的组合物相对于对照治疗物是否会升高含有变形链球菌的培养基的pH。

首先，制备生物膜并用实施例3中的测试治疗物进行温育。在将含有0.03％酵母提取物的100％THYE加入到孔中接着用测试治疗物温育之后立即测定各孔中培养基的初始pH值。样品在37℃开放空气的台式培养箱中温育，并对接着的7-8小时内每小时一次测定培养基的pH值。最后，每个孔中培养基的pH在第二天早晨再次进行测定。

正如图1中所示，用Xyncal 8.3进行1分钟温育，致使分析测定持续期内培养基的pH超过5.5。Xyncal 8.3比任何其各个组分自身(木糖醇、柠檬酸钠、碳酸氢钠或海藻酸钠)能够维持更高的pH值，表现出预料不到的协同作用。然而，Listerine^TMSmart Rinse^TM能够维持最高的pH值，这据信是由于在此次漂洗中包含了防腐剂氯化十六烷基吡啶(CPC)(其也出现于Listerine^TMAgent Cool Blue^TM中)。由于漂洗杀死了生物膜，则培养基的pH并未保持本来的那么低。

相比于水对照物，Xyncal 8.3的结果在1、6、7、8和24h时表现出统计学上显著的差异(p<0.05)；Listerine^TMSmart Rinse^TM的结果在所有时间上都表现出统计学上显著的差异(p<0.05)；木糖醇的结果在1、6、7和8h时表现出统计学上显著的差异(p<0.05)；碳酸氢钠的结果在1h时表现出统计学上显著的差异(p<0.05)；而Listerine^TMAgent Cool Blue^TM的结果在1-8h时都表现出统计学上显著的差异(p<0.05)。柠檬酸钠和海藻酸钠的结果在任何时间时都未表现出统计学上显著的差异。

图2和图3示出了组合Xyncal 8.3的各组分时所产生的更清晰的协同效应。图2是显示用测试治疗物温育之后6h时的总pH值下降或差值，即，培养基的初始pH值减去在6h时培养基的pH值的曲线图，其中测试治疗物是水、Xyncal 8.3、木糖醇、碳酸氢钠、柠檬酸钠和海藻酸钠。图3是显示治疗处理(处理，治疗，treatment)之后8h时pH降低的类似曲线图。

正如从图2和图3中可以看出，用碳酸氢钠、柠檬酸钠或海藻酸钠中任意之一单独治疗处理生物膜都对pH降低几乎没有影响；降低约等于对照物水的情况。Xyncal 8.3的组分中，仅仅木糖醇能够减缓pH降低。因此，会预期一旦一起加入木糖醇、碳酸氢钠、柠檬酸钠和海藻酸钠，则pH降低将大约与木糖醇的情况是一样大。然而，正如图2和3中所见，培养基当采用Xyncal 8.3处理时的pH降低实际上比木糖醇的情况更低，表现出了协同作用。以下表1-8显示了一旦进行如上所述的体外分析测试获得的示例性pH数据。

表1

表2

表3

表4

表5

表6

表7

表8

实施例5-Xyncal 8.3对变形链球菌生长和生物膜形成的影响

进行体外分析测定，确定Xyncal 8.3是否将会对变形链球菌生长和生物膜形成表现出抑制效应。

首先，制备生物膜并用如实施例3中的测试治疗物(测试处理物，testtreatment)温育。将含有0.03％酵母提取物的未稀释THYE加入到这些孔中接着用测试治疗物温育之后立即将这些样品在37℃温育1小时。

接着，进行两种不同的分析测试之一测试变形链球菌的生长和生物膜的形成：Presto Blue^TM分析测试和菌落形成单位(Colony Forming Unit)(CFU)分析测试。

对于Presto Blue^TM分析测试，生物膜再悬浮于存在于孔中的培养基中。接着，将悬浮液超声处理20秒以破坏细菌链。测定OD₆₀₀值，并将OD₆₀₀值调节至0.2。将90μL悬浮液样品置于96-孔板中之后向这些孔中加入10μl的Presto Blue^TM试剂。将这些样品在37℃温育至少10分钟或直到样品开始变成粉红色。最后，将这些样品在孔板读取器上570nm和600nm处读取并将570nm的值减去600nm的值。

对于CFU分析测试，生物膜再悬浮于存在于孔中的培养基中。将悬浮液超声处理20秒以破坏细菌链。接着，通过将20μL的细胞悬浮液加入到180μl磷酸盐缓冲盐水(PBS)中从而将悬浮液连续稀释至10^-7。对于每次稀释，都将20μL溶液接种于100％THYE琼脂平板上。24-48小时后，计数CFU。

图4和图5显示了用测试治疗物进行1min温育之后1h时，分别使用Presto Blue^TM和CFU分析测试进行测定的变形链球菌细胞的存活率。图4和图5表明，Xyncal 8.3抑制变形链球菌生长和生物膜形成的程度大于任何其各个组分自身(木糖醇、柠檬酸钠、碳酸氢钠或海藻酸钠)，表现出预料不到的协同效应。

存活率分析测试相关于实施例3的数据并对其进行了解释。采用Xyncal 8.3对变形链球菌生长和生物膜形成的抑制作用增加，相比于其各个组分(木糖醇、柠檬酸钠、碳酸氢钠或海藻酸钠)，解释了Xyncal 8.3为何能够保持比其任何各个组分更高的pH值。Listerine^TMSmart Rinse^TM对变形链球菌生长和生物膜形成的抑制作用增加据信是由于在此次漂洗(也就是Listerine^TMAgent Cool Blue^TM)中包含了防腐剂氯化十六烷基吡啶(CPC)。

实施例6-临床研究

实施统计学非动力(statistically non-powered)和非随机化临床研究涉及八名同意的成人和一名少年和一名在其家长监督下的蹒跚学步幼儿。

除了其吞咽未多次漂洗的幼儿之外，这些参与者采用2.5ml-5ml实施例1的漱口水组合物对其牙齿进行一次30秒漂洗。在30秒的咕噜涮洗之后，九名参与者选择喝掉漱口水而一名参与者将其吐出。

所有10名参与者很享受以漱口水形式的本发明的味道、香味、口感和质感。在用漱口水饮用或咕噜涮洗之后24小时、1个星期、1个月和三个月之后没有报告不利的影响。

九名参与者报告在其用漱口水漂洗其牙齿之后相比于漂洗之前感觉更清洁和更“愉悦”。“愉悦”的感觉描述为比用牙膏刷牙更清洁、更甜、和甚至更好。他们还报告“愉悦”感觉会持续3-12小时。幼儿参加者的父母报告宝宝的“晨吸(morning breath)”已经显著改善，并在早晨气味闻起来令人愉悦。

本发明已经关于具体实施方式进行了描述。然而，对于本领域内技术人员显而易见的是，能够作出许多变体和修改，而不会偏离如本文中所述的本发明范围。

Claims

1.一种用于抑制促龋齿细菌的生长的组合物，含有：

碳酸氢钠；

柠檬酸钠；

至少一种阴离子聚合物；和

木糖醇。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中碳酸氢钠浓度为0.1％-1.5％w/w。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中柠檬酸钠浓度为0.1％-1％w/w。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的组合物，其中碳酸氢钠与柠檬酸钠之比为1:1-2:1。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的组合物，其中碳酸氢钠浓度为0.5％w/w。

6.根据权利要求3-5中任一项所述的组合物，其中柠檬酸钠浓度为0.5％w/w。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的组合物，其中所述至少一种阴离子聚合物是海藻酸钠。

8.根据权利要求7所述的组合物，其中海藻酸钠浓度为0.05％-0.5％w/w。

9.根据权利要求8所述的组合物，其中海藻酸钠浓度为0.1％w/w。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中木糖醇浓度为15％-40％w/w。

11.根据权利要求10所述的组合物，其中木糖醇浓度为30％w/w。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的组合物，进一步含有至少一种赋形剂。

13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述至少一种赋形剂是以下各项中的一种或多种：粘合剂、润滑剂、崩解剂、悬浮剂、吸收剂、防腐剂、表面活性剂、着色剂、悬浮剂、水、甘油、调味剂、乳化剂或氢化葡萄糖糖浆。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中水浓度为35％-85％w/w。

15.根据权利要求14所述的组合物，其中水浓度为50％-75％w/w。

16.根据权利要求15所述的组合物，其中水浓度为58.75％w/w。

17.根据权利要求13-16中任一项所述的组合物，其中甘油浓度为10％-30％w/w。

18.根据权利要求17所述的组合物，其中甘油浓度为15％-25％w/w。

19.根据权利要求17所述的组合物，其中甘油浓度为10％。

20.根据权利要求13-19中任一项所述的组合物，其中所述氢化葡萄糖糖浆浓度为0％-15％w/w。

21.根据权利要求20所述的组合物，其中所述氢化葡萄糖浓度为5％-10％w/w。

22.根据权利要求1-21中任一项所述的组合物，进一步含有至少一种天然调味剂。

23.根据权利要求22所述的组合物，其中所述天然调味剂浓度小于0.1％w/w。

24.根据权利要求23所述的组合物，其中所述天然调味剂浓度为0.05％w/w。

25.根据权利要求22-24中任一项所述的组合物，其中所述天然调味剂是天然水果味。

26.根据权利要求25所述的组合物，其中所述天然水果味是柠檬。

27.根据权利要求22-26中任一项所述的组合物，含有聚山梨酸酯20。

28.根据权利要求27所述的组合物，其中聚山梨酸酯20的浓度为0.01％-0.1％w/w。

29.根据权利要求28所述的组合物，其中聚山梨酸酯20的浓度为0.1％。

30.根据权利要求1-29中任一项所述的组合物，进一步含有抗微生物剂。

31.根据权利要求30所述的组合物，其中所述抗微生物剂是对羟基苯甲酸甲酯。

32.根据权利要求31所述的组合物，其中对羟基苯甲酸甲酯的浓度小于0.1％w/w。

33.根据权利要求1-32中任一项所述的组合物，其中所述组合物是作为液体、漱口剂、洁齿剂、洞护剂、凝胶剂、食品、糖果、冰淇淋、口香糖、糖浆、乳膏、片剂、囊片、胶囊、咀嚼片、速溶片剂、泡腾片、硬明胶胶囊、软明胶胶囊、散剂或液体悬浮剂的口服制剂。

34.权利要求1-33中任一项所述的组合物用于治疗或预防患者中的龋齿的用途。

35.根据权利要求34所述的用途，其中所述患者是儿童、青少年，或所述患者遭受对有毒物质的高度易感性。

36.权利要求1-33中任一项所述的组合物用于制备治疗或预防龋齿的制剂的用途。

37.权利要求1-33中任一项所述的组合物用于治疗或预防由促龋齿细菌所致的病症的用途。

38.权利要求1-33中任一项所述的组合物用于制备治疗或预防由促龋齿细菌所致的病症的制剂的用途。

39.权利要求1-33中任一项所述的组合物用于抑制促龋齿细菌生长的用途。

40.权利要求1-33中任一项所述的组合物用于制备抑制促龋齿细菌的生长的制剂的用途。

41.根据权利要求37-40中任一项所述的用途，其中所述促龋齿细菌是变形链球菌、远源链球菌或乳酸杆菌中的一种或多种。

42.一种治疗或预防患者中的龋齿的方法，包括给予根据权利要求1-33中任一项所述的组合物。