CN104931520A - 一种检测儿童活动性结核病的试剂盒及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种检测儿童活动性结核病的试剂盒及其应用。本发明结合生物信息学方法筛选出了儿童活动性结核病特征代谢产物，并基于儿童活动性结核病特征代谢产物的化学位移建立了儿童活动性结核病的检测方法。通过试验表明：利用本发明的检测方法在验证24例样本中的正确率为100％，特异度为100％，灵敏度为100％，且本发明的方法简单、易于操作，可用于儿童活动性结核病早期检测，为儿童活动性结核病的临床诊断提供了新方法，同时也为探索疾病机制提供了新思路。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测儿童活动性结核病的试剂盒及其应用。
背景技术
由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的结核病是当今世界上最普遍的人类传染病之一，被认为是仅次于艾滋病的第二大疾病“杀手”，因此结核病已成为威胁人类健康的最重要的疾病，是全球公共卫生控制的一个难题。中国是世界上22个结核病高发国家之一，结核病患者数量居世界第二位。我国儿童结核病的疫情也比较严峻。2000年第四次全国结核病流行病学抽样调查报告显示我国0～14岁儿童结核感染率为9.0％，活动性结核病患病率为91.8/100,000，近年来，我国儿童结核病也有明显回升趋势。因此，加强儿童结核病的实验室诊断、对活动性结核病早诊断及早治疗已成为目前亟需解决的问题。
但是长期以来，儿童结核病诊断面临着两个难以解决的实际问题：一、儿童结核病患者的细菌载量低，再加上儿童咳嗽反射和气管纤毛运动能力差，常常合并肺外结核，病原学诊断的阳性率很低。结核病患儿发病早期临床症状尚不明显时，无法得到及时准确的病原学结果，常常延误诊断，导致病情恶化，失去抢救的最佳时机。二、免疫功能低下，或患有严重结核病如全身粟粒性结核和结核性脑膜炎，或患儿使用过免疫抑制剂时，机体免疫应答减弱，常规免疫学诊断方法往往出现假阴性，给疾病的诊断和早期预防治疗带来很大不利影响。
结核菌素皮试(PPD试验)是目前诊断结核病的重要辅助手段，但由于PPD是多种抗原的混合物，所含抗原为致病性分枝杆菌、环境分枝杆菌及卡介苗菌株所共有，其结果受到卡介苗接种及其他分枝杆菌感染的影响，特异度较差，常可导致假阳性结果。当患儿出现免疫功能低下时可出现假阴性结果。γ干扰素释放试验作为一种新型的免疫学诊断方法已在欧美等国广泛应用于结核病和潜伏结核感染的常规诊断。由于该试验结果不受卡介苗接种的影响，因此尤其适用于卡介苗接种率较高的人群。但目前关于该实验在儿童结核病诊断中的准确性如何，结论尚不一致。有研究认为γ干扰素释放试验不受年龄的影响，在儿童中具有较好的敏感度。而有的研究则认为该试验即使在细菌培养阳性的儿童中，其敏感度也很低，因此其不适于作为一种常规的儿童结核病诊断方法。
代谢组学是20世纪90年代中期发展起来的一门新兴学科，是系统生物学的重要组成部分，是关于生物体系内在或外在因素的刺激后其内源性代谢物种类、数量及其变化规律的科学。利用高通量、高灵敏度与高精确度的现代仪器分析技术，对机体整个代谢产物谱进行动态跟踪分析，从而帮助临床更好的理解病变过程并实施疾病的诊断。近年来，代谢组学技术已被广泛用于疾病的诊断，该技术通过分析机体病理改变所引起的代谢产物的变化，运用化学计量学方法对疾病组和正常组进行辨识，寻找疾病相关的生物标志物，并用于临床诊断。该诊断技术克服了传统医学诊断模式的一系列缺陷，包括诊断准确率低、诊断指标单一、对专家诊疗水平依赖性强、治疗模式缺乏个体化等，充分利用多种甚至是全代谢产物系统分析，做出更准确和客观的评价，并避免人为因素的误诊。HNMR技术具有快速、样品处理简单、所需样本量少、重复性好等特点，是代谢组学研究领用最常用的分析技术之一。
发明内容
本发明的一个目的是提供一种用于诊断儿童活动性结核病的产品。
本发明提供的用于诊断儿童活动性结核病的产品包括记载有如下内容的诊断卡：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量；
若1.19-1.20ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量均比正常儿童高，且0.82-0.88ppm、1.25-1.30ppm、1.46-1.48ppm和3.20-4.00ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量均比正常儿童低，则所述待测儿童为或候选为活动性结核病患者；
若1.19-1.20ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量不是均比正常儿童高，或0.82-0.88ppm、1.25-1.30ppm、1.46-1.48ppm和3.20-4.00ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量不是均比正常儿童低，则所述待测儿童不为或候选不为活动性结核病患者。
上述产品中，所述正常儿童在所述0.82-0.88ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为46.8655；
所述正常儿童在所述1.19-1.20ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为19.8161；
所述正常儿童在所述1.25-1.30ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为55.7459；
所述正常儿童在所述1.32-1.34ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为185.8018；
所述正常儿童在所述4.11-4.13ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为34.7537；
所述正常儿童在所述1.46-1.48ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为57.5105；
所述正常儿童在所述2.03-2.04ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为70.7800；
所述正常儿童在所述2.22-2.23ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为12.4336；
所述正常儿童在所述3.20-4.00ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为72.1825；
所述正常儿童在所述3.56ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为25.6423。
上述产品中，所述核磁检测包括如下步骤：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm的化学位移的峰下面积；根据每个化学位移的峰下面积，分别计算得到每个化学位移代表的差异产物的相对含量。
上述产品中，所述产品中还包括对待测儿童血浆进行核磁检测时使用的设备和试剂。
本发明的另一个目的是提供上述产品在制备用于诊断儿童活动性结核病的产品中的应用。
本发明还有一个目的是提供利用核磁方法检测待测儿童血浆中0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量时使用的设备和试剂在制备诊断儿童活动性结核病的产品中的应用。
本发明的最后一个目的是提供一种用于诊断儿童活动性结核病的产品。
本发明提供的用于诊断儿童活动性结核病的产品包括记载有如下内容的诊断卡：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮、3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量；
若1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量均比正常儿童高，且0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸和3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖的相对含量均比正常儿童低，则所述待测儿童为或候选为活动性结核病患者；
若1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量不是均比正常儿童高，或0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸和3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖的相对含量不是均比正常儿童低，则所述待测儿童为或候选为活动性结核病患者。
上述产品中，所述正常儿童在所述0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质的相对含量为46.8655；
所述正常儿童在所述1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸的相对含量为19.8161；
所述正常儿童在所述1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质的相对含量为55.7459；
所述正常儿童在所述1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸的相对含量为185.8018；
所述正常儿童在所述4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸的相对含量为34.7537；
所述正常儿童在所述1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸的相对含量为57.5105；
所述正常儿童在所述2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白的相对含量为70.7800；
所述正常儿童在所述2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮的相对含量为12.4336；
所述正常儿童在所述3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖的相对含量为72.1825；
所述正常儿童在所述3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量为25.6423。
上述产品中，所述核磁检测包括如下步骤：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮、3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的峰下面积；根据每个化学位移代表的差异产物的峰下面积，分别计算得到每个化学位移代表的差异产物的相对含量。
上述产品中，所述产品中还包括对待测儿童血浆进行核磁检测时使用的设备和试剂。
上述产品在制备用于诊断儿童活动性结核病的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
本发明与其它儿童活动性结核病的检测方法比较，具有以下优点：
第一，本发明采用儿童活动性结核病患者与正常儿童之间具有差异的多个特征产物组合，对儿童活动性结核病血浆进行检测，并采用了传统统计学与现代生物信息学相结合的方法处理数据，为寻找新的、更理想的标志物提供了基础和资源。
第二，与以往的血浆学检测方法相比，本发明的方法具有较高的敏感度和特异度，并能用于筛选儿童活动性结核病药物的研究。
第三，本发明的方法设计合理可行，为儿童活动性结核病的临床诊断提供了新方法，同时也为探索疾病机制提供了新思路。
本发明结合生物信息学方法筛选出了儿童活动性结核病特征代谢产物，并基于儿童活动性结核病特征代谢产物的化学位移建立了儿童活动性结核病的检测方法。通过试验表明：利用本发明的检测方法在验证24例样本中的正确率为100％，特异度为100％，灵敏度为100％，且本发明的方法简单、易于操作，可用于儿童活动性结核病早期检测，为儿童活动性结核病的临床诊断提供了新方法，同时也为探索疾病机制提供了新思路。
附图说明
图1为健康儿童和活动性结核病患儿血浆的代谢产物图谱。其中，图1a为健康儿童血浆的代谢产物图谱；图1b为活动性结核病患儿血浆的代谢产物图谱。
图2为正常组(Δ)和活动性结核病组(+)血浆核磁共振氢谱(CPMG)的PCA分析图谱。其中，图2a为正常组(Δ)、活动性结核病组(+)血浆核磁共振氢谱(CPMG)的PCA分析样本分布图谱；图2b为正常组(Δ)、活动性结核病组(+)血浆核磁共振氢谱(CPMG)的PCA分析3D图谱。
图3为用20例样本验证模型训练组样本分布图。其中，■代表模型组中正常组，▲代表训练组中正常组；●代表模型组中活动性结核病组，*代表训练组中活动性结核病组。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实验设备：INOVA 600MHz超导核磁共振谱仪购自美国瓦里安公司，配备脉冲场梯度，带梯度场的三共振探头；离心机购自德国Eppendorf MiniSpin Plus。
实验试剂：重水(D2O)购自美国CIL公司；3-三甲基硅烷基-2,2,3,3-四氘代丙酸钠(TSP)购自德国Merck公司。
实施例1、儿童活动性结核病的检测方法
一、样本的收集及制备
1、样本的来源
选自42例血浆样本(来源于首都医科大学附属北京儿童医院)，其中24例来自活动性结核病患儿，另外18例来自健康儿童，活动性结核病患儿均经临床诊断确定，并经知情同意。所有的血浆样本均在清晨空腹下抽取，分离血浆后储存在-80℃低温冰箱中备用。
2、样本的制备
(1)血浆采集：收集静脉血在BD管中，避免溶血。缓慢地上下振荡管五次，使血液中的凝结块混匀。室温(25℃)血凝结1小时，垂直放置。室温下，用临床离心机以1,400-2,000g离心SST管(真空采血管，BD公司)十分钟。吸取血浆到已进行标记的0.5ml离心管中，同一血浆样品50μl一管，分装多管。立即冻存血浆样品于-80℃，避免反复冻融。
向装有样本的离心管中分别依次加入100μl含有TSP(1mg/ml)的重水溶液、200μl磷酸盐缓冲液(0.2M)以及300μl血浆，充分震荡混匀后，13,000rpm离心10min。取上清液加入5mm的核磁共振管中待用。
二、核磁检测
1、核磁前预处理
(1)重水纯化
向编号后的样本离心管中分别依次加入100μl TSP的重水溶液(1mg/ml)，200μl磷酸盐缓冲液(0.2M)，以及300μl血清，充分震荡混匀后，13,000rpm离心10min。取上清液加入5mm核磁共振管中待用。
(2)稳定样品中的血浆代谢产物。
2、HNMR谱图的获得
采用驰豫编辑脉冲(CPMG脉冲)序列：–RD–90°–(–180°–)n–ACQ，采集血浆样本的数据，观测血浆中的小分子代谢产物。CPMG实验的谱宽为8000Hz，采样点数为32k，采样时间为2s，累加次数64次，为400s，2n为320ms，弛豫延迟为2s，其间采用低功率脉冲对水峰进行预饱和。以乳酸甲基信号双峰的左侧峰定为1.33。在对自由感应衰减(free induction decay，FID)信号数据进行填零，加上0.5Hz的线增宽因子后进行傅立叶变换转得HNMR谱图(如图1所示，其中，图1a为健康人血浆代谢产物HNMR图谱；图1b为儿童活动性结核病血浆代谢产物HNMR图谱)。
3、HNMR谱图的标准化处理和分析
对CPMG数据处理，是将0.4～4.4范围内的谱按照每段0.01ppm进行分段积分。将积分按每张谱的总积分强度归一化。数据采用平均中心化(mean centering)或Pareto标度化(Pareto scaling)进行预处理之后采用PCA(Principal Component Analysis)分析。分析结果如图2(图2a为健康儿童与活动性结核病患儿血浆核磁共振氢谱(CPMG)的PCA分析样本分布图；图2b为其PCA分析的三维立体图所示)。
4、检测结果
运用T检验P值和受试者接受曲线(ROC)的方法来评价每个峰的相对重要性。具体差异代谢产物见表1。根据HNMR的核磁代谢产物的特征信号得出具体差异代谢产物的归属信息，将这些归属信息再与报道的信息核对，得出差异化学位移的物质归属，结果如表2所示。每一个化学位移都对应一个峰下面积，根据峰面积计算得到每一个差异化学位移对应的正常组均值和结核病组均值(均值代表该化学位移所代表的物质在血浆中的相对含量)。
表1、健康组与活动性结核病组之间的差异化学位移
表2、健康组与活动性结核病组的差异化学位移的物质归属
根据表2中的十个化学位移代表的差异产物建立了一种检测儿童活动性结核病的方法。具体检测方法如下：
1、对待测儿童的血浆样本中十个差异产物所代表的十个化学位移：0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm进行核磁检测，分别得到待测儿童在0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm的化学位移峰对应的峰下面积，并根据峰下面积计算得到十个差异产物的相对含量。
2、将待测儿童血浆中十个差异产物的相对含量分别与正常儿童对应的差异产物的相对含量进行比较，判断待测儿童是否患有活动性结核病；
若待测儿童血浆中1.19-1.20ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm和3.56ppm的化学位移对应的差异产物的相对含量比正常儿童高，且0.82-0.88ppm、1.25-1.30ppm、1.46-1.48ppm和3.20-4.00ppm的化学位移对应的差异产物的相对含量比正常儿童低，则表明待测儿童患有儿童活动性结核病；
若待测儿童血浆中1.19-1.20ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm和3.56ppm的代谢产物的相对含量没有比正常儿童高，或0.82-0.88ppm、1.25-1.30ppm、1.46-1.48ppm和3.20-4.00ppm的代谢产物的相对含量没有比正常儿童低，则表明待测儿童不患有儿童活动性结核病。
实施例2、检测儿童活动性结核病的方法的应用
选择42例血浆样本，其中22例用于模型训练，包括活动性结核病患儿11例，健康儿童11例；其余20例用于模型测试，包括健康儿童7例，活动性结核病患儿13例。活动性结核病患儿均经临床诊断确定。所有的血浆样本均在清晨空腹下抽取，分离血浆后储存在-80低温冰箱中。
1、用实施例1中的检测儿童活动性结核病的方法对22例样本(活动性结核病患儿11例，健康儿童11例)进行训练。
结果表明：该方法的正确率为100％，采用随机选择方法进行交叉验证，验证结果为100％，说明该方法具有很好的预测能力，且有较高的特异性和敏感性。
2、模型训练完成后，接着用该方法对20个验证样本进行检测。
结果表明：7例健康儿童组均判断正确，13例儿童活动性结核病组均判断正确，正确率为100％。
Claims (10)
1.一种用于诊断儿童活动性结核病的产品，包括记载有如下内容的诊断卡：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量；
若1.19-1.20ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量均比正常儿童高，且0.82-0.88ppm、1.25-1.30ppm、1.46-1.48ppm和3.20-4.00ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量均比正常儿童低，则所述待测儿童为或候选为活动性结核病患者；
若1.19-1.20ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量不是均比正常儿童高，或0.82-0.88ppm、1.25-1.30ppm、1.46-1.48ppm和3.20-4.00ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量不是均比正常儿童低，则所述待测儿童不为或候选不为活动性结核病患者。
2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于：
所述正常儿童在所述0.82-0.88ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为46.8655；
所述正常儿童在所述1.19-1.20ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为19.8161；
所述正常儿童在所述1.25-1.30ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为55.7459；
所述正常儿童在所述1.32-1.34ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为185.8018；
所述正常儿童在所述4.11-4.13ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为34.7537；
所述正常儿童在所述1.46-1.48ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为57.5105；
所述正常儿童在所述2.03-2.04ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为70.7800；
所述正常儿童在所述2.22-2.23ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为12.4336；
所述正常儿童在所述3.20-4.00ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为72.1825；
所述正常儿童在所述3.56ppm化学位移代表的差异产物的相对含量为25.6423。
3.根据权利要求1或2所述的产品，其特征在于：所述核磁检测包括如下步骤：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm的化学位移的峰下面积；根据每个化学位移的峰下面积，分别计算得到每个化学位移代表的差异产物的相对含量。
4.根据权利要求1-3中任一所述的产品，其特征在于：所述产品中还包括对待测儿童血浆进行核磁检测时使用的设备和试剂。
5.权利要求1-4中任一所述的产品在制备用于诊断儿童活动性结核病的产品中的应用。
6.利用核磁方法检测待测儿童血浆中0.82-0.88ppm、1.19-1.20ppm、1.25-1.30ppm、1.32-1.34ppm、4.11-4.13ppm、1.46-1.48ppm、2.03-2.04ppm、2.22-2.23ppm、3.20-4.00ppm和3.56ppm的化学位移代表的差异产物的相对含量时使用的设备和试剂在制备诊断儿童活动性结核病的产品中的应用。
7.一种用于诊断儿童活动性结核病的产品，包括记载有如下内容的诊断卡：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮、3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量；
若1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量均比正常儿童高，且0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸和3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖的相对含量均比正常儿童低，则所述待测儿童为或候选为活动性结核病患者；
若1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量不是均比正常儿童高，或0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸和3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖的相对含量不是均比正常儿童低，则所述待测儿童为或候选为活动性结核病患者。
8.根据权利要求7所述的产品，其特征在于：
所述正常儿童在所述0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质的相对含量为46.8655；
所述正常儿童在所述1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸的相对含量为19.8161；
所述正常儿童在所述1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质的相对含量为55.7459；
所述正常儿童在所述1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸的相对含量为185.8018；
所述正常儿童在所述4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸的相对含量为34.7537；
所述正常儿童在所述1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸的相对含量为57.5105；
所述正常儿童在所述2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白的相对含量为70.7800；
所述正常儿童在所述2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮的相对含量为12.4336；
所述正常儿童在所述3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖的相对含量为72.1825；
所述正常儿童在所述3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的相对含量为25.6423。
9.根据权利要求7或8所述的产品，其特征在于：所述核磁检测包括如下步骤：对待测儿童血浆进行核磁检测，分别得到0.82-0.88ppm化学位移代表的脂质、1.19-1.20ppm化学位移代表的3-羟基丁酸、1.25-1.30ppm化学位移代表的脂质、1.32-1.34ppm化学位移代表的乳酸、4.11-4.13ppm化学位移代表的乳酸、1.46-1.48ppm化学位移代表的丙氨酸、2.03-2.04ppm化学位移代表的氮乙酰糖蛋白、2.22-2.23ppm化学位移代表的丙酮、3.20-4.00ppm化学位移代表的葡萄糖和3.56ppm化学位移代表的甘氨酸的峰下面积；根据每个化学位移代表的差异产物的峰下面积，分别计算得到每个化学位移代表的差异产物的相对含量。
10.权利要求7-9中任一所述的产品在制备用于诊断儿童活动性结核病的产品中的应用。
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