CN104931460A - 一种提高血小板聚集指数稳定性的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种提高血小板聚集指数稳定性的方法，依据光电比浊法进行测定；将患者血液样品制备成富血小板血浆样本和贫血小板血浆样本；将贫血小板血浆移入测试杯，检测光路系统自动读取贫血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；将富血小板血浆移入上述同一测试杯，检测光路系统自动读取富血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；将血小板致聚剂注入上述同一测试杯中，检测光路系统自动读取规定时间内上述富血小板血浆样本的透光度随时间变化的数据并存储到微型计算机，微型计算机根据公式计算出血小板聚集指数；将血小板聚集指数的测定结果根据所输入的患者信息生成试验报告。

Description

一种提高血小板聚集指数稳定性的方法

技术领域

本发明涉及一种提高血小板聚集指数稳定性的方法，该方法用于临床的血小板聚集率测定；依据光电比浊法进行测定，将PPP样本移入测试杯，检测光路系统读取透光度数据；将PRP样本移入同一测试杯，检测光路系统读取透光度数据；将血小板致聚剂注入同一测试杯中，检测光路系统读取数据。

背景技术

中国专利200910083611.6公开了一种血小板聚集性测定方法，使用一种全自动血小板聚集仪，依据光电比浊法进行测定，测定步骤是：制备血小板聚集诱导剂，制备好的富血小板血浆和贫血小板血浆放置到样品盘装置中，命令加样针吸取贫血小板血浆，注入测试机芯装置的测试杯中，读取贫血小板血浆样品透光度数据；命令加样针吸取富血小板血浆，注入测试机芯装置的测试杯中，读取富血小板血浆样品透光度数据；命令加样针吸取血小板聚集诱导剂，注入测试机芯装置的测试杯中，读取样品透光度数据；计算被测血液样品的血小板最大聚集率，同时根据所输入的患者信息生成试验报告。该专利的测试方法存在较大缺陷，不能保证血小板聚集指数的稳定。因此，需要提出一种提高血小板聚集指数稳定性的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高血小板聚集指数稳定性的方法，该方法依据光电比浊法进行测定；将PPP样本移入测试杯，检测光路系统自动读取透光度数据；将PRP样本移入同一测试杯，检测光路系统自动读取透光度数据；将血小板致聚剂注入同一测试杯中，检测光路系统自动读取数据，计算机根据公式计算出血小板聚集指数；检测过程中测试杯位置保持恒定。该方法大大的提高了临床检验的测试速度、准确性和血小板聚集指数的稳定性。

本发明的目的是由下述技术方案实现的：一种提高血小板聚集指数稳定性的方法，使用一种血小板聚集指数检测装置，依据光电比浊法进行测定，测定步骤是：

A、使用采血试管采集患者血液样品，对该血液样品进行抗凝处理，生成抗凝全血；将抗凝全血离心处理，制备成富血小板血浆样本和贫血小板血浆样本；富血小板血浆样本保存到样本盘装置的富血小板血浆样本杯中，设置样本号；贫血小板血浆样本保存到样本盘装置的贫血小板血浆样本杯中，设置样本号；

B、将制备好的血小板致聚剂放入试剂瓶装置中，低温保存备用；

C、将一个测试杯放入血小板聚集指数检测装置的测试孔中并保持测试杯位置固定不变；操作移液器按检测标准用量从所述贫血小板血浆样本杯中取出贫血小板血浆样本移入所述测试杯，检测光路系统自动读取贫血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内，然后操作移液器将所述贫血小板血浆样本移出所述测试杯；

D、操作移液器按检测标准用量从所述富血小板血浆样本杯中取出富血小板血浆样本移入上述同一测试杯，检测光路系统自动读取富血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；

E、操作移液器按检测标准用量从所述试剂瓶装置中取出血小板致聚剂注入上述同一测试杯中与该测试杯中的富血小板血浆样本混合，检测光路系统自动读取规定时间内上述富血小板血浆样本的透光度随时间变化的数据并存储到微型计算机，微型计算机根据公式计算出血小板聚集指数；

F、将血小板聚集指数的测定结果根据所输入的患者信息生成试验报告；

所述血小板聚集指数检测装置包括微型计算机、测试机芯装置、试剂瓶装置、样本盘装置，测试机芯装置包括测试孔、搅拌器、检测光路系统。

本发明的目的还可以由下述技术方案实现：一种提高血小板聚集指数稳定性的方法，其特征在于：使用一种全自动血小板聚集仪，依据光电比浊法进行测定，测定步骤是：

A、使用采血试管采集患者血液样品，对该血液样品进行抗凝处理，生成抗凝全血；启动离心机装置对抗凝全血离心处理，离心机以一档速度分离出富血小板血浆，命令加样针或者自动移液器从所述试管中吸取样本量的富血小板血浆，注入到样本盘装置中的样本杯中，设置样本号；离心机以二档速度分离出贫血小板血浆，命令加样针或者自动移液器从所述试管中吸取样本量的贫血小板血浆，注入到样本盘装置中的样本杯中，设置样本号；

B、将制备好的血小板致聚剂放入试剂瓶装置中，低温保存备用；

C、命令抓杯装置从测试杯盘装置中取出一个测试杯，将其放入测试机芯装置的测试孔中并保持测试杯位置固定不变；命令加样针或者自动移液器按检测标准用量从指定的样本杯中取出贫血小板血浆样本移入所述测试杯，检测光路系统自动读取贫血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内，然后命令加样针或者自动移液器将所述贫血小板血浆样本移出所述测试杯；

D、命令加样针或者自动移液器按检测标准用量从指定的样本杯中取出富血小板血浆样本移入上述同一测试杯，检测光路系统自动读取富血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；

E、命令试剂针按检测标准用量从所述试剂瓶装置中取出血小板致聚剂注入上述同一测试杯中与该测试杯中的富血小板血浆样本混合，检测光路系统自动读取规定时间内上述富血小板血浆样本的透光度随时间变化的数据并存储到微型计算机，微型计算机根据公式计算出血小板聚集指数；命令试剂针和加样针自动清洗或者自动移液器自动更换加样头；命令抓杯装置从上述测试孔中取出测试杯放入废杯孔中；

F、将血小板聚集指数的测定结果根据所输入的患者信息生成试验报告；

所述全自动血小板聚集仪包括自动控制电路，测试机芯装置、测试杯盘装置、样本盘装置、试剂瓶装置、清洗盘装置、离心机装置、试剂针装置、加样针装置或者自动移液器、抓杯装置；所述测试机芯装置包括测试孔、搅拌器、检测光路系统；所述样本盘装置上设置多个样本杯；所述试剂瓶装置下部设置半导体制冷装置；所述清洗盘装置中包括清洗液瓶和废液收集瓶。

本发明与现有技术相比具有如下优点：

1、本发明在三次加样和检测过程中使用同一个测试杯，并且保证该测试杯位置固定不变(即上下位置固定，圆周向位置固定)，消除了测试杯的本底误差，提高了测试结果的准确性。聚集率的变异系数从8％减低到小于5％。

2、本发明在三次加样和检测过程中使用同一个测试杯，省去清洗环节，大大的提高了临床检验的测试速度。

3、本发明在三次加样和检测过程中使用同一个测试杯，并测试杯位置固定不变，消除了测试杯的本底误差，免除了测试杯360°的透光性一致的特殊要求，降低了测试杯的成本。

4、本发明在一次加样和检测后回收PPP样本，在血小板聚集率测试时，可以减少血液样本用量。

附图说明

以下结合附图及实施例对本发明作进一步说明。

图1是本发明实施例一的血小板聚集指数检测装置俯视图；

图2是本发明实施例一的测试机芯装置示意图；

图3是本发明实施例二的聚集仪右视结构示意图；

图4是本发明实施例二的聚集仪正视结构示意图；

图5是本发明实施例二的聚集仪俯视结构图；

图6是本发明实施例二的加样针装置、抓杯装置位置图。

具体实施方式

实施例一：

本发明的提高血小板聚集指数稳定性的方法，使用血小板聚集指数检测装置，依据光电比浊法进行测定，测定步骤是：

A、使用采血试管采集患者血液样品(按检测标准用量采集，通常是5ml)，对该血液样品进行抗凝处理，生成抗凝全血；将抗凝全血离心处理，制备成富血小板血浆样本和贫血小板血浆样本；富血小板血浆样本保存到样本盘装置的富血小板血浆样本杯中，设置样本号；贫血小板血浆样本保存到样本盘装置的贫血小板血浆样本杯中，设置样本号；本实施例中，患者血液样品用血液抗凝剂3.8％(浓度)枸橼酸钠进行抗凝，抗凝剂和血液的比例为1∶9；此工作步骤由采血部门完成。由操作人员操作微型计算机完成样本号的设置，所述样本号可以是电子标记。由水平式离心机进行离心处理，先以一档速度离心(离心时间30-60秒，离心力2000g-3000g)，分离制备PRP(即富血小板血浆)；水平式离心机以二档速度离心(离心100-200秒，离心力7000g-8000g)，分离制备PPP(即贫血小板血浆)。

B、将制备好的血小板致聚剂放入试剂瓶装置中，低温保存备用；本实施例中，用液浓度为3-10umol／l，试剂用量5--10ul，血小板致聚剂可以使用ADR(肾上腺)、COL(胶原)、ARA(花生四烯酸)、RIS(瑞斯托霉素)中的一种。

C、将一个测试杯放入血小板聚集指数检测装置的测试孔中并保持测试杯位置固定不变；操作移液器按检测标准用量从所述贫血小板血浆样本杯中取出贫血小板血浆样本移入所述测试杯，检测光路系统自动读取贫血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内，然后操作移液器将所述贫血小板血浆样本移出所述测试杯(即全部移出，测试杯保持不动)；本实施例中，贫血小板血浆用量为300ul；移液器是杭州陆恒生物科技有限公司销售的大龙移液器(手动)。本实施例中，保持测试杯位置固定不变是指测试杯放入测试孔中以后，在全部检测过程中测试杯上下位置固定(测试杯不产生上下位移或跳动)，圆周向位置固定(测试杯不产生转动)。

D、操作移液器按检测标准用量从所述富血小板血浆样本杯中取出富血小板血浆样本移入上述同一测试杯，检测光路系统自动读取富血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；本实施例中，富血小板血浆用量为300ul；本步骤的检测完成后，富血小板血浆样本全部保留在上述测试杯中，然后进行下一检测步骤；

E、操作移液器按检测标准用量从所述试剂瓶装置中取出血小板致聚剂注入上述同一测试杯中与该测试杯中的富血小板血浆样本混合，检测光路系统自动读取规定时间内上述富血小板血浆样本的透光度随时间变化的数据并存储到微型计算机，微型计算机根据公式计算出血小板聚集指数；所述检测光路系统读取上述数据的过程中，有一个搅拌器对所述测试杯中的富血小板血浆样本进行连续搅拌；搅拌器可以是浆叶式搅拌器也可以是磁力搅拌装置，本实施例采用磁力搅拌装置。检测光路系统自动读取数据、对所测定的数据进行处理都属于成熟的现有技术范畴，在此不进行详细描述。在三次加样和检测过程中，测试孔中的测试杯始终保持位置固定不变；

F、将血小板聚集指数的测定结果根据所输入的患者信息生成试验报告；

参见图1图2，血小板聚集指数检测装置300包括微型计算机、测试机芯装置303、试剂瓶装置310、样本盘装置311、测试杯盘装置301；测试机芯装置包括测试孔305、磁力搅拌器309、小磁棒308、检测光路系统(测试机芯装置采用光电比浊法测试电路，检测光路系统属于现有技术范畴)；检测光路系统包括发光晶体管电路306和光电转换电路307，检测光路系统与微型计算机信号连接；测试孔中设有定位机构，保持测试杯304上下位置固定，圆周向位置固定；在测试杯下面设置一个加热装置，该加热装置是一个加热用线路板，通过该线路板上的导线发热，用于达到使测试区域保持37℃恒温的作用；样本盘装置上设置多个样本杯312；测试杯盘装置上设置多个测试杯座302，用于放置备用的测试杯；试剂瓶装置上部设置试剂瓶孔，其内插装试剂瓶，试剂瓶中保存血小板致聚剂；所述试剂瓶装置下部设置半导体制冷装置；制冷装置属于现有技术，不进行详细描述。图2中箭头表示磁力搅拌器旋转方向，该磁力搅拌器属于现有技术，不进行详细描述。

实施例二：

本实施例是在实施例一的基础上进行的改进，本实施例中与实施例一相同的内容，请参照实施例一中公开的内容进行理解，此处不作重复描述；实施例一中公开的内容也应当作为本实施例公开的内容。

参见图3-图6，本发明的血小板聚集指数稳定性的方法，使用一种全自动血小板聚集仪，依据光电比浊法进行测定，测定步骤是：

A、使用采血试管采集患者血液样品，对该血液样品进行抗凝处理，生成抗凝全血；启动离心机装置对抗凝全血离心处理，离心机以一档速度分离出富血小板血浆，命令加样针或者自动移液器从所述试管中吸取样本量的富血小板血浆，注入到样本盘装置中的样本杯中，设置样本号；离心机以二档速度分离出贫血小板血浆，命令加样针或者自动移液器从所述试管中吸取样本量的贫血小板血浆，注入到样本盘装置中的样本杯中，设置样本号；本步骤既可以通过聚集仪自动进行，也可以人工完成，本实施例通过聚集仪自动完成；

B、将制备好的血小板致聚剂放入试剂瓶装置中，低温保存备用；

C、命令抓杯装置从测试杯盘装置中取出一个测试杯，将其放入测试机芯装置的测试孔中并保持测试杯位置固定不变；命令加样针或者自动移液器按检测标准用量从指定的样本杯中取出贫血小板血浆移入所述测试杯，检测光路系统自动读取贫血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内，然后命令加样针或者自动移液器将所述贫血小板血浆样本移出所述测试杯；所述指定的样本杯是指装有贫血小板血浆的样本杯；

D、命令加样针或者自动移液器按检测标准用量从指定的样本杯中取出富血小板血浆移入上述同一测试杯，检测光路系统自动读取富血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；所述指定的样本杯是指装有富血小板血浆的样本杯；

E、命令试剂针按检测标准用量从所述试剂瓶装置中取出血小板致聚剂注入上述同一测试杯中与该测试杯中的富血小板血浆样本混合，检测光路系统自动读取规定时间内上述富血小板血浆样本的透光度随时间变化的数据并存储到微型计算机，微型计算机根据公式计算出血小板聚集指数；命令试剂针和加样针自动清洗或者自动移液器自动更换加样头；命令抓杯装置从上述测试孔中取出测试杯放入废杯孔中；

F、将血小板聚集指数的测定结果根据所输入的患者信息生成试验报告；

本实施例中，贫血小板血浆的数据测试动作、富血小板血浆的数据测试动作、血小板聚集诱导剂的数据测试动作是由计算机程序控制顺序进行的。

本实施例中，既可以采用上海寰熙医疗器械有限公司销售的NJ4A全自动血小板聚集仪，也可以采用北京普利生仪器有限公司销售的NJ4A全自动血小板聚集仪，还可以采用下述全自动血小板聚集仪：

一种全自动血小板聚集仪包括一个机座1，机座上设有自动控制电路，该自动控制电路中安装有相应的程序、微型计算机(单片机电路)，机座的测试台面101上设置测试机芯装置3、测试杯盘装置2、样本盘装置6、试剂瓶装置5、清洗盘装置4，所述机座的一侧设置模块式离心机装置7；所述测试机芯装置中设有五个磁力搅拌装置，环绕该磁力搅拌装置设置的发光晶体管电路和光电转换电路(测试机芯装置采用光电比浊法测试电路)；所述测试杯盘装置上设置多个测试杯201；所述测试杯盘装置左边设置一个废杯孔102，废杯孔下面(测试台面下面)设置废杯收集盒；所述样本盘装置上设置多个样本杯(用于放置待测试血浆)；所述试剂瓶装置下部设置半导体制冷装置；所述清洗盘装置中包括清洗液瓶和废液收集瓶；所述模块式离心机装置包括一个底座701，所述底座上固定一个医用高速离心机702，医用高速离心机左边设置采血试管架703；所述机座的测试台面上方设置加样针装置(或者自动移液器)9、试剂针装置10及抓杯装置8，该加样针装置(或者自动移液器)试剂针装置及抓杯装置安装在一个行走装置11上，该行走装置包括纵向行走机构111和横向行走机构112。加样针装置中的加样针901与一个自动加样管路和一个加样针的自动清洗管路连接。自动移液器能自动更换加样头。

在本实施例中，测试机芯装置中的每个磁力搅拌装置都设有一个测试孔(用于放入测试杯201)，测试杯的下面设置磁盘，在测试杯中加入一个搅拌棒(小磁棒308)，磁力搅拌电机驱动磁盘309转动，小磁棒随之转动，实现对测试杯中的待测血浆进行搅拌(参见图2)。该磁力搅拌装置属于现有技术，不进行详细描述。

参见图3，在本实施例中，样本盘装置6上设置60个样本杯孔位，样本杯孔位按棋盘格式布局，每个样本杯孔中插入能保存PRP或者PPP(即富血小板血浆、或者贫血小板血浆)的样本杯601。

在本实施例中，试剂瓶装置上部设置试剂瓶孔，其内插装试剂瓶，试剂瓶中保存血小板致聚剂(也可称为血小板聚集诱导剂)。为了满足血小板致聚剂的温度要求，所述试剂瓶装置下部设置半导体制冷装置；该制冷装置由制冷电路、散热片和风扇构成，制冷电路属于现有技术，不进行详细描述。

在本实施例中，清洗盘装置设有清洗池，清洗池用于试剂针和加样针的清洗。清洗池内部设置两个针孔形清洗槽和废液收集口，下部设置废液收集瓶，废液收集口与废液收集瓶连通。试剂针装置、加样针装置产生的废弃液都可以排放到废液收集瓶中，统一收集。

在本实施例中，医用高速离心机是市售的BY-620型台式高速常温离心机，离心机，由外壳、旋转部分及电器控制系统组成。机器工作时，在电机驱动下，旋转头承载分离样品高速旋转，装有血样品的试管对称放入转头的适配器中。

在本实施例中，加样针装置(或者自动移液器)9、试剂针装置10及抓杯装置安装在一个行走装置11上，该行走装置包括纵向行走机构111和横向行走机构112。(图3显示的仪器的长度方向为纵向)纵向行走机构包括纵向导轨、步进电机、同步齿形带、纵向行走托架，纵向行走托架与同步齿形带固定安装；(图3显示的仪器的宽度方向为横向)横向行走机构包括横向导轨、步进电机、同步齿形带、横向行走托架，横向行走托架与同步齿形带固定安装；试剂针装置、自动移液器及抓杯装置固定在横向行走机构的横向行走托架上，横向行走机构固定在纵向行走机构的纵向行走托架上。试剂针装置、自动移液器各自设置竖直向行走机构，分别驱动加样针901(或者自动移液器的加样头)、试剂针902上下移动，该竖直向行走机构包括步进电机、同步齿形带、同步带轮。试剂针装置包括试剂针、软管、电磁阀、吸液泵、计量元件；自动移液器包括试剂针、软管、电磁阀、吸液泵、计量元件；试剂针装置、自动移液器属于现有技术范畴，不进行详细描述。所述的抓杯装置包括竖直向驱动机构、竖直向托架803，所述竖直向托架底部安装抓臂802，所述抓臂底部水平设置四指抓杯器801。

Claims (2)

1.一种提高血小板聚集指数稳定性的方法，其特征在于：使用一种血小板聚集指数检测装置，依据光电比浊法进行测定，测定步骤是：

A、使用采血试管采集患者血液样品，对该血液样品进行抗凝处理，生成抗凝全血；将抗凝全血离心处理，制备成富血小板血浆样本和贫血小板血浆样本；富血小板血浆样本保存到样本盘装置的富血小板血浆样本杯中，设置样本号；贫血小板血浆样本保存到样本盘装置的贫血小板血浆样本杯中，设置样本号；

B、将制备好的血小板致聚剂放入试剂瓶装置中，低温保存备用；

C、将一个测试杯放入血小板聚集指数检测装置的测试孔中并保持测试杯位置固定不变；操作移液器按检测标准用量从所述贫血小板血浆样本杯中取出贫血小板血浆样本移入所述测试杯，检测光路系统自动读取贫血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内，然后操作移液器将所述贫血小板血浆样本移出所述测试杯；

D、操作移液器按检测标准用量从所述富血小板血浆样本杯中取出富血小板血浆样本移入上述同一测试杯，检测光路系统自动读取富血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；

E、操作移液器按检测标准用量从所述试剂瓶装置中取出血小板致聚剂注入上述同一测试杯中与该测试杯中的富血小板血浆样本混合，检测光路系统自动读取规定时间内上述富血小板血浆样本的透光度随时间变化的数据并存储到微型计算机，微型计算机根据公式计算出血小板聚集指数；

F、将血小板聚集指数的测定结果根据所输入的患者信息生成试验报告；

所述血小板聚集指数检测装置包括微型计算机、测试机芯装置、试剂瓶装置、样本盘装置，测试机芯装置包括测试孔、搅拌器、检测光路系统。

2.一种提高血小板聚集指数稳定性的方法，其特征在于：使用一种全自动血小板聚集仪，依据光电比浊法进行测定，测定步骤是：

A、使用采血试管采集患者血液样品，对该血液样品进行抗凝处理，生成抗凝全血；启动离心机装置对抗凝全血离心处理，离心机以一档速度分离出富血小板血浆，命令加样针或者自动移液器从所述试管中吸取样本量的富血小板血浆，注入到样本盘装置中的样本杯中，设置样本号；离心机以二档速度分离出贫血小板血浆，命令加样针或者自动移液器从所述试管中吸取样本量的贫血小板血浆，注入到样本盘装置中的样本杯中，设置样本号；

B、将制备好的血小板致聚剂放入试剂瓶装置中，低温保存备用；

C、命令抓杯装置从测试杯盘装置中取出一个测试杯，将其放入测试机芯装置的测试孔中并保持测试杯位置固定不变；命令加样针或者自动移液器按检测标准用量从指定的样本杯中取出贫血小板血浆样本移入所述测试杯，检测光路系统自动读取贫血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内，然后命令加样针或者自动移液器将所述贫血小板血浆样本移出所述测试杯；

D、命令加样针或者自动移液器按检测标准用量从指定的样本杯中取出富血小板血浆样本移入上述同一测试杯，检测光路系统自动读取富血小板血浆样本的透光度数据并存储到微型计算机内；

E、命令试剂针按检测标准用量从所述试剂瓶装置中取出血小板致聚剂注入上述同一测试杯中与该测试杯中的富血小板血浆样本混合，检测光路系统自动读取规定时间内上述富血小板血浆样本的透光度随时间变化的数据并存储到微型计算机，微型计算机根据公式计算出血小板聚集指数；命令试剂针和加样针自动清洗或者自动移液器自动更换加样头；命令抓杯装置从上述测试孔中取出测试杯放入废杯孔中；

F、将血小板聚集指数的测定结果根据所输入的患者信息生成试验报告；

所述全自动血小板聚集仪包括自动控制电路，测试机芯装置、测试杯盘装置、样本盘装置、试剂瓶装置、清洗盘装置、离心机装置、试剂针装置、加样针装置或者自动移液器、抓杯装置；所述测试机芯装置包括测试孔、搅拌器、检测光路系统；所述样本盘装置上设置多个样本杯；所述试剂瓶装置下部设置半导体制冷装置；所述清洗盘装置中包括清洗液瓶和废液收集瓶。