CN104906576A - 可供皮下注射的高浓度抗vegf抗体配制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种供皮下注射用包含高浓度抗VEGF抗体的液体药物配制剂,它包含如下组分:抗VEGF抗体20~400mg/ml;缓冲剂1~150mM;稳定剂1~500mM;非离子型表面活性剂0.01~0.08%(w/v);其中,配制剂的pH为5.5±2.0。本发明还公开了前述药物配制剂的用途,以及包含该配制剂的药物。本发明包含高浓度抗VEGF抗体的配制剂稳定,不易聚集和降解,安全性好,有效性强,可供皮下注射用,应用前景良好。
Description
技术领域
本发明涉及可供皮下注射的高浓度抗VEGF抗体配制剂。
背景技术
血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)为一种同源二聚体糖蛋白,在人体内具有促进血管内皮细胞分裂、增殖以及诱导血管形成等作用。VEGF会通过促进血管生成引起肿瘤快速生长,是一个重要的肿瘤药物靶标。VEGF抗体可以与VEGF结合抑制其生理活力,进而抑制肿瘤的快速生长,另外,VEGF抗体还可以治疗老年黄斑变性疾病。
目前,常用的VEGF抗体制剂是AVASTINTM(贝伐单抗(Bevacizumab),其由血管内皮生长因子(VEGF)的单克隆抗体与二水合海藻糖、磷酸钠和聚山梨酯20组成,其中,抗体的浓度为25mg/ml。贝伐单抗中,抗体浓度较低,使用时,至少需要注射几百毫升,才能发挥药效。因而仅适于肌肉注射,而不适于注射限度仅2ml的皮下注射。
皮下注射的优点在于它容许医学从业人员在相当短的时间内将其实施于患者。此外,患者训练后可以自己实施皮下注射,不需要医院护理,在维持剂量给药期间特别有用。但是,皮下注射受注射体积的限制,为了满足皮下注射的要求,需要提供一种高浓度的VEGF抗体制剂。
然而,高浓度抗体制剂在放置的过程中,抗体容易聚集形成聚集体,导致免疫原性大大增加,制剂的安全性明显降低。目前,未见高浓度VEGF抗体制剂的报道。
发明内容
因此,本发明要解决的问题是提供可以皮下注射的药学活性抗VEGF抗体或抗VEGF抗体分子的混合物的新颖的高度浓缩的稳定的药物配制剂。在较高量的抗VEGF抗体或其混合物外,此类配制剂包含缓冲剂、稳定剂或两种或更多种稳定剂的混合物、非离子型表面活性剂和有效量的至少一种透明质酸酶。高度浓缩的抗体配制剂的制备是有挑战性的,这是由于较高蛋白质浓度的粘性的潜在的蛋白质聚集风险提高。高粘性对抗体配制剂的工艺能力有负面影响(例如,抽吸和过滤步骤)和施用(例如注射器能力)。通过添加赋形剂,可以在一些情况中降低高粘性。对蛋白质聚集的控制和分析越来越多有挑战。在制造工艺的各个步骤(其包括发酵、纯化、配制)期间和贮存期间都有聚集的潜在可能。不同的因素,诸如温度、蛋白质浓度、搅动应力、冷冻和融化、溶剂和表面活性剂效应、和化学修饰都可以影响治疗性蛋白质的聚集行为。在高度浓缩的抗体配制剂的开发期间,必须监测蛋白质的聚集趋势,并通过添加各种赋形剂和表面活性剂来加以控制[Kiese S.等,J.Pharm.Sci.,2008;97(10);4347-4366]。制备依照本发明的药学活性抗VEGF抗体的合适的高度浓缩的稳定的药物配制剂的难度由于以下的情况而提高,必须以如下的方式在一种液体配制剂中配制两种不同蛋白质,使得配制剂在数周里仍然保持稳定,并且药学活性成分在适当的贮存期间仍然有活性。
本发明涉及供皮下注射用的药学活性抗VEGF抗体,或抗VEGF抗体分子的混合物的高度浓缩的稳定的药物配制剂。在较高量的抗VEGF抗体或其混合物外,此类配制剂包含缓冲剂、稳定剂或两种或更多种稳定剂的混合物、非离子型表面活性剂和有效量的至少一种透明质酸酶。本发明还涉及用于制备所述配制剂的方法及此类配制剂的用途。
本发明可供皮下注射的包含高浓度抗VEGF抗体的液体药物配制剂,它包含如下成分:
它包含如下组分:
其中,配制剂的pH值为5.5±2.0。
本发明所述“mM”具体为“mmol/L”。
优选地,所述抗VEGF抗体的浓度为40~200mg/ml。进一步优选地,所述抗VEGF抗体的浓度为80~160mg/ml。更进一步优选地,所述抗VEGF抗体的浓度为100~140mg/ml。再进一步优选地,所述抗VEGF抗体的浓度为100mg/ml、120mg/ml或140mg/ml。
优选地,所述抗VEGF抗体是贝伐单抗和/或雷珠单抗。
优选地,所述抗VEGF抗体在冷冻和融化后是稳定的。
优选地,所述配制剂的pH值为5.5~6.0。
优选地,所述缓冲剂的浓度为1~50mM。进一步优选地,所述缓冲剂的浓度为10~30mM。更进一步优选地,所述缓冲剂的浓度为10、20或30mM。
优选地,所述缓冲剂为乙酸盐、琥珀酸盐、葡糖酸盐、组氨酸盐或柠檬酸盐。
优选地,所述稳定剂的浓度分别是2~250mM。进一步优选地,所述稳定剂的浓度分别是2~50mM。更进一步优选地,所述稳定剂的浓度分别是5~250mM。再进一步优选地,所述稳定剂的浓度分别是200mM。
优选地,所述稳定剂是具有稳定蛋白性质的糖类或者氨基酸。优选地,所述糖类是蔗糖、麦芽糖或二水合α,α-海藻糖。优选地,所述糖类的浓度为100~200mM。
优选地,所述稳定剂是甲硫氨酸。优选地,所述氨基酸的浓度是5~15mM。进一步优选地,所述甲硫氨酸作为第二稳定剂使用。
药学可接受表面活性剂的合适的例子包括聚氧乙烯山梨聚糖脂肪酸酯(Tween)、聚乙烯-聚丙二醇、聚氧乙烯-硬脂酸酯、聚氧乙烯烃基醚,例如聚氧乙烯单月桂基醚、烃基苯基聚氧乙烯醚(Triton-X)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(Poloxamer,Pluronic)、和十二烷基硫酸钠(SDS)。最合适的聚氧乙烯山梨聚糖-脂肪酸酯是聚山梨酯20(以商标Tween20TM出售)和聚山梨酯80(以商标Tween80TM出售)。最合适的聚乙烯-聚丙烯共聚物是F68或Poloxamer188TM。最合适的聚氧乙烯烃基醚是BrijTM。最合适的烃基酚聚氧乙烯醚Triton-X。非离子型表面活性剂可以是聚山梨酯,例如选自聚山梨酯20、聚山梨酯80和聚乙烯-聚丙烯共聚物的组合。非离子型表面活性剂的浓度是0.01至0.08%(w/v)、或0.015至0.075%(w/v)、或更具体地约0.02、0.04或0.06%(w/v)。
优选地,所述非离子型表面活性剂是聚山梨酯、Poloxamer、Triton、十二烷基硫酸钠和月桂基硫酸钠中的一种或两种以上的混合物。
优选地,所述非离子型表面活性剂的浓度为0.02%~0.06%(w/v)。进一步优选地,所述非离子型表面活性剂的浓度为0.02%(w/v)、0.04%(w/v)或0.06%(w/v)。
优选地,所述配制剂还包括有效量的透明质酸酶。
使得共施用的抗VEGF抗体的分散和吸收升高是有可能的。透明质酸酶的最小量是大于150U/ml。更具体地,透明质酸酶的有效量是约1’000至15’000个U/ml,其中基于假定的比活100’000个U/mg,所述量对应于约0.01mg至0.15mg蛋白质。或者,透明质酸酶的浓度是约1’500至12’000个U/ml,或更具体地,约2’000个U/ml或约12’000个U/ml。前文规定的量对应于最初对配制剂添加的透明质酸酶量。如例示性配制剂中证明的,最终配制剂中测量的透明质酸酶浓度可以在某个范围内变化。例如刚好在添加12’000个U/ml酶后测量的实际测量透明质酸酶(HE)浓度显示12000U/ml至15000U/ml间的变化。透明质酸酶以组合的最终配制剂存在或者供共施用使用,例如作为如下文进一步概述的共配制剂。依照本发明的配制剂的重要问题是在它准备好使用时,它具有如所附权利要求书中所列的组成。透明质酸酶对抗VEGF抗体的比率(w/w)的范围为1∶1’000至1∶8’000,或范围为1∶3’000至1∶6’000或约1∶5’000。
透明质酸酶可以自重组DNA技术制造、人样品衍生或者动物组织提取。
优选地,所述透明质酸酶是提取自动物组织的透明质酸酶。
优选地,所述透明质酸酶是采用大肠杆菌/酵母或者哺乳动物细胞表达的重组透明质酸酶。
优选地,所述透明质酸酶的浓度2000~12000U/ml。
进一度优选地,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为5.5;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为5.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0。
所述配制剂还包括有效量的氯化钠。优选地,所述氯化钠的浓度为65~130mM。
优选地,所述药物配制剂用于皮下或肌肉施用。
本发明还提供了一种抗VEGF抗体的冻干药物配制剂,其复溶得到的液体配制剂是前述任意一项液体配制剂。依照WO97/04801中的教导,可以通过重建冻干的配制剂以提供比冻干步骤前混合物中的蛋白质浓度大2-40倍的重建配制剂中的蛋白质浓度,来提高重建配制剂中的抗体浓度。
本发明还提供了前述的药物配制剂或药物制剂在制备治疗癌症或非恶性疾病的药物中的用途。
本发明还提供了一种新的药物,它包括前述任意一项所述的配制剂。
综上,本发明包含高浓度抗VEGF抗体的配制剂稳定,聚集程度和降解幅度均较小,安全性好,抗体浓度高,有效性强,注射极小剂量即可发挥药效,可以通过皮下注射达到治疗目的,使用方便,应用前景良好。
本发明提供了前述配制剂用于制备可用于治疗受试者中适宜用抗VEGF抗体治疗的疾病或病症,诸如例如癌症或非恶性疾病的药物的用途,包括以有效治疗所述疾病或病症的量对受试者施用本文中所描述的配制剂。可以与化疗剂伴随或先后共施用抗VEGF抗体。
在本发明的另一方面,提供了前述配制剂治疗受试者中适宜用抗VEGF抗体治疗的疾病或病症(例如癌症或非恶性疾病)的方法,包括以有效治疗所述疾病或病症的量对受试者施用本文中所描述的配制剂。癌症或非恶性疾病一般会牵涉VEGF的过量表达,使得依照本发明的治疗性药物皮下配制剂中的VEGF抗体能够中和掉患者癌症组织过量的VEGF。
本发明还提供了一种试剂盒,它包含有前述的药物配制剂或药物制剂。
优选地,所述试剂盒包含装有前述药物配制剂或药物制剂的一个或多个管形瓶,以及患者皮下施用前述配制剂的说明书。
优选地,所述试剂盒还包含用于对患者皮下施用所述配制剂的注射或输注装置。
在一些实施方案中,依照本发明的高度浓缩的稳定的药物抗VEGF抗体配制剂具有下列组成之一:
a)80至160mg/ml抗VEGF抗体,例如选自下组:贝伐单抗、雷珠单抗或抗VEGF抗体分子的混合物;1至150mM组氨酸缓冲液,例如L-组氨酸/HCl(pH为约5.5);5至250mM稳定剂,其是例如二水合α,α-海藻糖和任选地浓度5至50mM的甲硫氨酸作为第二稳定剂;约0.01至0.08%非离子型表面活性剂;和大于150至15’000U/ml,透明质酸酶,例如动物组织提取的透明质酸酶,浓度约2’000U/ml或约12’000U/ml。
b)120±20mg/ml抗VEGF抗体,例如选自下组:贝伐单抗、雷珠单抗或抗VEGF抗体分子的混合物;10至30mM,或约20mM组氨酸缓冲液,诸如例如L-组氨酸/HCl(pH为约5.5);100至250mM或约200mM稳定剂,其是例如二水合α,α-海藻糖和任选地浓度2至50mM,或5至15mM,或约10mM的甲硫氨酸作为第二稳定剂;约0.01至0.08%非离子型表面活性剂;和1’000至15’000个U/ml,或1’500至12’000个U/ml,约2’000个U/ml或约12’000个U/ml透明质酸酶,例如动物组织提取的透明质酸酶。
c)约120mg/ml抗VEGF抗体,例如选自下组:贝伐单抗、雷珠单抗或抗VEGF抗体分子的混合物;10至30mM,或约20mM组氨酸缓冲液,诸如例如L-组氨酸/HCl(pH为约5.5);100至250mM,例如约200mM稳定剂,其是例如二水合α,α-海藻糖和任选地浓度2至50mM,或5至15mM,或约10mM的甲硫氨酸作为第二稳定剂;约0.01至0.08%非离子型表面活性剂;和1’000至15’000个U/ml,或1’500至12’000U/ml,或更具体地约2’000U/ml或约12’000个U/ml透明质酸酶,例如动物组织提取的透明质酸酶。
d)约120mg/ml抗VEGF抗体,例如选自下组:贝伐单抗、雷珠单抗或抗VEGF抗体分子的混合物;约20mM组氨酸缓冲液,诸如例如L-组氨酸/HCl(pH为约5.5);约200mM二水合α,α-海藻糖和任选地约10mM甲硫氨酸作为第二稳定剂;0.04或0.06%聚山梨酯20;和约12’000个U/ml透明质酸酶,例如动物组织提取的透明质酸酶;及特别地下文规定的配制剂A。
e)约120mg/ml抗VEGF抗体,例如选自下组:贝伐单抗、雷珠单抗或抗VEGF抗体分子的混合物;约20mM组氨酸缓冲液,诸如例如L-组氨酸/HCl(pH为约5.5);约200mM二水合α,α-海藻糖和任选地10mM甲硫氨酸作为第二稳定剂;0.04或0.06%聚山梨酯20;和约2’000个U/ml透明质酸酶,例如动物组织提取的透明质酸酶;及特别地下文规定的配制剂X。
f)冻干配制剂,其包含120mg/ml抗VEGF抗体,例如选自下组:贝伐单抗、雷珠单抗或抗VEGF抗体分子的混合物;20mM组氨酸缓冲液,诸如例如L-组氨酸/HCl(pH为约5.5);200mM二水合α,α-海藻糖和任选地10mM甲硫氨酸作为第二稳定剂;约0.04至0.06%非离子型表面活性剂;及特别地下文规定的配制剂Y。可以与1’000至15’000个U/ml,或1’500至12’000U/ml,或更具体地约2’000U/ml或约12’000U/ml透明质酸酶,例如动物组织提取的透明质酸酶一起重建这些配制剂。
在另一个实施方案中,依照本发明的高度浓缩的稳定的药物抗VEGF抗体配制剂具有表1、3和4-中规定的组成之一,其中配制剂C、D、E和F由于不太想要的特性而不太优选,如实施例中所概述的。
已经提出了通过使用少量可溶性透明质酸酶糖蛋白(sHASEGP)来促进治疗性蛋白质和抗体的皮下注射;见WO2006/091871。已经显示了此类可溶性透明质酸酶糖蛋白(作为组合的配制剂或者通过共施用)的添加促进对下皮施用治疗性药物。通过快速解聚胞外空间中的乙酰透明质酸HA,降低间质的粘性,由此提高液体传导,容许安全且舒适地将较大体积施用入皮下组织中。间质粘性的降低以及水力传导性的提高容许皮下更大的分散,这就提高了皮下施用的治疗性药物的系统生物利用度。
因此,包含可溶性透明质酸酶糖蛋白的高度浓缩的稳定的药物配制剂的本发明特别适合于皮下注射。本领域技术人员清楚地理解,可以提供包含抗VEGF抗体和可溶性透明质酸酶糖蛋白的此类配制剂来以一种单一组合配制剂形式或备选地以可以在临皮下注射前混合的两种分开的配制剂形式施用。或者,可以将抗VEGF抗体和可溶性透明质酸酶糖蛋白分开注射在身体的不同部位,优选地在彼此紧密相邻的部位施用。也有可能以连续注射形式注射依照本发明的配制剂中存在的治疗剂,例如首先是可溶性透明质酸酶糖蛋白,接着注射抗VEGF抗体配制剂。这些注射也可以以相反的次序实施,即通过首先注射抗VEGF抗体配制剂,接着注射可溶性透明质酸酶糖蛋白来进行。在以分开注射施用抗VEGF抗体和可溶性透明质酸酶糖蛋白的情况中,必须给蛋白质中的一种或两者提供如所附权利要求书中所规定浓度的缓冲剂、稳定剂和非离子型表面活性剂,但是排除透明质酸酶。然后,可以在例如L-组氨酸/HCl缓冲液(pH为约6.5)、100至150mM NaCl和0.01至0.1%(w/v)聚山梨酯20或聚山梨酯80中提供透明质酸酶。具体地,在20mM L-组氨酸/HCl缓冲液(pH6.5)、120mM NaCl、0.05%(w/v)聚山梨酯80中提供透明质酸酶。
如上文记录的,可以认为可溶性透明质酸酶糖蛋白是抗VEGF配制剂中的别的赋形剂。可溶性透明质酸酶糖蛋白可以在制造抗VEGF配制剂时添加至抗VEGF配制剂或者可以在注射前不久添加。或者,可以以分开注射提供可溶性透明质酸酶糖蛋白。在后一种情况中,可溶性透明质酸酶糖蛋白可以在分开的管形瓶中以在皮下注射发生前必须用合适的稀释剂重建的冻干形式提供,或者可以由制造商以液体配制剂提供。抗VEGF配制剂和可溶性透明质酸酶糖蛋白可以以分开的实体获得或者也可以以包含注射组分和适合于其皮下注射的包含两者的试剂盒提供。还可以提供适合于重建和/或施用配制剂中的一种或两者的说明。
因此,本发明还以包含注射组分和适合于其皮下施用的两者的试剂盒形式提供了药物组合物,其由药学活性抗VEGF抗体或抗VEGF抗体的混合物的高度浓缩的稳定的药物配制剂和适量的至少一种透明质酸酶组成。
本发明的又一方面涉及包含依照本发明的高度浓缩的稳定的药物配制剂的注射装置。此类配制剂可以由药学活性抗VEGF抗体或抗VEGF抗体分子的混合物和如下文所概述的合适的赋形剂组成,并且另外可以包含可溶性透明质酸酶糖蛋白作为组合配制剂或作为共施用的分开配制剂。
多种抗VEGF抗体是现有技术中已知的。抗VEGF抗体优选地是单克隆抗体。它们可以是所谓的嵌合抗体、人源化抗体或全人源抗体。它们可以是全长抗VEGF抗体;具有相同生物学活性的抗VEGF抗体片段;包括抗VEGF抗体或片段的氨基酸序列变体和/或糖基化变体。人源化抗VEGF抗体的例子以名称贝伐单抗、雷珠单抗已知。最成功的治疗性抗VEGF抗体是由Genentech Inc.和F.Hoffmann-La Roche Ltd以商品名AVASTINTM出售的贝伐单抗。关于VEGF抗原及针对其的抗体的更多详情记载于许多专利和非专利出版物(关于合适的概述,见美国专利US06,884,879和欧洲专利EP2,338,915)。
抗VEGF抗体选自例如贝伐单抗、雷珠单抗,并且也可以由抗VEGF抗体的混合物。依照本发明的配制剂在本文中以抗VEGF抗体贝伐单抗示例。术语“贝伐单抗”伐和“雷珠单抗”涵盖在选自美国、欧洲和日本的国家或地区中满足获得作为相同或生物相似产品的销售授权必需的要求的所有相应抗VEGF抗体。贝伐单抗具有EP2,338,915中限定的CDR区。雷珠单抗具有US20100322931A1中限定的CDR区。
AVASTINTM(贝伐单抗)已经在美国得到批准,用于抑制血管内皮生长因子引起的肿瘤血管生成相关的肿瘤:转移性的结直肠癌,联合5-氟尿嘧啶作为一线或者二线化学疗法以治疗方案。转移性的结直肠癌,联合氟尿嘧啶类药物伊立替康或奥沙利铂氟尿嘧啶为基础的化疗用于二线疗法,其中患者为AVASTINTM第一线含方案进展的患者。非鳞状非小细胞肺癌,联合卡铂和紫杉醇作为一线治疗不能切除的局部晚期,复发或转移性疾病。胶质母细胞瘤,作为单一的药物用于前期治疗后有进展性疾病的成年病人。转移性肾细胞癌(mRCC),联合干扰素alpha。此外,贝伐单抗目前开发用于治疗输卵管癌,卵巢癌,腹膜癌和胃癌等。
目前对贝伐单抗用于转移性的结直肠癌批准三种给药方案;5mg/kg IV(q2w)联合IFL;10mg/kg IV(q2w)联合FOLFOX4;5mg/kg IV(q2w)或7.5mg/kg IV(q3w)联合氟尿嘧啶类药物伊立替康或奥沙利铂氟尿嘧啶。贝伐单抗用于非鳞状非小细胞肺癌15mg/kg IV(q3w)联合卡铂/紫杉醇。贝伐单抗用于胶质母细胞瘤10mg/kg IV(q2w)。贝伐单抗用于转移性肾细胞癌10mg/kgIV(q2w)联合干扰素alpha。
如上文所记录的,静脉内施用的AVASTINTM(贝伐单抗)目前以管形瓶中的液体形式出售。在美国出售的配制剂中有两种规格每个管形瓶装有100mg/4ml或者400mg/16ml溶液。贝伐单抗提取所需量,稀释为总体积100ml的0.9%的氯化钠注射液。第一次滴注:滴注超过90分钟。随后输注:如果第一次输注耐受,则第二次静脉滴注60分钟以上;如果第二次输注耐受,则所有后续注入的时间超过30分钟。
许多可溶性透明质酸酶糖蛋白是现有技术中已知的。为了进一步限定此类可溶性透明质酸酶糖蛋白的功能、作用机制和特性,提供了以下背景信息。
SC(皮下)间质基质由糖胺聚糖的粘弹性凝胶内包埋的纤维状蛋白质的网络构成。乙酰透明质酸(HA),即一种非硫酸化重复线性二糖是SC组织的主要糖胺聚糖。HA由成纤维细胞以一种高分子量兆道尔顿粘性聚合物分泌入间质中,随后,其在局部、在淋巴中、及在肝中经由溶酶体透明质酸酶和外切糖苷酶的作用降解。身体中的约50%乙酰透明质酸是由SC组织生成的,其中它以约0.8mg/gm湿重组织存在[Aukland K.和Reed R.,见上文]。估计平均70kg成人含有约15克HA,其中30%每天周转(合成和降解)[Laurent L.B.等,“Catabolism of hyaluronanin rabbit skin takes place locally,in lymph nodes and livern,Exp.Physiol.1991;76:695-703]。作为皮下基质的凝胶样组分的主要成分,HA显著促成其粘性。
糖胺聚糖(GAG)是胞外基质(ECM)的复杂线性多糖。GAG以N-取代的氨基己酸和糖醛酸(在乙酰透明质酸(HA)、硫酸软骨素(CS)、软骨素(C)、硫酸皮肤素(DS)、硫酸乙酰肝素(HS)、和肝素(H)的情况中),或半乳糖(在硫酸角质素(KS)的情况中)的重复二糖结构为特征。除了HA外,所有都以与核心蛋白共价结合方式存在。GAG及其核心蛋白在结构上称为蛋白聚糖(PG)。
在哺乳动物中,主要在结缔组织、皮肤、软骨中,及在滑液中找到乙酰透明质酸(HA)。乙酰透明质酸也是眼的玻璃体的主要组分。在结缔组织中,与乙酰透明质酸有关的水合水产生组织间的水合基质。乙酰透明质酸在与细胞运动性有关的生物学现象,包括快速发育、再生、修复、胚胎发生、胚胎学发育、伤口愈合、血管发生、和肿瘤发生中发挥关键的作用(Toole,CellBiol.Extracell.Matrix,Hay(编),Plenum Press,New York,1991;第1384页-第1386页;Bertrand等,Int.J.Cancer1992;52:1-6;Knudson等,FASEB J.1993;7:1233-1241]。另外,乙酰透明质酸水平与肿瘤攻击性相关联[Ozello等,Cancer Res.1960;20:600-604;Takeuchi等,CancerRes.1976;36:2133-2139;Kimata等,Cancer Res.1983;43:1347-1354]。
在许多细胞的胞外基质中,特别地在软结缔组织中找到HA。HA的各项生理学功能包括,诸如在水和血浆蛋白质稳态中[Laurent T.C.等,FASEB J.,1992;6:2397-2404]。HA的合成在增殖细胞中增加,并且可以在有丝分裂中发挥作用。它还牵涉行进和细胞迁移。HA在细胞调节、发育、和分化中也发挥着重要的作用[Laurent等,见上文]。
临床医学中已经广泛使用HA。其组织保护和流变学特性已经证明可用于眼科手术(例如以在白内障手术期间保护角膜内皮)。血清HA可以为肝疾病和各种炎性状况,诸如类风湿性关节炎的诊断依据。由HA积累引起的间质性水肿可以引起各个器官的功能性障碍[Laurent等,见上文]。
乙酰透明质酸蛋白质相互作用也牵涉胞外基质或“基质”的结构。
透明质酸酶是遍及动物界都可以找到的一组一般是中性或酸性活性酶。透明质酸酶就其底物特异性和作用机制而言有区别(WO2004/078140)。总的说来存在着三大类透明质酸酶:
1.哺乳动物型透明质酸酶(EC3.2.1.35),其是以四糖和六糖作为主要终产物的内-β-N-乙酰基己糖胺酶。它们具有水解和转糖苷酶的活性,并且可以降解乙酰透明质酸和硫酸软骨素(CS),一般指C4-S和C6-S。
2.细菌透明质酸酶(EC4.2.99.1)降解乙酰透明质酸及以各种程度降解CS和DS。它们是内-β-N-乙酰基己糖胺酶,其主要运行β消除反应生成二糖终产物。
3.来自水蛭、其它寄生物和甲壳动物的透明质酸酶(EC3.2.1.36)是由水解β1-3连接生成四糖和六糖终产物的内-β-葡糖醛酸糖苷酶。
哺乳动物透明质酸酶可以进一步分成两组:中性活性和酸性活性酶。人基因组中存在着6种透明质酸酶样基因,即HYAL1、HYAL2、HYAL3、HYAL4、HYALP1和PH20/SPAM1。HYALP1是一种假基因,并且尚未显示HYAL3拥有针对任何已知底物的酶活性。HYAL4是一种软骨素酶,并且展现出很少的针对乙酰透明质酸的活性。HYAL1是原型酸性活性酶,而PH20是原型中性活性酶。一般地,酸性活性透明质酸酶,诸如HYAL1和HYAL2在中性pH(即pH7)缺乏催化活性。例如,HYAL1在体外超过pH4.5具有很少的催化活性[Frost I.G.和Stern,R.,活性[性。例如,Hiter-based assay for hyaluronidase activity not requiring specialized reagents稀,Anal.Biochemistry,1997;251:263-269]。HYAL2是一种在体外具有非常低的比活的酸性活性酶。
透明质酸酶样酶也可以指那些一般经由糖基磷脂酰肌醇锚锁定质膜的酶,诸如人HYAL2和人PH20[Danilkovitch-Miagkova等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,2003;100(8):4580-4585;Phelps等,Science1988;240(4860):1780-1782],和那些一般可溶的酶,诸如人HYAL1[Frost,I.G.等,“,G.1[Frosta,cloning,and expression of human plasma hyaluronidasee,Biochem.Biophys.Res.Commun.1997;236(1):10-15]为特征。然而,存在着物种间的变化:例如牛PH20非常松散地附着于质膜,并且没有经由磷脂酶敏感性锚来锚定[Lalancette等,Biol.Reprod.,2001;65(2):628-36]。牛透明质酸酶的此独特特征已经容许使用可溶性牛睾丸透明质酸酶作为临床使用的提取物(WydaseTM,HyalaseTM)。其它PH20种类是脂质锚定的酶,其一般在不使用去污剂或脂肪酶的情况中是不可溶的。例如,人PH20经由GPI锚而锚定于质膜。尝试生成人PH20,不会将脂质锚引入多肽中的DNA构建体生成无催化活性的酶,或不溶性的酶[Arming等,Eur.J.Biochem.,1997;247(3):810-4]。以可溶性和膜结合形式两者找到天然存在的弥猴精子透明质酸酶。虽然64kDa膜结合形式在pH7.0拥有酶活性,但是54kDa形式仅在pH4.0有活性[Cherr等,Dev.Biol.,1996;10;175(l):142-53]。如此,PH20的可溶性形式经常缺乏中性条件下的酶活性。
将少量可溶性透明质酸酶糖蛋白(sHASEGP)引入配制剂中以便于将治疗性药物施用入下皮中。通过快速解聚胞外空间中的HA,sHASEGP降低间质的粘性,由此提高水力传导,并且可以安全且舒适地将较大体积施用于SC组织中。经由降低的间质粘性由sHASEGP诱导的提高的水力传导容许更大程度的皮下分散,这潜在地提高SC施用的治疗性药物的系统生物利用度。
在皮下注射时,sHASEGP对HA的解聚定位于SC组织中的注射部位。实验证据显示sHASEGP在小鼠中以半衰期13至20分钟在间质空间中局部失活,在CD-1小鼠中静脉内单剂量注射后在血液中没有可检出的系统性吸收。在血管区室内,sHASEGP在多至0.5mg/kg剂量的情况下在小鼠和猕猴中分别有2.3和5分钟的半衰期。与HA底物在SC组织中的连续合成组合,sHASEGP的快速清除导致其它共注射分子的瞬时的且局部有活性的渗透增强,该效应在施用后的24至48小时内完全可逆[Bywaters G.L.等,[Bywaters G.L.of the dermalbarrier to dye spread after Hyaluronidase injection适,Br.Med.J.,1951;2(4741):1178-1183]。
除其对局部液体分散的影响外,sHASEGP还充当吸收增强剂。大于16千道尔顿(kDa)的大分子大多排除在经由扩散来通过毛细管的吸收之外,并且大多经由引流淋巴结吸收。因此,皮下施用的大分子,诸如例如治疗性抗体(分子量约150kDa)必须穿过间质基质,之后到达引流淋巴系统,随后吸收入血管区室中。通过提高局部分散,sHASEGP增加许多大分子的吸收速率(Ka)。相对于在没有sHASEGP的情况中的SC施用,这直接提高了峰血液水平(Cmax),而且潜在地提高了其生物利用度[Bookbinder L.H.,等“,A recombinant human enzyme for enhancedinterstitial transport of therapeuticsp,J.Control.Release2006;114:230-241]。
动物起源的透明质酸酶产品已经在临床上使用超过60年,主要用于提高其它共施用的药物的分散和吸收及用于皮下输液(大体积的流体的SC注射/输注)[Frost G.I.,“Recombinanthuman hyaluronidase(rHuPH20):an enabling platform for subcutaneous drug and fluidadministrationh,Expert Opinion on Drug Delivery,2007;4:427-440]。关于透明质酸酶作用机制的详情已经详细记载于下列出版:Duran-Reynolds F.,“A spreading factor in certain snake venomsand its relation to their mode of action建,CR Soc Biol Paris,1938;69-81;Chain E.,“A mucolyticenzyme in testes extractse,Nature1939;977-978;Weissmann B.,“The transglycosylative action oftesticular hyaluronidaseo,J.Biol.Chem.,1955;216:783-94;Tammi,R.,Saamanen,A.M.,Maibach,H.I.,Tammi M.,“Degradation of newly synthesized high molecular mass hyaluronan in the epidermalanddermal compartments of human skin in organ culture”,J.Invest.Dermatol.1991;97:126-130;Laurent,U.B.G.,Dahl,L.B.,Reed,R.K.,“Catabolism of hyaluronan in rabbit skin takes place locally,in lymph nodes and liver,Exp.Physiol.1991;76:695-703;Laurent,T.C.和Fraser,J.R.E.er,iol.1991;76:695-703;LauSubstances:Physiology and Pathophysiologya,Henriksen,J.H.(Ed)CRCPress,Boca Raton,FL;1991.第249页-第265页;Harris,E.N.等,“Endocytic function,glycosaminoglycan specificity,and antibody sensitivity of the recombinant human190-kDahyaluronan receptor for endocytosis(HARE)y,J.Biol.Chem.2004;279:36201-36209;Frost,G.I.,“Recombinant human hyaluronidase(rHuPH20):an enabling platform for subcutaneous drug and fluidadministrationn,Expert Opinion on Drug Delivery,2007;4:427-440。在EU国家得到批准的透明质酸酶产品包括Hylaser明质酸酶产品包括和在美国得到批准的动物起源的透明质酸酶产品包括VitraseTM、HydaseTM、和AmphadaseTM。
透明质酸酶产品的安全性和功效已经得到广泛建立。其最重大的安全性风险是超敏感性和/或变应原性。应当注意,在英国、德国与美国间就动物衍生的透明质酸酶的批准剂量而言有差异。在英国,作为皮下或肌肉内注射佐剂的常用剂量是1500个Hylase当单位。在美国,使用的常用剂量是150个单位。在皮下输液中,使用透明质酸酶来帮助相对大体积的流体的皮下施用。在英国,一般以皮下使用的每500至1000ml流体使用1500个单位的透明质酸酶。在美国,认为150个单位对于每升皮下输液溶液已经足够。在德国,认为150至300个单位对于此目的是足够的。在英国,通过添加1500个单位来加速局部麻醉剂的扩散。在德国和美国,认为150个单位对于此目的是足够的。虽然有剂量差异(在英国的剂量比在美国高10倍),但是在美国和英国销售的动物衍生的透明质酸酶产品的安全性概况报道没有明显差异。
可溶性透明质酸酶糖蛋白(sHASEGP)、其制备方法及其在药物组合物中的用途已经记载于WO2004/078140。已经在WO2006/091871中提及与多种例示性抗体,例如曲妥单抗组合使用可溶性透明质酸酶糖蛋白。
从下文具体实施方式已经显示了,本发明的配制剂具有有利的贮存稳定性,而且满足健康权力机构批准的所有必需要求。
本发明的配制剂中的透明质酸酶增强抗VEGF抗体对系统循环的投递,例如通过增加活性物质的吸收来实现(它充当渗透增强剂)。透明质酸酶还通过可逆水解乙酰透明质酸(即SC间质组织的一种胞外组分)来提高治疗性抗VEGF抗体经由皮下途径对系统循环的投递。下皮中的乙酰透明质酸水解暂时打开S C组织的间质空间中的通道,并且由此改善治疗性抗VEGF抗体对系统循环的传递。另外,施用显示了人的疼痛降低和SC组织的体积衍生的肿胀较小。
透明质酸酶在局部施用时在局部具有其全部效应。换言之,透明质酸酶在数分钟中局部失活并代谢,而且尚未注意到具有系统或长期效应。在透明质酸酶进入血流时它在数分钟内快速失活排除在不同透明质酸酶产品间实施可比较的生物分布研究的实际能力。此特性还使任何潜在的系统安全性忧虑最小化,这是因为透明质酸酶产品不能在远离的部位起作用。
所有透明质酸酶的统一特征是其解聚乙酰透明质酸的能力,不管化学结构、物种来源、组织来源、或源自相同物种和组织的药物产品的批次的差异。它们的与众不同之处在于,尽管具有不同结构,它们的活性是相同的(除了效力外)。
依照本发明的配制剂的透明质酸酶赋形剂以对本文中所描述的稳定的药物配制剂中的抗VEGF抗体的分子完整性没有不利影响为特征。此外,透明质酸酶仅仅修饰抗VEGF抗体对系统循环的投递,但是不拥有可以提供或促成系统吸收的抗VEGF抗体的治疗效果的任何特性。透明质酸酶不是系统生物利用的,并且在依照本发明的稳定的药物配制剂的推荐贮存条件没有不利地影响抗VEGF抗体的分子完整性。因此,它被认为是依照本发明的抗VEGF抗体配制剂中的赋形剂。因为它不施加治疗效果,所以它代表除治疗活性抗VEGF抗体外的药学形式组分。
依照本发明的许多合适的透明质酸酶现有技术已知。优选的酶是提取自动物组织的透明质酸酶。透明质酸酶是通过水解N-乙酰基葡糖胺的C1位置与葡糖醛酸的C4位置间的β-1,4连接来解聚乙酰透明质酸的中性和酸性活性β-1,4糖基水解酶家族成员。乙酰透明质酸是一种在结缔组织,诸如皮下间质组织,和某些特化组织,诸如脐带和玻璃体液的胞内基质中找到的多糖。乙酰透明质酸的水解暂时地降低间质组织的粘性,并且促进注射流体或局部漏出液或渗出物的分散,如此便于其吸收。透明质酸酶的效果是局部的,并且在24至48小时内发生的组织乙酰透明质酸完全重建的情况中可逆[Frost,G.I.质,Recombinant human hyaluronidase(rHuPH20):an enabling platform for subcutaneous drug and fluid administration”,Expert Opinion onDrug Delivery,2007;4:427-440]。经由水解乙酰透明质酸的结缔组织渗透性升高与透明质酸酶在其提高共施用分子的分散和吸收能力方面的功效相关联。
动物衍生的透明质酸酶通过水解N-乙酰基葡糖胺的C1位置与葡糖醛酸的C4位置间的β-1,4连接来解聚乙酰透明质酸。四糖是最小的消化产物[Weissmann,B.,是最小的transglycosylative action of testicular hyaluronidased,J.Biol.Chem.,1955;216:783-94]。此N-乙酰基葡糖胺/葡糖醛酸结构未在重组产物的N连接的聚糖中找到,并且因此,透明质酸酶不会影响与其一起配制的抗体,诸如例如贝伐单抗的糖基化。动物衍生的透明质酸酶的短半衰期和乙酰透明质酸的持续合成导致酶对组织的短的且局部的作用。
动物衍生的透明质酸酶在依照本发明的抗VEGF抗体SC配制剂中的使用容许施用较高体积的药物产物,并且潜在增强皮下施用的贝伐单抗吸收进入系统循环中。
依照本发明的稳定的药物配制剂的摩尔渗透压浓度是330明的稳定的药物配制剂。
依照本发明的稳定的药物配制剂基本上没有可见的(人眼检查)颗粒。(亚-可见如通过光遮蔽测量的)应当满足下列标准:每个管形瓶≥10μm颗粒的最大数目->5000;每个管形瓶≥25μm的颗粒的最大数目->500。
又一方面,本发明提供了治疗受试者中适宜用抗VEGF抗体治疗的疾病或病症(例如癌症或非恶性疾病)的方法,包括以有效治疗所述疾病或病症的量对受试者施用本文中所描述的配制剂。癌症或非恶性疾病一般会牵涉VEGF的过量表达,使得依照本发明的治疗性药物SC配制剂中的VEGF抗体能够抑制VEGF与其受体结合。下文的定义部分中进一步列出了可以用依照本发明的配制剂治疗的各种癌症或非恶性疾病。
可以将依照本发明的药学活性抗VEGF抗体的稳定的药物配制剂作为皮下注射施用,其中以2周时间间隔(q2w)重复施用几次。在大多数情况中在1至10分钟,优选地2至6分钟,最优选地3,最优分钟的时间段内注射流体的整个体积。此类皮下施用有方便患者在家自身使用的潜力,改善患者的顺从性,并且降低/消除与IV施用有关的成本(即IV施用的护理成本、躺椅租费、患者出行等)。依照本发明的皮下施用最可能会与输注相关反应的频率和/或强度降低有关。
对配制剂添加透明质酸酶容许增加可以安全且舒适地皮下施用的注射体积。在正常的情况下,注射体积是1至15ml。已经观察到依照本发明的配制剂的施用提高治疗性抗体的分散、吸收和生物利用度。经由SC路径施用的大分子(即大于16kDa)经由引流淋巴液优先吸收入血管区室中[Supersaxo,A.等,“Effect of Molecular Weight on the Lymphatic Absorption ofWater-Soluble Compounds Following Subcutaneous Administration酶,1990;2:167-169;Swartz,M.A.tz9of Molecular Weight on the,The physiology of the lymphatic systemp,2001;50:3-20]。因此这些大分子引入系统循环的速率相对于静脉内输注是较缓的,潜在地导致输注相关反应的频率/强度降低。
依照本发明的皮下贝伐单抗配制剂的生成要求制造工艺的最终纯化步骤中的高抗体浓度(约120mg/ml)。因此,将额外的工艺步骤(超滤/渗滤)添加至贝伐单抗的常规制造工艺。依照本发明的高度浓缩的稳定的药物抗VEGF抗体配制剂也可以以稳定化的蛋白质配制剂提供,所述稳定化的蛋白质配制剂可以用合适的稀释剂重建以生成高抗VEGF抗体浓度重建的配制剂。
主要使用依照本发明的VEGF抗体SC配制剂来治疗癌症。其中,术语“癌症”、“癌性”、“约”的定义见公开号:CN102573789A,发明名称:“皮下抗HER2抗体配制剂”的专利申请第【105】段和【106】段的内容。
也可以使用依照本发明的VEGF抗体SC配制剂来治疗各种非恶性疾病或病症,具体的疾病同公开号:CN102573789A,发明名称:“皮下抗HER2抗体配制剂”的专利申请第【107】段的内容。
在适应症是癌症的情况中,可以用抗体配制剂和化疗剂的组合治疗患者。联合施用包括共施用或同时施用(其使用分开的配制剂或单一药物配制剂进行)和以任意次序的连续施用,其中优选地,存在着所有活性剂同时施加其生物学活性的时间段。如此,可以在施用依照本发明的抗体配制剂之前、或之后施用化疗剂。在此实施方案中,化疗剂的至少一次施用与依照本发明的抗体配制剂的至少一次施用间隔优选地是约1个月或更小,且最优选地约2周或更小。或者,可以在单一配制剂或分开的配制剂中对患者同时施用化疗剂和依照本发明的抗体配制剂。
用所述抗体配制剂的治疗会导致癌症或疾病的体征或症状的改善。例如,在所治疗的疾病是癌症的情况中,此类疗法可以导致存活(总体存活和/或无进展存活)的改善和/或可以导致客观临床响应(部分的或完全的)。此外,用化疗剂和抗体配制剂的组合治疗可以对患者产生协同或大于叠加的治疗益处。
对于皮下投递,可以经由合适的装置,诸如(但不限于)注射器;注射装置(例如INJECT-EASETM和GENJECTTM装置);输注泵(诸如例如Accu-ChekTM);注射笔(诸如GENPENTM;一种无针装置(例如MEDDECTORTM和BIOJECTORTM);或者经由皮下贴片投递系统来施用配制剂。
对于预防或治疗疾病、先前的疗法、患者的临床史及他对抗体的响应、和主治内科医生的判断。在一次或一系列治疗里对患者适当地施用抗体。根据疾病的类型和严重性,约1μg/kg至50mg/kg体重或更具体地约0.1mg/kg至20mg/kg体重的抗VEGF抗体是对患者施用的候选初始剂量,其例如通过一次或多次分开的施用,或者通过连续输注来进行。更具体地,抗体的剂量会在约0.05mg抗VEGF抗体/kg体重至约10mg抗VEGF抗体/kg体重的范围中。若施用化疗剂,因此它通常以已知的剂量施用,或者任选地由于药物的组合作用或可归因于化疗剂施用的负面副作用而降低。可以依照制造商的说明或如熟练从业人员凭经验确定的那样使用此类化疗剂的制备和剂量给药日程表。此类化学疗法的制备和剂量给药日程表也记载于Chemotherapy Service Ed.,M.C.Perry,Williams&Wilkins,Baltimore,MD(1992)。
其它治疗方案可以与抗体组合,包括但不限于第二(第三、第四等)化疗剂(换言之,不同化疗剂的“混合物(cocktail)物合;另一种单克隆抗体;生长抑制剂;细胞毒剂;化疗剂;EGFR靶向药物;酪氨酸激酶抑制剂;和/或细胞因子等;或其任何合适的组合。
在上述治疗方案外,患者可以进行癌细胞的手术除去和/或放射疗法。
在本发明的另一个实施方案中,提供了制品,其含有本发明的药物配制剂且提供其使用说明。此制品包含容器。合适的容器包含例如瓶、管形瓶(例如多或双室管形瓶)、注射器(诸如多或双室注射器)和试管。容器可以自多种材料诸如玻璃或塑料形成。容器容纳配制剂,并且容器上或与容器结合的标签可以指示使用指导。容纳配制剂的容器可以是多次使用管形瓶,其容许重建配制剂的重复施用(例如2至6次施用)。制品可以进一步包含从商业和用户观点看期望的其它材料,包括其它缓冲液、稀释剂、滤器、针、注射器、和具有使用说明的包装插页。
术语“药物配制剂”指处于使得容许活性成分的生物学活性有效的形式,且不含对于会接受配制剂施用的受试者具有不可接受的毒性的别的组分的制剂。此类配制剂是无菌的。
“缓冲剂”指通过其酸/碱共轭组分的作用提供包含其的溶液抵抗pH变化的试剂。依照本发明的配制剂中使用的缓冲液具有范围为约5.0至约7.0,或约5.0至约6.5,或约5.3至约5.8的pH。已经发现了pH约5.5是最合适的。会控制此范围中的pH的缓冲剂的例子包括乙酸盐、琥珀酸盐、葡糖酸盐、组氨酸、柠檬酸盐、双甘氨肽和其它有机酸缓冲液。依照本发明的最合适的缓冲液是组氨酸缓冲液,诸如例如L-组氨酸/HCl。
“组氨酸缓冲液”是包含氨基酸组氨酸的缓冲液。组氨酸缓冲液的例子包括盐酸组氨酸、乙酸组氨酸、磷酸组氨酸、硫酸组氨酸。实施例中鉴定为最合适的组氨酸缓冲液是盐酸组氨酸缓冲液。通过用稀释的氢氯酸滴定L-组氨酸(游离碱,固体)来制备此类盐酸组氨酸缓冲液。具体地,组氨酸缓冲液或盐酸组氨酸缓冲液为pH5.5类盐酸5,更具体地为pH约5.3至约5.8,且最具体地具有pH5.5。
“稳定剂”(在本专利说明书中与术语“稳定化剂”同义使用)是权力机构准许作为药物配制剂中的合适添加剂或赋形剂的碳水化合物或糖类或糖,例如蔗糖,麦芽糖或二水合α,α-海藻糖。稳定剂的浓度是1至500mM,如5至250mM,或100至250mM,或约200mM。配制剂可以含有第二稳定剂,其中此第二稳定剂可以是甲硫氨酸,例如浓度为2至50mM或浓度为5至15mM(例如浓度为约5mM、约10mM或约15mM的甲硫氨酸)。
“糖类”包含通用组成(CH2O)n及其衍生物,包括单糖、二糖、三糖、多糖、糖醇、还原糖、非还原糖等。本文中糖类的例子包括葡萄糖、蔗糖、海藻糖、乳糖、果糖、麦芽糖、右旋糖苷、甘油、右旋糖苷、赤藓糖醇、甘油、阿拉伯糖醇、木糖醇(sylitol)、山梨糖醇、甘露糖醇、蜜二糖(mellibiose)、松三糖、棉子糖、甘露三糖、水苏糖(stachyose)、麦芽糖、乳酮糖(lactulose)、麦芽酮糖(maltulose)、葡糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、异麦芽酮糖等。特别地,本文中所描述的配制剂包含非还原性二糖作为稳定剂,选自下组的糖类:蔗糖,麦芽糖或海藻糖(二水合α,α-海藻糖)。
“表面活性剂”指一种表面活性剂,例如非离子型表面活性剂。本文中的表面活性剂的例子包括聚山梨酯(例如聚山梨酯20和聚山梨酯80);Poloxamer(例如Poloxamer188);Triton;十二烷基硫酸钠(SDS);月桂基硫酸钠;辛基糖苷钠;月桂基-、肉豆寇基-、亚油酰(linoleyl-)、或硬脂酰-磺基甜菜碱;月桂基-、肉豆寇基-、亚油酰基或硬脂酰基-肌氨酸;亚油酰基-、肉豆蔻基-、或鲸蜡基-甜菜碱;月桂酰胺基丙基-、椰油酰胺基丙基-、亚油酰胺基丙基-、肉豆蔻酰胺基丙基-、棕榈酰胺基丙基(palmidopropyl)-、或异硬脂酰胺基丙基-甜菜碱(例如月桂酰胺基丙基);肉豆蔻酰胺基丙基-、棕榈酰胺基丙基-、或异硬脂酰胺基丙基-二甲胺;甲基椰油酰基(cocoyl)牛磺酸钠、或甲基油烯基牛磺酸二钠;和MONAQU ATTM系列(MonaIndustries,Inc.,Paterson,New Jersey);聚乙二醇、聚丙二醇、和乙烯和丙二醇的共聚物(例如Pluronics、PF68等)等。已经分别发现了聚山梨酯20(PS20)和聚山梨酯80(PS80)在本文中所描述的配制剂中是特别适合的。
如下的术语:“无菌”配制剂、“稳定的”配制剂、“等渗的”或“等张的”、“抗体”、“单克隆抗体”、“抗体片段”、“全长抗体”、“氨基酸序列变体”抗体、“糖基化变体”抗体、抗体“效应器功能”、单克隆抗体的“生物学活性”、“血管生成因子或试剂(angiogenic factor or agent))、“抗血管生成剂”或“血管生成抑制剂”、“抗VEGF抗体”、抗VEGF抗体“贝伐单抗(BV)7”、“系列多肽”、“治疗/处理”、“细胞毒剂”、“化疗剂”、“靶向药物”、“酪氨酸激酶抑制剂”、“抗血管生成剂”、“细胞因子”、“有效量”、“基本上纯的”抗体,它们的定义见公开号:CN102573789A,发明名称:“皮下抗HER2抗体配制剂”的专利申请第【122】段~【154】段的内容。
显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1:就通过大小排阻-HPLC检出的低分子量(LMW)种类而言配制剂A至F(见下文表1~表6)在8周后的稳定性。如此图中所显示的,在于30℃贮存后,PS20配制剂A、C和E比PS80配制剂B、D和F显示略好的稳定性。
图2:就通过大小排阻-HPLC检出的高分子量(HMW)种类而言配制剂A至F(见下文表1~表6)在8周后的稳定性。如此图中所显示的,含有海藻糖而没有添加氯化钠的配制剂A和B在8周贮存时间后显示较小的HMW增加。
图3:液体配制剂A至F(见下文表1~表6)的浊度。如此图中所显示的,含有海藻糖的配制剂A和B显示低浊度;而含有NaCl的配制剂C至F显示高得多的浊度。含有海藻糖及NaCl的配制剂E和F显示中间的浊度。在贮存8周后没有观察到显著升高。
具体实施方式
使用如下文所概述的通用制备和分析方法和测定法,基于如下文所提供的实验结果开发依照本发明的供皮下施用的抗VEGF配制剂。
贝伐单抗:通过一般已知用于生成重组蛋白的技术来制造贝伐单抗或者采用市售品。制备方法:自母细胞库在经遗传工程改造的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)系在细胞培养物中扩充;自细胞培养物流体收获贝伐单克隆抗体,并使用固定化的蛋白A亲和层析、阳离子交换层析(例如SP-Sepharose FF)、除去病毒污染的过滤步骤(例如PVDF膜(由Milipore以名称Viresolve滤器销售)),接着进行阴离子交换层析(例如Q-SepharoseFF)和超滤/渗滤步骤来纯化。为了制备依照这些实施例的配制剂,在20mM组氨酸缓冲液(pH约6.0)中以约100mg/ml的浓度提供贝伐单抗。
透明质酸酶,按照如下方法制备:冷冻的羊和牛睾丸用刀切开,剥除内外层及副睾丸,绞碎成糜浆。称取糜浆100kg倒入预先配好的冷醋酸液(水90kg,冰醋酸600ml,1mol/L盐酸10L混合而成)中,在-5℃下激烈搅拌3~4min,以后每隔5min搅拌一次,提取4h。然后过滤,得提取液125~140L。浆渣进行第二次提取,提取酸液用量为第一次用量的1/3,合并提取液。在不断搅拌下,每升提取液加硫酸铵210g,完全溶解后,静置1h左右,用涤纶布吊滤过夜,得滤液110L。然后再按每升滤液加入硫酸铵290g,使完全溶解,静置1h,吊滤过夜,得透明质酸酶粗品。将粗品溶于5L冷蒸馏水中,搅拌下加入硫酸铵125g,使完全溶解,在10℃放置过夜。除去液面脂肪,虹吸出上层清液,并过滤。滤液在不断搅拌下,再缓缓加入硫酸铵750g,使完全溶解,在10℃左右放置过夜。次日吸去上层清液,得盐析物。将盐析物溶入500ml冷的蒸馏水中,装入透析袋,置于25L,pH=6.5磷酸盐-柠檬酸缓冲溶液(柠檬酸7.5g,Na2HP412H2O60g,氯化钠70g,用水配成2500ml,用柠檬酸调整pH=6.5)中,于约10℃透析24h后过滤,得透析液。透析液于冰浴中冷却,加入15%Na2HPO412H2O溶液50ml,在不断搅拌下,缓缓加入20%-水乙酸钙溶液30ml,并以0.5mol/L氢氧化钠溶液调pH=8.5,继续搅拌10min,减压过滤,滤液以0.5mol/L盐酸调pH=7.0,冷冻干燥,得无热原透明质酸酶精品。收率为每公斤睾丸得2*10e4单位以上。
依照本发明的配制剂的其它赋形剂在实践中广泛使用,并且是本领域技术人员已知的。因此,不需要在这里详细解释它们。
如下开发依照本发明的供皮下施用的液体药物产品配制剂。
实施例1:本发明液体配制剂的制备
配制剂的制备:为了制备液体配制剂,将贝伐单抗在含有预期的缓冲液组成的渗滤缓冲液中进行缓冲液交换,并且在需要时,通过渗滤浓缩成约150mg/ml的抗体浓度。完成渗滤操作后,将稳定剂(例如海藻糖、甲硫氨酸)以及透明质酸酶以储备溶液添加至抗体溶液中。然后,以50至200倍储备溶液添加表面活性剂。最后,用缓冲液调节各成分的浓度和pH,各成分的浓度和pH在下文中进一步规定。
将所有配制剂无菌过滤通过0.22μm低蛋白质结合滤器,并在无菌条件下填充入无菌6ml玻璃管形瓶中,用经ETFE(乙烯和四氟乙烯的共聚物)包被的橡胶塞和Alucrimp帽密封。填充体积是约3.0ml,即可。
配制剂的检测:将制得的配制剂在不同气候条件(5℃、25℃和30℃)贮存不同时间间隔,并通过摇动(于5℃和25℃以200min-1的摇动频率持续1周)和冷冻-融化压力法来施压。在应用压力测试之前和之后通过下列分析方法来分析样品:
1)UV分光光度法;
2)大小排阻层析(SEC);
3)通过溶液的浊度;
4)在可见颗粒方面;
5)在动物组织提取的透明质酸酶活性方面。
在Perkin Elmerλ35UV分光光度计上以240nm至400nm的波长范围实施用于测定蛋白质含量。
使用大小排阻层析(SEC)来检测配制剂中的可溶性高分子量种类(HMW聚集体)和低分子量水解产物(LMW)。在具有Waters W2487双吸光度检测仪并装备有2个行内TosoHaas TSK凝胶SuperSW3000,4,6x300mm柱的Waters Alliance2695HPLC仪上实施该方法。使用50mM磷酸钠、420mM高氯酸钠,pH7.0作为流动相通过等度洗脱概况来分开完整的单体、聚集体和水解产物,并于280nm的波长检测。
为了测定浊度,于室温使用HACH2100AN浊度计以FTU(浊度单位)测量乳光。
通过使用Seidenader V90-T目视检查仪对样品分析可见颗粒。
使用动物组织提取的透明质酸酶的体外酶测定法作为活性测定法。该测定法基于在乙酰透明质酸(透明质酸钠)结合阳离子沉淀剂时形成不溶性沉淀物。通过将动物组织提取的透明质酸酶与乙酰透明质酸底物一起温育,然后用酸化的血清清蛋白(马血清)沉淀未消化的乙酰透明质酸来测量酶活性。以640nm的波长测量浊度,并且以乙酰透明质酸底物的酶活性的浊度降低确定酶活性。使用用动物组织提取的透明质酸酶测定参照标准品的稀释物产生的标准曲线运行该规程,并自曲线阅读样品活性。
实施进一步的实验,包括下列变化:
-约5.0至约6.0的pH变化
-约100mg/ml至约140mg/ml的蛋白质含量变化
-约0.02%至约0.06%的表面活性剂变化
-约5mM至约15mM的稳定剂(甲硫氨酸)变化
下文表1中提供了液体抗VEGF药物产品配制剂(配制剂A至X)的组成和稳定性测试的结果,其中使用下列缩写:
ffp:=没有颗粒;effp:=基本上没有颗粒;wafp:=具有少许颗粒
F/T:=冷冻/融化;skg:=摇动;nd:=未测定
下文规定的配制剂显示了,有可能提供具有高浓度的两种不同蛋白质的液体配制剂。可以比冻干配制剂以更大的便利且更低的成本制备此类配制剂。此外,此类配制剂更易于处理,因为不需要溶解冻干的终产物重建。已经发现了,表1、3和4中规定的配制剂也适合于配制缺乏透明质酸酶的药学活性抗VEGF抗体的高度浓缩的稳定的药物配制剂。因此,在一方面,本发明还涉及具有规定的成分,但是缺乏透明质酸酶酶的配制剂。
如下表格中,各指标与初始条件下测得的各个参数的差异越小,说明配制剂越稳定。
配制剂A:含有120mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、10mM甲硫氨酸、0.04%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.5的液体配制剂。
表1:本发明配制剂A的稳定性数据
配制剂B:含有120mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、10mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯80、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.5的液体配制剂。
表2:本发明配制剂B的稳定性数据
配制剂C:含有120mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、130mM氯化钠、10mM甲硫氨酸、0.04%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.5的液体配制剂。
表3:配制剂C的稳定性数据
配制剂D:含有120mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、130mM氯化钠、10mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯80、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.5的液体配制剂。
表4:配制剂D的稳定性数据
配制剂E:含有120mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、100mM二水合α,α-海藻糖、65mM氯化钠、10mM甲硫氨酸、0.04%聚山梨酯20、12’000个U/ml,pH5.5动物组织提取的透明质酸酶的液体配制剂。
表5:本发明配制剂E的稳定性数据
配制剂F:含有120mg/贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、100mM二水合α,α-海藻糖、65mM氯化钠、10mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯80、12’000个U/ml,pH5.5动物组织提取的透明质酸酶的液体配制剂。
表6:本发明配制剂F的稳定性数据
配制剂G:含有120mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、10mM甲硫氨酸、0.04%聚山梨酯20,pH5.5的液体配制剂。
表7:本发明配制剂G的稳定性数据
配制剂H:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、5mM甲硫氨酸、0.02%聚山梨酯20、2’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.0的液体配制剂。
表8:本发明配制剂H的稳定性数据
配制剂I:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、5mM甲硫氨酸、0.02%聚山梨酯20、2’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表9:本发明配制剂I的稳定性数据
配制剂J:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、5mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、2’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.0的液体配制剂。
表10:本发明配制剂J的稳定性数据
配制剂K:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、5mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、2’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表11:本发明配制剂K的稳定性数据
配制剂L:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.02%聚山梨酯20、2’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.0的液体配制剂。
表12:本发明配制剂L的稳定性数据
配制剂M:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.02%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表13:本发明配制剂M的稳定性数据
配制剂N:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.0的液体配制剂。
表14:本发明配制剂N的稳定性数据
配制剂O:含有100mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl pH6.0、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶的液体配制剂。
表15:本发明配制剂O的稳定性数据
配制剂P:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCL、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.02%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.0的液体配制剂。
表16:本发明配制剂P的稳定性数据
]配制剂Q:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、5mM甲硫氨酸、0.02%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表17:本发明配制剂Q的稳定性数据
配制剂R:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、5mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.0的液体配制剂。
表18:本发明配制剂R的稳定性数据
配制剂S:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、5mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表19:本发明配制剂S的稳定性数据
配制剂T:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表20:本发明配制剂T的稳定性数据
配制剂U:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.02%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表21:本发明配制剂U的稳定性数据
配制剂V:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.0的液体配制剂。
表22:本发明配制剂V的稳定性数据
配制剂W:含有140mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、15mM甲硫氨酸、0.06%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH6.0的液体配制剂。
表23:本发明配制剂W的稳定性数据
配制剂X是:含有120mg/ml贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、10mM甲硫氨酸、0.04%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.5的液体配制剂。
表24:本发明配制剂X的稳定性数据
将前述24种抗体配制剂的组成及其在25℃放置35天后,抗体的HMW、单体和LMW的变化幅度如下表所示:
表25前述24种抗体配制剂的组成及其稳定性
如上表所示,本发明抗体配制剂在5℃放置35天后,HMW的变化幅度为-0.1~0.2%,单体的变化幅度为0.1~0.7%,LMW的变化幅度为0.1~0.6%,说明配制剂中的抗体的聚集程度和降解程度均较小,稳定性强。其中,配制剂A、Q、R、S、T、U的单体变化幅度仅仅0.1%,变化最小,最为稳定。
实施例2:本发明冻干配制剂的制备
如上文关于液体配制剂所描述的那样制备约60mg/ml贝伐单抗的溶液。以上文提及的液体配制剂浓度的一半添加其他组分。将配制剂无菌过滤通过0.22μm滤器,并在无菌条件下以等量分配入无菌20ml玻璃管形瓶中。将管形瓶用适合于在冻干工艺中使用的ETFE(乙烯和四氟乙烯的共聚物)包被的橡胶塞部分密封,并使用表25中报告的冷冻-干燥循环来冻干。
表25:冷冻-干燥循环
在LyoStar II冷冻干燥器(FTS Systems,Stone Ridge,NY,USA)中实施冻干:首先将产物自室温冷却至约5℃(预冷却),接着以约1℃/分钟的冷却速率于-40℃进行冷冻步骤,接着于-40℃进行保持步骤约2小时。于约-25℃的温度和约80μbar的室压力实施第一个干燥步骤达约72小时。随后,自-25℃随至255℃以0.2℃坡/分钟随后,自分钟的温度斜坡开始第二个干燥步骤,接着于25℃保持步骤以约80μbar的室压力持续至少8小时。
将冷冻干燥的样品于不同气候条件(5℃、25℃和30℃)贮存不同时间间隔。用注射用水(WFI)将冻干的管形瓶重建至终体积2.65ml,产生具有约120mg/ml抗体浓度的等渗配制剂(重建后的配制剂Y是含有120mg/贝伐单抗、20mM L-组氨酸/HCl、200mM二水合α,α-海藻糖、10mM甲硫氨酸、0.04%聚山梨酯20、12’000个U/ml动物组织提取的透明质酸酶,pH5.5的液体配制剂)。冷冻干燥的粉末的重建时间是10分钟左右。于周围温度在重建液体样品的24小时温育期后对重建样品进行分析。
通过上文所描述的下列分析方法再次分析样品:
1)UV分光光度法;
2)大小排阻层析(SEC);
3)离子交换层析(IEC);
4)溶液的浊度;及
5)在可见颗粒方面。
下文表3中提供了配制剂Y的稳定性测试的结果,其中使用下列缩写:
ffp:=没有颗粒;
effp:=基本上没有颗粒;
nd:=未测定
表26:本发明配制剂Y的稳定性数据
如表26所示,将本发明液体配制剂冻干后得到的冻干制剂,抗体的聚集程度和降低程度仍然较低,稳定性好。
综上,本发明包含高浓度抗VEGF抗体的配制剂稳定,聚集程度和降解幅度均较小,安全性好,抗体浓度高,有效性强,注射极小剂量即可发挥药效,可以通过皮下注射达到治疗目的,使用方便,应用前景良好。
Claims (10)
1.包含高浓度抗VEGF抗体的液体药物配制剂,其特征在于:它包含如下组分:
其中,配制剂的pH值为5.5±2.0。
2.根据权利要求1所述的药物配制剂,其特征在于:所述抗VEGF抗体是贝伐单抗和/或雷珠单抗;所述抗VEGF抗体的浓度为100~140mg/ml。
3.根据权利要求1所述的药物配制剂,其特征在于:所述缓冲剂为乙酸盐、琥珀酸盐、葡糖酸盐、组氨酸盐或柠檬酸盐;所述缓冲剂的浓度为10、20或30mM。
4.根据权利要求1所述的药物配制剂,其特征在于:所述稳定剂是糖类和/或氨基酸;所述糖类是蔗糖、麦芽糖和/或二水合α,α-海藻糖;所述氨基酸是甲硫氨酸;所述糖类的浓度为100~200mM;所述氨基酸的浓度是5~15mM。
5.根据权利要求1所述的药物配制剂,其特征在于:所述非离子型表面活性剂是聚山梨酯、Poloxamer、Triton、十二烷基硫酸钠和月桂基硫酸钠中的一种或两种以上的混合物;所述非离子型表面活性剂的浓度为0.02%~0.06%(w/v)。
6.根据权利要求1所述的药物配制剂,其特征在于:所述配制剂的pH值为5.0~6.0。
7.根据权利要求1~6任意一项所述的药物配制剂,其特征在于:所述配制剂还包括透明质酸酶;所述透明质酸酶的浓度2000~12000U/ml。
8.根据权利要求7所述的药物配制剂,其特征在于:
所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为5.5;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为5.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0;
或者,所述配制剂由如下组分组成:
其余为水,其中,配制剂的pH为6.0。
9.权利要求1~8任意一项所述的药物配制剂在制备治疗癌症或非恶性疾病的药物中的用途。
10.一种药物,其特征在于:它包含有权利要求1~8任意一项所述的药物配制剂。
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Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105920600A (zh) * | 2016-04-19 | 2016-09-07 | 上海景泽生物技术有限公司 | 一种稳定的抗vegf抗体制剂及其用途 |
CN107898756A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-04-13 | 东曜药业有限公司 | 一种用于皮下或肌肉注射的高浓度尼妥珠单抗制剂及其制备方法和应用 |
US10894083B2 (en) | 2015-01-28 | 2021-01-19 | Pfizer Inc. | Stable aqueous anti-vascular endothelial growth factor (VEGF) antibody formulation |
WO2022265591A1 (en) * | 2021-06-18 | 2022-12-22 | Arven Ilac Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi | Pharmaceutical compositions of bevacizumab |
EP4115903A4 (en) * | 2020-03-04 | 2023-12-20 | Shanghai Henlius Biotech, Inc. | PHARMACEUTICAL FORMULATION WITH BEVACIZUMAB |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2023031478A1 (en) * | 2021-09-06 | 2023-03-09 | Lek Pharmaceuticals D.D. | Formulations for vegf receptor fusion proteins |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011119661A1 (en) * | 2010-03-24 | 2011-09-29 | Genentech, Inc. | Anti-lrp6 antibodies |
CN102573789A (zh) * | 2009-07-31 | 2012-07-11 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 皮下抗her2抗体配制剂 |
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102573789A (zh) * | 2009-07-31 | 2012-07-11 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 皮下抗her2抗体配制剂 |
CN102770158A (zh) * | 2009-12-21 | 2012-11-07 | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 | 抗体配制剂 |
WO2011119661A1 (en) * | 2010-03-24 | 2011-09-29 | Genentech, Inc. | Anti-lrp6 antibodies |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10894083B2 (en) | 2015-01-28 | 2021-01-19 | Pfizer Inc. | Stable aqueous anti-vascular endothelial growth factor (VEGF) antibody formulation |
CN105920600A (zh) * | 2016-04-19 | 2016-09-07 | 上海景泽生物技术有限公司 | 一种稳定的抗vegf抗体制剂及其用途 |
CN107898756A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-04-13 | 东曜药业有限公司 | 一种用于皮下或肌肉注射的高浓度尼妥珠单抗制剂及其制备方法和应用 |
EP4115903A4 (en) * | 2020-03-04 | 2023-12-20 | Shanghai Henlius Biotech, Inc. | PHARMACEUTICAL FORMULATION WITH BEVACIZUMAB |
WO2022265591A1 (en) * | 2021-06-18 | 2022-12-22 | Arven Ilac Sanayi Ve Ticaret Anonim Sirketi | Pharmaceutical compositions of bevacizumab |
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