CN104886154A - 使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法 - Google Patents

Abstract

使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，属于烟草病虫害的生物防治技术领域，解决了现有烟草根结线虫采取化学防治时会产生生态环境破坏的问题，包括以下顺序步骤：在烟苗移栽时，将昆虫病原线虫虫尸剂放入烟苗根部，使昆虫病原线虫虫尸剂缓慢释放出昆虫病原线虫，从而抑制烟草根结线虫；所述昆虫病原线虫虫尸剂是指侵染有昆虫病原线虫的大蜡螟的尸体。本发明方法能替代化学农药防治烟草根结线虫，生态环保，安全性高。

Description

使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法

技术领域

本发明属于烟草病虫害的生物防治技术领域，特别涉及一种烟草根结线虫的防治方法。

背景技术

根结线虫是一种重要的植物寄生性线虫，其寄主范围广，繁殖能力和适应能力强，在世界各地均有发生，近几年在烟草上的发生有严重的趋势。目前生产上使用较多的是化学防治，化学防治会产生一系列诸如生态环境破坏、人体健康受到威胁等负面影响，目前有一些农药因其剧毒已被禁用。因此，人们就将目光转向生物防治，它具有环境污染小、对人体无害、维护生态平衡、持续发挥药效等优点。

发明内容

为解决现有烟草根结线虫采取化学防治时会产生一系列诸如生态环境破坏、人体健康受到威胁等问题，本发明提供一种使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，其技术方案如下：

使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，包括以下顺序步骤：

将烟苗从育苗盘中移栽到大田时，将昆虫病原线虫虫尸剂放入大田中的烟苗根部的土壤中，让昆虫病原线虫虫尸剂在土壤中缓慢释放出昆虫病原线虫，从而抑制土壤中的烟草根结线虫；

所述昆虫病原线虫虫尸剂是指侵染有昆虫病原线虫的大蜡螟的尸体。

所述让昆虫病原线虫虫尸剂在土壤中缓慢释放出昆虫病原线虫，从而抑制烟草根结线虫，其含义是让昆虫病原线虫侵染烟草根结线虫，从而将烟草根结线虫杀死。

优选地，所述虫尸剂的施用量为每株烟苗施用昆虫病原线虫9至11万条。

优选地，所述虫尸剂在施用40天后，对烟草根结线虫达到显著的抑制作用。也就是说，虫尸剂在施用40天后，每株烟草上的根结线虫卵数仅为73.9个，相比较而言，如果不对烟苗采取任何防治措施，那么每株烟草上的根结线虫卵数为106.9个。

优选地，所述虫尸剂放入位于地表以下深度为10 至20厘米的烟苗根部。

优选地，所述昆虫病原线虫虫尸剂的制备方法包括以下顺序步骤：

将大蜡螟幼虫放入含有昆虫病原线虫的土壤中，在对土壤翻动的条件下，使昆虫病原线虫侵染大蜡螟幼虫6至8天，在侵染期间每天对大蜡螟幼虫进行人工剥茧，待大蜡螟幼虫死亡后，得到大蜡螟虫尸；

取若干个开口向上的第一培养皿，在每个第一培养皿中，放入一个开口向下的第二培养皿，其中第二培养皿的口径小于第一培养皿，在第二培养皿的顶部放入一块500目的尼龙过滤网，在尼龙过滤网的顶部放上一条大蜡螟虫尸，沿着第二培养皿的顶部向第一培养皿中加入2毫升以上的蒸馏水，使蒸馏水沿第二培养皿的外壁向上对尼龙过滤网持续进行浸润，使大蜡螟虫尸上侵染的昆虫病原线虫通过第二培养皿的外壁上的水膜游到第一培养皿中的蒸馏水中，在第一培养皿上盖上一个开口向下的的第三培养皿，其中第三培养皿的口径大于第一培养皿，从而构建一个密闭的培养容器，将上述培养容器放在扎有小孔的封口袋中，再放在不透明盒中避光，然后将不透明盒放在防虫网中，6至8天后，依次打开防虫网、不透明盒、封口袋、第三培养皿后，在第一培养皿的蒸馏水中可收集得到昆虫病原线虫，第一培养皿中的蒸馏水和昆虫病原线虫的混合物构成昆虫病原线虫悬浮液，其中昆虫病原线虫悬浮液中的昆虫病原线虫浓度大于20条/20微升；

取工作面上具有若干个沉孔的孔板，在每个沉孔中放入50微升的昆虫病原线虫悬浮液，在每个沉孔中放入一条大蜡螟幼虫，使沉孔中的昆虫病原线虫悬浮液中的昆虫病原线虫侵染大蜡螟幼虫，3天后沉孔中的大蜡螟幼虫死亡，得到昆虫病原线虫虫尸剂，其中每条大蜡螟尸体即为一副昆虫病原线虫虫尸剂，每副昆虫病原线虫虫尸剂中含有9至11万条昆虫病原线虫。

本发明中的大蜡螟属鳞翅目、螟蛾科、蜡螟亚科，其拉丁文名称为Galleria mellonella，分布遍及世界各地。它的分布主要受长期寒冷的限制。在高海拔地区，大蜡螟没有或很少发生。而在东南亚热带与亚热带地区，大蜡螟危害相当严重。中国广东、广西、云南均有记载。雌成虫体肥大，前翅外缘明显向内凹陷。翅展20～40毫米。成虫头部和胸部红褐色，腹部暗褐色，前翅灰褐色，翅面有黑褐色鳞毛，翅后缘的鳞毛较多。翅端有4条短灰白色斜线。后翅灰白色，翅顶端颜色稍暗。蜡螟的幼虫又称巢虫、绵虫、隧道虫。在蜜蜂巢内取食蜂巢的蜡质，并吐丝造巢扰乱蜜蜂在蜂巢内的正常活动，严重破坏蜂巢的结构，以致迫使蜂群逃逸。成虫羽化后，在傍晚乘工蜂守卫巢口不备之机，潜入蜂巢内，产卵于蜂巢蜡脾上。幼虫也能为害毛皮和羊毛。年发生1～2代。以蛹越冬。

本发明方法能替代化学农药防治烟草根结线虫，生态环保，虫尸剂可缓慢释放有效成分EPN，防效期长，可持续100-120天，且投放、运输、储存均较方便，安全性高。

附图说明

  图1为本发明中用于诱捕昆虫病原线虫的装置的剖视图。

具体实施方式

本发明是一种采用斯氏线虫科昆虫病原线虫虫尸剂防治烤烟根结线虫的方法，其中斯氏线虫科昆虫病原线虫的拉丁文名称为S.carpocapsae，简称EPN，本发明包括以下顺序步骤：

1.昆虫病原线虫虫尸剂的制备

诱捕昆虫病原线虫：从田间取土壤到实验室，将4-5龄的老熟大蜡螟幼虫放入土壤中，其中大蜡螟的拉丁文名称为Galleria mellonella，任土壤中的昆虫病原线虫自动侵染大蜡螟一周，期间注意对土壤和大蜡螟的混合体进行翻动，同时每天都要人工剥茧，因为大蜡螟随时都会吐丝用来保护自己，待大蜡螟死亡后，得到大蜡螟虫尸；

然后将按照以下“白色陷阱”方式，其英文名称为“white-trap”方式从大蜡螟虫尸上诱捕昆虫病原线虫：如图1所示，在一个开口向上的外径为6cm、高度为1. 5 cm的第一培养皿1中，放入一个开口向下的直径为3.5cm、高度为7mm的第二培养皿2，在第二培养皿2的顶部放入一块直径为3.5 cm、孔径为500目的尼龙过滤网5，在尼龙过滤网5的顶部放上一条大蜡螟虫尸4，沿着第二培养皿2的顶部向第一培养皿1中加入2毫升以上的蒸馏水6，加入到第一培养皿1中的蒸馏水6会沿着第二培养皿2的外壁向上对尼龙过滤网5进行浸润，从而在第二培养皿2的外壁上形成水膜，大蜡螟虫尸4上侵染的昆虫病原线虫会通过第二培养皿2的外壁上的水膜游到第一培养皿1中的蒸馏水6中，在第一培养皿1上盖上一个开口向下的内径为6cm的第三培养皿3，从而构建一个密闭的培养容器，将上述培养容器放在扎有小孔的封口袋中，再放在不透明盒中避光，然后将不透明盒放在防虫网中，一周后，依次打开防虫网、不透明盒、封口袋、第三培养皿3后，在第一培养皿1的蒸馏水6中可收集得到昆虫病原线虫，第一培养皿1中的蒸馏水6和昆虫病原线虫的混合物构成昆虫病原线虫悬浮液；

扩繁：先在显微镜下观察昆虫病原线虫悬浮液中的昆虫病原线虫的浓度，当昆虫病原线虫悬浮液中的昆虫病原线虫浓度大于20条/20ul时，用移液枪吸取50ul昆虫病原线虫悬浮液放在24孔板的每个孔中，在每个孔中加入一条4-5龄的老熟大蜡螟幼虫，任溶液中的线虫侵染大蜡螟幼虫，进行扩繁，3天后大蜡螟幼虫死亡，所得的大蜡螟尸体即为昆虫病原线虫虫尸剂。

2. 使用时间及方法

烤烟移栽时将昆虫病原线虫虫尸剂放入烤烟烟苗根部，深度为10 - 20cm，使昆虫病原线虫虫尸剂缓慢释放EPN。

3. 虫尸剂用量

昆虫病原线虫虫尸剂的施用量为每株烤烟施1条昆虫病原线虫虫尸剂，含昆虫病原线虫9至11万条。

本发明达到的技术效果：

使用昆虫病原线虫虫尸剂40天后收集烟草根上的根结线虫虫卵，如下表一如示，结果表明斯氏线虫科昆虫病原线虫S.carpocapsae对烟草上根结线虫具有显著的抑制作用。以昆虫病原线虫虫尸剂方式施加，每株烟草上的根结线虫卵数仅为73.9个，显著少于对照组的106.9个，LSD均值差的显著水平为0.05，LSD的英文全称为Least—Significant Difference，其中文含义为最小显著性差异法。表一中的“对照组”是指没有对烟苗采取任何防治措施的栽培方式。

表一   EPN虫尸剂对烟草上根结线虫的影响

处理方式	对照组	施用昆虫病原线虫虫尸剂
			根结线虫卵数（个）	106.9±10	73.9±11.7*

*LSD均值差的显著水平为0.05

该方法能替代化学农药防治烟草根结线虫，虫尸剂可缓慢释放有效成分EPN，防效可持续100-120天，且投放、运输、储存均较方便，安全性高。

Claims (5)

1.使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，其特征在于，包括以下顺序步骤：

将烟苗从育苗盘中移栽到大田时，将昆虫病原线虫虫尸剂放入大田中的烟苗根部的土壤中，让昆虫病原线虫虫尸剂在土壤中缓慢释放出昆虫病原线虫，从而抑制土壤中的烟草根结线虫；

所述昆虫病原线虫虫尸剂是指侵染有昆虫病原线虫的大蜡螟的尸体。

2.根据权利要求1所述的使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，其特征在于：

所述虫尸剂的施用量为每株烟苗施用昆虫病原线虫9至11万条。

3.根据权利要求2所述的使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，其特征在于：

所述虫尸剂在施用40天后，对烟草根结线虫达到显著的抑制作用。

4.根据权利要求3所述的使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，其特征在于：

所述虫尸剂放入位于地表以下深度为10 至20厘米的烟苗根部。

5.根据权利要求1、2、3或4所述的使用昆虫病原线虫虫尸剂来防治烟草根结线虫的方法，其特征在于，所述昆虫病原线虫虫尸剂的制备方法包括以下顺序步骤：

将大蜡螟幼虫放入含有昆虫病原线虫的土壤中，在对土壤翻动的条件下，使昆虫病原线虫侵染大蜡螟6至8天，在侵染期间每天对大蜡螟幼虫进行人工剥茧，待大蜡螟幼虫死亡后，得到大蜡螟虫尸；

取若干个开口向上的第一培养皿，在每个第一培养皿中，放入一个开口向下的第二培养皿，其中第二培养皿的口径小于第一培养皿，在第二培养皿的顶部放入一块500目的尼龙过滤网，在尼龙过滤网的顶部放上一条大蜡螟虫尸，沿着第二培养皿的顶部向第一培养皿中加入2毫升以上的蒸馏水，使蒸馏水沿第二培养皿的外壁向上对尼龙过滤网持续进行浸润，使大蜡螟虫尸上侵染的昆虫病原线虫通过第二培养皿的外壁上的水膜游到第一培养皿中的蒸馏水中，在第一培养皿上盖上一个开口向下的的第三培养皿，其中第三培养皿的口径大于第一培养皿，从而构建一个密闭的培养容器，将上述培养容器放在扎有小孔的封口袋中，再放在不透明盒中避光，然后将不透明盒放在防虫网中，6至8天后，依次打开防虫网、不透明盒、封口袋、第三培养皿后，在第一培养皿的蒸馏水中可收集得到昆虫病原线虫，第一培养皿中的蒸馏水和昆虫病原线虫的混合物构成昆虫病原线虫悬浮液，其中昆虫病原线虫悬浮液中的昆虫病原线虫浓度大于20条/20微升；

取工作面上具有若干个沉孔的孔板，在每个沉孔中放入50微升的昆虫病原线虫悬浮液，在每个沉孔中放入一条大蜡螟幼虫，使沉孔中的昆虫病原线虫悬浮液中的昆虫病原线虫侵染大蜡螟幼虫，3天后沉孔中的大蜡螟幼虫死亡，得到昆虫病原线虫虫尸剂，其中每条大蜡螟尸体即为一副昆虫病原线虫虫尸剂，每副昆虫病原线虫虫尸剂中含有9至11万条昆虫病原线虫。