CN104782579A - 红铃虫甲腹茧蜂的人工繁育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种红铃虫甲腹茧蜂的人工繁育方法，包括以下步骤：1)种蜂及寄主的获得；2)寄主室内饲养；3)接蜂；4)接蜂后的饲养。本发明通过室内饲养红铃虫作为红铃虫甲腹茧蜂的扩繁寄主，来完成红铃虫甲腹茧蜂成蜂的人工扩繁；最终目的是能够人为生产大量的寄生性天敌-红铃虫甲腹茧蜂，然后在红铃虫等靶标害虫产卵期进行田间释放，控制靶标害虫的种群数量，减轻其为害作物的程度，减少化学农药使用量，提高农产品产量，保护人民生命安全和生态环境安全。
Description
技术领域
本发明涉及一种昆虫的人工繁育方法，特别是指一种红铃虫甲腹茧蜂的人工繁育方法，属于生物技术领域。
背景技术
红铃虫甲腹茧蜂（Chelonus pectinophorae Cushman），为膜翅目，茧蜂科，甲腹茧蜂亚科，甲腹茧蜂属昆虫。红铃虫甲腹茧蜂为红铃虫寄生性天敌，其已知的寄主为红铃虫、鼎点金刚钻、棉大卷叶螟（盛金坤等.江西水稻主要害虫寄生性天敌种类调查[J]，江西农业大学学报；1981，02，74-75）。
目前关于甲腹茧蜂的人工饲养有吉训聪等人（吉训聪，岳建军，秦双等.台湾甲腹茧蜂的生物学特性.中国生物防治学报，2013，29（1）：153-156；中国专利CN103109781A）开展了研究，并成功建立了室内成功饲养技术（吉训聪），但他们饲养的甲腹茧蜂为台湾甲腹茧蜂（Chelonus formosanus Sonan），与红铃虫甲腹茧蜂不是一个种。其所用寄主为甜菜夜蛾和斜纹夜蛾等。
发明内容
有鉴于此， 本发明的目的是提供一种红铃虫甲腹茧蜂的人工繁育方法。
为了实现上述的目的，本发明提供一种红铃虫甲腹茧蜂的人工繁育方法，包括如下步骤：
1)种蜂及寄主的获得；
2)寄主室内饲养；
3)接蜂方法；
4)接蜂后的饲养。
进一步地，其中步骤1)所述种蜂及寄主的获得包括：从田间采集越冬代红铃虫幼虫（其为老熟幼虫，4龄，体长11-13mm，全体红色，不再需要取食），连同一定量的籽棉一起带回室内（该籽棉起物理隔离作用，以防红铃虫幼虫间自相残杀；籽棉与虫量的比例为每500克籽棉含虫300-500头），放在直径30-32cm的玻璃缸内，用纱布覆住缸口，并用绳系住，以防茧蜂羽化后逃逸；再置于28±1℃、60-80%左右的相对湿度条件下饲养；一旦发现该种群中出现甲腹茧蜂，就用直径1cm，高10cm的指形玻璃管收集该蜂，以作种蜂备用；再收集化蛹的红铃虫，作为寄主来源。
进一步地，其中步骤2)所述寄主室内饲养(甲腹茧蜂寄主红铃虫的饲养)包括：
A）红铃虫成虫的继代培养：将上述田间收集到的红铃虫蛹置于一端用40目纱网封住、直径为15cm、高约15cm的圆柱形玻璃产卵罩中，同时向该玻璃产卵罩投入浓度为5wt％的蔗糖水以供羽化后的成虫取食；一旦成虫开始羽化，即将直径约为10cm的圆形滤纸片置于产卵罩的细纱上，用重物压住以用于卵的收集；待产卵开始后，每天同一时间（上午8-10：00间）揭下有卵的滤纸，放入干净的直径为15cm、高为15cm的罐头瓶内孵化，同时在产卵罩盖上新的圆形滤纸片，以备成虫产卵；
B) 红铃虫幼虫的继代培养：将配好的饲料切成约1cm长、0.5cm宽的条状（配方为：麦胚粉41 g/kg（150-200目）；干酪素35.5 g/kg；琼脂28.5g/kg；蔗糖12 g/kg；啤酒酵母6 g/kg；纤维素1.2 g/kg；山梨酸钾1.8g/kg；尼泊金0.6 g/kg；复合维生素0.01 g/kg（各组分占复合维生素的比例如下：泛酸钙40 wt%，烟酸20 wt%，核黄素10 wt%，盐酸吡哆辛5 wt%，硫胺素盐酸盐5 wt%，叶酸10 wt%，生物素5 wt%和维生素B12 5 wt%；各组分按照上述比例混合均匀即可得到所述复合维生素）；氯化胆碱0.07 g/kg；玉米油3.9 g/kg；蜂蜜2.4 g/kg；蒸馏水867.0 g/kg；先准确称取配方量的各种组分，然后将配方量的琼脂置于三分之二配方量的蒸馏水中并加热至溶解，配方量的其余固体组分在烧杯中用其余三分之一的蒸馏水充分溶解混匀并加入配方量的玉米油、配方量的蜂蜜再次混匀得到一混合液，最后将溶解好的琼脂加入该混合液中搅拌均匀并冷却。将配好的饲料切成长约1cm，高0.5cm的条状，装入直径、高度均为1cm的24孔盒，用精致毛刷接入红铃虫初孵幼虫（由步骤A）中每天揭下的滤纸上的红铃虫卵孵化而来），每孔接1头，再将24孔培养盒盖紧，以防幼虫逃走；之后放置在28±1℃、光照与黑暗的时间比（L：D）=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下饲养、16-20天后化蛹，再开始下一代。
进一步地，其中步骤3) 所述接蜂的方法包括：
将步骤1)中收集到的甲腹茧蜂成虫置于上述步骤2)的红铃虫产卵罩中，于28±1℃、光照与黑暗的时间比=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下培养，并向其中放入蘸有5 wt %蔗糖水的脱脂棉球（该棉球的湿润标准为用镊子夹起时，棉球很湿润但无明水下滴）用于甲腹茧蜂成虫补充营养；待出蜂后，将产有红铃虫卵的滤纸置于该产卵罩的纱网上，用重物压住以方便甲腹茧蜂的寄生。放卵量根据雌蜂的数量来把握，要求为：每头雌蜂放红铃虫卵100-200粒（约为1对红铃虫成虫的产卵量）。
进一步地，其中步骤4) 所述接蜂后的饲养包括：
将寄生后的卵收集起来，置于干净、密闭、透气的上述相同的罐头瓶（直径为15cm、高为15cm）内，再将其放于28±1℃ 、光照与黑暗的时间比=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下培养，待卵孵化后，饲养方法同步骤2)中红铃虫幼虫的饲养完全一致。
本发明具有以下有益效果：
本发明通过室内饲养红铃虫作为红铃虫甲腹茧蜂的扩繁寄主，来完成红铃虫甲腹茧蜂成蜂的人工扩繁；最终目的是能够人为生产大量的寄生性天敌-红铃虫甲腹茧蜂，然后在红铃虫等靶标害虫产卵期进行田间释放，控制靶标害虫的种群数量发生，减轻为害作物程度，减少化学农药使用量，提高农产品产量，保护人的生命安全和生态环境安全。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进一步描述。
实施例1
1、种蜂及寄主的获得：
从田间采集越冬代红铃虫老熟幼虫（4龄，体长11-13mm，全体红色，不再需要取食），连同一定量的籽棉一起带回室内（该籽棉起物理隔离作用，以防红铃虫幼虫间自相残杀。籽棉与虫量的比例为每500克籽棉含虫300-500头），放在直径约30cm的玻璃缸内，用纱布覆住缸口，并用绳系住，以防茧蜂羽化后逃逸。再置于28±1℃、60-80%左右的相对湿度条件下饲养。一旦发现该种群中出现甲腹茧蜂，就用直径约1cm，高10cm的指形玻璃管收集该蜂，以作种蜂备用。再收集化蛹的红铃虫，作为寄主来源。
2、寄主室内饲养(甲腹茧蜂寄主红铃虫的饲养)：
2.1红铃虫成虫的继代培养：将上述田间收集到的红铃虫蛹置于一端用40目细纱封住、直径和高度均为15cm的圆柱形玻璃产卵罩中，同时向产卵罩内投入5wt％的蔗糖水以供羽化后的成虫取食。一旦成虫开始羽化，即将直径为10cm左右的圆形滤纸片置于产卵罩的细纱上，用重物压住以用于卵的收集。待产卵开始后，每天上午8-10：00间揭下有卵的滤纸，放入干净的容器（如直径为15cm、高约15cm的罐头瓶）内孵化，同时在产卵罩盖上新的滤纸，以备成虫产卵。
2.2红铃虫幼虫的继代培养：红铃虫的人工饲料配方参照吴金萍，棉红铃虫人工饲料饲养技术， 湖北农业科学， 2008年第7期，见表1；先准确称取配方量的各种组分，然后将配方量的琼脂置于三分之二配方量的蒸馏水中并加热至溶解，配方量的其余固体组分在烧杯中用其余三分之一的蒸馏水充分溶解混匀并加入配方量的玉米油、配方量的蜂蜜再次混匀得到一混合液，最后将溶解好的琼脂加入该混合液中搅拌均匀并冷却。将配好的饲料切成长约1cm，高0.5cm的条状，装入24孔盒内，用精致毛刷接入红铃虫初孵幼虫（由上述2.1中每天揭下的滤纸上的红铃虫卵孵化而来），每孔接1头，再将24孔培养盒盖紧，以防幼虫逃走；放置在28±1℃、光照与黑暗的时间比（L：D）=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下饲养、16天后化蛹。
表1：红铃虫的人工饲料配方
| 组分 | 用量（g/kg, ml/L） | 作用 |
| 麦胚粉（150-200目，南京面粉厂） | 41 | 昆虫饲料的主要营养组分 |
| 干酵素（北京奥博星生物技术有限责任公司） | 35.5 | 提供昆虫生长所需的酪氨酸及各种蛋白质 |
| 琼脂（福建省莆田市秀屿区平海琼脂厂） | 28.5 | 起凝固饲料的作用 |
| 蔗糖（北京化学试剂公司） | 12 | 提供昆虫生长所需的糖分 |
| 啤酒酵母（湖北安琪酵母股份有限公司） | 6 | 提供各种氨基酸及微量元素 |
| 纤维素（α -纤维素，西陇化工有限公司） | 1.2 | 调节饲料质地，促进昆虫消化 |
| 山梨酸钾（北京化学试剂公司） | 1.8 | 防腐剂 |
| 尼泊金（西陇化工有限公司） | 0.6 | 防腐剂 |
| 复合维生素（（泛酸钙40 wt%（天津市博迪化工有限公司），烟酸20 wt%（上海蓝季科技发展有限公司），核黄素（天津市化学试剂公司分公司），盐酸吡哆辛5 wt%（天津市化学试剂公司分公司），硫胺素盐酸盐5 wt%，（上海崇明裕西厂），叶酸10 wt%（天津市科密欧化学试剂有限公司），生物素5 wt%（浙江康普达生物科技有限公司）和维生素B12 5 wt%（浙江康普达生物科技有限公司））） | 0.01 | 提供各种必需维生素 |
| 氯化胆碱（上海三爱思试剂有限公司） | 0.07 | 提供昆虫生长所需的胆碱 |
| 玉米油（福临门玉米油，东海粮油工业张家港有限公司） | 3.9 | 提供各种不饱和脂肪酸 |
| 蜂蜜（百花蜂蜜，湖北大华蜂业有限公司） | 2.4 | 提供其它必需氨基酸及维生素 |
| 蒸馏水 | 867 | 溶解各种固体物质 |
3、接蜂：
将收集到的甲腹茧蜂的茧置于红铃虫产卵罩中，置于28±1℃、L：D=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下培养，并向其中放入有5wt%蔗糖水的脱脂棉球用于茧蜂成虫补充营养；待出蜂后，将产有红铃虫卵的滤纸置于产卵罐的细纱上，用重物压住以方便甲腹茧蜂的寄生。放卵量根据雌蜂的数量来把握，要求为：每头雌蜂放卵100-200粒左右（约为1对红铃虫成虫的产卵量）。
4、接蜂后（寄生卵）的饲养：
将寄生后的卵收集起来，置于干净、密闭、上述相同的罐头瓶（直径为15cm、高为15cm）内，再将容器放于28±1℃ 、L：D=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下培养，待卵孵化后，饲养方法同上述2.2红铃虫幼虫的饲养完全一致。
本发明所提供的红铃虫甲腹茧蜂的人工繁育效果见表2。从表2的结果可以看出，在20-32℃范围内，随着温度的上升，甲腹茧蜂的各虫态历期均显著缩短，但其蛹重却以28℃为最高。该结果表明，28℃为红铃虫甲腹茧蜂的最适发育温度。
表2 不同处理温度对红铃虫甲腹茧蜂生长发育的影响
| 温度(℃) | 卵-幼虫期(d) | 蛹期（d） | 蛹茧重(g) | 全世代(d) |
| 20 | 44.27±0.67a | 22.93±0.74a | 0.0049±0.0001a | 67.20±0.67a |
| 24 | 20.67±0.75b | 14.03±0.20b | 0.0050±0.0001ab | 34.70±0.56b |
| 28 | 14.17±0.27c | 7.57±0.27c | 0.0053±0.0001b | 21.50±0.60c |
| 32 | 12.96±0.33c | 6.60±0.23c | 0.0051±0.0001ab | 19.13±0.20b |
注：同一列数据后不同小写字母代表在 0.05 水平具显著性差异。
以上仅为本发明所列举的较佳实施例，并非用以限制本发明的保护范围，所属技术领域中的普通技术人员运用本发明所作的等效修饰或变化，均同理应属于本发明的专利保护范围。
Claims (10)
1.一种红铃虫甲腹茧蜂的人工繁育方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)种蜂及寄主的获得；
2)寄主的室内饲养；
3)接蜂；
4)接蜂后的饲养。
2.如权利要求1所述的人工繁育方法，其特征在于，其中步骤1)所述种蜂及寄主的获得包括：从田间采集越冬代红铃虫幼虫，连同籽棉一起带回室内，放入直径为30-32cm的玻璃缸内，用纱布覆住缸口，并用绳系住，再置于28±1℃、60-80%的相对湿度条件下饲养；一旦发现该种群中出现甲腹茧蜂成虫，就用直径1cm，高10cm的指形玻璃管收集该蜂，以作种蜂备用；再收集化蛹的红铃虫，作为寄主来源。
3.如权利要求2所述的人工繁育方法，其特征在于，步骤1)中，所述越冬代红铃虫幼虫为老熟幼虫，4龄，体长11-13mm，全体红色，不再需要取食；所述籽棉与红铃虫幼虫的比例为每500克籽棉含虫300-500头。
4.如权利要求1所述的人工繁育方法，其特征在于，其中步骤2)所述寄主室内饲养包括：
A) 红铃虫成虫的继代培养：将上述田间收集到的红铃虫蛹置于产卵罩中，同时向该产卵罩内投入浓度为5wt％的蔗糖水以供羽化后的成虫取食；一旦成虫开始羽化，即将直径为10cm的圆形滤纸片置于产卵罩的纱网上，并用重物压住以用于卵的收集；待产卵开始后，每天同一时间揭下有卵的滤纸，放入干净的罐头瓶内孵化，同时在该产卵罩盖上新的圆形滤纸片，以备成虫产卵；
B) 红铃虫幼虫的继代培养：将配好的饲料切成1cm长、0.5cm宽的条状，装入直径、高度均为1cm的24孔盒，用精致毛刷接入红铃虫初孵幼虫，每孔接1头，再将24孔培养盒盖紧；之后放置在28±1℃、光照与黑暗的时间比为14：10h，相对湿度60％-80%的条件下饲养、16-20天后化蛹，再开始下一代。
5.如权利要求4所述的人工繁育方法，其特征在于，步骤A)中，所述产卵罩为一端用40目纱网封住、直径为15cm、高15cm的圆柱形玻璃产卵罩；所述罐头瓶的直径为15cm、高为15cm。
6.如权利要求4所述的人工繁育方法，其特征在于，步骤B)所述红铃虫初孵幼虫由步骤A）中每天揭下的滤纸上的红铃虫卵孵化而来。
7.如权利要求4所述的人工繁育方法，其特征在于，步骤B) 所述饲料的配方如下：
麦胚粉41 g/kg；干酵素35.5 g/kg；琼脂28.5 g/kg；蔗糖12 g/kg；啤酒酵母6 g/kg；纤维素1.2g/kg；山梨酸钾1.8 g/kg；尼泊金0.6g/kg；复合维生素0.01 g/kg；氯化胆碱0.07 g/kg；玉米油3.9 g/kg；蜂蜜2.4 g/kg；蒸馏水867.0 g/kg；其中所述复合维生素中的各组分占复合维生素的比例为：泛酸钙40 wt%、烟酸20 wt%、核黄素10 wt%、盐酸吡哆辛5 wt%、硫胺素盐酸盐5 wt%、叶酸10 wt%、生物素5 wt%以及维生素B12 5 wt%。
8.如权利要求7所述的人工繁育方法，其特征在于，步骤B) 所述饲料的配制方法为：
先准确称取配方量的各种组分，然后将配方量的琼脂置于三分之二配方量的蒸馏水中并加热至溶解，配方量的其余固体组分在烧杯中用其余三分之一的蒸馏水充分溶解混匀并加入配方量的玉米油、配方量的蜂蜜再次混匀得到一混合液，最后将溶解好的琼脂加入该混合液中搅拌均匀并冷却。
9.如权利要求1所述的人工繁育方法，其特征在于，其中步骤3) 所述接蜂的方法包括：
将步骤1)中收集到的甲腹茧蜂成虫置于上述步骤2)的红铃虫产卵罩中，于28±1℃、光照与黑暗的时间比=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下培养，并向其中放入蘸有5wt%蔗糖水的脱脂棉球以用于甲腹茧蜂成虫补充营养；待出蜂后，将产有红铃虫卵的滤纸置于该产卵罩的纱网上，用重物压住以便于甲腹茧蜂的寄生；其中每头雌蜂放100-200粒红铃虫卵。
10.如权利要求1所述的人工繁育方法，其特征在于，其中步骤4) 所述接蜂后的饲养包括：
将寄生后的卵收集起来，置于干净、密闭、透气且直径为15cm、高为15cm的罐头瓶内，再将其放于28±1℃ 、光照与黑暗的时间比=14：10h，相对湿度60％-80%的条件下培养，待卵孵化后，饲养方法同步骤2)中红铃虫幼虫的饲养一致。
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