CN104782559A - 一种用于评价肉鸡热舒适性的非侵入性内分泌指标及其应用 - Google Patents

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张敏红
苏红光
胡春红
冯京海
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Abstract

本发明公开了一种用于评价肉鸡热舒适性的非侵入性内分泌指标及其应用。该应用具体可为肉鸡粪便中皮质酮的含量作为指标在辅助评价肉鸡热舒适性中的应用。本发明的实验证明，在肉鸡没有受到外界环境条件变化干扰的情况下，以2h为一个时间段收集的肉鸡粪便中的皮质酮含量在白天和夜间均保持稳定，本身没有大的波动。而肉鸡在急性暴露于高温环境后，2h内粪便中皮质酮的含量的急剧升高。因此，肉鸡2h内粪便中皮质酮的含量，可作为评价肉鸡的热舒适性状况的一个非侵入的内分泌指标。

Description

一种用于评价肉鸡热舒适性的非侵入性内分泌指标及其应用
技术领域
本发明涉及一种用于评价肉鸡热舒适性的非侵入性内分泌指标及其应用，属于环境评价领域。
背景技术
环境舒适度直接影响畜禽生长、繁殖、健康及其生产效率。动物的舒适性是躯体、精神方面多种因素相互作用的综合状态。动物舒适度评价是一个复杂问题，为了避免误评，往往采用行为、生产性能、生理和内分泌等指标综合评判。从内分泌指标角度，人们往往采用检测体液糖皮质激素这一指标。但检测体液糖皮质激素这一指标需要采集体液，体液采集程序难免会采用对动物进行接触、抓捕、绑定，或采血等对动物造成侵犯的手段，影响数据的可靠性。如血液采集很关键，已有研究表明，采血产生的干扰数分钟内使糖皮质激素急剧升高。这样往往会出现类似状态得出截然不同的舒适性评判。因此亟需找寻一种非侵入性的内分泌指标用以评价肉鸡热舒适。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于评价肉鸡热舒适性的非侵入性内分泌指标及其应用。
本发明以肉鸡粪便中皮质酮的含量作为肉鸡热舒适性评价的指标，可用于评价环境温度变化对肉鸡热舒适性造成的影响。
本发明的一种技术方案可为肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量作为标志物在辅助评价肉鸡热舒适性中的应用。
本发明的另一种技术方案可为检测皮质酮及皮质酮代谢产物的含量的物质在制备用于辅助评价肉鸡热舒适性的产品中的应用。
上述应用中，所述皮质酮及皮质酮代谢产物含量为肉鸡所处环境温度变化后2小时内的肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物含量。
上述应用中，所述2小时内肉鸡粪便为此2小时内肉鸡产生的所有粪便。
上述应用中，肉鸡热舒适性是指肉鸡所处环境温度的变化对肉鸡来说是否舒适。
本发明的另一个技术方案是一种辅助评价肉鸡热舒适性的方法。该方法包括如下步骤：检测肉鸡所处环境温度变化后2小时内肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量，若此2小时内粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量显著高于（统计学分析差异显著）此前2小时内肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量，则候选判定此2小时内所述环境温度的变化对肉鸡来说是不舒适的。
上述辅助评价肉鸡热舒适性的方法中，所述皮质酮代谢产物是指皮质酮代谢后产生的含有甾体激素母核或环戊烷多氢菲母核结构的一类物质。
上述辅助评价肉鸡热舒适性的方法中，所述2小时内肉鸡粪便为此2小时内肉鸡产生的所有粪便。
本发明所检测的是皮质酮及其代谢产物。这是因为体液中的皮质酮经过代谢到达粪便中时，其存在形式包括皮质酮及其代谢产物。皮质酮代谢主要是发生在其侧链上的氧化或羟基化，而其甾体激素母核或环戊烷多氢菲母核结构比较稳定。本发明测定粪便皮质酮及其代谢产物的原理就是根据这些代谢产物和皮质酮具有共有的稳定结构、相同的免疫活性，采用多克隆抗体，以皮质酮为标准品对其进行含量的检测。所测含量是所有与皮质酮标准品具有共有稳定结构、相同免疫活性的一类物质的总含量。
本发明的实验证明，在肉鸡没有受到外界环境条件变化干扰的情况下，以2h为一个时间段收集的肉鸡粪便中的皮质酮含量在白天和夜间均保持稳定，本身没有大的波动。而肉鸡在急性暴露于高温环境后，2h内粪便中皮质酮的含量的急剧升高。因此，肉鸡2h内粪便中皮质酮的含量，可作为评价肉鸡的热舒适性状况的一个非侵入的内分泌指标。
附图说明
图1为肉鸡粪便中皮质酮含量。A粪便皮质酮代谢产物的昼夜节律；B急性热应激对粪便皮质酮代谢产物的影响。图中时间以08:00点为高温处理或开始收粪的0h。各点的值用平均值±标准差表示，不同时间段内带有不同字母的值差异显著（P＜0.05）。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中，检测的是皮质酮及其代谢产物。皮质酮代谢产物是指皮质酮代谢后产生的含有甾体激素母核或环戊烷多氢菲母核结构的一类物质。
实施例1、皮质酮的昼夜节律
一、试验材料
试验动物：42日龄体重相近的AA肉鸡16只（公母各半），按体重和性别随机分为4笼，每笼作为一个重复，每个重复4只鸡，放于环控仓中饲养，前3天为适应阶段，环控仓温度22℃，湿度60％，自由采食和饮水，24h光照。
检测皮质酮含量的试剂盒：Corticosterone ELISA试剂盒（Enzo）。该试剂盒是采用多克隆抗体，以皮质酮为标准品，检测具有与皮质酮标准品具有共有稳定结构、相同免疫活性的一类物质的量。
二、试验方法
试验当天早上8:00开始每2h收集各重复排出的所有粪便，共收集12次为一个昼夜。粪便放于-80℃条件下保存。用于粪便皮质酮的测定。
取10g左右冷冻粪样于真空冷冻干燥机中充分冷冻干燥。取冻干粪便0.5g用5ml60%（体积百分含量）甲醇水溶液提取，手动涡流振荡2min，离心15min（4000r/min）取上清液，用Corticosterone ELISA试剂盒（Enzo）测量皮质酮及皮质酮代谢产物浓度。
三、试验结果
结果见表1和图1A，粪便皮质酮含量仅在16:00时高于18:00和4:00（P＜0.05），其他各时间段内差异均不显著，即在整个白天或者夜间，每2h内粪便皮质酮含量是没有剧烈波动的，由于本实验为24h光照，这说明这一规律与光照无关，而是肉鸡自身的生物节律。这一点显示了2h内粪便皮质酮含量用于肉鸡热舒适状况评价的可行性和优越性。
表1：粪便皮质酮昼夜节律
注：平均数±标准差,同一列数含不同字母上标者差异显著(p＜0.05)
实施例2、急性高温对皮质酮的影响
一、试验材料
试验动物：42日龄体重相近的AA肉鸡16只（公母各半），按体重和性别随机分为4笼，每笼作为一个重复，每个重复4只鸡，放于环控仓中饲养，前3天为适应阶段，环控仓温度22℃，湿度60％，自由采食和饮水。
二、试验方法
试验当天早上8点开始，将环控仓内温度在30分钟内升到35℃，湿度设定为60％保持不变。2h后将温度在30分钟内降回到22℃，处理前全收集2h的粪便，处理后第2，4，6，22h各收集2h内排泄的粪便，放于-80℃条件下保存。用于粪便皮质酮的测定。测定方法同实施例1。
三、结果
结果见表2和图1B，与处理前相比，急性热暴露后2h内肉鸡粪便皮质酮含量显著升高(P＜0.05)，第4h、6h后便恢复到正常水平，甚至在第6h这一水平比处理前有所降低(P＜0.05)，而在22h后与处理前没有显著差别。
表2：急性热暴露对粪便皮质酮的影响
注：平均数±标准差,同一列数含不同字母上标者差异显著(p＜0.05)
本试验结果中检测的粪便皮质酮在急性热暴露的这两个小时内的含量急剧升高，而根据试验一的结果，肉鸡在非干扰状态下2h内粪便皮质酮的含量在这段时间内是稳定的，这就说明了高温暴露造成了粪便皮质酮含量的增加，这反映了皮质酮分泌增多，影响了肉鸡的热舒适性。本实验证明了肉鸡2h内粪便皮质酮的含量能反映其在到高温暴露下的处于不舒适状态，可作为一种非侵入性的内分泌指标用于肉鸡热舒适性的评价。
将上述检测方法进行总结概括，即为如下方法：检测肉鸡所处环境温度变化后2小时内肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量，若此2小时内粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量显著高于（统计学分析差异显著）此前2小时内肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量，则候选判定此2小时内所述环境温度的变化对肉鸡来说是不舒适的。

Claims (5)

1.肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量作为标志物在辅助评价肉鸡热舒适性中的应用。
2.检测皮质酮及皮质酮代谢产物的含量的物质在制备用于辅助评价肉鸡热舒适性的产品中的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述皮质酮及皮质酮代谢产物含量为肉鸡所处环境温度变化后2小时内的肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物含量。
4.一种辅助评价肉鸡热舒适性的方法，包括如下步骤：检测肉鸡所处环境温度变化后2小时内肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量，若此2小时内粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量显著高于此前2小时内肉鸡粪便中皮质酮及皮质酮代谢产物的含量，则候选判定此2小时内所述环境温度的变化对肉鸡来说是不舒适的。
5.根据权利要求1-3任一所述的应用或权利要求4所述的方法，其特征在于：所述皮质酮代谢产物是指皮质酮代谢后产生的含有甾体激素母核或环戊烷多氢菲母核结构的一类物质。
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