CN104739823A - 淫羊藿素在制备维罗非尼增敏剂中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明属药物制备领域，涉及淫羊藿素在制备维罗非尼增敏剂中的应用。本发明进行了增加维罗非尼抗黑色素瘤的活性试验以及有关抑制IGF1-R通路的活化试验，结果显示，所述的淫羊藿素可增加维罗非尼抗黑色素瘤A375的活性，该作用不依赖于淫羊藿素本身是否有抗黑色素瘤作用；淫羊藿素可抑制维罗非尼诱导的IGF-1R及其下游的STAT3的活化；采用IGF-1激活IGF-1R后，淫羊藿素对维罗非尼增敏作用被逆转。所述的淫羊藿素可制备维罗非尼增敏剂，以及制备IGF-1R通路抑制剂；进一步，可以作为药物有效成分，加以药物学上可接受的载体，制备对维罗非尼增敏的药物组合物，以及制备IGF-1R通路抑制剂的药物组合物。

Description

淫羊藿素在制备维罗非尼增敏剂中的用途

技术领域

本发明属药物制备领域。涉及淫羊藿素的医药新用途，具体地涉及淫羊藿素在制备维罗非尼增敏剂中的用途。

背景技术

现有技术公开了黑色素瘤是一种皮肤恶性肿瘤,具有高侵袭、高转移特性,预后差、死亡率高。据流行病学资料显示,恶性黑色素瘤是目前所有恶性肿瘤中发病率增长最快的肿瘤,年增长率约3-5%。虽然黑色素瘤在我国发病率较低，但近年来呈成倍增长势，每年新发病例约2万例。近年来黑色素瘤的治疗有了长足的进步，但其疗效仍不能令人满意。新近的研究发现，约50-70%左右的黑色素瘤存在BRAF^v600E突变。维罗非尼（Vemurafenib）是美国FDA2011年批准的一种BRAF抑制剂，主要用于治疗晚期黑色素瘤，临床研究显示，维罗非尼的耐药性比较突出，在应用于患者最初的几个月内显现病情得到缓解，然而大多数情况下，黑色素瘤在随后的数月内出现复发。因此，寻找维罗非尼增敏剂渐显得十分必要，业内研究人员对维罗非尼疗效增敏进行了关注，有研究发现苯乙双胍对维罗非尼有增敏作用，将其作为维罗非尼增敏剂；有研究从天然药物中寻找维罗非尼增敏剂等。

已知淫羊藿素属黄酮醇类化合物，其少量存在于淫羊藿药材中，其化学结构式如下：

目前有关淫羊藿素的药理活性研究报道公开了淫羊藿素具有抗炎症、抗抑郁和抗骨质疏松等药理作用，关于淫羊藿素在制备维罗非尼增敏剂中的用途尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供淫羊藿素的新的药用用途，具体涉及淫羊藿素在制备维罗非尼增敏剂中的用途。

本发明所述的淫羊藿素（可市购）属黄酮醇类化合物，少量存在于淫羊藿药材中，其化学结构式如下：

本发明进行了增加维罗非尼(PLX)抗黑色素瘤的活性试验以及有关抑制IGF1-R通路的活化试验，结果显示，所述的淫羊藿素可增加维罗非尼抗黑色素瘤A375的活性，该作用不依赖于淫羊藿素本身是否有抗黑色素瘤作用；淫羊藿素可抑制维罗非尼诱导的IGF-1R及其下游的STAT3的活化；采用IGF-1激活IGF-1R后，淫羊藿素对维罗非尼增敏作用被逆转。

所述的淫羊藿素可制备维罗非尼增敏剂，以及制备IGF-1R通路抑制剂；进一步，可以作为药物有效成分，加以药物学上可接受的载体，制备对维罗非尼增敏的药物组合物，以及制备IGF-1R通路抑制剂的药物组合物。

附图说明

图1显示了淫羊藿素增加维罗非尼的抗黑色素瘤活性（WST-8法），其中，**与单纯PLX组相比，p<0.01，#与单纯淫羊藿素1或10μM相比，p<0.01。

图2显示了维罗非尼可抑制黑色素瘤ERK的活化，对IGF-1R和STAT3则显示了激活作用（western blot法）。

图3显示了淫羊藿素可抑制维罗非尼诱导的黑色素瘤IGF-1R和STAT3活化（western blot法）。

图4显示了淫羊藿素与维罗非尼的协同抗黑色素瘤作用被IGF-1部分逆转（MTT法），

其中，**与Medium组相比，p<0.01，#与淫羊藿素10μM+PLX0.5μM相比，p<0.01。

具体实施方式

实施例1

淫羊藿素对维罗非尼(PLX)抗黑色素瘤的活性影响实验

采用MTT方法观察到，PLX0.5μM作用于A375细胞24h，其细胞活性为70%左右，淫羊藿素1μM作用24h，无抗黑色素瘤活性（细胞活性几乎为100%），而二者联用细胞活性降为60%；淫羊藿素10μM作用24h，细胞活性为63%，淫羊藿素10μM和PLX0.5μM联用细胞活性降为52%；同样，48h的细胞活性结果也显示了同样的趋势，结果表明，淫羊藿素能增加维罗非尼抗黑色素瘤A375的活性（如图1所示）。

实施例2.

淫羊藿素对维罗非尼诱导的IGF-1R及其下游的STAT3的活化影响试验

基于现有技术的BRAF可激活RAS-MEK-ERK通路；维罗非尼作为BRAF抑制剂，可抑制ERK的活化；本实施例中采用western blot的方法证实了上述观点，PLX0.5μM作用2h可显著抑制ERK的活化，然而本实施例中同时观察到，PLX0.5μM对IGF-1R和STAT3显示了激活作用，且呈时间依赖性，以24h最为明显（如图2所示）；本实施例中采用不同浓度的淫羊藿素（0，1，10μM）预培养2h，其后以PLX0.5μM干预24h，westernblot结果发现，淫羊藿素（1，10μM）可明显抑制PLX0.5μM诱导的P-IGF-1R和P-STAT3蛋白表达的增加，且显示了较好的量效关系（如图3所示），结果表明，淫羊藿素可抑制维罗非尼诱导的IGF-1R及其下游的STAT3的活化。

实施例3

采用IGF-1激活IGF-1R后，淫羊藿素对维罗非尼增敏作用被逆转，

本实施例采用IGF-1100ng/ml刺激黑色素瘤A375细胞，48h后采用MTT法观察到淫羊藿素10μM与PLX0.5μM抗黑色素瘤的协同效应被部分逆转（如图4所示）。

本发明的实验证实所述的淫羊藿素可制备维罗非尼增敏剂，以及制备IGF-1R通路抑制剂；进一步，可以作为药物有效成分，加以药物学上可接受的载体，制备对维罗非尼增敏的药物组合物，以及制备IGF-1R通路抑制剂的药物组合物。

Claims (4)

1.式（1）的淫羊藿素在制备维罗非尼增敏剂中的用途，

2.式（1）的淫羊藿素在制备IGF-1R通路抑制剂中的用途。

3.一种对维罗非尼增敏的药物组合物，其特征在于含有式（1）的淫羊藿素及药物学上可接受的载体。

4.一种IGF-1R通路抑制剂的药物组合物，其特征在于含有式（1）的淫羊藿素及药物学上可接受的载体。