CN104605349A - 一种含d-松醇并具有降血糖功能的保健品及功能学评价方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含D-松醇并具有降血糖功能的保健品，所述保健品包含D-松醇，所述D-松醇的质量百分含量为90.0％-100.0％。本发明保健品包含D-松醇，该保健品具有胰岛素增敏作用，起到降血糖的效果；此外，该保健品还具备抗炎、抗肿瘤及免疫调节等特殊的生理功能，相较现有降糖保健品而言，具有无毒副作用的优点，同时还具有降血脂、抗氧化等功效，是一种既安全、又有效的保健产品，为糖尿病患者带来了福音。

Description

一种含D-松醇并具有降血糖功能的保健品及功能学评价方法

技术领域

本发明属于保健品技术领域，涉及保健品，尤其是一种含D-松醇并具有降血糖功能的保健品及功能学评价方法。

背景技术

糖尿病是一种由遗传因素及环境因素引起的临床综合症。它引起糖、蛋白质、脂肪的代谢紊乱，并引起继发性的水、电解质代谢紊乱及酸碱平衡失调等内分泌代谢紊乱，严重者会引起病人的慢性血管及神经并发症，使病人致残或死亡。世界卫生组织通常将糖尿病分为两型：I型糖尿病(即胰岛素依赖型，IDDM)主要是由于胰岛β细胞破坏致使血浆中胰岛素水平低于正常引起的，II型糖尿病(即非胰岛素依赖型，NIDDM)是最常见的一类糖尿病。

近几十年来，全球糖尿病患病数量急剧增加，已经成为继肿瘤、心脑血管疾病之后的第三大非传染性慢性疾病，严重影响人类的健康甚至危害生命。目前，我国已经成为糖尿病患者人数第二多的国家。糖尿病作为人类健康的另一杀手引起了各国政府、卫生部门和广大医务工作者以及普通百姓群体的关注和重视。与此同时，全球每年新增糖尿病患者人数高达700万人，具体来说，每10秒钟就有1位糖尿病患者因此丧命，有2例新发糖尿病患者。根据调查统计结果显示，在20世纪90年代，全球的糖尿病患者大约为1.00亿人，到2000年，糖尿病患病人数已经快速增长到1.71亿人，到2010年糖尿病患病人数则已经高达2.84亿人，专家预测到2030年，全球各国糖尿病患者将增长到4.39亿人。上述一系列数字显示出糖尿病患病率的增长速度是非常惊人的，如果不给予足够的重视并采取有效治疗手段的话，在未来的十几年甚至是几十年内，糖尿病的患病率很有可能会超出预测值。

目前，常用的治疗糖尿病的药物主要有磺酰脲类药、双胍类药、α糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、非磺酰脲类促胰岛素分泌剂和一些注射用胰岛素，随着多种降血糖药物的毒副作用逐渐浮出水面，新型的、毒副作用小、降血糖效果明显的药物的开发越来越被人们重视，近年来，肌醇类物质在降血糖方面的作用崭露头角，尤其是以D-手性肌醇和D-松醇的研究报道居多，D-松醇是D-手性肌醇甲基化的一种衍生物，具有类胰岛素作用，能起到降低调节机体血糖平衡、缓解胰岛素抵抗的作用，是一种新兴的降血糖功能物质。

通过检索，发现一篇与本发明专利申请相关的专利公开文献：

松醇类物质在制药或保健品中的应用(CN103202824A)，提出了松醇类物质在制药或保健品中的应用。与现有技术相比，本发明的有益效果是：对已知的化合物发掘了新的医疗用途和保健用途，开拓了一个新的应用领域；产品来源丰富，制备工艺简单，并可做成口服剂型、注射剂型、片剂等，使用方便；产品配置成的药物或保健品具有使松醇与D-手性肌醇的血浆水平上升，血浆胰岛素与血糖水平下降的作用；产品配置成的药物或保健品具有降低血糖值、降低胰岛素水平、降低血浆脂和降低血浆甘油三酯的作用。

通过对比，本发明专利申请与上述专利公开文献存在本质的不同。

发明内容

本发明的目的在于克服原有技术的不足之处，提供一种方法简单、操作方便，可通过提高机体对胰岛素的敏感性，从而促进葡萄糖被组织细胞利用，加速降低血液中的高葡萄糖含量，起到降血糖的效果且无毒副作用的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品及功能学评价方法。

本发明解决技术问题所采用的技术方案是：

一种含D-松醇并具有降血糖功能的保健品，所述保健品包含D-松醇，所述D-松醇的质量百分含量为90.0％-100.0％。

而且，所述保健品还包含氯化锰，所述D-松醇的质量百分含量为95.0％-97.0％，所述氯化锰质量百分含量为3.0％-5.0％。

而且，所述保健品为口服制剂。

而且，所述保健品为胶囊剂。

如上所述的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品的功能学评价方法，步骤如下：

⑴实验材料的准备：

①受试样品：如上所述的保健品，用蒸馏水配置到所需应用浓度；

②实验动物：ICR种雄性小鼠，体重22±2g；

③试剂与仪器：链脲佐菌素、葡萄糖、血糖测定试纸，血清胰岛素Elisa试剂盒、糖化血清蛋白试剂盒；血糖仪、紫外分光光度计、天平；

④高脂高糖饲料：猪油16％，白砂糖20％，酪蛋白11％，明胶1％，胆固醇0.5％，矿物质和维生素1.5％，动物基础饲料50％；

⑤饲养环境：实验动物饲养于屏障系统动物房中，温度22±2℃，相对湿度40％～60％，控制照明时间为12h：12h，分笼饲养，自由进食及饮水，及时更换垫料、清洗鼠笼及托盘；实验动物适应性喂养一周后开始实验；

⑵动物实验操作：

①高血糖动物模型建立

雄性ICR小鼠100只用普通饲料适应性饲养1w后，根据体重随机分成正常组10只、高脂高糖剂量组共6组，每组15只，正常组喂饲基础饲料，其余5组饲以高脂高糖饲料，开始进入实验期；

喂养四周后，高脂高糖组通过腹腔注射STZ来模拟建立2型糖尿病模型；用前将STZ用无菌pH4.2、0.1mol/L的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液配成质量分数为1.1％的STZ溶液，小鼠称重后按110mg/kg一次性腹腔注射STZ，正常组给予等剂量的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液；注射1w后，断尾采血检测空腹血糖，血糖>11.1mmol/L为造模成功的标准，造模不成功小鼠舍弃；

②动物分组

小鼠分为正常对照组、模型对照组；剂量组给予不同浓度的受试样品，低剂量D-松醇15mg/kg BW.组、中剂量D-松醇30mg/kg BW.组、高剂量D-松醇60mg/kg BW.组，D-松醇30mg/kg BW.+MnSO₄1.2mg/kg BW.组和MnSO₄1.2mg/kg BW.组，每组10只；成模的糖尿病小鼠饲喂高脂高糖饲料，正常组小鼠饲喂动物基础饲料，自由饮食，每天灌胃；

③生理生化指标检测

实验期间每周对小鼠进行一次空腹血糖测定，灌胃治疗4周后进行糖耐量实验，之后处死小鼠对其血清胰岛素含量、糖化血清蛋白含量进行检测，并计算胰岛素敏感指数和胰岛β细胞功能指数；

④实验结果确定各个组别间的统计学意义，从而得出所述具有降血糖功能的保健品的功能学评价结果。

而且，所述动物基础饲料包括如下质量百分数的组份：蛋白质18％，粗脂肪4％，粗纤维5％，粗灰分8％，水分10％，赖氨酸0.82％，钙1.0-1.8％，磷0.6-1.2％，食用盐0.3-0.8％。

本发明取得的优点和积极效果是：

1、本发明保健品包含D-松醇，该保健品具有胰岛素增敏作用，起到降血糖的效果；此外，该保健品还具备抗炎、抗肿瘤及免疫调节等特殊的生理功能，相较现有降糖保健品而言，具有无毒副作用的优点，同时还具有降血脂、抗氧化等功效，是一种既安全、又有效的保健产品，为糖尿病患者带来了福音。

2、本发明保健品使用D-松醇与硫酸锰配合来增益降血糖效果，胰岛素第二信使的化学结构是由一分子D-松醇与一分子半乳糖胺在Mn²⁺的螯合作用下生成的；本发明外源性地添加硫酸锰作为Mn²⁺的来源，来催化D-松醇在体内与半乳糖胺的结合，形成胰岛素第二信使结构类似物，从而更好的促进机体对胰岛素的敏感性，起到更快降低血糖的效果。

3、本发明保健品为胶囊剂，保健品本身无异味且添加量小，所选用胶囊体积小、易吞服。

附图说明

图1为本发明的D-松醇样品对糖尿病小鼠口服糖耐量的影响图(M±SD,n＝10)；

图2为本发明的D-松醇样品对糖尿病小鼠口服糖耐量血糖曲线下面积的影响图(M±SD,n＝10)；其中，^##P<0.01，模型组与空白组比较，具有极显著性差异；*p<0.05，剂量组与模型组比较，具有显著性差异；**p<0.01，剂量组与模型组比较，具有极显著性差异；

图3为本发明的D-松醇对小鼠GSP含量的影响图(M±SD,n＝10)；其中：##p<0.01，模型组与空白对照组比较；**p<0.01，剂量组与模型组比较。

具体实施方式

为能进一步了解本发明的内容、特点及功效，兹例举以下实施例，并配合附图详细说明如下。需要说明的是，本实施例是描述性的，不是限定性的，不能由此限定本发明的保护范围。

本发明中所使用的试剂，如无特殊规定，均为本领域的常规试剂；本发明中所使用的方法，如无特殊规定，均为本领域的常规方法。

本发明中所使用的动物基础饲料为本领域中的常规的动物基础饲料，例如，该动物基础饲料可以包括如下质量百分数的组份：蛋白质18％，粗脂肪4％，粗纤维5％，粗灰分8％，水分10％，赖氨酸0.82％，钙1.0-1.8％，磷0.6-1.2％，食用盐0.3-0.8％。

实施例1：本实施例中的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品的重量配比如下：D-松醇质量百分含量为100.00％。灌入胶囊，得胶囊剂1。

实施例2：本实施例中的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品的重量配比如下：D-松醇质量百分含量为95.00％-97.00％，氯化锰质量百分含量为3.00％-5.00％。灌入胶囊，得胶囊剂2。

本发明保健品的功能学评价方法及相关评价结果：

动物实验

(一)实验材料

1、受试样品：按照本发明实施例1和实例2所述方法制成胶囊剂，用时倒出内容物，用蒸馏水配置到所需浓度应用。

2、动物：ICR种雄性小鼠，体重22±2g，由北京大学医学部实验动物中心提供。

3、主要试剂与仪器：链脲佐菌素(STZ)、葡萄糖、血糖测定试纸，血清胰岛素Elisa试剂盒、糖化血清蛋白试剂盒；血糖仪、紫外分光光度计、天平。

4、高脂高糖饲料：猪油16％，白砂糖20％，酪蛋白11％，明胶1％，胆固醇0.5％，矿物质和维生素1.5％，动物基础饲料50％；

5、饲养环境：实验动物饲养于屏障系统动物房中，温度22±2℃，相对湿度40％～60％，控制照明时间为12h：12h(黑天：白天)，分笼饲养，自由进食及饮水，及时更换垫料，定时(如一周两次)清洗鼠笼及托盘等。实验动物适应性喂养一周后开始实验。

(二)本发明中动物实验参照《保健食品检验与评价技术规范》中辅助降血糖功能检验方法与操作规程进行。

1、高血糖动物模型建立

雄性ICR小鼠100只用普通饲料适应性饲养1w后，根据体重随机分成正常组10只、高脂高糖剂量组共6组，每组15只，正常组喂饲基础饲料，其余5组饲以高脂高糖饲料，开始进入实验期。

喂养四周后，高脂高糖组通过腹腔注射STZ来模拟建立2型糖尿病模型。用前将STZ用无菌pH4.2、0.1mol/L的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液配成质量分数为1.1％的STZ溶液，小鼠称重后按110mg/kg一次性腹腔注射STZ，正常组给予等剂量的缓冲液。注射1w后，断尾采血检测空腹血糖，血糖>11.1mmol/L为造模成功的标准，造模不成功小鼠舍弃。

2、动物分组

小鼠分为正常对照组、模型对照组。剂量组给予不同浓度本发明胶囊的内容物，低剂量D-松醇15mg/kg BW.组、中剂量D-松醇30mg/kg BW.组、高剂量D-松醇60mg/kg BW.组，D-松醇30mg/kg BW.+MnSO₄1.2mg/kg BW.组和MnSO₄1.2mg/kg BW.组，每组10只。成模的糖尿病小鼠饲喂高脂高糖饲料，正常组小鼠饲喂动物基础饲料，自由饮食，每天灌胃。

3、生理生化指标检测

实验期间每周对小鼠进行一次空腹血糖测定，灌胃治疗4周后进行糖耐量(OGTT)实验，之后处死小鼠对其血清胰岛素(FINS)含量、糖化血清蛋白(GSP)含量进行检测，并计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)。

(三)实验结果

1、本发明胶囊对小鼠空腹血糖的影响

由表1可知：模型对照组小鼠空腹血糖值明显高于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.01)，说明糖尿病模型已成功建立。

在实验35d时间，模型对照组的血糖一直保值较高数值，与空白对照组比较具有极显著差异(P<0.01)。给药14d后各治疗组小鼠空腹血糖值均开始下降，给药28d后，高剂量组和D-松醇+MnSO₄组血糖下降明显，与模型对照组比较有显著差异(P<0.05)；给药35d后，中剂量组和D-松醇+MnSO₄组血糖值较模型对照组有显著性差异(P<0.05)，高剂量组则出现极显著性差异(P<0.01)。实验后各给药组血糖相比实验前分别下降4.7％、14.78％、19.02％、16.56％和2.38％。

表1 D-松醇对小鼠空腹血糖值的影响(M±SD,n＝10)

^##P<0.01，模型组与空白组比较，具有极显著性差异；*p<0.05，剂量组与模型组比较，具有显著性差异；**p<0.01，剂量组与模型组比较，具有极显著性差异

结果表明，本发明胶囊可降低2型糖尿病小鼠的空腹血糖。

2、本发明胶囊对小鼠糖耐量的影响

口服糖耐量是常用的检查糖代谢的一种方法。对实验小鼠灌胃本发明胶囊一段时间后测定其糖耐量，结果如图1和图2所示。给予葡萄糖负荷后，空白对照组糖耐量正常，服用葡萄糖后，其血糖在0.5h时达到最高值，随后逐渐下降，2.0h时降到正常水平。模型对照组其血糖值在0.5h时达到最高值，其后一直维持在较高水平，表现为糖耐量降低的特征。

如图1，在时间点0.5h的血糖检测中，各组血糖值达到最高值，模型对照组相比空白对照组的血糖值具有极显著性差异(P<0.01)，中、高、D-松醇+MnSO₄组血糖明显低于模型对照组。随后各组血糖逐渐下降，在2h的血糖检测中，模型对照组血糖较高，与空白对照组比较具有极显著性差异(P<0.01)。中、高剂量组和D-松醇+MnSO₄组明显低于模型对照组，具有极显著性差异(P<0.01)。图2显示，高脂饲料配合STZ致使模型对照组小鼠的口服糖耐量血糖曲线下面积较空白对照组的AUC上升，具有极显著性差异(P<0.01)，中、高剂量组和D-松醇+MnSO₄组AUC下降，与模型对照组比较具有极显著性差异(P<0.01)。另外MnSO₄组与模型对照组的OGTT和AUG差异均无统计学差异。

结果表明，本发明胶囊可以改善2型糖尿病小鼠对葡萄糖的耐受能力。

3、本发明胶囊对小鼠空腹血清胰岛素及糖化血清蛋白的影响

由表2可见，模型对照组空腹血清胰岛素(INS)水平较空白对照组升高，且有极显著性差异(P<0.01)；灌胃35d后，各治疗组空腹血清胰岛素水平较模型对照组降低，高剂量组和D-松醇+MnSO₄组与模型对照组相比具有极显著性降低(P<0.01)。模型对照组胰岛素敏感性指数(ISI)较空白对照组降低，具有极显著差异(P<0.01)；各治疗组的ISI较模型对照组升高，只有高剂量组与模型对照组相比有显著性升高(P<0.05)。模型对照组胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)较空白对照组显著降低(P<0.01)，治疗后，各剂量组均有所升高，但与模型对照组相比均无显著性差异。

表2 D-松醇对糖尿病小鼠血清INS和ISI和HOMA-β的影响(M±SD,n＝10)

注：##p<0.01，模型组与空白对照组比较；*p<0.05，剂量组与模型组比较；**p<0.01，剂量组与模型组比较。

结果表明，使用本发明胶囊治疗后，可使血清胰岛素浓度下降、敏感性指数和β细胞功能指数增加。

由图3可知，模型对照组GSP含量较空白对照组极显著升高(P<0.01)，与血糖值表现一致，灌胃35d后，中剂量组、高剂量组和D-松醇+MnSO₄组的GSP含量较模型对照组降低，具有极显著性差异(P<0.01)。

结果表明，本发明胶囊能降低2型糖尿病小鼠糖化血清蛋白含量，表现出较好的血糖控制效果。

Claims (6)

1.一种含D-松醇并具有降血糖功能的保健品，其特征在于：所述保健品包含D-松醇，所述D-松醇的质量百分含量为90.0％-100.0％。

2.根据权利要求1所述的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品，其特征在于：所述保健品还包含氯化锰，所述D-松醇的质量百分含量为95.0％-97.0％，所述氯化锰质量百分含量为3.0％-5.0％。

3.根据权利要求1或2所述的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品，其特征在于：所述保健品为口服制剂。

4.根据权利要求3所述的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品，其特征在于：所述保健品为胶囊剂。

5.如权利要求1至4任一项所述的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品的功能学评价方法，其特征在于：步骤如下：

⑴实验材料的准备：

①受试样品：如权利要求1至4任一项所述的保健品，用蒸馏水配置到所需应用浓度；

②实验动物：ICR种雄性小鼠，体重22±2g；

③试剂与仪器：链脲佐菌素、葡萄糖、血糖测定试纸，血清胰岛素Elisa试剂盒、糖化血清蛋白试剂盒；血糖仪、紫外分光光度计、天平；

④高脂高糖饲料：猪油16％，白砂糖20％，酪蛋白11％，明胶1％，胆固醇0.5％，矿物质和维生素1.5％，动物基础饲料50％；

⑤饲养环境：实验动物饲养于屏障系统动物房中，温度22±2℃，相对湿度40％～60％，控制照明时间为12h：12h，分笼饲养，自由进食及饮水，及时更换垫料、清洗鼠笼及托盘；实验动物适应性喂养一周后开始实验；

⑵动物实验操作：

①高血糖动物模型建立

雄性ICR小鼠100只用普通饲料适应性饲养1w后，根据体重随机分成正常组10只、高脂高糖剂量组共6组，每组15只，正常组喂饲基础饲料，其余5组饲以高脂高糖饲料，开始进入实验期；

喂养四周后，高脂高糖组通过腹腔注射STZ来模拟建立2型糖尿病模型；用前将STZ用无菌pH4.2、0.1mol/L的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液配成质量分数为1.1％的STZ溶液，小鼠称重后按110mg/kg一次性腹腔注射STZ，正常组给予等剂量的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液；注射1w后，断尾采血检测空腹血糖，血糖>11.1mmol/L为造模成功的标准，造模不成功小鼠舍弃；

②动物分组

小鼠分为正常对照组、模型对照组；剂量组给予不同浓度的受试样品，低剂量D-松醇15mg/kg BW.组、中剂量D-松醇30mg/kg BW.组、高剂量D-松醇60mg/kg BW.组，D-松醇30mg/kg BW.+MnSO₄1.2mg/kg BW.组和MnSO₄1.2mg/kg BW.组，每组10只；成模的糖尿病小鼠饲喂高脂高糖饲料，正常组小鼠饲喂动物基础饲料，自由饮食，每天灌胃；

③生理生化指标检测

实验期间每周对小鼠进行一次空腹血糖测定，灌胃治疗4周后进行糖耐量实验，之后处死小鼠对其血清胰岛素含量、糖化血清蛋白含量进行检测，并计算胰岛素敏感指数和胰岛β细胞功能指数；

④实验结果确定各个组别间的统计学意义，从而得出所述具有降血糖功能的保健品的功能学评价结果。

6.根据权利要求5所述的含D-松醇并具有降血糖功能的保健品的功能学评价方法，其特征在于：所述动物基础饲料包括如下质量百分数的组份：蛋白质18％，粗脂肪4％，粗纤维5％，粗灰分8％，水分10％，赖氨酸0.82％，钙1.0-1.8％，磷0.6-1.2％，食用盐0.3-0.8％。