CN104490850A - 一种胶原多肽皮肤光损伤修复膜及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种胶原多肽皮肤光损伤修复膜的制备方法,属于生物医学材料领域。本发明的胶原多肽皮肤光损伤修复膜是以胶原多肽、羧甲基纤维素钠、戊二醛、淀粉形成膜的基本骨架结构,加入丙三醇作为保湿剂,控制膜的湿度,再加入灵芝多糖、香菇多糖和枸杞多糖等抗氧化物。最后将混合均匀的糊状混合液倒入模具中成型,在烘箱中恒温干燥。揭膜即得具有良好生物相容性和抗氧化性的胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
Description
技术领域
本发明涉及一种胶原多肽皮肤光损伤修复膜及其制备方法,属于生物医学材料领域。
背景技术
随着大气污染的日趋严重,臭氧层的破坏导致地表紫外线(ultraviolet,UV)辐射增加,对人体产生各种不良影响。如引起皮肤光老化、皮肤癌、眼角膜光损伤以及晶状体混浊。在自然环境中,UV 约占太阳光的13%。到达地球表面时,大部分的中波紫外线(ultraviolet B,UVB)和几乎全部的短波紫外线(ultraviolet C,UVC)被大气平流层的臭氧层所吸收,因此,自然界中的长波紫外线(ultraviolet A,UVA)约占97%,UVB 仅占3%。但由于UVA 的生物活性比UVB 弱得多,约为UVB 的1/1 000,过去人们认为引起皮肤光老化、DNA 损伤和皮肤癌的UV 主要是UVB,而UVA 除了使皮肤晒黑外几乎对人体无害。
近年来,研究发现UVA 对皮肤的穿透能力远远高于UVB,尤其是UVA(340~400 nm)能穿透到真皮层,引起真皮组织中胶原及弹力纤维的损伤进而引起更深层次的氧化损伤。UVA 剧烈照射与UVB 一样,也能产生红斑和血管损伤,引起的改变甚至比UVB 更为严重。有研究显示UVA 对细胞具有强烈的氧化损伤,UVA 在UV 氧化损伤中扮演比UVB 更为重要的角色。因此UVA 的氧化损伤作用也日益受到重视。
皮肤直接受到日光紫外线照射, 紫外线辐射后可诱发皮肤多种损伤, 包括光老化、各种皮肤癌如基底细胞癌、鳞状细胞癌和恶性黑素瘤、光敏反应和光毒反应、光线性角化等各种与光有关的皮肤病。因此减缓和改善皮肤光损伤的研究是当今国际上热点的领域之一。
研究者首先明确了不同类别的紫外线对人类皮肤细胞的作用关系, 揭示了紫外线对人体皮肤细胞的损伤作用, 为预防光老化和光致癌打下理论基础。再运用了各种细胞生物学及分子生物学手段, 同时结合传统中医理论及现代药理学技术, 从多种中药及天然植物有效组分中筛选出具有明确皮肤光损伤修复的活性成分。
植物多糖(PPS) 是指含10个以上单糖的生物活性大分子。植物多糖广泛存在于生物体特别是植物体中,不仅是生物体重要的营养物质,而且在生物体的生命活动中发挥重要的功能,与脂质、蛋白质、核酸一起被视为生物体中最重要的4 种生物大分子物质。相对于蛋白质和核酸的研究,植物多糖的研究尚处于起步阶段。由于PPS 具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、降血糖等多种生物活性及毒副作用小、来源广泛等优点,近年来对PPS 研究的广度和深度都在不断扩展,不少PPS 有望成为临床药物,当正常机体受到某些外界因素( 如射线、金属离子、化学试剂等) 的作用时,体内的氧化-还原平衡将被破坏,氧化应激被诱发,从而对机体内细胞造成氧化损伤,最终导致疾病的发生。PPS对细胞的氧化损伤具有保护和修复作用。
临床研究与基础研究表明,氧自由基损伤参与许多疾病的病理生理过程,活性氧自由基可引起细胞增殖活力下降,为控制或消除自由基引起的损伤,体内存在一系列抑制或清除自由基的抗氧化酶和非酶性抗氧化剂。例如,超氧化物歧化酶( SOD) 是细胞内一种重要的抗氧化酶,对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用,SOD催化清除超氧阴离子自由基转变为H2O2和O2的歧化反应,因此,SOD 活力高低间接反映了机体清除氧自由基的能力。此外,谷胱甘肽过氧化物酶,是机体内广泛存在的一种重要的抗氧化物酶,可清除H2O2与许多有机氢过氧化物;还原型GSH作为体内一种重要的抗氧化剂,易受某些物质的氧化,所以它在体内能够保护许多蛋白质和酶等分子发挥其正常生理作用,多年来人们也一直试图根据GSH 被氧化还原的程度来评估脂质过氧化损伤的程度。而CAT是一种以铁卟啉为辅基的酶,它能催化H2O2释放新生态氧以氧化某些酚类和胺类物质,使H2O2不至于在体内积累。这些抗氧化酶水平的高低直接或间接地反应了机体抗氧化损伤能力强弱。
PPS可提高细胞抗氧化活性,一定程度上阻止或减缓氧化应激对细胞的损伤,从而实现对细胞的保护和修复。PPS 作为一类重要的天然活性物质,对细胞的氧化损伤具有保护和修复作用。PPS 不仅可维持细胞正常形态和结构,修复受损细胞细胞形态,而且,还能对氧化损伤所致的细胞活力下降、凋亡的发生起抑制作用;PPS 通过提高细胞内SOD、CAT、GSH 等抗氧化物水平及清除积累的LDH 和MDA,可以提高细胞的抗氧化活性,降低细胞的氧化损伤程度。
灵芝多糖、香菇多糖、枸杞多糖具有较强的抗氧化能力,可对抗UVA 辐射所造成的损伤。三种多糖可以通过抗氧化酶的活性增强提高机体抗氧化能力,提高抑制羟自由基的能力对抗羟自由基对机体造成的氧化损伤,同时抑制机体脂质过氧化损伤从而减少MDA 含量,达到了对抗UVA 造成的氧化损伤。
真皮的主要成分是胶原, 而胶原中含有大量的氨基酸。胶原类修复材料是目前研究的焦点。其原因是Ⅰ型胶原是构成皮肤的主要结构蛋白,通过自聚和交联重建的胶原可形成具有一定强度和稳定性的结构材料,具有高亲水性、无毒、体内生物相容性、降解性良好等生物特性。
胶原多肽的平均分子量在1000~9000时具有恢复、修复细胞的功能, 能增进细胞活力、增加皮肤亮泽, 起到显现人体年轻健康的作用;还具有维持皮肤锁水保湿的能力。皮肤因光损伤而使保持水分的功能逐渐减退, 使皮肤干燥、细纹出现得较早、较多。在这种情况下, 急需补充胶原多肽, 以增加皮肤保水能力、紧致肌肤、淡化干纹。
发明内容
本发明用戊二醛将胶原多肽和羧甲基纤维素钠等交联为网状大分子材料,让灵芝多糖、香菇多糖和枸杞多糖等药物固定在网状大分子结构中,把皮肤光损伤修复药物制成水凝胶膜状,使药物能更好的释放在皮肤处。为皮肤康复提供了良好的条件。这种材料在皮肤光损伤治疗中将发挥着重要作用,本产品增加了皮肤光损伤修复材料的多样性。
本发明的目的是提供一种新的胶原多肽皮肤光损伤修复膜,通过胶原多肽和植物多糖的释放而达到促进皮肤修复的作用,以解决现在皮肤光损伤的问题,本发明的胶原多肽光损伤修复膜具有良好的生物相容性、透气性。
本发明的另一个目的是提供一种上述组合物的制备方法。
本发明的胶原多肽皮肤光损伤修复膜,它是由下述重量配比的原料制成的膜:
胶原多肽 0.1~0.7份
丙三醇 0.6~5.2份
戊二醛 1.0~4.8份
淀粉 0.1~1.0份
羧甲基纤维素钠 0.5~3.0份
去离子水 5.0~40.0份
灵芝多糖 0.1~2.0份
香菇多糖 0.1~2.0份
枸杞多糖 0.1~2.0份
在上述的胶原多肽皮肤光损伤修复膜中,胶原多肽粉末为自主提取。胶原多肽具有促进细胞再生,淡化疤痕的作用,中药活性成分灵芝多糖、香菇多糖、枸杞多糖具有能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基的作用;交联剂戊二醛使成膜物质交联形成网状大分子结构,使膜的机械强度提高;增塑剂丙三醇,赋予膜一定的湿度和韧性。淀粉作为膜的定型剂加入其中。灵芝多糖、香菇多糖、枸杞多糖被固定在骨架结构中,药物缓慢释放,达到使膜药效持久的目的。这些组分的组合以及各组分的上述混合范围,通过大量实验确定。
胶原多肽皮肤光损伤修复膜的制备方法包括下述步骤:
(1)选取新鲜猪皮,物理方法去除猪皮上多余的脂肪,将猪皮洗净切成3mm3~5mm3颗粒置于反应瓶中。以新配置的浓度为10%的Na2CO3溶液作为脱脂剂,加入到反应瓶中直至淹没猪皮颗粒。在45℃水浴中脱脂70分钟,并且不断搅拌,抽滤。将抽滤后的猪皮颗粒置于另一反应瓶中,加入蒸馏水,调节PH为8,加入猪皮重量6%~12%的胰蛋白酶。于40℃水浴中酶解2~6小时。最后离心机离心分离上述混合液,取含胶原多肽的中间层溶液,去掉上层脱脂未净的脂肪和下层不溶的根毛、弹性纤维等物质。再在40℃~60℃烘箱中烘干,研磨得到胶原多肽粉末。
( 2 ) 将0.5~3.0重量份羧甲基纤维素钠与5.0~39.0重量份去离子水混合,在30℃~50℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物;
(3)将1.0~4.8重量份戊二醛、0.6~5.2重量份丙三醇加入(2)中,混合搅拌均匀;
(4)将 0.1~1.0重量份淀粉、 0.1~0.7重量份胶原多肽、0.1~2.0重量份的灵芝多糖、0.1~2.0重量份的香菇多糖、0.1~2.0重量份的枸杞多糖 ,放入烧杯中,加入1.0~5.0重量份去离子水,搅拌使其溶解;
(5)将(3)和(4)得到的混合物,使用机械搅拌,使其混合均匀,得粘稠物;
(6)将(5)制得的粘稠物均匀的平铺在干燥、洁净的模板上,形成厚薄均匀、表面光洁平整的液层,在55℃~65℃的烘箱中干燥,干燥时间0.6~3小时,揭膜即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
具体实施方式
下列经过实施例的方式进一步说明本发明,本发明的范围并不因此局限于下列实施例,而是由本发明的说明书和权利要求书限定。
实施例1
在一个洁净干燥的烧杯中,加入0.1份胶原多肽、0.1份可溶性淀粉、0.1份灵芝多糖、0.3份香菇多糖、0.1份枸杞多糖和2份去离子水,搅拌均匀,使其溶解;在第二个烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠和9份去离子水混合,在40℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物,然后加入2份戊二醛和2.5份丙三醇,搅拌使其混合均匀。
将第一个烧杯中的混合溶液,倒入第二个烧杯中,继续机械搅拌,搅拌使其混合均匀,得粘稠物。
将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上,形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层,用恒温烘箱60℃烘干,揭膜,即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
实施例2
在一个洁净干燥的烧杯中,加入0.1份胶原多肽、0.1份可溶性淀粉、0.3份灵芝多糖、0.5份香菇多糖、0.1份枸杞多糖和2份去离子水,搅拌均匀,使其溶解。在第二个烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠和9份去离子水混合,在40℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物,然后加入2份戊二醛和2.5份丙三醇,搅拌使其混合均匀。
将第一个烧杯中的混合溶液,倒入第二个烧杯中,继续机械搅拌,直到得到均匀粘稠的胶状物为止。
将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上,形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层,用恒温烘箱60℃烘干,揭膜,即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
实施例3
在一个洁净干燥的烧杯中,加入0.1份胶原多肽、0.1份可溶性淀粉、0.5份灵芝多糖、0.1份香菇多糖、0.1份枸杞多糖和2份去离子水,搅拌均匀,使其溶解。在第二个烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠和9份去离子水混合,在40℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物,然后加入2份戊二醛和2.5份丙三醇,搅拌使其混合均匀。
将第一个烧杯中的混合溶液,倒入第二个烧杯中,继续机械搅拌,直到得到均匀粘稠的胶状物为止。
将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上,形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层,用恒温烘箱60℃烘干,揭膜,即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
实施例4
在一个洁净干燥的烧杯中,加入0.1份胶原多肽、0.1份可溶性淀粉、0.1份灵芝多糖、0.3份香菇多糖、0.3份枸杞多糖和2份去离子水,搅拌均匀,使其溶解。在第二个烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠和9份去离子水混合,在40℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物,然后加入2份戊二醛和2.5份丙三醇,搅拌使其混合均匀。
将第一个烧杯中的混合溶液,倒入第二个烧杯中,继续机械搅拌,直到得到均匀粘稠的胶状物为止。
将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上,形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层,用恒温烘箱60℃烘干,揭膜,即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
实施例5
在一个洁净干燥的烧杯中,加入0.1份胶原多肽、0.1份可溶性淀粉、0.3份灵芝多糖、0.5份香菇多糖、0.3份枸杞多糖和2份去离子水,搅拌均匀,使其溶解。在第二个烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠和9份去离子水混合,在40℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物,然后加入2份戊二醛和2.5份丙三醇,搅拌使其混合均匀。
将第一个烧杯中的混合溶液,倒入第二个烧杯中,继续机械搅拌,直到得到均匀粘稠的胶状物为止。
将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上,形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层,用恒温烘箱60℃烘干,揭膜,即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
实施例6
在一个洁净干燥的烧杯中,加入0.1份胶原多肽、0.1份可溶性淀粉、0.5份灵芝多糖、0.1份香菇多糖、0.3份枸杞多糖和2份去离子水,搅拌均匀,使其溶解。在第二个烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠和9份去离子水混合,在40℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物,然后加入2份戊二醛和2.5份丙三醇,搅拌使其混合均匀。
将第一个烧杯中的混合溶液,倒入第二个烧杯中,继续机械搅拌,直到得到均匀粘稠的胶状物为止。
将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上,形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层,用恒温烘箱60℃烘干,揭膜,即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
实施例7
在一个洁净干燥的烧杯中,加入0.1份胶原多肽、0.1份可溶性淀粉、0.1份灵芝多糖、0.3份香菇多糖、0.5份枸杞多糖和2份去离子水,搅拌均匀,使其溶解。在第二个烧杯中加入1份羧甲基纤维素钠和9份去离子水混合,在40℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物,然后加入2份戊二醛和2.5份丙三醇,搅拌使其混合均匀。
将第一个烧杯中的混合溶液,倒入第二个烧杯中,继续机械搅拌,直到得到均匀粘稠的胶状物为止。
将胶状物均匀的铺在干燥洁净的模板上,形成厚薄均匀、表明光洁平整的胶状层,用恒温烘箱60℃烘干,揭膜,即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
Claims (3)
1.一种胶原多肽皮肤光损伤修复膜,其特征在于它是由下述重量配比的原料制成的膜:
胶原多肽 0.1~0.7份
丙三醇 0.6~5.2份
戊二醛 1.0~4.8份
淀粉 0.1~1.0份
羧甲基纤维素钠 0.5~3.0份
去离子水 5.0~40.0份
灵芝多糖 0.1~2.0份
香菇多糖 0.1~2.0份
枸杞多糖 0.1~2.0份。
2.根据权利要求1所述的胶原多肽皮肤光损伤修复膜,其特征在于胶原多肽的数均分子量为6500~7500。
3.制备权利要求1中所述制备胶原多肽皮肤光损伤修复膜的方法,其特征在于该方法由以下步骤组成:
( 1 ) 将0.5~3.0重量份羧甲基纤维素钠与5.0~39.0重量份去离子水混合,在30℃~50℃的恒温水浴中均匀搅拌成透明胶状物;
(2)将1.0~4.8重量份戊二醛、0.6~5.2重量份丙三醇加入(1)中,混合搅拌均匀;
(3)将 0.1~1.0重量份淀粉、 0.1~0.7重量份胶原多肽、0.1~2.0重量份的灵芝多糖、0.1~2.0重量份的香菇多糖、0.1~2.0重量份的枸杞多糖 ,放入烧杯中,加入1.0~5.0重量份去离子水,搅拌使其溶解;
(4)将(2)和(3)得到的混合物,使用机械搅拌,使其混合均匀,得粘稠物;
(5)将(4)制得的粘稠物均匀的平铺在干燥、洁净的模板上,形成厚薄均匀、表面光洁平整的液层,在55℃~65℃的烘箱中干燥,干燥时间0.6~3小时,揭膜即得胶原多肽皮肤光损伤修复膜。
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