CN104487089B - Mek抑制剂和igfir抑制剂的组合疗法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物组合，所述药物组合包含MEK抑制剂化合物6‑(4‑溴‑2‑氟苯基氨基)‑7‑氟‑3‑甲基‑3H‑苯并咪唑‑5‑羧酸(2‑羟基乙氧基)‑酰胺或其药学上可接受的盐和IGFIR抑制剂抗体A；一种包含所述组合的药物组合物；用于治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的所述组合；以及所述组合用于治疗癌症的用途。

Description

MEK抑制剂和IGFIR抑制剂的组合疗法

相关申请

本申请要求2012年3月20日提交的美国临时申请序号61/613,046和2013年2月12日提交的美国临时申请序号61/763,767的优先权，所述申请均以引用的方式整体并入本文。

发明领域

本发明涉及一种药物组合，所述药物组合包含MEK抑制剂化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺或其药学上可接受的盐和IGF1R抑制剂抗体A；一种包含所述组合的药物组合物；用于治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的所述组合；以及所述组合用于治疗癌症的用途。

发明背景

RAS/RAF/MEK/ERK途径涉及在生长因子介导的增殖信号传导中。所述途径包括通过RAS小胍三磷酸酶(GTP酶)激活的进化上保守的信号传导级联，所述信号传导级联进而激活RAF，所述RAF进而磷酸化并且激活MEK，并且所述MEK进而激活细胞外信号调节激酶(ERK)。ERK-介导的多种转录因子的磷酸化调节几种重要的细胞活动，包括增殖、分化、迁移、存活以及血管生成。

通过RAS/RAF/MEK/ERK途径的异常信号传导导致不受约束的细胞生长和细胞转化并且是许多癌症的特性特征。RAS途径的不适当激活可通过几种不同的机制发生，所述机制包括KRAS中的激活 突变、NRAS中的激活突变以及丝氨酸/苏氨酸BRAF。大约15％的人癌症携带激活RAS突变，包括结肠直肠癌(CRC)(40％KRAS突变)、胰腺癌(KRAS 70％至90％突变)以及非小细胞肺癌(NSCLC)(30％KRAS突变)。BRAF中的激活突变在7％至8％的所有实体瘤和60％的恶性黑色素瘤、8％至15％的CRC以及3％的胰腺癌病例中发生。BRAF和NRAS中的体细胞突变分别在50％至60％和15％至20％的皮肤黑色素瘤中发生。一般来说，KRAS、NRAS和BRAF的这类激活突变被认为是恶性肿瘤的关键启动子。

此外，胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)(一种跨膜酪氨酸激酶)广泛表达于正常组织上。所述受体通过天然配体IGF1与IGF2的结合激活并且导致PI3K/AKT和RAS/RAF/MEK/ERK途径的激活。通过磷脂酰肌醇3’激酶(PI3K)信号传导调节各种细胞功能，包括蛋白质合成和葡萄糖代谢、细胞存活和生长、增殖、细胞复原和修复、细胞迁移以及血管生成。在激活后，PI3K产生PIP3(一种脂质“第二信使”)，所述PIP3进而激活AKT(PKB)(一种丝氨酸/苏氨酸激酶)，所述AKT(PKB)可能是PI3K的最佳理解的下游效应子。PI3K信号传导通过双特异性蛋白磷酸酶/3-PI磷酸酶(即肿瘤抑制基因PTEN)的作用进行负调节。

与增加的IGF1R信号传导相关的PI3K/AKT途径的激活已知发生在各种癌症类型中，如胰腺癌、结肠直肠癌和黑色素瘤。IGF1R经常被发现为由癌症细胞系和人癌症过量表达，并且许多癌细胞系有丝分裂地响应于IGF的生理浓度。然而，与其它受体酪氨酸激酶受体相比，IGF1R过量表达似乎不与基因扩增或基因突变相关。IGF1R被发现通过胰岛素生长因子结合蛋白表达的损失在EGFR扩增的肿瘤中建立对表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂的抗性。

许多癌症，特别是携带EGFR扩增、KRAS-突变或BRAF-突变的那些分别易于用表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂、IGF1R抑制剂和/或BRAF-抑制剂进行治疗。然而，在许多情况下，这些癌症获得 对这些所选治疗的抗性并且最终变得难以治疗。

尽管对与癌症患者来说有多种治疗选择，但仍需要有效和安全的治疗剂并且需要其在组合治疗中的优先使用。具体地说，本领域需要治疗癌症的新颖方法，所述癌症特别是携带EGFR扩增、EGFR激活突变、IGF1R激活特征(例如，IGF1R的过量表达、高IGF-1循环水平或高IGFBP1水平)、KRAS突变的、NRAS-突变的或BRAF突变的癌症的那些，尤其是当前疗法抗性和/或难治的那些癌症。

发明概述

本发明部分地涉及一种药物组合，所述药物组合包含(a)化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(化合物A)或其药学上可接受的盐，和(b)IGF1R抑制剂抗体A，所述抗体A包含本文SEQ ID NO:1中列出的重链氨基酸序列和SEQ ID NO:2中列出的轻链氨基酸序列。

在一个实施方案中，本发明包括一种药物组合，所述药物组合包含化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺或其药学上可接受的盐和IGF1R抑制剂抗体A，所述药物组合用于在治疗有需要的受试者中的癌症中使用。本发明的组合可用于治疗患有例如以下癌症的受试者，所述癌症具有EGFR扩增、EGFR激活突变、IGF1R激活特征(例如，IGF1R的过量表达、高IGF-1循环水平或高IGFBP1水平)、KRAS突变、NRAS-突变以及BRAF突变。适合的癌症包括但不限于，胰腺癌，例如局部晚期胰腺癌和KRAS突变的胰腺癌。

在另一个实施方案中，本发明包括一种药物组合，所述药物组合包含化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺或其药学上可接受的盐和IGF1R抑制剂抗体A，所述药物组合用于在治疗有需要的受试者中当前可获得的疗法抗性或难治的癌症中使用，所述癌症例如EGFR抑制剂、IGF1R抑制剂或 BRAF抑制剂抗性或难治的EGFR扩增的癌症、KRAS突变的癌症、NRAS-突变的癌症以及BRAF突变的癌症。

在另一个实施方案中，本发明包括6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(化合物A)或其药学上可接受的盐与展示出协同作用的抗体A的组合。

本发明提供一种治疗受试者(例如，患者)中的癌症的方法，所述方法通过向需要这种治疗的受试者施用治疗有效量或剂量的化合物A或其药学上可接受的盐与抗体A的组合。

在一个实施方案中，本发明提供一种治疗癌症的方法，所述方法通过向需要这种治疗的受试者施用一定量的化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A，所述抗体A对于所述治疗来说是联合治疗有效的。

在另一个实施方案中，化合物A和抗体A是呈单一制剂或单位剂型。在另一个实施方案中，化合物A和抗体A是呈分开的制剂或单位剂型。

在另一个实施方案中，化合物A和/或抗体A大致上同时施用。在另一个实施方案中，化合物A和/或抗体A在不同时间施用。在另一个实施方案中，化合物A在施用抗体A之前施用至受试者。在另一个实施方案中，抗体A在施用化合物A之前施用至受试者。

在另一个实施方案中，化合物A以约15与约60mg之间、例如15与60mg之间的剂量施用。在另一个实施方案中，单克隆抗体A以约9与约20mg/kg之间、例如9与20mg/kg之间的剂量施用。

本发明提供一种用于治疗对用EGFR调节剂、IGF1R抑制剂或BRAF抑制剂的先前治疗抗性或难治的癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A。

本发明进一步提供一种用于通过施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐来治疗用IGF1R抑制剂抗体A的治疗抗性或难治的癌症的方法。

本发明提供一种包含化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A的药物组合用于制造用以治疗癌症的药物制剂或药剂的用途。

本发明进一步提供包含化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A的药物组合用于制造用以治疗癌症的药物制剂或药剂的用途，所述癌症为用EGFR调节剂、IGF1R抑制剂或BRAF抑制剂的治疗抗性或难治的癌症。

本发明进一步提供化合物A或其药学上可接受的盐用于治疗用IGF1R抑制剂抗体A治疗抗性或难治的癌症的用途。

在一个实施方案中，本发明涉及一种药物组合物或药物制剂，所述药物组合物或药物制剂包含(a)化合物A或其药学上可接受的盐，和(b)抗体A，以及任选地一种或多种药学上可接受的载体。

在另一个实施方案中，本发明进一步涉及一种用于在治疗癌症中使用的药物组合物或药物制剂，所述药物组合物或药物制剂包含(a)化合物A或其药学上可接受的盐，和(b)抗体A，以及任选地一种或多种药学上可接受的载体。

在另一个实施方案中，本发明涉及(a)包含化合物A或其药学上可接受的盐的药物组合，和(b)以分开的药物组合物施用至有需要的受试者的包含抗体A的药物组合物。

附图简述

图1描绘用于确定在不存在或存在100ng/ml IGF1的情况下化合物A与抗体A的组合对Miapaca-2和AsPC-1细胞增殖的作用的实验的结果。

发明详述

本发明涉及一种药物组合，所述药物组合包含化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(化合物A)或其药学上可接受的盐和IGF1R抑制剂抗体A。

本文所用的某些术语在以下进行描述。使用标准命名法描述本发明的化合物和抗体。除非另外定义，否则本文所用的所有技术性和科学性术语具有与本发明所属领域中的技术人员通常所理解的相同的含义。

本文所用的术语“药物组合”是指呈一种剂量单位形式的固定组合、或非固定组合或用于组合施用的部分的试剂盒，其中两种或更多种治疗剂可同时独立地施用或在时间间隔内分开施用，尤其是这些时间间隔允许组合伴侣显示出合作、例如协同作用的情况下。

术语“组合疗法”是指施用两种或更多种治疗剂以治疗本公开中所描述的治疗性病状或病症。所述施用涵盖以大致上同时的方式共同施用这些治疗剂，如以具有固定比例的活性成分的单个胶囊或以每种活性成分的多个或分离的容器(例如，胶囊和/或静脉内制剂)。此外，所述施用还涵盖在大约同时或在不同时间以顺序方式使用每种类型的治疗剂。在任一情况下，治疗方案将在治疗本文所描述的病状或病症中提供药物组合的有益作用。

如本文所用的术语“MEK抑制剂”是指靶向、减少或抑制MEK丝氨酸激酶的至少一种活性的化合物。示例性MEK抑制剂描述于国际PCT申请WO2003/0077914中，所述申请特此以引用的方式整体并入。

如本文所用的术语“IGF1R抑制剂”是指靶向、减少或抑制胰岛素生长因子-1受体的至少一种活性的化合物。示例性IGF1R抑制剂公开于美国专利号7,871,611中，所述专利特此以引用的方式整体并入。

如本文所用的术语“药学上可接受的”是指在合理医学判断的范 围内、适合用于与温血动物(例如，哺乳动物或人)的组织相接触而无过度毒性、刺激过敏反应和其它问题并发症、与合理的益处/风险比相称的那些化合物、抗体、材料、组合物和/或剂型。

如本文所用的术语“固定组合”、“固定剂量”和“单一剂型”是指配制用于向患者递送一定量的两种治疗剂的单一载体或媒介物或剂型，所述量对于治疗癌症来说是联合治疗有效的。单一媒介物被设计成递送一定量的每种药剂连同任何药学上可接受的载体或赋形剂。在一些实施方案中，媒介物是片剂、胶囊、丸剂或贴剂。在其它实施方案中，媒介物是溶液或悬浮液。

术语“非固定组合”或“部分的套件”意指活性成分例如化合物A和抗体A作为分开的实体同时、并发或顺序地但无具体时间限制地施用至患者，其中这种施用在有需要的温血动物体内提供治疗有效水平的两种化合物。后者还应用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或更多种活性成分。

术语“单位剂量”在本文用于意指将两种药剂一起，以一种剂型，同时施用至待治疗的患者。在一些实施方案中，单位剂量是单一制剂。在某些实施方案中，单位剂量包括一种或多种媒介物，以使得每种媒介物包括有效量的至少一种所述药剂连同药学上可接受的载体和赋形剂。在一些实施方案中，单位剂量是同时施用至患者的一个或多个片剂、胶囊、丸剂或贴剂。

“口服剂型”包括开处方或意图用于口服施用的单位剂型。

术语“治疗”在本文用于意指缓解、减少或减轻受试者中的疾病的至少一种症状。在本发明的含义内，术语“治疗”还指代控制、延迟疾病的发作(即在疾病或疾病的症状的临床表现之前的时期)和/或降低发展或恶化疾病的症状的风险。

术语治疗剂的组合的“有效量”或“治疗有效量”是足以提供相对 于用所述组合治疗的病症的基线临床上可观察的病征和症状的可观察的改善的量。

如本文所用的术语“联合治疗有效的”或“联合治疗作用”意指治疗剂可以它们在待治疗的温血动物、尤其是人中优选的这类时间间隔中分开给予(以时间顺序交错的方式，尤其是顺序特异性方式)。仍显示(优选地协同)相互作用(联合治疗作用)。是否是这种情况尤其可通过追踪血液水平来确定，从而表明两种化合物均至少在某一时间间隔过程中存在于待治疗的人的血液中。

术语“受试者”意图包括动物。受试者的实例包括动物，例如，人、狗、牛、马、猪、绵羊、山羊、猫、小鼠、兔、大鼠以及转基因非人动物。在某些实施方案中，受试者是人，例如，患有、有风险患有、或潜在能够患有癌症的人。

除非另外指出，术语“包含”和“包括”在本文以其开放式和非限制意义使用。

在描述本发明的上下文中(尤其是在以下权利要求的上下文中)术语“一个/种(a)”和“一个/种(an)”以及“所述”以及类似的提及应被解释为涵盖单数和复数两者，除非在本文另外地指示或明显地与上下文矛盾。在复数形式用于化合物、盐等的情况下，这应被认为还意指单一化合物、盐等。

术语“约”或“大约”通常意指给定的值或范围的20％内、更优选10％内、并且又最优选5％内。或者，特别是在生物系统中，术语“约”意指在给定值的约一个对数(即，一个数量级)内、优选2的系数内。

本发明的药物组合包含具有以下化学式(A)的MEK抑制剂化合物：

或其药学上可接受的盐。式(A)的化合物还被称为化学化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(在下文中被称为“化合物A”)。化合物A描述于PCT申请号WO 03/077914中，所述申请特此以引用的方式整体并入；并且用于其制备的方法已经例如在其中的实施例18中进行了描述。

如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指化合物A的无毒酸式盐或碱金属盐和碱土金属盐。这些盐可在化合物的最终分离和纯化过程中原位制备，或通过使碱或酸官能团分别与适合的有机或无机酸或碱单独反应来制备。

可用于制备化合物A的药学上可接受的酸加成盐的酸是形成无毒酸加成盐的那些，即含有药学上可接受的阴离子的盐，如醋酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、钙盐、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二磺酸盐(edislyate)、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、乙基琥珀酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰基对氨基苯胂酸盐(glycollylarsanilate)、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、海巴明(hydrabamine)盐、氢溴酸盐、盐酸盐、碘化物、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、扑酸盐(双羟萘酸盐)、棕榈酸盐(palimitate)、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐(teoclate)、甲苯磺酸盐、三乙基碘(triethiodode)以及戊酸盐。

相对于酸性部分来说，优选的无机盐是用碱金属和碱土金属如锂、钠、钾、钡以及钙形成的那些。优选的有机碱盐包括例如，铵、二苄基铵、苄基铵、2-羟乙基铵、双(2-羟乙基)铵、苯基乙基苄胺、二苄基-乙二胺以及类似盐。酸性部分的其它盐可包括例如用普鲁卡因、奎宁以及N-甲基葡糖胺(methylglusoamine)形成的那些盐，加上用碱性氨基酸如甘氨酸、鸟氨酸、组氨酸、苯基甘氨酸、赖氨酸以及精氨酸形成的盐。尤其优选的盐是本发明的化合物的钠或钾盐。

相对于碱性部分，优选的无机盐是用酸性化合物、特别是无机酸形成的那些，如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、磷酸盐或类似盐。这种类型的优选的有机盐可包括例如，用甲酸、乙酸、琥珀酸、柠檬酸、乳酸、马来酸、富马酸、棕榈酸、胆酸、扑酸、粘酸、D-谷氨酸、D-樟脑酸、戊二酸、乙醇酸、邻苯二甲酸、酒石酸、月桂酸、硬脂酸、水杨酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、山梨酸、尿酸(puric)、苯甲酸、肉桂酸以及类似有机酸形成的盐。这种类型的尤其优选的盐是盐酸盐或硫酸盐。

除非另外指明或由本文清楚地指示，提及适用于本发明的组合疗法中的化合物包括化合物A的游离碱和化合物A的所有药学上可接受的盐两者。

本发明的药物组合进一步包含公开于美国专利号7,871,611中的IGF1R抑制抗体(抗体A)，所述专利以引用的方式整体并入本文。具体地说，本文中抗体A包含SEQ ID NO：1中列出的重链氨基酸序列和SEQ ID NO：2中列出的轻链氨基酸序列。

抗体A重链

QVQLQESGPGLVKPSGTLSLTCAVSGGSISSSNWWSWVRQPPGKGLEWIGEIYHSGSTNYNPSLKSRVTISVDKSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARWTGRTDAFDIWGQGTMVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO：1)

抗体A轻链

DVVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGTHWPLTFGQGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:2)

抗体A的变体还可用于本文所公开的组合疗法和方法中。在一个实施方案中，所述变体是包含SEQ ID NO：3中列出的重链可变区氨基酸序列的抗体。在另一个实施方案中，所述变体是包含SEQ ID NO：4中列出的轻链可变区氨基酸序列的抗体。在另一个实施方案中，所述变体是分别包含SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4中列出的重链可变区氨基酸序列和轻链可变区氨基酸序列的抗体。在又一个实施方案中，所述变体是分别包含SEQ ID NO：5、6和7中列出的重链CDR1、2和3氨基酸序列的抗体。在另一个实施方案中，所述变体是分别包含SEQ ID NO：8、9和10中列出的轻链CDR1、2和3氨基酸序列的抗体。在另一个实施方案中，所述变体是分别包含SEQ ID NO：5、6和7中列出的重链CDR1、2和3氨基酸序列和分别包含SEQID NO：8、9和10中列出的轻链CDR1、2和3氨基酸序列的抗体。

抗体A的示例性变体的抗体可变区和CDR氨基酸序列在以下列出：

QVQLQESGPGLVKPSGTLSLTCAVSGGSISSSNWWSWVRQPPGKGLEWIGEIYHSGSTNYNPSLKSRVTISVDKSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARWTGRTDAFDIWGQGTMVTVSS(SEQ ID NO:3)

DVVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSNGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSNRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQGTHWPLTFGQGTKVEIK(SEQ ID NO:4)

SSNWWS (SEQ ID NO:5)

EIYHSGSTNYNPSLKS (SEQ ID NO:6)

WTGRTDAFDI (SEQ ID NO:7)

RSSQSLLHSNGYNYLD (SEQ ID NO:8)

LGSNRAS (SEQ ID NO:9)

MQGTHWPLT (SEQ ID NO:10)

如本文所用，“药剂的组合”、“本发明的组合”以及类似术语是指两种类型的药剂的组合：(1)MEK抑制剂化合物A或其药学上可接受的盐和(2)IGF1R抑制剂抗体A。

本文提供包含MEK抑制剂(例如化合物A)抑制剂和IGF1R抑制剂(例如抗体A)的组合疗法。施用化合物A与抗体A的组合包括施用呈单一制剂或单位剂型的所述组合、同时地但分开地施用所述组合的单独药剂、或通过任何适合的途径顺序地施用所述组合的单独药剂。与所述组合中的其它一种或多种药剂相比，所述组合的单独药剂的剂量可要求更频繁的施用所述一种或多种药剂中的一种。因此，为了允许适当的给药，封装的药物产品可包括含有药剂的组合的一个或多个剂型，和含有药剂的组合中的一种但无所述组合中的一个或多个剂型。

在一个实施方案中，本发明包括一种药物组合，所述药物组合包含化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺或其药学上可接受的盐和IGF1R抑制剂抗体A，所述药物组合用于在治疗有需要的受试者中的癌症中使用。本发明的组合可用于治疗患有例如以下癌症的受试者，所述癌症具有EGFR扩增、EGFR激活突变、IGF1R激活特征(例如，IGF1R的过量表达、高IGF-1循环水平或高IGFBP1水平)、KRAS突变、NRAS-突变以及BRAF突变。

在另一个实施方案中，本发明包括一种药物组合，所述药物组合包含化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺或其药学上可接受的盐和IGF1R抑制剂抗体A，所述药物组合用于在治疗有需要的受试者中当前可获得的疗法抗性或难治的癌症中使用，所述癌症例如EGFR抑制剂、IGF1-R抑制剂或BRAF抑制剂抗性或难治的EGFR扩增的癌症、KRAS突变的癌症、NRAS-突变的癌症以及BRAF突变的癌症。

在一个实施方案中，6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(化合物A)或其药学上可接受的盐与本文所描述的抗体A的组合展示出协同作用。如本文所用的术语“协同作用”是指两种药剂(例如像化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A)产生例如减缓癌症或其症状的症状性进展的效应的作用，所述作用大于独自施用的每种药物的作用的简单加成。协同作用可例如使用适合的方法来计算，所述方法如Sigmoid-Emax方程(Holford,N.H.G.和Scheiner,L.B.,Clin.Pharmacokinet.6:429-453(1981))、Loewe可加性方程(Loewe,S.和Muischnek,H.,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.114:313-326(1926))以及中值效应方程(median-effect equation)(Chou,T.C.和Talalay,P.,Adv.Enzyme Regul.22:27-55(1984))。可将上文提及的各方程应用到实验数据，以得到有助于评估药物组合的作用的相应图表。与上文提及的方程相关的相应图表分别是浓度-效应曲线、等效线图曲线和组合指数曲线。

使用MEK抑制剂和IGF1R抑制剂组合的治疗方法

本发明提供一种通过向有需要的受试者施用化合物A或其药学上可接受的盐与抗体A的组合来治疗所述有需要的受试者中的癌症的方法。

在一个实施方案中，本发明提供一种治疗受试者(例如，患者)中的癌症的方法，所述方法通过向需要这种治疗的受试者施用治疗有效量或剂量的化合物A或其药学上可接受的盐与抗体A的组合。

在另一个实施方案中，本发明提供一种治疗癌症的方法，所述方法通过向需要这种治疗的受试者施用一定量的化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A，所述抗体A对于所述治疗来说是联合治疗有效的。

可用本发明的组合治疗的癌症的类型的实例包括但不限于肺癌、骨癌、CMML、胰腺癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼内黑色素瘤、子 宫癌、中枢神经系统(CNS)癌症、卵巢癌、直肠癌、肛门区癌症、胃癌、结肠癌、乳腺癌、黑色素瘤、结肠直肠癌、睾丸癌、妇科肿瘤(例如子宫肉瘤、输卵管癌、子宫内膜癌、子宫颈癌、阴道癌或外阴癌)、何杰金氏病、食道癌、小肠癌、内分泌系统症癌(例如，甲状腺癌、甲状旁腺癌或肾上腺癌)、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、慢性或急性白血病、儿童期实体瘤、淋巴细胞性淋巴瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌(例如，肾细胞癌、肾盂癌)。在某些实施方案中，癌症是实体瘤。

可用本发明的组合治疗的癌症的类型的其它实例包括，但不限于，肾上腺皮质癌、AIDS相关癌症、儿童小脑星形细胞瘤、儿童大脑星形细胞瘤、基底细胞癌、肝外胆管癌、骨肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤骨癌、脑肿瘤(例如，脑干神经胶质瘤、小脑星形细胞瘤、大脑星形细胞瘤/恶性神经胶质瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、幕上原始神经外胚层肿瘤、视通路和下丘脑神经胶质瘤)、支气管腺瘤/类癌瘤、类癌肿瘤、胃肠类癌肿瘤、原发性中枢神经系统、小脑形细胞瘤、大脑星形细胞瘤/恶性神经胶质瘤、宫颈癌、儿童癌症、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、慢性骨髓增生性病症、室管膜瘤、尤因氏家族肿瘤、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、眼内黑色素瘤眼癌、视网膜母细胞瘤眼癌、胆囊癌、胃肠类癌肿瘤、生殖细胞肿瘤(例如，颅外、性腺外和卵巢)、妊娠滋养细胞肿瘤、神经胶质瘤(例如成人、儿童脑干、儿童大脑星形细胞瘤、儿童视通路和下丘脑)、毛细胞白血病、肝细胞癌、下咽癌、下丘脑和视通路神经胶质瘤、胰岛细胞癌(内分泌胰腺)、卡波济氏肉瘤、喉癌、白血病(例如，急性成淋巴细胞性、急性髓性、慢性淋巴细胞性、慢性髓细胞性和毛细胞)、唇和口腔癌症、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、淋巴瘤(例如，AIDS-相关、伯基特氏、皮肤T-细胞、非何杰金氏以及原发性中枢神经系统)、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、骨/骨肉瘤的恶性纤维性组织细胞瘤、成神经管细胞瘤、梅克尔细胞癌、间皮瘤、隐匿性原发性转移性鳞状颈癌、多发性内分泌腺瘤形成综合征、多发 性骨髓瘤/浆细胞肿瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性疾病、粒细胞性白血病、鼻腔和鼻旁窦癌症、鼻咽癌、成神经细胞瘤、口腔癌、口咽癌、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢低恶性潜能肿瘤、胰腺癌、胰岛细胞胰腺癌、甲状旁腺癌、嗜铬细胞瘤、松果体母细胞瘤、垂体肿瘤、胸膜肺母细胞瘤、输尿管移行性细胞癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、塞扎里综合征、非黑色素瘤皮肤癌、梅克尔细胞皮肤细胞癌、鳞状细胞癌、睾丸癌、胸腺瘤、妊娠滋养细胞肿瘤以及维尔姆斯氏肿瘤。

在优选实施方案中，可用本发明的组合治疗的癌症包括但不限于结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌以及黑色素瘤。

待治疗的癌症可具有RAS/RAF/MEK信号转导途径中的遗传改变，例如像HRAS、KRAS、NRAS或BRAF突变或基因扩增。在一个实施方案中，待治疗的癌症具有KRAS突变，例如KRAS-突变的结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌以及黑色素瘤。在另一个实施方案中，待治疗的癌症具有BRAF突变(例如BRAF^V600)，例如黑色素瘤。

在某些实施方案中，癌症是EGFR-扩增的、KRAS-突变的、NRAS-突变的或BRAF-突变的癌症。适合的KRAS-突变的、NRAS-突变的以及BRAF-突变的(例如BRAF^V600)癌症包括但不限于结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌以及黑色素瘤。

在某些实施方案中，癌症选自由以下各项组成的组：KRAS-突变的结肠直肠腺癌、转移性胰腺癌、和/或突变的BRAF^V600黑色素瘤。

术语“KRAS-突变的癌症”是指其中癌细胞包含RAS家族小胍三磷酸酶(GTP酶)中的激活突变KRAS的癌症。

术语“NRAS-突变的癌症”是指其中癌细胞包含RAS家族激酶小胍三磷酸酶(GTP酶)中的激活突变NRAS的癌症。NRAS还被称为成神经细胞瘤RAS病毒(v-ras)同系物。

术语“BRAF-突变的癌症”是指其中癌细胞包含丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶中的激活突变B-Raf的癌症。

术语“BRAF抑制剂”是指抑制、减少、减低或降低BRAF激酶的任何亚型或突变体的至少一种活性的化合物或药剂。BRAF抑制剂的实例包括但不限于GSK2118436、PLX4720以及PLX4032。

术语“EGFR-扩增的癌症”是指其中癌细胞包含表皮生长因子受体(EGFR)，例如EGFR1、EGFR2或EGFR3的酪氨酸激酶结构域的扩增的癌症。

术语“EGFR抑制剂”是指抑制、减少、减低或降低表皮生长因子受体(EGFR)的至少一种活性的化合物。EGFR抑制剂的实例包括但不限于[6,7-双(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉-4-基]-(3-乙炔基苯基)胺(还被称为OSI-774)、埃罗替尼、CI-1033(之前被称为PD183805)、AG-1478、CGP-59326、PKI-166、EKB-569、拉帕替尼或二甲苯磺酸拉帕替尼；和吉非替尼、AG490(一种酪氨酸磷酸化抑制剂(tyrphostin))、ARRY-334543、BIBW-2992、EKB-569、ZD6474、BMS-599626(百时美施贵宝(Bristol-Myers Squibb))、西妥昔单抗以及MDX-447。

通过代号、类属名称或商品名鉴别的活性剂的结构可取自标准纲目“默克索引(The Merck Index)”的现行版本或取自数据库，例如国际专利(例如IMS世界公布)。其相应内容以引用的方式并入。

在一个实施方案中，本发明提供一种治疗癌症的方法，所述方法通过向需要这种治疗的受试者施用一定量的化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A，所述抗体A对于所述治疗来说是联合治疗有效的。

在另一个实施方案中，化合物A和抗体A是呈单一制剂或单位剂型。在另一个实施方案中，化合物A和抗体A是呈分开的制剂或单位剂型。

在另一个实施方案中，化合物A和/或抗体A大致上同时施用。在另一个实施方案中，化合物A和/或抗体A在不同时间施用。在另一个实施方案中，化合物A在施用抗体A之前施用至受试者。在另一个实施方案中，抗体A在施用化合物A之前施用至受试者。

在一个实施方案中，本发明提供一种用于治疗用EGFR调节剂、IGF1R抑制剂或BRAF抑制剂的治疗抗性或难治的癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，本发明提供一种用于治疗用IGF1R抑制剂抗体A的治疗抗性或难治的癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐。

本发明进一步提供一种用于通过施用治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐来治疗用IGF1R抑制剂抗体A的治疗抗性或难治的癌症的方法。

本发明提供进一步一种包含化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A的药物组合用于制造用以治疗癌症的药物制剂或药剂的用途。在一个实施方案中，待治疗的癌症是以上所鉴别的癌症，其特此以引用的方式整体并入。

本发明进一步提供包含化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A的药物组合用于制造用以治疗癌症的药物制剂或药剂的用途，所述癌症为用EGFR调节剂、IGF1R抑制剂或BRAF抑制剂的治疗抗性或难治的癌症。在一个实施方案中，待治疗的癌症是以上所鉴别的癌症，其特此以引用的方式整体并入。

本发明进一步提供化合物A用于治疗用IGF1R抑制剂抗体A的治疗抗性或难治的癌症的用途。

本发明包括一种药物组合，所述药物组合包含化合物A或其药 学上可接受的盐和IGF1R抑制剂抗体A，所述药物组合用于在治疗有需要的受试者中当前可获得的疗法抗性或难治的癌症中使用，所述癌症例如EGFR抑制剂、IGF1R抑制剂或BRAF抑制剂抗性或难治的EGFR扩增的癌症、KRAS突变的癌症、NRAS-突变的癌症以及BRAF突变的癌症。

剂量

用于治疗疾病的药剂组合的最佳剂量可使用已知方法针对每一个体凭经验确定并且将取决于多种因素，包括但不限于疾病的进展程度；所述个体的年龄、体重、总体健康、性别以及饮食；给药时间和给药途径；以及所述个体正在服用的其它药物。最佳剂量可使用本领域中熟知的常规测试和工序来确立。

可与载体材料组合以产生单一剂型的药剂组合的量将取决于所治疗的个体和具体的施用方式而变化。在一些实施方案中，含有如本文所描述的药剂组合的单位剂型将含有当独自施用所述药剂时所通常施用的量的所述组合的每种药剂。

剂量频率可取决于所使用的化合物和待治疗或预防的具体病状而变化。一般来说，使用足以提供有效治疗的最小剂量是优选的。通常可使用适合用于所治疗或预防的病状的测定来针对治疗有效性对患者进行监测，所述测定将是本领域技术人员熟悉的。

剂型可通过对于药物制剂化学中的技术人员来说显而易见的各种常规混合、粉碎和制作技术来制备。

含有所述药剂组合或所述药剂组合的单独药剂的口服剂型可呈封装在胶囊(例如明胶胶囊)内部的微片剂的形式。为此，可使用如药物制剂中所采用的明胶胶囊，如从辉瑞(Pfizer)可获得的被称为CAPSUGEL的硬明胶胶囊。

本文有用的许多口服剂型含有呈颗粒形式的所述药剂组合或所 述药剂组合的单独药剂。这类颗粒可被压制成存在于包衣剂型(如掩味剂型、挤压包衣剂型或肠溶包衣剂型)的核心元件中的片剂，或可包含在胶囊、渗透泵剂型或其它剂型中。

本发明的药物化合物(例如化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A)以100:1至1:100范围的比例存在于本文所公开的组合(固定的或非固定的)、剂型、药物组合物和药物制剂中。例如，化合物A:抗体A的比例可在1:100至1:1，例如1:100、1:90、1:80、1:70、1:60、1:50、1:40、1:30、1:20、1:10、1:5、1:2或1:1的范围内。在另一个实例中，抗体A:化合物A的比例可在1:100至1:1，例如1:100、1:90、1:80、1:70、1:60、1:50、1:40、1:30、1:20、1:10、1:5、1:2或1:1的范围内。

产生功效但无毒性的药物化合物的最佳比例、单独剂量和组合剂量以及浓度基于活性成分针对靶位点的利用度的动力学并且使用本领域技术人员已知的方法来确定。

本文所提供的药物组合物或组合(即化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A)可在临床研究中进行测试。适合的临床研究可以是例如患有癌症的患者中的开放标记、剂量递增研究。这类研究特别证明本发明的组合的活性成分的协同作用。对癌症的有益作用可直接通过为本领域的技术人员所已知的这些研究的结果来确定。这类研究可特别适合用于比较使用所述活性成分的单一疗法和本发明的组合的作用。在一个实施方案中，化合物A的剂量逐步增加直到达到最大耐受剂量，并且抗体A以固定剂量施用。或者，化合物A可以固定剂量施用并且抗体A的剂量可逐步增加。每个患者可每日或间歇地接受所述化合物的剂量。治疗的功效可在例如，在12、18或24周之后通过每6周评价症状得分的这类研究中来确定。

施用本发明的组合疗法不但可产生有益作用，例如(例如)关于减轻症状、延迟症状的进展或抑制症状的协同治疗作用，而且产生其 它出人意料的有益作用，例如与仅应用本发明的组合中使用的药物活性成分中的一种的单一疗法相比更少的副作用、改善的生命质量或减少的发病率。

另一益处可以是可使用较低剂量的本发明的组合的活性成分，例如所需的剂量不仅经常更小，而且可以较低频率应用，这样可减少副作用的发生率或严重程度。这与待治疗的患者的希望和要求一致。

本发明的一个目的是提供一种包含一定量的药物组合，所述药物组合可联合治疗有效地靶向或预防癌症，例如EGFR扩增的、KRAS-突变的、NRAS-突变的或BRAF-突变的癌症。在这种组合中，化合物A和抗体A可以一个组合单位剂型或以两个分开的单位剂型一起、相继地或分开地施用。单位剂型还可以是固定组合。

用于分开施用(或非固定剂量)两种化合物或用于以固定组合(即，包含根据本发明的两种化合物的单一组合物)施用的药物组合物可以本身已知的方式进行制备，并且是适于经肠(如口服或直肠)和胃肠外施用至哺乳动物(温血动物)(包括人)的那些，所述药物组合物独自包含治疗有效量的至少一种药理学活性组合伴侣(例如，如以上所指示)，或与一种或多种药学上可接受的载体或稀释剂(尤其是适用于经肠或胃肠外应用)组合。

在一个实施方案中，本发明涉及一种药物组合物或药物制剂，所述药物组合物或药物制剂包含(a)化合物A或其药学上可接受的盐，和(b)抗体A，以及任选地一种或多种药学上可接受的载体。

在另一个实施方案中，本发明进一步涉及一种用于在治疗癌症中使用的药物组合物或药物制剂，所述药物组合物或药物制剂包含(a)化合物A或其药学上可接受的盐，和(b)抗体A，以及任选地一种或多种药学上可接受的载体。

在另一个实施方案中，本发明涉及(a)包含化合物A或其药学上 可接受的盐的药物组合，和(b)以分开的药物组合物施用至有需要的受试者的包含抗体A的药物组合物。

制剂

本文所提供的药物组合可通过对于药物制剂领域中的技术人员来说清楚的多种方法进行配制。如以上所讨论，化合物A和抗体A可配制到同一药物组合物中或配制到用于单独施用的分开的药物组合物中。适合的制剂包括例如片剂、胶囊、挤压包衣制剂、静脉内溶液或悬浮液以及其它容易施用的制剂。

一种或两种组合伴侣可以包含一种或多种药学上可接受的载体的药物制剂施用。术语“载体”是指使用其来施用化合物的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。这类药物载体可以是无菌液体如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些，如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。水或含水盐水溶液以及右旋糖水溶液和甘油水溶液优选用作载体，特别是用于可注射溶液。适合的药物载体描述于“Remington's Pharmaceutical Sciences”(E.W.Martin)中。

适合的药物制剂可包含例如约0.1％至约99.9％、优选约1％至约60％的一种或多种活性成分。用于经肠或胃肠外施用的组合疗法的药物制剂是例如呈单位剂型的那些，如糖包衣片剂、片剂、胶囊或栓剂或安瓿剂。如果不以另外的方式指示，这些以本身已知的方式进行制备，例如通过常规混合、制粒、糖包衣、溶解或冷冻干燥方法。应理解包含于每个剂型的单独剂量中的组合伴侣的单位含量本身不必构成有效量，因为必需的有效量可通过施用多个剂量单位达到。

根据本发明，治疗有效量的本发明的组合的组合伴侣中的每种可同时或顺序地并且以任何顺序施用，并且所述组分可分开地或作为固定组合施用。或者，对于治疗癌症来说联合治疗有效的量的本发明的组合的每种组合伴侣可同时或顺序地并且以任何次序施用，并且所述组分可分开地或作为固定组合施用。

例如，根据本发明的治疗疾病的方法可包括：(i)施用呈游离或药学上可接受的盐形式的第一药剂和(ii)以联合治疗有效量、优选以协同有效量，例如以对应于本文所描述的量的每日剂量或间歇剂量同时或以任何次序顺序地施用呈游离或药学上可接受的盐形式的第二药剂。本发明的组合的单独组合伴侣可在治疗过程期间在不同时间分开地施用或以分开的或单一组合形式同时施用。此外，术语施用还涵盖使用组合伴侣的前药，所述前药在体内转化成组合伴侣自身。本发明因此应被理解为包括同时或交替治疗的所有这类方案，并且术语“施用”应被相应地解释。

本发明的组合中采用的组合伴侣中的每种的有效剂量可取决于所采用的具体化合物或药物组合物、施用方式、所治疗的病状、所治疗的病状的严重程度而变化。因此，本发明的组合的剂量方案是根据多种因素来选择，包括施用方式和患者的肾和肝功能。普通技术的临床医生或医师可容易地确定并且开出减轻、对抗或控制病状的进展所需的有效量的单一活性成分。普通技术的临床医生或医师还可使用实体瘤应答评价标准(RECIST)准则(参见例如Therasse等人2000,JNCI92:2,205，其特此以引用的方式整体并入)来容易地确定有效剂量。

本文所描述的方法中使用的化合物A的适合剂量是近似约0.1mg至约200mg(例如，约0.1、0.3、0.5、0.7、1、3、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、90、95、100、120、140、160、180、200或220mg)。在优选实施方案中，化合物A是以约15mg、30mg、45mg或60mg的剂量施用至受试者。

本文所描述的方法中使用的抗体A的适合的剂量是近似约1mg/kg至约100mg/kg(例如，约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、90、95或100mg/kg)。在优选实施方案中，抗体A是以约9、12或20mg/kg的剂量施用至受试者。

本文所描述的方法中使用的化合物A或抗体A的适合的施用频率是近似约10次每天至约一次每月(例如，约10、9、8、7、6、5、4、3、2、1次每天至约31、30、29、28、27、26、25、24、23、22、21、20、19、18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1次每月)。

在一个实施方案中，约15与约60mg之间的化合物A每日两次口服施用至受试者。在另一个实施方案中，抗体A以约9与约20mg/kg之间每月两次静脉内施用。

通过以下实施例进一步说明本发明。所述实施例不应被理解为进一步的限制。本发明的组合的有益作用还可通过相关领域中的技术人员已知的其它测试方法来确定。

实施例1.化合物A的合成

化合物A的合成描述于国际专利申请WO 03/077914(PCT/US03/07864)中，所述申请以引用的方式整体并入。在以下描述这种化合物的合成。

2,3,4-三氟-5-硝基-苯甲酸2

向3升三颈圆底烧瓶装入125ml H₂SO₄。添加发烟硝酸(8.4ml，199mmol)并且轻轻地搅拌混合物。在90分钟内以5g每批添加2,3,4-三氟苯甲酸1(25g，142mmol)。将暗棕黄色溶液搅拌60分钟，此时反应完成。将反应混合物倒入1升冰:水混合物中并且用二乙醚萃取(3×600ml)。将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)并且在减压下浓缩以得到黄色固体。将所述固体悬浮在己烷中并且搅拌30分钟，在此之后将它过滤以便得到29g(92％)呈类黄色(off-yellow)的纯净所需产物：检测到MS APCI(-)m/z220(M-1)。

4-氨基-2,3-二氟-5-硝基-苯甲酸3

将氢氧化铵溶液(约30％于水中)(35ml，271mmol)在0℃下在搅拌下添加至2,3,4-三氟-5-硝基-苯甲酸2(15g，67.8mmol)于30ml水中的溶液。在完成氢氧化铵添加之后，在搅拌下将反应混合物加热至室温。在2.5小时之后，将反应混合物冷却至0℃并且小心地添加浓HCl直到混合物的pH接近0。将反应混合物用水(30ml)稀释并且用二乙醚(3×50ml)萃取。将合并的有机萃取物干燥(MgSO₄)并且在减压下浓缩以便得到14g(95％)纯的所需产物：检测到MS APCI(-)m/z217(M-1)。

4-氨基-2,3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4

在0℃下在氮气氛下将TMS重氮甲烷于己烷(6.88ml，13.75mmol)中的2M溶液添加至4-氨基-2,3-二氟-5-硝基-苯甲酸3(2.00g，9.17mmol)于25ml的4:1THF:MeOH中的悬浮液中。在完成添加之后，将反应混合物加热至室温。在0.5小时之后，通过小心地添加乙酸来破坏过量的TMS重氮甲烷。然后将反应在减压下浓缩并且在真空中干燥以得到1.95g(92％)纯的所需产物：检测到MS APCI(-)m/z 231(M-1)。

6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(8d)

步骤A：4-氨基-3-氟-2-(2-氟-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲酯5b

将4-氨基-2,3-二氟-5-硝基-苯甲酸甲酯4(1.50g，6.46mmol)悬浮于二甲苯(7.5mL)中并且添加2-氟-苯胺(6.24mL，64.6mmol)。在140℃下在N₂下搅拌反应混合物。在搅拌6天之后，反应完成。将反应混合物冷却至室温并且用二氯甲烷稀释并且过滤通过用二氯甲烷(1L)洗脱的硅胶塞以得到橙色滤液。将滤液浓缩至干燥并且然后用二 乙醚研磨以产生嫩黄色固体。重复研磨。收集黄色固体以产生1.08g(52％)纯的所需产物。检测到MSAPCI(-)m/z 322(M-1)。

步骤B：6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯8d

将4-氨基-3-氟-2-(2-氟-苯基氨基)-5-硝基-苯甲酸甲酯5b通过还原/环化和溴化工序转化以产生所需产物。检测到MS ESI(+)m/z 382,384(M+,Br模式)。

6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺

将6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(8d)、碘甲烷以及碳酸钾于二甲基甲酰胺中的溶液在75℃下搅拌一小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸钾水溶液(2x)、盐水洗涤并且干燥(Na₂SO₄)。快速柱色谱法(20:1二氯甲烷/乙酸乙酯)提供3-甲基-3H-苯并咪唑化合物。

将3-甲基-3H-苯并咪唑化合物溶解至2:1THF/水中并且添加NaOH(1.0M水溶液)。在搅拌两小时之后，将反应经由旋转蒸发减少至四分之一初始体积，并且将剩余部分用水稀释。将水溶液通过添加1.0M HCl水溶液酸化至pH2并且用1:1四氢呋喃/乙酸乙酯萃取(3x)萃取，干燥(Na₂SO₄)并且在减压下浓缩以提供呈灰白色固体的纯羧酸。

将羧酸、O-(2-乙烯氧基-乙基)-羟胺、HOBt、三乙胺以及EDCI溶解于二甲基甲酰胺中并且在室温下搅拌48小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水(3x)、饱和碳酸钾(2x)、饱和氯化铵(2x)、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)并且在减压下浓缩至6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-乙烯氧基-乙氧基)-酰胺的灰白色固体。

将盐酸(14mL，1.0M水溶液，14mmol)添加至上述化合物于乙 醇中的悬浮液中并且使反应混合物搅拌24小时。将反应混合物通过旋转蒸发浓缩至干燥并且将固体分配在3:1乙酸乙酯/四氢呋喃与饱和碳酸钾之间。将水相用3:1乙酸乙酯/四氢呋喃(3x)萃取，将合并的有机物干燥(Na₂SO₄)，并且浓缩成灰白色固体的6-(4-溴-2-氟-苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基-乙氧基)-酰胺。

实施例2.患有选定晚期实体瘤的成人患者中MEK抑制剂化合物A与胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)抑制剂抗体A的组合的Ib/II期开放标记、多中心研究

进行多中心、开放标记、Ib/II期研究，从而评价化合物A的MEK抑制剂与抗体A的胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)抑制剂的组合在具有选定晚期实体瘤的成人患者中的功效和安全性。首先，进行剂量递增Ib期研究以便估计一个或多个最大终点剂量(MTD)和/或鉴别MEK抑制剂化合物A与胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)抑制剂抗体A的组合在患者中的一个或多个建议的II期剂量(RP2D)。第二，进行II期以便评估临床功效并且进一步评估这种组合在选定患者中的安全性。

剂量递增研究

招募患有证实的晚期KRAS或BRAF突变的癌症的患者，所述癌症如结肠直肠癌(CRC)、胰腺癌和黑素瘤或其它晚期实体肿瘤或胰腺癌(不管KRAS-或BRAFV600突变状态)。每个招募的患者被确定为满足以下所列出的具体入选/排除标准。对于这一剂量递增研究来说，招募大约15至25名患者。

在这一研究中，化合物A在28天周期中作为口服片剂每日两次(BID)施用。抗体A作为用于静脉输注的溶液每两周(Q2W)在每一周期的第1天和第15天施用。

向所有患者施用30mg BID化合物A和12mg/kg Q2W抗体A 的组合的起始剂量。剂量持续逐步增加直到达到一个或多个MTD/RP2D9。根据固定比例向患者给予化合物A，并且根据体重向患者给予抗体A。在递增过程中，一次仅一种研究药物如下逐步增加：

所述研究的剂量递增部分通过贝叶斯逻辑回归模型(BLRM)来指导。在所有决策时间点，自适应BLRM允许基于所观察的剂量限制性毒性(DLT)改变剂量增量。不允许低于15mgBID化合物A或9mg/kg Q2W抗体A的剂量。

DLT使用美国国家癌症研究所(NCI)不良事件的通用毒性标准(CTCAE)4.03版来进行评估。对患者监测的参数是例如临床检查、血液和淋巴系统病症、心脏病症、血管病症、一般病症和施用部位病状、皮肤和皮下组织病症(例如皮疹或光过敏)、高血糖症、胃肠病症、血胆红素、AST或ALT水平、血清碱性磷酸酶、血清脂肪酶和/或血清淀粉酶(无症状的)血清肌酸、血清CK/CPK、ANC、血小板计数、ECGQTc间期、眼病症(例如视网膜病变、视力模糊、闪光、漂浮物)、听觉损伤以及其它血液学和非血液学毒性。

MTD被定义为不会在第一治疗周期中超过35％的治疗患者中引起医学上不可接受的DLT的最高组合药物剂量。因为几个组合可对应于这一定义，所以可用不同剂量的研究药物鉴别多于一个MTD。所应用的自适应贝叶斯方法提供不超过MTD的化合物A与抗体A的组合的估计。通常，MTD是具有最大靶向毒性可能性的测试剂量 (DLT率在16％-35％之间)。使用EWOC原则限制潜在下一剂量将超过MTD的风险(章节10.4.2)。

患者将在以下情况下停止研究：(a)自下一预定剂量的预期日期，化合物A的>连续21天和/或抗体A的多于2个剂量的剂量延迟，或(b)不良事件或异常实验室值。对由于不良事件或临床上显著的实验室问题而中断或永久停止治疗的任何患者进行持续4周至少每周一次随访。允许最多两个(2)剂量减少，并且在剂量减少之后，不允许剂量重新逐步增加。

入选和排除标准：

患者的入选标准是以下：

·年龄≥18岁

·患有以下的男性或女性患者：(a)具有肿瘤组织中的证实的体细胞KRAS-或BRAFV600突变的晚期实体瘤(包括但不限于结肠直肠癌(CRC)、胰腺癌和黑色素瘤以及其它晚期实体瘤)，或(b)转移性胰腺癌，不论KRAS或BRAFV600突变状态。在II期，这一标准修改如下：(a)仅对于组1来说—患有KRAS-突变的结肠直肠腺癌的患者，(b)仅对于组2来说—患有转移性胰腺癌(不论KRAS或BRAFV600突变状态的腺癌)的患者，以及(c)仅对于组3来说—患有突变BRAFV600黑色素瘤的患者。

·在标准疗法之后复发或进展的患者或根据研究者评估不存在标准抗癌疗法的患者。

·如通过RECIST v1.1.世界卫生组织(WHO)体力状态(PS)≤2所确定的可测量疾病。先前照射区域中的靶病变不应被选择，除非存在这类病变中的进展的明显证据。

·如由以下定义的足够的器官功能和实验室参数：绝对中性粒细 胞计数(ANC)≥1.5x 109/L；血红蛋白(Hgb)≥9g/dl；在第一治疗之前的21天内无输血的情况下，血小板(PLT)≥100x 109/L；如果存在肝转移，AST/SGOT和/或ALT/SGPT≤2.5x ULN(正常上限)或≤5x ULN；血清胆红素≤2x ULN；血清肌酸酐≤1.5x ULN或计算的或直接测量的CrCl≥50％LLN(正常下限)；阴性血清妊娠测试。

·从之前抗癌疗法(包括外科手术和放射疗法)的所有AE恢复至基线或至CTCAE级≤1，除脱发外。

·在所有绝经前妇女和在绝经开始之后<12个月的妇女中在开始研究之前的72小时内阴性血清妊娠(βhCG)测试。

患者的排除标准是以下：

·用任何MEK抑制剂或IGF1R抑制剂先前治疗。

·中心浆液性视网膜病变(CSR)、视网膜静脉阻塞(RVO)或视网膜退行性疾病的历史或当前证据

·具有针对单克隆抗体的严重输液反应的已知历史的患者

·具有原发性CNS肿瘤或CNS肿瘤介入的患者，除非患者患有转移性CNS肿瘤并且满足以下附加标准：(a)从先前治疗完成(包括放射和/或外科手术)4周，(b)在研究开始时相对于CNS肿瘤临床上稳定的，(c)未在接受类固醇治疗，以及(d)未在接受抗惊厥药物(针对脑转移的开始的)。

·在以下时间范围内已接受先前全身抗癌治疗的患者：(a)在开始研究治疗之前比用于所述治疗的周期长度(例如对于亚硝基脲、丝裂霉素-C来说6周)短的一段时期内的循环化疗，和(b)在开始研究治疗之前的为≤5T1/2或≤4周(以较短者为准)的一段时期内的生物疗法(例如抗体)、连续或间歇小分子治疗剂或任何其它研究性药剂。

·在开始研究药物之前已经接受放射疗法≤4周、还未从这种疗法的副作用恢复和/或≥30％的骨髓进行辐射处理的患者。

·在开始研究治疗之前已经历大手术≤4周或还未从这种手术的副作用恢复的患者。

·在招募之前的任何时间需要全剂量抗凝治疗的血栓栓塞事件的历史

·临床上显著的心脏疾病或受损的心脏功能。

需要胰岛素治疗和/或具有临床病征或具有空腹血糖>160mg/dL(8.9mmol/L)的患有糖尿病的患者。

·具有周围神经病变CTCAE级≥2的患者。

·具有腹泻CTCAE级≥2的患者。

·患有急性或慢性胰腺炎的患者。

·患有外部胆汁引流的患者。

·由于安全性关切或与临床研究程序的顺应性而在研究者的判断中将禁忌患者参与临床研究的任何其它疾患，例如感染/炎症、肠梗阻、不能服用口服药物、社会/心理并发症。

·可显著改变口服化合物A的吸收的受损的GI功能或GI疾病(例如溃疡性疾病、不受控制的恶心、呕吐、腹泻、吸收不良综合征或小肠切除)。

·在开始研究药物之前用造血集落刺激生长因子(例如G-CSF、GM-CSF、M-CSF)治疗≤2周的患者。允许促红细胞生成素或达贝泊汀，只要它在开始研究招募之前至少2周已开始。

·在开始研究药物之前已接受全身皮质类固醇≤2周或还未从 这种治疗的副作用完全恢复的患者。

·在2年内另一恶性肿瘤的历史，除了治愈的皮肤基底细胞癌或切除的宫颈原位癌。

·已知HIV阳性血清学、活动性乙型肝炎和/或活动性丙型肝炎感染。

·怀孕或哺乳(泌乳)妇女，其中妊娠被定义为通过阳性hCG实验室测试(>5mIU/mL)证实的在受孕之后直到怀孕终止的女性的状态。

·具有生育潜力的妇女(其被定义为生理上能够变得怀孕的所有女性)不允许参与这一研究，除非她们在整个研究过程和研究药物停止之后持续30天使用高效避孕方法。

功效研究

在MTD/RP2D声明之后，患者被招募在三个II期组中以便评估所述组合的功效：(a)组1由患有KRAS-突变的结肠直肠腺癌的患者组成，(b)组2由患有转移性胰腺癌的患者组成，以及(c)组3由患有突变的BRAF^V600黑色素瘤的患者组成。大约20至30个患者招募在组1、2以及3中的每个中。

向患者施用适合剂量的如剂量递增Ib期研究中所定义的组合物A与抗体A的组合。

所施用的化合物A与抗体A的组合的功效通过比较从基线/筛选的肿瘤进展来评估。在基线/筛选通过放射学技术(例如CT或MRI成像)或物理检查(如皮下结节和可测量的皮肤病变)来评估肿瘤病变的所有潜在部位。测量方法是按照实体瘤RECIST 1.1版标准。在研究中招募的同时，在以下时间进行随访肿瘤评估：在完成6周治疗(周期2，第15天)、10周治疗(周期3，第15天)、16周治疗(周期5，第1天)、22周治疗(周期6，第15天)、28周治疗(周期14，第1天)之 后并且在其之后每12周(每第3周期的开始)和在治疗访问结束时。

患者进行治疗直到疾病进展、不可接受的毒性发展或收回知情同意书，以先发生者为准。对所有患者进行随访—至少，患者必须在研究治疗的最后一次剂量之后30天完成安全性随访评估。对在停止研究治疗时无进展的患者针对疾病状态进行放射学跟踪并且对II期患者针对存活进行跟踪。所述研究在用所述组合治疗的最后一个患者的随访期完成时结束。然而，所述组合的安全性和功效是用在研究结束之前获得的临床试验数据进行评估。

实施例3.化合物A与抗体A的组合对KRAS突变的胰腺癌细胞系的增殖的作用

进行细胞增殖测定以便研究化合物A与抗体A的组合对KRAS突变的细胞系Miapaca-2和AsPC-1的胰岛素样生长因子1(IGF1)诱导的增殖的活性。为了以非偏移方式评价组合作用，并且鉴别不同浓度下的协同作用，使用“剂量矩阵”方案(在以下详细描述的)来进行所述研究。以下所列出的这些实验的结果证明当与独自作用的每种药剂相比时，化合物A与抗体A的组合在不存在IGF1的情况下协同地抑制Miapaca-2和AsPC-1的IGF1-诱导的增殖。

化合物溶液的制备

将化合物A(10mM)以等分部分储存在-20℃下。将抗体A(0.2mM于1％BSA中)以等分部分储存在4℃下。将胰岛素样生长因子-1(IGF1；R&D系统，目录号291-G1)以100ug/mL在无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)中进行重构。

细胞培养

将KRAS突变体，胰腺癌细胞系Miapaca-2和AsPC-1如由供应商所建议的培养在DMEM培养基(ATCC目录号30-2002)和RPMI-1640(ATCC目录号30-2001)加10％胎牛血清(FBS；Invitrogen 目录号10099-141)中。将细胞使用标准细胞培养技术培养在T-150烧瓶中并且在达到80％汇合之后分裂。TryPLE Express(Invitrogen#12604-013，无酚红)用于所有细胞解离。用ViCell计数器(Beckman-Coulture)使用Trypan染料排除法测量细胞计数和存活力。使用PCR检测方法(www.radil.missouri.edu)，细胞被确定为不含支原体。

细胞存活力测定和细胞增殖测定

将Miapaca-2和AsPC-1细胞使用TryPLE Express进行胰蛋白酶化并且一式三份接种(1200个细胞/孔)在透明底384孔黑色板(Greiner)上(于培养基中30μL/孔)。使细胞附着过夜，然后在存在或不存在IGF1的情况下与不同浓度的抑制剂或药剂组合(10μL/孔)一起孵育120小时。使用(CTG)发光细胞存活力测定(Promega)通过测量细胞ATP含量来确定细胞存活力。将每种单一药剂和组合治疗与对照或用等效体积的培养基处理的细胞进行比较。将等体积的CTG试剂在化合物处理结束时添加至各孔中并且将发光记录在Envision板读数器(Perkin Elmer)上。相对于未处理的(对照)细胞计算减少的和增强的发光信号值(反应)。

用于计算化合物A与抗体A的组合的功效的方法

为了以非偏移方式评价化合物A与抗体A的抗增殖活性，以及鉴别不同浓度下的协同作用，使用“剂量矩阵”进行所述研究。这种剂量矩阵使用连续稀释的单一药剂(例如，化合物A和抗体A)的不同排列。在组合测定中，药剂被同时应用并且在存在或不存在IGF1的情况下进行评估。使化合物A进行7个剂量3倍连续稀释，其中高剂量为2.6μM并且低剂量为约3.5nM。使抗体A进行6个剂量3倍连续稀释，其中高剂量为566nM并且低剂量为约2.3nM。

通过针对药物自身剂量添加参考模型比较来自组合的反应与独自作用的药剂的反应来计算化合物A与抗体A的协同相互作用(使用 Chalice软件[CombinatoRx,CambridgeMA]进行分析)。用组合指数(CI)数字上评估与剂量添加的偏差，所述组合指数定量组合作用的总体强度。这一计算(实质上体积得分)是如下：V_HSA＝Σ_X,Y lnf_X lnf_Y(I_数据–I_HSA)。CI在数据与最高单药剂表面之间进行计算，并且针对单药剂稀释因子进行标准化(参见例如Lehar J等人(2009),“Synergistic drug combinations tend to improvetherapeutically relevant selectivity”,Nature Biotechnology 27:659-66(2009))

所有数据评价和图表生成是使用Microsoft Excel软件和Chalice软件来进行。

结果

在剂量矩阵的每种条件下IGF1诱导Miapaca-2和AsPC-1细胞增殖的抑制百分比在图1中列出。化合物A在存在和不存在IGF1的两种情况下均展示出浓度依赖性抗增殖活性，并且添加IGF1似乎轻微地抑制化合物A的单一药剂活性。抗体A在存在或不存在IGF1的情况下几乎是完全无活性的。当在不存在IGF1的情况下应用于Miapaca-2细胞时化合物A与抗体A的组合表现出协同作用，如通过由每种试剂独自表现出的细胞增殖的抑制中的差异所证明。当288nM-2.6μM化合物A与189nM–566nM抗体A组合时观察到生长抑制的增强(参见图1)。相比之下，在存在IGF1的情况下，没有观察到协同作用或增强的生长抑制。

这些数据证明化合物A与抗体A的组合在不存在IGF1信号传导的情况下协同地抑制KRAS突变的胰腺癌的生长。因此，化合物A与抗体A的组合代表用于KRAS突变的胰腺癌的改进的治疗。

Claims (21)

1.一种药物组合，其包含：

a)化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A是6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺；以及

b)抗体A，其中抗体A是特异性结合胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)的抗体，其中所述抗体包含分别在SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2中列出的重链氨基酸序列和轻链氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的药物组合，其用于治疗有需要的受试者中的癌症，其中所述癌症是对作为单一疗法的EGFR抑制剂、IGF1R抑制剂或BRAF抑制剂的治疗抗性或难治的癌症。

3.根据权利要求2所述的药物组合，其中所述癌症选自由以下各项组成的组：肺癌、骨癌、皮肤癌、头颈癌、子宫癌、中枢神经系统(CNS)癌症、卵巢癌、肛门区癌症、胃癌、乳腺癌、黑色素瘤、结肠直肠癌、睾丸癌、输卵管癌、阴道癌、外阴癌、食道癌、小肠癌、内分泌系统癌症、软组织肉瘤、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、儿童期实体瘤、膀胱癌、肾或输尿管癌、AIDS-相关癌症、基底细胞癌、肝外胆管癌、脑肿瘤、类癌肿瘤、宫颈癌、急性淋巴细胞性白血病、急性粒细胞性白血病、尤因氏家族肿瘤、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、胆囊癌、妊娠滋养细胞肿瘤、毛细胞白血病、肝细胞癌、卡波济氏肉瘤、淋巴瘤、骨/骨肉瘤的恶性纤维性组织细胞瘤、间皮瘤、多发性内分泌腺瘤形成综合征、多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤、蕈样真菌病、骨髓增生异常/骨髓增生性疾病、鼻腔和鼻旁窦癌症、鼻咽癌、成神经细胞瘤、嗜铬细胞瘤、胸膜肺母细胞瘤、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、塞扎里综合征、鳞状细胞癌、以及胸腺瘤。

4.根据权利要求2所述的药物组合，其中所述癌症选自由结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌以及黑色素瘤组成的组。

5.根据权利要求4所述的药物组合，其中所述癌症为胰腺癌。

6.根据权利要求5所述的药物组合，其中所述胰腺癌是局部晚期胰腺癌。

7.根据权利要求5所述的药物组合，其中所述胰腺癌是KRAS-突变的胰腺癌。

8.根据权利要求2所述的药物组合，其中所述癌症选自由以下各项组成的组：CMML、胰腺癌、皮肤或眼内黑色素瘤、何杰金氏病、骨肉瘤/恶性纤维组织细胞瘤骨癌、支气管腺瘤/类癌瘤、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、慢性骨髓增生性病症、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、卵巢上皮癌、卵巢生殖细胞肿瘤、卵巢低恶性潜能肿瘤、非黑色素瘤皮肤癌、以及梅克尔细胞皮肤细胞癌。

9.治疗有效量的化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A用于制备治疗癌症的药物中的用途，其中化合物A是6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺和其中抗体A是特异性结合胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)的抗体、其中所述抗体包含分别在SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2中列出的重链氨基酸序列和轻链氨基酸序列。

10.如权利要求9所述的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A是呈单一制剂或单位剂型。

11.如权利要求9所述的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和抗体A是呈分开的制剂或单位剂型。

12.如权利要求9所述的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和/或抗体A同时施用。

13.如权利要求9所述的用途，其中化合物A或其药学上可接受的盐和/或抗体A在不同时间施用。

14.如权利要求9-13中任一项所述的用途，其中所述癌症是如权利要求3至8中所鉴别的癌症。

15.如权利要求9-13中任一项所述的用途，其中所述癌症是用EGFR抑制剂、IGF1R抑制剂或BRAF抑制剂的治疗抗性或难治的。

16.根据权利要求1所述的药物组合用于制造用以治疗癌症的药物制剂或药剂的用途。

17.一种药物组合物，其包含：

化合物A或其药学上可接受的盐，其中化合物A是6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(2-羟基乙氧基)-酰胺；

抗体A，其中抗体A是特异性结合胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)的抗体、其中所述抗体包含分别在SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2中列出的重链氨基酸序列和轻链氨基酸序列；以及

任选地一种或多种药学上可接受的载体。

18.如权利要求9-13或16中任一项所述的用途，其中化合物A以15与60mg之间的剂量施用。

19.如权利要求9-13或16中任一项所述的用途，其中抗体A以9与20mg/kg之间的剂量施用。

20.根据权利要求3所述的药物组合，其中所述癌症是脑癌，选自小脑星形细胞瘤、大脑星形细胞瘤/恶性神经胶质瘤、室管膜瘤、和成神经管细胞瘤。

21.根据权利要求20所述的药物组合，其中所述恶性神经胶质瘤选自儿童脑干神经胶质瘤、儿童视通路神经胶质瘤和下丘脑神经胶质瘤。