CN104459104B - 一种显微镜检测古代丝织品的方法 - Google Patents

一种显微镜检测古代丝织品的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104459104B
CN104459104B CN201410846466.3A CN201410846466A CN104459104B CN 104459104 B CN104459104 B CN 104459104B CN 201410846466 A CN201410846466 A CN 201410846466A CN 104459104 B CN104459104 B CN 104459104B
Authority
CN
China
Prior art keywords
iii
solution
historical relic
rabbit
wash
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201410846466.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104459104A (zh
Inventor
刘苗苗
刘建军
胡智文
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University of Technology ZJUT
Original Assignee
Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University of Technology ZJUT filed Critical Zhejiang University of Technology ZJUT
Priority to CN201410846466.3A priority Critical patent/CN104459104B/zh
Publication of CN104459104A publication Critical patent/CN104459104A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104459104B publication Critical patent/CN104459104B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6803—General methods of protein analysis not limited to specific proteins or families of proteins

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种显微镜检测古代丝织品的方法，先将兔抗丝素蛋白多克隆抗体浸渍于文物样表面，洗涤干净后，加入胶体金标记的山羊抗兔IgG（H+L）抗体，形成抗原-一抗-二抗复合物，然后洗涤干净将文物样放在显微镜下观察。可根据样品表面有没有呈现红色进行定性分析。本发明的有益成果是：采用免疫胶体金技术对古代丝织品进行检测，一方面，灵敏度高，操作简单。另一方面能够避免来自其它蛋白质的干扰，特异性强。与现有技术相比，本发明成本低，结果直观，更适合于考古分析。

Description

一种显微镜检测古代丝织品的方法
技术领域
本发明属于古代丝织品的检测领域，尤其涉及一种显微镜检测古代丝织品的方法。
背景技术
丝绸是中国民族的宝贵文化，但近年来，关于丝绸的起源却众说纷纭，因此如何采用科学的手段确定丝绸是中国的原创成了燃眉之急。丝绸容易受到外界环境的影响而发生分子链的断裂，使之劣化降解，面目全非。目前对丝织品检测主要是质谱光谱检测法，但是，由于杂质的干扰，后期谱图解析困难，不能对结果进行直观的判定。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：针对上述现有技术存在的问题提供一种直观的，快捷的检测方法。
为此采用取的技术方案是：一种显微镜检测古代丝织品的方法，其特征在于采用步骤如下：
A)PBS7.4溶液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO41.42g，用800ml蒸馏水溶解并定容至1000ml，调节pH至7.4；
B)从文物样里面抽取三根单纤，分别放置于打孔皿中，标记为I，II，III；用pH=7.4的PBS缓冲溶液进行洗涤，保证表面附着物洗涤干净；分别向I中加入80-120μL用PBS7.4溶液稀释10-50倍的兔抗丝素蛋白多克隆抗体；II，III中加入80-120μLpH=7.4的PBS溶液，然后放置于4℃冰箱中过夜；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次；
C)分别向I，II中加入80-120μL用PBS7.4溶液稀释100-400倍稀释的胶体金标记山羊抗兔IgG抗体，III中加入80-120μLpH=7.4的PBS溶液；然后分别将I，II，III放置于有湿毛巾垫着的盒子中，37℃孵育1h；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次，然后采用盖玻片封片；
D)将I，II，III放置于显微镜下进行观察；比较测得的结果：II，III颜色未发生变化，而I呈现较亮的红色，说明文物样与兔抗丝素蛋白抗体发生了特异性结合，证明文物样为丝织品。
本发明先将兔抗丝素蛋白多克隆抗体浸渍于文物样表面，洗涤干净后，加入胶体金标记的山羊抗兔IgG抗体，形成抗原-一抗-二抗复合物，然后洗涤干净将文物样放在显微镜下观察。可根据样品表面有没有呈现红色进行定性分析。
本发明的有益成果是：1本发明采用免疫胶体金技术对古代丝织品进行检测，一方面，灵敏度高，操作简单。另一方面能够避免来自其它蛋白质的干扰，特异性强。2与现有技术相比，本发明成本低，结果直观，更适合于考古分析。
具体实施方式
实施例1采用步骤如下：
A)PBS7.4溶液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO41.42g，用800ml蒸馏水溶解并定容至1000ml，调节pH至7.4；
B)从文物样里面抽取三根单纤，分别放置于打孔皿中，标记为I，II，III；用pH=7.4的PBS缓冲溶液进行洗涤，保证表面附着物洗涤干净；分别向I中加入80μL用PBS7.4溶液稀释10倍的兔抗丝素蛋白多克隆抗体；II，III中加入80μLpH=7.4的PBS溶液，然后放置于4℃冰箱中过夜；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次；
C)分别向I，II中加入80μL用PBS7.4溶液稀释100倍稀释的胶体金标记山羊抗兔IgG抗体，III中加入80μLpH=7.4的PBS溶液；然后分别将I，II，III放置于有湿毛巾垫着的盒子中，37℃孵育1h；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次，然后采用盖玻片封片；
D)将I，II，III放置于显微镜下进行观察；比较测得的结果：II，III颜色未发生变化，而I呈现较亮的红色，说明文物样与兔抗丝素蛋白抗体发生了特异性结合，证明文物样为丝织品。
实施例2采用步骤如下：
A)PBS7.4溶液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO41.42g，用800ml蒸馏水溶解并定容至1000ml，调节pH至7.4；
B)从文物样里面抽取三根单纤，分别放置于打孔皿中，标记为I，II，III；用pH=7.4的PBS缓冲溶液进行洗涤，保证表面附着物洗涤干净；分别向I中加入100μL用PBS7.4溶液稀释25倍的兔抗丝素蛋白多克隆抗体；II，III中加入100μLpH=7.4的PBS溶液，然后放置于4℃冰箱中过夜；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次；
C)分别向I，II中加入100μL用PBS7.4溶液稀释200倍稀释的胶体金标记山羊抗兔IgG抗体，III中加入100μLpH=7.4的PBS溶液；然后分别将I，II，III放置于有湿毛巾垫着的盒子中，37℃孵育1h；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次，然后采用盖玻片封片；
D)将I，II，III放置于显微镜下进行观察；比较测得的结果：II，III颜色未发生变化，而I呈现较亮的红色，说明文物样与兔抗丝素蛋白抗体发生了特异性结合，证明文物样为丝织品。
实施例3采用步骤如下：
A)PBS7.4溶液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO41.42g，用800ml蒸馏水溶解并定容至1000ml，调节pH至7.4；
B)从文物样里面抽取三根单纤，分别放置于打孔皿中，标记为I，II，III；用pH=7.4的PBS缓冲溶液进行洗涤，保证表面附着物洗涤干净；分别向I中加入120μL用PBS7.4溶液稀释50倍的兔抗丝素蛋白多克隆抗体；II，III中加入120μLpH=7.4的PBS溶液，然后放置于4℃冰箱中过夜；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次；
C)分别向I，II中加入120μL用PBS7.4溶液稀释400倍稀释的胶体金标记山羊抗兔IgG抗体，III中加入120μLpH=7.4的PBS溶液；然后分别将I，II，III放置于有湿毛巾垫着的盒子中，37℃孵育1h；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次，然后采用盖玻片封片；
D)将I，II，III放置于显微镜下进行观察；比较测得的结果：II，III颜色未发生变化，而I呈现较亮的红色，说明文物样与兔抗丝素蛋白抗体发生了特异性结合，证明文物样为丝织品。

Claims (1)

1.一种显微镜检测古代丝织品的方法，其特征在于采用步骤如下：
A)PBS7.4溶液配制：KCl0.2g，KH2PO40.27g，NaCl8.0g，Na2HPO41.42g，用800ml蒸馏水溶解并定容至1000ml，调节pH至7.4；
B)从文物样里面抽取三根单纤，分别放置于打孔皿中，标记为I，II，III；用pH=7.4的PBS缓冲溶液进行洗涤，保证表面附着物洗涤干净；分别向I中加入80-120μL用PBS7.4溶液稀释10-50倍的兔抗丝素蛋白多克隆抗体；II，III中加入80-120μLpH=7.4的PBS溶液，然后放置于4℃冰箱中过夜；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次；
C)分别向I，II中加入80-120μL用PBS7.4溶液稀释100-400倍稀释的胶体金标记山羊抗兔IgG抗体，III中加入80-120μLpH=7.4的PBS溶液；然后分别将I，II，III放置于有湿毛巾垫着的盒子中，37℃孵育1h；然后分别加入2mlpH=7.4的PBS溶液于打孔皿中，浸泡5min进行洗涤，洗涤三次，然后采用盖玻片封片；
D)将I，II，III放置于显微镜下进行观察；比较测得的结果：II，III颜色未发生变化，而I呈现较亮的红色，说明文物样与兔抗丝素蛋白抗体发生了特异性结合，证明文物样为丝织品。
CN201410846466.3A 2014-12-31 2014-12-31 一种显微镜检测古代丝织品的方法 Expired - Fee Related CN104459104B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410846466.3A CN104459104B (zh) 2014-12-31 2014-12-31 一种显微镜检测古代丝织品的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410846466.3A CN104459104B (zh) 2014-12-31 2014-12-31 一种显微镜检测古代丝织品的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104459104A CN104459104A (zh) 2015-03-25
CN104459104B true CN104459104B (zh) 2016-02-17

Family

ID=52905492

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410846466.3A Expired - Fee Related CN104459104B (zh) 2014-12-31 2014-12-31 一种显微镜检测古代丝织品的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104459104B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105372420A (zh) * 2015-11-12 2016-03-02 浙江理工大学 一种利用显微镜检测古代羊毛织品的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0543600A (ja) * 1991-08-08 1993-02-23 Kanebo Ltd 抗体または抗原固定化絹フイブロイン膜および免疫測定用センサー
JPH0572205A (ja) * 1991-09-14 1993-03-23 Kanebo Ltd 免疫測定方法及び装置
CN103048458A (zh) * 2012-11-29 2013-04-17 大连大学 利用单克隆抗体快速检测C-Myc的ELISA法
CN103509107A (zh) * 2013-08-07 2014-01-15 浙江大学 利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法
CN103509108A (zh) * 2013-08-07 2014-01-15 浙江大学 利用特征十二多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法
CN104059131A (zh) * 2014-07-04 2014-09-24 丝科普乐（北京）生物科技有限公司 抗丝素蛋白多克隆抗体及其制备方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0543600A (ja) * 1991-08-08 1993-02-23 Kanebo Ltd 抗体または抗原固定化絹フイブロイン膜および免疫測定用センサー
JPH0572205A (ja) * 1991-09-14 1993-03-23 Kanebo Ltd 免疫測定方法及び装置
CN103048458A (zh) * 2012-11-29 2013-04-17 大连大学 利用单克隆抗体快速检测C-Myc的ELISA法
CN103509107A (zh) * 2013-08-07 2014-01-15 浙江大学 利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法
CN103509108A (zh) * 2013-08-07 2014-01-15 浙江大学 利用特征十二多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法
CN104059131A (zh) * 2014-07-04 2014-09-24 丝科普乐（北京）生物科技有限公司 抗丝素蛋白多克隆抗体及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
利用丝素蛋白抗体鉴定古代丝织品;郑秦等;《蚕业科学》;20140615;第40卷(第3期);520-526 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104459104A (zh) 2015-03-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104483478B (zh) 一种古代丝织品的检测方法
CN104459104B (zh) 一种显微镜检测古代丝织品的方法
EP2669927A3 (en) Inspection system for use with scanning electron microscope
WO2013011056A3 (en) Pathology biomarker assay
MX2011013538A (es) Monitoreo de carga de tambor.
MX2009003070A (es) Tratamiento enzimatico de textiles que utiliza un pectato liasa de bacillus subtilis.
MX2011013243A (es) Marcadores de riesgo para enfermedad cardiovascular.
WO2011143574A3 (en) Plasma biomarkers for diagnosis of alzheimer's disease
IN2015DN01052A (zh)
WO2011066248A3 (en) Method and apparatus for reducing condensate related defects in a glass manufacturing process
MX2016007123A (es) Metodos y reactivos para la evaluación de diabetes gestacional.
SA112330754B1 (ar) طريقة تشخيصية للكشف عن مرض قلبي وعائي
CN104406992B (zh) 一种透射电镜检测古代丝织品的方法
CN109215022A (zh) 验布方法、装置、终端设备、服务器、存储介质和系统
CN104483479A (zh) 一种斑点金免疫渗滤测定古代丝织品的方法
CN104502605A (zh) 检测犬弓形虫IgM抗体的ELISA试剂盒及其制备方法
CN105372420A (zh) 一种利用显微镜检测古代羊毛织品的方法
CN204214875U (zh) 可快速检测有效性的elisa试剂盒
RU2013126822A (ru) Способ диагностики реальной структуры кристаллов
CN103823444B (zh) 半导体设备的上下位机的通信方法和通信系统
GB201021623D0 (en) Detection of acute myeloid leukaemia
CN201441033U (zh) 新式眼镜盒
CN103184524A (zh) 一种去除单晶硅片指纹印及重油污的方法
DI BELLA et al. Foraminiferal assemblages in active volcanic areas: two study cases from Azores Archipelago (Atlantic Ocean) and Pantelleria Island (Mediterranean Sea)
CN103901176B (zh) 一种冻干即食海参的检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160217

Termination date: 20161231