CN104431313A - 一种池塘养殖营养液及其使用方法 - Google Patents
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Abstract
一种池塘养殖营养液，按照下述步骤进行制备：(1)以质量份数计，将质量含量为5-10％的竹子精华溶液600份、竹子干细胞100份混合后，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7天；(2)在步骤(1)得到的发酵混合物中再次混合质量含量为5-10％的莫兰或印茄精华溶液140份以及莫兰或印茄干细胞60份，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7-9天；(3)将质量含量为5-10％的布袋莲或浮萍精华溶液80份以及布袋莲或浮萍干细胞20份加入步骤(2)得到的混合物中，再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃下发酵6-8天；(4)将步骤(3)得到的发酵产物使用15000转/分的分散机进行分散2小时，最终产物即所述池塘养殖营养液。
Description
技术领域：
本发明属于池塘养殖技术领域，具体涉及一种池塘养殖营养液及其使用方法。
背景技术
目前，池塘养殖中鱼类、虾类的养殖多采用固态饵料进行养殖，如公布号为CN103583872A的中国专利公开了一种池塘混养鱼饲料，其特征在于是由下述重量份的原料制成：发酵豆粕30-40、米糠粕50-60、鱼粉80-90、肉骨粉15-20、石榴籽8-10、黄芪2-3、白芍1-2、菊花2-3、溪黄草1-2、山楂2-3、淡竹叶1-2、韭菜子1-2、柿叶1-3、榴莲核2-3、红景天1-3、陈皮1-2、蛋壳粉3-5、玉米蛋白粉8-10、膨润土1-1.5、当归油0.01-0.02、苹果醋2-3、绿茶4-6、豌豆粉3-4。以及公布号为CN103598444A的中国专利公开了一种罗非鱼饲料，该饲料包含以下重量份的组分：玉米45-55，小麦18-20，次粉10-12，玉米须10-12，碎米10-12，啤酒糟5-6，虾皮粉6-8，芹菜汁5-6，槐树叶8-10，鸡肝粉3-4，螺蛳粉4-5，金鱼藻粉5-6，面包屑10-12，食盐适量，诱食剂4-5，诱食剂由下列重量份的原料组成：薏仁油1-2，大麦苗粉1-2，丁葵草2-3，峨参叶2-3，黑皮根3-4，山楂12-14，黑木耳2-3，绞股蓝1-2，光刺兔唇花1-2，芝麻油30-35，面粉30-40；制备方法是将丁葵草、峨参叶、黑皮根、山楂、黑木耳、绞股蓝、光刺兔唇花加水煎煮1-2小时，过滤得煎液，浓缩成稠膏，药渣烘干后，粉碎，加入炒热的芝麻油中拌炒10-15分钟；最后，将所得的稠膏，药渣及其它剩余成分混合，制粒，即得。实践证明，上述两种已公开鱼类饲料的营养成分不高，对鱼类生长的促进效果有限，且不含有抗病成分，在鱼类、虾类抗病过程中仍需单独喷洒抗病药物，过程繁琐，导致养成成本仍然较高，仍需进一步改进。
发明内容
针对现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种池塘养殖营养液及其使用方法。
本发明采用如下技术方案：
一种池塘养殖营养液，所述池塘养殖营养液按照下述步骤进行制备：
(1)以质量份数计，将质量含量为5-10％的竹子精华溶液600份、竹子干细胞100份混合后，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7天；
(2)在步骤(1)得到的发酵混合物中再次混合质量含量为5-10％的莫兰或印茄精华溶液140份以及莫兰或印茄干细胞60份，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7-9天；
(3)将质量含量为5-10％的布袋莲或浮萍精华溶液80份以及布袋莲或浮萍干细胞20份加入步骤(2)得到的混合物中，再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃下发酵6-8天；
(4)将步骤(3)得到的发酵产物使用15000转/分的分散机进行分散2小时，最终产物即所述池塘养殖营养液。
在一种优选实施方式中，所述竹子干细胞的提取方法包括如下步骤：
(1)提取竹子干细胞：选择生长状况良好的竹子的树干、枝干，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将竹子的树干、枝干首先切割成长度10-20厘米的小块，然后将整理后的竹子原料放入在搅拌设备中粉碎成细末；
(2)将步骤(1)中粉碎制得的竹子细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度；
(3)形成层细胞的诱导：在整个培养过程中保持25±1摄氏度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在86±1左右，培养20-30天后，竹子内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎；
(4)将步骤(3)中形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、25±1度下培养，培养时间设定为20天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力；
(5)竹子干细胞的提取：首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时，再进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，在放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。
在一种优选实施方式中，所述莫兰或印茄干细胞的提取方法包括如下步骤：
(1)提取莫兰或印茄树木枝干的干细胞：选择生长状况良好的莫兰或印茄的树干，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将其切割成边长小于20厘米的方块，然后将所述方块放入在搅拌设备中粉碎成细末；
(2)将步骤(1)中粉碎制得的树干细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度；
(3)形成层细胞的诱导：在整个培养过程中保持35±1度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在90±1左右，培养15-25天后，树干内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎；
(4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、35±1度下培养，培养时间设定为16天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力；
(5)莫兰或印茄干细胞的提取：首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时，再进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，25-30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。
在一种优选实施方式中，所述固态培养基成分的组成为：硝酸钾1010mg/L，硫酸镁120mg/L，硫酸锰9.5mg/L，硫酸锌2mg/L，氯化钙113mg/L，硫酸铜0.023mg/L，碘化钾0.72mg/L，磷酸二氢钠130mg/L，氯化钴0.023mg/L，硼酸3.1mg/L，钼酸钠0.24mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L；肌醇452mg/L，盐酸噻胺(VB1)21mg/L，吡哆醇(VB6)1.9mg/L，尼克酸1.9mg/L，L-抗坏血酸110mg/L，柠檬酸114mg/L；光氨酸170mg/L，酪蛋白水解物510mg/L；蔗糖30.100mg/L；2，4-D2.5mg/L，赤霉素0.6mg/L；琼脂39.000mg/L；活性炭3000mg/L；磁化水 1升。
在一种优选实施方式中，所述液态培养基成分的组成：硝酸钾1010mg/L，硫酸镁120mg/L，硫酸锰9.5mg/L，硫酸锌2mg/L，氯化钙113mg/L，硫酸铜0.023mg/L，碘化钾0.72mg/L，磷酸二氢钠130mg/L，氯化钴0.023mg/L，硼酸3mg/L，钼酸钠0.24mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L，肌醇200mg/L，盐酸噻胺(VB1)21mg/L，吡哆醇(VB6)1.9mg/L，尼克酸1.9mg/L，L-抗坏血酸110mg/L，柠檬酸148mg/L，2，4-D2.5mg/L，赤霉素0.1mg/L，天冬氨酸134mg/L，精氨酸180mg/L，脯氨酸118mg/L，甘氨酸60mg/L，色氨酸80mg/L，蔗糖21.000mg/L，麦饭石2000mg/L，锗石2000mg/L，磁化水1升。
在一种优选实施方式中，布袋莲或浮萍干细胞的提取方法包括如下步骤：
(1)将布袋莲或浮萍用无菌水冲洗10分钟，洗净：
(2)制备固态培养基：硝酸钾2500mg/L，硫酸镁122mg/L，硫酸锰11mg/L，硫酸锌2.5mg/L，硫酸铜0.025mg/L，硫酸胺135mg/L；氯化钙112mg/L，碘化钾0.7mg/L，氯化钴0.025mg/L，磷酸二氢钠132mg/L，硼酸2.6mg/L，钼酸钠0.23mg/L，烟酸2.0mg/L，吡哆醇2.1mg/L，L-抗坏血酸53mg/L，柠檬酸78mg/L，L-天冬氨酸140mg/L，L-精氨酸180mg/L，甘氨酸75mg/L，脯氨酸120mg/L；a-萘乙酸2.2mg；蔗糖10.200mg/L；活性炭500mg/；琼脂3800mg/L；磁化水0.7升；
(3)形成层分离培养：将水生植物用小刀切碎后放进固态培养基中，在受控暗室内培养15天，培养温度25±1℃；随后将形成层细胞系用接种铲轻轻将其移入另一同样培养基培养器皿内，在放大培养20天，最后将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中，在暗室内用摇床旋转培养，在160rpm、25±1℃环境中培养，培养时间设定为20天；
所述液态培养基的成分为：硫酸钾995mg/L，磷酸氢钾160mg/L，硫酸镁185mg/L，硫酸锌9mg/L，硫酸锰22mg/L，硫酸铜0.25mg/L，氯化钙70mg/L，硝酸钙480mg/L，钼酸钠0.26mg/L，硼酸6.5mg/L，硝酸胺420mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐38mg/L，肌醇230mg/L，硫胺素22mg/L，烟酸2mg/L，吡哆醇2.5mg/L，L-抗坏血酸65mg/L，柠檬酸72mg/L，L-天冬氨酸140mg/L，L-精氨酸180mg/L，甘氨酸80mg/L，脯氨酸120mg/L，a-萘乙酸2.2mg/L；蔗糖31000mg/L；麦饭石颗粒60000mg/L，锗石颗粒60000mg/L，硒矿石颗粒主90000mg/L；磁化水0.7升；
(4)布袋莲或浮萍干细胞的分离：将液态培养基用1um过滤器过滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2-3小时，在进行经旋转式真空蒸发器，间接加热60度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，20-22小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。
在一种优选实施方式中，所述竹子精华溶液是通过将竹子的主干、枝干和叶子燃烧后，注入蒸馏水并发酵14-16天，经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％制得的溶液；所述莫兰、印茄精华溶液是通过将莫兰、印茄枝干用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵10-15天，然后经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％制得的溶液。
在一种优选实施方式中，所述布袋莲或浮萍精华溶液是通过将布袋莲或浮萍用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵12-15天，然后经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％制得的溶液。
在一种优选实施方式中，所述莫兰、印茄精华溶液是通过将莫兰、印茄枝干用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵10-15天，然后经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-8％制得的溶液。
本发明还涉及一种所述的池塘养殖营养液的使用方法，其中使用雨水或暴晒2天后的自来水将所述池塘养殖营养液以体积比1∶30进行稀释，然后以平均每20-25公斤鱼类或虾类饲料喷洒200-500mL的上述稀释后的营养液的方式进行喷洒，然后正常投喂。
本发明的池塘养殖营养液及其使用方法的技术效果是：该营养液使用过程中，只需要喷洒在固态饲料表面即可，然后随固态饲料一起投入池塘供鱼类、虾类取食，不但提高了原有固态饲料的营养含量，而且提高鱼类的抗病能力，对鱼类的成长速度和成活率均有显著提高。
具体实施方式：
本发明中的池塘养殖营养液制作主要包括以下几个步骤：
竹子干细胞的提取：
(1)提取竹子干细胞：首先，选择收集生长状况良好的竹子的树干、枝干或竹叶，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将竹子的树干或枝干首先切割成长度10-20厘米的小块，然后将整理后的竹子原料放入在搅拌设备中粉碎成细末。
(2)将步骤(1)中粉碎制得的竹子细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度。
其中，固态培养基成分的组成为：
硝酸钾1010mg/L，硫酸镁120mg/L，硫酸锰9.5mg/L，硫酸锌2mg/L，氯化钙113mg/L，硫酸铜0.023mg/L，碘化钾0.72mg/L，磷酸二氢钠130mg/L，氯化钴0.023mg/L，硼酸3.1mg/L，钼酸钠0.24mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L；肌醇452mg/L，盐酸噻胺(VB1)21mg/L，吡哆醇(VB6)1.9mg/L，尼克酸1.9mg/L，L-抗坏血酸110mg/L，柠檬酸114mg/L；光氨酸170mg/L，酪蛋白水解物510mg/L；蔗糖30.100mg/L；2，4-D2.5mg/L，赤霉素0.6mg/L；琼脂39.000mg/L；活性炭3000mg/L；磁化水1升。
(3)形成层细胞的诱导：在初始培养的4-5天内，可直观的观察到来自形成层细胞系的出现，并在14天后，通过去分化形成的无定形愈伤组织已开始从从内皮上下组织构成的形成层中被诱导。在整个培养过程中必须保持25±1度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在86±1左右。培养20-30天后，竹子内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎。
(4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、25±1度下培养，培养时间设定为20天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力。
通过在液态培养基中培养20天后，可以看到悬浮液培养时细胞系超过94％的细胞是以单细胞形式存在，而细胞系的形态特征存在大量的液泡，处在未分化状态，竹子干细胞已经充分分裂生长。通过观察发现，在液态培养基中使用小分子磁化活性水、添加了具有内含几十种天然微量元素的麦饭石含有锗元素的矿石对竹子干细胞的分裂和生长极为有效，小分子活性水能增强细胞活力，麦饭石、锗石中固含几十种天然的微量元素，经液流不间断的冲击而冲刷下来溶于培养液中，使培养后期的细胞系细胞群得到天然、安全和足够利用的微量元素的补充。
其中，液态培养基成分的组成：
硝酸钾1010mg/L，硫酸镁120mg/L，硫酸锰9.5mg/L，硫酸锌2mg/L，氯化钙113mg/L，硫酸铜0.023mg/L，碘化钾0.72mg/L，磷酸二氢钠130mg/L，氯化钴0.023mg/L，硼酸3mg/L，钼酸钠0.24mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L，肌醇200mg/L，盐酸噻胺(VB1)21mg/L，吡哆醇(VB6)1.9mg/L，尼克酸1.9mg/L，L-抗坏血酸110mg/L，柠檬酸148mg/L，2，4-D2.5mg/L，赤霉素0.1mg/L，天冬氨酸134mg/L，精氨酸180mg/L，脯氨酸118mg/L，甘氨酸60mg/L，色氨酸80mg/L，蔗糖21.000mg/L，麦饭石2000mg/L，锗石2000mg/L，磁化水1升。
(5)竹子干细胞的提取：
首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞、乙醇混合液经另一容器内快速搅拌3小时，在进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之一时取出，在放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用，即成为制作完成的竹子干细胞原料。
之所以采用植物干细胞来制作有机肥料，是因为植物干细胞是由多种植物及有机物营养，源经独特工艺超强发酵和长期熟化而成的，无毒、无害、无污染的活性微生物有机液体，不含任何化学物质，不含改造基因物质。含有效活菌富有益微生物菌群，活性有机物质及多种微量元素。而且竹子干细胞具有抗病、重生的功效，利于作物生长。
热带雨林树木如莫兰、印茄干细胞的提取：
(1)提取树木枝干的干细胞：首先，选择收集生长状况良好的热带雨林树木的树干，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将其数目切割成变长小于20厘米的方块，然后将所述方块放入在搅拌设备中粉碎成细末。
(2)将步骤(1)中粉碎制得的树干细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度。
其中，为了节约成本，简化工艺，固态培养基采用竹子干细胞提取过程中同样的培养基。
(3)形成层细胞的诱导：在初始培养的3-5天内，可观察到来自形成层细胞 系的出现，并在15天后，通过去分化形成的无定形愈伤组织已开始从从内皮上下组织构成的形成层中被诱导。在整个培养过程中必须保持35±1度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在90±1左右。培养15-25天后，树干内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎。
(4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、35±1度下培养，培养时间设定为16天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力。
通过在液态培养基中培养16天后，可以看到悬浮液培养时细胞系超过91％的细胞是以单细胞形式存在，而细胞系的形态特征存在大量的液泡，处在未分化状态，树干干细胞已经充分分裂生长。
其中，液态培养基成分同样适用竹子干细胞培养中使用的液态培养基。
(5)热带雨林树木干细胞的提取：
首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时，在进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之一时取出，再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，25-30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用，即成为制作完成的热带雨林树干干细胞原料。
热带雨林干细胞具有增加免疫力和自然抵抗力的功效。
水生植物如布袋莲或浮萍干细胞的提取：
(1)将水生植物用无菌水冲洗10分钟，洗净。
(2)制备固态培养基：硝酸钾2500mg/L，硫酸镁122mg/L，硫酸锰11mg/L，硫酸锌2.5mg/L，硫酸铜0.025mg/L，硫酸胺135mg/L。氯化钙112mg/L，碘化钾0.7mg/L，氯化钴0.025mg/L，磷酸二氢钠132mg/L，硼酸2.6mg/L，钼酸钠0.23mg/L，烟酸2.0mg/L，吡哆醇2.1mg/L，L-抗坏血酸53mg/L，柠檬酸78mg/L，L-天冬氨酸140mg/L，L-精氨酸180mg/L，甘氨酸75mg/L，脯氨酸120mg/L。a-萘乙酸2.2mg。蔗糖10.200mg/L。活性炭500mg/L。琼脂3800mg/L。磁化水0.7升。
(3)形成层分离培养：
将水生植物用小刀切碎后放进固态培养基中，在受控暗室内培养15天，培养温度25±1℃，随后将形成层细胞系用接种铲轻轻将其移入另一同样培养基培养器皿内，在放大培养20天，最后将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中，在暗室内用摇床旋转培养，在160rpm、25±1℃环境中培养，培养时间设定为20天。
所述液态培养基的成分为：硫酸钾995mg/L，磷酸氢钾160mg/L，硫酸镁185mg/L，硫酸锌9mg/L，硫酸锰22mg/L，硫酸铜0.25mg/L，氯化钙70mg/L，硝酸钙480mg/L，钼酸钠0.26mg/L，硼酸6.5mg/L，硝酸胺420mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐38mg/L，肌醇230mg/L，硫胺素22mg/L，烟酸2mg/L，吡哆醇2.5mg/L，L-抗坏血酸65mg/L，柠檬酸72mg/L，L-天冬氨酸140mg/L，L-精氨酸180mg/L，甘氨酸80mg/L，脯氨酸120mg/L，a-萘乙酸2.2mg/L。蔗糖31000mg/L。麦饭石颗粒60000mg/L，锗石颗粒60000mg/L，硒矿石颗粒主90000mg/L。磁化水0.7升。
(4)水生植物干细胞的分离：将液态培养基用1um过滤器过滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2-3小时，在进行经旋转式真空蒸发器，间接加热60度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之一时取出，再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，20-22小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用，即成为制作完成的水生植物干细胞原料。
水生植物干细胞可促进植物的快速生长。
竹子精华的制备：
将竹子的主干、枝干和叶子燃烧后，注入蒸馏水并发酵14-16天，发酵温度控制在35-45℃，然后用渣液分离器分离，随后经1um过滤器过滤，滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％蒸发完成，即为竹子精华溶液。
热带雨林树木如莫兰、印茄精华的制备：
将热带雨林树木如莫兰、印茄切割成变长小于20厘米的方块，随后用15000转/分的粉碎机将其粉碎，随后注入蒸馏水并发酵10-15天，发酵温度控制在40-45℃，然后经渣液分离器分离，随后经1um过滤器过滤，滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％蒸发完成，即为热带雨林树木精华 溶液。
水生植物如布袋莲或浮萍精华的制备：
将布袋莲或浮萍用15000转/分的粉碎机将其粉碎，随后注入蒸馏水并发酵12-15天，发酵温度控制在26-33℃，然后经渣液分离器分离，随后经1um过滤器过滤，滤液间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％蒸发完成，即为水生植物精华溶液。
最后用上述已制备完成的干细胞和精华溶液来进行植物有机肥料的制备(均按质量份数计)：
(1)以质量份数计，将质量含量为5-10％的竹子精华溶液600份、竹子干细胞100份混合后，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7天；
(2)在步骤(1)得到的发酵混合物中再次混合质量含量为5-10％的莫兰或印茄精华溶液140份以及莫兰或印茄干细胞60份，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7天；
(3)将质量含量为5-10％的布袋莲或浮萍精华溶液80份以及布袋莲或浮萍干细胞20份加入步骤(2)得到的混合物中，再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃下发酵7天；
(4)将步骤(3)得到的发酵产物使用15000转/分的分散机进行分散2小时，最终产物即所述池塘养殖营养液。
本发明的池塘养殖营养液在使用过程中，使用前先摇匀产品，然后使用雨水或暴晒2天后的自来水以体积比1∶30进行稀释，然后喷洒至养殖用池塘表面，喷洒均匀后，搁置7天，可有效杀死池塘表面的微生物，利于随后池塘的养殖。
鱼类、虾类养殖过程中，将上述稀释后的池塘养殖营养液，以平均20-25公斤固态饲料喷洒200-500mL的上述稀释后的营养液的方式进行喷洒，然后正常投喂。
为了验证本发明的池塘养殖营养液的营养、抗病性能，选择两块同样大小的池塘，池塘养殖前，一片池塘采用池塘内部喷洒营养液，然后搁置七天后，另一片不喷洒。养殖过程中，两块池塘分别投入同样大小和数量的鲤鱼鱼苗，并在第一块池塘中采用喷洒过营养液的鲤鱼饲料进行投喂，另一块正常投喂。养殖3-6个月后，第一块池塘中鲤鱼成活率比没有采用营养液的另一块池塘中高约27％， 且第一块池塘中鲤鱼重量比另一块池塘中高约16％，可见，本发明的营养液可显著提高现有固态饲料的营养成分，并可具有抗病、提高鱼类成活率的显著性能，适于大量推广。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.一种池塘养殖营养液，其特征在于，所述池塘养殖营养液按照下述步骤进行制备：
(1)以质量份数计，将质量含量为5-10％的竹子精华溶液600份、竹子干细胞100份混合后，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7天；
(2)在步骤(1)得到的发酵混合物中再次混合质量含量为5-10％的莫兰或印茄精华溶液140份以及莫兰或印茄干细胞60份，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃条件下发酵7-9天；
(3)将质量含量为5-10％的布袋莲或浮萍精华溶液80份以及布袋莲或浮萍干细胞20份加入步骤(2)得到的混合物中，再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃下发酵6-8天；
(4)将步骤(3)得到的发酵产物使用15000转/分的分散机进行分散2小时，最终产物即所述池塘养殖营养液。
2.如权利要求1所述的池塘养殖营养液，其特征在于：所述竹子干细胞的提取方法包括如下步骤：
(1)提取竹子干细胞：选择生长状况良好的竹子的树干、枝干，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将竹子的树干、枝干首先切割成长度10-20厘米的小块，然后将整理后的竹子原料放入在搅拌设备中粉碎成细末；
(2)将步骤(1)中粉碎制得的竹子细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度；
(3)形成层细胞的诱导：在整个培养过程中保持25±1摄氏度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在86±1左右，培养20-30天后，竹子内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎；
(4)将步骤(3)中形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、25±1度下培养，培养时间设定为20天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力；
(5)竹子干细胞的提取：首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速 搅拌3小时，再进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，在放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。
3.如权利要求1所述的池塘养殖营养液，其特征在于：所述莫兰或印茄干细胞的提取方法包括如下步骤：
(1)提取莫兰或印茄树木枝干的干细胞：选择生长状况良好的莫兰或印茄的树干，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将其切割成边长小于20厘米的方块，然后将所述方块放入在搅拌设备中粉碎成细末；
(2)将步骤(1)中粉碎制得的树干细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度；
(3)形成层细胞的诱导：在整个培养过程中保持35±1度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在90±1左右，培养15-25天后，树干内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎；
(4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、35±1度下培养，培养时间设定为16天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力；
(5)莫兰或印茄干细胞的提取：首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时，再进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，25-30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。
4.如权利要求2或3所述的池塘养殖营养液，其特征在于：所述固态培养基成分的组成为：硝酸钾1010mg/L，硫酸镁120mg/L，硫酸锰9.5mg/L，硫酸锌2mg/L，氯化钙113mg/L，硫酸铜0.023mg/L，碘化钾0.72mg/L，磷酸二氢钠130mg/L，氯化钴0.023mg/L，硼酸3.1mg/L，钼酸钠0.24mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L；肌醇452mg/L，盐酸噻胺(VB1)21mg/L，吡哆醇(VB6)1.9mg/L，尼克酸1.9mg/L，L-抗坏血酸110mg/L，柠檬酸114mg/L；光氨酸170mg/L，酪蛋白水解物510mg/L；蔗糖30.100mg/L；2，4-D2.5mg/L，赤霉素0.6mg/L；琼脂39.000mg/L；活性炭3000mg/L；磁化水1升。
5.如权利要求2或3所述的池塘养殖营养液，其特征在于：所述液态培养基成分的组成：硝酸钾1010mg/L，硫酸镁120mg/L，硫酸锰9.5mg/L，硫酸锌2mg/L，氯化钙113mg/L，硫酸铜0.023mg/L，碘化钾0.72mg/L，磷酸二氢钠130mg/L，氯化钴0.023mg/L，硼酸3mg/L，钼酸钠0.24mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐37mg/L，肌醇200mg/L，盐酸噻胺(VB1)21mg/L，吡哆醇(VB6)1.9mg/L，尼克酸1.9mg/L，L-抗坏血酸110mg/L，柠檬酸148mg/L，2，4-D2.5mg/L，赤霉素0.1mg/L，天冬氨酸134mg/L，精氨酸180mg/L，脯氨酸118mg/L，甘氨酸60mg/L，色氨酸80mg/L，蔗糖21.000mg/L，麦饭石2000mg/L，锗石2000mg/L，磁化水1升。
6.如权利要求1所述的池塘养殖营养液，其特征在于：布袋莲或浮萍干细胞的提取方法包括如下步骤：
(1)将布袋莲或浮萍用无菌水冲洗10分钟，洗净；
(2)制备固态培养基：硝酸钾2500mg/L，硫酸镁122mg/L，硫酸锰11mg/L，硫酸锌2.5mg/L，硫酸铜0.025mg/L，硫酸胺135mg/L；氯化钙112mg/L，碘化钾0.7mg/L，氯化钴0.025mg/L，磷酸二氢钠132mg/L，硼酸2.6mg/L，钼酸钠0.23mg/L，烟酸2.0mg/L，吡哆醇2.1mg/L，L-抗坏血酸53mg/L，柠檬酸78mg/L，L-天冬氨酸140mg/L，L-精氨酸180mg/L，甘氨酸75mg/L，脯氨酸120mg/L；a-萘乙酸2.2mg；蔗糖10.200mg/L；活性炭500mg/；琼脂3800mg/L；磁化水0.7升；
(3)形成层分离培养：将水生植物用小刀切碎后放进固态培养基中，在受控暗室内培养15天，培养温度25±1℃；随后将形成层细胞系用接种铲轻轻将其移入另一同样培养基培养器皿内，在放大培养20天，最后将其放大培养的细胞系群体移入液态培养基中，在暗室内用摇床旋转培养，在160rpm、25±1℃环境中培养，培养时间设定为20天；
所述液态培养基的成分为：硫酸钾995mg/L，磷酸氢钾160mg/L，硫酸镁185mg/L，硫酸锌9mg/L，硫酸锰22mg/L，硫酸铜0.25mg/L，氯化钙70mg/L，硝酸钙480mg/L，钼酸钠0.26mg/L，硼酸6.5mg/L，硝酸胺420mg/L，乙二胺四乙酸铁钠盐38mg/L，肌醇230mg/L，硫胺素22mg/L，烟酸2mg/L，吡哆醇2.5mg/L，L-抗坏血酸65mg/L，柠檬酸72mg/L，L-天冬氨酸140mg/L，L-精氨酸180mg/L，甘氨酸80mg/L，脯氨酸120mg/L，a-萘乙酸2.2mg/L；蔗糖31000mg/L；麦饭石颗粒60000mg/L，锗石颗粒60000mg/L，硒矿石颗粒主90000mg/L；磁化水0.7升；
(4)布袋莲或浮萍干细胞的分离：将液态培养基用1um过滤器过滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌2-3小时，在进行经旋转式真空蒸发器，间接加热60度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，20-22小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。
7.如权利要求1所述的池塘养殖营养液，其特征在于：所述竹子精华溶液是通过将竹子的主干、枝干和叶子燃烧后，注入蒸馏水并发酵14-16天，经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％制得的溶液；所述莫兰、印茄精华溶液是通过将莫兰、印茄枝干用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵10-15天，然后经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％制得的溶液。
8.如权利要求1所述的池塘养殖营养液，其特征在于：所述布袋莲或浮萍精华溶液是通过将布袋莲或浮萍用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵12-15天，然后经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-10％制得的溶液。
9.如权利要求1所述的池塘养殖营养液，其特征在于：所述莫兰、印茄精华溶液是通过将莫兰、印茄枝干用15000转/分的粉碎机将其粉碎后注入蒸馏水并发酵10-15天，然后经1um过滤器过滤后间接加热65-85度进行旋转吸空蒸发，浓缩至矿物质含量为5-8％制得的溶液。
10.根据权利要求1-9任一所述的池塘养殖营养液的使用方法，其特征在于：使用雨水或暴晒2天后的自来水将所述池塘养殖营养液以体积比1∶30进行稀释，然后以平均每20-25公斤鱼类或虾类饲料喷洒200-500mL的上述稀释后的营养液的方式进行喷洒，然后正常投喂。
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