CN104429217A

CN104429217A - 一种解除牡丹种子休眠的方法

Info

Publication number: CN104429217A
Application number: CN201310417397.XA
Authority: CN
Inventors: 王阿慧
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2013-09-13
Filing date: 2013-09-13
Publication date: 2015-03-25

Abstract

本发明提供一种解除牡丹种子休眠的方法，本发明建立了解除牡丹种子休眠的成套技术体系，该体系分为实生苗和离体种胚两种途径。实生苗途径操作步骤：1000mg/LGA₃浸泡24h；附含100mg/LGA₃+1mg/LBA+3mg/LCa(NO₃)₂4℃湿砂储藏；泥炭、菜园土和珍珠岩（3∶6∶1）基质播种；10mg/LGA₃+1mg/LBA+3mg/LCa(NO₃)₂叶面喷洒。离体种胚途径操作步骤：1000mg/LGA₃浸泡24h；100mg/LGA₃+1mg/LBA+3mg/LCa(NO₃)₂去壳浸泡24h；添加5mg/LGA₃+1mg/LBA+3mg/LCa(NO3)₂的WPM培养基培养4周。本发明能简便、快速、高效地解除牡丹种子休眠，大大缩短了牡丹成苗成花的时间跨度，为牡丹、芍药等具休眠特性物种的后续开发利用提供了全新的技术平台。

Description

一种解除牡丹种子休眠的方法

技术领域

本发明涉及生物领域，特别涉及一种解除牡丹种子休眠的方法。

背景技术

牡丹(Paeonia suffruticosa)，别名富贵花、百两金、木芍药、鼠姑、鹿韭，洛阳花，为芍药科芍药属木本植物，落叶灌木，素有“国色天香”、“花中之王”的美誉，为我国国花之首选。牡丹不仅有较高的观赏价值，还具备很好的药用价值。早在汉代，药用植物典籍《神农本草经》就有牡丹被驯化入药的记载。随着牡丹在园林绿化、药材储备中市场价值的增大，催生了牡丹的经济市场，整个市场已经形成了从种苗、盆花、切花、干花到规模化景观开发和精细化精油提取等完整的产业链条，链条上每个环节都蕴藏着诱人的商机和花卉产业全新的经济增长点。扩大繁殖系数，提高扩繁效率，开展牡丹种苗规模化生产，为市场快速高效提供各级优质牡丹苗木，成为当今牡丹生产与研究的主要关注点。

牡丹的种苗繁殖以种子播种方式为主，其中包括结籽稀少的重瓣型品种，只有极少部分不结籽的重瓣型品种采用分株或嫁接方式进行后代繁殖。然而，牡丹种子在自然条件下具有休眠特性，具体表现在胚根(下胚轴)和胚芽(上胚轴)的休眠，尤以上胚轴休眠更为深沉。通常情况下，牡丹种子靠越冬低温打破休眠而自然萌发成苗需两年时间，开花需10年左右，时间跨度过长，生产效率过低，生产成本过高，严重制约牡丹经济的蓬勃兴起。因此，能够快速高效破除上胚轴休眠特性，有效提高种子的发芽率及发芽势，缩短牡丹种子成苗成花时间跨度，对日益升温的牡丹经济来说，意义重大。

发明内容

本发明提供一种解除牡丹种子深度休眠的方法，快速破除牡丹上胚轴休眠特性，尽快缓解牡丹种苗供需矛盾。

为达到以上目的，本发明采用以下技术方案：

本发明通过对解除牡丹种子休眠影响因素的探索，建立了解除牡丹种子深度休眠的成套技术体系，该体系分为实生苗和离体种胚两种途径。

实生苗途径操作步骤：

（1）1000 mg/L GA₃浸泡24 h；

（2）附含100 mg/L GA₃+ 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂ 4℃湿砂储藏；

（3）泥炭、菜园土和珍珠岩（3∶6∶1）基质播种；

（4）10 mg/L GA₃ + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂ 叶面喷洒。离体种胚途径操作步骤：

（1）1000 mg/L GA₃浸泡24 h；

（2） 100 mg/L GA₃ + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂去壳浸泡24 h；

（3）添加5 mg/L GA₃ + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂的WPM培养基培养4周。实生苗途径获得明显主茎的牡丹苗木历时180天，离体种胚途径获得明显主茎的离体芽苗历时30天。

本发明的有益效果在于：

本发明建立了解除牡丹种子休眠的技术体系。其意义在于：简便、快速、高效地解除牡丹种子深度休眠，大大缩短了牡丹成苗成花的时间跨度，为牡丹、芍药等具深度休眠特性物种的后续开发利用提供了全新的技术平台。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明做进一步阐述：

1、植物材料：凤丹种子，自 2010年至2012年，每逢9月采集于上海植物园科研中心牡丹育种苗圃，采后去荚、阴凉处风干，塑料袋分装，4℃或-20℃冰箱保存备用。

2、材料处理：选取成熟饱满的牡丹种子，用自来水冲洗2-4 h，滤纸吸干；再用70%酒精浸泡60s，无菌水或蒸馏水冲洗3次，滤纸吸干，4℃或-20℃冰箱保存备用。

母液制备： 1000 mg/L的赤霉素（GA₃）溶液，用分析纯酒精助溶，现配现用；1 mg/L BA，用1 mol/L HCl助溶，4℃冰箱保存；5 mg/L Ca(NO₃)₂，直接溶于水，常温保存。

培养基：WPM基本培养基，按需添加植物激素等，121℃灭菌20 min，用于种胚离体培养。

播种基质：泥炭、菜园土和珍珠岩（3∶6∶1）的基质，用于播种已发根的牡丹种子；冷藏所用湿砂，使用前121℃灭菌60 min，用于储存各处理的牡丹种子。

GA₃预处理对发根的影响：选取饱满的牡丹种子，用0，200, 600, 1000, 1400, 1800 mg/L的GA₃浸泡24 h，弃液，留种子，温水洗3次，风干，埋藏于湿砂中，黑暗条件下常温储藏。

GA₃对出苗的影响：将1000 mg/L的GA₃浸泡24 h的牡丹种子埋藏于附含0，50，100，150,200,250 mg/L GA₃的湿砂中，黑暗条件下4℃储藏。

GA₃对实生苗上胚轴伸长的影响：用0, 5, 10，15，20, 30 mg/L GA₃喷洒处理6（2）获得的小苗叶片，3天/次，持续喷洒2个月。

GA₃对离体种胚上胚轴伸长的影响：选取经1000 mg/L GA₃浸泡24 h、去壳并用100 mg/L GA₃浸泡24 h的牡丹离体种胚为实验对象，直接接种于附含0, 1, 3，5，7, 10 mg/L GA₃的WPM培养基中。

Claims

1.一种解除牡丹种子休眠的方法，其特征在于：建立了解除牡丹种子休眠的成套技术体系，该体系分为实生苗和离体种胚两种途径。

2. 根据权利要求1所述实生苗途径操作步骤，其特征在于：

（1）1000 mg/L GA₃浸泡24 h；

（2）附含100 mg/L GA₃ + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂ 4℃湿砂储藏；

（3）泥炭、菜园土和珍珠岩（3∶6∶1）基质播种；

（4） 10 mg/L GA₃ + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂ 叶面喷洒。

3.根据权利要求1所述离体种胚途径操作步骤，其特征在于：

（1）1000 mg/L GA₃浸泡24 h；

（2） 100 mg/L GA₃ + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂2去壳浸泡24 h；

（3）添加5 mg/L GA₃ + 1 mg/L BA + 3 mg/L Ca(NO₃)₂ 的WPM培养基培养4周。