CN104422777B - Ano1蛋白在食管癌预后及癌前病变风险预测中的应用 - Google Patents
Ano1蛋白在食管癌预后及癌前病变风险预测中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104422777B CN104422777B CN201310409322.7A CN201310409322A CN104422777B CN 104422777 B CN104422777 B CN 104422777B CN 201310409322 A CN201310409322 A CN 201310409322A CN 104422777 B CN104422777 B CN 104422777B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ano1
- albumen
- detection
- molecule
- squamous cell
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 102100022992 Anoctamin-1 Human genes 0.000 title claims abstract description 83
- 101000757261 Homo sapiens Anoctamin-1 Proteins 0.000 title claims abstract description 83
- 230000003902 lesion Effects 0.000 title claims abstract description 37
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 title abstract description 7
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 title description 21
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 title description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 53
- 208000007276 esophageal squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 49
- 206010061534 Oesophageal squamous cell carcinoma Diseases 0.000 claims abstract description 47
- 208000036765 Squamous cell carcinoma of the esophagus Diseases 0.000 claims abstract description 47
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 27
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 29
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 claims description 24
- 238000001861 endoscopic biopsy Methods 0.000 claims description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 13
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 claims description 9
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 claims description 8
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 claims description 5
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 2
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 32
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 abstract description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 5
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 abstract description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 20
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 12
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 11
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000013115 immunohistochemical detection Methods 0.000 description 5
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 5
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 230000036046 immunoreaction Effects 0.000 description 4
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 4
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 4
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 4
- 208000007433 Lymphatic Metastasis Diseases 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- WZUVPPKBWHMQCE-XJKSGUPXSA-N (+)-haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2C[C@]2(O)[C@H]1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-XJKSGUPXSA-N 0.000 description 2
- 102000016956 Autophagy-Related Protein-1 Homolog Human genes 0.000 description 2
- 108010014380 Autophagy-Related Protein-1 Homolog Proteins 0.000 description 2
- 208000009458 Carcinoma in Situ Diseases 0.000 description 2
- 102100036568 Cell cycle and apoptosis regulator protein 2 Human genes 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Natural products C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100021866 Hepatocyte growth factor Human genes 0.000 description 2
- 101000715194 Homo sapiens Cell cycle and apoptosis regulator protein 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000625256 Homo sapiens Protein Mis18-beta Proteins 0.000 description 2
- 101000807524 Homo sapiens Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 22 Proteins 0.000 description 2
- 208000035346 Margins of Excision Diseases 0.000 description 2
- 206010061882 Oesophageal neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 102100025034 Protein Mis18-beta Human genes 0.000 description 2
- 102100037184 Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 22 Human genes 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000005081 epithelial layer Anatomy 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 201000004933 in situ carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 208000025402 neoplasm of esophagus Diseases 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003787 Anoctamin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108090000160 Anoctamin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101150042405 CCN1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- 102000011045 Chloride Channels Human genes 0.000 description 1
- 108010062745 Chloride Channels Proteins 0.000 description 1
- 102100038447 Claudin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000601 Claudin-4 Proteins 0.000 description 1
- 244000050510 Cunninghamia lanceolata Species 0.000 description 1
- 108010058546 Cyclin D1 Proteins 0.000 description 1
- 102000002045 Endothelin Human genes 0.000 description 1
- 108050009340 Endothelin Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102100024165 G1/S-specific cyclin-D1 Human genes 0.000 description 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000100 Hepatocyte Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 101000933342 Homo sapiens BMP/retinoic acid-inducible neural-specific protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001065550 Homo sapiens Lymphocyte antigen 6K Proteins 0.000 description 1
- 101000817237 Homo sapiens Protein ECT2 Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 241001062009 Indigofera Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102100032129 Lymphocyte antigen 6K Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102100028489 Phosphatidylethanolamine-binding protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710204191 Phosphatidylethanolamine-binding protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100040437 Protein ECT2 Human genes 0.000 description 1
- 102000001788 Proto-Oncogene Proteins c-raf Human genes 0.000 description 1
- 108010029869 Proto-Oncogene Proteins c-raf Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108010078814 Tumor Suppressor Protein p53 Proteins 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004791 biological behavior Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000002559 cytogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N endothelin-1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]2CSSC[C@@H](C(N[C@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2)=O)NC(=O)[C@@H](CO)NC(=O)[C@H](N)CSSC1)C1=CNC=N1 ZUBDGKVDJUIMQQ-UBFCDGJISA-N 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012308 immunohistochemistry method Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 208000020082 intraepithelial neoplasia Diseases 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000611 regression analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 208000017572 squamous cell neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 230000004960 subcellular localization Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57484—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumor, cancer, neoplasia, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides, metabolites
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Oncology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明属于分子生物学、临床预后判断及癌变风险预测领域，具体涉及检测ANO1蛋白表达的分子在制备用于食管鳞癌预后判断及癌前病变病程进展风险预测的试剂盒或检测试剂中的应用，所述检测ANO1蛋白表达的分子可以为核酸、蛋白或化合物，表明ANO1蛋白可以作为分子标志物用于食管鳞癌预后判断及癌前病变病程进展风险预测。
Description
技术领域
本发明属于分子生物学、临床预后判断及癌变风险预测领域，具体涉及检测ANO1蛋白的分子在制备用于食管鳞癌预后及对癌前病变人群病程进展风险预测判断的试剂盒或检测试剂中的应用。本发明还涉及包含检测ANO1蛋白的分子的试剂盒或检测试剂。
背景技术
食管癌是人类常见的十大恶性肿瘤之一，全球食管癌每年新增病例超过482000，死亡病例超过407000。中国是世界食管癌的高发地区，尤以男性高发，组织类型主要为鳞状细胞癌（简称食管鳞癌）。2012年出版的《中国肿瘤登记年报》的最新数据显示，我国食管鳞癌居恶性肿瘤发病第五位、死亡第四位，对人民的生活质量甚至生命安全构成了严重威胁。
食管鳞癌起病隐匿，许多患者早期阶段无任何症状。50%以上患者在确诊时已无法切除或已出现影像学可见的转移灶，中晚期患者术后5年总体生存率多年以来一直徘徊在10%左右。如能找到可将术后病人区分为高风险和低风险组的诊断方法，则可指导临床实现个体化诊治，避免过度治疗或治疗不足。现已明确食管癌的发生经历从正常食管粘膜→炎症→食管粘膜上皮不典型增生→早期癌→晚期癌的过程。食管粘膜鳞状上皮不典型增生已被公认为癌前病变，是指不侵犯固有层的食管肿瘤性上皮，出现了不同程度的细胞异型性和结构紊乱性改变。根据累及上皮层内的不同程度，不典型增生病变分为轻、中、重度/原位癌三级。我国食管癌高发现场的普查发现，轻度及中度不典型增生的分化方向具有多向性，既可以继续发展成癌、也可以逆转为正常、还可以保持不变；而重度不典型增生及原位癌的恶变几率很大、逆转的可能性很小。但目前临床尚无可预测癌前病变进展方向的诊断方法，只能依靠定期随访。上述现状说明，需要寻找一种准确的方法对高发现场癌前病变人群进行癌变风险预测，指导临床尽早进行干预和治疗。研究显示，内镜筛查为早期食管癌、且接受外科手术切除的患者，5年总体生存率可达90%左右。
肿瘤的发生是多因素、多基因异常所致的复杂过程，在病灶发生形态学变化之前，可能已经存在着许多分子生物学的改变。用分子水平异常作食管鳞癌的肿瘤标志物能更恰当地反映肿瘤生物学行为的异质性，进而为食管癌的预后判断及癌前病变进展方向预测提供更有价值的指导。目前发现的食管癌重要改变的分子标志物主要集中在核酸与蛋白方面，前者包括细胞遗传学改变、基因的扩增、缺失、突变、断裂与融合、mRNA、及miRNA等，后者表现为蛋白表达水平、大小、亚细胞定位及蛋白翻译后修饰等改变。由于蛋白质是基因表达的最终产物，也是基因功能的执行者，蛋白质间的相互作用、相互协调是细胞进行一切代谢活动的基础，因此关注食管癌发生发展中蛋白水平的改变，对寻找预后判断及癌前病变进展方向预测的分子标志物显得更加关键。
迄今为止，针对食管鳞癌预后判断蛋白标志物的实验室研究已取得了具有潜在应用前景的进展，例如文献报道可能作为独立预后因子的Cyclin D1,E-cadherin,TP53和VEGF、Hepatocyte growth factor(HGF)、claudin-4、UNC-51-like kinase1(ULK1)、Cysteine-rich61(Cyr61)、Twist1、DBC1(deleted in breast cancer1)、Ubiquitin-specific protease22(USP22)、Raf-1kinase inhibitory protein(RKIP)、Celltransformingsequence2(ECT2)、Endothelin(ET)、Opa interacting protein5(OIP5)、Antigen6complex locus K(LY6K)等等。但是，迄今为止这些分子均未被临床接受而应用。对于高发现场癌前病变人群癌变风险预测的研究，目前更处在初步探索阶段。
因此，本领域亟需可用于食管癌预后判断或癌前病变风险预测的分子标志物。
发明内容
发明人经过大量实验研究，发现ANO1蛋白阳性表达与与食管鳞癌患者不良预后显著正相关，同时发现ANO1可能具有预测食管癌前病变病程进展风险的价值，由此完成了本发明。
本发明第一方面涉及检测ANO1蛋白的分子在制备用于食管癌预后判断或癌前病变风险预测的试剂盒或检测试剂中的用途。
根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述检测ANO1蛋白的分子是指能够特异性检测ANO1蛋白是否表达的分子，例如可以为核酸、蛋白质或化合物。
根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述蛋白质为抗体，其能够与ANO1蛋白特异性结合，优选为单克隆抗体。
在本发明的实施方案中，所述检测ANO1蛋白的分子为单克隆抗体，其能够与ANO1蛋白特异性结合。在本发明的具体实施方案中，所述单克隆抗体购自LSBio公司，货号为LS-C88846。
在本发明的具体实施方案中，采用免疫组织化学的方法检测ANO1蛋白。
根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述的食管癌为食管鳞癌。
根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述的癌前病变是指食管鳞状上皮的不典型增生。
根据本发明第一方面任一项的用途，所述试剂盒或检测试剂用于手术切除组织样品或内镜活检组织样品的检测，优选地，所述检测方法为免疫组织化学方法。
根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述预后判断或风险预测的判断方法为，ANO1蛋白表达阳性，则食管鳞癌患者生存期短；ANO1蛋白表达阳性，则癌前病变人群5年后病程进展风险可能性大。
在本发明的实施方案中，所述生存期是指经过食管鳞癌切除术（例如根治或姑息手术）的患者的生存期；在本发明的具体实施方案中，所述生存期是指经过食管鳞癌根治手术的患者的生存期。
在本发明的实施方案中，所述癌前病变人群是指高发现场的癌前病变人群。
根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述检测ANO1蛋白的分子还带有可检测的标记。
根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述试剂盒或检测试剂中还含有缓冲液及显色剂。
本发明第二方面涉及试剂盒或检测试剂，其中含有检测ANO1蛋白的分子，所述试剂盒或检测试剂用于食管癌预后判断或癌前病变风险预测。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述检测ANO1蛋白的分子是指能够特异性检测ANO1蛋白是否表达的分子，例如可以为核酸、蛋白质或化合物。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述蛋白质为抗体，其能够与ANO1蛋白特异性结合，优选为单克隆抗体。
在本发明的实施方案中，所述检测ANO1蛋白的分子为单克隆抗体，其能够与ANO1蛋白特异性结合。在本发明的具体实施方案中，所述单克隆抗体购自LSBio公司，货号为LS-C88846。
在本发明的具体实施方案中，采用免疫组织化学的方法检测ANO1蛋白。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述的食管癌为食管鳞癌。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述的癌前病变是指食管鳞状上皮的不典型增生。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，所述试剂盒或检测试剂用于手术切除组织样品或内镜活检组织样品的检测，优选地，所述检测方法为免疫组织化学方法。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述预后判断或风险预测的判断方法为，ANO1蛋白表达阳性，则食管鳞癌患者生存期短；ANO1蛋白表达阳性，则癌前病变人群5年后病程进展风险可能性大。
在本发明的实施方案中，所述生存期是指经过食管鳞癌切除术（例如根治或姑息手术）的患者的生存期；在本发明的具体实施方案中，所述生存期是指经过食管鳞癌根治手术的患者的生存期。
在本发明的实施方案中，所述癌前病变人群是指高发现场的癌前病变人群。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述检测ANO1蛋白的分子还带有可检测的标记。
根据本发明第二方面任一项的试剂盒或检测试剂，其中所述试剂盒或检测试剂中还含有缓冲液及显色剂。
在本发明中，所述ANO1蛋白也称为Anoctamin1蛋白，是钙离子依赖的氯离子通道蛋白，其GenBank号为NP_060513.5。
在本发明中，其中所述检测ANO1蛋白的分子是指能够检测ANO1蛋白是否表达的分子，例如可以为核酸、蛋白质或化合物。
在本发明中，所述核酸例如可以为寡核苷酸片段，其能够与ANO1蛋白的mRNA序列或cDNA序列结合，进而检测ANO1蛋白的表达；所述寡核苷酸片段例如为引物或探针。
在本发明中，所述蛋白质可以为分子量较小的多肽（如5-100个氨基酸组成），也可以为分子量较大的蛋白（例如长度大于100个氨基酸），所述蛋白质能够与ANO1蛋白特异性结合，进而检测ANO1蛋白的表达；优选地，所述蛋白质为抗体，所述抗体可以为多克隆抗体或单克隆抗体，优选为单克隆抗体。所述抗体可以为嵌合抗体、重组抗体、人源化抗体、单链抗体或能够与抗原结合的抗体片段。
可以采用本领域公知的方法制备抗体，或者可以使用购买的抗体。
可以使用免疫测定的方法定量或定性检测蛋白标志物的存在。所述免疫测定通常包括将生物样品与抗体一起孵育，并通过多种熟知技术检测结合抗体。
在本发明中，所述化合物具有本领域公知的含义，其可以和ANO1蛋白特异性结合，进而用于检测ANO1蛋白的表达。
在本发明中，所述检测ANO1蛋白的分子上可以连接有可检测的标记分子。
在本发明中，所述试剂盒或检测试剂中还可以包含能够与检测ANO1蛋白的分子结合的分子，例如抗体，例如第二抗体，该分子也可以连接有可检测的标记分子。
在本发明中，所述可检测的标记分子例如可以为酶、荧光素、金属离子或同位素等。
在本发明中，其中所述的癌前病变是指食管鳞状上皮的不典型增生。食管鳞状上皮不典型增生是指食管鳞状上皮出现的不同程度的细胞异型性和结构紊乱性改变。食管鳞状上皮不典型增生根据累及上皮层内的不同程度，不典型增生病变分为轻、中和重度不典型增生。
在本发明中，ANO1蛋白表达阳性的判断标准为本领域公知，可以根据所采用的检测ANO1蛋白的分子不同而采用相应的方法。如果检测ANO1蛋白的分子与ANO1蛋白或者ANO1的mRNA或cDNA发生了特异性结合，则可以判断ANO1蛋白表达阳性。在进行表达阳性判断时，可以设立ANO1不表达的对照。
在本发明中，所述食管鳞癌患者生存期短是指与ANO1表达阴性的患者相比，生存期更短；该生存期可以指未经过食管鳞癌切除术（例如根治或姑息手术）的患者的生存期，也可以指经过食管鳞癌切除术（例如根治或姑息手术）的患者的生存期。在本发明的实施方案中，所述生存期是指经过食管鳞癌切除术（例如根治或姑息手术）的患者的生存期，例如指经过食管鳞癌根治手术的患者的生存期。
在本发明中，所述生存期的计算方式为本领域所公知，是指在经过相应治疗后开始计算的生存期；例如经过食管鳞癌切除术（例如根治或姑息手术）的患者的生存期是指术后开始计算的生存期；未经过食管鳞癌切除术（例如根治或姑息手术）的患者的生存期是指经过其它治疗例如放疗、化疗等后开始计算的生存期。
在本发明中，所述癌前病变人群5年后病程进展是指从癌前病变进展为食管鳞癌，或者从轻、中度的不典型增生进展为中、重度不典型增生或原位癌。
在本发明中，所述食管鳞癌根治手术是指对食管鳞癌进行包括肿瘤、肿瘤上下端足够长度的食道、受累组织器官的切除及淋巴结的清扫等。
在本发明中，所述食管鳞癌姑息手术是指食管肿瘤不能完全切除或因肿瘤转移较严重淋巴结不能清扫干净。
在本发明中，所述高发现场是指中国食管鳞癌发生率较高的地区。
在本发明中，制备组织芯片的方法为本领域所公知。在本发明的具体实施方案中，制备组织芯片样本的方法为：
食管鳞癌及手术切端组织用福尔马林固定，用石蜡包埋，制成石蜡标本。切片进行HE染色，以明辨肿瘤病理类型且标记所需癌巢及手术切缘组织位置。在石蜡标本的相应位置取出组织芯，放入预先设计的阵列模块中，排列成组织芯片模块。将组织芯片模块切片，裱于玻片上，置于干燥箱中过夜，待做免疫组织化学用。
在本发明中，免疫组织化学方法为本领域公知。在本发明的具体实施方案中，免疫组织化学的方法为：
组织芯片烤片，脱蜡，微波热修复，加抗体孵育，洗涤。加PV9000试剂1于37℃温箱中孵育，加PV9000试剂2于37℃温箱中孵育，DAB溶液镜下显色，蒸馏水漂洗，苏木素复染，氨水返蓝，乙醇脱水，二甲苯透明，树胶封片。
在本发明的实施方案中，阳性判断标准为：
评分标准：需综合考虑阳性细胞显色强度和百分比；
显色强度：无膜浆显色为0分，较弱膜浆显色为1分，中等膜浆显色为2分，较强膜浆显色为3分；百分比：无膜浆着色：0分，≤10%的肿瘤细胞出现膜浆着色为1分，10%－25%的肿瘤细胞出现膜浆着色为2分，25%－50%的肿瘤细胞出现膜浆着色为3分；＞50%的肿瘤细胞出现膜浆着色为4分。以显色强度评分×百分比评分记为最终评分结果；显色强度评分×百分比评分为0分以上即判断为阳性。
本发明提供了一种可以有效区分食管鳞癌病人术后生存期、且能预测癌前病变人群病程进展风险的分子标志物，该标志物具有以下特征：
(一)在食管鳞癌组织中高表达，而在手术切端组织中不表达
(二)在高发现场内镜活检病理诊断正常的人群中不表达，而在癌前病变和食管鳞癌中高表达
(三)阳性表达的食管鳞癌患者，其术后生存期短。
(四)阳性表达的癌前病变人群，存在5年内病程进展的风险可能。
发明的有益效果
本发明通过检测样品中ANO1蛋白的表达，可以将食管鳞癌术后病人生存期有效区分成长短两组，且可以对癌前病变人群病程进展风险可能进行预测，为食管鳞癌预后及癌变风险预测的判断提供了新途径。
附图说明
图1.ANO1蛋白在食管鳞癌组织的免疫组织化学检测。
从图1可以看出，ANO1蛋白在部分食管鳞癌组织中高表达，而在手术切端组织中不表达。
图2.ANO1蛋白表达与食管鳞癌根治手术患者预后的关系，其中左上图为全部病例的统计结果，右上图为髓质型病例的统计结果，左下图为胸中下段食管鳞癌病例的统计结果，右下图为肿块大于5cm病例的统计结果。
从图2可以看出，ANO1蛋白阳性患者术后生存期短。
图3.ANO1蛋白在高发现场内镜活检正常组织和食管鳞癌组织的免疫组织化学检测，其中左上图为一例内镜活检病理诊断为食管正常上皮组织的ANO1蛋白免疫组织化学检测结果，右上图为一例内镜活检病理诊断为食管鳞癌组织的ANO1蛋白免疫组织化学检测结果，左下图为另一例内镜活检病理诊断为食管正常上皮组织的ANO1蛋白免疫组织化学检测结果，右下图为另一例内镜活检病理诊断为食管鳞癌组织的ANO1蛋白免疫组织化学检测结果。
从图3可以看出，ANO1蛋白在高发现场内镜活检正常组织中不表达，而在部分食管鳞癌中阳性表达。
图4.ANO1蛋白在高发现场内镜活检食管癌前病变组织免疫组织化学检测。
从图4可以看出，ANO1蛋白在1例轻度不典型增生患者中表达阳性，该患者5年后进展为中度不典型增生；另1例为ANO1阳性表达的重度不典型增生患者，5年后恶变为食管鳞癌。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
在本发明中，ANO1抗体购自LSBio公司，货号为LS-C88846。
在本发明中，制备样本方法、免疫组织化学方法和评分标准如下：
（a）制备样本：
组织芯片：食管癌及手术切端组织用10%中性福尔马林固定48h后分别用石蜡包埋，切片进行HE染色，明辨肿瘤病理类型且标记所需癌巢及手术切缘组织位置。在石蜡标本的相应位置标记作为取材部位，后用直径为1mm的打孔针从标定部位逐个取出组织芯，放入预先设计的阵列模块中，排列成组织芯片模块。用切片机切成4μm厚的切片裱于防脱玻片上，置于65℃干燥箱中过夜，待做免疫组织化学用。
（b）免疫组织化学：组织芯片65℃烤片30min，二甲苯脱蜡10min×3次，100%、85%、75%乙醇各3min，PBS5min×2次，H2O215min，枸橼酸钠溶液（pH=6.0）微波热修复（微波加热至95℃-99℃后将薄片置入，再用微波炉中-低火加热20min，冷却至室温），PBS3min×3次，加ANO1抗体置入湿盒中4℃过夜。第二天取出湿盒恢复至室温，PBS3min×3次，加PV9000试剂1于37℃温箱中孵育20min，PBS3min×3次；加PV9000试剂2（PV9000试剂1和2购于北京中杉金桥生物技术有限公司）于37℃温箱中孵育30min，PBS3min×3次；二氨基联苯胺（DAB）溶液镜下显色，蒸馏水漂洗，苏木素复染，氨水返蓝10min，75%、85%、100%乙醇脱水各3min，二甲苯透明5min×2次，树胶封片，显微镜下观察。
（c）评分标准：需综合考虑阳性细胞显色强度和百分比。
显色强度：无膜浆显色为0分，较弱膜浆显色为1分，中等膜浆显色为2分，较强膜浆显色为3分；百分比：无膜浆着色为0分，≤10%的肿瘤细胞出现膜浆着色为1分，10%－25%的肿瘤细胞出现膜浆着色为2分，25%－50%的肿瘤细胞出现膜浆着色为3分；＞50%的肿瘤细胞出现膜浆着色为4分。以显色强度评分×百分比评分记为最终评分结果。显色强度评分×百分比评分为0分以上即判断为阳性。
实施例1
回顾性研究：将359例食管鳞癌及其相应手术切端组织制备组织芯片，其中肿瘤组织取3个点，手术切端组织取2个点。用免疫组织化学的方法检测ANO1蛋白表达，并进行评分、分析。表1列出了ANO1免疫组织化学的具体检测结果，图1为代表性的免疫组织化学检测结果图。采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验进行生存分析，结果表明ANO1蛋白阳性表达的患者根治术后生存时间比不表达的患者较短（如图2所示）。表2是按照表1中根治术病例的数据进行的多因素COX回归分析结果，可见ANO1高表达和淋巴结转移可分别作为食管癌独立预后因子。
表1ANO1蛋白在食管鳞癌组织中免疫组织化学检测结果
pT，肿瘤浸润深度，pN，区域淋巴结转移状态，下同。“ANO1评分”中的空缺为组织芯片阵列点因组织破损严重、脱片、或靶细胞过少，不满足镜检要求，而没有数据；
“生存/月”中的“-”表示信息不全，没有数据。
表2.食管癌根治手术患者多因素COX回归分析
其中pN表示淋巴结转移（病理性分期）。
实施例2
回顾性研究：将12例高发现场内镜活检病理诊断为食管鳞癌肿瘤标本和75例内镜活检病理诊断为食管正常上皮标本，制备成组织大片，用免疫组织化学的方法检测ANO1蛋白表达水平，并进行分析。结果如图3所示，ANO1蛋白在食管正常人群中不表达，特异性为100%；在部分食管鳞癌患者中有阳性表达，敏感性为25%（3/12）。表3列出了具体的检测结果。
表3ANO1蛋白在高发现场内镜活检食管鳞癌和正常人群标本中免疫组织化学检测结果
实施例3
回顾性研究：将168例高发现场内镜活检食管不典型增生组织，制备成组织大片，用免疫组化方法检测ANO1蛋白表达水平，并进行分析。结果如图4所示，ANO1蛋白在1例轻度不典型增生患者中检测阳性；1例重度不典型增生患者中检测阳性。表4列出了具体的检测结果。
表4ANO1蛋白在高发现场内镜活检食管不典型增生人群标本中免疫组织化学检测结果
实施例4
前瞻性研究：对实施例3中的ANO1检测阳性的轻度不典型增生和重度不典型增生患者5年后进行内镜随访检测。结果显示，1例ANO1检测阳性的轻度不典型增生患者5年后进展为中度不典型增生；另一例ANO1检测阳性的重度不典型增生患者5年后进展为食管鳞癌，表明ANO1蛋白可用于癌前病变人群病程进展风险的预测。表5列出了首次内镜活检组织ANO1表达阳性患者5年后内镜随访诊断的结果。
表5ANO1表达阳性的食管不典型增生患者5年后内镜随访诊断结果
尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。
Claims (9)
1.检测ANO1蛋白的分子在制备用于食管鳞癌癌前病变风险预测的试剂盒或检测试剂中的用途；
其中，所述试剂盒或检测试剂用于手术切除组织样品或内镜活检组织样品的检测。
2.根据权利要求1所述的用途，其中，所述检测ANO1蛋白的分子是指能够特异性检测ANO1蛋白是否表达的分子。
3.根据权利要求2所述的用途，其中，能够特异性检测ANO1蛋白是否表达的分子为核酸或蛋白质。
4.根据权利要求3所述的用途，其中，所述蛋白质为抗体。
5.根据权利要求4所述的用途，其中，所述抗体为单克隆抗体。
6.根据权利要求1所述的用途，其中，所述癌前病变是食管鳞状上皮的不典型增生。
7.根据权利要求1所述的用途，其中，所述检测为免疫组织化学方法。
8.根据权利要求1所述的用途，其中，所述检测ANO1蛋白的分子还带有可检测的标记。
9.根据权利要求1所述的用途，其中，所述试剂盒或检测试剂中还含有缓冲液及显色剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310409322.7A CN104422777B (zh) | 2013-09-10 | 2013-09-10 | Ano1蛋白在食管癌预后及癌前病变风险预测中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310409322.7A CN104422777B (zh) | 2013-09-10 | 2013-09-10 | Ano1蛋白在食管癌预后及癌前病变风险预测中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104422777A CN104422777A (zh) | 2015-03-18 |
| CN104422777B true CN104422777B (zh) | 2017-11-28 |
Family
ID=52972379
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310409322.7A Active CN104422777B (zh) | 2013-09-10 | 2013-09-10 | Ano1蛋白在食管癌预后及癌前病变风险预测中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104422777B (zh) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106202988A (zh) * | 2016-10-11 | 2016-12-07 | 哈尔滨工业大学深圳研究生院 | 一种预测疾病生存期的逐步多元回归模型及应用 |
| CN107807243B (zh) * | 2017-11-24 | 2020-08-07 | 暨南大学 | 一种食管癌的生物标志物及其应用 |
| CN110596406B (zh) * | 2019-10-30 | 2021-05-07 | 河北工业大学 | Tmem16a作为骨质疏松的标志物及其应用、骨质疏松诊断试剂盒和药物 |
| CN112614128B (zh) * | 2020-12-31 | 2021-09-07 | 山东大学齐鲁医院 | 一种基于机器学习的内镜下辅助活检的系统及方法 |
| CN113754764B (zh) * | 2021-08-20 | 2022-09-06 | 四川大学华西医院 | 抗dog-1抗体、缀合物、药物组合物、药物制剂及其用途 |
| CN113777311B (zh) * | 2021-09-16 | 2023-08-01 | 郑州大学 | 一种用于食管鳞癌辅助诊断的elisa试剂盒 |
| CN115261472B (zh) * | 2022-07-18 | 2023-03-03 | 中国医学科学院肿瘤医院 | 一种用于局部晚期食管鳞癌放疗疗效预测的标志物及其应用与试剂盒 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62269071A (ja) * | 1986-05-17 | 1987-11-21 | Wakunaga Pharmaceut Co Ltd | 癌細胞及び癌抗原検出用試薬 |
| CN102154482A (zh) * | 2011-02-16 | 2011-08-17 | 北京大学 | 钙激活氯通道ano1/tmem16a在诊断和治疗前列腺癌中的用途 |
-
2013
- 2013-09-10 CN CN201310409322.7A patent/CN104422777B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS62269071A (ja) * | 1986-05-17 | 1987-11-21 | Wakunaga Pharmaceut Co Ltd | 癌細胞及び癌抗原検出用試薬 |
| CN102154482A (zh) * | 2011-02-16 | 2011-08-17 | 北京大学 | 钙激活氯通道ano1/tmem16a在诊断和治疗前列腺癌中的用途 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Consistent and Differential Genetic Aberrations between Esophageal Dysplasia and Squamous Cell Carcinoma Detected By Array Comparative Genomic Hybridization.;Zhi-Zhou Shi, et al.;《Clinical Cancer Research》;20130905;第19卷(第21期);第5867-5878页 * |
| Genomewide mRNA profiling of esophageal squamous cell carcinoma for identification of cancer biomarkers.;Manoj Kumar Kashyap, et al.;《Cancer Biology & Therapy》;20090101;第8卷(第1期);第1-11页 * |
| TMEM16A在食管鳞癌中的表达及意义;柏文霞，等;《世界华人消化杂志》;20090528;第17卷(第15期);第1513页右栏第31行-第1514页左栏第14行，第1514页左栏第43行-第1515页左栏第2行，第1515页左栏第8行-右栏第18行，第1516页左栏第16-32行 * |
| 钙激活氯通道TMEM16A与TE-1、A549肿瘤细胞增殖、迁移及凋亡关系的研究;耿仙;《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》;20110115(第1期);E072-3 * |
| 食管鳞癌基因组改变及预后相关基因的研究;史志周;《北京协和医学院博士学位论文 万方数据》;20120320;摘要，第35页第17行-第38页第5行，第50页倒数第6行-第51页第3行，第61页第2-4行，第67页第9-10行，第68页第8-9行，图13-16 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104422777A (zh) | 2015-03-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104422777B (zh) | Ano1蛋白在食管癌预后及癌前病变风险预测中的应用 | |
| Ciolofan et al. | Clinical, histological and immunohistochemical evaluation of larynx cancer | |
| Hashimoto et al. | The prognostic relevance of fascin expression in human gastric carcinoma | |
| Proctor et al. | Association of human papilloma virus status and response to radiotherapy in vulvar squamous cell carcinoma | |
| Hou et al. | High expression of the transcriptional co-activator p300 predicts poor survival in resectable non-small cell lung cancers | |
| ES2720483T3 (es) | Sistemas y procedimientos de anticuerpos anti p40 | |
| Dai et al. | Capn4 contributes to tumour growth and metastasis of hepatocellular carcinoma by activation of the FAK–Src signalling pathways | |
| AU2003267105A1 (en) | Cell-based detection and differentiation of disease states | |
| Chen et al. | Characterizing the activation of the Wnt signaling pathway in hilar cholangiocarcinoma using a tissue microarray approach | |
| CN107085108A (zh) | 诊断癌症和确定癌症患者的总体生存和无病生存的方法 | |
| CN110836974A (zh) | Flt3lg蛋白在制备肺腺癌术后预后评估试剂或者试剂盒中的应用 | |
| Lastraioli et al. | hERG1 behaves as biomarker of progression to adenocarcinoma in Barrett's esophagus and can be exploited for a novel endoscopic surveillance | |
| Dalbagni et al. | Prospective evaluation of p53 as a prognostic marker in T1 transitional cell carcinoma of the bladder | |
| Fan et al. | Detection of Brk expression in non-small cell lung cancer: clinicopathological relevance | |
| Cayonu et al. | Lymph node yield and lymph node density for elective level II–IV neck dissections in laryngeal squamous cell carcinoma patients | |
| Guo et al. | Increased high-mobility group A2 correlates with lymph node metastasis and prognosis of non-small cell lung cancer | |
| CN110527728A (zh) | 作为子宫颈癌和存活期的生物标记物的角蛋白 | |
| CN109999184A (zh) | Tak1蛋白在制备食管癌预后评估试剂或试剂盒中的应用 | |
| CN106908609A (zh) | 肿瘤特异性移植抗原蛋白tsta3在制备食管鳞癌诊断试剂中的用途 | |
| CN102803968A (zh) | 食道癌标志物 | |
| CN105785004B (zh) | 细胞分裂周期相关蛋白2在胰腺癌诊断或预后中的用途 | |
| Lazăr et al. | Different patterns of p16INK4a immunohistochemical expression and their biological implications in laryngeal squamous cell carcinoma | |
| CN112904006B (zh) | 一种乳腺癌预后预测分子标志物及其应用 | |
| CN102053159A (zh) | 一组早期胰腺癌模型差异表达的相关蛋白质及其应用 | |
| Zand et al. | Cyclin D1 expression in patients with laryngeal squamous cell carcinoma |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |