CN104255829B - 扁蓄植物源杀菌剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

扁蓄植物源杀菌剂及其制备方法，它属于农药技术领域。本发明目的是公开一种复方植物源杀菌剂配方及其制备方法，产品主要由扁蓄、黄芩、龙葵、龙胆和苍术等制成。方法：一、将原料干制后粉碎，然后过筛，混合；二、用乙醇冷浸后超声处理，过滤取滤液，蒸发浓缩至膏状物。本发明产品对立枯丝核菌、腐霉枯萎病菌、禾谷镰孢菌、茄链格孢菌、炭色长蠕孢菌等多种植物病原致病真菌有较好的抑菌功能，效果明显好于化学杀菌剂福美双。本发明采用原料均为纯天然植物，制备成本低，可进行小型工厂化生产，而且这些植物都属于中草药，使用后可以迅速降解，对人畜安全，环境相容性好，不会对环境造成二次污染，符合当今的绿色食品理念和环境可持续发展战略。

Description

扁蓄植物源杀菌剂及其制备方法

技术领域

本发明属于农药技术领域；具体属于植物源杀菌剂领域；具体涉及扁蓄植物源杀菌剂及其制备方法。

背景技术

自1761年人们首次应用硫酸铜处理种子防治小麦腥黑穗病以来，化学农药在防治植物病害上发挥了重要的作用。例如多菌灵、福美双和百菌清一直作为主要的化学杀菌剂在蔬菜、果树等作物上用来防治一些真菌性病害，连续多年的使用造成病原菌的变异及抗性增强。因而只能通过加大杀菌剂的使用量来达到更好的防治目的，这势必造成在植物和土壤中更多的化学物质残留，不仅危害食品安全，而且造成严重的环境污染。不符合当今“无公害绿色食品”和“环境可持续发展”的理念。

发明内容

本发明的目的是将扁蓄等具有清热、解毒、抗炎抑菌的天然植物进行复配，扩大其抑菌谱，提供一种高效、生产成本低的扁蓄植物源杀菌剂及其制备方法，以缓解使用化学农药杀菌造成的植物和土壤中化学物质残留超标、危害食品安全、环境污染等问题。

本发明采用的杀菌剂配方原料均为纯天然植物，而且这些植物都属于中草药，使用后可以迅速降解，对人畜安全，环境相容性好，不会对环境造成二次污染，符合当今的环境可持续发展战略。该杀菌剂制备原料成本低廉，技术简单易行，可以进行小型工厂化生产制备。

本发明中扁蓄植物源杀菌剂按重量份数主要是下述原料制成的：扁蓄2.0～3.0份、黄芩0.5～1.2份、龙葵2.0～3.0份、龙胆0.8～1.0份和苍术1.0～2.0份。

扁蓄植物源杀菌剂的原料还包括3.0～4.0份白鲜皮、4.0～5.0份菊芋、0.5份甘草、4.0～5.0份反枝苋及5.0～6.0份苍耳中的一种或者其中几种的组合。

扁蓄植物源杀菌剂的制备方法是按下述步骤进行的：

步骤一、将原料干制后粉碎，然后过筛，混合；

步骤二、用乙醇冷浸，然后超声处理，过滤取滤液，蒸发浓缩至膏状物；即得到扁蓄植物源杀菌剂。

步骤二乙醇体积浓度为75％～85％。

步骤二中在50～60℃、功率150W条件下，超声处理30分钟。

步骤二滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％～10％。

植物源杀菌剂常温保存。使用时将植物源杀菌剂用水稀释至100～400倍液在蔬菜及大田作物上使用，主要用于防治立枯丝核菌、腐霉枯萎病菌、禾谷镰孢菌、茄链格孢菌、炭色长蠕孢菌所引起的植物病害。

本发明采用扁蓄、黄芩、龙葵、龙胆、苍术、白鲜皮、菊芋、甘草、反枝苋、苍耳等中草药的粗提物为有效成分。本发明采用的植物原料都具有清热解毒、抗菌消炎的功效，对多种病原细菌、真菌具有抑制和杀灭功能。本发明进行体外抑菌试验，结果表明对立枯丝核菌、腐霉枯萎病菌、禾谷镰孢菌、茄链格孢菌、炭色长蠕孢菌等多种植物病原致病真菌有较好的抑菌功能，抑制率达75％以上，效果明显好于对照化学杀菌剂福美双，尤其对立枯丝核菌引起的水稻纹枯病和禾谷镰孢菌引起的小麦赤霉病防效显著。本发明的杀菌剂配方中选用的原料均为天然植物，主要用于蔬菜及大田作物病害防治，使用后在土壤中容易降解、无残留，对环境友好，符合当今“无公害绿色食品”和“环境可持续发展”的理念。该杀菌剂原料成本低，制备技术简单易行，可以进行小型工厂化生产制备。

附图说明

图1是不同配方植物源杀菌剂对水稻纹枯病菌抑菌试验结果比较图；图2是不同配方植物源杀菌剂对小麦赤霉病菌抑菌试验结果比较图；图3是不同配方植物源杀菌剂对腐霉枯萎病菌抑菌试验结果比较图；图4是不同配方植物源杀菌剂对马铃薯早疫病菌抑菌试验结果比较图；图5是不同配方植物源杀菌剂对茄腐镰孢病菌抑菌试验结果比较图；图6是不同配方植物源杀菌剂对玉米圆斑病菌抑菌试验结果比较图；图7是不同配方植物源杀菌剂对小麦根腐病菌抑菌试验结果比较图；图1-7中上排左面的是福美双，右面的是1％(体积)乙醇对照；下排由右至左为具体实施方式十一、十二和十三的配方。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式中扁蓄植物源杀菌剂按重量份数主要是下述原料制成的：扁蓄2.0～3.0份、黄芩0.5～1.2份、龙葵2.0～3.0份、龙胆0.8～1.0份和苍术1.0～2.0份。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：扁蓄植物源杀菌剂按重量份数主要是下述原料制成的：扁蓄2.0～2.5份、黄芩0.8～1.1份、龙葵2.1～2.4份、龙胆0.8～1.0份和苍术1.2～1.5份。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一不同的是：扁蓄植物源杀菌剂按重量份数主要是下述原料制成的：扁蓄2.4份、黄芩1.0份、龙葵2.3份、龙胆1.0份和苍术1.5份。

具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：扁蓄植物源杀菌剂的原料还包括3.0～4.0份白鲜皮、4.0～5.0份菊芋、0.5份甘草、4.0～5.0份反枝苋及5.0～6.0份苍耳中的一种或者其中几种的组合。其它与具体实施方式一至三之一相同。

具体实施方式五：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：扁蓄植物源杀菌剂的原料还包括3.5～4.0份白鲜皮、4.0～4.5份菊芋、0.5份甘草、4.2～4.6份反枝苋及5.0～5.3份苍耳中的一种或者其中几种的组合。其它与具体实施方式一至三之一相同。

具体实施方式六：本实施方式与具体实施方式一至三之一不同的是：扁蓄植物源杀菌剂的原料还包括3.8份白鲜皮、4.4份菊芋叶、0.5份甘草、4.3份反枝苋及5.2份苍耳中的一种或者其中几种的组合。其它与具体实施方式一至三之一相同。

具体实施方式七：具体实施方式一至六中的扁蓄植物源杀菌剂可按下述方法制备，具体是按下述步骤进行的：

步骤一、将原料干制后粉碎，然后过筛，混合；

步骤二、用乙醇冷浸，然后超声处理，过滤取滤液，蒸发浓缩至膏状物；即得到扁蓄植物源杀菌剂。

具体实施方式八：本实施方式与具体实施方式七不同的是：步骤二乙醇体积浓度为75％～85％。其它步骤和参数与具体实施方式七相同。

具体实施方式九：本实施方式与具体实施方式七或八不同的是：步骤二中在50～60℃、功率150W条件下，超声处理30分钟。其它步骤和参数与具体实施方式七相同。

具体实施方式十：本实施方式与具体实施方式七至九之一不同的是：步骤二滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％～10％。其它步骤和参数与具体实施方式七至九之一相同。

具体实施方式十一：本实施方式中扁蓄植物源杀菌剂是按下述步骤进行的：

步骤一、将扁蓄茎叶，黄芩根，龙葵茎叶(带青果)，龙胆草根，苍术根，白鲜根皮，菊芋茎叶，甘草根，反枝苋茎叶，苍耳全株(带果实)分别晾晒干制后用高速粉碎机粉碎，然后过40目筛，按质量份数称取扁蓄2.4份、黄芩1.0份、龙葵2.3份、龙胆1.0份、苍术1.5份、白鲜皮3.8份、甘草0.5份和反枝苋4.3份充分混匀；

步骤二、然后用5倍的80％(体积)乙醇水溶液冷浸8h，然后在55℃、功率150W条件下，超声30分钟，过滤获得滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％～10％，即得到扁蓄植物源杀菌剂。

具体实施方式十二：本实施方式中扁蓄植物源杀菌剂是按下述步骤进行的：

步骤一、将扁蓄茎叶，黄芩根，龙葵茎叶(带青果)，龙胆草根，苍术根，白鲜根皮，菊芋茎叶，甘草根，反枝苋茎叶，苍耳全株(带果实)分别晾晒干制后用高速粉碎机粉碎，然后过40目筛，按质量份数称取扁蓄2.4份、黄芩1.0份、龙葵2.3份、龙胆1.0份、苍术1.5份、菊芋4.4份和甘草0.5份充分混匀；

步骤二、然后用5倍的80％(体积)乙醇水溶液冷浸8h，然后在55℃、功率150W条件下，超声30分钟，过滤获得滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％～10％时，即得到扁蓄植物源杀菌剂。

具体实施方式十三：本实施方式中扁蓄植物源杀菌剂是按下述步骤进行的：

步骤一、将扁蓄茎叶，黄芩根，龙葵茎叶(带青果)，龙胆草根，苍术根，白鲜根皮，菊芋茎叶，甘草根，反枝苋茎叶，苍耳全株(带果实)分别晾晒干制后用高速粉碎机粉碎，然后过40目筛，按质量份数称取扁蓄2.4份、黄芩1.0份、龙葵2.3份、龙胆1.0份、苍术1.5份、菊芋4.4份和苍耳5.2份充分混匀；

步骤二、然后用5倍的80％(体积)乙醇水溶液冷浸8h，然后在55℃、功率150W条件下，超声30分钟，过滤获得滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％～10％时，即得到扁蓄植物源杀菌剂。

扁蓄主要含有槲皮素、绿原酸、咖啡酸、没食子酸等，绿原酸是一种重要的生理活性物质，具有抗菌、抗病毒、升高白细胞等作用；黄芩中的黄芩素对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌具有很好的体外抑菌作用。龙葵中含有生物碱，具有清热解毒、利水消肿等功效，中医用于主治沁尿系感染、细菌性痢疾，龙葵果提取物对变异链球菌和大肠杆菌体外抑菌作用显著；龙胆具有清热燥湿、泻肝胆火等功效；苍术具有抗溃疡、保肝、抑菌等药用功效；白鲜皮中的白鲜碱具有抗菌消炎的作用；菊芋叶片中主要含有绿原酸等酚类物质，对小麦纹枯病、番茄灰霉病、苹果炭疽病等具有很好的抑菌功效；甘草主要含有甘草酸，具有抗炎、抗病毒、保肝解毒及增强免疫力的功能，对革兰氏阳性球菌、革兰氏阳性芽胞杆菌、真菌和利什曼原虫疟原虫生长有较强的抑制活性；反枝苋，性凉，味甘，具有清热明目、通利二便、收敛消肿、解毒治痢、抗炎止血等功效。可治疗尿血、内痔出血、扁桃腺炎、急性肠炎等症。苍耳全株有毒，主要含有苍耳甙和生物碱等，可以解毒杀虫，主治疔疮、疥癣、皮肤瘙痒、痢疾等，对番茄灰霉、黄瓜黑星等病菌有较好的抑制作用。

采用下述试验验证发明效果：

利用具体实施方式十一、十二和十三中获得的混合粗提物乙醇溶液进行了体外抑菌试验，空白对照药剂为1％乙醇溶液，参考对照为2％的50％福美双可湿性粉剂悬浊液。

参试病原真菌为：水稻纹枯病菌(立枯丝核菌)、腐霉枯萎病菌、小麦赤霉病菌(禾谷镰孢菌)、玉米圆斑病菌(炭色长蠕孢菌)、马铃薯早疫病菌(茄链格孢菌)、茄腐病菌(茄腐镰孢菌)、小麦根腐病菌(禾旋孢腔菌)。

离体培养基为PDA培养基，按粗提混合物170～175g/l的量加入灭菌后的培养基中，每个处理配方设3次重复。在培养基中央接种病原菌菌叠，菌叠直径0.6cm，置于28℃恒温培养，每天观察菌丝生长情况，待对照长满皿后测量菌落直径，计算不同配方杀菌剂对病原菌的生长抑制率。

计算公式如下：

表1不同配方植物源杀菌剂对7种病原真菌体外生长抑制率结果

从表1可以看出，具体实施方式十一和十二对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、腐霉枯萎病菌的体外生长抑菌率达100％，分别高出化学杀菌剂福美双66.04％、71.08％和66.52％，差异极显著(p＜0.01)。具体实施方式十三对水稻纹枯病菌、腐霉枯萎病菌的体外生长抑菌率达100％，分别高出化学杀菌剂福美双66.04％和66.52％，差异极显著(p＜0.01)。对小麦赤霉病菌的体外生长抑菌率为96.81％，高出化学杀菌剂福美双67.89％，差异极显著(p＜0.01)。具体实施方式十一、十二和十三对马铃薯早疫病菌的体外生长抑菌率分别为86.46％、88.54％和94.17％，分别高出化学杀菌剂福美双65.21％、67.29％和72.92％，差异极显著(p＜0.01)。具体实施方式十一、十二和十三对小麦根腐病菌和玉米圆斑病菌均有不同程度的抑菌作用，具体实施方式十一对两种病原菌的抑菌率均在65％以上，具体实施方式十二对小麦根腐病菌的抑制率为76.38％(较高)，对玉米圆斑病菌的抑制率只有27.27％，具体实施方式十三对两种病原菌的抑制率均在30％以下(较差)而福美双对这两种病原菌的抑菌率为0。

综上，具体实施方式十一、十二和十三对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、腐霉枯萎病菌和马铃薯早疫病菌具有极强的体外抑制作用，抑菌效果显著；对于小麦根腐病菌、茄腐病菌、和玉米圆斑病菌也具有不同程度抑菌功效。

在图1-7每个照片的上排培养皿为空白对照和化学杀菌剂福美双对病原菌的生长抑制效果，下排为本发明中具体实施方式十一、十二和十三对病原菌的生长抑制效果。从图1-3可以看出，具体实施方式十一、十二和十三可以完全抑制水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌和腐霉枯萎病菌的生长，而化学杀菌剂福美双只能部分抑制这3种病原真菌的生长，效果只是略好于空白对照；从图4可以看出，具体实施方式十一、十二和十三对马铃薯早疫病菌具有极为显著的抑制作用，菌叠只是略有生长，而化学杀菌剂福美双对该病原菌的抑制作用只是略好于对照；从图5-7可以看出，具体实施方式十一、十二和十三对茄腐镰孢病菌、玉米圆斑病菌和小麦根腐病菌具有一定程度的生长抑制作用，明显好于空白对照，而化学杀菌剂福美双对这3种病原真菌的抑制作用很差，与对照效果相当甚至不及对照。

番茄立枯病(病原为立枯丝核菌)盆栽试验。

试验品种：北京大黄

试验试剂：本发明的植物源杀菌剂，由具体实施方式十一和十二制备，对照为50％福美双可湿性粉剂。

试验方法：从发病温室取病土，分装到直径35cm的花盆中，每个处理装10盆。每盆播种10粒种子，出苗前喷施化学杀菌剂50％福美双可湿性粉剂800倍液，本发明的植物杀菌剂400倍液，出苗后观察植株发病情况，同时设空白对照。计算药剂防效，公式如下：

表2不同配方植物杀菌剂防治番茄立枯病试验结果

从表2可以看出本发明的植物杀菌剂具体实施方式十一和十二的配方防效分别为81.36％和82.71％，高出福美双近20个百分点(p＜0.01)。

采用本发明的植物源杀菌剂能够有效防治番茄立枯病，防效在80％以上，明显好于化学杀菌剂50％福美双可湿性粉剂的防治效果。

辣椒猝倒病(病原为腐霉枯萎病菌)盆栽试验。

试验品种：农家辣妹子

试验试剂：本发明的植物源杀菌剂，由实施例1和实施例2制备，对照为50％福美双可湿性粉剂。

试验方法：从发病温室取病土，分装到直径35cm的花盆中，每个处理装10盆。每盆播种10粒种子，出苗前喷施化学杀菌剂50％福美双可湿性粉剂800倍液，本发明的植物杀菌剂400倍液，出苗后观察植株发病情况，同时设空白对照。

表3不同配方植物杀菌剂防治辣椒猝倒病试验结果

从表3可以看出本发明的植物杀菌剂具体实施方式十一和十二配方防效分别为76.91％和76.20％，高出福美双10个百分点(p＜0.01)。

结论：采用本发明的植物源杀菌剂能够有效防治辣椒猝倒病，防效在75％以上，明显好于化学杀菌剂50％福美双可湿性粉剂的防治效果。

具体实施方式十四：本实施方式中扁蓄植物源杀菌剂是按重量份数由下述原料制成的：

扁蓄2.0份、黄芩1.0份、龙葵2.0份、龙胆1.0份、苍术2.0份、4.0份白鲜皮、4.0份菊芋、0.5份甘草、4.5份反枝苋及5.0份苍耳。

制备方法：

步骤一、将扁蓄茎叶，黄芩根，龙葵茎叶(带青果)，龙胆草根，苍术根，白鲜根皮，菊芋茎叶，甘草根，反枝苋茎叶，苍耳全株(带果实)分别晾晒干制后用高速粉碎机粉碎，然后过40目筛，按上述配比充分混匀；

步骤二、然后用5倍的80％(体积)乙醇水溶液冷浸8h，然后在55℃、功率150W条件下，超声30分钟，过滤获得滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％～10％，即得到扁蓄植物源杀菌剂。

分别取与具体实施方式十四中相同份数的扁蓄2.0份、黄芩1.0份、龙葵2.0份、龙胆1.0份和苍术2.0份、4.0份白鲜皮、4.0份菊芋、0.5份甘草、4.5份反枝苋及5.0份苍耳，按具体实施方式十四的方法分别制备膏状物。离体培养基为PDA培养基，分别按照扁蓄1.6g/l、黄芩0.8g/l、龙葵1.6g/l、龙胆0.8g/l、苍术1.6g/l、白鲜皮1.6g/l、菊芋3.2g/l、甘草0.45g/l、反枝苋3.6g/l和苍耳4.5g/l的量加入灭菌后的培养基中。

具体实施方式十四配方按粗提混合物170～175g/l的量加入灭菌后的培养基中，每个处理配方设3次重复。在培养基中央接种病原菌菌叠，菌叠直径0.6cm，置于28℃恒温培养，每天观察菌丝生长情况，待对照长满皿后测量菌落直径，计算不同配方杀菌剂对病原菌的生长抑制率。

计算公式如下：

参试病原真菌为：水稻纹枯病菌(立枯丝核菌)、腐霉枯萎病菌、小麦赤霉病菌(禾谷镰孢菌)、玉米圆斑病菌(炭色长蠕孢菌)、马铃薯早疫病菌(茄链格孢菌)、茄腐病菌(茄腐镰孢菌)、小麦根腐病菌(禾旋孢腔菌)。

表4单一植物提取物与本发明植物源杀菌剂对7种病原真菌体外生长抑制率结果比较

由表4可知，扁蓄、黄芩、龙葵、菊芋、苍耳五种植物的乙醇粗提物对七种病原真菌均有不同程度的体外抑制作用，只是不同植物提取物针对不同的病原真菌抑制效果有较大差别。例如：扁蓄对玉米圆斑病和腐霉枯萎病菌抑制效果较好，黄芩对水稻纹枯病、小麦赤霉病和玉米圆斑病抑制效果较好。其它几种植物提取物虽然不是对所有参试病原真菌都有抑制作用，但是都有各自的抑菌优势，例如：苍术对水稻纹枯、玉米圆斑和腐霉枯萎均有很好的抑制作用，反枝苋和龙胆对马铃薯早疫病抑制效果较好。针对不同植物提取物的抑菌特点将其混合为具体实施方式十四的配方进行抑菌试验获得了理想的体外抑菌效果，该配方对7种病原真菌的体外抑菌率均达到75％以上，对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌和腐霉枯萎病菌的抑菌率达100.00％，值得一提的是单独使用上表的任意一种植物粗提物对茄腐病菌和小麦根腐病菌的抑菌效果均不理想，混合使用后极大地提高了对这两种病原真菌的抑菌率。黄芩对茄腐病菌和小麦根腐病菌抑菌率最高分别仅为48.97％和50.03％，而具体实施方式十四的配方对这两种真菌的抑菌率分别达到75.96％和80.00％，抑菌效果差异极显著(p＜0.01)。

Claims (7)

1.扁蓄植物源杀菌剂，其特征在于扁蓄植物源杀菌剂按重量份数主要是下述原料制成的：扁蓄2.0～3.0份、黄芩0.5～1.2份、龙葵2.0～3.0份、龙胆0.8～1.0份和苍术1.0～2.0份。

2.根据权利要求1所述的扁蓄植物源杀菌剂，其特征在于扁蓄植物源杀菌剂按重量份数主要是下述原料制成的：扁蓄2.0～2.5份、黄芩0.8～1.1份、龙葵2.1～2.4份、龙胆0.8～1.0份和苍术1.2～1.5份。

3.根据权利要求1所述的扁蓄植物源杀菌剂，其特征在于扁蓄植物源杀菌剂按重量份数主要是下述原料制成的：扁蓄2.4份、黄芩1.0份、龙葵2.3份、龙胆1.0份和苍术1.5份。

4.根据权利要求1所述的扁蓄植物源杀菌剂，其特征在于扁蓄植物源杀菌剂的原料还包括3.0～4.0份白鲜皮、4.0～5.0份菊芋、0.5份甘草、4.0～5.0份反枝苋及5.0～6.0份苍耳中的一种或者其中几种的组合。

5.根据权利要求1所述的扁蓄植物源杀菌剂，其特征在于扁蓄植物源杀菌剂的原料还包括3.5～4.0份白鲜皮、4.0～4.5份菊芋、0.5份甘草、4.2～4.6份反枝苋及5.0～5.3份苍耳中的一种或者其中几种的组合。

6.根据权利要求1所述的扁蓄植物源杀菌剂，其特征在于扁蓄植物源杀菌剂的原料还包括3.8份白鲜皮、4.4份菊芋、0.5份甘草、4.3份反枝苋及5.2份苍耳中的一种或者其中几种的组合。

7.根据权利要求1-6任意一项权利要求所述的扁蓄植物源杀菌剂的制备方法，其特征在于扁蓄植物源杀菌剂的制备方法是按下述步骤进行的：

步骤一、将原料干制后粉碎，然后过筛，混合；

步骤二、用体积浓度为75％～85％的乙醇冷浸，然后在50～60℃、功率150W条件下超声处理30分钟，过滤取滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％～10％；即得到扁蓄植物源杀菌剂。