用于提高仔猪免疫力的饲料
技术领域
本发明涉及饲料技术领域,尤其涉及一种用于提高仔猪免疫力的饲料。
背景技术
在现代集约化养猪生产中广泛采用早期断奶技术,仔猪离开母猪后,在饲养环境和营养突然改变,重新合群、建立新的等级秩序等不良因素的作用下,容易发生以生长缓慢和腹泻为主要特征的仔猪早期断奶应激综合症。由于这种疾病具有较高的发生率和死亡率,给养猪业带来了重大损失。
目前,在畜牧业生产中普遍采用在饲料中添加抗生素、激素、化学合成药物等来防治畜禽腹泻。1950年10月抗生素饲料添加剂被美国官方所认可,美国饲料监督局(AFCO)和国家食品和药物管理局(FDA)正式批准抗生素添加到饲料中。此后,世界各国进行了大量的饲养试验及其它科学研究,抗生素饲料添加剂得到快速发展,成为全价饲料的重要组成成分,从此饲料行业进入了抗生素时代。早在20世纪60年代,我国就对一些饲用抗生素(如链霉素、土霉素等)进行过研究,但由于种种原因,未能得到推广和应用。自从八十年代以来,我国再次进行了大量试验和科学研究,饲用抗生素开始普遍得到使用。目前,我国已批准近几十种抗生素作为饲料添加剂。抗生素作为饲料添加剂的应用为畜牧业的快速发展作出了巨大的贡献,其使用效果及对畜牧业的促进作用是其它任何一种添加剂和任何一项技术都无法相比的。
抗生素对畜牧业尤其是饲料工业快速发展起到了积极的推动作用,尤其是在畜禽疾病防治及促生长方面发挥了不可磨灭的作用。但随着科技和认识的不断深入,人们开始发现在抗生素作为饲料添加剂带来巨大经济效益的同时所引起的弊端,人类健康常见的癌症、畸形、抗药性和某些中毒现象与肉、蛋、奶中的抗生素、激素和其他合成药物的残留有关。长期使用这些物质,不仅易引起病原微生物产生耐药性、动物免疫力下降和产品品质下降等问题,并可造成畜产品及环境中的有害残留增加,严重威胁着人类健康。
动物机体的免疫力是机体抗御和清除微生物及有害物质,以保持和恢复正常生理功能的能力。在猪的生命过程中,营养是维持免疫系统功能、确保完善免疫力的决定因素。中草药源于动物、植物、矿物及其产品,保持了各种结构成分的自然状态和生物活性。长期使用,很少产生细菌耐药性,不易出现残留、抗药性、毒副作用,具有安全性和可靠性。
中草药具有多种营养成分和生物活性,兼有营养和药物双重作用,既可防治疾病又可提高生产性能,不但能直接抑菌和杀菌,还能调节机体的免疫功能,具有非特异性免疫抗菌作用。中草药不但含有糖、脂肪、氨基酸、维生素、微量元素等动物机体所需的营养成分,还含有生物碱类、甙类、挥发油类、色素等生物活性物质。这些生物活性物质具有增强免疫、抗应激、调节新陈代谢、改善肉质和胴体性状等作用。有些中草药具有对动物某一脏腑的功能状态(亢进或抑制)进行调整的作用。
免疫器官的重量与动物免疫功能密切相关,中草药对免疫器官的影响主要集中在对胸腺、脾脏、淋巴结、圆小囊及蚓突发育的影响上。中草药可以促进免疫器官的发育,增强机体的免疫功能。
目前,关于中草药的使用大多是经过粉碎后直接添加,操作较粗糙,并且难以进行产品的质量控制,见效并不快。本发明提供一种新型的中草药饲料添加剂和包含该饲料添加剂的饲料,采用这种饲料添加剂可以显著的提高仔猪免疫力,效果好,见效快,降低仔猪发病率和死亡率,且不易出现残留、抗药性、毒副作用,具有安全性和可靠性,所饲养的仔猪是健康绿色食品。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种新型的用于提高仔猪免疫力的饲料添加剂及包含该饲料添加剂的饲料,采用这种饲料添加剂可以显著的提高仔猪免疫力,效果好,见效快,降低仔猪发病率和死亡率,且不易出现残留、抗药性、毒副作用,具有安全性和可靠性,所饲养的仔猪是健康绿色食品。
为解决上述技术问题,本发明提供了一种提高仔猪免疫力的饲料,其原料包括玉米、豆粕、食盐、鱼粉、豆油、蛋氨酸、赖氨酸、色氨酸、维生素A、维生素E、维生素C和用于促进仔猪提高免疫力的药物饲料添加剂。
其中,所述饲料中各原料的重量份分别为玉米60重量份~70重量份、豆粕15重量份~20重量份、食盐1重量份~3重量份、鱼粉5重量份~8重量份、豆油8重量份~12重量份、蛋氨酸0.05重量份~0.15重量份、赖氨酸0.05重量份~0.15重量份、色氨酸0.05重量份~0.15重量份、维生素A 0.05重量份~0.15重量份、维生素E 0.05重量份~0.15重量份、维生素C 0.05重量份~0.15重量份、上述药物饲料添加剂1重量份~3重量份。
其中,所述药物饲料添加剂的原料药包括芡实、红景天、刺五加、鸡血藤、土党参、黄精、木蝴蝶、龙脷叶、北沙参、虎杖、垂盆草、委陵菜、金龙胆草、狗脊、贯筋藤、元宝草、桑寄生、山大黄、豨莶草、蓍草、山白菊和积雪草。
其中,所述药物饲料添加剂中各原料药的重量份别为芡实35重量份~45重量份、红景天25重量份~35重量份、刺五加35重量份~45重量份、鸡血藤20重量份~30重量份、土党参30重量份~40重量份、黄精35重量份~45重量份、木蝴蝶15重量份~25重量份、龙脷叶15重量份~25重量份、北沙参25重量份~35重量份、虎杖30重量份~40重量份、垂盆草20重量份~30重量份、委陵菜15重量份~25重量份、金龙胆草25重量份~35重量份、狗脊20重量份~30重量份、贯筋藤25重量份~35重量份、元宝草30重量份~40重量份、桑寄生30重量份~40重量份、山大黄25重量份~35重量份、豨莶草10重量份~20重量份、蓍草20重量份~30重量份、山白菊15重量份~25重量份和积雪草15重量份~25重量份。
其中,所述药物饲料添加剂中各原料药的重量份别为芡实38重量份~42重量份、红景天28重量份~32重量份、刺五加38重量份~42重量份、鸡血藤23重量份~27重量份、土党参33重量份~37重量份、黄精38重量份~42重量份、木蝴蝶18重量份~22重量份、龙脷叶18重量份~22重量份、北沙参28重量份~32重量份、虎杖33重量份~37重量份、垂盆草23重量份~27重量份、委陵菜18重量份~22重量份、金龙胆草28重量份~32重量份、狗脊23重量份~27重量份、贯筋藤28重量份~32重量份、元宝草33重量份~37重量份、桑寄生33重量份~37重量份、山大黄28重量份~32重量份、豨莶草13重量份~17重量份、蓍草23重量份~27重量份、山白菊18重量份~22重量份和积雪草18重量份~22重量份。
本发明还提供了上述饲料的制备方法,包括:
第一步,制备所述药物饲料添加剂;
第二步,将饲料原料中其他原料组分与第一步获得的所述药物饲料添加剂一起放入饲料搅拌机中,连续均匀搅拌1~3小时后,放入粉碎机中进行粉碎,获得饲料。
其中,所述饲料添加剂的制备方法包括:
第a步,将芡实、刺五加、土党参、黄精、北沙参、金龙胆草、狗脊、元宝草、桑寄生、山大黄、豨莶草、蓍草、山白菊和积雪草分别粉碎,按比例混合,混合物装入渗漉筒中,每500g加入醇浓度为80%~90%的乙醇800g~1000g,在35℃~45℃的条件下浸泡25小时~35小时,调节渗漉筒阀门,使白酒药液慢慢滴出,滴出速度为每分钟2~4mL,至滴出的颜色透明为止,收集滴出的滴出液,得渗漉液,浓缩,除去白酒,干燥,粉碎,获得第一粉末;
第b步,将余下原料药组分分别粉碎成粉末,送入搅拌机中混合,获得混合物,每100g混合物,加入500g~600g的水,煮沸3~4小时,过滤,获得第一滤液,滤渣再次加入200g~300g的水,再次煮沸1~2小时,过滤,获得第二滤液,将第一滤液和第二滤液混合,浓缩除去水溶剂,粉碎,干燥,获得干燥的第二粉末;
第c步,将第一粉末和第二粉末混合,随后以质量比1∶1的比例加入玉米芯粉,搅拌均匀,即为药物饲料添加剂。
本发明的有益效果:
本发明提供的用于提高仔猪免疫力的饲料添加剂及包含该饲料添加剂的饲料,采用这种饲料添加剂可以显著的提高仔猪免疫力,效果好,见效快,降低仔猪发病率和死亡率,且不易出现残留、抗药性、毒副作用,具有安全性和可靠性,所饲养的仔猪是健康绿色食品。
具体实施方式
本发明提供了一种用于提高仔猪免疫力的饲料添加剂,其原料药包括芡实、红景天、刺五加、鸡血藤、土党参、黄精、木蝴蝶、龙脷叶、北沙参、虎杖、垂盆草、委陵菜、金龙胆草、狗脊、贯筋藤、元宝草、桑寄生、山大黄、豨莶草、蓍草、山白菊和积雪草。
进一步优选,所述饲料添加剂仅由上述原料药构成。
所述饲料添加剂中各原料药的重量份别为芡实35重量份~45重量份、红景天25重量份~35重量份、刺五加35重量份~45重量份、鸡血藤20重量份~30重量份、土党参30重量份~40重量份、黄精35重量份~45重量份、木蝴蝶15重量份~25重量份、龙脷叶15重量份~25重量份、北沙参25重量份~35重量份、虎杖30重量份~40重量份、垂盆草20重量份~30重量份、委陵菜15重量份~25重量份、金龙胆草25重量份~35重量份、狗脊20重量份~30重量份、贯筋藤25重量份~35重量份、元宝草30重量份~40重量份、桑寄生30重量份~40重量份、山大黄25重量份~35重量份、豨莶草10重量份~20重量份、蓍草20重量份~30重量份、山白菊15重量份~25重量份和积雪草15重量份~25重量份。
进一步优选,所述饲料添加剂中各原料药的重量份别为芡实38重量份~42重量份、红景天28重量份~32重量份、刺五加38重量份~42重量份、鸡血藤23重量份~27重量份、土党参33重量份~37重量份、黄精38重量份~42重量份、木蝴蝶18重量份~22重量份、龙脷叶18重量份~22重量份、北沙参28重量份~32重量份、虎杖33重量份~37重量份、垂盆草23重量份~27重量份、委陵菜18重量份~22重量份、金龙胆草28重量份~32重量份、狗脊23重量份~27重量份、贯筋藤28重量份~32重量份、元宝草33重量份~37重量份、桑寄生33重量份~37重量份、山大黄28重量份~32重量份、豨莶草13重量份~17重量份、蓍草23重量份~27重量份、山白菊18重量份~22重量份和积雪草18重量份~22重量份。
最优选,所述饲料添加剂中各原料药的重量份别为芡实40重量份、红景天30重量份、刺五加40重量份、鸡血藤25重量份、土党参35重量份、黄精40重量份、木蝴蝶20重量份、龙脷叶20重量份、北沙参30重量份、虎杖35重量份、垂盆草25重量份、委陵菜20重量份、金龙胆草30重量份、狗脊25重量份、贯筋藤30重量份、元宝草35重量份、桑寄生35重量份、山大黄30重量份、豨莶草15重量份、蓍草25重量份、山白菊20重量份和积雪草20重量份。
本发明还提供了上述饲料添加剂的制备方法,其包括:
第一步,将芡实、刺五加、土党参、黄精、北沙参、金龙胆草、狗脊、元宝草、桑寄生、山大黄、豨莶草、蓍草、山白菊和积雪草分别粉碎,按比例混合,混合物装入渗漉筒中,每500g加入醇浓度为80%~90%的乙醇800g~1000g,在35℃~45℃的条件下浸泡25小时~35小时,调节渗漉筒阀门,使白酒药液慢慢滴出,滴出速度为每分钟2~4mL,至滴出的颜色透明为止,收集滴出的滴出液,得渗漉液,浓缩,除去白酒,干燥,粉碎,获得第一粉末;
第二步,将余下原料药组分分别粉碎成粉末,送入搅拌机中混合,获得混合物,每100g混合物,加入500g~600g的水,煮沸3~4小时,过滤,获得第一滤液,滤渣再次加入200g~300g的水,再次煮沸1~2小时,过滤,获得第二滤液,将第一滤液和第二滤液混合,浓缩除去水溶剂,粉碎,干燥,获得干燥的第二粉末;
第三步,将第一粉末和第二粉末混合,随后以质量比1∶1的比例加入玉米芯粉,搅拌均匀,即为药物饲料添加剂。
本发明还提供了一种提高仔猪免疫力的饲料,其原料包括玉米、豆粕、食盐、鱼粉、豆油、蛋氨酸、赖氨酸、色氨酸、维生素A、维生素E、维生素C和上述用于促进仔猪提高免疫力的药物饲料添加剂。
进一步,所述饲料仅由上述原料构成。
进一步,所述饲料中各原料的重量份分别为玉米60重量份~70重量份、豆粕15重量份~20重量份、食盐1重量份~3重量份、鱼粉5重量份~8重量份、豆油8重量份~12重量份、蛋氨酸0.05重量份~0.15重量份、赖氨酸0.05重量份~0.15重量份、色氨酸0.05重量份~0.15重量份、维生素A 0.05重量份~0.15重量份、维生素E 0.05重量份~0.15重量份、维生素C 0.05重量份~0.15重量份、中药物饲料添加剂1重量份~3重量份。
更进一步,所述饲料中各原料的重量份分别为玉米75重量份、豆粕18重量份、食盐2重量份、鱼粉6重量份、豆油10重量份、蛋氨酸0.1重量份、赖氨酸0.1重量份、色氨酸0.1重量份、维生素A 0.1重量份、维生素E 0.1重量份、维生素C 0.1重量份、药物饲料添加剂2重量份。
本发明还提供了上述饲料的制备方法,包括:
第一步,制备所述药物饲料添加剂;
第二步,将饲料原料中其他原料组分与第一步获得的所述药物饲料添加剂一起放入饲料搅拌机中,连续均匀搅拌1~3小时后,放入粉碎机中进行粉碎,获得饲料。
各原料药的药理如下:
芡实:味甘,涩,性平。归脾、肾经。具有益肾固精,补脾止泻,祛湿止带的功能,主治梦遗滑精,脾虚泄泻,脾虚白浊,带下等证。
红景天:味甘,苦,性平,归肺、心经,具有益气活血,通脉平喘的功效,用于气虚血瘀,胸痹心痛,中风偏瘫,倦怠气喘等证。
刺五加:为五加科五加属植物刺五加的根、根茎或茎叶,拉丁名Acanthopanacis Senticosi Radix et Rhizoma seu Caulis,味辛、苦、微甘,性温,入脾、肾、心经,具有益气健脾,补肾安神,祛风除湿的功效,用于风寒湿痹、腰膝疼痛、筋骨痿软、行动迟缓、体虚羸弱、跌打损伤、骨折、水肿、脚气、阴下湿痒等证。
鸡血藤:拉丁名spatholobi caulis,味苦、甘,性温,归肝、肾经,具有扩张血管,补血活血,调经,舒筋活络的功效,主治血虚有淤之月经不调,四肢疼痛不仁,腰膝酸软、疼痛等证。
土党参:拉丁名radix campanumoea javanicae,为桔梗科金钱豹属植物大花金钱豹与金钱豹的根,味甘,性平,归肺、脾经,具有健脾益气、补肺止咳,下乳的功效,主治劳虚内伤,气虚乏力,心悸,多汗,脾虚泄泻,白带,乳汁稀少,脾虚咳嗽等证。
黄精:味甘,性平,入肺、脾、肾经,具有养气养阴,健脾润肺,益肾填精的功效,用于脾胃气阴亏虚,食少无力,阴虚肺燥,干咳少痰,阴虚内热之消渴,肾虚精亏、阳痿遗精、头晕耳鸣、目昏眼花等证。
木蝴蝶:紫葳科植物木蝴蝶的干燥成熟种子,味苦、甘,性凉,归肺、肝、胃经,具有清肺利湿,疏肝和胃的功效,主治肺热咳嗽,喉痹,喑哑,肝胃气痛等证。
龙脷叶:大戟科植物龙脷叶的干燥叶,味甘、淡,性平,归肺、胃经,具有润肺止咳,通便的功效,主治肺燥咳嗽,咽痛失音,便秘等证。
北沙参:味甘、微苦,性微寒,归肺、胃经,具有养阴清肺,益胃生津的功效,主治肺热咳嗽,劳咳痰血,胃阴不足,热病津伤,咽干口渴等证。
垂盆草:景天科植物垂盆草的干燥全草,味甘、淡,性凉,归肝、胆、小肠经,具有利湿退黄,清热解毒的功效,主治湿热黄疸,小便不利,痈肿疮疡等证。
虎杖:拉丁名Polygoni Cuspidati Rhizoma et Radix,味微苦,性微寒,归肝、胆、肺经,具有清热解毒,利胆退黄,祛风利湿,散瘀定痛,止咳化痰的功效,用于关节痹痛,湿热黄疸,经闭,癓瘕,咳嗽痰多,水火烫伤,跌扑损伤,痈肿疮毒等证。
委陵菜:蔷薇科植物委陵菜的干燥全草,味苦,性寒,归肝、大肠经,具有清热解毒,凉血止痢的功效,主治赤痢腹痛,久痢不止,痔疮出血,痈肿疮毒等证。
金龙胆草:为菊科植物苦蒿的干燥地上部分,味苦,性寒,归肺、肝经,具有清热化痰,止咳平喘,解毒利湿,凉血止血的功效,主治肺热咳嗽,痰多气喘,咽痛,口疮,湿热黄疸,便血,崩漏,外伤出血等证。
狗脊:为蚌壳蕨科植物金毛狗脊的干燥根茎,味苦、甘,性温,归肝、肾经,具有祛风湿,补肝肾,强腰膝的功效,主治风湿痹痛,腰膝酸软,下肢无力等证。
贯筋藤:为萝藦科南山藤属植物贯筋藤的全株,味微苦,性平,具有祛风、利湿,淋病,水肿,乳汁不下,外伤骨折等证。
元宝草:为藤黄科金丝桃属植物元宝草的全草,味苦,辛,性寒,归肝、脾经,具有凉血解毒,活血调经,祛风通络的功效,主治各种出血,肠炎痢疾,乳痈,痈肿疔毒,烫伤,蛇咬伤,月经不调,痛经,白带,跌打损伤,风湿痹痛,口疮等证。
桑寄生:味苦,甘,性平,入肝、肾经,具有补肝肾、强筋骨、祛风湿、安胎元的作用,用于肝肾不足所致的腰酸疼痛,筋骨痿软,足膝无力,肝肾不足,精血虚亏,胎元不固之胎动不安,腰腹疼痛等证。
山大黄:拉丁名Radix et Rhizome Rhei Franzenbachii,为蓼科植物波叶大黄的根及根茎,味苦;性寒,归胃;大肠经,具有泻热解毒;凉血行瘀的功效,主治湿热黄疸;痢疾;经闭腹痛;吐血衄血;跌打瘀痛;痈肿疔毒;口舌糜烂;烧烫伤等证。
豨莶草:拉丁名Siegesbeckiae Herba,味寒、辛、苦,归肝经、肾经,具有祛风湿,利关节,解毒的功效,主治风湿痹痛、筋骨无力、腰膝酸软、四肢麻痹、半身不遂、风疹湿疮等证。
蓍草:味辛;苦;性平温,具有祛风止痛;活血解毒的功效,主治感冒发热;头风痛;牙痛;风湿痹痛;血瘀经闭;腹部痞块;跌打损伤;毒蛇咬伤;痈肿疮毒等证。
山白菊:味苦、辛,性凉,具有清热解毒,祛痰凉血的功效,主治感冒发热,扁桃体炎,支气管炎,肝炎,肠炎,热淋,痈肿疔毒,蛇虫咬伤等证。
积雪草:味苦,辛,性凉,归肝,胆,膀胱经,具有利湿通淋,清热解毒,散瘀消肿的功效,主治湿热黄疸,中暑腹泻,石淋血淋,痈肿疮毒,跌扑损伤等证。
以下采用实施例来详细说明本发明的实施方式,借此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题,并达成技术效果的实现过程能充分理解并据以实施。
实施例1药物饲料添加剂1
将芡实40g、刺五加40g、土党参35g、黄精40g、北沙参30g、金龙胆草30g、狗脊25g、元宝草35g、桑寄生35g、山大黄30g、豨莶草15g、蓍草25g、山白菊20g和积雪草20g分别粉碎,按比例混合,混合物装入渗漉筒中,每500g加入醇浓度为90%的乙醇1000g,在45℃的条件下浸泡30小时,调节渗漉筒阀门,使白酒药液慢慢滴出,滴出速度为每分钟3mL,至滴出的颜色透明为止,收集滴出的滴出液,得渗漉液,浓缩,除去白酒,干燥,粉碎,获得第一粉末;将红景天30g、鸡血藤25g、木蝴蝶20g、龙脷叶20g、虎杖35g、垂盆草25g、委陵菜20g、贯筋藤30g分别粉碎成粉末,送入搅拌机中混合,获得混合物,每100g混合物,加入600g的水,煮沸4小时,过滤,获得第一滤液,滤渣再次加入300g的水,再次煮沸2小时,过滤,获得第二滤液,将第一滤液和第二滤液混合,浓缩除去水溶剂,粉碎,干燥,获得干燥的第二粉末;将第一粉末和第二粉末混合,随后以质量比1∶1的比例加入玉米芯粉,搅拌均匀,即为药物饲料添加剂1。
实施例2药物饲料添加剂2
将芡实38g、刺五加38g、土党参33g、黄精38g、北沙参28g、金龙胆草28g、狗脊23g、元宝草33g、桑寄生33g、山大黄28g、豨莶草13g、蓍草23g、山白菊18g和积雪草18g分别粉碎,按比例混合,混合物装入渗漉筒中,每500g加入醇浓度为90%的乙醇1000g,在45℃的条件下浸泡30小时,调节渗漉筒阀门,使白酒药液慢慢滴出,滴出速度为每分钟3mL,至滴出的颜色透明为止,收集滴出的滴出液,得渗漉液,浓缩,除去白酒,干燥,粉碎,获得第一粉末;将红景天28g、鸡血藤23g、木蝴蝶18g、龙脷叶18g、虎杖33g、垂盆草23g、委陵菜18g、贯筋藤28g分别粉碎成粉末,送入搅拌机中混合,获得混合物,每100g混合物,加入600g的水,煮沸4小时,过滤,获得第一滤液,滤渣再次加入300g的水,再次煮沸2小时,过滤,获得第二滤液,将第一滤液和第二滤液混合,浓缩除去水溶剂,粉碎,干燥,获得干燥的第二粉末;将第一粉末和第二粉末混合,随后以质量比1∶1的比例加入玉米芯粉,搅拌均匀,即为药物饲料添加剂2。
实施例3药物饲料添加剂3
将芡实42g、刺五加42g、土党参37g、黄精42g、北沙参32g、金龙胆草32g、狗脊27g、元宝草37g、桑寄生37g、山大黄32g、豨莶草17g、蓍草27g、山白菊22g和积雪草22g分别粉碎,按比例混合,混合物装入渗漉筒中,每500g加入醇浓度为90%的乙醇1000g,在45℃的条件下浸泡30小时,调节渗漉筒阀门,使白酒药液慢慢滴出,滴出速度为每分钟3mL,至滴出的颜色透明为止,收集滴出的滴出液,得渗漉液,浓缩,除去白酒,干燥,粉碎,获得第一粉末;将红景天32g、鸡血藤27g、木蝴蝶22g、龙脷叶22g、虎杖37g、垂盆草27g、委陵菜22g、贯筋藤32g分别粉碎成粉末,送入搅拌机中混合,获得混合物,每100g混合物,加入600g的水,煮沸4小时,过滤,获得第一滤液,滤渣再次加入300g的水,再次煮沸2小时,过滤,获得第二滤液,将第一滤液和第二滤液混合,浓缩除去水溶剂,粉碎,干燥,获得干燥的第二粉末;将第一粉末和第二粉末混合,随后以质量比1∶1的比例加入玉米芯粉,搅拌均匀,即为药物饲料添加剂3。
实施例4药理学毒性试验
急性毒性试验资料
检测试剂
血清AST、ALT检测试剂盒购自青岛瑞生生物科技有限公司。
检测设备
Micro-200半自动生化检测仪,分析天平,解剖器械,注射器,试管等。
试验方法
经3天的适应性饲养后,随机均分为3组(雌雄各半),每组各20只;对照组、2个不同药物组(分别为400g/kg体重,300g/kg体重),对照组灌胃生理盐水,2个药物组灌胃本发明实施例1制备的中药组合物饲料添加剂1,将中药组合物饲料添加剂溶解在水中灌服小鼠。
测定指标及方法
(1)临床症状观察:每日观察试验鼠的精神状态、饮食情况,每日记录发病死亡情况。
(2)病理学观察:对于死亡鼠进行剖检观察内脏变化。
(3)生长指标观察:对试验鼠进行定期称重;试验结束,扑杀鼠称量体重、脏器重脏器指数测定:剖检大鼠,取心脏、脾脏、肝脏、肾脏、睾丸、卵巢,称重,按照下式计算脏器指数:脏器指数=脏器重/体重×100。
(4)肝脏功能变化观察:试验结束后,扑杀鼠,采取血液分离血清,测定AST、ALT。
数据处理与分析
各组数据均用均数土标准差表示,各组均数作正态性检验及重复测量方差齐性检验,以单因素方差分析进行组间比较仔检验),P<0.05为相差显著,P<0.01为相差非常显著。统计计算均采用SPSS12.0软件完成。
临床症状观察
对照组和试验组鼠,精神状态和饮食欲、对外界反应能力未见明显的异常。各组鼠发病和死亡情况如下表1。
表1
分组 |
总数 |
死亡(只) |
死亡率(%) |
1(400g/kg) |
20 |
0 |
0 |
2(300g/kg) |
20 |
0 |
0 |
对照组 |
20 |
0 |
0 |
病理学观察:对照组和试验组,鼠扑杀后进行剖检眼观未见观察内脏器官明显的病理变化。
生长指标观察:试验结束,扑杀鼠称量体重、脏器重分析见表2。
表2
分组 |
肝脏指数 |
心脏指数 |
肾脏指数 |
肺脏指数 |
脾脏指数 |
1(400g/kg) |
5.79±0.22 |
0.83±0.08 |
1.23±0.21 |
0.72±0.09 |
0.51±0.06 |
2(300g/kg) |
5.73±0.17 |
0.80±0.11 |
1.21±0.19 |
0.74±0.12 |
0.52±0.08 |
对照组 |
5.72±0.25 |
0.82±0.09 |
1.26±0.25 |
0.73±0.10 |
0.50±0.05 |
肝脏功能变化观察
试验结束后,扑杀鼠,采取血液分离血清,测定AST(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)见表3。结果显示各组数据与健康对照组相比差异不显著,都处于正常范围内。
表3
分组 |
总数 |
ALT |
AST |
1(400g/kg) |
20 |
30.91±2.17 |
132.11±10.32 |
2(300g/kg) |
20 |
32.63±2.53 |
130.57±9.96 |
对照组 |
20 |
31.97±2.09 |
131.91±12.03 |
长期毒性试验资料
根据实施例1制备的本发明中药组合物饲料添加剂20g/kg、100g/kg给大鼠连续灌胃给药3个月,动物的皮毛、肤色、摄食、活动、尿、便等均无异常动物的血常规、肝、肾功能等血液生化指标和动物的主要脏器指数均在正常范围,且正常动力无差异病理组织学检查表明,心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、气管、睾丸、卵巢等重要脏器无病理改变。停药两周后检查以上各项指标均无明显毒性反应,表明无蓄积毒性。
急性毒性试验资料
检测试剂
血清AST、ALT检测试剂盒购自青岛瑞生生物科技有限公司。
检测设备
Micro-200半自动生化检测仪,分析天平,解剖器械,注射器,试管等。
试验方法
经3天的适应性饲养后,随机均分为3组(雌雄各半),每组各20只;对照组、2个不同药物组(分别为400g/kg体重,300g/kg体重),对照组灌胃生理盐水,2个药物组灌胃本发明实施例1制备的药物饲料添加剂1,将中药组合物饲料添加剂溶解在水中灌服小鼠。
测定指标及方法
(1)临床症状观察:每日观察试验鼠的精神状态、饮食情况,每日记录发病死亡情况。
(2)病理学观察:对于死亡鼠进行剖检观察内脏变化。
(3)生长指标观察:对试验鼠进行定期称重;试验结束,扑杀鼠称量体重、脏器重脏器指数测定:剖检大鼠,取心脏、脾脏、肝脏、肾脏、睾丸、卵巢,称重,按照下式计算脏器指数:脏器指数=脏器重/体重×100。
(4)肝脏功能变化观察:试验结束后,扑杀鼠,采取血液分离血清,测定AST、ALT。
数据处理与分析
各组数据均用均数土标准差表示,各组均数作正态性检验及重复测量方差齐性检验,以单因素方差分析进行组间比较仔检验),P<0.05为相差显著,P<0.01为相差非常显著。统计计算均采用SPSS12.0软件完成。
临床症状观察
对照组和试验组鼠,精神状态和饮食欲、对外界反应能力未见明显的异常。各组鼠发病和死亡情况如下表1。
表1
分组 |
总数 |
死亡(只) |
死亡率(%) |
1(400g/kg) |
20 |
0 |
0 |
2(300g/kg) |
20 |
0 |
0 |
对照组 |
20 |
0 |
0 |
病理学观察:对照组和试验组,鼠扑杀后进行剖检眼观未见观察内脏器官明显的病理变化。
生长指标观察:试验结束,扑杀鼠称量体重、脏器重分析见表2。
表2
分组 |
肝脏指数 |
心脏指数 |
肾脏指数 |
肺脏指数 |
脾脏指数 |
1(400g/kg) |
5.61±0.17 |
0.80±0.09 |
1.20±0.19 |
0.73±0.11 |
0.50±0.03 |
2(300g/kg) |
5.65±0.31 |
0.81±0.13 |
1.22±0.26 |
0.68±0.09 |
0.51±0.05 |
对照组 |
5.63±0.22 |
0.78±0.06 |
1.23±0.21 |
0.70±0.21 |
0.48±0.03 |
肝脏功能变化观察
试验结束后,扑杀鼠,采取血液分离血清,测定AST(谷草转氨酶)、ALT(谷丙转氨酶)见表3。结果显示各组数据与健康对照组相比差异不显著,都处于正常范围内。
表3
分组 |
总数 |
ALT |
AST |
1(400g/kg) |
20 |
30.61±1.36 |
130.62±8.29 |
2(300g/kg) |
20 |
31.03±1.99 |
131.27±7.26 |
对照组 |
20 |
30.23±1.76 |
130.27±9.23 |
长期毒性试验资料
根据实施例1制备的本发明中药组合物饲料添加剂20g/kg、100g/kg给大鼠连续灌胃给药3个月,动物的皮毛、肤色、摄食、活动、尿、便等均无异常动物的血常规、肝、肾功能等血液生化指标和动物的主要脏器指数均在正常范围,且正常动力无差异病理组织学检查表明,心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、气管、睾丸、卵巢等重要脏器无病理改变。停药两周后检查以上各项指标均无明显毒性反应,表明无蓄积毒性。
实施例5饲料1
将玉米7.5kg、豆粕1.8kg、食盐0.2kg、鱼粉0.6kg、豆油1kg、蛋氨酸0.01kg、赖氨酸0.01kg、色氨酸0.01kg、维生素A 0.01kg、维生素E 0.01kg、维生素C 0.01kg、0.2kg药物饲料添加剂1一起放入饲料搅拌机中,连续均匀搅拌3小时后,放入粉碎机中进行粉碎,获得饲料1。
比较例1饲料2
将玉米7.5kg、豆粕1.8kg、食盐0.2kg、鱼粉0.6kg、豆油1kg、蛋氨酸0.01kg、赖氨酸0.01kg、色氨酸0.01kg、维生素A 0.01kg、维生素E 0.01kg、维生素C 0.01kg一起放入饲料搅拌机中,连续均匀搅拌3小时后,放入粉碎机中进行粉碎,获得饲料2。
免疫力效果试验
试剂和仪器
绵羊红细胞悬液,肝素钠,Hank’s液,Ficoll(GE Healthcare),RPMI 1640,MTT液,PBS,SDS液,显微镜CX31-32C02(奥林巴斯),电子天平BT125D(赛多利斯),离心机2-16p(Sigma),CO2培养箱C150(Binder),紫外可见分光光度计UV-1240(岛津)。
动物试验设计
试验动物为相同饲养条件的300头28日龄杜洛克×长白×大三元杂交仔猪,初始体重相接近,组间差异不显著。随机分为3组,试验组喂食实施例5制备的饲料1、对照1组仅喂食比较例1制备的饲料2、对照2组喂食比较例1制备的饲料2,饲料中添加常规抗生素和化学药物。所有仔猪于28日龄当天经耳静脉注入5mL 1.0%绵羊红细胞悬液,试验期14d。
饲养管理
猪舍、饲养条件、卫生环境、饲料品质及其他饲养管理等均相同,自由采食和饮水。
血样采集
血样采集采取三次采血的方式,即试验前、试验7d后、试验14d后。采血时间:清晨空腹。分别从3组活体经耳静脉采血少量,经颈静脉采血8~10mL(加1%肝素钠抗凝)。
检测项目和方法
中性粒细胞及外周血淋巴细胞百分数的测定
耳静脉血进行常规的白细胞分类计数。
绵羊红细胞抗体效价的测定
耳静脉血用常规微量法血凝试验测定仔猪绵羊红细胞抗体效价(绵羊红细胞浓度为1.0%)。
血清γ-球蛋白含量的测定
耳静脉血分离血清,醋酸纤维薄膜电泳法分离血清中各蛋白组分,染色、洗脱后于分光光度计上620nm测定OD值,测γ-球蛋白相对含量。
外周血中单核细胞增殖率的测定
肝素钠抗凝血液Hank’s液稀释后,加入Ficoll分离液(GE Healthcare),2000r/min水平离心30min。小心吸取单个核细胞界面层,Hank’s液洗涤2次,以RPMI 1640完全培养液调整细胞浓度为2×106/mL,加入40孔无菌细胞培养板,每孔加入细胞悬液0.1mL,并加入含有或不含有PHA的RPMI1640完全培养液(终浓度10μg/mL),以作刺激转化或自发转化对照,每份样品加3孔。置37℃、5%CO2培养箱培养66h,然后加入MTT液(PBS配制,pH 7.2)使其终浓度为0.5mg/mL。继续培养6h,再加入20%SDS液(含50%二甲基酰胺,pH 4.7),37℃作用12h,于分光光度计上570nm处测OD值。
数据处理
计量资料采用表示,组间比较采用χ2检验,所有资料均采用SPSS 12.0统计软件处理。
结果
药物饲料添加剂对仔猪中性粒细胞及外周血淋巴细胞百分数的影响,结果见表1。
表1对仔猪中性粒细胞及外周血淋巴细胞百分数的影响/%
从表1可以看出,采用本发明提供的药物饲料添加剂可以显著提高仔猪血液系统中中性粒细胞显著增加,淋巴细胞显著下降,比抗生素及化学药效果更好。
药物饲料添加剂对仔猪绵羊红细胞抗体效价的影响,结果见表2。
表2对仔猪血清绵羊红细胞抗体效价(log2)的影响
试验时间/d |
对照1组 |
对照2组 |
试验组 |
0 |
0.19±0.004 |
0.20±0.002 |
0.19±0.002 |
7 |
4.49±0.051 |
3.53±0.052 |
4.39±0.037 |
14 |
4.53±0.047 |
4.10±0.061 |
5.57±0.049 |
试验结果表明,采用本发明提供的药物饲料添加剂能够显著提高仔猪的免疫应答反应。
药物饲料添加剂对仔猪血清γ-球蛋白含量(OD值)的影响,结果见表3。
表3对仔猪血清γ-球蛋白含量(OD值)的影响
试验时间/d |
对照1组 |
对照2组 |
试验组 |
0 |
23.17±0.16 |
23.11±0.32 |
23.52±0.40 |
7 |
23.05±0.63 |
22.61±0.19 |
23.06±0.51 |
14 |
23.23±0.22 |
22.96±0.39 |
24.92±0.33 |
试验结果表明,采用本发明提供的药物饲料添加剂能够增强仔猪免疫力。
药物饲料添加剂对仔猪外周血中单核细胞增殖率(OD值)的影响,结果见表4。
表4对仔猪外周血中单核细胞增殖率(OD值)的影响
试验时间/d |
对照1组 |
对照2组 |
试验组 |
0 |
0.58±0.0013 |
0.59±0.0011 |
0.59±0.0012 |
7 |
0.56±0.0021 |
0.36±0.0015 |
0.55±0.0023 |
14 |
0.52±0.0016 |
0.39±0.0020 |
0.53±0.0022 |
试验结果可知,采用传统的化学药和抗生素显著降低了外周血单核细胞增值率,试验组外周血单核细胞增值率与对照1组无显著差别。
所有上述的首要实施这一知识产权,并没有设定限制其他形式的实施这种新产品和/或新方法。本领域技术人员将利用这一重要信息,上述内容修改,以实现类似的执行情况。但是,所有修改或改造基于本发明新产品属于保留的权利。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例而已,并非是对本发明作其它形式的限制,任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容,依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型,仍属于本发明技术方案的保护范围。