CN104222023A - 一种斯氏线虫大批量繁殖培育方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，包括以下步骤:将斯氏线虫接种于食用肉虫体内，培养温度为22-26℃，培养的相对湿度为70-90％,控湿用的雾水的pH值为4.5-4.6；培养220-260小时后，在接种斯氏线虫成功的食用肉虫中加入重量浓度为6-8‰的甲醛溶液，将接种斯氏线虫成功的食用肉虫完全浸泡于所述甲醛溶液中,放置15-20分钟；灌入离心管，分离温度为28℃，分离出嗜虫线虫。采用食用肉虫繁殖培育斯氏线虫，繁殖培育方法简单，通过严格控制每条食用肉虫的接种量，提高斯氏线虫接种的成功率，通过在斯氏线虫的培养过程中加入含甲醛的溶液使得嗜虫线虫的产出量倍增。培育出的嗜虫线虫携带含生物药物素的杆菌，杀虫率大幅提高，可高达95％以上。

Description

一种斯氏线虫大批量繁殖培育方法

技术领域

本发明涉及斯氏线虫繁殖培育领域，特别是一种斯氏线虫大批量繁殖培育方法。 

背景技术

目前人们主要通过使用农药来防治各种病害，斯氏线虫作为一种理想的生物杀虫剂，具有以下优点：对植食性昆虫幼虫专性寄生，寄主范围广；对寄主植食性昆虫幼虫具有主动搜寻能力，能够以人工培养基低成本大量培养；田间施用时可和许多化学农药混合使用，对人畜、植物及有益生物及环境安全。由于斯氏斯氏线虫属于环境友好的生物天敌，繁殖培育成本低。 

目前斯氏斯氏线虫的繁殖产量低，繁殖培育出的斯氏线虫杀虫率不高。 

发明内容

本发明的目的是提出一种斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，解决了现有技术中斯氏线虫繁殖培育的周期长、成本高、活性度低、繁殖产量低的问题，同时也解决了繁殖培育出的斯氏线虫杀虫率不高以及杀虫范围单一的问题。 

本发明的技术方案是这样实现的：一种斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，包括以下步骤: 

将斯氏线虫接种于食用肉虫体内，培养温度为22-26℃，培养的相对湿度为70-90％,控湿用的雾水的pH值为4.5-4.6；培养220-260小时后，在接种斯氏线虫成功的食用肉虫中加入重量浓度为6-8‰的甲醛溶液，将接种斯氏线虫成功的食用肉虫完全浸泡于所述甲醛溶液中,放置15-20分钟；灌入离心管，分离温度为28℃，分离出嗜虫线虫。 

所述嗜虫线虫与杆菌是共生体，繁殖培育出的嗜虫线虫携带含生物药物素的杆菌，杀虫率大幅提高，可高达95％以上。 

所述嗜虫线虫为斯氏线虫的一种，所述嗜虫线虫攻击植食性昆虫、是对人类有益的线虫；所述嗜虫线虫具有杀虫率高，杀虫范围广的特点。 

通过加入甲醛溶液可以使斯氏线虫的繁殖量倍增，物化成本和劳动成本减半。若全用蒸馏水代替甲醛，嗜虫线虫的产出量只有该方法产出量的一半。 

优选的，用食用肉虫培育的所述斯氏线虫，其活性度高于其他线虫。 

优选的，每一条食用肉虫的斯氏线虫接种量为18-22尾，接种量过低或者过高都会影响斯氏线虫的接种成功率。通过对斯氏线虫接种量的控制，使斯氏线虫成功接种到食用肉虫中，使接种斯氏线虫的成功率大大增加。 

优选的，所述斯氏线虫为小卷蛾斯氏线虫、嗜菌异小杆线虫中的一种或两种。 

优选的，所述控湿用的雾水中加入了杆菌，所述杆菌含有生物药物素。 

本发明的有益效果为：采用食用肉虫繁殖培育斯氏线虫，繁殖培育方法简单，通过严格控制每条食用肉虫的斯氏线虫接种量，提高斯氏线虫接种的成功率，通过在斯氏线虫的培养过程中加入甲醛溶液使得嗜虫线虫的产出量倍增。通过所述斯氏线虫的大批量繁殖培育方法培育出的嗜虫线虫携带含生物药物素的杆菌，杀虫率大幅提高，可高达95％以上，同时所述嗜虫线虫防治害虫范围广，可以防治多种害虫。 

具体实施方式

为更好地理解本发明，下面通过以下实施例对本发明作进一步具体的阐述，但不可理解为对本发明的限定，对于本领域的技术人员根据上述发明内容所作的一些非本质的改进与调整，也视为落在本发明的保护范围内。 

所述斯氏线虫，在水中呈悬浮液；10倍放大镜下清晰可见。显微镜下不透明，油脂光泽,呈棕褐色，身长0.3-0.5毫米；生存温度2℃-28.9℃，理想的生存条件为24℃。它们结构简单，成虫由约1,000个单细胞组成。其中，数百个单细胞为其生殖系统：以其管内套管为特征，消化系统由前端的嘴延伸至近尾 巴的肛门。它有消化系统、神经系统、排泄系统和生殖系统，却无循环系统和呼吸系统。斯氏线虫的生活周期主要有三个形式：卵、幼虫(其中分四阶段)、成虫(分雌雄)。其幼虫的第三个阶段是唯一生长在土壤中的阶段，其它阶段都是寄生在害虫寄主体内；在寄主体内它们发育成成虫。 

所述斯氏斯氏线虫的灭虫方式： 

斯氏线虫与杆菌是共生体，当线虫从害虫的气孔、口部或肛门进入虫体内，便释放出共生的杆菌，二至三天后，昆虫便因受杆菌感染死亡。斯氏线虫在死虫体内发育成熟并繁殖，以害虫虫体为食粮。食物消耗殆尽时，感染期斯氏线虫便再进入泥土内寻觅新寄主；而害虫体群逐渐被消灭后，斯氏线虫就会死亡。 

所述斯氏线虫的安全性： 

斯氏线虫是一种只侵袭及寄生于植食性昆虫体内的线虫，不会感染其他生物；因此对人畜、野生动物和环境等不会构成不良影响。在斯氏线虫内的共生菌对人类和其他生物无害、但当斯氏线虫一旦进入虫体时，共生菌就会很快令害虫发病致死。使用这些斯氏线虫来防治农林作物害虫，不会导致有农药残余问题；除此之外，害虫对斯氏线虫产生抗性的机会也甚微。 

实施例1 

根据本发明提供的内容，发明人繁殖培育出嗜虫线虫1，繁殖培育方法如下： 

将小卷蛾斯氏线虫接种于食用肉虫体内，培养温度为22℃，培养的相对湿度为70％,控湿用的雾水的pH值为4.5；培养220小时后，在接种小卷蛾斯氏线虫成功的食用肉虫中加入重量浓度为6‰的甲醛溶液，将接种小卷蛾斯氏线虫成功的食用肉虫完全浸泡于所述甲醛溶液中,放置15分钟；灌入离心管，分离温度为28℃，分离出嗜虫线虫1，每条食用肉虫中产出100000尾嗜虫线虫1。 

实施例2 

根据本发明提供的内容，发明人繁殖培育出嗜虫线虫2，繁殖培育方法如下： 

将小卷蛾斯氏线虫接种于食用肉虫体内，培养温度为24℃，培养的相对湿度为80％,控湿用的雾水的pH值为4.6；培养260小时后，在接种小卷蛾斯氏线虫成功的食用肉虫中加入重量浓度为7‰的甲醛溶液，将接种小卷蛾斯氏线虫成功的食用肉虫完全浸泡于所述甲醛溶液中,放置18分钟；灌入离心管，分离温度为28℃，分离出嗜虫线虫2，每条食用肉虫中产出80000尾嗜虫线虫2。 

实施例3 

根据本发明提供的内容，发明人繁殖培育出嗜虫线虫3，繁殖培育方法如下： 

将小卷蛾斯氏线虫接种于食用肉虫体内，培养温度为26℃，培养的相对湿度为90％,控湿用的雾水的pH值为4.5；培养240小时后，在接种小卷蛾斯氏线虫成功的食用肉虫中加入重量浓度为8‰的甲醛溶液，将接种小卷蛾斯氏线虫成功的食用肉虫完全浸泡于所述甲醛溶液中,放置20分钟；灌入离心管，分离温度为28℃，分离出嗜虫线虫3，每条食用肉虫中产出90000尾嗜虫线虫3。 

发明人用获得的嗜虫线虫1、嗜虫线虫2、嗜虫线虫3防治害虫，防治的害虫有以下一些： 

1、农作物(经济作物)害虫：玉米黏虫、大豆蚜虫和叶面蛀虫；小麦蚜虫、甘蔗蛾虫；烟草切根虫、根结线虫、地蚕、蘑菇切杆虫和山莓冠蛀虫、金针虫。 

2、林业(果树)害虫：白蚁、结网毛虫；桃(油桃、李)树蛀虫、葡萄黑粉虱、葡萄根瘤蚜。 

3、棉地害虫：棉铃虫、棉金刚钻和海灰翅夜蛾。 

4、蔬菜害虫：胡萝卜象鼻虫、各种菜蛆、甜菜粘虫、根结线虫、意大利瓜藤蔓蛀虫、螟虫、黄瓜等葫芦科植物(南瓜、笋瓜)绢野螟和大椒铃虫。 

5、草皮害虫：蛴螬、火蚂蚁、蝼蛄、玫瑰花甲虫、黏虫、葷蚊、跳蚤、苍蝇、蜱虫和铁线虫(金针虫)等。 

发明人测得嗜虫线虫1的杀虫率达到95.2％、嗜虫线虫2的杀虫率达到96％、嗜虫线虫3杀虫率达到95.8％。 

发明人用嗜菌异小杆线虫替代小卷蛾斯氏线虫做了相同的实验，实验获得的嗜虫线虫同样具有产出量高、活性度高、杀虫率高、杀虫范围广的特点。 

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。 

Claims (5)

1.一种斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，其特征在于包括以下步骤:

将斯氏线虫接种于食用肉虫体内，培养温度为22-26℃，培养的相对湿度为70-90％,控湿用的雾水的pH值为4.5-4.6；培养220-260小时后，在接种斯氏线虫成功的食用肉虫中加入重量浓度为6-8‰的甲醛溶液，将接种斯氏线虫成功的食用肉虫完全浸泡于所述甲醛溶液中,放置15-20分钟；灌入离心管，分离温度为28℃，分离出嗜虫线虫。

2.如权利要求1所述斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，其特征在于：用食用肉虫培育的所述斯氏线虫，其活性度高于其他线虫。

3.如权利要求1所述斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，其特征在于：每一条食用肉虫的斯氏线虫接种量为18-22尾。

4.如权利要求1或2或3或4所述斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，其特征在于：所述斯氏线虫为小卷蛾斯氏线虫、嗜菌异小杆线虫中的一种或两种。

5.如权利要求1所述斯氏线虫的大批量繁殖培育方法，其特征在于：所述控湿用的雾水中加入了杆菌，所述杆菌含有生物药物素。