CN104146142A

CN104146142A - 一种复合保健食品及其制备方法

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Publication number: CN104146142A
Application number: CN201410363129.9A
Authority: CN
Inventors: 叶春江; 姜均
Original assignee: SICHUAN ANYI BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Current assignee: SICHUAN ANYI BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority date: 2014-07-28
Filing date: 2014-07-28
Publication date: 2014-11-19

Abstract

本发明属于功能食品领域，具体涉及一种复合型天然发酵保健食品及其制备方法。包括丙酸杆菌发酵生物合成ALA、酿酒酵母发酵生物合成GSH、发酵液的浓缩、菌体重悬液均质、澄清、超滤、浓缩、干燥，制备益生菌来源的生物制品。

Description

一种复合保健食品及其制备方法

技术领域

本发明属于功能食品领域，涉及一种复合型天然发酵保健食品及其制备方法，具体涉及一种由益生菌发酵制备的复合保健食品及其制备方法。

背景技术

5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid，5-ALA)是生物体内吡咯类化合物(叶绿素、血红素、维生素B12等)生物合成的中间体。近年来，由于发现5-ALA在癌症诊断与治疗、生物除草、提高植物耐盐、抗冻性，及促进植物生长等领域具有重要的应用，因而对5-ALA的研究引起了极大的关注。同时，有研究表明微量的5-ALA具有促进血液再生、提高动物基础代谢率、促进增长和提高免疫力的作用，同时由于5-ALA是天然存在于生物体内的物质，因而适量的5-ALA对生物体没有任何毒副作用。专利“一种畜禽生长促进剂”(CN 102870970 A)公开了一种以5-ALA为主效成份的畜禽生长促进剂的组合(5-氨基乙酰丙酸、赖氨酸、辅酶Q10)；该组方能改善畜禽的体质，促进食欲，明显提高畜禽的生长及生产性能。

然而，由于化学合成5-ALA的过程极其复杂，因而5-ALA纯品价格十分昂贵。专利“一种盐酸氨基乙酰丙酸酯的制新工艺”(公开号102649769A)公开了一种利用3-(2-(N,N-二苄基氨基)乙酰)丙酸苄酯、甲醇和钯碳，制备盐酸氨基乙酰丙酸甲酯的方法。目前，虽然通过微生物发酵生物合成5-ALA是个不错的选择，但是其分离提取是目前尚未完全攻克的难题。目前，国内外学者，根据生物体中存在的两种5-ALA合成途径(C4和C5途径)，通过合成生物学的方法构建了大肠杆菌基因工程菌，通过发酵生物合成(转化)5-ALA，其主要操作对象是5-ALA合成酶(ALAS)。由于大肠杆菌本身的特点，决定了此种方法生产的5-ALA，只有精制后，才能得到广泛的应用。5-氨基乙酰丙酸是动物体内生物体合成血红素和维生素B12的前体物质。因而5-ALA能够促进血红蛋白合成，以及红细胞的发育和成熟，为机体充分的氧气运输和内环境的酸碱稳定起到了重要的作用，表现为对生长的促进作用和基础代谢率的提高。同时，补充ALA可以促进人体自身维生素B12的合成。

费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii)具有广泛的益生活性，并且一直应用于奶酪的生产。该菌所产生的二氧化碳形成了乳酪中的孔。同时，该菌发酵产生的丙酸造就了瑞士乳酪特有的口味。美国FDA早在70年代就将其归为可食用且安全的益生菌(GRAS)。研究表明费氏丙酸杆菌既具有生物合成5-ALA所需的C4途径又具有C5途径。只要培养基中存在合适的前体(琥珀酸和甘氨酸)，该菌就可以合成并在胞外积累5-ALA。同时，费氏丙酸杆菌在发酵工业中被用于制造丙酸和维生素B12。

谷胱甘肽(glutathione,GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸缩合形成的三肽，具有很多重要的生理活性，如抗氧化、激活硒在人体中的生理作用；同时可以保护肝脏，促进并提高视力；同时，谷胱甘肽还能抑制皮肤细胞中黑色素的形成，从而具有促进全身美白的功效。另外，谷胱甘肽在食品工业中也具有广泛的用途，可以有效改善和提高食品的风味及延长其保质期。谷胱甘肽能帮助保持正常的免疫系统的功能，并具有抗氧化作用和整合解毒作用，巯基(-SH)是谷胱甘肽的活性基团，GSH易与某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、芥子气、铅、汞、砷等重金属)等结合，而具有综合的细胞解毒能力。维生素C也是一种重要的抗氧化剂，其在体内许多氧化还原反应中有重要作用。维生素C能够通过保持巯基(-SH)处于还原状态而维持以-SH为活性中心酶的活性。维生素C可以使氧化型谷胱甘肽(GSSG)转化为还原型谷胱甘肽(GSH)，而且能将有机体代谢产生的过氧化氢(H₂O₂)还原。因此，维生素C与还原性谷胱甘肽组合，能够提高谷胱甘肽的功效。

酿酒酵母通常是天然谷胱甘肽的重要来源之一，同时酵母细胞中优质蛋白含量高达42％,其中含有多种维生素和人体必需氨基酸。千百年来，酵母一直是人类有效的营养补充剂和强化剂。美国、日本及欧洲一些国家在普通的粮食制品如面包、蛋糕、饼干等食品中加入5％左右的食用酵母粉(或酵母抽提物)以提高其营养价值。酵母自溶物可作为肉类、果酱、汤类、乳酪、面包类食品、蔬菜及调味料的添加剂；在婴幼儿食品和健康食品中作为营养强化剂。

目前5-氨基乙酰丙酸和谷胱甘肽的保健制品都采用纯品5-ALA和GSH，造成成本高，进而限制了其被人们广泛接受的不足；同时本领域一直缺乏一种简单、安全的将二者组合利用的生物制品。

发明内容

针对目前5-氨基乙酰丙酸和谷胱甘肽的保健制品都采用纯品5-ALA和GSH，造成成本高，难以被广大普通消费者接受的不足，同时本领域一直缺乏一种简单、安全的将二者组合利用的生物制品的现状，本发明的目的是提供一种由益生菌发酵制备的保健食品。该食品富含5-ALA和GSH，具有抗氧化功能，同时对酒精中毒、重金属中毒均具有缓解作用，能够保护肝脏、促进血液再生和提高人体基础代谢和抗疲劳等功效。

采用的技术方案是：

复合保健食品，包含5-氨基乙酰丙酸和谷胱甘肽，采用以下方法制备；

(1)5-氨基乙酰丙酸制备：培养基组成；酵母浸膏5～15g/L、大豆蛋白胨8～18g/L、乳酸钠20～35g/L，甘氨酸10～18g/L、琥珀酸2.8～5g/L、葡萄糖1～1.8g/L，pH7.2；培养基高压湿热灭菌后，接种1～10v/v％费氏丙酸杆菌培养液OD＝0.5～1.0进行厌氧发酵；培养温度为32±2℃，静态培养5～10天；发酵结束后，发酵液中5-氨基乙酰丙酸含量为8.0～15mg/L，获得原发酵液A。

(2)谷胱甘肽制备：培养基组成；磷酸8.0～14.0g/L、硫酸铵8.0～10.0g/L、硫酸镁2.0～5.0g/L、氯化钙0.1～0.4g/L、葡萄糖60.0～80.0g/L、谷氨酸1～4g/L、甘氨酸0.5～2.5g/L、半胱氨酸1.5～3.5g/L，pH5.0，培养基高压湿热灭菌后，，接种1～10v/v％酿酒酵母培养液OD＝1.0～20进行发酵；培养温度为29±1℃，培养时间60～80小时，发酵结束后酵母湿重为80～300g/L，谷胱甘肽发酵水平为100～300mg/L，获得发酵液B。

(3)发酵液A和发酵液B，经过固液分离、破壁、酶解、澄清、浓缩、调配后，制成品，其中每克制品中含5～20mg5-氨基乙酰丙酸和2～6mg谷胱甘肽，以保证足够的生物学活性，同时又能保证制备工艺的简易性。

更具体的，上述复合保健食品采用下述方法制备；

(1)5-氨基乙酰丙酸的制备；采用的培养基组成为：酵母浸膏5～15g/L、大豆蛋白胨8～18g/L、乳酸钠20～35g/L，甘氨酸10～18g/L、琥珀酸2.8～5g/L、葡萄糖1～1.8g/L，pH7.2；培养基高压湿热灭菌后，接种1～10％(v/v)费氏丙酸杆菌培养液(OD＝0.5～1.0)进行厌氧发酵；培养温度为32±2℃，静态培养5～10天；发酵结束后，发酵液中5-氨基乙酰丙酸含量为8.0～15mg/L，获得原发酵液A。

(2)谷胱甘肽的制备；培养基组成为：磷酸8.0～14.0g/L、硫酸铵8.0～10.0g/L、硫酸镁2.0～5.0g/L、氯化钙0.1～0.4g/L、葡萄糖60.0～80.0g/L、谷氨酸1～4g/L、甘氨酸0.5～2.5g/L、半胱氨酸1.5～3.5g/L，pH5.0，培养基高压湿热灭菌后，，接种1～10v/v％酿酒酵母培养液OD＝1.0～20进行发酵；培养温度为29±1℃，培养时间60～80小时，发酵结束后酵母湿重为80～300g/L，谷胱甘肽发酵水平为100～300mg/L，获得发酵液B。

(3)发酵液处理，取适量发酵液A，减压浓缩至原体积的1/3～1/6，获得浓缩发酵液C；取适量发酵液B,5000rpm离心3～5min，弃上清，获得湿酵母菌体D。

(4)以浓缩发酵液C重悬菌体沉淀D，其中C与D的体积比为10:1～10，混合、搅拌均匀，进行细胞破壁处理，得到均一的体系E。

(5)在E中加入有机酸溶液调节pH3.0～4.0，并搅拌均匀，获得均一体系F；

(6)向F体系中添加酸性蛋白酶，酸性蛋白酶与F体系的重量体积比w/v为0.00001～0.00005:1，保温50～60℃，并保持18～30小时，进行蛋白水解。

(7)将(6)中水解后的体系进行6000～12000rpm高速离心5～10min，除去细胞壁及变性蛋白，获得澄清体系。

(8)将澄清体系减压浓缩至固含物50～80％，获得粘稠均一体系G。

(9)将G与其他功能辅料调配，冷冻干燥至含水量6～9wt％的固形物H；

(10)将H压片或制备胶囊制得成品保健食品。

其中，步骤(5)中所述有机酸选自乳酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸之一或其组合。

步骤(9)中的所述辅料包括食品中可接受的粘合剂，调味剂，所述粘合剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:100，其粘合剂为羟丙甲纤维素。所述调味剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:10，其调味剂为果葡糖浆、麦芽糖糊精、赤藓糖醇之一或其组合物。

优选的，步骤(7)中得到的澄清体系在浓缩前先经过过有机超滤膜过滤，截留分子量10～100KD。

本发明的另一个目的是提供上述复合保健食品的制备方法，具体而言，本发明涉及含有5-ALA丙酸杆菌菌体及发酵液上清浓缩液与含有GSH酿酒酵母菌体混合后，添加辅料制备保健食品的方法，包括丙酸杆菌发酵生物合成ALA、酿酒酵母发酵生物合成GSH、发酵液的浓缩、菌体重悬液均质与澄清、超滤、浓缩、干燥，制备益生菌来源的生物制品。

复合保健品的制备方法，包含以下步骤；

更具体的，所述制备方法包括一下步骤：

(10)将H压片或制备胶囊制得成品保健食品。

其中步骤(5)中所述有机酸选自乳酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸之一或其组合。

步骤(9)中的所述辅料包括食品中可接受的粘合剂，调味剂，所述粘合剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:100，其粘合剂为羟丙甲纤维素；所述调味剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:10，其调味剂为果葡糖浆、麦芽糖糊精、赤藓糖醇之一或其组合物。

谷胱甘肽含量测定方法:

采用HPLC系统方法：柱子：C18，25cm×4.6mm，5μm；检测波长：200nm；流速：1.0ml/min。流动相为磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠缓冲液(称取0.05mol磷酸二氢钾和2.2g的庚烷磺酸钠，用纯化水配制成1L，用磷酸调至pH＝3.0)。发酵液的处理：取发酵液5ml在50ml容量瓶中加10ml纯化水，加2～3滴浓硫酸，摇匀，在100℃以上水溶液中快速加热到88℃，停留20s，取出快速冷却到室温，再用纯化水加到刻度，离心进样。谷胱甘肽标准溶液的配制：将50mg的标准品溶于50ml的HPLC级水中，用磷酸调pH至3.0以下，0～4℃保存。

本发明中5-ALA的测定方法如下：

5-ALA的检测方法根据Mauzerall和Granick的方法修改而来。反应体系中含有1ml离心后获得的上清液和0.5ml1％乙酰丙酮缓冲液(pH4.6)。将反应体系于100℃水浴中保持15分钟,然后冷却至室温，与1.5ml新鲜配制的Ehrlich’s试剂混合(1g对二甲胺基苯甲醛溶于42ml冰乙酸和8ml70％(v/v)高氯酸中)，并于室温下反应10分钟。于553nm波长下，测得吸光度,换算5-ALA的浓度。

本发明的有益效果：

5-ALA可提高机体基础代谢速率、促进新陈代谢，为有机体细胞提供更充足的营养而实现的抗衰老，但此过程中必然会产生更多的自由基类物质。而GSH可以有效清除自由基达到抗氧化、促进细胞排毒、进而延缓衰老的作用，二者相互协同，有益于人体稳恒态的维持，抵御亚健康。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。

实施例1

发酵培养：

在1升三角瓶中，装入800毫升纯净水配制培养基，其中含有如下成份：5.6克酵母浸膏、8克大豆蛋白胨、20克食品级乳酸钠、9克甘氨酸、3克琥珀酸、1.2克葡萄糖，pH7.2,115℃、高压湿热灭菌30min，自然冷却至室温，接种48ml的费氏丙酸杆菌培养液(OD＝0.8)；培养温度为33℃，静态培养6天，获得原发酵液A。

在2升三角瓶中，将4.5g磷酸、4.1g硫酸铵、1.78g硫酸镁、0.15g氯化钙、32g葡萄糖溶入420ml纯净水中，调pH至5.0，115℃高压湿热灭菌20min；同时将0.7g谷氨酸、0.34甘氨酸、0.5g半胱氨酸溶入80mL纯净水中，用0.22μm滤膜过滤除菌后，合并入盛有已灭菌培养液的2升三角瓶中。接种10ml的酿酒酵母发酵液(OD＝1.0)，于29±1℃、180rpm摇床转速下，连续培养50h，获得原发酵液B。

丙酸杆菌发酵结束时，细胞浓度(湿重)约为18g/L，5-ALA含量约为10mg/L。

酿酒酵母发酵结束时，细胞浓度(湿重)约为80g/L，GSH含量约为110mg/L。后处理过程：

1)将500ml发酵液A减压浓缩获得浓缩发酵液C120mL；取500ml发酵液B,6000rpm离心5min，弃上清，获得40克湿酵母菌体。

2)将湿酵母菌体D(40克)用浓缩发酵液C(120mL)重悬，混合、搅拌均匀，过高压均质机进行细胞破壁3次，压力为80MPa；得到均一的重量为175克的体系E。

3)在E中加入体积比1％的乳酸和重量比1％的柠檬酸，并搅拌均匀，获得均一体系F,180ml,其pH为3.1。

4)在F体系添加0.004克酸性蛋白酶(0.0022％(w/v))，保温55±1℃，并保持26小时，进行蛋白水解。

5)9000rpm高速离心8分钟，获得澄清体系，取上清液；弃去细胞壁及变性蛋白形成的沉淀。

6)将5)中的澄清体系过有机超滤膜，截留分子量10KD，进一步去除杂质；获得进一步澄清的体系，该步骤只是为了获得杂质更少的澄清体系，实际上也可以省略该步骤。

7)将6)中的澄清体系减压浓缩获得固含物80％(W/W)的粘稠均一体系G。

8)将G与麦芽糖糊精和羟丙甲纤维素按89:10:1(7g:0.8g:0.08g)混合调配,进行真空低温干燥至含水量为6％的固形物H。

9)将固形物H以制粒机造粒，然后经压片机压片制得成品，每片重1克。

实施例2

发酵培养：

在500mL三角瓶中，装入400mL纯净水配制的培养基，其中含有如下成份：6克酵母浸膏、8.3克大豆蛋白胨、11克食品级乳酸钠、5.8克甘氨酸、1.4克琥珀酸、0.8克葡萄糖，pH7.2,112℃、高压湿热灭菌35min，自然冷却至室温，接种16mL丙酸杆菌培养液(OD＝0.9)；培养温度为35℃，静态培养7天，发酵结束后，获得原发酵液A。

(在范围内，注意此处实际上是300ML培养基＝220+80)在1升三角瓶中，将3.2g磷酸、2.5g硫酸铵、1.1g硫酸镁、0.11g氯化钙、20g葡萄糖溶入220mL纯净水中，调pH至5.0，112℃高压湿热灭菌30min；同时将1.2g谷氨酸、0.6g甘氨酸、0.9g半胱氨酸溶入80mL纯净水中，用0.22μm滤膜过滤除菌后，合并入盛有已灭菌培养液的1升三角瓶中，即发酵体系为300mL。接种5％(V/V)的酿酒酵母种子液15mL，于29±1℃、200rpm摇床转速下，连续培养38h，获得原发酵液B。

丙酸杆菌发酵结束时，细胞浓度(湿重)约为19g/L，5-ALA含量约为12mg/L。

酿酒酵母发酵结束时，细胞浓度(湿重)约为86g/L，GSH含量约为132mg/L。后处理步骤：

1)将400mL发酵液A减压浓缩获得浓缩发酵液C80mL，；取300mL发酵液B,8000rpm离心3min，弃上清，获得25.8克湿酵母菌体D。

2)将湿酵母菌体D用浓缩发酵液C重悬，混合、搅拌均匀，过胶体磨进行细胞破壁3次；得到均一的体系E。

3)在E中加入0.7％(v/v)的苹果酸和1％(v/v)的柠檬酸溶液，并搅拌均匀，获得pH3.3的均一体系F，90mL。

4)在F体系添加0.005％(w/v)百分比的酸性蛋白酶0.45克，保温56±1℃，并保持10小时，进行蛋白水解。

5)10,000rpm高速离心6分钟，获得澄清体系，取上清液；弃去细胞壁及变性蛋白形成的沉淀。

6)将5)中的澄清体系过有机超滤膜，截留分子量100KD，进一步去除杂质；获得更为澄清的体系。

7)将6)中的澄清体系减压浓缩至固含物75％(w/w)的粘稠膏状物G。

8)将膏状物G与70％(w/v)果葡糖浆和羟丙甲纤维素按84.5:14.5:1重量比混合调配，进行真空干燥至含水量为7％的固形物H。

9)将固形物H以制粒机造粒，然后经压片机压片制得成品,每片重600mg。

实施例3

5-ALA发酵培养：

在3个2升三角瓶中，分别装入1.5升纯净水配制的培养基，其含9克酵母浸膏、13克大豆蛋白胨、45克食品级乳酸钠、24克甘氨酸、5.8克琥珀酸、2.25克葡萄糖，pH7.5,115℃、高压湿热灭菌30min，自然冷却至室温，接种90mL丙酸杆菌培养液(OD＝0.7)；培养温度为33℃，静态培养9天，发酵结束后，获得原发酵液A。

GSH发酵转化：

在7升发酵罐中，将50克磷酸、35克硫酸铵、12克硫酸镁、1克氯化钙、247克葡萄糖溶入3.8升纯净水中，调pH至5.0，115℃高压湿热灭菌28min；接种200mL酿酒酵母种子液(OD＝10)，于28±1℃、搅拌转速200-600rpm，连续培养32h。同时，将220克葡萄糖、6克硫酸铵、6克硫酸镁、0.8克氯化钙、18克谷氨酸、10克甘氨酸、13克半胱氨酸溶入800mL纯净水中，用0.22μm滤膜过滤除菌后，加入补料流加瓶中。发酵过程中溶氧保持大于20％，当发酵培养基中葡萄糖浓度低于0.5％时，开始流加补料培养基，直至补料完成，OD值回升，发酵结束，获得原发酵液B。

丙酸杆菌发酵结束时，细胞浓度(湿重)为22g/L，5-ALA含量为13mg/L。

酿酒酵母发酵结束时，细胞浓度(湿重)为200g/L，GSH含量为260mg/L。

ALA和谷胱甘肽酿酒酵母发酵液的处理和生物制品制备与实例1和实例2类似，不再赘述。

实施例4

如实施例3所述的5-ALA发酵培养。

在30升发酵罐中，装入12升培养基，首先将160克磷酸、96克硫酸铵、38克硫酸镁、3.5克氯化钙、720克葡萄糖溶入12升纯净水中，调pH至5.0，110℃高压湿热灭菌30min；接种800mL酿酒酵母种子液(OD＝15)，于28±1℃、搅拌转速200-600rpm，连续培养28h。同时，将600克葡萄糖、20克硫酸铵、20克硫酸镁、25克氯化钙、55克谷氨酸、33克甘氨酸、40克半胱氨酸溶入2.5升纯净水中，充分溶解，用0.22μm滤膜过滤除菌后，加入5升消毒后的补料流加瓶中。发酵过程中溶氧保持大于25％，当发酵培养基中葡萄糖浓度低于0.8％时，开始流加补料培养基，保持发酵液中糖浓度大于0.5％，直至补料完成，OD值回升，发酵结束，获得原发酵液B。

丙酸杆菌发酵结束时，细胞浓度(湿重)为25g/L，5-ALA含量为12mg/L。

酿酒酵母发酵结束时，细胞浓度(湿重)为260g/L，GSH含量为251mg/L。

5-ALA和谷胱甘肽酿酒酵母发酵液的处理和生物制品制备与实例1和实例2类似，不再赘述。

Claims

1.复合保健食品，其特征在于：包含5-氨基乙酰丙酸和谷胱甘肽，采用以下方法制备；

(1)5-氨基乙酰丙酸制备：培养基组成；酵母浸膏5～15g/L、大豆蛋白胨8～18g/L、乳酸钠20～35g/L，甘氨酸10～18g/L、琥珀酸2.8～5g/L、葡萄糖1～1.8g/L，pH7.2；培养基高压湿热灭菌后，接种1～10v/v％费氏丙酸杆菌培养液OD＝0.5～1.0进行厌氧发酵；培养温度为32±2℃，静态培养5～10天；发酵结束后，发酵液中5-氨基乙酰丙酸含量为8.0～15mg/L，获得原发酵液A；

(2)谷胱甘肽制备：培养基组成；磷酸8.0～14.0g/L、硫酸铵8.0～10.0g/L、硫酸镁2.0～5.0g/L、氯化钙0.1～0.4g/L、葡萄糖60.0～80.0g/L、谷氨酸1～4g/L、甘氨酸0.5～2.5g/L、半胱氨酸1.5～3.5g/L，pH5.0，培养基高压湿热灭菌后，，接种1～10v/v％酿酒酵母培养液OD＝1.0～20进行发酵；培养温度为29±1℃，培养时间60～80小时，发酵结束后酵母湿重为80～300g/L，谷胱甘肽发酵水平为100～300mg/L，获得发酵液B；

(3)发酵液A和发酵液B，经过固液分离、破壁、酶解、澄清、浓缩、调配后，制成品，其中每克制品中含5～20mg5-氨基乙酰丙酸和2～6mg谷胱甘肽。

2.如权利要求1中所述的复合保健食品，其特征在于：采用下述方法制备；

(1)5-氨基乙酰丙酸的制备；采用的培养基组成为：酵母浸膏5～15g/L、大豆蛋白胨8～18g/L、乳酸钠20～35g/L，甘氨酸10～18g/L、琥珀酸2.8～5g/L、葡萄糖1～1.8g/L，pH7.2；培养基高压湿热灭菌后，接种1～10v/v％费氏丙酸杆菌培养液OD＝0.5～1.0进行厌氧发酵；培养温度为32±2℃，静态培养5～10天；发酵结束后，发酵液中5-氨基乙酰丙酸含量为8.0～15mg/L，获得原发酵液A；

(2)谷胱甘肽的制备；培养基组成为：磷酸8.0～14.0g/L、硫酸铵8.0～10.0g/L、硫酸镁2.0～5.0g/L、氯化钙0.1～0.4g/L、葡萄糖60.0～80.0g/L、谷氨酸1～4g/L、甘氨酸0.5～2.5g/L、半胱氨酸1.5～3.5g/L，pH5.0，培养基高压湿热灭菌后，，接种1～10v/v％酿酒酵母培养液OD＝1.0～20进行发酵；培养温度为29±1℃，培养时间60～80小时，发酵结束后酵母湿重为80～300g/L，谷胱甘肽发酵水平为100～300mg/L，获得发酵液B；

(3)发酵液处理，取适量发酵液A，减压浓缩至原体积的1/3～1/6，获得浓缩发酵液C；取适量发酵液B,5000rpm离心3～5min，弃上清，获得湿酵母菌体D；

(4)以浓缩发酵液C重悬菌体沉淀D，其中C与D的体积比为10:1～10，混合、搅拌均匀，进行细胞破壁处理，得到均一的体系E；

(6)向F体系中添加酸性蛋白酶，酸性蛋白酶与F体系的重量体积比w/v为0.00001～0.00005:1，保温50～60℃，并保持18～30小时，进行蛋白水解；

(7)将(6)中水解后的体系进行6000～12000rpm高速离心5～10min，除去细胞壁及变性蛋白，获得澄清体系；

(8)将澄清体系减压浓缩至固含物50～80％，获得粘稠均一体系G；

(9)将G与其他功能辅料调配，冷冻干燥至含水量6～9w/w％的固形物H；

(10)将H压片或制备胶囊制得成品保健食品。

3.如权利要求2中所述的复合保健品，其特征在于：步骤(5)中所述有机酸选自乳酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸之一或其组合。

4.如权利要求2中所述的复合保健品，其特征在于：步骤(9)中的所述辅料包括食品中可接受的粘合剂，调味剂，所述粘合剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:100，其粘合剂为羟丙甲纤维素；所述调味剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:10，其调味剂为果葡糖浆、麦芽糖糊精、赤藓糖醇之一或其组合物。

5.如权利要求2中所述的复合保健品，其特征在于：优选的，步骤(7)中得到的澄清体系在浓缩前先经过过有机超滤膜过滤，截留分子量10～100KD。

6.如权利要求1-5中所述的复合保健品的制备方法，其特征在于：包含以下步骤；

(2)谷胱甘肽制备：培养基组成；磷酸8.0～14.0g/L、硫酸铵8.0～10.0g/L、硫酸镁2.0～5.0g/L、氯化钙0.1～0.4g/L、葡萄糖60.0～80.0g/L、谷氨酸1～4g/L、甘氨酸0.5～2.5g/L、半胱氨酸1.5～3.5g/L，pH5.0，培养基高压湿热灭菌后，，接种1～10 v/v％酿酒酵母培养液OD＝1.0～20进行发酵；培养温度为29±1℃，培养时间60～80小时，发酵结束后酵母湿重为80～300g/L，谷胱甘肽发酵水平为100～300mg/L，获得发酵液B；

7.如权利要求6中所述的制备方法，其特征在于：采用下述方法制备；

(1)5-氨基乙酰丙酸的制备；采用的培养基组成为：酵母浸膏5～15g/L、大豆蛋白胨8～18g/L、乳酸钠20～35g/L，甘氨酸10～18g/L、琥珀酸2.8～5g/L、葡萄糖1～1.8g/L，pH7.2；培养基高压湿热灭菌后，接种1～10％(v/v)费氏丙酸杆菌培养液(OD＝0.5～1.0)进行厌氧发酵；培养温度为32±2℃，静态培养5～10天；发酵结束后，发酵液中5-氨基乙酰丙酸含量为8.0～15mg/L，获得原发酵液A；

(10)将H压片或制备胶囊制得成品保健食品。

8.如权利要求7中所述的复合保健品，其特征在于：步骤(5)中所述有机酸选自乳酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸之一或其组合。

9.如权利要求7中所述的复合保健品，其特征在于：步骤(9)中的所述辅料包括食品中可接受的粘合剂，调味剂，所述粘合剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:100，其粘合剂为羟丙甲纤维素；所述调味剂在体系G中的重量体积比w/v为1～2:10，其调味剂为果葡糖浆、麦芽糖糊精、赤藓糖醇之一或其组合物。

10.如权利要求7中所述的复合保健品，其特征在于：优选的，步骤(7)中得到的澄清体系在浓缩前先经过过有机超滤膜过滤，截留分子量10～100KD。