CN104145887A - 一种人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,包含以下步骤:(1)将人工扩繁的异色瓢虫成虫在10℃下暴露24h以上,置于透气装置中;(2)将步骤(1)的异色瓢虫在﹣5~5℃下暴露贮藏,其中每天在5℃~30℃下间断高温暴露0.5~4h;(3)步骤(2)的异色瓢虫在低温和间断高温贮藏结束后,转至饲养条件下恢复24小时以上,筛选存活的成虫。其中,所述人工扩繁的繁殖条件是在温度为24~26℃,湿度为60~70%,光周期L:D=16h:8h。本发明对异色瓢虫采用低温贮藏、高温间断贮藏方法,相比恒定低温贮藏,能显著提高存活率。
Description
技术领域
本发明涉及异色瓢虫的贮藏技术领域,具体涉及一种人工扩繁代异色瓢虫成虫的低温贮藏技术。
背景技术
化学农药的长期使用带来了一系列的生态环境和食品安全问题,而治理化学农药污染不仅要求逐步减少其使用量,更需要寻求优化升级与替代传统防治办法的技术。其中,以天敌昆虫释放为主的生物防治技术在害虫综合治理(IPM)中发挥着越来越重要的作用。天敌昆虫大量释放的首要前提是在一定时间内积累足够数量的产品,但是大多数天敌昆虫的贮藏时间一般较短,且室内种群扩繁受田间释放时间和防治对象的制约。低温可以诱导和延缓昆虫的发育进程,因此在低温环境下贮藏天敌昆虫不仅有利于延长其贮藏时间,为生物防治提供稳定、充足的种群数量,而且还能根据害虫的发生危害规律进行贮藏期调控,继而实现田间同步释放。
异色瓢虫Harmonia axyridis(Pallas)属鞘翅目(Coleoptera)瓢虫科(Coccinellidae),是一种重要的天敌昆虫,通过释放异色瓢虫可以防控果树、花卉、设施蔬菜等农产品上的蚜虫、螨类以及其它多种害虫。随着我国绿色农业规模不断加大,异色瓢虫的应用前景十分广泛。关于异色瓢虫的应用已经基本产业化,而在大面积释放之前往往要进行数量储备和运输,因此低温贮藏是实现其商品化生产、运输和释放应用的重要环节之一。目前,异色瓢虫一般采用恒定低温贮藏的方法,但是除越冬代以外,一般贮藏时间不能过长,否则存活率受到较大影响,而且恢复捕食活性需要一定时间。因此,随着异色瓢虫在生物防治产业中的需求和发展,探讨一种理想的贮藏方法。提高异色瓢虫在贮藏过程中的成活率,对充分发挥该天敌在害虫生物防治中的作用具有重要实践意义。低温贮藏方法的创新会降以天敌昆虫应用为主的生物防治成本,使应用更加简单、经济。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:针对现有技术存在的不足,提供一种能延长贮藏时间,且低温贮藏后异色瓢虫的存活率高的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,解决了由于异色瓢虫自身生物学特性不能满足长期贮藏、运输的问题,从而充分发挥该天敌在害虫生物防治中的作用。
为解决上述技术问题,本发明的技术方案是:
一种人工扩繁代异色瓢虫成虫的低温贮藏方法,包含以下步骤:
(1)将人工扩繁的异色瓢虫成虫在10℃以下暴露24h以上,置于透气装置中;
(2)将步骤(1)的异色瓢虫在﹣5~5℃下低温暴露贮藏,其中每天在5℃~30℃下间断高温暴露0.5~4h;
(3)步骤(2)的异色瓢虫在低温和间断高温贮藏结束后,转至饲养条件下恢复24小时以上,筛选存活的成虫。
其中,所述人工扩繁的繁殖条件是在温度为24~26℃,湿度为60~70%,光周期L:D=16h:8h。
其中作为一种技术方案,所述透气装置为无色半透明塑料盒(15cm×10cm×7cm),所述塑料盒以封口膜Parafilm覆盖,并在封口膜上扎取若干通气孔。
优选的,步骤(2)中,将异色瓢虫在﹣5℃下暴露贮藏,其中每天在5℃、15℃、25℃或30℃下间断高温暴露0.5h、1h、2h或4h。
作为进一步的优选,步骤(2)中,将异色瓢虫在﹣5℃下暴露贮藏,其中每天在25℃下间断高温暴露0.5h、1h、2h或4h。
作为再进一步的优选,步骤(2)中,将异色瓢虫在﹣5℃下暴露贮藏,其中每天在25℃下间断高温暴露2h。
其中,所述饲养条件为T=24~26℃,光周期L:D=16h:8h。
所述步骤(2)的低温暴露和间断高温贮藏过程中的异色瓢虫均无需饲喂。
由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果为:
本发明异色瓢虫的低温贮藏中,采用先在10℃下暴露24h以上,然后将异色瓢虫在﹣5~5℃下暴露贮藏,其中每天在5℃~30℃下间断高温暴露0.5~4h,低温贮藏结束后,转至饲养条件下恢复24小时以上,筛选存活的成虫,采用低温贮藏时高温间断的贮藏方法,相比一直在恒定低温下贮藏,存活率能提高15%以上。
具体实施方式
下面结合具体的实施例来进一步阐述本发明。
实施例1
为排除冷激(cold-shock)对异色瓢虫低温存活的影响,先将人工扩繁的异色瓢虫成虫在10℃下暴露24h,移入无色半透明塑料盒(15cm×10cm×7cm)中,所述塑料盒以封口膜Parafilm覆盖,并在封口膜上扎取若干通气孔。
将异色瓢虫移入塑料培养皿中,在0℃下低温暴露贮藏1周,其中每天在5℃间断高温暴露0.5h。
异色瓢虫在低温和间断高温贮藏结束后,转至饲养条件下恢复24小时,筛选行走协调的存活的成虫。
实施例2
为排除冷激(cold-shock)对异色瓢虫低温存活的影响,先将人工扩繁(人工扩繁的繁殖条件是在温度为24℃,湿度为60%,光周期L:D=16h:8h)的异色瓢虫成虫在10℃下暴露24h,移入无色半透明塑料盒(15cm×10cm×7cm)中,所述塑料盒以封口膜Parafilm覆盖,并在封口膜上扎取若干通气孔。
将异色瓢虫移入塑料培养皿中,在﹣2℃下低温暴露贮藏四周,其中每天在15℃间断高温暴露1h。
异色瓢虫在低温和间断高温贮藏结束后,转至饲养条件(饲养条件为T=24℃,光周期L:D=16h:8h)下恢复24小时,筛选行走协调的存活的成虫。
实施例3
为排除冷激(cold-shock)对异色瓢虫低温存活的影响,先将人工扩繁(人工扩繁的繁殖条件是在温度为26℃,湿度为70%,光周期L:D=16h:8h)的异色瓢虫成虫在10℃下暴露24h,移入无色半透明塑料盒(15cm×10cm×7cm)中,所述塑料盒以封口膜Parafilm覆盖,并在封口膜上扎取若干通气孔。
将异色瓢虫移入塑料培养皿中,在5℃下低温暴露贮藏2周,其中每天在30℃间断高温暴露2h。
异色瓢虫在低温和间断高温贮藏结束后,转至饲养条件(饲养条件为T=26℃,光周期L:D=16h:8h)下恢复24小时以上,筛选行走协调的存活的成虫。
实施例4
为排除冷激(cold-shock)对异色瓢虫低温存活的影响,先将人工扩繁(人工扩繁的繁殖条件是在温度为25℃,湿度为65%,光周期L:D=16h:8h)的异色瓢虫成虫在10℃下暴露24h,移入无色半透明塑料盒(15cm×10cm×7cm)中,所述塑料盒以封口膜Parafilm覆盖,并在封口膜上扎取若干通气孔。
将异色瓢虫移入塑料培养皿中,在﹣5℃下低温暴露贮藏1-9天,其中每天在5℃间断高温暴露2h。
异色瓢虫在低温和间断高温贮藏结束后,转至饲养条件(饲养条件为T=25℃,光周期L:D=16h:8h)下恢复24小时,筛选行走协调的存活的成虫。
实施例5-7
实施例5-7中,将异色瓢虫移入塑料培养皿中,在﹣5℃下低温暴露贮藏1-9天,其中实施例5、6、7每天分别在15℃、25℃、30℃间断高温暴露2h。其余跟实施例4相同。
实施例8-11
实施例8-11中,将异色瓢虫移入塑料培养皿中,在﹣5℃下低温暴露贮藏1-9天,其中实施例8、9、10、11每天25℃分别间断高温暴露0.5h、1h、2h、4h。其余跟实施例4相同。
对比例1
为排除冷激(cold-shock)对异色瓢虫低温存活的影响,先将人工扩繁(人工扩繁的繁殖条件是在温度为25℃,湿度为65%,光周期L:D=16h:8h)的异色瓢虫成虫在10℃下暴露24h,移入无色半透明塑料盒(15cm×10cm×7cm)中,所述塑料盒以封口膜Parafilm覆盖,并在封口膜上扎取若干通气孔。
将异色瓢虫移入塑料培养皿中,在﹣5℃下低温暴露贮藏1-9天。
异色瓢虫在低温贮藏结束后,转至饲养条件(饲养条件为T=25℃,光周期L:D=16h:8h)下恢复24小时,筛选行走协调的存活的成虫。
表1
注:利用统计软件SPSS16.0for windows对各实验内容所得数据进行统计分析,表中各数据均为平均值±标准误差;同列标记相同小写字母表示其在0.05水平下One-way ANOVA,Duncan氏多重比较无显著差异。下表2-3同。
由表1可以看出:异色瓢虫暴露在﹣5℃时每天在5℃、15℃和25℃下间断2h可以提高成虫的存活率,随着间断温度的升高存活率提高,但是间断温度并非越高越好,30℃下间断2h存活率反而有所下降。低温暴露1d时,无论在恒定低温下还是变温下,成虫存活率均接近或高于80%;暴露在﹣5℃下5d,恒定低温贮藏的成虫存活率急剧降低(26.7%),而每天在5℃、15℃、25℃和30℃下间断2h的成虫存活率分别为50.0%、54.4%、77.7%和45.6%;暴露在﹣5℃下9d,恒定低温贮藏的成虫存活率几乎为零,而每天在25℃下间断2h(﹣5℃22h/25℃2h)成虫存活率仍为50%,每天在5℃、15℃和30℃下间断2h的成虫存活率大约为15%。
表2
由表2可以看出:间断时间对异色瓢虫的低温存活也会产生显著的影响,异色瓢虫暴露在﹣5℃下,每天在25℃下间断0.5h、1h和2h可以提高成虫存活率,随着间断时间的延长(0.5﹣2h)存活率升高,但是间断时间并非越长越好,间断4h时成虫存活率反而有所下降。暴露在﹣5℃下3d,恒定低温贮藏的成虫存活率为53.3%,而每天在25℃下间断0.5h、1h、2h和4h成虫存活率分别为64.5%、75.6%、84.4%和68.7%,显著高于未进行间断的(F=3.507,df=4,10;P<0.05)。暴露在﹣5℃下7d,恒定低温贮藏的成虫存活率急剧降低(16.6%),而每天在25℃下间断2h的成虫存活率仍为71.1%。
表3 异色瓢虫低温暴露时进行高温间断9天后成虫的半致死时间Lt50
由表3可以看出:异色瓢虫成虫在﹣5℃下暴露时每天在25℃下间断0.5h、1h、2h和4h,成虫的半致死时间Lt50分别为4.23d、4.88d、10.13d和6.01d,显著高于未进行间断的(3.54d)(F=116.445,df=4,10;P<0.001)。异色瓢虫成虫在﹣5℃下暴露时每天在5℃、15℃、25℃、30℃下间断2h,成虫的半致死时间Lt50分别为4.27d、5.23d、10.13d和4.67d,显著高于未进行间断的(F=36.384,df=4;P<0.001)。
表4 异色瓢虫经恒定低温及变温贮藏后的存活率
由表4可以看出:恒定低温与变温这两种贮藏方式对异色瓢虫成虫存活率存在明显影响。成虫暴露在变温下比一直暴露在恒定低温下,存活率明显提高。低温贮藏2周后,经恒定低温贮藏的成虫存活率为65.4%,而经变温贮藏的成虫存活率提高至73.9%;低温贮藏4周后,经恒定低温贮藏的成虫存活率下降至18.3%;而经变温贮藏的成虫存活率仍然保持在36.1%。
Claims (8)
1.一种人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于包含以下步骤:
(1)将人工扩繁的异色瓢虫成虫在10℃以下暴露24h以上,置于透气装置中;
(2)将步骤(1)的异色瓢虫在﹣5~5℃下低温暴露贮藏,其中每天在5℃~30℃下间断高温暴露0.5~4h;
(3)步骤(2)的异色瓢虫在低温和间断高温贮藏结束后,转至饲养条件下恢复24小时以上,筛选存活的成虫。
2.如权利要求1所述的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于:所述人工扩繁的繁殖条件是在温度为24~26℃,湿度为60~70%,光周期L:D=16h:8h。
3.如权利要求1所述的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于:所述透气装置为无色半透明塑料盒,所述塑料盒以封口膜覆盖,并在封口膜上扎取若干通气孔。
4.如权利要求1所述的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于:步骤(2)中,将异色瓢虫在﹣5℃下低温暴露贮藏,其中每天在5℃、15℃、25℃或30℃下间断高温暴露0.5h、1h、2h或4h。
5.如权利要求4所述的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于:步骤(2)中,将异色瓢虫在﹣5℃下低温暴露贮藏,其中每天在25℃下间断高温暴露0.5h、1h、2h或4h。
6.如权利要求5所述的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于:步骤(2)中,将异色瓢虫在﹣5℃下低温暴露贮藏,其中每天在25℃下间断高温暴露2h。
7.如权利要求1至6任一权利要求所述的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于:所述饲养条件为T=24~26℃,光周期L:D=16h:8h。
8.如权利要求7所述的人工扩繁代异色瓢虫的低温贮藏方法,其特征在于:所述步骤(2)的低温暴露贮藏和间断高温贮藏过程中的异色瓢虫均无需饲喂。
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